实验5 大黄中蒽醌类的提取与分离
大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定
• （4）收集 洗脱液25ml一份，分别收集，回收溶 剂至小体积，放置，即可析出结晶，合并相同晶 形部分。先洗脱下的化合物为大黄酚，后洗脱下 的化合物为大黄素甲醚。
• 三、鉴定
• 1、蒽醌类成分化学鉴定
• 仪器：回流装置一套、蒸发皿、层析槽、试管、梨 形分液漏斗、水浴锅、电炉、薄层板、点样毛细管 等
• 实验内容与方法：
• 一、游离蒽醌的提取
• 称取大黄粗粉50g，加20%硫酸溶液50ml， 充分搅拌混匀，加氯仿200ml，热水浴上回 流提取1小时，过滤得氯仿滤液。药渣继用 氯仿200ml回流1小时，过滤，合并两次氯 仿提取液于圆底烧瓶中，加沸石数粒，水 浴上蒸馏回收氯仿至200毫升（可减压抽干 氯仿）。
• 2. 大黄素的分离和精制：用碳酸氢钠液萃 取后的氯仿液加5%碳酸钠溶液萃取数次 （每次20～30m1），（方法同上述碳酸氢 钠溶液的处理）。萃取液经酸化后析出棕 黄色沉淀，过滤，水洗沉淀物至洗出液呈 中性，沉淀经干燥后，用15ml丙酮热溶， 趁热过滤，滤液静置，析出橙色针状结晶， 过滤后，用少量丙酮淋洗结晶，得大黄素。
• 5.柱层析法分离大黄酚和大黄素甲醚
• （1）装柱 取一玻璃层析柱，垂直固定在铁架台 上，在管的下端垫入少量棉花，装入100～200目 硅胶（约1/3高，湿法装柱）。
• （2）上样 将样品置于小蒸发皿中，用少量石油 醚分散，另加用3倍量硅胶拌和均匀，并于水浴上 缓缓蒸去溶剂。然后将含有样品的硅胶装入色谱 柱的上端，并盖一圆形滤纸。
• 3. 芦荟大黄素的分离和精制：用碳酸钠液 萃取后的氯仿液加0.25%氢氧化钠溶液萃取 数次（每次20～30m1），（方法同上述碳 酸氢钠溶液的处理）。萃取液经酸化后析
实验5-1大黄中蒽醌的提取分离与鉴定
实验5-1大黄中蒽醌的提取分离与鉴定一、实验目的：1、了解一个天然药物中含有的主要有效成分并对其进行提取分离。
2、掌握植物中活性成分的化学检测方法，并进行初步的鉴定工作。
二、实验原理：大黄是一味天然草药，具有泻下通便之效果。
其主要活性成份是大黄素与蒽醌类物质，其中瑞贝洛Ⅱ（rustbelineⅡ）、大黄素（emodin）、芦丁（rutin）等，在医学上有广泛的应用。
大黄素与蒽醌类物质在自然状态下大多处于质子化状态，存在于与水相较弱的有机溶剂中。
为了获得高品质的大黄素与蒽醌类物质，需要对有机溶剂进行筛选，筛选出适宜的溶剂并对大黄中的主要成分进行提取与分离工作。
三、实验步骤：A. 大黄中蒽醌的提取分离1、将粉末大黄紫锥子取 1g 加入圆底烧瓶中，加入 15 mL 95% 乙醇溶液，加热回流30分钟。
2、冷却后用干净的滤纸分离上清液用热水冲涤保持颜色相同（保留水冲涤液备用）。
3、将去溶剂后的渣用 10 mL 苯醇溶解，并过滤写滤液保存，不断冲涤干净渣质。
4、将 2mL 苯醇滤液分离于干净的离心管中，在室温下慢慢加入正硫酸，足量使呈酸性.，加入 5 mL 甲醇，蒸去溶剂后，注 1mL 50%氨水，筛过活性炭或过硅酸钠脱除杂物，使溶液呈现深黄色液体。
