赤芝中一个新萜类化合物_刘超
灵芝总三萜酸含量测定方法的研究_李保明
中国中药杂志
Ch ina Journal of Ch in ese M ateria M ed ica
V o.l 32, Issue 12 June, 2007
的 7-羟基被甲氧基所取代。13 C-NMR ( DM SO-d6, 500 MH z) D: 16511 ( C-2) , 10317 ( C-3 ), 18210 ( C-4 ) , 15713( C-5) , 9810( C-6) , 16319( C-7) , 9218 ( C-8) , 16111( C-9) , 12012( C-10) , 14010( C-1c), 10417( C2c), 16511 ( C-3c) , 14812 ( C-4c) , 16511 ( C-5c) , 10415( C-6c), 5614 ( OCH 3-3c, 5c) , 5611( OCH 3-7) 。 上述数据再与文献 [ 9] 报道的小麦黄素 7-甲醚 ( tr-i cin 7-m ethyl ether) 相比较一致, 故推定为小麦黄素 7-甲醚。
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3 讨论 用该方法未测到紫芝、破壁赤芝孢子粉及未破
壁赤 芝 孢 子 粉 中 的 三 萜 酸, 采 用 马 林 等 报 道 的 H PLC 条件对产于广东和福建的紫芝和孢子粉样品 进行检测, 结果显 示, 赤芝孢 子粉中三萜酸 含量极 低。
用氯仿分别溶解赤芝酸 C 甲酯和赤芝酮, 再用 本试验中供试液制备方法制备, 经 TLC 分离显色后 表示, 它们均未在碱化层, 而是存在于碱化后的氯仿
[ 致谢 ] 核磁共振波谱由中 国医学 科学院 药物研 究所 药物分析测试中心贺 文义老师代测。
[ 参考文献 ]
[ 1] 刘勇民. 维吾尔药志 [M ]. 下册. 乌鲁木 齐: 新疆科技卫 生出版 社, 1999: 541.
药用真菌
中国药用真菌真菌(fungi)在自然界现存的大约有2O～25万种，我国的真菌资源非常丰富，传统药用及试验具有药效的真菌已超过400种，主要集中在担菌亚门和子囊菌亚门⋯。
药用真菌是指能治疗疾病、具有药用价值的一类真菌，即在菌丝体、子实体、菌核或孢子中能产生氨基酸、维生素、多糖、甙类、生物碱、甾醇类、黄酮类及抗生素等多种物质，对人体有保健，对疾病有预防、抑制或治疗作用的真菌。
我国的真菌资源非常丰富，真菌是寻找新的抗生素和抗菌素等药物的宝贵资源库。
真菌等微生物在长期的生物进化过程中，为抗拒外来物侵袭以及适应外界环境产生了大量的化学防御物质和生长调节物质。
现有的研究结果表明，已知对肉瘤和艾氏癌抑制率达60％～100％的真菌有近300种，且大多数真菌抗肿瘤活性是具有特定结构的多糖和蛋白结合多糖体，把传统中医药和民间用药积累的宝贵经验与现代科学技术手段紧密结合，从丰富的真菌资源中寻找新的物质资源，更好的发挥它在中医药中的作用。
1．1担子菌亚门1．1．1 银耳目、银耳科1．银耳TermeUafuciformis Berk．2．焰耳Phlogiotis helveUoides(DC．ex Fr)Martin．3．金耳Termella aurantialba Bandoni&Zang．Sp．nov．1．1．2 木耳目、木耳科4．黑木耳Auricularia auricula(L．ex Hook．)Under．5．毛木耳Auricularia polytricha(Mont．)Sacc．6．皱木耳Auricularia delicata(Fr．)Henn．7．肠膜状木耳Auricularia messenterica(Dicks．)Bers．8．皱极木耳Auricularia rugosissima (Lev)Bres．9．胶角菌Calocera cornea(Batsch)Fr．1．1．3 非褶茵目、牛舌茵科10．牛舌菌Fistulina hepatica(Schaef)Fr．1．1．4 非褶茵目、多孔茵科11．茯苓Poria C0C05(Fr．)Wolf．12．灰树花Gr lafrondosa(Fr．)S．F．Gray13．猪苓Gr la umbellate(Pers．：Fr)Pilat14．平盖灵芝Ganoderma applanatum(Pers．)Pat．15．云芝Coriolus versicolor(L．：Fr．)Qu61．16．薄盖灵芝Ganoderma capeiK~e(Lloyd)Teng．17．灵芝Ganoderma lucifum(Leyss．ex Fr．)Karst18．匙状灵芝Ganoderma cochlear(B1．Et Ness)Bres19．层迭灵芝Ganoderma lobatum(Schw)Atk．20．松杉灵芝Ganoderma tsugae Murr．21．中华灵芝Ganderma sinense Zhap，Xu et Zhang22．虎乳灵芝Polyporus rhinoceros Cooke23．竹苓(雷丸)Omphalia lapidescens Schroeter．24．桑黄Phellinus baumii Pilat．25．隐孔菌Cryptoporus volvatus(Peck．)Hubb．26．红密孔菌Pycnoporus cinna barinus(Jacq．Fr．)Kaest．27．桦褐孔菌Fuscoporus obliqus(Pers．：Fr．)Aoshi．1．1．5 非褶茵目、猴头茵科28．猴头菌Hericium erinaceus(Bul1)Pers．1．1．6 非褶茵目、革茵科29．莲座革菌Thelephora vialis Schw．1．1．7 非褶茵目、枝瑚茵科30．黄枝瑚菌Ramariaflava(Schaef ex Fr．)Quel31．红顶枝瑚菌Ramaria botrytoides(Peck．)orner32．枝瑚菌Ramaria stricta(Pers．ex Fr．)Quel33．葡萄状枝瑚菌Ramaria botyrtis(Pers．)Ricken34．杯冠瑚菌Clavicorona phxidata(Pers．ex Fr．)Daty35．灰色锁瑚菌Clavulina cinerea(Bul1．ex Fr．)1．1．8 非褶茵目、鸡油茵科36．鸡油菌Cantharellus cibarius Fr．1．1．9 非褶茵目、齿茵科37．卷缘齿菌Hydnum repandum L．er Fx．1．1．10 硬皮马勃目、马勃茵科38．网纹马勃Lycoperdon perlatum Pers．39．多形马勃Lycoperdon Polymorphum Vitt．40．小马勃Lycoperdon pusllum Batsch ex Pers．41．红枣硬皮马勃Lycoperdon aurantium(Vail]．)．42．黄硬皮马勃Lycoperdonflavidum El1．et Ev．43．多根硬皮马勃Lycoperdon poleroderma Pers．44．灰疣硬皮马勃Lycoperdon verrucosum(Vail1．)Pers．1．1．11 伞茵目、牛肝茵科45．卷边牛肝菌Boletus albidus Roq．46．铜色牛肝菌Boletus aereus Fr．ex Bul1．47．血红牛肝菌Boletus rubellus Krombh48．厚环乳牛肝菌Suillus grevillei(K1)Sing49．点柄乳牛肝菌Suillus granulatus(L．ex Fr．)O．Kuntze 50．褐环乳牛肝菌Suillus luteus(L．ex Fr．)Gray51．肝色牛排菌Fistulina hepatica(Schaef．)Fr．1．1．12 伞茵目、红菇科52．全缘红菇Russula integra(L_)Fr．53．革质红菇Russula alutacea(Pers．)Fr．54．臭红菇(臭黄菇)Russula zoeteus Pers．ex F55．变绿红菇(绿菇，青头菌) Russula Viresceu(Schaef．)Fr．1．1．13 伞茵目、侧耳科56．虎奶菇Pleurotus tuberregium(Fr．)Sing．57．金顶侧耳Pleurotus citrinopileatus Sing58．糙皮侧耳Pleurotus ostreatus(Jacq．ex Fr．)Quel59．美味侧耳Pleurotus sapidus(Schulz．Apud．Kal—chbr．)Sace 60．阿魏侧耳Pleurotus ferulae Lenzi1．1．14 伞茵目、蘑菇科61．