一株沥青质降解菌的筛选及其对稠油作用评价
石油降解菌的分离筛选及混合菌群的构建与优化
（ １ ．中国地质科学 院水文地质 环境 地质研究所 ，河北 石家庄 ２ ．中国地质科学 院地下水 污染机理与修复重点实验室 ， 河北 正定
泽 ’
０ ５ ０ ０ ６ １ ； ０ ５ ０ ８ ０ ３ ）
摘要 ：以河 南濮 阳油 田超重质原 油为研 究对 象 ，从 污染井场 土壤 中分 离并 筛选 出几株 高效 降解 细菌、酵母 茵和霉 菌。 由于不 同类型微 生物对碳 源的利 用 目标和方 式有 所不同，而将 ３类不 同类型 菌种进行排 列组合进行 降解 实验 ，最终优 选 出一组石 油降解优势 菌群 。该文还利 用正 交优化 法对 降解菌的最佳 添加 量进行 计算 ，结果显示 ，最佳接 种量 为 Ｘ ２ ５ ： １ ． ５ ％ ，Ｚ ３ ：１ ％ ，Ｘ１ ８ ：１ ％ ，Ｚ ２ ８ ：２ ％。利用该优化结果进行 降解 实验 ，石 油的 降解 率在 一定程 度上提 高 了。在 对濮
文献 标 识 码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ １ ． ３ ６ ４ ４（ ２ ０ １ ３ ） ０ ６ － ０ ０ １ ６ ０５ － 中 图分 类 号 ： Ｘ ５ ３
Ｓ ｔ ｕｄ ｙ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ Ｉ ｓ ｏ ｌ ａｔ ｉ ｏ ｎ ａｎ ｄ Ｓ ｃ ｒ ｅ ｅ ｎｉ ｎｇ ｏ ｆ Ｏｉ ｌ Ｄｅ ｇ ｒ ａ ｄａ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｏ ｒ ｇ ａ ｎｉ ｓ ｍ ａ ｎｄ ｔ ｈ ｅ Ｃｏ ｎｓ ｔ ｒ ｕ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ Ｏｐ ｔ ｉ ｍｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｈｅ Ｍｉ ｘ ｅ ｄ Ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎｓ ＮＩ ＮＧ Ｚｈ ｕ ｏ，ＬＩ Ｕ Ｙａ — ｃ ｉ ，ＺＨＡＮＧ Ｓ ｈｅ ｎ ｇ，ＺＨＡＮＧ Ｃｕｉ － ｙ ｕ ｎ，ＨＥ Ｚｅ，ＹＩ Ｎ Ｍｉ — ｙ ｉ ｎｇ
两株石油降解菌的筛选及其生长特性-精选文档
两株石油降解菌的筛选及其生长特性DOI：10.14088/jki.issn0439-8114.2016.02.016土壤是人类赖以生存的自然基础和重要资源，近年来，随着社会经济发展对石油产品需求量增加，大量的石油及其加工品在勘探、开采、运输、加工及储存的过程中进入土壤，造成土壤的石油污染日趋严重，已成为世界性的环境问题[1，2]。
石油物理化学性质特殊，进入土壤后残留时间长，在自然条件下难以降解，给受污染土壤带来一系列的危害：石油黏性强，影响土壤的通透性，使土壤盐碱化、沥青化和板结化，破坏土壤结构和功能，在长期累积过程还会导致土壤中碳氮比和碳磷比失调，引起土壤微生物群落变化，破坏土壤微生物区系，影响植物生长；石油中所含的多环芳烃具有致癌、致突变、致畸变等作用，它们能通过食物链在动植物体内逐级富集，危及人类健康和生态安全[3，4]。
鉴于以上原因，修复和治理污染土壤已经成为迫切需要研究解决的问题。
目前石油污染土壤的修复方法主要有物理方法、化学方法和生物方法，其中微生物处理技术具有经济、有效和环境友好等特点，是目前修复石油污染土壤优先考虑的技术[5，6]。
微生物修复技术是微生物通过代谢作用将石油污染物转化为稳定、无毒的以二氧化碳、水和无机物为主的降解产物。
石油的降解程度和速度取决于微生物特性、污染物的性质和环境因素，而具有强降解能力的石油降解菌是决定生物修复效率的关键因素。
因此，需要有针对性地筛选适合本地区石油污染土壤的土著高效降解菌。
新疆是中国石油主产区，存在大面积石油污染土壤亟待修复[7，8]。
基于此，本研究从新疆石油污染土壤中筛选出2株高效石油降解菌，通过形态和生理生化试验对其进行了初步鉴定，并初步研究该菌的生长特性和培养条件，以期为新疆石油污染土壤的微生物修复提供试验基础。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 土壤和石油样品分离菌种土壤采自新疆油田区污染程度不同的位置，采样时取地表10 cm污染土壤1.0 kg，去除杂物，装入密封袋，于4 ℃冰箱保存。
一株菲降解菌的筛选及降解动力学分析
关键词
菲
降解
耐受性
指 数 模 型
Ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ａ ｐ ｈ ｅ ｎ ａ ｎ ｔ ｈ ｒ ｅ ｎ ｅ － ｄ ｅ ｇ ｒ ａ ｄ ｉ ｎ ｇ ｂ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ａ ａ ｎ ｄ ｐ ｈ ｅ ｎ ａ ｎ ｔ ｈ ｒ ｅ ｎ ｅ ｂ ｉ ｏ ｄ ｅ ｇ ｒ ａ ｄ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｋ ｉ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ ｓ Ｙ ＡＮＧ Ｂｉ ｎ ｙ ｉ ｎ， ＣＨ ＡＯ Ｑｕ ｎ —
