实验五、微生物的选育及其鉴定10.11
微生物的分离和鉴定技术研究
微生物的分离和鉴定技术研究微生物是存在于我们周围的微小生物，在自然界中扮演着非常重要的角色。
然而，许多微生物的可见性非常低，需要使用特殊的方法来鉴定和分离它们。
本文将介绍微生物的分离和鉴定技术，以及其在科学研究和医学应用中的重要性。
一、微生物的分离技术微生物的分离是用于分离出特定种类的微生物，使其能够单独生长和繁殖。
最常用的方法是培养。
在这个过程中，我们将可疑培养基接种到一个富含养分的培养基中，并以一定的条件使其生长。
通过观察生长在培养基上的生物体，我们可以确定具体种类的微生物。
分离微生物的过程并不简单。
常见的方法包括传统的分离技术和分子生物学方法。
传统的分离方法包括像悬浮液的过滤，血平板分散和细胞分裂等方法，可以分离出特定种类的微生物。
之后，从培养基中可分离出一定量的纯净菌落。
然而，传统方法存在一定的局限性。
这些方法需要专业设备和设施，还需要经过多次的试验来找出适合的条件和方法。
分子生物学方法是近年来快速发展的新技术之一，使微生物分离更加容易。
通过分子生物学方法，可以快速鉴定病原体，确定不同菌株间的遗传差异。
比如，PCR技术，利用特殊的酶扩增DNA样本，以便检测出微量的感染病毒，可以在短时间内完成微生物分离和鉴定，更加准确、快速。
二、微生物的鉴定技术完成微生物的分离后，科学家需要对其进行鉴定，查明特定种类的微生物信息。
这个过程涉及到对微生物的形态、结构、化学反应、遗传学和生理学特征等方面进行分析和研究，以便准确地鉴定微生物的种类。
在鉴定方面，科学家使用了各种技术和工具。
传统方法包括形态学、生理学、生化学和免疫学鉴定等。
这些方法利用了不同的技术和试剂来确定微生物的特殊特征。
比如，通过形态学，对细胞大小、形状、结构、表面特征进行分析，并根据细胞的生长方式和生态特征，描述微生物的形态特征。
现代生物技术的发展，使得微生物的鉴定变得更加容易和准确。
其中最常用的方法是分子生物学。
分子生物学利用DNA和RNA序列之间的异构标记，通过PCR扩增和测序的技术，分析和比较微生物的DNA结构和DNA序列，鉴定微生物的种类。
实验十一 土壤微生物的分离纯化以及鉴定
四 操作步骤
4.稀释倒平板：取10-2、10-3两管稀释液各 1ml，分别接入相应标号的平皿中，每个稀 释度接两个平皿，然后，每个平皿分别倒 入约15ml已融化并冷至50℃左右的蔡氏培
养基，轻轻摇匀，凝固后即成霉菌平板。
5.培养： 28～30℃，倒置培养3-4天。
四 操作步骤
种土法分离圆褐固氮菌： 用灭菌镊子取火柴头大小（绿豆般大小） 的土粒，接种于无氮培养基平板表面， 28～30℃，倒置培养3-4天。 荚膜的染色： 挑取圆褐固氮菌的可疑菌落进行菌涂片， 进行荚膜染色。 单染法：菌体紫色、荚膜浅色或无色。
四 操作骤
荚 膜
四 操作步骤
染色后的荚膜
五 结果与讨论
1.绘图 绘出圆褐固氮菌的形态图。 2.思考题 （1）稀释倒平板法分离微生物时应注意什么 问题？吸取菌悬液时为什么要从低浓度到 高浓度？ （2）平板培养时，为什么要倒置培养？
存在的菌体、芽孢或孢子，以便在固体平
板上经过培养，长成肉眼可见的并具有一
定特征的菌落，经鉴定或进一步纯化，即
可转入相应的培养基或纯培养。
二 基本原理
三 器材与试剂
培养基： 仪器和其他用具：
无N培养基
微量移液器 染料等
四 操作步骤
稀释倒平板法分离圆褐固氮菌： 1.采土壤：取表层以下5-10cm处的菜园土。 2.制备土壤悬液：称土样5g→45ml无菌水 （带玻璃珠）→振荡5-10分种，即成10-1的 土壤悬液。 3.10倍稀释：10-1的土壤悬液取1ml→放到9ml 无菌水稀释管中，即成10-2的稀释液，10-2 取1ml→放到9ml无菌水稀释管中，即成10-3 的稀释液。