双孢蘑菇Agaricus bisporus(Lange)Sing．62．野蘑菇Agaricus arven~is St：haef．Fr．63．姬松茸Agaricus blazei Murrill1．1．15 伞茵目、白蘑科64．松口蘑Tricholoma matsutake(Ito．et Imai)Sing．65．香杏口蘑Tricholoma gambosum(Fr．)Gil1．66．丛生口蘑Tricholoma conglobatum Vitt．67．苦口蘑Tricholoma album(Schaef．)Fr．68．蒙古口蘑Tricholoma mongolicum Imai．69．蜜环菌Armillaria meUea(Vah1．ex Fr．)Qu 1．70．棱柄蜜环菌Armillariella ventricosa Peck．71．黏液蜜环菌Armillariella mucida(Schrad．)Fr．72．发光假蜜环菌Armillariella tabesceus(Scop．ExFr．Sing．73．长根菇Collybia radicata(Relh．ex Fr．)Qu 1．74．长根菇鳞腿变种Collybia radicata(Relh．ex Fr．)Qu l val-．furfuracea PK．75．安络小皮伞Marasmius androsaceu．s(L ex Fr．)Fr．76．白蚁伞Tormitomyces albuminosus(Berk．)Helm．1．1．16 伞茵目、丝膜茵科77．毛柄金钱菌Flammulina velutipes(Curt．ex Fr．)Sing．78．蜜环丝膜菌Cortinarius armillatus(Fr．)Fr1．1．17 伞菌目、鹅膏科79．橙盖鹅膏Amarnita caesarea(Scop．ex Fr．)Pets．ex Schw．8O．橙盖鹅膏白色变种Amarnita caesorea(Scop．exFr．、Pers．ex Schw．var．alba Gil1．81．松塔鹅膏Amarnita strobiliformis(Pau1．et Fr．)Bert．82．灰鹅膏Amanita vaginata(Bul1．ex Fr．)Vitt83．草菇Volvariella volvacea(bul1．ex Fr．)Sing1．1．18 伞菌目、球盖菇科84．黄伞Pholiota adiposa(Fr．)Qu 1．85．翘鳞环锈伞Pholiot squarrosa(Pers．ex Fr．)Qu l_86．毛腿环锈伞Pholiot mutabilis(Schaef．ex Fr．)Qu 1．1．1．19 伞菌目、鬼伞科87．粪菌Coprinus sterquilinus Fr．88．褐盖鬼伞Coprinus f~cesceus(Schaef．)Fr．89．墨汁鬼伞Coprinus atramentariu．s(Bul1．)Fr．90．毛头鬼伞Coprinus comatu~(Mfll1．ex Fr．)Gray．91．卵状鬼伞Coprinus ovatu~(Schaef．)Fr．92．长裙竹荪Dictyophora indusiata(Vent．：Pers．)Fisch．93．棘托竹荪Dictyophora echino—volvata Zane．Zheng etHu1．1．20 伞菌目、裂褶菌科94．裂褶菌Schizphylhls commne Fr1．2 子囊菌亚门1．2．1 盘菌目、羊肚菌科95．羊肚菌Morchella esculenta(L．)Pets．1．2．2 麦角菌目、麦角菌科96．冬虫夏草Cordyceps sinen~is(Berk．)Sacc．97．蛹虫草Cordyceps militaris(L：Fr．)Link98．麦角Claviceps purpurea(Fr．)Tu1．99．蝉花菌Cordyceps sobalifera(Hil1) Berk．Et Broome。
不同产地牛蒡根下脚料成分比较及赤
㊀山东农业科学㊀２０２２ꎬ５４(１２):１３６~１４２ＳｈａｎｄｏｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ㊀ＤＯＩ:１０.１４０８３/ｊ.ｉｓｓｎ.１００１－４９４２.２０２２.１２.０２１收稿日期:２０２２－０７－２６基金项目:山东省重点研发计划项目(２０１９ＧＨＺ０２２)ꎻ山东省外专双百计划项目(ＷＳＴ２０１７００４)ꎻ泰山学者工程专项经费资助项目(ｔｓｑｎ２０１９０９１６８)ꎻ潍坊市科学技术发展计划项目(２０２０ＺＪ１０４５)作者简介:赵双枝(１９７６ )ꎬ女ꎬ硕士ꎬ研究员ꎬ从事功能性真菌发酵研究ꎮＥ－ｍａｉｌ:ｚｈａｏｓｈｚ７１７＠１６３.ｃｏｍ通信作者:杨金玉(１９８７ )ꎬ女ꎬ博士ꎬ助理研究员ꎬ从事真菌发酵研究ꎮＥ－ｍａｉｌ:ｙａｎｇｊｉｎｙｕ８６＠１６３.ｃｏｍ不同产地牛蒡根下脚料成分比较及赤芝固态发酵菌质成分变化分析赵双枝１ꎬ２ꎬ宋国宾２ꎬ裘纪莹２ꎬ张彦昊２ꎬ陈蕾蕾２ꎬ３ꎬ李熙文２ꎬ周庆新２ꎬ３ꎬ袁玮２ꎬ３ꎬ杨金玉２(１.中国海洋大学海洋生命学院ꎬ山东青岛㊀２６６００３ꎻ２.山东省农业科学院农产品加工与营养研究所/山东省农产品精深加工技术重点实验室/农业农村部新食品资源加工重点实验室ꎬ山东济南㊀２５０１００ꎻ３.山东师范大学生命科学学院ꎬ山东济南㊀２５００１４)㊀㊀摘要:选择安丘㊁徐州㊁亳州㊁兰陵㊁陇南和城阳地区的牛蒡根下脚料ꎬ对其化学成分含量进行测定ꎬ以便筛选出最适赤芝发酵基质ꎮ在营养成分方面ꎬ安丘样品中菊糖㊁总糖㊁氨基酸㊁核苷总量㊁蛋白质含量最高ꎻ城阳样品中还原糖含量最高ꎮ在功效成分方面ꎬ安丘样品中类黄酮含量最高ꎬ为６.７２ｍｇ/ｇꎻ城阳样品中总三萜酸含量最高ꎬ为０.１５ｍｇ/ｇꎮ在挥发性物质方面ꎬ安丘样品中挥发性物质种类最多(１０８种)ꎬ其中醛㊁醇㊁酮㊁烯㊁氮杂环种类相对较多ꎬ分别为２３㊁１１㊁１１㊁９㊁１９种ꎻ安丘样品中总挥发性物质相对含量最高ꎬ为７８.４７％ꎬ其中醛㊁醇㊁有机酸㊁氮杂环类物质相对含量较高ꎬ分别为２６.３５％㊁７.３１％㊁１０.２８％㊁１２.７６％ꎮ比较分析了安丘牛蒡根下脚料赤芝发酵前后的化学成分变化ꎮ在营养成分方面ꎬ蛋白质㊁还原糖㊁总三萜酸含量和核苷总量发酵后显著升高ꎬ氨基酸及总糖㊁菊糖含量发酵后显著降低ꎬ并且发酵后产生了新的核苷物质(鸟苷㊁肌苷㊁腺苷)ꎮ在挥发性物质方面ꎬ发酵第１６天菌质中总挥发性成分种类比未发酵样品减少ꎬ尤其是醇㊁有机酸和氮杂环类化合物变化最为明显ꎬ分别由１１㊁８㊁１９种减少为３㊁２㊁９种ꎬ醛㊁酮㊁氧杂环类化合物相对含量大幅提高ꎬ分别由２６.３５％㊁３.０５％㊁４.３４％升高到９１.４２％㊁２２.３８％㊁２０.２１％ꎮ本研究可为牛蒡根下脚料的综合开发利用提供理论依据ꎬ并对安丘牛蒡的精深加工利用和经济价值提高具有指导意义ꎮ关键词:牛蒡根下脚料ꎻ产地ꎻ赤芝ꎻ固态发酵ꎻ化学成分中图分类号:Ｓ６４９㊀㊀文献标识号:Ａ㊀㊀文章编号:１００１－４９４２(２０２２)１２－０１３６－０７ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｎＣｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓｏｆＢｕｒｄｏｃｋＲｏｏｔＬｅｆｔｏｖｅｒｓｆｒｏｍＤｉｆｆｅｒｅｎｔＰｒｏｄｕｃｉｎｇＡｒｅａｓａｎｄＶａｒｉａｔｉｏｎＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＣｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓａｆｔｅｒＧａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍＳｏｌｉｄＳｔａｔｅＦｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎＺｈａｏＳｈｕａｎｇｚｈｉ１ꎬ２ꎬＳｏｎｇＧｕｏｂｉｎ２ꎬＱｉｕＪｉｙｉｎｇ２ꎬＺｈａｎｇＹａｎｈａｏ２ꎬＣｈｅｎＬｅｉｌｅｉ２ꎬ３ꎬＬｉＸｉｗｅｎ２ꎬＺｈｏｕＱｉｎｇｘｉｎ２ꎬ３ꎬＹｕａｎＷｅｉ２ꎬ３ꎬＹａｎｇＪｉｎｙｕ２(１.ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＭａｒｉｎｅＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＯｃｅａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎａꎬＱｉｎｇｄａｏ２６６００３ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＡｇｒｏ￣ＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬＳｈａｎｄｏｎｇＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ/ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＡｇｒｏ￣ＰｒｏｄｕｃｔｓＰｒｏｃｅｓｓｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆＳｈａｎｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅ/ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＮｏｖｅｌＦｏｏｄＲｅｓｏｕｒｃｅｓＰｒｏｃｅｓｓｉｎｇꎬＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＲｕｒａｌＡｆｆａｉｒｓꎬＪｉｎａｎ２５０１００ꎬＣｈｉｎａꎻ３.ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＳｈａｎｄｏｎｇＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＪｉｎａｎ２５００１４ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ㊀ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｓｅｌｅｃｔｔｈｅｍｏｓｔｓｕｉｔａｂｌｅｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｓｕｂｓｔｒａｔｅｆｏｒＧａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍꎬｔｈｅｃｏｎ￣ｔｅｎｔｓｏｆｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｉｎｔｈｅｌｅｆｔｏｖｅｒｓｏｆｂｕｒｄｏｃｋｒｏｏｔｆｒｏｍＡｎｑｉｕꎬＸｕｚｈｏｕꎬＢｏｚｈｏｕꎬＬａｎｌｉｎｇꎬＬｏｎｇｎａｎａｎｄＣｈｅｎｇｙａｎｇｒｅｇｉｏｎｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ.ＩｎｔｅｒｍｓｏｆｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎꎬｉｎｕｌｉｎꎬｔｏｔａｌｓｕｇａｒｓꎬａｍｉｎｏａｃｉｄｓꎬｔｏｔａｌｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎｔｈｅＡｎｑｉｕｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔꎬａｎｄｔｈｅｒｅｄｕｃｉｎｇｓｕｇａｒｃｏｎｔｅｎｔｗａｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｉｎｔｈｅＣｈｅｎｇｙａｎｇｓａｍｐｌｅｓ.ＩｎｔｅｒｍｓｏｆｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓꎬｔｈｅｆｌａｖｏｎｏｉｄｃｏｎｔｅｎｔｗａｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｉｎｔｈｅＡｎｑｉｕｓａｍｐｌｅｓꎬｗｈｉｃｈｗａｓ６.７２ｍｇ/ｇꎻｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｏｔａｌｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄａｃｉｄｗａｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔａｓ０.１５ｍｇ/ｇｉｎｔｈｅＣｈｅｎｇｙａｎｇｓａｍｐｌｅｓ.Ｉｎｔｅｒｍｓｏｆｖｏｌａｔｉｌｅｓｕｂｓｔａｎｃｅｓꎬｔｈｅｔｙｐｅｓｏｆｖｏｌａｔｉｌｅｓｕｂ￣ｓｔａｎｃｅｓｉｎＡｎｑｉｕｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｔｈｅｍｏｓｔ(１０８ｔｙｐｅｓ)ꎬａｎｄａｌｄｅｈｙｄｅｓꎬａｌｃｏｈｏｌｓꎬｋｅｔｏｎｅｓꎬａｌｋｅｎｅｓａｎｄｎｉｔｒｏｇｅｎｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓｈａｄｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｍｏｒｅｔｙｐｅｓａｓ２３ꎬ１１ꎬ１１ꎬ９ａｎｄ１９ｔｙｐｅｓꎬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｏ￣ｔａｌｖｏｌａｔｉｌｅｓｕｂｓｔａｎｃｅｓｉｎｔｈｅＡｎｑｉｕｓａｍｐｌｅｓｗａｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔ(７８.４７％)ꎬａｎｄｔｈａｔｏｆａｌｄｅｈｙｄｅｓꎬａｌｃｏｈｏｌｓꎬｏｒ￣ｇａｎｉｃａｃｉｄｓａｎｄｎｉｔｒｏｇｅｎｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃｗｅｒｅｈｉｇｈｅｒａｓ２６.３５％ꎬ７.３１％ꎬ１０.２８％ａｎｄ１２.７６％.ＴｈｅｃｈａｎｇｅｓｉｎｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓａｆｔｅｒｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｆＡｎｑｉｕｂｕｒｄｏｃｋｒｏｏｔｌｅｆｔｏｖｅｒｓｗｉｔｈＧ.ｌｕｃｉｄｕｍｍｙｃｏｐｌａｓｍｗｅｒｅａｎａ￣ｌｙｚｅｄ.Ｉｎｔｅｒｍｓｏｆｎｕｔｒｉｅｎｔｓꎬｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｐｒｏｔｅｉｎꎬｒｅｄｕｃｉｎｇｓｕｇａｒꎬｔｏｔａｌｔｒｉｔｅｒｐｅｎｅａｃｉｄａｎｄｔｏｔａｌｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙａｆｔｅｒｆｅｒｍｅｎｔｉｏｎꎬｗｈｉｌｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆａｍｉｎｏａｃｉｄꎬｔｏｔａｌｓｕｇａｒａｎｄｉｎｕｌｉｎｄｅｃｒｅａｓｅｄｓｉｇ￣ｎｉｆｉｃａｎｔｌｙꎬａｎｄｎｅｗｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ(ｇｕａｎｏｓｉｎｅꎬｉｎｏｓｉｎｅａｎｄａｄｅｎｏｓｉｎｅ)ｗｅｒｅｆｏｕｎｄ.Ｉｎｔｅｒｍｓｏｆｖｏｌａｔｉｌｅｓｕｂｓｔａｎｃｅｓꎬｔｈｅｔｙｐｅｓｏｆｖｏｌａｔｉｌｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｎｔｈｅ１６ｔｈｄａｙｏｆｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｄｅｃｒｅａｓｅｄａｆｔｅｒｆｅｒｍｅｎｔｉｏｎꎬｅｓｐｅ￣ｃｉａｌｌｙａｌｃｏｈｏｌꎬｏｒｇａｎｉｃａｃｉｄａｎｄｎｉｔｒｏｇｅｎｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃｃｏｍｐｏｕｎｄｓｄｅｃｒｅａｓｉｎｇｆｒｏｍ１１ꎬ８ａｎｄ１９ｔｏ３ꎬ２ａｎｄ９ꎬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆａｌｄｅｈｙｄｅｓꎬｋｅｔｏｎｅｓａｎｄｏｘｙｇｅｎｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃｃｏｍｐｏｕｎｄｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｌａｒｇｅｌｙｆｒｏｍ２６.３５％ꎬ３.０５％ａｎｄ４.３４％ｔｏ９１.４２％ꎬ２２.３８％ａｎｄ２０.２１％ꎬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.