溶血性、非溶血性肠球菌的毒力差异
败血症
临床表现
（三）特殊类型的败血症
1、 新生儿败血症 ：指出生后第一个月内的感染 ，感染途径多 源自母亲产道感染，吸入感染羊水、脐带或皮肤等感染。主要病 原菌为大肠杆菌B组溶血性链球菌、金葡菌等。主要临床表现为 精神萎靡、食欲减退、呕吐、腹胀、呼吸困难、黄疸、惊厥等， 仅部分患儿有发热。 由于新生儿血脑屏障功能尚不健全，因此25 ％－30％的患儿可并发中枢神经系统感染。
概述
菌血症（baCteremla）:是指细菌在血流 中短暂出现而无明显毒血症的表现。
1991年，在美国胸内科医师学院和危象 护理医学会召开的芝加哥会议上将败血 症和菌血症均定义为细菌在血流中出现， 而败血症的病情较重。
病原学
致病菌：绝大多数是细菌，其次为真菌， 偶可为支原体等。
细菌：革兰阳性菌、革兰阴性菌、厌氧 菌。
缺氧时厌氧菌繁殖而导致感染扩散。厌氧菌占败血症致病菌的7％一20％。入侵途 径主要源自肠道的肿瘤、憩室炎 、女性生殖道、褥疮溃疡和坏疽等病灶处。主要 的致病菌为脆弱类杆菌和厌氧链球菌，但常为与需氧菌的混合感染。厌氧菌败血 症的临床表现常与需氧或兼性厌氧者大致相似，但也有其特点如高胆红素血症， 黄疸发生率为10％～40％，血清总胆红素高出正常值的10倍以上；并发血栓性静 脉炎和迁徙性脓肿或感染等；病变组织有脏而臭的分泌物并含有气体，可形成假 膜，此外，厌氧菌败血症易并发肺炎，婴幼儿病人发生率尤高。
病原学
（一）致病菌的变迁 抗生素问世前：肺炎球菌和其他链球菌为主，其次为葡萄球菌，
革兰阴性菌仅占少数。 青霉素应用后：溶血性链球菌和肺炎球菌已少见（对青霉素G高
度敏感）。葡萄球菌易产生耐药，一直成为败血症的重要致病菌 之一。 20世纪70年代至80年代初：革兰阴性菌败血症所占比例逐年增加， 一度曾占主导地位。 80年代后期：由于第三代头抱菌素和喹诺酮类抗菌药物的广泛应 用，革兰阴性菌败血症的发病率逐年下降，而革兰阳性球菌败血 症呈上升趋势，尤其是耐药的葡萄球菌和肠球菌已成为院内感染 败血症的最常见的病原菌。
见微知著——微生物学细菌归类
长链状
C/多糖抗原 （分群依据）
葡 （+）
菊 （－） 有无有无 灰白、光滑 胆汁 边缘整齐 （－） 完全透明溶血环（β）
M 蛋白 （致病性）
触酶 P/核蛋白抗原 （－）
草绿色α溶血环 菌落中央下陷呈脐状
混浊生长 后期变澄清
葡麦 乳蔗 （+） 有无有无
胆汁 （+）
荚膜多糖抗原 (荚膜多糖疫 苗可作预防) 菌
外毒素： 志贺毒素（Stx）
细菌性痢疾： ①我国多 B/D 群引起 ②通过粪口途径传播 ③只在肠道，不侵入 血 ④发热 腹痛 水样腹 泻 脓血粘液便 里急 后重
急性中毒性痢疾： ①多见于小儿 ②表现为全身中毒， 微血管痉挛、导致 DIC、器官衰竭
D 可迟缓分解 乳糖，产酸不 产气
BCD 群均能发 酵甘露醇，仅 A 群有鸟苷酸 脱羧酶
分解 反应
表面抗原
普通琼脂 直径 2mm 半透明
平板
光滑型菌落
O (四群分类
依据)
葡
（+）
短
兼
小
性不
G－
杆
厌高
乳 无无有无
（－）
菌
氧
动力
S.S 琼脂培 无色半透明菌落
养基
（－） K
毒力因子
所致疾病
备注
侵袭力： ①黏附于派氏淋 巴结 M 细胞 ②向上皮细胞、 巨噬细胞分泌蛋 白诱导内吞 ③胞浆内繁殖并 进入毗邻细胞 内毒素： ①作用于肠黏膜 使其通透性增高 ②破坏肠黏膜， 促炎症 ③作用神经系统
周
科
Serratia
小杆菌
G－
般
无
菌属
高
红色
身
无