实验十一
土壤微生物的分离纯化以 及鉴定
一 目的要求
微生物的菌种选育
理想的工业发酵菌种应符合以下要求：⑴遗传性状稳定⑵生长速度快，不易被噬菌体等污染⑶目标产物的产量尽可能接近理论转化率⑷目标产物最好能分泌到胞外，以降低产物抑制并利于产物分离⑸尽可能减少产物类似物的产量，以提高目标产物的产量并且有利于产物分离⑹培养基成分简单、来源广、价格低廉⑺对温度、pH、离子强度、剪切力等环境因素不敏感⑻对溶氧的要求低，便于培养以及降低能耗一、从自然界获得新菌种的步骤分离微生物新种的具体步骤大体可分为采样、增殖、纯化、性能测定。
采样菜园和耕作层土壤是有机质较多的土层，常以细菌和放线菌为主；果园数根土层中，酵母菌含量较高；动植物残体及霉腐土层中，分布着较多的霉菌。
豆科植物根系土中，往往存在根瘤菌；河流湖泊的淤泥中能分离到产甲烷菌；油田和炼油厂周围土层中常见分解石油的微生物等。
各种水体也是工业微生物菌种的重要来源，许多具有光合作用能力的微生物以及兼性或专性厌氧微生物都能从各种水体中筛选得到。
增殖才采集的样品中，一般待分离的菌种在数量上并不占优势，为提高分离的效率，常以投其所好和取其所抗的原则在培养基中添加特殊的养分或抗菌物质，使所需菌种的数量相对增加，这种方法称为增殖培养或富集培养。
纯化常用的菌种纯化方法很多，大体可将它们分为两个层次，一个层次较粗放，一般只能达到“菌落纯”的水平，从“种”的水平来说是纯的，其方法有划线分离法，涂布分离法和稀释分离法。
另一层次是较为精细的单细胞或单孢子分离法，它可达到细胞纯即“菌株纯”的水平。
具体操作方法很多，最简便的方法是利用培养皿或凹玻片等分离小室进行细胞分离。
也可以利用复杂的显微镜操作装置进行单细胞挑取。
性能测定菌种性能测定包括菌株的毒性试验和生产性能测定。
二、基因突变和微生物菌种选育基因是在生物体内具有自主复制能力的遗传功能单位，是一个具有特定核苷酸顺序的核酸片段，每个基因约有1000个碱基对。
基因是合成有功能的蛋白质多肽链或RNA所必需的全部核酸序列（通常是指DNA序列）。
实验五环境中微生物的检测和分离纯化
实验五环境中微生物的检测和分离纯化一、实验目的1．熟悉常用微生物培养基的配制方法。
2．学习并掌握各种无菌操作技术，并用此技术进行微生物稀释分离、划线分离接种。
3．用平板划线法和稀释法分离微生物。
4．认识微生物存在的普遍性，体会无菌操作的重要性。
二、实验原理(一)微生物的分离与纯化土壤是微生物生活的大本营，在这里生活的微生物无论是数量还是种类都是极其丰富的。
因此，土壤是微生物多样性的重要插所，也是发掘微生物资源的重要基地，可以从土壤中分离、纯化得到许多有价值的菌株。
从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。
常用的是平板分离法。
为了获得某种微生物的纯培养，一般是根据该微生物对雪养、酸碱度、浓度和氧等条件要求不同，而供给它适宜的培养条件，或加入某些抑制剂抑制其他菌生长而利于此菌生长的环境，从而淘汰其他一些不需要的微生物．再用稀释涂布平板法或稀释后平板划线分离，纯化该微生物，直至得到纯菌株。
(二)平板菌落计数法平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释，使其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞．统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品含菌数。
平板菌落计数法虽然操作繁琐，结果需要培养一段时间才能取得，而且测定结果易受多种因素的影响，但是，由于该计数方法的最大优点是可以获得活菌的信息，所以被广泛用于生物制品检验(如活菌制剂)，以及食品、饮料和水(包括水源水)等的含菌指数或污染程度的检测。