5、以上溶液在 20ml 分液漏斗中加入 20-25 mL 丙酮，振荡混合，分离两层液体，取下蒸馏收干（可以置于干燥器或开放场地自然干燥，当感觉无水分或连续称量两次称量值一致时即可）6、将干燥沉淀取少量溶解于绝对丙酮中成特邻醌的溶液。
7、分别进行下列试验来分离纯特邻醌：（1）纯特邻醌呈现红色；（2）用极少量生石灰进行检测，呈现橙色。
B. 大黄中大黄素含量的色谱定量测定色谱图谱图峰形面积法进行测定。
1、用同上操作，按“ A ”-“ E ”方法操作，取所得特邻醌溶液 1-5 mL 再加入丙酮使其溶解（溶液的浓度以能出现三个吸光峰为适宜，可调配NaOH溶液调节pH 值，使吸光峰相对集中于三个波长摆荡之一）。
大黄中蒽醌类成分的提取 - 大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴别
1.提取、分离流程（如图一）
2.总蒽醌苷元的提取
大黄粗粉100 g，加20％硫酸溶液300 ml润湿，再加氯 仿500 ml，回流提取2hr，稍冷后过滤，残渣弃去，氯仿提 取液于分液漏斗中，分出酸水层，得氯仿提取液。
图1.大黄提取分离流程图
3.蒽醌苷元的分离和精制
（1）蒽醌类成分的缓冲纸色谱试验
b.醋酸镁试验 分别取蒽醌结晶数毫克，置于小试管中，各加乙醇l ml使 溶解，滴加0.5％醋酸镁乙醇溶液，观察颜色变化。
(2)色谱鉴识
a.薄层板：硅胶G-CMC-Na板。
b.点样：提取的大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的 氯仿溶液及各对照品氯仿溶液。
c.展开剂：石油醚－乙酸乙酯－甲酸（15:5:1）上层溶液。
大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴别
一、实验目的 1. 掌握蒽醌苷元的提取方法——酸水解法。 2. 掌握缓冲纸色谱的原理及基本操作技术。 3. 掌握pH梯度萃取法的原理及操作技术。 4. 通过大黄酚和大黄素甲醚的分离实验，熟悉柱色 谱的操作技术。 5. 熟悉蒽醌类化合物的鉴定方法。
二、基本原理
大黄中羟基葸醌类化合物多数以苷的形式存在，故先 用稀硫酸溶液把蒽醌苷水解成苷元，利用游离葸醌可溶于 热氯仿的性质，用氯仿将它们提取出来。由于各羟基葸醌 结构上的不同所表现的酸性不同，用pH梯度萃取法分离它 们；大黄酚和大黄素甲醚酸性相近，利用其极性的差别， 用柱色谱分离之。
洗脱：先用100 ml石油醚－乙酸乙酯（9.8:0.2）洗脱，至第一条黄色色 带洗下来，再换用100 ml石油醚－乙酸乙酯（9.5:0.5）洗脱下第二条色带。
4.鉴定
(1)蒽醌类成分化学鉴定
a.碱液试验 分别取各蒽醌结晶数毫克置于小试管中，加2％氢氧化钠溶 液l ml，观察颜色变化。凡有互成邻位或对位羟基的蒽醌呈蓝紫至蓝色， 其它羟基蒽醌呈红色。
实验六大黄中游离蒽醌类成分的提取、分离与鉴定(二)
实验目的
1. 通过大黄酚及大黄素甲醚的分离试验，掌 握硅胶柱色谱的操作技术。 2. 掌握蒽醌类化合物的化学鉴定及色谱鉴定 技术。