第一节 化脓性细菌
有群特异性。
9
（）
Fc receptor IgG
PHAGOCYTE
SPA
BACTERIUM
协同凝集试验（）
功能 体内作用：
与结合后所形成的 复合物具有抗吞噬、 促细 胞分裂、引起超敏反 应、 损伤血小板等多种生 物活 性。 体外作用： 用于多种微生物抗原 检测。
S.aureus
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.免疫性
人类有一定的天然免疫力，只有当 皮肤黏膜受伤后，宿主免疫力降低时， 才易引起葡萄球菌感染。
感染后能获得一定的免疫力，但不 强，难以防止再次感染。
23
（三）微生物学检查法
标本 脓汁，血液，剩余食物，呕吐物等
直接涂片镜检 分离培养
革兰阳性葡萄球菌
生长现象 生化反应
毒素检查
色素，溶血……
血浆凝固酶（） 发酵甘露醇（） 耐热核酸酶（）
药敏实验 动物实验：对食物中毒患者
24
四、防治原则
治
抗菌素 药敏试验
自身菌苗疗法
注意 消毒隔离
防止 医源性感染
防
防止 耐药性产生
注意 个人卫生
25
二、凝固酶阴性葡萄球菌
,
26
已成为医源性感染的常见重要病原菌，耐药 菌株日益增多；当机体免疫功能低下或细菌进入 非正常寄居部位时，可引起多种感染，各类感染 中仅次于大肠埃希菌，居病原菌的第位，造成诊 治困难，引起临床微生物学工作者关注。
龋齿，心内膜炎
33
一、群（化脓性）链球菌 本属细菌的代表种，致病性强，对
人致病的链球菌有属此种。
34
(一)生物学性状
.形态与染色 球形或椭圆形，链状排列，革兰染
败血症（败血病）
败血症（败血病）1病因及发病机制1 病因1.革兰阳性球菌主要是葡萄球菌、肠球菌和链球菌等。
最常见的是金黄色葡萄球菌，尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA），高度耐药凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）也不少见，肺炎链球菌可引起免疫缺陷者及老年人发生败血症，B组溶血性链球菌也可引起婴幼儿败血症。
20世纪90年代以来，耐青霉素的肺炎球菌（PRSP）、耐万古霉素的肠球菌（VRE）、耐万古霉素的金黄色葡萄球菌（VRSA）所致败血症的报道逐年增高。
2.革兰阴性杆菌常见的是大肠埃希菌、假单胞菌属、克雷伯菌属、变形杆菌、不动杆菌属等。
近年来产超广谱p内酰胺酶（extended-s pectrum β-lactamases，ESBLs）的克雷伯菌、多重耐药的铜绿假单胞菌（MDR-Pa）、产气杆菌、阴沟肠杆菌、溶血/鲍曼不动杆菌等所致败血症有增多趋势，也有嗜麦芽窄食单胞菌（Stenotrophomonas maltophilia）败血症病例报道。
3.厌氧菌占败血症病原的5%~7%，主要为脆弱类杆菌、梭状芽胞杆菌属，其次为消化链球菌及产气荚膜杆菌等。
4.真菌白色念珠菌占绝大多数，热带念珠菌，毛霉菌等也可引起败血症。
肝、肾等器官移植后及恶性肿瘤患者可发生曲霉菌（Aspergillus）败血症。
5.其他细菌一些致病力低的条件致病菌如单核细胞增多性李斯特菌、聚团肠杆菌及腐生葡萄球菌所致败血症均有报道。
在免疫缺陷者如艾滋病或免疫抑制剂长期使用时，偶可发生分枝杆菌败血症。
少数病例在同一血标本或3日内从同一病人不同血标本培养分离出两种或两种以上致病菌称为复数菌败血症。
败血症致病菌种类因不同年龄、性别、感染病灶、原发疾病及免疫功能状态等有所差别。