三、实验材料土样10g，未知菌变形杆菌单菌落平板和无菌水．取液器(5m1、l000ml各一支)，培养箱，培养皿(20个)，无菌有帽试管，三角瓶，无菌涂棒，接种环，5ml、1ml 无菌吸头（移液管），记号笔，酒精灯，火柴，试管架，牙签，。
四，实验步骤(一)培养基的制备(提前准备)按以下步骤制备牛肉膏蛋白胨平板培养基，每组20个平板。
[详细讲解]细菌营养缺陷型菌株的诱变和筛选鉴定实验报告
![[详细讲解]细菌营养缺陷型菌株的诱变和筛选鉴定实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/96df62ccb04e852458fb770bf78a6529647d3574.png)
工业微生物育种实验细菌营养缺陷型菌株的诱变和筛选鉴定关于菌株的几个概念：野生型菌株：从自然界分离到的微生物在其发生突变前的原始状态。
营养缺陷型：野生型菌株经过人工诱变或自然突变失去合成某种营养的能力，只有在基本培养基中补充所缺乏的营养因子才能生长。
原养型：营养缺陷型菌株经回复突变或重组后产生的菌株，其营养要求在表型上和野生型相同关于培养基：基本培养基（minimal medium，MM）：仅能满足微生物野生型菌株生长需要的培养基，用[－]来表示。
完全培养基（complete medium，CM）：凡可满足一切营养缺陷型菌株营养需要的天然或半组合培养基。
用[＋]来表示。
补充培养基（supplemental medium，SM）：凡只能满足相应的营养缺陷型生长需要的组全培养基，它是在基本培养基中加入该菌株不能合成的营养因子而组成。
摘要：本实验选用紫外线为诱变剂，来诱发大肠杆菌突变，并用青霉素法淘汰野生型，逐个测定法检出缺陷型，获得100#大肠杆菌菌株，最后经生长谱法鉴定出该菌株为脯氨酸缺陷型。
关键词：大肠杆菌紫外线营养缺陷型青霉素逐个测定法生长谱法一、实验目的1、了解营养缺陷型突变株选育的原理。
2、学习并掌握细菌氨基酸营养缺陷型的诱变、筛选与鉴定方法。
二、实验原理筛选营养缺陷型菌株一般具有四个环节：诱变处理、营养缺陷性的浓缩、检出、鉴定缺陷型。
本实验选用紫外线为诱变剂，来诱发突变，并用青霉素法淘汰野生型，逐个测定法检出缺陷型，最后经生长谱法鉴定细菌的营养缺陷型。
三、实验器材离心机，紫外线照射箱，冰箱，恒温箱，高压灭菌锅；三角烧瓶，试管，离心管，移液管，培养皿，接种针四、实验材料(一)菌种E.coli(二)培养基、1LB培养液：酵母膏，0.5g；蛋白胨，1g；NaCl，0.5g；水，100ml，pH7.2 121℃灭菌15min22×LB培养液：其它不变，水，50ml。
3基本培养基：葡萄糖0.5 g，(NH4)2SO4 0.1 g，柠檬酸钠0.1 g，MgSO4·7H2O0.02 g，K2HPO4 0.4 g，KH2PO4 0.6 g，重蒸水100 mL，pH 7.2，110℃灭菌20 min。
发酵食品中微生物菌株的筛选及鉴定研究
发酵食品中微生物菌株的筛选及鉴定研究近年来，发酵食品作为一种受欢迎的食品，受到了广泛的关注。
发酵食品具有丰富的营养成分和独特的口感，其特殊的发酵过程使其更加容易消化吸收。
而微生物是发酵食品中不可或缺的关键因素，通过筛选和鉴定微生物菌株，可以有效地提高发酵食品的品质和保健功效。
发酵食品中的微生物菌株筛选是一个复杂而细致的过程。
首先，需要选择合适的培养基和培养条件来造就适宜的环境。
不同微生物对培养基的要求不同，通过调整培养基中的成分和条件，可以选择出具有优良发酵特性的菌株。
其次，需要使用特定的筛选方法，如筛选培养基、筛选指标和筛选条件等，对大量的微生物进行初步的筛选。
通过筛选，我们可以找到具有特殊产物合成能力或特定功能菌株。
最后，通过进一步的鉴定和评价，确定菌株的发酵特性和应用潜力。