实验原理
大黄中游离蒽醌的极性大小顺序为：大黄酸>大黄 素>芦荟大黄素>大黄素甲醚>大黄酚。前三种可用 pH梯度萃取法分离。 大黄酚和大黄素甲醚酸性相近，但极性不同，可用 硅胶柱色谱法进行分离。 总蒽醌及各种分离成分可用色谱法进行鉴别。同时 硅胶柱色谱洗脱液可用色谱法鉴别后，合并单一成 分的洗脱液。来自注意事项
①大黄中的蒽醌类成分大部分与糖结合，以蒽醌的形式存在 于植物组织中。所以要用酸水解使其生成苷元。蒽醌苷元可 溶于氯仿、苯及乙醚等有机溶剂，用苯时应注意苯蒸气的挥 发，严防中毒； ②所得的氯仿液中如带有酸水液，应该用分液漏斗分出弃去， 并用蒸馏水回洗一次除去酸性以免影响梯度萃取。氯仿提取 液放置中如有沉淀析出，可滤取之，该沉淀多为大黄素，余 液进行下一步分离试验用。 ③ 分离萃取时一定注意乳化层的分出，不要混入，并且每步 最好用新鲜CHCl3，回洗碱水液。回洗液应弃去，可除去混 入碱液中的大黄素甲醚和大黄酚。 留取5ml的三氯甲烷提取液做总样，供最后层析鉴定用。
仪器、材料与试剂
实验试剂及试药： 大黄药材粗粉2Kg，氯仿500ml 10瓶，浓硫酸2瓶，浓盐酸2 瓶，冰醋酸，苯，乙酸乙酯，碳酸钠（5% Na2CO3溶液 3000ml），碳酸氢钠（5% NaHCO3溶液3000ml），氢氧 化钠（5% NaOH溶液1000ml），氢氧化钾，醋酸镁试剂等。 实验仪器设备： 500ml圆底烧瓶10个，冷凝回流管10只，500ml分液漏斗10 只，500ml烧杯20只，100-250ml量筒10只，常压漏斗（510cm斗径10只），定性滤纸（10cm）2盒，毛细管点样器1 盒，玻璃喷瓶4套，广谱PH试纸5盒，纱布一卷，多孔水浴 锅5台，旋转蒸发仪2台。
大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定
大黄中游离蒽醌类成分的提取、分离与鉴定一、实验目的1.掌握蒽醌苷元的提取方法--双相酸水减法2.掌握梯度PH萃取法提取分离大黄中各种蒽醌苷元的原理及操作方法3.掌握羟基蒽醌类化合物的颜色反应及薄层色谱鉴别方法二、实验原理1.提取原理双向酸水解法，为一相与酸水不相互溶的有机溶剂，另一相为酸水，加热回流水解的方法。
由于大黄中的羟基蒽醌类化合物多以苷的形式存在，所以首先要将苷水解成苷元，本实验选用硫酸和乙酸乙酯作为双向酸水解的溶剂，采用加热回流方法，提取大黄药材中的游离蒽醌类化合物。
根据苷元不溶于水，可溶于乙醚、乙酸乙酯等亲脂性有机溶剂的性质，即在加热回流提取过程中，稀硫酸可将蒽醌苷元水解成苷元，游离出来的蒽醌苷元随即溶于乙酸乙酯中，从而将蒽醌苷元提取出来。
2.分离原理pH梯度萃取法羟基蒽醌类化合物酸性强弱不同，用pH梯度法进行分离。
具有羧基或多个β位酚羟基的蒽醌可溶于5%碳酸氢钠溶液；具有一个β位酚羟基的蒽醌可溶于5%碳酸钠溶液；只具有α位酚羟基的蒽醌，酸性弱，只溶于氢氧化钠溶液。
以分离酸度不同的蒽醌苷元。
也可利用游离蒽醌的极性不同，采用硅胶柱色谱法进行分离。