2 发病机制病原菌从不同途径进入血循环后是否引起败血症取决于人体的免疫功能和细菌种类、数量及其毒力。
1.人体因素：机体防御免疫功能缺陷或下降是败血症的重要诱因。
健康者病原菌入侵血流后，常仅表现为短暂菌血症，细菌可被免疫防御系统迅速消灭，不出现明显症状。
一例导管相关性血流感染病历讨论
余正常 • proBNP >35000.00 pg/ml • 尿常规：尿亚硝酸盐 阳性 ；尿蛋白 75.00
mg/dl； 红细胞血红蛋白 150 ↑ /ul；白细胞酯酶 100 ↑ /ul；红细胞(镜检) 5-8 /HP；白细胞(镜检) 10-15 /HP
----- 控制应激状态下血糖异常增高 l 继续CRRT(CVVHDF模式）治疗
6
D3
一般情况
神清，Tmax38.5℃， BP 156/76mmHg SPO2 92100% 两肺呼吸音粗，未及明显干湿啰音。心率110次/ 分，律齐。有气促，予以间歇无创呼吸机辅助通气，无 腹泻、呕吐。全身有浮肿。
检查
3
患者基本情况
辅助检查 头部、胸部CT示：左下肺少许炎症, 老年脑改变 腹部CT示：双肾结石可能，左肾积水， 左 输尿管结石可能 腹部超声：左肾积水，左侧输尿管上段稍 扩张，显示部分未见明显结石。
2021/10/10
入院诊断：
1.严重脓毒症 （肠道感染，尿路感染）； 2.尿路梗阻可能； 3.急性肾损伤； 4.低蛋白血症，中度贫血，电解质紊乱 （高钾血症）； 5. 慢性肾功能不全 （糖尿病肾病可能）； 6.心功能不全 心功能III级； 7.2型糖尿病； 8.高血压病（3级，极高危）
4
初始治疗方案
抗感染
美罗培南 1g q12h ivgtt
抑酸
半托拉唑 40mg qd ivgtt
保护脏器 还原型谷胱甘肽1.2 qd ivgtt
环磷腺苷葡胺120mg qd ivgtt
纠正内环境紊乱及脏器支持
临床医学检验技术(士)：革兰阳性球菌考点巩固
临床医学检验技术(士)：革兰阳性球菌考点巩固1、单选下列关于肠球菌属共同特征的叙述，错误的是（）A.分类上属于链球菌科B.是人类肠道中的正常菌群，对人体无致病潜力C.革兰阳性球菌，短键状排列D.无芽孢，无荚（江南博哥）膜，部分有鞭毛E.触酶阴性正确答案：B参考解析：肠球菌属是人类肠道中的正常菌群，是人类的条件致病菌。
2、单选Optochin试验阳性的细菌是（）A.金黄色葡萄球菌B.草绿色链球菌C.肺炎链球菌D.脑膜炎奈瑟菌E.淋病奈瑟菌正确答案：C参考解析：Optochin试验是肺炎链球菌和草绿色链球菌的鉴别试验，肺炎链球菌的Optochin敏感试验阳性。
3、单选肺炎链球菌的主要鉴定试验是（）A.杆菌肽敏感试验B.CAMP试验C.马尿酸钠水解试验D.Optochin试验E.胆汁七叶苷水解试验正确答案：D参考解析：1.A群链球菌可引起急性化脓性感染，化脓型链球菌杆菌肽敏感试验为阳性。
2.CAMP试验时羊血平板上B群链球菌与金黄色葡萄球菌协同形成箭头状溶血。
3.几乎所有的肺炎链球菌菌株都对Optochin敏感，而其他链球菌通常不被其所抑制。
4、单选患者，女性，70岁。
因慢性支气管炎急性发作入院，给予吸氧，青霉素治疗后，热退，咳嗽减轻，但8夭后该患者出现腹泻，呕吐，体温升高，粪便检查发现大量革兰阳性球菌，少量革兰阴性杆菌。
