不同产地丹参药材中丹参酮_A及丹参素的含量比较
中药丹参中丹参素,丹参酮A的提取及质量研究X
中药丹参中丹参素、丹参酮 A 的提取及质量研究Ξ郑 萍, 谢笑天, 孟东华3, 王永生3, 曾福永3, 刘凤琼3(云南师范大学化学化工学院,云南昆明650092)摘 要: 通过对丹参药材的提取工艺比较,以水溶性的丹参素、脂溶性的丹参酮 A 为质量指标,采用高效液相色谱法定量测定、薄层层析定性等,为丹参制剂的前处理提供实验依据。
关 键 词: 丹参素;丹参酮 A ;高效液相色谱;薄层色谱中图分类号: O 621.14 文献标识码: A 文章编号: 1007-9793(2004)04-0050-03 丹参是我国传统著名的活血化瘀中药,现代药理研究表明丹参对心血管系统、血液系统的作用十分显著[1]。
特别是在近20年里,丹参治疗冠心病的研究报道甚多。
其主要有效成分为水溶性酚性酸:丹参素和原儿茶醛。
脂溶性二萜醌类:丹参酮 A 。
本文以丹参素、丹参酮 A 为质量指标,研究丹参的提取工艺,并采用高效液相色谱法对指标成分进行含量测定。
1 仪器与试剂日本岛津L C —6A 高效液相色谱仪,SPD —6AV 紫外可见检测器。
双底层薄层层析缸、DW F —l 00型电动植物粉碎机,XA —1型粉碎机,CSX —50超声清洗仪。
对照品:丹参素和丹参酮 A ,中国药品生物制品鉴定所提供。
丹参中药材,市售品。
所用试剂均为分析纯,水为二次亚沸石英蒸馏水。
2 实 验2.1丹参素不同提取工艺比较2.1.1水煎回流法精密称取丹参药粉2.5g ,加水24倍量,按表1条件试验,测定丹参素含量。
2.1.2超声提取法精密称取丹参药粉0.33g ,加水定溶于25m l 容量瓶中,30℃超声提取、测定。
2.1.350%乙醇渗漉法精密称取丹参药粉5.0g ,加50%乙醇渗漉,收集渗漉液200m l ,回收乙醇,测定丹参素含量,结果见表1。
表1丹参素不同提取工艺比较(n =3)Tab .1The results of three extract m ethods提取方法时间h 丹参素含量%R S D %水煎回流法1.50.541.8水煎回流法2.50.861.5水煎回流法3.50.911.6超声提取法0.50.101.9超声提取法1.00.101.850%乙醇渗漉法-0.521.7从表1可以明显看出,采用水煎回流法,丹参素的提取率高于其它方法。
不同产地丹参药材中丹参酮_A和丹酚酸B含量比较_陈彻
丹酚酸 B 的含量测定结果（ n = 3 ）
图2
丹酚酸 B 高效液相色谱图
5 6 7 8 9 10
2． 2． 2
对照品溶液的制备 精密称取丹酚酸 B 对照品 6． 9mg 置于 50mL 容量
瓶中， 用 75% 色谱甲醇溶解定容， 作为丹酚酸 B 贮备 液（ 0． 138mg / mL） 。 2． 2． 3 供试品溶液的制备 称取粉末（ 过 40 目筛 ） 约 0． 6 g， 精密称定， 置具 塞锥形瓶中，精密加入 75% 甲醇 50mL， 震摇， 称定重
讨论 实验中发现以药典流动 相 比 例 测 定 丹 参 酮 Ⅱ A 时， 所 测 成 分 出 峰 太 晚 （ 30min ） 故 加 大 流 速 （ 1 → 1. 2mL / min） 测定， 效 果 良 好。 以 药 典 流 动 相 比 例 甲 醇： 乙腈： 甲酸： 水（ 30 ： 10 ： 1 ： 59 ） 测定丹酚酸 B 时所测 成分前有一干扰峰且未达到基线分离， 加大水相比例 至 62 时两峰基线分离， 但所测成分出峰太迟且峰面积 显著减小， 进而在此基础减小水相比例至 61 测定， 效 果良好。 就测定结果来看， 不同地区丹参药材的丹参酮 Ⅱ A 和丹酚酸 B 含量差别较大，野生品的含量普遍高于 栽培品。河南卢氏、 山西芮城及河北承德栽培品丹参 酮ⅡA 含量较低， 四川中江栽培品丹参酮 Ⅱ A 含量最 高。然而， 山西芮城栽培品丹参酮ⅡA 含量尽管最低， 但丹酚酸 B 含量却最高。 丹参酮 Ⅱ A 和丹酚酸 B 含 量均较高的是四川中江栽培品。这些结果可为丹参药 材的优选及临床用药提供相应的参考依据 。 3