（1）大黄中游离蒽醌的酸性强弱顺序大黄酸（-COOH）＞大黄素（β酚-OH）＞芦荟大黄素（醇-OH）＞大黄素甲醚（-OCH3）≈大黄酚（-CH3）（2）大黄中游离蒽醌的极性大小顺序大黄酸＞大黄素＞芦荟大黄素＞大黄素甲醚＞大黄酚大黄酚和大黄素甲醚酸性相近，但极性不同，可用硅胶柱色谱法进行分离。
三、实验方法四、 1.总蒽醌苷元的提取、分离工艺流程大黄药材（粗粉）50g乙酸乙酯提取液药渣去除下层酸水层，再用蒸馏水水洗2次（50ml/次）直至乙酸乙酯层pH值呈中性乙酸乙酯提取液碱水层乙酸乙酯层滴加浓盐酸，调节pH=2，放置 5%Na2CO3溶液萃取三次（40ml/次）沉淀物（黄色结晶或黄色絮状沉淀）碱水层沉淀过滤，冰醋酸精制滴加浓盐酸，调节溶液萃黄色结晶（大黄酸）沉淀物（橙色结晶或40ml/次）橙色絮状沉淀）沉淀过滤，碱水层丙酮精制橙色结晶（大黄素）节pH=2沉淀物（橙色絮状沉淀）黄色沉淀物乙酸乙酯层沉淀过滤，乙酸乙酯精制硅胶柱色谱黄色针晶洗脱剂为石油醚（60-90℃）（芦荟大黄素）-乙酸乙酯（15：1）大黄酚和大黄素甲醚混合物2.总蒽醌苷元的提取大黄粗粉50g，置500ml烧瓶中，加20%硫酸溶液100ml和乙酸乙酯250ml，水浴回流提取2h，放置，冷后过滤，残渣弃去，乙酸乙酯提取液置分液漏斗中，分出酸水层，乙酸乙酯提取液用蒸馏水洗2次（20ml/次），将乙酸乙酯放置在锥形瓶中，密封。
利用pH梯度萃取法提取中药大黄中的游离蒽醌组分
利用pH梯度萃取法提取中药大黄中的游离蒽醌组分
中药大黄是一种常见的中药材，具有清热泻火、通便利水的功效。
其中，游离蒽醌是大黄的活性成分之一，具有抗氧化、抗癌、抗炎等多种药理作用。
因此，提取大黄中的游离蒽醌组分具有重要的研究意义和应用前景。
pH梯度萃取法是一种基于组分在不同pH值下的电荷性质而进行的分离提取方法。
其原理是通过升高或降低样品溶液的pH值，使得不同电荷的组分在溶液中的分布发生变化，从而实现对不同组分的萃取分离。
1. 制备大黄样品溶液。
将干燥的大黄粉末加入适量的水溶液中，经过高温高压灭菌后，制备得到大黄样品溶液。
2. 调整溶液pH值。
将制备好的大黄样品溶液分别加入缓冲液中，调整pH值至4、6、8、10、12等不同的梯度。
每个pH值下各预留一部分样品溶液用于后续萃取。
3. 萃取游离蒽醌组分。
将调整好pH值的样品溶液转移到离心管中，进行离心。
收集上清液，并用乙酸乙酯洗涤3次。
将洗涤液汇集，用无水氯化钠干燥，得到游离蒽醌组分的提取物。
4. 分离提取物。
将提取物过滤，用旋转蒸发器将乙酸乙酯挥发，得到游离蒽醌组分的固体样品。
5. 测定游离蒽醌组分含量。
采用高效液相色谱法测定萃取得到的游离蒽醌组分含量。
通过这种pH梯度萃取法可以分离得到不同pH值下的游离蒽醌组分，进而进行药理、病理、毒理实验或进行其他分析研究。
此外，这种方法相对简单，提取效率高，提取得到的游离蒽醌组分可以应用于制药、化妆品等领域。
实验5大黄中蒽醌类的提取与分离
Hale Waihona Puke 熟练进行大黄中 蒽醌类化合物的 提取、分离及鉴 定操作。
学会大黄中大蒽 醌类化合物的色 谱鉴定技术。
二、实验原理
大黄(Rheum palmatum L.)