该患者腹泻最有可能由哪种细菌引起（）A.猪霍乱沙门菌B.消化链球菌C.耐药性金黄色葡萄球菌D.粪肠球菌E.霍乱弧菌5、单选下列哪种细菌是医院感染最常见的致病菌（）A.肺炎链球菌B.腐生葡萄球菌C.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌D.乙型溶血性链球菌E.脑膜炎奈瑟菌正确答案：C参考解析：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是医院感染最常见的致病菌。
6、单选B群链球菌的主要鉴定试验是（）A.杆菌肽敏感试验B.CAMP试验C.马尿酸钠水解试验D.Optochin试验E.胆汁七叶苷水解试验正确答案：B参考解析：1.A群链球菌可引起急性化脓性感染，化脓型链球菌杆菌肽敏感试验为阳性。
革兰阳性球菌
以血平板上溶血(rónɡ xuè)现象 Lancefield抗原血清分型
长高盐琼脂上的菌落）加入1滴血浆，10 秒内观察细菌聚集和凝块形成 金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌呈现 阳性反应
第二十六页，共九十五页。
2．凝固 酶试验 (nínggù)
试管凝固酶试验-测定分泌型凝固酶 以孵育过夜的牛心脑浸液肉汤培养物和血浆在37℃水浴中
孵育4h，观察凝块形成。如试验结果为阴性(yīnxìng)者再 置室温18~24h，因某些菌种（中间葡萄球菌、猪葡萄球 菌）的凝集出现所需时间长于4h
必须注意
某些菌株产生的葡激酶在延长孵育时间后可使凝块溶解使之 产生假阴性
若使用的不是无菌血浆可产生假阳性或假阴性结果；
细菌不是纯培养物或污染可导致假阳性
第二十七页，共九十五页。
3．耐热(nai rè)核酸酶试验
将待检菌的过夜肉汤培养物置沸水浴15min后，滴加 于含甲苯胺蓝核酸琼脂上已打好的直径为2～5mm小 孔内，置35°孵育，1h～3h后观察结果，绕孔周围蓝
产生荚膜多糖或糖萼有关
增强细菌与外来物质（生物性瓣膜、导管等）表面的粘附 或在其表面形成一层生物膜而保护细菌对抗杀菌物质作用。
第十五页，共九十五页。
三、生物学特性(tèxìng)
革兰阳性球菌
葡萄串样或单个、成双、短链，某些(mǒu xiē)菌株 能形成荚膜
在金黄色葡萄球菌的细胞壁有葡萄球菌A蛋白， 具有抗原性
第九页，共九十五页。
②毒素
葡萄球菌溶素
有α、β、γ、δ等 损伤细胞膜的毒素（细胞毒素）,破坏红细胞、
白细胞、血小板以及肝细胞等
杀白细胞素
细胞毒素
攻击中性粒细胞和巨噬细胞 抵抗宿主吞噬细胞，增强(zēngqiáng)细菌侵袭力
细菌学检验-8-链球菌
（Streptococcus）
革兰染色阳性G+，球形，链状排列
细菌种类多，分布广
其中某些菌种为毒力强的致病菌 另一些则是作为正常菌群栖居于宿主的呼
吸道、消化道、泌尿生殖道 还有一些是皮肤上的过路菌和黏膜上的定
居菌
一、分类
根据在血平板上溶血现象分三类
溶血现象 名称 类别
包括肺炎链球菌（S.pneumoniae） 草绿色链球菌群（Viridans streptococci）
4.不溶血D群链球菌
牛链球菌（S.bovis）
二、生物学特性
形态染色
直径0.5~1μm的球形或卵圆形革兰阳性球菌， 呈链状排列，链的长短和细菌的种类及生长环境
有关。
•培养特性：
有抗吞噬和抗吞噬细胞内杀菌作用 与某些超敏反应疾病有关
链球菌溶素（streptolysin）
SLO：对O2敏感。
抗原性强， 测定SLO抗体（ASO）含量，可作为链球菌
新近感染指标之一或风湿热及其活动性的 辅助诊断。
SLS：对O2稳定，β溶血环
致热外毒素（pyrogenic exotoxin，SPE）
皮肤及皮下组织感染
丹毒和淋巴管炎：