收稿日期： 2013 － 09 － 20 176 号） 作者简介： 陈彻（ 1972 － ） ， 副教授， 主要从事生化过程研究。 男， 博士， E － mail： chen72123@ 163． com 修回日期： 2013 － 10 － 27
不同厂家丹参胶囊中4种主要活性成分含量比较_王国辉
医药导报 2013 年 2 月第 32 卷第 2 期
·235·
B 的含量，对丹参酮ⅡA 不作测定要求。由此可见，丹 参胶囊正式标准是目前国内少数以丹参酮 ⅡA 和丹酚 酸 B 作为双含量控制对象的制剂，完全与丹参药材的 《中华人民共和国药典》2010 年版标准要求一致，有利 于药品质量的控制和监测。
较明显。结论 两组测试样品的 4 种活性成分含量存在一定差异。
关键词 丹参胶囊; 丹参酮 ⅡA; 丹酚酸 B; 丹参素; 原儿茶醛; 色谱法，高效液相
中图分类号 R286; R927． 1
文献标识码 A
文章编号 1004 － 0781( 2013) － 0233 － 03
现代药理学研究表明，丹参的药理学活性成分主 要为丹参酮ⅡA、丹酚酸 B、丹参素和原儿茶醛等［1-2］， 而现行的《中华人民共和国药典》或《国家药品标准》 中大多数只采用了单一成分的含量测定来表征丹参制 剂的质量［3］，由此导致丹参制剂的质量标准和疗效一 直饱受争议［4-5］。丹参胶囊目前国内只有两家生产，且 执行两个不同的药品标准。为进一步监测执行不同标 准的产品的内在质量，笔者在前期工作基础上［6-7］，对 两个厂家生产的各 3 批样品进行分析，以期全面评价 不同厂家丹参胶囊质量。 1 仪器与试药 1． 1 仪器 Agilent 1100 型高效液相色谱仪，可变波 长扫描紫外检测器和 Agilent Chemstation 色谱工作站 （ 均为美国 Agilent 公司） ，BP211D 型电子天平（ 德国 Sartorius） ，SK5200H 超声波清洗器（ 上海科导超声仪 器有限公司，频率 53 kHz，功率 200 W） 。 1． 2 试药 丹参胶囊（ 海南赛立克药业有限公司，简 称赛立克，批号： 090802，100101，100901； 西双版纳雨 林 制 药 有 限 责 任 公 司，简 称 雨 林，批 号： 100526， 100701，100910，均购自市场） ，丹参酮ⅡA 对照品（ 批 号： 110766-200416） 、原儿茶醛对照品 （ 批号： 110813200501） 均购自中国食品药品检定研究院； 丹参素对 照品（ 批号： 22681-72-7，纯度 ＞ 98% ） 、丹酚酸 B 对照
市售不同产地的丹参中丹参酮ⅡA的含量比较
【 ｂｔ ｃ】 Ｏｊｃｖ ｏｎｅｔａ ｅ ｏｔ ｔ ａｅ ｎｈ ｏｅ ｋｉＳＮａ ｉｏ ｈ Ｂ ｅ ｒ ｎ ｍ ｒｅ Ｍｅ ｏｓＡ Ａ ｓ ａｔ ｒ ｂ ｔｅ Ｔ ｖｓｇｔｔ ｎ ｎｖｒｔ ｏ ｔ ｓｎ ｎ ａ ｉｍｌ 盯 ｇ ｃ ｒ ｔ ａ ｔ ｔ ｄ ｅｉ ｉ ｉ ｅｈ ｃ ｅ ｉｙ ｆａ ｉ Ｉ ｎ ｔ ｉ ｎ ｉ ｕｅ ｋ ． ｈ