Ｔｈｅｓｅｒｅｓｕｌｔｓｃｏｕｌｄｐｒｏｖｉｄｅｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌｂａｓｅｓｆｏｒｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｂｕｒｄｏｃｋｒｏｏｔｌｅｆｔｏｖｅｒｓꎬａｎｄｗｏｕｌｄｈａｖｅｇｕｉｄ￣ｉｎｇｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｆｏｒｄｅｅｐｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇａｎｄｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎａｎｄｉｍｐｒｏｖｉｎｇｅｃｏｎｏｍｉｃｖａｌｕｅｏｆＡｎｑｉｕｂｕｒｄｏｃｋ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ㊀ＢｕｒｄｏｃｋｒｏｏｔｌｅｆｔｏｖｅｒｓꎻＰｒｏｄｕｃｉｎｇａｒｅａꎻＧａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍꎻＳｏｌｉｄｓｔａｔｅｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎꎻＣｈｅｍｉｃａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ㊀㊀牛蒡(ＡｒｃｔｉｕｍｌａｐｐａＬ.)是菊科牛蒡属两年生草本直根类植物ꎬ又名 蝙蝠刺 蒡翁菜 东洋牛鞭菜 等ꎮ牛蒡喜生长在光照强㊁土壤深厚疏松㊁气候温润潮湿的地方[１ꎬ２]ꎮ我国大部分地区均有种植ꎬ栽培区域主要在山东㊁江苏㊁浙江㊁湖北㊁安徽㊁甘肃等地区[３]ꎮ牛蒡富含菊糖㊁蛋白质㊁钙等营养成分及多种维生素㊁１７种氨基酸ꎬ有较高的药用和食用价值[４ꎬ５]ꎮ牛蒡叶㊁子㊁根均可作药用[６ꎬ７]ꎮ牛蒡叶具有抗炎㊁疏风散热㊁抗病毒等作用[８ꎬ９]ꎻ牛蒡子具有抗炎㊁抗病毒㊁免疫调节活性等[１０ꎬ１１]ꎻ牛蒡根的主要功效包括降脂㊁调节胃肠功能及提高机体代谢率等[１２ꎬ１３]ꎮ近年来ꎬ国外对我国牛蒡根的需求量逐渐增加ꎬ但在对外出口的牛蒡根中会产生约１０ｔ/ｈｍ２的不合格产品ꎬ主要作为废弃物处理[１４]ꎻ同时ꎬ在我国牛蒡根精深加工过程中会产生大量的下脚料ꎮ为提高经济价值㊁避免资源浪费与环境污染ꎬ牛蒡根下脚料的综合利用与开发具有深远意义ꎮ研究不同产地牛蒡根下脚料的化学成分组成ꎬ旨在筛选出适合赤芝发酵的培养基质ꎬ通过赤芝－牛蒡根下脚料双向发酵体系的建立ꎬ提高发酵菌质某些营养成分㊁功效成分及风味ꎬ以期开发出功能性牛蒡灵芝茶等饮品ꎬ既可解决牛蒡下脚料废弃㊁腐烂引起的资源浪费和环境污染问题ꎬ又可提高该资源经济价值ꎮ１㊀材料与方法１.１㊀供试材料牛蒡根下脚料分别从山东安丘㊁江苏徐州㊁安徽亳州㊁山东兰陵㊁甘肃陇南及山东青岛城阳地区农户手中采集ꎬ是牛蒡根加工过程中产生的破碎料㊁残根㊁碎屑等废弃物ꎬ经清洗㊁切碎后于６５ħ烘箱烘干备用ꎮ赤芝(Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ)菌种７３１㊀第１２期㊀㊀㊀㊀㊀赵双枝ꎬ等:不同产地牛蒡根下脚料成分比较及赤芝固态发酵菌质成分变化分析ＣＩＣＣ５０００６由山东省农业科学院农产品加工与营养研究所食品微生物团队分离㊁保存ꎮ１.２㊀试验方法１.２.１㊀菌种活化和种子培养基㊀ＰＤＡ培养基经１２１ħ高压灭菌３０ｍｉｎ后制成试管斜面备用ꎮ无菌条件下剖取小块母种(１ｃｍ２)ꎬ移接到斜面活化培养基ꎬ２７ħ恒温培养ꎬ待菌丝长满斜面后置于４ħ保存备用ꎮ种子培养基为２０％土豆汁㊁３％麦麸㊁３％葡萄糖㊁０.２％磷酸二氢钾㊁０.１％硫酸镁ꎬ自然ｐＨꎮ１.２.２㊀牛蒡根下脚料预处理及发酵㊀将牛蒡根下脚料水中浸泡２ｈꎬ利用脱水机脱水ꎬ水分含量控制在６５％ꎬ按３００ｇ/袋装袋ꎬ１２１ħ灭菌２ｈꎮ赤芝接种量为１０％ꎬ发酵温度为２６ħꎬ分别于培养第７㊁１０㊁１３㊁１６㊁１９天取样ꎬ粉碎后测定营养和功效成分ꎮ１.２.３㊀固态发酵基质的筛选㊀检测安丘㊁徐州㊁亳州㊁兰陵㊁陇南㊁城阳６个地区牛蒡根下脚料中氨基酸总量㊁蛋白质㊁类黄酮㊁总糖㊁还原糖㊁菊糖㊁总三萜酸㊁核苷㊁挥发性物质种类和含量以及抗氧化活性ꎮ综合赤芝菌生物学特性及对主要营养物质的需求ꎬ筛选出最优的固态发酵基质ꎮ１.２.４㊀营养成分和功能成分测定㊀蛋白质含量:将烘干后的样品粉碎ꎬ参照ＧＢ５００９.５ ２０１６«食品安全国家标准食品中蛋白质的测定»(凯氏定氮法)ꎮ氨基酸含量:将烘干㊁粉碎后的样品进行盐酸酸解ꎬ参照ＧＢ５００９.１２４ ２０１６«食品安全国家标准食品中氨基酸的测定»ꎮ多糖含量:精密称取烘干㊁粉碎均匀样品１ｇ于具塞试管中ꎬ加入２５ｍＬ纯水ꎬ沸水浴提取２ｈꎬ冷却过滤后残渣用２０ｍＬ纯水再提取１ｈꎬ合并滤液ꎬ定容至５０ｍＬꎬ充分摇匀ꎮ采用苯酚硫酸法ꎬ参照刘夕娟等[１５]的试验方法进行测定ꎮ还原糖含量:采用ＤＮＳ试剂法ꎬ参照刘夕娟等[１５]的试验方法进行测定ꎮ菊糖含量:根据总糖和还原糖标准曲线分别计算样品中两者的含量ꎬ然后根据公式计算菊糖含量ꎮ菊糖含量＝总糖含量－还原糖含量ꎮ总三萜酸含量:参照刘超[１６]的方法进行测定ꎮ精密称取０㊁０.１㊁０.２㊁０.３㊁０.４㊁０.５㊁０.６㊁０.７ｍＬ齐墩果酸标准品溶液于８支具塞试管中ꎬ水浴加热挥发掉溶剂ꎻ分别向每支试管中加５％香草醛－冰醋酸溶液０.３μＬ㊁高氯酸１ｍＬꎬ密封ꎻ７０ħ水浴恒温加热２５ｍｉｎꎬ取出后立即冰水冷却ꎬ加冰醋酸１０μＬꎬ摇匀ꎬ５５０ｎｍ处测定吸光值ꎬ以吸光度(Ａ)为纵坐标㊁齐墩果酸浓度(Ｃ)为横坐标绘制标准曲线ꎬ其回归方程为Ａ＝０.８６３３ＣꎬＲ２＝０.９９９１ꎮ粉碎后的样品于４０ħ烘箱烘８ｈꎬ精密称取各样品２.０ｇꎬ放入具塞三角瓶中ꎬ加乙醇４０ｍＬꎬ超声３０ｍｉｎꎬ过滤ꎬ滤渣加入无水乙醇３０ｍＬꎬ超声３０ｍｉｎꎬ过滤ꎬ用乙醇冲洗滤渣数次ꎬ滤液定容于１００ｍＬꎬ待测ꎮ精密吸取各供试品溶液０.２ｍＬꎬ重复３次ꎬ按照上述标准曲线步骤操作测定吸光值ꎬ根据标准曲线计算浓度(ｍｇ/ｇ)ꎮ核苷含量:参照王金艳等[１７]的方法进行测定ꎮ精密称取粉碎后均匀的样品１ｇ于１０ｍＬ具塞试管中ꎬ加入１０ｍＬ蒸馏水ꎬ混匀后超声(５００Ｗꎬ４０ｋＨｚ)提取１ｈꎮ将试管取出后冷却至室温ꎬ混匀ꎬ４０００ｒ/ｍｉｎ离心１０ｍｉｎꎬ吸取上清液过０.４５μｍ微孔滤膜并转移至样品瓶中ꎬ进行ＨＰＬＣ分析ꎬ绘制核苷标准曲线ꎬ对发酵前后核苷含量进行测定ꎮ色谱条件:色谱柱为ＡｇｌｉｅｎｔＨＣ－Ｃ１８柱(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)ꎮ流动相(甲醇－水)梯度洗脱程序:０ң２０ｍｉｎꎬ甲醇５％ꎬ水９５％ꎻ２０ң３５ｍｉｎꎬ甲醇２０％ꎬ水８０％ꎻ３５ң３６ｍｉｎꎬ甲醇５％ꎬ水９５％ꎻ３６ң４０ｍｉｎꎬ甲醇５％ꎬ水９５％ꎮ紫外检测器ꎬ波长２５９ｎｍꎬ柱温３０ħꎬ流速１.０ｍＬ/ｍｉｎꎬ进样量１０μＬꎮ１.２.５㊀挥发性物质种类和含量测定㊀参照屠玥之等[１８]的方法进行测定ꎮ称取各待测样品２.００ｇ左右于顶空瓶中ꎬ加入５ｍＬ蒸馏水㊁５μＬ四甲基二戊醇ꎬ混匀ꎬ于６５ħ条件下将６５μｍＰＤＭＳ/ＤＶＢ纤维萃取头插入顶空瓶中萃取３０ｍｉｎꎬ拔出萃取头插入ＧＣ－ＭＳ进样口中ꎬ２２０ħ脱附２ｍｉｎꎬ进行ＧＣ－ＭＳ分析ꎬ得到质谱图ꎬ由ＣｈｒｏｍａＴＯＦ软件系统完成质谱分析ꎮ化合物检索谱库:ＮＩＳＴ谱库ꎮ以各挥发性组分的峰面积占总面积之比表示组分相对含量ꎮ色谱条件:ＤＢ－Ｗａｘ毛细管柱(６０ｍˑ３２０μｍˑ０.１５μｍ)ꎻ进样口温度２２０ħꎻ载气:氦气(纯度>９９.９９９％)ꎻ流速１ｍＬ/ｍｉｎꎻ分流进样ꎮ升温程序:５０ħ保持３ｍｉｎꎬ以３ħ/ｍｉｎ升温至１２０ħ并保持３ｍｉｎꎬ以５ħ/ｍｉｎ升温至２５０ħ并保持１０８３１㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５４卷㊀ｍｉｎꎻ总分析时间为６２ｍｉｎꎮ质谱条件:离子源为ＥＩꎻ电离能量:－７０ｅＶꎻ质量扫描范围:３３~６００ｕꎻ离子源温度:２００ħꎻ传输线温度:２５０ħꎮ１.３㊀数据统计与分析使用ＳＰＳＳ２６.０的ＡＮＯＶＡ法进行单因子方差分析ꎬ统计各处理组之间的差异性ꎬ试验数据用平均值ʃ标准误表示ꎬＰ<０.０５表示差异显著ꎮ２㊀结果与分析２.１㊀不同地区牛蒡根下脚料营养成分和功效成分测定结果２.１.１㊀不同地区牛蒡根下脚料营养成分含量㊀由表１可知ꎬ安丘地区牛蒡根下脚料中氨基酸总量最高ꎬ达１０４.０ｇ/ｋｇꎬ与亳州地区的差异不显著ꎬ但显著高于其它地区ꎮ安丘地区牛蒡根下脚料中蛋白质含量最高ꎬ达１１７.９ｇ/ｋｇꎬ显著高于其它地区ꎮ安丘地区牛蒡根下脚料中总糖和菊糖含量最高ꎬ分别达０.７２㊁０.