２ ｏ ｆ ｙ － ８ ｔ ｏ ｐ ｈ ｅ ｎ ａ ｎ ｔ ｈ ｒ ｅ ｎ ｅ ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ １ ０ ０ ｍｇ ／ Ｌ，９ ３ ． ７ ｏ ｆ ｐ ｈ ｅ ｎ ａ ｎ ｔ ｈ ｒ ｅ ｎ ｅ ｗａ ｓ ｄ ｅ ｇ ｒ ａ ｄ ｅ ｄ ｉ ｎ ７ ２ ｈ ｕ ｎ ｄ ｅ ｒ ｔ ｈ ｅ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ｃ ｏ ｎ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｏ ｆ ３ Ｏ℃ ， ｐ Ｈ ７ ． ０ ａ ｎ ｄ ｓ ｈ ａ ｋ ｉ ｎ ｇ ｓ ｐ ｅ ｅ ｄ １ ４ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ ．Ｔｈ ｅ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ｅ ｘ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｅ ｄ ｇ ｏ ｏ ｄ ｔ ｏ ｌ ｅ ｒ ａ ｎ ｃ ｅ ｔ Ｏ ｐ ｈ ｅ ｎ ａ ｎ ｔ ｈ ｒ ｅ ｎ ｅ（ ３ ０ ０ ０ ｍｇ ／ Ｌ） ．Ｔｈ ｅ ｋ ｉ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ ｓ ｏ ｆ ｐ ｈ ｅ ｎ ａ ｎ ｔ ｈ ｒ ｅ ｎ ｅ ｂ ｉ ｏ ｄ ｅ ｇ ｒ ａ ｄ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗａ ｓ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｚ ｅ ｄ ，ｂ ａ ｓ ｅ Ｏ ｎ ｗｈ ｉ ｃ ｈ，ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｐ ｏ ｎ ｅ ｎ ｔ ｉ Ｍ ｍｏ ｄ ｅ ｌ ｗａ ｓ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ —
1株产表面活性剂石油降解菌筛选及发酵条件优化
1株产表面活性剂石油降解菌筛选及发酵条件优化邓振山;马琳;张袭;李鹏【摘要】The strain was selected that can produce surfactant from the crude oil samples,and the bacterial strain and fermentation products were preliminarily identified,then optimized the fermentation conditions in flask.For enrichment culturing,plate screening and determining of oil ring,a strain producing surfactant was screened out efficiently.By using the weighing method and Thin Layer Chromatography (TLC) respectively,the oil degradation rate was determined and the type of surfactant identified.The most suitable fermentation conditions were explored in flask in some respects,such as Carbon source,Nitrogensource,Temperature,Salinity and pH.A gram negative bacteria were screened out producing lipopeptide surfactant efficiently numbers for E-02.The most suitable fermentation conditions in flask is that the most suitable carbon source is edible oil,the nitrogen source is (NH4) 2SO4,the temperature is 42℃,the salinity 7.5％ and the pH 5.4.It can degrade crude oil,and its superlatively degradation rate can stabilize in 41.02％.It was verified that the strains that were isolated can grow well under a wide range of environmental conditions,and they can effectively repair the petroleum contaminated.