【 ｅ ｏ ｄ 】 Ｔ ｎ ｈｎ ｎ Ａ Ｈ Ｌ Ｓ ｌｉ ｍｉｉｒ ｉａ ｕ ｇ Ｋ ｙｗ ｒ ｓ ａ ｓ ｉ ｅＩ ； Ｐ Ｃ； ａ ａ ｌｏｒ ｚ ｎ ｅ ｏ Ｉ ｖ ｔ ｈ Ｂ
丹参 是唇形科 植物 丹参 Ｓ ｌ ａｍ ｌｏｒｉ ｕ ｇ ａ ｉ ｉｉ ｈｚ Ｂ ｎ ｅ的干燥 根 及根 茎 ，是临床最 常用 中药 之一。具有祛瘀 止痛 ，活血通 络 ， ｖ ｔｒ ａ
收 稿 日期 ：２ １— ３ ２ ０００—７ 作者 简 介 ：麦 少 霞 ，女 ，广 东 省 人 ，主 管 药 师 。
清心 除烦 的功效 。丹参酮 Ｉ 是丹参 的主要有效成分 之一 ，具 Ｉ
有抗菌 、抗氧化 、抗动脉粥样硬化 、降低心肌耗氧量 以及抑 制
３ 讨 论 ห้องสมุดไป่ตู้
状及诱 发原因等 。如疼痛突然加 重 ，或呕 吐 、黑便 ；或寒 颤 、
Ｄ ｔｒ ｎ ｔ ｎ ｏ ａ ｓｉｏ ｅＨ ｉ ｒ ｕ ａｖａ Ｍｉｉｒｈｚ ｕ ｇ ｎ Ｃ ｒｅ ｔＭａ ｋｔ ／ Ａ ｈ ｏｉ ＨＥ ￣ ａ， ｅｅｍｉａｉ ｆＴ ｎ ｈｎ ｎ ｏ ｎ Ｖａｉ ｓ Ｓ ｌ ｌｏ ｒ ｉ Ｂ ｎ ｅｉ ｕ ｒｎ ｒ ｅ ／Ｍ ＩＳ ａｘｏ ｏ ｉ ｔ ａ ，Ｃ Ｎ Ｌ ｕｎ ＷＡ ＧＬ ｉｚ Ｏ ＧＪ ｎ ｆｕｎｄ ｎ ｒｖ ｃａ ｓｉｌｆＴａｉｏａ ｈｎｓ ｄ ｉ ， ｕｎ ｚｏ １ １ ０ Ｃ ｉａ Ｎ ｅ Ｈ Ｎ ｕ Ｇ ａｇ ｏｇＰｏｉ ｉ Ｈｏ ｔ ｒ ｔｎｌ ｉ ｅＭｅｉ ｎ Ｇ ａｇｈｕ５ ０２ ， ｈｎ） ， ｎ ｌ ｐａｏ ｄｉ Ｃ ｃ ｃｅ
不同产地丹参药材中丹参酮ⅡA及丹参素的含量比较
地 区 ， 参 药材 均经 鉴 定 ） 试 剂均 为 分析 纯 。 丹 。
２ 方 法
２ ６ 重 复 性 实验 取 丹 参 １ 药 材 ， 供 试 品溶 液 制 ． 号 依 备 方 法分 别 制 备 ３ 份供 试 品溶 液 ， 样 ２ １ 进 Ｏ 分析 ， 份 每 进样３ ， 次 测得 丹参 酮 Ⅱ 的平 均含 量 为０ ０ ２ ， Ｓ ． ８ Ｒ Ｄ
（ 津 中医 学 院 第 一 附 属 医 院 ， 津 天 天
摘
要 目的 ： 究 不 同 产 地 的丹 参 药 材 中丹 参 酮 Ⅱ 及 丹 参 素 的 含 量 。 法 ： 效 液 相 色 谱 法 。 果 ： 同 产 地 丹 参 研 方 高 结 不
药 材 中的水溶性成分 丹参素 及脂溶性 成分丹参 酮 Ⅱ 含量差 异很大 ， 两种 成 分 之 间 无 一 定 关 系 。 论 ： 议 《 国 药 典 》 结 建 中 增
见 表 １ 。
谱柱 Ｉｒｇ ｌｒＨ ｌ ４ ６ｍｍ×２ ０ｍｍ， ０ ｒｅ ｕａ — Ｃ ８ ． （ ５ １ ｍ） 流动 ；
相 水 一 醇 一 甲 基 甲 酰 胺 一 乙 酸 （ ０ ４： ２ ； 速 ： 甲 二 冰 ９ ： ４： ） 流
０ ９ｍｌｍｉ ； 测 波 长 ： ８ ｍ； 论 塔 板 数 以丹 参 素 ． ／ ｎ 检 ２ ０ｎ 理
不同产地丹参药材中丹参酮ⅡA与丹酚酸B的含量测定
38中国处方药 第18卷 第10期·实验研究·采用乙腈-0.1%磷酸系统进行梯度洗脱。
③本试验考察了不同柱温、流速对分离度及基线是否平稳的影响。
本试验考察的柱温为25℃，30℃和35℃，试验结果表明，柱温对其的影响较小，因此本试验柱温采用30℃；还考察3种不同流速0.8 ml/min 、1.0 ml/min 、1.2 ml/min 对分离度的影响，试验结果表明1.0 ml/min 时分离度较好，基线也较平衡，故本试验采用的流速为1.0 ml/min 。