６６ｇ/ｇꎬ与陇南地区的差异不显著ꎬ但显著高于其它地区ꎮ可见ꎬ不同地区的牛蒡根下脚料中营养成分含量存在较大差异ꎮ㊀㊀表１㊀㊀不同地区牛蒡根下脚料营养成分含量产地氨基酸总量(ｇ/ｋｇ)蛋白质(ｇ/ｋｇ)总糖(ｇ/ｇ)还原糖(ｇ/ｇ)菊糖(ｇ/ｇ)安丘１０４.０ʃ０.３０ａ１１７.９ʃ０.３０ａ０.７２ʃ０.０２ａ０.０６ʃ０.００２ｃ０.６６ʃ０.０３ａ徐州１００.０ʃ０.２０ｂ１０７.９ʃ０.２０ｃ０.５５ʃ０.０４ｂ０.０５ʃ０.００１ｄ０.５０ʃ０.０４ｂ亳州１０２.０ʃ０.２０ａｂ１１１.０ʃ０.３０ｂ０.４９ʃ０.０４ｃ０.０４ʃ０.００１ｅ０.４５ʃ０.０４ｃ兰陵８９.８ʃ０.３０ｃ１１０.５ʃ０.４０ｂｃ０.５２ʃ０.０３ｂｃ０.０７ʃ０.００１ｂ０.４５ʃ０.０３ｃ陇南５９.５ʃ０.１０ｅ９９.５ʃ０.２０ｄ０.６２ʃ０.０５ａｂ０.０６ʃ０.００１ｃ０.５６ʃ０.０３ａｂ城阳８２.２ʃ０.２０ｃｄ９３.６ʃ０.３０ｅ０.５６ʃ０.０３ｂ０.０９ʃ０.００１ａ０.４７ʃ０.０２ｂｃ㊀㊀注:同列肩标不同字母表示差异显著(Ｐ<０.０５)ꎬ下同ꎮ由表２可知ꎬ亳州㊁陇南地区牛蒡根下脚料均未检出胞苷ꎬ各地区均未检出鸟苷㊁肌苷及腺苷ꎬ安丘地区牛蒡根下脚料尿苷㊁核苷总量最高ꎬ显著高于其它地区ꎮ㊀㊀表２㊀不同地区牛蒡根下脚料中核苷含量(μｇ/ｇ)产地胞苷尿苷鸟苷肌苷腺苷核苷总量安丘１０.９６ʃ０.４３ｃ１７４.０８ʃ２.０１ａ １８５.０４ʃ２.４４ａ徐州３３.３３ʃ２.１４ａ６０.２８ʃ２.２９ｂ ９３.６１ʃ４.４３ｂ亳州 ２１.４４ʃ０.５９ｅ ２１.４４ʃ０.５９ｆ兰陵１０.２９ʃ１.１９ｄ４９.８９ʃ２.０４ｃ ６０.１８ʃ３.２３ｃ陇南 ４６.４５ʃ０.２４ｄ ４６.４５ʃ０.２４ｄ城阳２３.１８ʃ０.５２ｂ１６.０９ʃ０.３２ｆ ３９.２７ʃ０.８４ｅ㊀㊀注: 表示未检出ꎮ２.１.２㊀不同地区牛蒡根下脚料功效成分含量㊀由表３可知ꎬ安丘地区牛蒡根下脚料中类黄酮含量最高ꎬ达６.７２ｍｇ/ｇꎬ显著高于其它地区ꎮ青岛城阳地区总三萜酸含量最高ꎬ与兰陵地区差异不显著ꎬ但显著高于其它地区ꎮ㊀㊀表３㊀㊀㊀不同地区牛蒡根下脚料功效成分含量(ｍｇ/ｇ)产地类黄酮总三萜酸安丘６.７２ʃ０.２７ａ０.０９ʃ０.００４ｂ徐州４.０７ʃ０.５６ｂ０.０７ʃ０.００９ｃ亳州２.８２ʃ０.２０ｃ０.０８ʃ０.００５ｂ兰陵４.１１ʃ０.１１ｂ０.１４ʃ０.００３ａｂ陇南２.３９ʃ０.２３ｃ０.０９ʃ０.００５ｂ城阳４.７０ʃ０.１２ｂ０.１５ʃ０.００３ａ２.１.３㊀不同地区牛蒡根下脚料中挥发性物质种类和含量㊀表４表明ꎬ安丘地区牛蒡根下脚料样品中共检测到挥发性物质１０８种ꎬ相对含量达７８.４７％ꎬ亳州和兰陵样品的总挥发性物质种类也较多ꎬ相对含量也较高ꎮ在挥发性物质中ꎬ醛类㊁氮杂环化合物㊁醇类㊁有机酸类化合物的相对含量普遍较高ꎮ安丘地区样品中检测到醛类化合物２３种ꎬ相对含量２６.３５％ꎻ氮杂环化合物１９种ꎬ相对含量１２.７６％ꎻ醇类化合物１１种ꎬ相对含量７.３１％ꎻ有机酸类化合物８种ꎬ相对含量１０.２８％ꎻ烯类化合物９种ꎬ相对含量５.５７％ꎮ综上ꎬ安丘地区牛蒡根下脚料中氨基酸总量㊁蛋白质含量㊁类黄酮含量㊁总糖和菊糖含量㊁核苷总量等营养和功效成分以及挥发性物质的种类和相对含量均最高ꎬ故选择安丘地区牛蒡根下脚料为原料制备固态发酵基质ꎬ开展下一步的发酵试验ꎮ２.２㊀未发酵样品及发酵菌质营养成分、功效成分和挥发性成分组成及含量分析２.２.１㊀发酵前后营养成分含量分析㊀如表５所示ꎬ与未发酵样品相比ꎬ发酵菌质氨基酸总量显著下降ꎬ蛋白质含量显著上升ꎬ说明赤芝菌丝体利用牛蒡根下脚料中的营养物质转化合成了菌体蛋白ꎮ发酵菌质中总糖㊁菊糖含量显著降低ꎬ还原糖含量显著升高ꎬ说明赤芝在发酵过程中能分解牛蒡根下脚料中的糖类ꎬ以满足自身生长繁殖需要ꎬ并且进行生物转化ꎮ９３１㊀第１２期㊀㊀㊀㊀㊀赵双枝ꎬ等:不同产地牛蒡根下脚料成分比较及赤芝固态发酵菌质成分变化分析㊀㊀表４㊀不同地区牛蒡根下脚料中挥发性成分种类及含量化合物类别安丘种类相对含量(％)徐州种类相对含量(％)兰陵种类相对含量(％)陇南种类相对含量(％)亳州种类相对含量(％)城阳种类相对含量(％)总挥发性成分１０８７８.４７７８３５.７５９１５６.９２８０１５.１９９１６２.３７６７１４.２３烯类９５.５７１０.１９８１.８９６０.２７５１.１４５０.２１胺类５２.５８２０.０６７２.５６７０.３１５１.４３６０.３６烷烃类７１.０３６１.３７７３.７６４０.５１８２.８８８１.４７醛类２３２６.３５１７９.００１７１６.４０２１６.７２２１１８.１４１５６.８５醚类２０.３２１０.１１２０.１３１０.０１４０.７０２０.０５醇类１１７.３１１９１２.６９９１.９５９１.２３９６.４０６０.７９酯类４４.５１４１.０２４３.５８１０.４７２０.８９１１.３１酮类１１３.０５８１.９８８２.７９５０.０８５２.９６６０.１９酚类１０.０３１０.１２００.００００.００１０.０９１０.０３有机酸类８１０.２８７７.５３８９.１２６０.５６７５.９２２０.１１含硫化合物２０.１０３０.１８１０.１０２０.１３２０.２９１０.０５氮杂环化合物１９１２.７６６１.４３１７１１.９５１５３.４４１５１１.３４１０２.１５氧杂环化合物４４.３４１０.０３２２.５７２１.４３４９.４０２０.５８芳香烃２０.２５２０.０７１０.１２１０.０４３０.８０２０.０９㊀㊀表５㊀牛蒡根下脚料发酵前后营养成分含量比较项目未发酵样品发酵菌质氨基酸总量(ｇ/ｋｇ)１０４.０ʃ０.３０ａ８８.６ʃ０.１０ｂ蛋白质含量(ｇ/ｋｇ)１１７.９ʃ０.３０ｂ１３６.４ʃ０.１０ａ总糖含量(ｇ/ｇ)０.７１ʃ０.０５ａ０.５５ʃ０.０２ｂ还原糖含量(ｇ/ｇ)０.０６ʃ０.００２ｂ０.１７ʃ０.００１ａ菊糖含量(ｇ/ｇ)０.６５ʃ０.０３ａ０.３８ʃ０.０２ｂ㊀㊀注:同行肩标不同字母表示差异显著(Ｐ<０.０５)ꎮ如图１所示ꎬ未发酵样品中不含鸟苷㊁肌苷㊁腺苷ꎬ经过发酵合成了上述核苷ꎮ未发酵样品胞苷㊁尿苷及核苷总量较低ꎬ发酵后显著性增加(Ｐ<０.０５)ꎬ核苷总量达到２６３７.１４μｇ/ｇꎮ同种核苷柱上不同字母表示发酵前后差异显著(Ｐ<０.０５)ꎮ图１㊀牛蒡根下脚料赤芝发酵前后核苷含量２.２.２㊀发酵前后功效成分含量分析㊀如图２所示ꎬ与未发酵样品相比ꎬ牛蒡根下脚料赤芝发酵菌质中总三萜酸含量显著提高(Ｐ<０.０５)ꎬ其中发酵第１３㊁１６天含量最高ꎬ说明牛蒡根下脚料赤芝发酵过程中能够产生三萜酸类化合物ꎮ发酵前样品中类黄酮含量为６.７２ｍｇ/ｇꎬ发酵后未检测出ꎮ柱上不同字母表示不同发酵时间差异显著(Ｐ<０.０５)ꎮ图２㊀牛蒡根下脚料发酵前后总三萜酸含量２.２.３㊀发酵前后挥发性成分组成及含量分析㊀由表６可以看出ꎬ发酵第１６天菌质中总挥发性成分种类由未发酵样品中的１０８种减少到７３种ꎬ但总挥发性成分的相对含量由７８.４７％增加到１６２.２１％ꎬ说明经过发酵可去除原料本身的某些挥发性成分ꎬ同时赋予其更浓郁的香味ꎬ尤其是醛类㊁酮类和氧杂环类化合物的相对含量大幅提高ꎮ３㊀讨论牛蒡根中含有类黄酮㊁三萜酸类㊁核苷等多种小分子功效成分[１９]ꎬ还具有醇㊁烯㊁醛㊁酮㊁酚㊁烷烃㊁有机酸㊁酯㊁氮杂环及氧杂环等挥发性成分[２０]ꎮ不同地区牛蒡根下脚料中蛋白质㊁氨基酸㊁０４１㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５４卷㊀㊀㊀表６㊀未发酵样品和发酵菌质中挥发性成分种类及其含量化合物类别未发酵样品种类相对含量(％)发酵菌质种类相对含量(％)总挥发性成分１０８７８.４７７３１６２.２１烯类９５.５７６６.４０胺类５２.５８５０.６２烷烃类７１.０３３１.８７醛类２３２６.３５１９９１.４２醚类２０.３２１０.１２醇类１１７.３１３１.４０酯类４４.５１３２.８４酮类１１３.０５１０２２.３８酚类１０.０３２１.４０有机酸类８１０.２８２１.４５含硫化合物２０.１０２０.９６氮杂环化合物１９１２.７６９１０.２８氧杂环化合物４４.３４６２０.２１芳香烃２０.２５２０.８６总糖㊁还原糖和核苷的含量差异较大ꎮ时新刚等[２１]报道ꎬ山东兰陵地区每１００ｇ鲜牛蒡根中含有２.１ｇ蛋白质ꎮ本试验结果显示ꎬ兰陵地区牛蒡根下脚料中蛋白质含量为１１０.５ｇ/ｋｇꎬ这可能是由于牛蒡品种㊁干鲜程度不同造成的ꎮ何虎翼等[２２]研究证实ꎬ不同品种牛蒡根的营养成分差异较大ꎮ牛蒡根中氨基酸含量较高ꎬ约占干重的２８％ꎬ其中精氨酸含量最高[２３]ꎮ胡喜兰等[２４]研究发现ꎬ新疆伊犁㊁石河子两个地区牛蒡根(干料)的氨基酸总量基本相同ꎬ分别为１１２.０㊁１２３.