%从含有原油的样品中筛选出能够产生表面活性剂的菌株,对其菌株及产物进行初步鉴定,并优化其摇瓶发酵条件.分别采用称重法和薄层层析法(TLC)测定其原油降解率和鉴别其表面活性剂的类型.采用不同种类的碳源和氮源、不同梯度的温度、盐度、酸碱度,筛选出产高效脂肽类生物表面活性剂的革兰氏阴性菌株E-02.摇瓶发酵最适条件为碳源是食用油,氮源为NH4C1,温度为42℃,盐度为7.5％,最适pH为5.4,培养3d后,原油降解率为41.02％.实验筛选的菌株能适应较广泛的环境条件,可对石油污染进行有效修复.【期刊名称】《西北大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2017(047)004【总页数】7页(P545-551)【关键词】石油污染;表面活性剂;薄层层析法;脂肽类;条件优化【作者】邓振山;马琳;张袭;李鹏【作者单位】延安大学生命科学学院,陕西延安716000;延安大学生命科学学院,陕西延安716000;延安大学生命科学学院,陕西延安716000;延安大学生命科学学院,陕西延安716000【正文语种】中文【中图分类】Q938.15随着石油工业的发展,在采油、炼油、运输与利用中,石油废弃物对环境的污染是不可避免的。
一株芘降解菌的分离鉴定及其特性初步研究
安徽农学通报，AnhuiAgri，Sci，Bull，2022，28（11）一株芘降解菌的分离鉴定及其特性初步研究张天宇1王美琴1刘龙祥1任丽丽1马燕阳1翟振龙1樊平2吴涛1，3（1滨州学院生物与环境工程学院，山东省黄河三角洲野生植物资源开发利用工程技术研究中心，山东滨州256600；2滨州市农业农村局，山东滨州256601；3滨州学院，山东省黄河三角洲生态环境重点实验室，山东滨州256600）
摘要：以黄河三角洲重盐碱地原油污染区健康生长的盐生植物芦苇、稗草、盐地碱蓬为材料，采用芘为碳源，分离筛选具有芘降解功能的植物内生细菌，并研究其促进植物生长的特性。结果表明，筛选得到7株植物内生细菌具有溶解有机磷能力，7株菌7d对多环芳烃芘的降解率为59%～78%，其中菌株LDD3的降解效果较为显著，降解率达到78%。经分子鉴定，菌株LDD3为施氏假单胞菌，在WB培养基和芘培养基中对数生长期分别为4～16h、24h～48h，最适生长盐度范围为1%～3%。关键词：植物内生细菌；芘；降解；施氏假单胞菌中图分类号X172文献标识码A文章编号1007-7731（2022）11-0029-04
Isolation,IdentificationandCharacterizationofaPyreneDegradingStrainZHANGTianyu1WANGMeiqin1LIULongxiang1RENLili1MAYanyang1ZHAIZhenlong1
FANPing2WUTao1，3
（1ShandongProvincialEngineeringandTechnologyResearchCenterforWildPlantResourcesDevelopmentandAp⁃plicationofYellowRiverDelta,CollegeofBiologicalandEnvironmentalEngineering,BinzhouUniversity,Binzhou
一株长链烷烃降解菌LZ02的筛选及其降解特性
江西农业大学学报2017,39(4):780-784 A c ta A g ric u ltu ra e U n iv e rs ita tis J ia n g x ie n s ish ttp ://x u e l)a(). jx a u.e d u.c n D01：10.1383d/j.jja u.2017101李兵，张博.一株长链烷烃降解菌L Z02的筛选及其降解特性[J].江西农业大学学报，2017,39(4) :780-784.一株长链烷烃降解菌LZ02的筛选及其降解特性李兵1，张博2(1.周口师范学院生命科学与农学学院，河南周口466000;2.周口师范学院稀土功能材料及应用重点实验室，河 南周口466000)摘要:通过富集分离筛选高效长链烷烃降解菌，采用形态学、生理生化实验、16S r D N A序列比对进行菌种鉴定，通过U V和G C-M S检测菌株对长链烷烃降解特性。
结果表明:分离到1株长链烷降解烃菌，经鉴定为希瓦氏菌属，命名为sp.LZ02。
该菌生长温度范围0~45尤，最适生长温度35尤，在接种量为106C F U/m L，原油浓度为0.5%(W/V)，振荡培养7 d时，降解率可达62.90%。