丹毒主要侵犯皮肤毛细淋巴管, 以皮肤红肿热为特征表现， 特点是皮疹呈猩红，边缘清楚， 伴剧痛。
淋巴管炎表现为明亮红线向肢体 延伸的皮肤感染。
面部丹毒急性期
面部丹毒恢复期
其他系统感染
咽痛、淋巴结肿大、 发热、咽部渗出物：
仅仅依靠临床表现很
1.A、C、G群抗原 1)菌落直径大于0.5mm :A群的化脓性链球菌
（S. pyogenes）、C群、G群的马链球菌 、G群抗原，统
简述致病菌引起全身感染后,常见
临床微生物检验简述致病菌引起全身感染后，常见的几种类型？答：①毒血症②菌血症③败血症④内毒素血症⑤脓毒血症试述构成细菌侵袭力的物质根底。
答：①荚膜②黏附素③侵袭性物质简述病原菌感染机体后，机体如何发挥抗菌免疫功能？答：首先遇到机体的非特异性免疫包括皮肤与粘膜构成的屏障构造，血脑屏障，胎盘屏障及吞噬细胞对细菌的非特异性的吞噬和体液中杀菌抑菌物质对细菌的攻击。
7-10天后，机体产生特异的细胞免疫和体液免疫与非特异性免疫一起杀灭病原菌简述细菌耐药性产生的主要机制。
答：①钝化酶的产生②药物作用靶位发生改变③胞壁通透性的改变和主动外排机制④抗菌药物的不合理使用形成了抗菌药物的选择压力，在这种压力的作用下，原来只占很少比例的耐药菌株被保存下来，并不断扩大。
举例说明细菌命名的原那么。
答：细菌的命名一般采用国际上通用的拉丁文双命名法。
一个细菌种的学名由两个拉丁字组成，属名在前，用名词，首字母大写；种名在后，用形容词，首字母小写；两者均用斜体字。
中文译名种名在前，属名在后。
如Mycobaterium tuberculosis 〔结核分枝杆菌〕。
属名亦可不将全文写出，只用第一个大写字母代表，如M. tuberculosis如何确定从标本中别离的细菌为葡萄球菌？并确定其有无致病性。
答：①直接镜检，经革兰染色后镜检发现革兰染色阳性呈葡萄状排列的球菌，可初步报告疑为葡萄球菌，需进一步别离培养鉴定。
②别离培养：血培养需经增菌后转种血平板进一步鉴定，假设无细菌生长，需连续观察7天，并以血平板确定有无细菌的生长。
脓液、尿道分泌物、脑脊液沉淀物可直接接种血平板，37℃过夜，可形成直径约2-3mm、产生不同色素的菌落。
金葡菌菌落周围有透明溶血环。
③试验鉴定：血浆凝固酶试验，甘露醇发酵试验，耐热核酸酶试验，肠毒素测定，SPA检测。
致病性葡萄球菌菌落周围有透明溶血环，血浆凝固酶试验阳性，甘露醇发酵试验阳性，耐热核酸酶试验阳性，SPA检测有A蛋白的存在。
复方嗜酸乳杆菌片与酪酸梭菌活菌散的区别
复方嗜酸乳杆菌片与酪酸梭菌活菌散的区别浅析————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：2宝乐安【酪酸梭菌活菌散】与益君康【复方嗜酸乳杆菌片】的区别浅析益生菌宝乐安与益君康两者都是益生菌制剂，有什么区别呢？下面从几个主要的方面概述之区别：第一，剂型不同。
宝乐安益生菌是口服酪酸梭菌活菌散，是散剂，服用方便，在低于40度的温水中就可以很快溶解并给孩子服用，而且口感好，儿童喜事；益君康益生菌是片剂，儿童用需要研碎，导致二次污染。
而且没有指出儿童的用法用量。
其次，保存方法不同宝乐安在常温条件下就可以保存，服用，携带方便；益君康阴凉（21℃以下），按药品法规定需要放冰箱保存。
第三，成分不同。
宝乐安的主要成分是酪酸梭菌，能修复肠粘膜：分泌酪酸（丁酸），修复营养受损的肠粘膜；益君康的主要成分是中国株嗜酸乳杆菌、日本株嗜酸乳杆菌、粪链球菌（粪肠球菌）、枯草杆菌，不能分泌酪酸，没有修复肠粘膜的作用；其中枯草杆菌和粪肠球菌都是条件致病菌，对身体存在潜在的致病性。