蓼科多年生草本植物，掌叶。大黄的干燥根可入药，性 寒味苦，具有清热解毒、活血化瘀、泻火凉血等多种作用。
初步检测
乙醚提取液经薄层检查含有大黄酸、芦荟 大黄素、大黄素、大黄素甲醚和大黄酚。
检测方法：取硅胶-CMC-Na板，将上述乙醚 提取液点样后，用石油醚（60-90℃）-醋酸 乙酯（7：3）为展开剂，展开晾干，在可见 光下观察，可见到4个黄色斑点，Rf值由大 到小分别是大黄酚与大黄素甲醚的混合物、 大黄素、芦荟大黄素、大黄酸。置氨蒸汽 中熏后，斑点变为红色。
大黄中主要有效成分及结构
大黄中化学成分复杂，主要以蒽醌衍生物为主。 包括游离蒽醌、蒽醌苷、二蒽酮苷、鞣质等。
游离蒽醌主要有大黄酚、大黄素、大黄素甲醚、
芦荟大黄素、大黄酸。
R1
R2
大黄酚
CH3 H
大黄素
CH3 OH
大黄素甲醚 CH3 芦荟大黄素 H
大黄酸
H
OCH3 CH2OH COOH
提取分离原理
大黄中的蒽醌苷经 酸水解成游离蒽醌 苷元，苷元可溶于 乙醚而被提取出来。 再利用各种蒽醌类 化合物酸性不同， 采用pH梯度萃取法 分离得到各种蒽醌 类化合物。
三、实验材料
器材：
500ml圆底烧瓶、烧杯、滴管、橡皮管、球形冷凝 管、30cm层析缸、标本瓶、索氏提取器一套、 250ml分液漏斗、布氏漏斗、抽滤瓶、普通滤纸、 薄层板、喷雾器、广泛PH试纸
大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定(实验报告)
大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定一、实验目的（1）熟悉蒽醌类成分的提取分离方法（2）掌握pH梯度提取法的原理和操作技术（3）学习蒽醌类化合物鉴定方法二、实验器材材料及试剂：大黄粗粉、浓硫酸、NaHCO3、Na2CO3、NaOH、浓盐酸、乙酸乙酯、石油醚、乙醚、普通滤纸、薄层层析硅胶板（2.5 cm×10 cm）、广泛PH试纸、剪刀、铅笔、尺子、点样毛细管、样品管等。
仪器：500mL圆底烧瓶、球形冷凝管（30cm）、橡皮管、烧杯、滴管、层析缸（广口瓶）、250mL 分液漏斗、布氏漏斗、抽滤瓶、水浴锅、集热式磁力搅拌器、磁子、循环水式多用真空泵、铁架台等。
三、实验原理大黄为蓼科植物,味苦,性寒,具有泻热通肠、凉血解毒、逐瘀通经等功效。
其主要成分为为蒽醌化合物，含量约为3%~5%，大部分与葡萄糖结合苷，游离苷元有大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚等。
其中，大黄酸具有羧基，酸性最强；大黄素具有β-酚羟基，酸性第二；芦荟大黄素连有羟甲基，酸性第三；大黄素甲醚和和大黄酚的酸性最弱。
根据以上化合物的酸度差异，可用碱性强弱不同的溶液进行梯度萃取分离。
大黄酸 R1=H R2=COOH大黄素 R1=CH3 R2=OH芦荟大黄素 R1=CH2OH R2=H大黄素甲醚 R1=CH3 R2=OCH3大黄酚 R1=CH3 R2=H四、实验内容大黄素的提取、分离流程图大黄粗粉10g20%H2SO4 150 ml加热1h, 抽滤、干燥滤饼150ml乙醚回流提取1 h乙醚层水层（紫红色）乙醚层HCl 5%Na大黄酸沉淀（粗品）水层（红色）乙醚层HCl % NaOH大黄素沉淀（粗品）水层（红色）芦荟大黄素、大黄素甲醚沉淀（混合物）具体操作步骤1. 游离蒽醌的提取（1）酸水解：称取大黄粗粉10g，加20%H2SO4水溶液150mL，在水浴上加热1小时，放冷，抽滤，滤饼用NaOH溶液洗至近中性（pH约为6），于70℃干燥后，研碎，置250mL圆底烧瓶中，加入乙醚150mL回流提取1小时（调45℃，回流即可），得到乙醚提取液。