G C-M S分析表明:石油中长链烷烃C I5~C2，被完全降解，C22 ~ C32部分降解，降解方式为单末端氧化。
关键词：长链烷烃;生物降解;SAewane//a sp.中图分类号:X172 文献标志码:A文章编号：1000-2286(2017) 04-0780-05Screening of a Long-Chain Alkane-Degrading Bacterium LZ02and Its Degradation CharacteristicsLI Bing1，ZHANG Bo2(1. C o lle g e o l L ife S cie n ce a n d A g ic u lt u r e，Z h o u k o u N o rm a l U n iv e r s ity，Z h o u k o u466000，C h in a; 2. T h e K e y la b o ra to ry o l R a re E a rth F u n c tio n a l M a te ria ls a n d A p p lic a tio n s，Z h o u k o u N o rm a l U n iv e r s tiy，Z h o u k o u 466000，C h in a)Abstract:L o n g-c h a in a lk a n e - d e g ra d in g b a c te ria w e re o b ta in e d b y e n ric h e d c u lt u r e，id e n tifie d b ased on m o rp h o lo g ic a l，p h y s io lo g ic a l a n d b io c h e m ic a l tests a n d16S rD N A se q u en ce a lig n m e n t.T h e d e g ra d a tio n c h a ra cte ris tic s w e re d e te rm in e d b y U V s p e c tro p h o to m e try a n d G C-M S. A s a r e s u lt，a n e w s tra in w as is o la te d，w h ic h w as id e n tifie d as SAewaneZZa sp. L Z02.T h e te m p e ra tu re ra n g e lo r g ro w th w as 0 〜45^( o p tim u m a t 37t). S tra in L Z02c o u ld re m o ve o il b y62.90%a t th e c o n c e n tra tio n o l 0.5% (w/v)a n d106C F U/m L o l in o c u lu m w ith in7d a t 35 T h e lo n g-c h a in a lk a n e s C15〜C21 in o il w e re c o m p le te ly d e g ra d e d a n d C22〜C32co m p o n e n tsw e re p a rtly d e g ra d e d v ia th e m o n o te rm in a l o x id a tio n.Keywords: lo n g-c h a in a lk a n e; b io d e g ra d a tio n；Shewanella sp.目前石油泄漏已给全球海洋和陆地带来严重的生态和环境问题[1-4]。
1株稠油降粘菌BIT-BS002的性质研究与矿场应用
及 １ＳｒＮ ６ Ｄ Ａ序 列分析 。 鉴定为枯 草芽胞杆 茵（ ａｉｕ ｂｌ ） 并命名 为 ＢＴＢ Ｏ ２ Ｂ ｃｌ ｓ ｉｉ ， ｌｓ ｕ ｔｓ Ｉ－Ｓ０ 。通过薄层 色谱 和红外光
谱 分析 确 定 该 茵 所产 生物 表 面活 性 剂为 一 种 环 脂 肽 类 物 质 。该 茵 在 ５ ０℃ 条 件 下 培 养 ２ 后 可使 发 酵液 表 面 ４ｈ
ｂｙ Ｆ Ｒ ｎｄ ＴＬＣ ｎａｙ ｉ ，ａｎ ｔ ｔｕｃｕ ｅ ｃ ｎｓｓｓ ｏ ｙ ｌｃ ｐ ｐ ｉｃ ｓ ｑｕ ｎｃ ｉｋｅ ｏ ａ ｆｔｙ ａ ｉ Ｉ ｏ ｌ ｅ ＴＩ ａ ａ ｌ ｓｓ ｄ ｉ ｓｒ ｔｒ ｏ ｉｔ ｆａ ｃ ｃｉ ｃ ｔｄ ｅ ｅ ｅ ｌｎ ｄ ｔ ａｔ ｃｄ． ｔｃ ｕ ｄ ｒ — ｓ
石油烃污染土壤微生物修复技术、菌剂的筛选研制及案例分析
为混合颗粒状粉剂，具有调理土壤环境，提高土壤渗透性、增加氧气传输 等作用，同时还具有很好的持水能力，有利于微生物生长，提高污染物降 解率。
油泥生物处理调质营养素
为白色粉剂，能有效改善土壤质地，为微生物提供营养物质，促进微生物 快速繁殖，增强降解活性，提高污染物降解速度。
六、微生物菌剂的生产
60
50
40
30
20
10