下面是世界卫生组织公布的条件致病菌肠球菌的危害性。
过去认为肠球菌是对人体无害的共生菌，但近年来的研究已经证实它是严重的条件致病菌，具有潜在致病性。
肠球菌可产生许多与宿主病理改变有关的因子，粪肠球菌产生的多形核白细胞趋化因子可介导或至少是部分介导通常与肠球菌属感染有关的炎症反应。
肠球菌属亦可产生一种质粒编码的、可增加感染严重程度的溶血素（cytolysin），其毒力因子还有聚集物质（AS）、表面蛋白（esp）、心内膜炎抗原（efaA）、明胶酶（gelE）、胶原结合蛋白（ace）、胞外超氧化物（O2－）、透明质酸酶、性信息素等，从而引起尿路感染、皮肤软组织感染，还可引起危及生命的腹腔感染、败血症、心内膜炎和脑膜炎等，死亡率达21.0～27.5 %，主要见于免疫力低下或过量使用抗生素的患者。
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【关键词】 肠球菌属;,溶血素类;,毒力;,药物耐受性
摘要:目的 探讨肠球菌溶血素与毒力的关系。 方法 比较溶血性肠球菌在临床标本及健
康人群粪便标本的检出率;比较溶血性、非溶血性肠球菌对小鼠的ld50及其对9种抗生素的
敏感性。结果 临床标本肠球菌的溶血素检出率61.5%,高于健康人群粪便标本
(18.4%,p<0.05);溶血性肠球菌的ld50[(3.9~11)×108cfu/ml]比非溶血性肠球菌小
[(2.5~8.9)×1010cfu/ml,p<0.01]。除丁胺卡那、万古霉素外，溶血性肠球菌对抗生素的
耐药性明显高于非溶血株。结论 肠球菌的溶血素可能与其毒力有关。
关键词:肠球菌属; 溶血素类; 毒力; 药物耐受性
qiang hua, xie manling
division of etiology, fujian medical university, fuzhou 350004, china
肠球菌已成为院内感染的第二位主要原因[13],其致病因子的 研究 十分迫切与重要。有
研究表明,肠球菌溶血素在眼内炎、心内膜炎、腹膜炎等动物模型中有致病作用[46]。笔者比
较溶血性肠球菌、非溶血性肠球菌对小鼠的ld50及其对抗生素的敏感性,通过 医院 临床标
本以及健康人群粪便标本肠球菌溶血素的检出率调查,探讨溶血性、非溶血性肠球菌的毒力差
异以及溶血素在肠球菌的毒力作用。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 菌株
1.1.1.1 肠球菌菌株
临床菌株分离自福建医科大学附属协和医院及福建省立医院就诊患者的尿液、胆汁、腹
腔液和心瓣膜、白带、前列腺等临床标本,健康人群菌株分离自某宿舍区健康自愿者、福建医
科大学教职工、学生等粪便标本。
1.1.1.2 质控菌株
药敏质控菌:肠球菌atcc29212(敏感株)、肠球菌atcc51299(耐药株)、金黄色葡萄球菌
atcc25923、大肠埃希氏菌atcc25922(卫生部药品生物制品检定所)。溶血对照乙型链球菌bd1、
甲型链球菌bc3为福建医科大学病原生物学系保存菌株。
1.1.2 动物
出生4周昆明种小鼠,体质量(19±1)g,雄性,清洁级(闽实动质准第00205),福建医科大
学实验动物中心提供。
1.1.3 培养基
1.1.3.1 肠球菌培养基elb1
lb培养基(1％胰蛋白胨,0.5％酵母提取物,1％nacl)添加0.4%na2hpo4,0.2%葡萄糖,0.8%
枸橼酸钠,ph 7.6~7.8。