参考文献[1]尚云冰，曲夷.再论大承气汤[J].山东中医药大学学报，2016，40（2）：135-136.[2]魏江存，秦祖杰，谢臻，等.大黄不同炮制品对大承气汤泻下作用变化研究[J].中华中医药杂志，2018，33（12）：5392-5396.[3]张保国，梁晓夏，刘庆芳.大承气汤现代药效学研究[J].中成药，2009，31（9）：1427-1430.[4] Peigen X ， Liyi H ， Liwei W.Ethnopharmacologic study of Chinese rhubarb[J].J Ethnopharmacol ，1984，10（3）：275-293.[5]魏江存，陈勇，谢臻，等.中药大黄炮制品的化学成分及药效研究进展[J].中国药房，2017，28（25）：3569-3574.[6]阴健，郭力弓.中药现代研究与临床应用[M].北京：学苑出版社，1993：492.[7]刘学仁，张莹，林志群.橙皮苷和橙皮素生物活性的研究进展[J]. 中国新药杂志，2011，20（4）：329-333，381.[8]国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S]. 2015年版.北京：中国医药科技出版社，2015：23-24.[9]历淑芬. 大承气汤传统煎煮工艺及质量控制研究[D].杭州：浙江中医药大学，2012.[10]李丽，肖永庆.大黄饮片炮制前后物质基础变化规律研究[J].中华中医药杂志，2012，27（4）：803-813.表5：DCQT 样品测定结果（n ＝6）成分/样品平均质量浓度（μg/ml）RSD （%）柚皮苷867.24 1.55橙皮苷22.86 2.29新橙皮苷482.81 1.26芦荟大黄素 6.90 2.05大黄酸27.84 2.21和厚朴酚19.60 2.53厚朴酚74.04 2.64大黄素13.57 3.01大黄酚38.69 2.75大黄素甲醚14.212.83丹参属于唇形科植物丹参的根茎与干燥根，同时也属于我国传统珍贵中药材，历史悠久[1]。
商洛丹参和中江丹参中丹参酮IIA的含量比较
等 。其 中丹参 酮 Ｉ Ｉ Ａ是 脂 溶 性 成 分 的 代 表 ， 是 体
现丹 参质 量 的一个 重要 化学成 分 。在 当前新 药 的
开发 上 ， 在药 物价 值 较 高 的植 物 中寻 求 药 物治 疗 疾病 是一 种较 为常 见 的方法 。丹参 的主要作 用成
９ ８ ％， 批 号为 ２ ０ １ ４ ０ ３ １ ８ ） １ ． ２ 实验仪 器
丹参 酮 Ｉ 、 丹参 酮 Ｉ Ｉ Ａ等 ； 水 溶 性 主要 为 酚 酸 类 化
合物 ， 包括 丹参 素 ， 丹参酸甲， 丹参酸乙、 丹参 酸丙
紫外可见 分光 光度 计 （ 上 海 精 密 科 学仪 器 有
量高于商洛丹参。在 临床 用药和 生产中药制剂中 ， 需要发挥丹参酮 Ｉ Ｉ Ａ药理作 用时优选 中江丹参 。
关键词 ： 不 同产地 ；丹参酮 Ｉ Ｉ Ａ含量 ；回流提取 法；紫外分光光度法
丹 参是 唇形 科 鼠尾 草 属 多年 生 草 本 植 物 ， 又
名赤参， 紫丹参 ， 红根 等 ， 其 根 是一种 中药 ， 主产 安
陕 西农 业 科 学 ２ ０ １ ７ ， ６ ３ （ ０ ９ ） ： ２ ２—２ ４
商 洛 丹 参 和 中江 丹 参 中丹 参 酮 Ｉ Ｉ Ａ的含 量 比较
雷燕 妮 ， 张小斌
（ 商洛学院 生物 医药与食 品工程 学院 ， 中国中医科学院商洛中药材 Ｇ Ａ Ｐ科研 工程 中心 ， 陕西 商洛 ７ ２ ６ ０ ０ ０ ）