0 2周 4周 6周 8周 3个月 4个月
示范现场土壤中石油烃含量的变化
修复前 调理剂、菌剂播撒
翻耕
浇水
种植植物
修复后
五、石油污染土壤微生物修复技术
2、异位修复技术---堆体技术
根据多种生物堆体的生物学过程特性, 将其与微生物包埋/脱附增溶（IMT/SER）等强化工艺 相组合，建立了不同类型的生物堆体强化修复系统，并获得了完整的工艺参数。
土壤中主要石油污染物残留量测试 （GC-FID、UV、IR、重量法） 土壤中微生物群落变化 （PCR、DGGE）； 修复植物生物量变化。
CK F-7 FL-7 FH-7 F-24 FL-24 FH-24
FH-24 FL-24 F-24 FH-7 FL-7 F-7
修复后微生物群落谱带条数 增加了3-4倍
溶
（Rhodococcus erythropolis）；25%铜绿假单孢杆菌 （Pseudomonas aeruginosa）；25% acinetobacter）。
构建适宜反应的微环境
促进污染物的脱附传质
企业标准
《石油污染土壤处理用微生物修复菌剂》 (Q/0500DJH001-2015)
五、石油污染土壤微生物修复技术
菌剂添加量对修复效果的影响
原油降解菌JL21的筛选与降解性能分析
原油降解菌JL21的筛选与降解性能分析作者：宫勋来源：《石油知识》 2017年第2期摘要：菌株JL21与Gordonia amicalis（序列号：KM113029）菌亲缘关系最近，同源性达99%，与构建系统发育树的结果一致。
因此，菌株JL21在分类学地位上初步确定为友善戈登氏菌Gordonia amicalis JL21。
随着2015年新环保法的公布，石油污染的有效处理已经成为国内外研究的重中之重。
微生物处理技术作为既经济高效又环保的方法，受到国内外研究人员的青睐。
本文着重探讨了石油降解菌的筛选与降解性能的测定。
关键词：原油；降解菌；表面活性剂1 实验材料和方法1.1 采样地点及原油来源分离、筛选、降解实验所用的原油及土壤样品均来自中国石油天然气股份有限公司吉林油田分公司。
1.2 培养基无机盐培养基（MSM）：Na2HPO4·2H2O 8.5 g、KH2PO4 3.0 g、NaCl 0.5 g、NH4Cl 1.0 g、MgSO4·7H2O 0.5g、CaCl2 14.7 mg、CuSO4 0.4 mg、KI 1.0 mg、MnSO4·H2O4.0 mg、ZnSO4·7H2O 4.0 mg、H3BO3 5.0 mg、Na2MoO4·2H2O 1.6 mg、FeCl3·6H2O 2.0 mg，蒸馏水1 L。
pH7.0-7.2、121 ℃灭菌20 min。
原油降解培养基：在MSM培养基中添加0.5%的灭菌原油。
油平板：将原油溶于石油醚（原油终浓度为10%）中，滤纸剪成直径85 mm，置90 mm培养皿中，加2 mL 10%原油溶液，待石油醚挥发后，121℃高压蒸汽灭菌20 min，取出烘干备用。
无机盐培养基灭菌后倾倒平板，将滤纸紧贴在MSM平板上后即成油平板。
富集培养基：蛋白胨 10 g、牛肉膏 5 g、NaCl 5 g、蒸馏水 1 L，pH 7. 0.血液琼脂培养基：脱纤维绵羊血 50 ml、血液营养琼脂45 g、去离子水 1L。
石油烃高效降解菌的筛选、复配及降解条件优化
!"#$%&'2020,Chemistry&Bioengineeringdoi：10.3969/j.issn.1672—5425.2020.12.013段潍超，杨泽群，刘其友.石油A高效降解菌的筛选、复配及降解条件优化化学与生物工程，2020,37(12):5558.DUAN W C,YANG Z Q,LIU Q Y.Screening and compounding of high efficient petroleum hydrocarbon-degrading bacteria and optimization in degradation conditions'].Chemistry W Bioengineering,2020,37(12)：55-58.石油怪高效降解菌的筛选、复配及降解条件优化段潍超杨泽群2,刘其友2(1.青岛欧赛斯环境与安全技术有限责任公司，山东青岛266555；2.中国石油大学(华东)，山东青岛266555)摘要：基于原油组成选取模式物，从实验室保存的石油A降解菌株(S1、S2、S3、S4、S5、S6"中筛选各模式物的高效降解菌株，并对高效降解菌株的复配进行优化，通过正交实验确定复配菌群的最优降解条件。