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5.pH梯度萃取
取乙醚提取液2/3量，置
250ml分液漏斗中。
1、大黄酸：用2.5% NaHCO3溶液 60ml,分三次萃取，合并三次萃 取液，用浓盐酸调 pH2-3,抽滤， 得大黄酸沉淀。
2 、大黄素：分离出大黄酸的乙醚层，用 2.5% Na2CO3溶液60ml分三次萃取，合并三 次萃取液，用浓盐酸调 pH2-3,抽滤可得大 黄素沉淀。
五、思考题
1.简述大黄中5种游离羟基蒽醌化合物的酸 性与结构的关系。 2. pH梯度萃取法的原理是什么？如何利用 该方法分离大黄中的5种游离羟基蒽醌化合 物？ 3.大黄中5种游离羟基蒽醌化合物的极性与 结构的关系如何？薄层鉴别时常用何类吸 附剂？Rf值顺序如何？
大黄酚 大黄素 大黄素甲醚 芦荟大黄素 大黄酸
CH3 CH3 CH3 H OH OCH3
H
H
CH2OH
COOH
提取分离原理
大黄中的蒽醌苷经 酸水解成游离蒽醌 苷元，苷元可溶于 乙醚而被提取出来。 再利用各种蒽醌类 化合物酸性不同， 采用pH梯度萃取法 分离得到各种蒽醌 类化合物。
三、实验材料
1～2小时后， 当展开剂前沿 到达薄板3／4 高度时，将薄 板自层析缸内 取出，立即用 铅笔记下展开 剂前沿的位置， 自然风干
注意事项
1.本实验提取方法是采用酸水解法，使药材中蒽醌苷水解 得到游离蒽醌化合物，再用连续回流的方法，使游离蒽醌 被氯仿提取出来，这样提取的游离蒽醌类成分较为完全， 收率高。 2.酸水解后的滤饼一定要水洗至中性，为了节省时间，可 将第一次抽滤得到的滤饼混悬在水中，加10%NaOH水溶 液调pH值至6，抽滤后再水洗至中性。 3.pH梯度萃取法分离羟基蒽醌，是利用羟基蒽醌的酸性不 同，可溶于不同 pH的碱液中，在分离时，应注意萃取的 次数不宜过多，否则被分离的成分间回游混杂，最好同时 用薄层对照。所用碱液的pH值分别如下：5%碳酸氢钠为8， 5%碳酸钠为10-11，0.5%氢氧化钠为12以上。
能力要求
熟练进行大黄中 蒽醌类化合物的 提取、分离及鉴 定操作。 学会大黄中大蒽 醌类化合物的色 谱鉴定技术。
二、实验原理
大黄(Rheum palmatum L.)
蓼科多年生草本植物，掌叶。大黄的干燥根可入药，性 寒味苦，具有清热解毒、活血化瘀、泻火凉血等多种作用。
大黄中主要有效成分及结构
大黄中化学成分复杂，主要以蒽醌衍生物为主。 包括游离蒽醌、蒽醌苷、二蒽酮苷、鞣质等。 游离蒽醌主要有大黄酚、大黄素、大黄素甲醚、 芦荟大黄素、大黄酸。 R1 R2
将玻璃棒从硅胶面上由上至下缓慢匀速拉下。重复 两到三次，直到将硅胶层铺好为止（铺好的薄层可 以清晰地看见玻璃板下面的手指！） 将硅胶板室温干燥30分钟后置于烘箱内，缓慢升温 至105℃左右烘烤20分钟（使硅胶活化），然后放入 干燥箱备用。
105 ℃活 化
薄层层析
用铅笔在距硅胶板点样端约2cm处平行地划上点样标记，用毛 细管点样（注意：样点的间距不能小于1cm，点的直径能够不 得超过0.5cm!），自然风干 在烧杯中倒入1cm深的展开剂，将点样后的薄板斜放入其中， 迅速罩好
四、实验步骤