摘 要： 对商洛丹参和 中江丹参 中的丹参酮 Ｉ Ｉ Ａ含量进行对 比研 究， 以丹参 酮 Ｉ Ｉ Ａ的含 量为考察指标 ， 甲醇 为
提取溶 剂， 采用回流提 取法 ， 通过 紫外分光光度 法（ 选择波 长在 ２ ７ ０ ｎ ｍ） 测定其含 量。 实验结 果表明 ： 中江 丹 参 中丹参 酮 Ｉ Ｉ Ａ的含 量为 ０ ． ２ ０ ３ ％， 商洛丹参 中丹参酮 Ｉ Ｉ Ａ的含量 为 ０ ． １ ３ ７ ％， 即中江丹参 中丹参 酮 Ｉ Ｉ Ａ的含
不同产地丹参中隐丹参酮_丹参酮_和丹参酮_A的含量比较_孔祥文
89.76
89.25
178.53 99.36
99.34
89.78
89.25
178.66 99.29
89.96
89.25
178.65 99.42
89.53
89.25
178.39 99.65
RSD/％ 0.2 0.1 0.1
表 3 样品含量测定结果（n＝3）
Results of content determination of sample（s n＝3）
# 通 讯 作 者 ：副 主 任 中 药 师 。 研 究 方 向 ：药 品 检 验 。 电 话 ： 010-62310830
超声仪器有限公司）；BP211 十万分之一电子分析天平（德国赛 多利斯公司）。
隐丹参酮（批号：110852-200305，供含量测定用）、丹参酮 Ⅰ（批 号 ：0867-200205，供 含 量 测 定 用）、丹 参 酮 Ⅱ A（批 号 ： 110766-200417，供含量测定用）均购自中国药品生物制品检定 所；丹参购于不同产地（1、2 号：河北；3、4 号：山东；5、6 号：江 苏；7、8 号：河南；9、10 号：安徽），均经北京市海淀区药品检验 所韩杰副主任中药师鉴定为真品。
取已知隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA 含量的样品（批 号：6174241）0.5 g，共 6 份，分别对应加入一定量的对照品，按 “2.3”项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件进样测定，计
算加样回收率，结果见表 2。 2.9 样品含量测定
取不同产地的丹参适量，按“2.3”项下方法制备供试品溶
液，按上述色谱条件进样测定，计算样品含量，结果见表 3。
1 仪器与试药
LC-2010 型 HPLC 仪、CLASS-VP 色谱工作站、SPD-20A 紫 外-可见检测器（日本岛津公司）；KQ118 超声波清洗器（昆山市
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312 对照品溶液的制备 另取人参二醇与人参三醇加无水乙醇分别制成每1m l 含1m g 的混合液。
313 展开剂制备 氯仿2乙醚(1 1)。
314 实验方法 取样品溶液和对照品溶液各10Λl ,分别点样于同一硅胶G 薄层板上,用展开剂展开至约15c m ,晾干,喷以硫酸甲醇溶液(1→2),在105o C 烘干约10分钟,置紫外灯(365nm )下检视。
供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
见图3。
11颐和春胶囊 21人参二醇、人参三醇图3 供试品及人参二醇、人参三醇对照品色谱图315 阴性对照试验 取川牛膝、锁阳、淫羊藿、蛇床子、沙参、冰片、覆盆子、熟地黄、韭菜子(炒)、附子(制)路路通等药材按处方比例混合研细,取细粉,按以上样品溶液制备方法制得溶液作为样品液,取此液及上述对照品溶液各10Λl ,分别点样于同一硅胶G 薄层板上,同上实验方法,此样品液未见与对照品溶液相同位置斑点。