结果表明：菌株S2和S5对单环芳A(甲苯)的降解效果最好，菌株S1和S6对多环芳A(菲)的降解效果最好，菌株S4对长链烷A(石蜡)的降解效果最好；将S1、S2、S4复配得到的复配菌群对原油的降解效果最好，其最优降解条件为:pH值7、底物浓度0.4g・L1、氮磷比7:1、接种量1mL、温度30b，各因素对原油降解率的影响大小为：pH值％温度〉底物浓度％接种量〉氮磷比&关键词：石油A降解菌；筛选；复配菌群；正交实验；降解条件中图分类号：X172文献标识码:A文章编号：16725425(2020) 1205504ScreeningandCompoundingofHighE f icientPetroleum Hydrocarbon-DegradingBacteriaandOptimizationinDegradationConditionsDUAN Weichao1,YANG Zequn2,LIU Qiyou2(1.Qingdao Oasis Environmental&Safety Technology Co..Ltd.,Qingdao266555,China；2.China University of P e troleum(East China%,Qingdao266555,Cina)Abstract:Based on the composition of crude oil,we selected the model substances,and screened the high efficient degradation strains against each model substance from the petroleum hydrocarbon-degrading strains(S1, S2,S3,S4,S5,and S6)preserved in the laboratory.Moreover,we optimized the compounding of high efficient degradationstrainsanddeterminedtheoptimaldegradationconditionsofthecompoundbacteriabyorthogonal experiments.TheresultsshowthatstrainsS2andS5havethebestdegradatione f ecton monocyclicaromatic hydrocarbons(toluene)strainsS1andS6havethebestdegradatione f ectonpolycyclicaromatichydrocarbons (phenanthrene)andstrainS4hasthebestdegradatione f ectonlong-chainalkanes(para f in wax).Thecom-poundbacteriaofS1!S2andS4havethebestdegradatione f ectoncrudeoilandthebestdegradationcondi-tions are determined as follows：the pH value of7,the substrate concentration of0.4g•L-1,the N/P ratio of7 :1,the inoculum amount of1mL,and the temperature of30b.The effects of various factors on the degrada-Oion raOe of crude oil are inOhe fo l owing order:pH value%OemperaOure%subsOraOe concenOra ion%inoculum a-mounO%N/PraOio.Keywords：petroleum hydrocarbon-degrading bacterium；screening；compound bacteria；orthogonal experiment；degradation condition收稿日期2020-09-08作者简介：段潍超（1991—"，男，山东济南人，工程师，研究方向：土壤污染调查与修复，E-mail：dwc8023@foxmai1com&「段潍超，等：石油怪高效降解菌的筛选、复配及降解条件优化/2020年第12期石油是目前人类使用最为广泛的能源之一，但在开采、储运、炼制及加工过程中，石油因事故、泄漏或排污等不可避免的会进入水体和土壤中，从而污染生态环境(13)。
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Ｉ Ｉ Ｙａ ｎ ｇ ．ＢＡＯ ＭＵ — ｔ ａ ｉ －
（ １ ． Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｃｈ ｅ ｍｉ ｓ ｔ ｒ ｙ＆ Ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｃ ａ ｌ Ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ ，Ｏｃ ｅ ａ ｎ Ｕｎ ｉ ｖ ｏ ｆ Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ，Ｑｉ ｎ ｇ ｄ ａ ｏ 。 Ｓ ｈ ａ ｎ ｄ ｏ ｎ ｇ ２ ６ ６ １ ０ ０。 Ｃｈ ｉ ｎ ａ ；
Ｊ ａ ｎ ．２ ０ １ ３