1.粉碎 2.酸解 3.水洗、抽滤、干燥 4.索式提取 5.萃取结晶 6.硅胶薄层层析 7.纤维素柱层析
1.粉碎
将大黄药材切片剪碎，用粉碎机粉碎得到 大黄粗粉，经80目筛子得到大黄细粉。
80目
2.酸解
取大黄粉20 g，加20%H2SO4 200ml，在70℃ 水浴上加热 3~4小时。
大黄中蒽醌类的提取与分离
指导老师：肖靓
小老师： 罗天明 潘少涛 武雪莹
大黄中蒽醌类的提取与分离
1 2 3 4 5
实验目的
实验原理 实验材料 实验步骤 思考题
一、实验目的
1
2
3
学习目的
掌握大黄中蒽醌类 化学成分的提取分 离技术。
知识要求
掌握大黄中蒽醌类 化合物的提取、分 离原理。
熟悉大黄中蒽醌类 化合物的结构及主 要理化性质。 了解大黄中蒽醌类 化合物的提取分离 新进展。
酸化结晶
碱 液
酸 化 后
6.硅胶薄层层析
薄层层析是一种快速分离和定性分析少量 物质的实验技术。
它是将某种吸附剂在玻璃板（或硬制塑料板等） 上均匀地铺成薄层，把待分析鉴定的样品溶液点 在薄层的一端，然后选择合适的溶剂作为流动相 （展开剂），在密闭的层析缸内进行层析，从而 达到分离鉴定的目的。 本实验中
吸附剂：硅胶—CMC 展开剂：石油醚（60～90℃）：乙酸乙酯＝7：3
薄层的制备
2g硅胶G + 20ml 0.25% CMC ，混合均匀 取20cm×5cm的光滑洁净玻璃板一块，水平放置， 将已调制好的硅胶G均匀地涂布于玻璃板上 取一洁净的玻璃棒，两手用拇指，食指，中指控 制住玻璃棒的两端并始终保持玻璃棒与桌面平行。 调整玻璃棒高度使之与玻璃板间的距离约为1.0 mm
器材：
500ml圆底烧瓶、烧杯、滴管、橡皮管、球形冷凝 管、30cm层析缸、标本瓶、索氏提取器一套、 250ml分液漏斗、布氏漏斗、抽滤瓶、普通滤纸、 薄层板、喷雾器、广泛PH试纸
药品：
大黄20g、NaHCO3、Na2CO3、NaOH、浓硫酸、浓盐酸、 浓硝酸、乙醚、石油醚、乙酸乙酯、硅胶G、CMC
20g
70 ℃
3.水洗、抽滤、干燥
抽滤，滤饼水洗至中性后，于70℃左右干燥， 研成粉末。
水洗至中性
真空泵
4.索式提取器
圆底烧瓶内的抽提剂受热挥 发，蒸气经导气管向上，在 冷凝管中冷却为液体，滴入 装有样品滤纸筒的管中，使 样品浸在纯净的抽提剂中。 待提取物质逐渐从样品中溶 解到抽提剂中。当样品管中 的抽提剂液面逐渐上升到与 回流管（虹吸管）上端齐平 时，在虹吸作用下，携带所 提取的物质一同从侧面的虹 吸管流入烧瓶中即完成一轮 循环。
实验装置
提取过程
滤饼经干燥后，置索氏提取器中以乙醚约 150ml回流提取3~4小时，得乙醚提取液。
注意颜色 的变化 喔～
初步检测
ห้องสมุดไป่ตู้
乙醚提取液经薄层检查含有大黄酸、芦荟 大黄素、大黄素、大黄素甲醚和大黄酚。 检测方法：取硅胶-CMC-Na板，将上述乙醚 提取液点样后，用石油醚（60-90℃）-醋酸 乙酯（7：3）为展开剂，展开晾干，在可见 光下观察，可见到4个黄色斑点，Rf值由大 到小分别是大黄酚与大黄素甲醚的混合物、 大黄素、芦荟大黄素、大黄酸。置氨蒸汽 中熏后，斑点变为红色。
3、芦荟大黄素：分离出大黄素的乙醚层， 继续用2.5% Na2CO3溶液60ml分四次萃取， 合并四次萃取液，用浓盐酸调 pH2-3,抽滤 可得芦荟大黄素沉淀。
4、大黄酚和大黄素甲醚混合物:将分离出 芦荟大黄素的乙醚层，用0.5% NaOH溶液 60ml,分三次萃取，合并三次萃取液，用浓 盐酸调 pH2-3,抽滤，得大黄酚和大黄素甲 醚混合物。