９ｇ/ｋｇꎬ与本试验中安丘地区样品相近ꎬ这表明牛蒡根下脚料含有较高的氨基酸ꎬ具有较高的再利用价值ꎮ徐孝梁等[２５]研究表明ꎬ牛蒡根中菊糖含量与年均温和土壤有机质含量无明显相关性ꎬ与年日照量存在正相关关系ꎬ与年降水量和年相对湿度存在负相关性ꎮ赤芝作为木腐真菌ꎬ菌丝体活力较高ꎬ分解能力较强ꎮ牛蒡根下脚料经过赤芝发酵后ꎬ氨基酸总量显著降低ꎬ可能是由于赤芝菌在生长过程中利用牛蒡根下脚料中的氨基酸成分ꎬ以满足自身生长ꎬ同时转化合成其它物质ꎬ从而造成了氨基酸总量的降低ꎮ高文庚等[２６]对灵芝发酵粉基质进行优化ꎬ使氨基酸质量分数增加了７％ꎬ与本试验结果有一定差异ꎬ可能是本试验发酵过程中没有外源营养物质添加的原因ꎮ有研究报道采用灵芝－牛蒡根发酵后ꎬ菌质蛋白质含量显著升高[２７]ꎻ采用灵芝－枇杷叶发酵后ꎬ菌质总蛋白平均增长率为４３.６０％[２８]ꎮ这与本试验结果一致ꎬ可能是因为发酵过程中赤芝菌丝体生长产生了新的菌体蛋白ꎮ在本试验中ꎬ发酵后总糖和菊糖显著降低ꎬ核苷总量显著升高ꎬ且合成了新的腺苷ꎬ与张命龙等[２７]的结论一致ꎮ发酵后还原糖含量升高ꎬ这可能是由于赤芝菌丝体分解总糖生成还原糖ꎮ表明牛蒡根下脚料经赤芝菌丝体发酵后营养成分发生了较大改变ꎬ体现了真菌发酵牛蒡根下脚料的双向效果ꎮ类黄酮化合物普遍存在于植物体内的生物合成途径中ꎬ而且可产生极其丰富的次生代谢物[２９]ꎬ因具有清除自由基㊁抑菌等多种功能而受到广泛关注ꎮ在本试验发酵菌质中未检测出类黄酮物质ꎬ而未发酵样品中类黄酮含量为６.７２ｍｇ/ｇꎬ说明发酵后类黄酮含量显著降低ꎬ这与前人的研究结果一致[２８]ꎬ表明类黄酮物质可能在牛蒡根下脚料－赤芝发酵过程中被赤芝菌丝体代谢利用转化为其它物质ꎬ今后需进一步探究其转化机制ꎮ三萜酸类化合物广泛存在ꎬ枇杷叶㊁茯苓㊁牛蒡根中都含有三萜酸成分ꎬ是赤芝的主要生理活性成分ꎬ具有明显的免疫调节㊁抗炎㊁抗病毒等功能[３０]ꎮ本试验中ꎬ未发酵基质中总三萜酸含量极低ꎬ仅为０.０９ｍｇ/ｇꎬ发酵第１６天菌质中总三萜酸含量最高ꎬ为０.２３ｍｇ/ｇꎬ这说明赤芝菌丝体可能通过生物转化机制ꎬ利用牛蒡根下脚料中的营养物质㊁活性物质等合成三萜类化合物ꎬ也与前人研究结果[３１]一致ꎮ本试验中ꎬ牛蒡根下脚料经过赤芝菌丝体发酵后挥发性物质种类减少ꎬ但总成分相对含量显著提升ꎮ４㊀结论本研究中山东安丘地区牛蒡根下脚料的氨基酸㊁蛋白质㊁总糖㊁菊糖㊁核苷㊁类黄酮含量及挥发性物质种类和相对含量高于其它产区ꎬ适合作为赤芝发酵的固态基质ꎮ牛蒡根下脚料经过赤芝固态发酵ꎬ明显提高了菌质的营养成分和功效成分含量ꎬ同时去除了难闻㊁刺鼻气味ꎬ更好地呈现了愉悦的香味ꎬ为牛蒡根下脚料的综合利用和功能性牛蒡灵芝茶饮品的开发提供了理论依据和技术支撑ꎮ１４１㊀第１２期㊀㊀㊀㊀㊀赵双枝ꎬ等:不同产地牛蒡根下脚料成分比较及赤芝固态发酵菌质成分变化分析参㊀考㊀文㊀献:[１]㊀刘萍.牛蒡的开发利用现状及展望[Ｊ].食品研究与开发ꎬ２０１３ꎬ３４(１５):１２８－１３０.[２]㊀顾雪芳.牛蒡对环境条件的要求及主要栽培技术[Ｊ].现代农业科技ꎬ２０１５(７):９３－１０１.[３]㊀伏卉ꎬ杜丽君ꎬ牛先前.牛蒡栽培及加工研究现状[Ｊ].福建热作科技ꎬ２０１４ꎬ３９(４):２７－３１.[４]㊀张晓伟ꎬ孙爱东ꎬ宫玮.牛蒡的营养价值及其开发现状[Ｊ].中国食物与营养ꎬ２００６(１):２５－２７.[５]㊀ＬｉｕＪꎬＣａｉＹＺꎬＷｏｎｇＲＮꎬｅｔａｌ.Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｃａｆ￣ｆｅｏｙｌｑｕｉｎｉｃａｃｉｄｓａｎｄｌｉｇｎａｎｓｉｎｒｏｏｔｓａｎｄｓｅｅｄｓａｍｏｎｇｖａｒｉｏｕｓｂｕｒｄｏｃｋ(Ａｒｃｔｉｕｍｌａｐｐａ)ｇｅｎｏｔｙｐｅｓｗｉｔｈｈｉｇｈａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖ￣ｉｔｙ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌａｎｄＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ２０１２ꎬ６０(１６):４０６７－４０７５.[６]㊀娄在祥.牛蒡功能性成分及其抗氧化㊁抗菌活性研究[Ｄ].无锡:江南大学ꎬ２０１０.[７]㊀ＣｈａｎＹＳꎬＣｈｅｎｇＬＮꎬＷｕＪＨꎬｅｔａｌ.Ａｒｅｖｉｅｗｏｆｔｈｅｐｈａｒｍａ￣ｃｏｌｏｇｉｃａｌｅｆｆｅｃｔｓｏｆＡｒｃｔｉｕｍｌａｐｐａ(ｂｕｒｄｏｃｋ)[Ｊ].Ｉｎｆｌａｍｍｏｐ￣ｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙꎬ２０１１ꎬ１９(５):２４５－２５４.[８]㊀ＭａｅｔａＡꎬＩｓｈｉｋａｗａＨꎬＴａｋａｈａｓｈｉＫ.ＡｎｔｉａｌｌｅｒｇｉｃａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＪａｐａｎｅｓｅｌｅａｆｂｕｒｄｏｃｋｅｘｔｒａｃｔｉｎａｒａｔｂａｓｏｐｈｉｌｉｃｌｅｕｋｅｍｉａｃｅｌｌｌｉｎｅ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ２０２１ꎬ４５(１２):ｅ１３９９６.[９]㊀ＲｏｍｕａｌｄｏＧꎬＳｉｌｖａＥꎬＤａＳꎬｅｔａｌ.Ｂｕｒｄｏｃｋｒｏｏｔａｔｔｅｎｕａｔｅｓｐｒｅｎｅｏｐｌａｓｔｉｃｌｅｓｉｏｎｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｉｎａｄｉｅｔａｎｄｔｈｉｏａｃｅｔａｍｉｄｅ￣ｉｎｄｕｃｅｄｍｏｄｅｌｏｆｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ￣ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｈｅｐａｔｏｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅ￣ｓｉｓ[Ｊ].ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＴｏｘｉｃｏｌｏｇｙꎬ２０２０ꎬ３５(４):５１８－５２７. [１０]张雨.１９种化合物抗大口黑鲈弹状病毒活性筛选[Ｄ].杨凌:西北农林科技大学ꎬ２０１９.[１１]ＤｉｎｇＭＲꎬＴａｎｇＺＹꎬＬｉｕＷꎬｅｔａｌ.Ｂｕｒｄｏｃｋｆｒｕｃｔｏｏｌｉｇｏｓａｃ￣ｃｈａｒｉｄｅａｔｔｅｎｕａｔｅｓｈｉｇｈｇｌｕｃｏｓｅ￣ｉｎｄｕｃｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｉｎｊｕｒｙｉｎｒｅｎａｌｔｕｂｕｌａｒｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＦｒｏｎｔｉｅｒｓｉｎＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙꎬ２０２１ꎬ１２:７８４１８７.[１２]ＭｏｒｏＴＭＡꎬＣｌｅｒｉｃｉＭＴＰＳ.Ｂｕｒｄｏｃｋ(ＡｒｃｔｉｕｍｌａｐｐａＬ.)ｒｏｏｔｓａｓａｓｏｕｒｃｅｏｆｉｎｕｌｉｎ￣ｔｙｐｅｆｒｕｃｔａｎｓａｎｄｏｔｈｅｒｂｉｏａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓ:ｃｕｒｒｅｎｔｋｎｏｗｌｅｄｇｅａｎｄｆｕｔｕｒｅｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓｆｏｒｆｏｏｄａｎｄｎｏｎ￣ｆｏｏｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ[Ｊ].ＦｏｏｄＲｅｓｅａｃｈＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌꎬ２０２１ꎬ１４１:１０９８８９.[１３]ＷｕＫＣꎬＷｅｎｇＨＫꎬＨｓｕＹＳꎬｅｔａｌ.ＡｑｕｅｏｕｓｅｘｔｒａｃｔｏｆＡｒｃｔｉ￣ｕｍｌａｐｐａＬ.ｒｏｏｔ(ｂｕｒｄｏｃｋ)ｅｎｈａｎｃｅｓｃｈｏｎｄｒｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｈｕｍａｎｂｏｎｅｍａｒｒｏｗ￣ｄｅｒｉｖｅｄｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＢＭＣＣｏｍ￣ｐｌｅｍｅｎｔａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅａｎｄＴｈｅｒａｐｉｅｓꎬ２０２０ꎬ２０(１):３６４. [１４]董亮ꎬ张玉凤ꎬ王学君ꎬ等.牛蒡提取物对菠菜生长及品质的影响[Ｊ].植物营养与肥料学报ꎬ２００９ꎬ１５(３):７２９－７３２. [１５]刘夕娟ꎬ曹泽虹ꎬ李超ꎬ等.牛蒡菊糖的提取工艺及其纯化的研究[Ｊ].农业机械ꎬ２０１２(６):１４０－１４４.[１６]刘超.紫芝和松杉灵芝化学成分研究及灵芝三萜酸的含量测定[Ｄ].北京:中国协和医科大学ꎬ２００９.[１７]王金艳ꎬ王晨光ꎬ张劲松ꎬ等.灵芝孢子粉中核苷类成分分析[Ｊ].菌物学报ꎬ２０１６ꎬ３５(１):７７－８５.[１８]屠玥之ꎬ姜启兴ꎬ于沛沛ꎬ等.发酵牛蒡茶的风味物质与营养成分研究[Ｊ].食品工业科技ꎬ２０１４ꎬ３５(１７):３３７－３４２. 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二萜类成分(3篇)