文章编号 ： １ ６ ７ ４ ２ ９ ７ ４ （ ２ ０ １ ３ ） Ｏ １ ～ ０ ０ ８ ２ — ０ ５
一
株 沥青质 降解 菌 的筛 选及 其对 稠 油作 用评 价
宋永 亭 。 ， 宋 欣 。 ， 高光 军。 ， 陈庆国 ， 李 阳 ， 包木 太 。
了稠 油 的 物 化 性 质 ．
关 键词 ： 稠油； 沥青质 ； 降解 菌 ； 理 化性 质
中 图分 类 号 ： ＴＥ ３ ５ ７ ． ９ 文献标 识码 ： Ａ
Ｉ ｓ ｏｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ａ ｎ Ａｓ ｐ ｈａ ｌ ｔ ｅ ｎｅ Ｄｅ ｇ ｒ ａ ｄ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｂａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ｕ ｍ ａ ｎ ｄ Ｉ ｔ ｓ Ｃｈａ ｒ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ｚ ａ ｔ ｉ ０ ｎ ｉ ｎ Ｈ ｅ ａ ｖ ｙ Ｏｉ ｌ Ｂｉ ０ ｄｅ ｇｒ ａ ｄ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ
（ １ ． 中 国海 洋 大 学 化 学 化 工 学 院 ， 山东 青 岛 ２ ６ ６ １ ０ ０ ； ２ ．海 洋 化 学 理 论 与 工 程 技 术 教 育 部 重点实验室（ 中 国海 洋 大 学 ） ， 山东 青 岛 ２ ６ ６ １ ０ ０ ； ３ ．中 国石 化 股 份 胜 利 油 田分 公 司 采 油 工 艺研 究 院 ， 山东 东 营 ２ ５ ７ Ｏ ０ ０ ； ４ ．中 国石 油 化 工 股 份 有 限公 司 ， 北京 １ ０ ０ ７ ２ ８ ）
摘 要 ： 以稠 油 中的 沥青质组 分作 为唯 一碳 源 ， 利 用 选择 性 富 集 方法 ， 从 油 田采 出水 筛 选得 到 一株 能够 降解 沥青质 的菌株 Ｓ ， 分子 生物 学分析表 明 ， 菌株 Ｓ与 Ｇｅ ｎ ｂ ａ ｎ ｋ中 Ｂ ａ ｃ ｉ ｌ ｌ ｕ ｓ ｓ ｕ ｂ ｔ ｉ ｌ ｉ ｓ Ｂ ｓ ｎ ５的序 列相似 度达 ９ ９ ． 利 用 菌株 Ｓ对 富含 沥青质 的稠 油进 行 了微 生物 降 解评
第 ４ ０卷 第 １ 期
２ ０ １ ３ 年
湖
南
大
学
学
报 （自 然 科 学 版 ） ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
Ｖｏ １ ． ４０， Ｎｏ．１
１月
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｈｕ ｎ ａ ｎ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ （ Ｎａ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ）
Ｄ ｏ ｎ ｇ ｙ ｉ ｎ ｇ， Ｓ ｈ ａ ｎ ｄ ｏ ｎ ｇ ２ ５ ７ ０ ０ ０ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ； ４ ． Ｃｈ ｉ ｎ ａ Ｐ ｅ ｔ ｒ ｏ ｌ ｅ ｕ ｍ ＆ Ｃｈ ｅ ｉｃ ｍ ａ ｌ ｏｒ Ｃ ｐ ｏ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ 。Ｂ ｅ ｉ ｊ ｉ ｎ ｇ １ ０ ０ ７ ２ ８ 。 Ｃｈ ｉ ｎ ａ ） Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ａｎ ａ ｓ ｐｈａ ｈｅ ｎｅ — ｄ ｅ ｇ ｒ ａ ｄｉ ｎｇ ｂ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ｕ ｍ Ｓ， ｗｈｉ ｃ ｈ ｃ ａ ｎ ｕ ｔ ｉ ｌ ｉ ｚ ｅ ａ ｓ ｐｈ ａ ｈｅ ｎ ｅ ａ ｓ ｔ ｈｅ ｓ ｏ ｌ ｅ ｃ ａ ｒ ｂ ｏｎ ｓ ｏ ｕｒ ｃ ｅ，ｗａｓ ｓ ｃ ｒ ｅ ｅ ｎ ｅ ｄ ａ ｎｄ ｉ ｓ ｏｌ ａ ｔ ｅ ｄ ｆ ｒ ｏ ｍ ｏｉ ｌ ｐ ｒ ｏ ｄｕ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗａ ｔ ｅ ｒ ．Ｓｔ ｒ ａ ｉ ｎ Ｓ ｗａ ｓ ｓ ｈｏ ｗｅ ｄ ９ ９ ｐ ｒ ｏｂ ａ ｂｉ ｌ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ Ｂａ—
价 实验 ， 分析 了其 对稠 油物理 化 学性质 的影 响． 结果表 明 ， 经菌株 Ｓ作 用后 ， 稠 油外观及 组 成
结构都 发 生 了明显 变化 ， 其 中烷 烃 含 量增 加 ， 沥 青质 组 分 降 低 ， 沥 青质 降解 率 达 到 ３ ４ ； 稠