见图4。
11未加人参的药材混合粉末 21人参二醇、人参三醇图4 未加人参药材及人参二醇、人参三醇色谱图4 讨论按此方法对3个批号的颐和春胶囊进行有效成分鉴定,结果都呈正反应,显色明显,本方法可作为该药品的鉴别实验。
不同产地丹参药材中丹参酮 A 及丹参素的含量比较Ξ严 红,高 扬,郭 伟,程 筠(天津中医学院第一附属医院,天津 300193)摘 要 目的:研究不同产地的丹参药材中丹参酮 A 及丹参素的含量。
方法:高效液相色谱法。
结果:不同产地丹参药材中的水溶性成分丹参素及脂溶性成分丹参酮 A 含量差异很大,两种成分之间无一定关系。
结论:建议《中国药典》增加丹参水溶性成分的定量指标,为保证丹参制剂的疗效,应根据制剂的工艺特点,进行相应定量指标检验。
关键词 丹参,丹参酮 A ,丹参素,高效液相色谱中图分类号:R 927.2 文献标识码:A 文章编号:100625687(2003)0320010203 丹参为唇形科植物S alv ia m iltiorrh iza Bge 干燥根及根茎,临床用于治疗冠心病、心绞痛、缺血性中风、栓塞、肝脾肿大、化脓性感染等疾病。
现代药理学研究表明,丹参的有效成分分为脂溶性的菲醌类衍生物和水溶性的酚酸类成分,前者为抗菌抗炎的主要成分,其中丹参酮 A 还能增加冠脉流量、改善心肌功能、降低血小板聚集而抗血栓形成。
后者以丹参素、原儿茶醛为代表,具有抗氧化、抗凝抗血栓、抗心肌缺血及调血脂作用,对多种实验性心、肝、脾的损伤均具有保护作用,被认为是丹参治疗冠心病、栓塞、中风的主要成分,因此,二者均为评价丹参质量与疗效的重要指标。
丹参酮 A已被作为评价丹参质量的指标成分,收载于《中国药典》2000版一部丹参的含量测定项下。
但在临床上广泛使用的丹参注射液、复方丹参注射液、丹参口服液、复方丹参口服液及丹参粉针剂等,在制备工艺中丹参的提取方法大多沿用传统的水提醇沉法。
有实验表明,采用水提法,主要提出丹参的水溶性成分,脂溶性的有效成分丹参酮 A 仅提出2.6%[1],对于丹参药材的质控标准,如仍采用测定丹参酮 A 的含量是否有意义,为此,研究测定了几种不同产地丹参药材中丹参酮 A01天津药学 T ianjin Phar m acy 2003年6月 第15卷第3期Ξ及丹参素的含量,以探求两种成分之间的内在联系。
1 仪器与试药高效液相色谱仪:美国Beckm an公司;125型输液泵;168二极管阵列检测器;Gold N ouveau2色谱工作站。
JA21104型电子天平(万分之一)。
丹参素对照品(上海医科大学天然药化室);丹参酮 A(中国药品生物制品检定所)。
丹参药材(购于不同产地,1号:甘肃;2、3、4号:安徽;5号:内蒙古;6号:河北;7、8、9、10号山东不同地区,丹参药材均经鉴定)。
试剂均为分析纯。
2 方法211 色谱条件 丹参酮 A:色谱柱UL TRA SPH ER E TM OD S2C18(4.6mm×250mm,5Λm);流动相甲醇2水(15 5),流速1.0m l m in;检测波长270nm;理论塔板数以丹参酮 A峰记不低于2000。
丹参素:色谱柱Irregular2H C18(4.6mm×250mm,10Λm);流动相水2甲醇2二甲基甲酰胺2冰乙酸(90 4 4 2);流速:019m l m in;检测波长:280nm;理论塔板数以丹参素峰记不低于2000。