第1篇一、引言二萜类成分是一类广泛存在于自然界中的有机化合物，主要来源于植物、真菌和微生物。
它们具有多种生物活性，如抗炎、抗菌、抗癌、抗病毒、抗肿瘤等。
近年来，随着对二萜类成分研究的深入，其在医药、食品、化妆品等领域的应用越来越广泛。
本文将介绍二萜类成分的结构、生物活性及其应用。
二、二萜类成分的结构二萜类成分是由两个异戊二烯单位组成的化合物，其基本骨架由四个异戊二烯单位构成。
根据碳链的长度、双键的位置、官能团的不同，二萜类成分可分为多种类型，如二萜酸、二萜醇、二萜内酯等。
1. 二萜酸：二萜酸是一类含有羧基的二萜类化合物，如穿心莲内酯、丹参酮ⅡA 等。
它们具有多种生物活性，如抗炎、抗菌、抗癌等。
2. 二萜醇：二萜醇是一类含有羟基的二萜类化合物，如丹参醇、白藜芦醇等。
它们具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等生物活性。
3. 二萜内酯：二萜内酯是一类含有内酯环的二萜类化合物，如青蒿素、花椒素等。
它们具有抗菌、抗病毒、抗癌等生物活性。
三、二萜类成分的生物活性1. 抗炎活性：二萜类成分具有显著的抗炎活性，可通过抑制炎症因子的产生、调节免疫细胞功能等途径发挥作用。
例如，穿心莲内酯、丹参酮ⅡA等二萜酸具有抗炎作用。
2. 抗菌活性：二萜类成分具有广谱的抗菌活性，对多种细菌、真菌和病毒具有抑制作用。
例如，青蒿素对疟原虫具有高效杀灭作用。
3. 抗肿瘤活性：二萜类成分具有抗肿瘤活性，可通过抑制肿瘤细胞的增殖、诱导肿瘤细胞凋亡等途径发挥作用。
例如，丹参酮ⅡA、白藜芦醇等二萜醇具有抗肿瘤作用。
4. 抗病毒活性：二萜类成分具有抗病毒活性，可通过抑制病毒的复制、干扰病毒与宿主细胞的结合等途径发挥作用。
例如，花椒素对流感病毒具有抑制作用。
5. 抗氧化活性：二萜类成分具有抗氧化活性，可清除体内的自由基，保护细胞免受氧化损伤。
例如，白藜芦醇、丹参酮ⅡA等二萜醇具有抗氧化作用。
四、二萜类成分的应用1. 医药领域：二萜类成分在医药领域具有广泛的应用，如抗炎、抗菌、抗癌、抗病毒等。
灵芝三萜类成分提取分离和质量控制研究进展
析 、 述。 评 结果 灵芝 中三萜类成分 的研 究主要集 中在化学成分和药理 作用上 ， 缺乏高效的提取方法和科 学的质量控 制方法研 究。 结论 对
灵 芝 三 萜 类成 分提 取 纯化 和 质 量控 制 研 究 是 今后 灵芝 研 究 工作 的 重点 。 关 键 词 ： 芝 ； 萜 ； 取 分 离 ； 量控 制 灵 三 提 质 中 图分 类 号 ： Ｑ ６ ； ２ ４ Ｔ ４ １Ｒ ８ 文 献标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０ ６— ９ １２ ０ ）４— ０ ０— ２ １０ ４ ３ （０ ８２ ０ ６ ０
而 ， 林 等 、 马 张宪 民等 …均认 为仅 用 超 声 处理 样 品。 萜 类 物 质 的 三
提取 率 低 于 回 流 提取 。
Ｚ ａｇ ｈｎ 的干 燥 子 实体 ， 有安 神 平 喘 、 强 壮 、 年益 寿 的 功效 ， 具 滋补 延 历
１ ３ 超 临 界 Ｃ 萃 取 法 ． Ｏｚ
临界 Ｃ ｚ Ｏ 萃取法提取灵芝子 实体 中三萜类化合物。 ｕｙ等 ’ Ｒｅ 分别 考察 了改性剂 、 温度以及压力对萃取率的影响 ， 与传Байду номын сангаас的溶剂法 并
进 行 比较 ， 果 超 临界 Ｃ ｚ 结 Ｏ 萃取 温 度 较 低 且 得 率 较 高 ， 入 改性 剂 加
萜类成分提取纯化以及质量控制的研究对今后全面研究灵芝三萜类
９ ％乙醇和氯仿 ３种溶剂 的提取效率， ５ 结果以氯仿 回流提取 １ ｈ的
提 取 率最 高， 样 品 中杂 质 干扰 较 少 。 宪 民等 Ｉ以 提取 率 和灵 芝 且 张 １ 醇 Ａ含 量 为 指 标 ， 提取 溶 剂 、 取 方 法 、 取 时 间 和 提 取 次 数 为 以 提 提 因 素 ， 用 Ｌ（ 正 交 试 验 设 计 优 选 提 取 工 艺 ， 果 以氯 仿 或 丙 酮 采 ９３） 结
食用菌活性成分研究现状
食用菌活性成分研究现状（2007.11.28)食用菌是可供人类食用的大型真菌，包括香菇、黑木耳、草菇、银耳、金针菇、茯苓、竹荪等，它含有蛋白质、糖类、脂类、维生素、矿物元素、核苷酸等多种营养成分，具有高蛋白、低糖、低脂肪等特点。
食用菌蛋白质中氨基酸种类比较齐全，含17～18种氨基酸，其中包括人体必需的8种氨基酸，18种氨基酸的总量为10.71%～24.81%，8种人体必需氨基酸在总氨基酸中的比例为30%～50%。
食用菌中的维生素类有V Bl、V B2、烟酸、V c、V d、V E等。
此外，食用菌还含有少量麦角甾醇等，而麦角甾醇对儿童生长及增强机体抵抗力很重要，具有较高的营养价值。
食用菌中糖类、脂类的含量较低，100g食用菌中仅含碳水化合物3.8g，脂肪少于2.0g，且脂肪酸为不饱和脂肪酸，能降低血脂，多食也不会引起发胖或诱发心血管疾病，是健美减肥者的首选食品。
我国是食用菌良好的繁衍和滋生地，蕴藏着极其丰富的食用菌物种资源，因此对食用菌的生物活性成分进行综合利用及开发具有极大的意义。
本文概述了食用菌中蛋白及多肽、多糖、三萜类等活性成分的研究进展，并对食用菌中活性成分的开发利用作出了展望。
1蛋白及肽类食用菌的蛋白质含量一般占子实体湿重的1.75％～3.63％，最高为5.9％，按干重计算，食用菌通常含有19％～35％的蛋白质。
食用菌的氨基酸种类齐全，含有8种必需氨基酸，且必需氨基酸的含量高达菌体氨基酸总量的25％～45％。
研究者们还在一些食用菌中发现了活性蛋白和活性肽，前者具有免疫调节作用，而后者则有抗氧化功能。
Kino等和Lin等采用了相似的提取方法从灵芝菌丝体和金针菇、草菇子实体中提取粗蛋白，进一步采用离子交换层析和凝胶过滤等方法分离纯化出有生理活性的真菌免疫调节蛋白，氨基酸测序表明这4种真菌免疫调节蛋白由1 10~1 14个氨基酸组成。
叶波平等同利用凝胶层析法对灵芝子实体和破壁孢子粉的蛋白初提液进行了分离，通过体外免疫反应初步检测了各蛋白质成分的免疫调节活性，其中相对分子质量分别为67000，43000和45700的3种灵芝蛋白具有较强的促进淋巴细胞增殖的活性。
关于灵芝-----一种有药用价值的真菌
灵芝是担子菌类，几个世纪以来一直用于医学治疗，尤其在中 国，日本和韩国。灵芝最常用的名字包括Lingzhi, Munnertake, Sachitake, Reishi 和Youngzhi. 本文通过例举最常见的种和最 典型的化合物对已发表的文献进行回顾。灵芝的生物活性方面 的报道比较多，结构方面的信息相对而言少一些。其提取物主 要包括多糖和萜类，许多物质对当代主要的病都有作用，它们 的作用范围很广，从抗癌到消除胆囊肿。然而，这些报道没有 系统地利用纯的化合物进行令人信服的论证。下一步任务就是 生产一些有用的药物，但批量生产可能是个瓶颈。
曾经发生过仅用一个标本来进行种的鉴定（Di et al., 2003）的情况，但这对那些没获得标本的变种 是无法进行鉴定的。
例如，一种已经被广泛应用的灵芝，就是 从上文提到的一些组织获得的（Ziegenbein et al., 2006)。这些私人企业在多大程度上 应用了科学鉴定？菌种保藏也存在相同的 问题：不管是公共机构还是私人企业，都 没有注册，保存和鉴定的程序：中国保藏 的菌种极有可能与美国的不适用同一标准。
另一种定量分析孢子中灵芝酸和灵芝醇的方法也已经有报道， 从来自不同国家五种灵芝子实体分离得到六种灵芝醇。用相 同的柱子（2％乙醇：乙腈=7:3作流动相）进行分离，除了 灵芝酸C1和H外，还得到了另外七种灵芝酸。结果表明：孢 子中总三萜含量是子实体中的5-20倍(Huie and Di, 2004)。 然而，有其它研究表明三萜在孢子中含量最低。
灵芝菌株的数据库已经建立(Nishitoba et al., 1986), Hirotani et al. (1993a)做了“相关种”相似的工作.