对于微生物菌株的鉴定，常用的方法包括形态学、生理学和分子生物学等多种手段。
其中，形态学观察是最基本的鉴定方法之一。
不同微生物在形态上表现出明显的差异，通过观察其形态特征，可以初步判断其所属菌属。
生理学特性则包括生长速度、耐受温度、耐受pH等指标，通过比较和对照，可以进一步鉴定菌株的分类。
近年来，分子生物学的技术迅速发展，为微生物的鉴定提供了更加精确和快速的方法。
通过PCR扩增和测序技术，可以对微生物的16s rRNA基因进行序列分析，从而确定菌株的亲缘关系和系统发育地位。
值得注意的是，微生物菌株的筛选和鉴定不仅仅是一种科学研究，它还具有重要的应用价值。
不同微生物菌株在发酵过程中所产生的代谢产物具有不同的特性和功效。
利用微生物菌株的多样性，可以开发出不同种类的发酵食品，包括乳酸菌饮料、酱油、豆豉、醋等。
而且，微生物菌株还可以用于制备益生菌和功能性食品，具有调节肠道菌群、提高免疫力、降低胆固醇等功效。
因此，微生物菌株的筛选和鉴定研究对发酵食品的开发和创新具有重要的意义。
总之，发酵食品中微生物菌株的筛选和鉴定是一个复杂而系统的研究工作。
微生物的生长与控制—微生物的菌种选育(食品微生物学课件)
微生物的诱变育种
微生物的诱变育种
目录/Contents
0
诱变育种的概念
10
诱变育种的环节
20
诱变育种的步骤
30
诱变育种的注意事项
4
01 诱变育种的概念
诱变育种就是利用物理的或化学诱变剂处理均匀分散的微生物群体， 促进其突变频率大幅度提高，从中挑选少数符合育种目的的突变菌 株，以供生产实践或科学实验之用。
02 菌种选育的步骤
（1）采样 由于土壤是微生物生活的大本营，其中包括各种各样的微生物，因 此，如果我们不知道生产某种产品的微生物属类及某些特征时，一般 都可以土壤为样品进行分离。一般离表层5～15cm深处的微生物数量 最多。 如果我们知道所需菌种的明显特征，则可直接采样。例如分离啤酒酵 母可直接从酒厂的酒糟中采样；分离抗噬菌体的新菌株可以从污染噬 菌体的发酵液中采样；分离能利用糖质原料、耐高渗的酵母菌可以采 集加工蜜饯、糖果、蜂蜜的环境土壤等。
04 诱变育种的注意事项
（4）诱变剂选择与诱变剂剂量确定
②剂量的选择
最适剂量：在提高突变率的基础上，既能扩大变异幅度，又能使变异 向正突变范围移动的剂量。 突变率随剂量的增加而提高，但到达一定程度后，再提高剂量, 反而 会使突变率下降。正变较多出现在偏低剂量中，而负变较多出现在偏 高剂量中。
在产量变异工作中，常采用相对杀菌率为70~75%, 甚至30~70%的 剂量。
04 诱变育种的注意事项
（5）分离和筛选
②根据平板颜色反应直接挑选
透明圈法（蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶）； 抑菌圈法（抗生素）； 变色圈法（柠檬酸）、显色圈（氨基酸）； 沉淀圈法（外毒素）
透明圈直径（H）/菌落直径（C）：产量高低
微生物菌种的选育方法(两篇)
引言：微生物菌种的选育是一项重要的研究领域，其在农业、医药、环境保护等多个领域具有广泛的应用价值。
本文结合相关研究成果，探讨了微生物菌种选育的方法，旨在为相关领域的科研工作者提供参考。
概述：微生物菌种的选育是指通过对微生物的筛选和培养，选择出具有特殊功能或者优良特性的微生物菌株。
其方法包括了菌种筛选、培养条件优化等多个环节。
本文将以此为主线，结合实际案例，详细阐述微生物菌种选育的方法。
正文内容：1. 菌种筛选1.1 传统筛选方法传统筛选方法包括菌落形态观察、生理生化指标检测、抗性测定等。
通过对菌落形态和生理生化特性的观察，可以初步确定菌株的特性。
同时，通过对菌株的抗性测定，可以筛选出具有耐药或者耐环境逆境特性的菌株。