油黏度 和 密度也相 应 降低 ， 降低程 度分 别 为 ３ ４ ． １ １ 和 ４ ． ５ ７ ； 菌株 Ｓ对稠 油 的作 用 ， 改善
２． Ｋｅ ｙ Ｌａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏｒ ｙ ｏｆ Ｍａ ｒ ｉ ｎｅ Ｃｈｅ ｍｉ ｓ ｔ ｒ ｙ Ｔｈ ｅ ｏ ｒ ｙ ａ ｎｄ Ｔ ｅ ｃ ｈｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ，Ｍ ｉ ｎ ｉ ｓ ｔ ｒ ｙ ｏ ｆ Ｅｄｕ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ。Ｏｃ ｅ ａ ｎ Ｕｎｉ ｖ ｏ ｆ Ｃｈｉ ｎ ａ，
ｃ ｉ ｌ ｌ ｕ ｓ ｓ ｕ ｂ ｔ ｉ ｌ ｉ ｓ Ｂｓ ｎ５ ｂｙ ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｐａ ｒ ｔ ｉ ａ ｌ １ ６ Ｓｒ ＤＮＡ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ．Ｔｈｅ ｕ ｔ ｉ ｌ ｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｈｅ ａ ｖ ｙ ｏ ｉ ｌ ｃ ｏｎ ｔ ａ ｉ ｎ ｉ ｎｇ ａ — ｂ ｕｎ ｄａ ｎｔ ａ ｓ ｐ ｈａ ｌ ｔ ｅ ｎｅ ｂｙ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ Ｓ ｗａ ｓ ｄ ｏ ｎｅ，ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｉ ｎ ｆ ｌ ｕｅ ｎ ｃ ｅ ｏｆ ｂ ｉ ｏ ｄ ｅ ｇｒ ａ ｄａ ｔ ｉ ｏｎ ｏ ｎ ｔ ｈｅ ｐ ｈｙ ｓ ｉ ｃ ａ ｌ ａ ｎ ｄ ｃ ｈｅ ｍｉ ｃ ａ １ ｐｒ ｏ ｐｅ ｒ ｔ ｉ ｅ ｓ ｏｆ ｈｅ ａ ｖ ｙ ｏ ｉ ｌ ｗａ ｓ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｚ ｅ ｄ． Ｔｈｅ ｒ ｅ ｓ ｕｌ ｔ ｓ ｉ ｎｄ ｉ ｃ ａ ｔ ｅ ｄ ｔ ｈａ ｔ ｔ ｈｅ ｓ ｕ ｒ ｆ ａ ｃ ｅ ａ ｐｐ ｅ ａ ｒ ａ ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ｄ ｓ ｔ ｒ ｕ ｃ ｔ ｕｒ ｅ ｏ ｆ ｈｅ ａ ｖｙ ｏｉ ｌ ｗｅ ｒ ｅ ｃ ｈａ ｎ ｇｅ ｄ ｏ ｂｖ ｉ ｏ ｕｓ ｌ ｙ ａ ｆ ｔ ｅ ｒ ｂ ｉ ０ ｄｅ ｇｒ ａ ｄ ａ ｔ ｉ ｏｎ ． Ｔｈ ｅ ａ ｌ ｋａ ｎｅ ｃ ｏ ｎｔ ｅ ｎ ｔ ｉ ｎｃ ｒ ｅ ａ ｓ ｅ ｄ ｗｈｉ ｌ ｅ ｔ ｈｅ ａ ｓ ｐｈ ａ ｈｅ ｎｅ ｆ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎｓ ｄ ｅ ｃ ｒ ｅ ａ ｓ ｅ ｄ，ｃ ｏ ｍｐ ａ ｒ ｅ ｄ ｗｉ ｔ ｈ ｔ ｈｅ ｓ ｅ ｃ ｏ ｍｐ ｏ ｎｅ ｎ ｔ ｓ ｉ ｎ ｈｅ ａ ｖ ｙ ｏｉ ｌ ｓ ａ ｍｐｌ ｅ ｂｅ ｆ ｏ ｒ ｅ ｂｉ ｏ ｄ ｅ ｇ ｒ ａ ｄａ ｔ ｉ ｏ ｎ． Ｔｈ ｅ ａ ｓ — ｐ ｈａ ｌ ｔ ｄ ｅ ｇ ｒ ａ ｄａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｒ ａ ｔ ｅ ｉ ｓ ｕ ｐ ｔ ｏ ３ ４ ，ａ ｎｄ ｔ ｈｅ ｖ ｉ ｓ ｃ ｏ ｓ ｉ ｔ ｙ ａ ｎｄ ｄｅ ｎ ｓ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ ｈｅ ａ ｖ ｙ ｏ ｉ ｌ ｗａ ｓ ｒ ｅ ｄｕｃ ｅ ｄ ａ ｂｏ ｕｔ ３ ４ ．１ １ ａ ｎｄ ４． ５ ７ ｒ ｅ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｌ ｙ ．Ｔｈｅ ｐ ｈｙｓ ｉ ｃ ａ ｌ ａ ｎ ｄ ｃ ｈｅ ｍｉ ｃ ａ ｌ ｐ ｒ ｏｐ ｅ ｒ ｔ ｉ ｅ ｓ ｏ ｆ ｈｅ ａ ｖｙ ｏ 订 ｈａ ｖｅ ｂｅ ｅ ｎ ｉ ｍｐ ｒ ｏ ｖ ｅ ｄ ｂｙ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ Ｓ．
Ｑｉ ｎ ｇ ｄ ａ ｏ ， Ｓ ｈ ａ ｎ ｄ ｏ ｎ ｇ ２ ６ ６ １ ０ ０ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ； ３ ． Ｓ ｈ ｅ ｎ ｇ ｌ ｉ Ｏｉ ｌ Ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｒｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ，Ｓ ｉ ｎ ｏ ｐ ｅ ｃ 。