傅里叶变换红外吸收光谱及HPLC应用于灵芝和松杉灵芝商 业化产品的分类鉴定，把它们分为三类。其它科学工作者从 松杉灵芝的子实体中分离出九种三萜，它们都是首次用 HPLC进行分析。一种检测灵芝不同部位灵芝酸B的方法检 测到菌盖含量最高，其次是菌柄，孢子中含量最少。
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·1450·药学学报ActaPharmaceuticaSinica2013,48(9):1450−1452赤芝中一个新萜类化合物刘超,李保明,康洁,王洪庆,陈若芸*(中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所,天然药物活性物质与功能国家重点实验室,北京100050)摘要:从赤芝子实体的乙醇提取物中分得一个新的萜类化合物。通过一维和二维核磁共振谱分析确定结构为7β,15α-dihydroxy-4,4,14α-trimethyl-3,11,20-trioxo-5α-pregn-8-en,命名为赤芝酮D(lucidoneD)。关键词:萜类;赤芝;赤芝酮D中图分类号:R284文献标识码:A文章编号:0513-4870(2013)09-1450-03
AnewterpenoidfromGanodermalucidumLIUChao,LIBao-ming,KANGJie,WANGHong-qing,CHENRuo-yun*(StateKeyLaboratoryofBioactiveSubstanceandFunctionofNaturalMedicines,InstituteofMateriaMedica,ChineseAcademyofMedicalSciencesandPekingUnionMedicalCollege,Beijing100050,China)
Abstract:Anewterpenoid,lucidoneD(1),hasbeenisolatedfromGanodermalucidum.Itsstructurewasdeterminedtobe7β,15α-dihydroxy-4,4,14α-trimethyl-3,11,20-trioxo-5α-pregn-8-enonthebasisof1Dand2D-NMRspectralanalysis.Keywords:terpenoid;Ganodermalucidum;lucidoneD
赤芝[Ganodermalucidum(Leyss.exFr.)Karst]属于层菌纲非褶菌目灵芝科灵芝属的真菌[1],具有补气安神、止咳平喘的功效,在我国具有悠久的药用历史,我国药典将其与紫芝(G.sinense)的干燥子实体定为灵芝的药用正品[2]。文献报道,赤芝中富含三萜类化合物,据统计现分得的三萜类化合物已达百余种,作者曾经从赤芝孢子粉中得到3个新三萜化合物(ganosporelactoneA、B和ganosporericA)[3−5]。本文报道从赤芝子实体的乙醇提取物中分离纯化的一个新萜类化合物。化合物1白色针晶,mp285～286℃,[α]20D+253.51(CHCl3,c0.185)。Liebermann-Burchard反应阳性。UV在254nm处有最大吸收。IR显示存在羟基(3364cm−1)、乙酰基(1699cm−1)和α,β-不饱和收稿日期:2013-05-10;修回日期:2013-06-06.基金项目:“十二五”重大专项-中药新药发现与评价技术平台(2012ZX09301002-002).*通讯作者Tel/Fax:86-10-83161622,E-mail:rych@imm.ac.cn羰基(1659cm−1)。HR-EI-MS给出分子离子峰[M]+
m/z:402.2432(C24H34O5,计算值为402.2406),不饱和度为8。1HNMR谱(CDCl3,400MHz,表1)显示了均
为单峰的6个甲基氢信号δ2.12,1.35,1.28,1.13,1.10,0.85和2个连氧碳上的偕氢信号δ4.84(1H,dd,J=9.2,7.2Hz),4.63(1H,m)。13CNMR(CDCl3,100MHz,
表1)共给出24个碳信号,包括1个α,β-不饱和羰基(δ198.2,158.4,140.3)、1个乙酰基(δ207.2,31.3)、5个甲基碳信号(δ27.3,20.7,19.8,19.3,18.9)、1个酮羰基(δ216.8)以及2个连氧碳信号(δ72.5,68.9)。结合DEPT谱发现,上述数据特征与已知萜类化合物赤芝酮A(3β,7β-dihydroxy-4,4,14α-trimethyl-11,15,20-trioxo-5α-pregn-8-en)接近[6,7],且与赤芝酮A为同分异构体,提示化合物1也为
萜类化合物。不同的是,赤芝酮A的C-3、C-7位有羟基取代,C-15位为酮羰基取代,而化合物1的C-7、C-15位有羟基取代,C-3位则为酮羰基取代。这点从刘超等:赤芝中一个新萜类化合物·1451·
HMBC的远程相关中得到了确认。Table1NMRdataoflucidoneDinCDCl3(400MHzfor1H,100MHzfor13C)No.δCδHJ/HzHMBC135.4(t)2.89−2.81(m)H-1β/C-2,3,5,10,181.52−1.48(m)H-1α/C-2,3,4,10,18234.2(t)2.52−2.48(m)H-2/C-1,3,103216.8(s)446.6(s)548.7(d)1.70−1.65(m)H-5α/C-4,6,10,23629.1(t)2.10−2.05(m)H-6β/C-4,5,7,101.65−1.61(m)H-6α/C-5,7,8,22768.9(d)4.63(m)H-7α/C-6,8,98158.4(s)9140.3(s)1038.1(s)11198.2(s)1250.7(t)2.98(d)15.2H-12α/C-11,13,14,17,192.59(d)15.2H-12β/C-11,13,191346.7(s)1454.0(s)1572.5(d)4.84(dd)9.2,7.2H-15β/C-241630.0(t)2.89−2.81(m)H-16α/C-14,15,17,201.65−1.61(m)H-16β/C-15,171756.3(d)3.11(dd)10.4,6.8H-17α/C-12,13,16,19,201818.9(q)0.85(s)H-18/C-12,13,14,171919.3(q)1.28(s)H-19/C-1,5,9,1020207.2(s)2131.3(q)2.12(s)H-21/C-17,202227.3(q)1.13(s)H-22/C-3,4,5,232320.7(q)1.10(s)H-23/C-4,5,222419.8(q)1.35(s)H-24/C-8,13,14,15在HMBC中,H-7(δ4.63)和C-6、C-8、C-9(δ29.1,158.4,140.3)的相关,H-15(δ4.84)与Me-24(δ19.8)证明了C-7和C-15位上的羟基取代。另外,12位上的两个氢(δ2.98和2.59)与C-11(δ198.2);H-7(δ4.63)与C-8、C-9(δ158.4,140.3);24位的甲基(δ19.8)与C-8的相关揭示了α,β-不饱和羰基的存在。C-7位羟基的β构型及C-15位的α构型是通过NOE(1D)实验确定:当照射δ4.63(H-7)时,δ1.35(Me-24)有增益;当照射δ4.84(H-15)时,δ0.85(Me-18)有增益。至此,确定化合物1的结构如图1所示,结合DEPT、HSQC和HMBC谱对各碳氢信号进行了归属,鉴定为7β,15α-dihydroxy-4,4,14α-trimethyl-3,11,20-trioxo-5α-pregn-8-en,为一新化合物,命名为赤芝酮D(lucidoneD)。化合物1与灵芝酸A(7β,15α-dihydroxy-3,11,23-trioxo-5α-lanost-8-en-26-oicacid)具有相同母核[8],提示化合物1在生源上可能是由灵芝酸A侧链断裂衍变而来。
Figure1StructureoflucidoneD(1)实验部分XT4-100显微熔点测定仪(未校正);LabtechUV2000型可见−紫外分光光度计;IMPACT-400傅立叶变换红外光谱仪;AutospecUltimaETOF质谱仪;美国Varian公司Mercury-400型核磁共振仪(TMS内标)。硅胶(青岛海洋化工厂),SephadexLH-20(Pharmacia公司),所用试剂均为AR级。赤芝子实体为人工栽培品种,产于福建,经广东省微生物分析检测中心严舒宁工程师鉴定为赤芝[Ganodermalucidum(Leyss.exFr.)Karst]。标本保存于中国医学科学院药物研究所标本室(标本号:ID-S-2448)。1提取与分离10kg赤芝子实体粉碎后,用95%乙醇加热回流提取3次,合并提取液,减压回收溶剂,得乙醇浸膏420g。将其混悬于水后,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取。取乙酸乙酯部分共25g,经硅胶柱色谱分离,石油醚−丙酮系统梯度洗脱,得到5∶1、
4∶1、3∶1、2∶1、1∶1共5个部分,其中石油醚−丙酮4∶1部分(3.1g)再经反复硅胶(氯仿−丙酮系统及氯仿−甲醇系统)和凝胶(甲醇及氯仿−甲醇系统)柱色谱,最终得到化合物1(14mg)。2结构鉴定化合物1:白色针晶(MeOH),mp285～286℃,
[α]20D+253.51(CHCl3,c0.185)。UVλmax:254nm(logε
3.8,MeOH)。IRνmaxcm−1:3364,2983,2952,1699,1659,1562,1425,1386,1366,1278,1245,1212,1178,1127,1090,1057,998。1H和13CNMR数据见
表1。HR-EI-MSm/z:402.2432[M]+(C24H34O5,计算
值为402.2406)。
References[1]LinZB.ModernResearchofGanoderma(灵芝的现代研究)