1.2 分子生物学方法分子生物学方法可以应用PCR等技术，快速检测目标菌株的特定基因或者特性。
这些特定基因可能与目标菌株的优良性状相关，通过筛选出含有这些特定基因的菌株，可以更加精确地进行微生物菌种的选育。
2. 菌种培养条件优化2.1 培养基配方优化培养基是微生物菌种培养的基础，其配方的优化对于菌种的生长和代谢具有重要影响。
通过调整培养基中的碳源、氮源、矿质元素等成分，可以优化菌株的生长条件。
2.2 培养条件控制培养条件的控制对于微生物菌株的生长和产生特定代谢产物等方面具有重要影响。
温度、pH值、培养时间等因素的调控，可以使菌株在适宜的环境中进行生长和代谢，从而保证其优良特性的表达。
3. 菌株遗传改良3.1 重组DNA技术重组DNA技术可以通过将目标基因导入到菌株中，使其具有特定的功能特性。
通过引入外源基因，可以使菌株产生特定的代谢产物，或者具有特定的酶活性等特性。
3.2 融合技术融合技术是指将两个或者多个菌株进行融合，从而形成新的菌株。
融合后的菌株可能具有不同菌株的优点，如抗性能力、代谢能力等，从而提高菌株的综合性能。
4. 菌株功能验证4.1 体外实验通过在实验室中建立靶点验证体系，对选育出的菌株进行功能验证。
植物病原菌拮抗微生物的筛选、鉴定及拮抗机理研究
植物病原菌拮抗微生物的筛选、鉴定及拮抗机理研究一、本文概述植物病原菌是威胁全球农业可持续发展的重要因素之一，它们引发的植物病害会导致作物减产、品质下降，甚至造成整个生态系统的破坏。
因此，寻找并利用拮抗微生物来防治植物病害，已成为当前植物保护领域的研究热点。
本文旨在探讨植物病原菌拮抗微生物的筛选方法、鉴定技术，以及深入研究其拮抗机理，以期为农业可持续发展提供新的生物防治策略。
本文将详细介绍拮抗微生物的筛选过程，包括采样方法、初筛和复筛步骤等。
通过从各种环境样本中分离和筛选出具有拮抗活性的微生物，为后续研究提供丰富的资源库。
本文将阐述拮抗微生物的鉴定方法，包括形态学观察、生理生化特性分析以及分子生物学鉴定等，以确保所获得的拮抗微生物种类准确可靠。
在此基础上，本文将重点研究拮抗微生物的拮抗机理。
通过比较基因组学、转录组学、蛋白质组学等多组学手段，揭示拮抗微生物与植物病原菌之间的相互作用关系，明确其拮抗作用的分子机制。
还将通过室内生物测定和田间试验，验证拮抗微生物的实际应用效果，为其在实际生产中的应用提供科学依据。
本文旨在通过系统研究植物病原菌拮抗微生物的筛选、鉴定及拮抗机理，为农业病害的生物防治提供新的思路和方法。
这不仅有助于推动植物保护领域的发展，也将为农业可持续发展和生态环境保护做出积极贡献。
二、材料与方法为了筛选拮抗微生物，我们从各种植物病害的土壤中收集了多种微生物，并选取了代表性的植物病原菌，如灰霉病菌、青枯病菌等。
这些病原菌是在植物病理实验室中通过常规方法分离和纯化的。
用于微生物培养和筛选的培养基包括牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯葡萄糖培养基等，这些培养基均按照标准方法进行配制和灭菌。
实验过程中所使用的试剂均为分析纯，购自国内知名试剂公司。
实验仪器包括显微镜、培养箱、分光光度计、PCR仪等，这些仪器均经过定期校准和维护。
将收集到的微生物在牛肉膏蛋白胨培养基上进行初步培养，然后通过平板对峙法观察微生物对病原菌的拮抗作用。
微生物大实验 土壤中微生物的分离鉴定
土壤中微生物的分离与研究一、实验目的1.学习微生物纯系分离、培养方法。
2.掌握划线分离纯化微生物的方法。
3.掌握微生物生理生化反应的研究方法。
4.了解该菌种的生物学特征。
二、实验原理土壤是微生物的良好生境，土壤中有多种类群的微生物，它们对自然界物质的转化和循环起着极为重要的作用，对农业生产和环境保护有着不可忽视的影响。