212 供试品溶液的制备 取丹参药材,粉碎过3号筛,分别取粉末0.3g,精密称定,置于具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50m l,密塞,称定重量,加热回流1小时,放冷,密塞,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,过0.45Λm滤膜,取续滤液作为测定丹参酮 A的供试品溶液。
另取丹参药材剪成小段后适当粉碎,精密称取各药材10g,加12倍量水回流提取2次(2、1.5小时)[2],提取液过滤,滤液浓缩至50m l,加95%乙醇使含醇量为65%,冷藏过夜,滤过,滤液定容至200m l,混匀,精密吸取滤液10m l于蒸发皿中,水浴蒸干,残渣以水溶解并定容至25m l,充分混匀,过0.45Λm滤膜,取续滤液作为测定丹参素的供试品溶液。
213 线性关系的考察 精密称取丹参酮 A对照品10m g于50m l棕色容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,摇匀;精密量取0.2、1、2、3、4和5m l于25m l棕色容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,依次吸取丹参酮 A系列对照液20Λl,注入液相色谱仪,测定,以丹参酮 A 的浓度为纵坐标,峰面积为横坐标,计算回归方程为C=1.013×10-8A+2.033×10-6,r=0.9998,表明丹参酮 A在0.002～0.040m g m l之间线性关系良好。
精密称取丹参素对照品10m g于50m l棕色容量瓶中,加过膜水溶解并定容至刻度,摇匀;精密量取1、3、5、7和9m l于10m l棕色容量瓶中,加过膜水至刻度,摇匀,依次吸取丹参素系列对照液20Λl,注入液相色谱仪,测定,以丹参素浓度为纵坐标,峰面积为横坐标,计算回归方程为C=7.587×10-8A,r=0.9999,表明丹参素在0.02～0.18m g m l之间线性关系良好。
214 精密度实验 分别取丹参酮 A对照液(0.008 m g m l)、丹参素对照液(0.06m g m l)连续进样6次,每次20Λl,测得峰面积,计算R SD分别为1.98%和1125%。
215 稳定性实验 吸取常温下供试品溶液,每隔一段时间进样20Λl分析,结果两种供试品溶液在24小时内基本稳定,R SD分别为2.87%和2.09%。
2.6 重复性实验 取丹参1号药材,依供试品溶液制备方法分别制备3份供试品溶液,进样20Λl分析,每份进样3次,测得丹参酮 A的平均含量为0.082%,R SD =1.59%;丹参素的平均含量为0.67%,R SD= 1179%。
2.7 样品测定 分别吸取各丹参药材的丹参酮 A 及丹参素的供试品溶液,进样20Λl分析,根据测得的浓度,计算丹参药材中丹参酮 A及丹参素含量。
结果见表1。
表1 丹参药材中丹参酮 A及丹参素的含量(%)丹参药材编号丹参酮 A丹参素10108016720109013630107012840109012550117013260109014470121016280128014190125014010016701533 小结与讨论311 含量测定结果表明 不同产地及同一产地不同地区的丹参药材中丹参酮 A及丹参素的含量存在明显差异,这可能与各产地丹参的生长环境和药材产地的加工方法有关。
丹参药材中两种成分的含量无一定内在关系,如山东产丹参质量明显优于其他产地,但丹参素的含量不与丹参酮 A成正比关系,又如丹参素含量最高的1号药材其丹参酮 A的含量却很低。