根际微生物与植物的关系特别密切，不同的土壤和植物对根际微生物产生显著影响，而不同的根际微生物由于其生理活性和代谢产物的不同，也将对土壤肥力和植物营养产生积极或消极的作用。
土壤中微生物的数量因土壤类型、季节、土层深度与层次等不同而异。
一般地说，在土壤表面，由于日光照射及干燥等因素的影响，微生物不易生存，离地表10 cm～30 cm的土层中菌数最多，随土层加深，菌数减少。
土壤中微生物以细菌数量最多，为几百万个/克土至几亿个/克土，有各种生理类群，营养类型多属异养型，鉴别染色多为革兰氏阳性。
放线菌含量为几万个/克土至几百万个/克土，但其生物量不比细菌低，因为菌丝体积较大。
土壤中真菌含量为几千个/克土至几十万个/克土，而其生物量常比细菌的大。
通过土壤微生物的分离与计数及划线纯化，涂布分离长出的单菌落，须经划线纯化，再转斜面培养后保藏备用。
涂布分离细菌的平板，温箱培养1d～2d后，然后挑取各单菌落的部分培养物，在预先制备好的平板上划线纯化。
根据所得纯种菌，依次进行简单染色，革兰氏染色，芽孢染色，确定菌种的形态特征。
然后根据伯杰手册确定菌种的大体范围，有针对性的进行生理生化实验，从而最终确定菌种所在的属。
三、实验材料1.培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、PDA培养基、固体油脂培养基、固体淀粉培养基、葡萄糖发酵培养基、乳糖发酵培养基、蛋白胨水培养基、葡萄糖蛋白胨水培养基。
2.染液和试剂：5%孔雀绿水溶液、0.5%番红水溶液、1%结晶紫水溶液、20%硫酸铜水溶液、95%乙醇、卢戈氏碘液、甲基红指示剂、乙醚、吲哚试剂等等。
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实验五 产蛋白酶微生物的筛选及其鉴定
一、实验目的
掌握稀释平板法、划线法分离获得菌落纯的微生物；了解菌种鉴定方法，初
步学会利用菌落、镜检和染色来鉴定微生物；掌握蛋白酶菌株的分离鉴定过程。
二、原理
土壤是微生物的“大本营”，主要在于土壤中的营养成分、物理化学性质为微
生物提供了生长的必要条件。因此，从土壤中分离有用微生物是首选，但要考虑
不同的土壤对某种微生物的含量不一样，故在分离时要选择富含需要微生物的土
壤。
蛋白酶是最重要的一种工业酶制剂，能催化蛋白质和多肽肽键水解，各种生
物体都能合成它，但唯有微生物蛋白酶具有生产价值。
采用合适的选择性培养基几合理的菌种分离方法可以获得产蛋白酶的微生
物。
三、试剂和仪器设备
含0.5%葡萄糖牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，10%牛奶，盛9ml无菌水的试管，
盛90ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶，无菌玻璃涂棒，无菌吸管，接种环，
无菌培养皿，无菌移液管、称量纸、土样、培养箱、显微镜等。
四、实验步骤
1.倒平板
将牛奶培养基灭菌后，混合均匀倒平板，置水平桌面冷却。
2.制备土壤稀释液
称取土样1g，放入盛有99ml无菌水带有玻璃珠的三角瓶中，摇振约20分
钟混匀并制成不同稀释度的土壤溶液。
3.涂布
用无菌吸管分别吸取土壤稀释液0.2ml于平板，并作上标记，用无菌玻璃涂
棒，在培养基表面轻轻涂布均匀，室温静置10min待土壤溶液吸附进培养基。
4.培养
将培养皿倒置培养，于37℃培养1-2d，对于产生透明圈的菌落,即为需要菌
株，重复分离过程，直至获得纯培养。
5.镜检
对分离菌株在显微镜下进行镜检，观察菌株形态特征，并作详细记录，利用
各种菌的形态描述及检索表，确定菌株种类。
6.鉴定
对菌种进行革兰氏染色，对菌株进行初步鉴定。
五、实验结果与讨论
记录菌体和菌落群体形态特征，记录革兰氏染色结果。
六、思考题
设计筛选获得高产蛋白酶菌株的方案有哪些要点？