因此,建议《中国药典》增加丹参水溶性成分的定量指标,为保证丹参制剂的疗效,应根据制剂的工艺特点,进行相应定量指标检验。
312 本实验根据丹参液体制剂的工艺特点,以水醇法制备丹参药材的丹参素的供试品溶液,水醇法会沉去丹参的部分水溶性成分,将水煎液分别浓缩至5 1和1 1浓度进行醇沉,结果5 1浓度进行醇沉可平均少损失约15%。
重复性实验表明,测定结果具有良好的重复性,因此,丹参各药材的供试液之间具有可比性。
313 实验中还分别测定了丹参醇沉液冷藏1、4、6、1211天津药学 T ianjin Phar m acy 2003年6月 第15卷第3期日后丹参素的含量,结果无明显差异,表明丹参素在65%乙醇溶液中具有一定的稳定性。
参考文献1 苏子仁,陈建南,普惠芳,等1复方丹参片中丹参酮 A的变异因素和稳定化措施1中国中药杂志,2000,25(4):2472 刘重芳,张钰泉,戴居云,等1丹参不同提取工艺比较1中成药,1999, 21(8):41大承气汤的药材特性与显微鉴定Ξ张文萍,张国庆,张永升(天津市医药科学研究所,天津 300070)摘 要 目的:对中药大承气汤所用生药材进行药材品种特性与显微鉴定研究。
方法:首先对大承气汤所用的生药材进行品种性状鉴定,然后常规粉碎,过100目筛,在显微镜下观察组织特征。
结果:大承气汤所用药材均为药典规定品种。
结论:本项研究对大承气汤的质量鉴别和临床应用等提供了可靠依据。
关键词 大承气汤,药材特性,显微鉴定中图分类号:R927 文献标识码:A 文章编号:100625687(2003)0320012203Studi es on character and m i crostructure of m edi c i n a l ma ter i a ls i n Dachengq i TangZhang W enp ing,Zhang Guoqing,Zhang Yongsheng(T ianjin Institute of M edical and Phar m aceutical Science,T ianjin300070)ABSTRACT O bjective:To study the character and m icrostructure of m edicinal m aterials in D achengqi T ang.M ethods: F irst,identified s pecific p roperty of m edicinalm aterials in D achengqi T ang,then crushed to pow er,pass th rough a sieve w ith a nom inalm esh aperture of250Λm,observed m icrostructure using m icroscope R esults:T he m edicinalm aterials in D achengqi T ang are m easured up to CP.Conclusi on:T he study p rovided a reliable truth in quality identified and clinical using of D achengqi T ang.KE Y WOR D S D achengqi T ang,character of m edicinal m aterials,m icrostructure 大承气汤是《伤寒论》中的著名方剂之一。