高效液相色谱法测定果汁饮料中的维生素C含量_张杰
高效液相色谱法测定果粒橙中维生素C的含量
2013年第1期广东化工第40卷总第243期 · 105 · 高效液相色谱法测定果粒橙中维生素C的含量孙艳丽(菏泽学院化学化工系，山东菏泽 274015)[摘要]建立了反相高效液相色谱(HPLC)测定果粒橙中维生素C的测定方法。
采用LC-100PLUS液相色谱仪，Agilent TC-C18色谱柱(4.6×250 mm，5 μm)，以0.05 mol/L磷酸二氢钾∶甲醇=96∶4(V/V)作流动相，室温25 ℃，流速0.6 mL/min，检测波长288 nm。
维生素C浓度与峰面积在5~80 µg/mL的范围内呈现良好的线性关系，线性回归方程为y=11.2534x-17.0162(R=0.9989)。
相对标准偏差为1.40 %。
该测定方法操作简便、灵敏、准确、可靠，适用于多数饮料中维生素C含量的测定。
[关键词]高效液相色谱；果粒橙；维生素C[中图分类号]O652.1 [文献标识码]A [文章编号]1007-1865(2013)01-0105-02Analysis of Vitamin C in Orange by HPLCSun Yanli(Department of Chemistry and Chemical Engineering, Heze University, Heze 274015, China)Abstract: A method has established for the detection of Vitamin C (Vc) in orange juice by high performance liquid chromatography (HPLC). The LC-100PLUS HPLC system with Agilent TC-C18 column (4.6×250 mm, 5 μm) was used. The samples were analyzed using 0.05 mol/L potassium dihydrogen phosphate: methanol (V:V=96:4) as mobile phase with the flow rate of 0.6 mL/min. The temperature of the column was room temperature and the detection wave length was 288 nm. The standard working curve of Vc and peak area had a good linear relation between the concentration from 5 µg/mL to 80 µg/mL. The linear equation was y=11.2534 x-17.0162and the related coefficient equaled to 0.9989. The relative standard deviation of this method was 1.40 %. This method proved to be a simple, rapid, exact and reliable way to determine the content of Vitamin C in most of the beverages.Keywords: high performance liquid chromatography (HPLC)；beverage；vitamin C (Vc)饮料中含有的维生素C具有很高的医用价值，它是一种水溶性活性物质，在人体新陈代谢过程中起着举足轻重的作用[1]。
高效液相色谱法测定果珍中维生素C含量_金黎明
高效液相色谱法测定果珍中维生素C 含量 金黎明 姜 波 郝 苗 (大连民族学院生命科学学院,大连 116600) (大连市产品质量监督检验所,大连 116021) 摘要 用0.1%的草酸作为流动相,高效液相色谱法测定了果珍中维生素C 的含量。
维生素C 的浓度c 在0～300μg /m L 范围内与色谱峰面积A 呈正比关系,线性相关系数为0.9993。
方法的回收率为96.2%～103.2%,测定结果的相对标准偏差为0.6%(n =8)。
利用高效液相色谱法测定果珍中的维生素C 的含量,具有试剂用量少、操作简单、结果准确等特点,采用弱酸性的草酸为流动相,避免了维生素C 的分解。
关键词 维生素C 果珍 高效液相色谱 维生素C 是一种水溶性维生素,又被称为抗坏血酸,它是维持人体正常生理代谢的一种重要化合物,若严重缺乏会引起坏血病,维生素C 还可参与体内氧化还原反应,具有解毒作用。
近年的研究表明,维生素C 可预防癌症,具有抗氧化、抗衰老的作用,并对肝炎、肝硬化有疗效。
但是人体自身不能合成维生素C ,必须由食物中摄取,维生素C 广泛存在于新鲜水果、蔬菜中[1]。
维生素C 测定的方法一般有碘量法[2]、比色法[3]、荧光法[4]等,这些方法操作繁琐,近年来普遍采用高效液相色谱法测定维生素C[5,6]。
笔者利用高效液相色谱法,通过采用低浓度的草酸流动相,分析了果珍中的维生素C 含量,本方法所用试剂较少,操作简单,且通过采用弱酸性的草酸流动相,避免了维生素C 的分解,测定结果较为理想。
1 实验部分1.1 主要仪器与试剂 高效液相色谱仪:L C-10A 型,日本岛津公司; 二极管阵列检测器:S P D-M 10A 型,日本岛津公司; 高压输液泵:L C -10A 型,日本岛津公司; 自动进样器:S I L -10A 型,日本岛津公司; 维生素C 标准对照品:维生素C 含量99.7%。
中国医药上海化学试剂公司; 草酸:分析纯,沈阳医药有限公司; 甲醇:H P L C 级,使用前经0.45μm 滤膜过滤,美国T c d i a 公司; 草酸溶液:0.1%。
高效液相色谱法测定果汁饮料中的维生素C含量
Ａ ｓｒｃ： ｉｗ ｒ， Ｐ Ｃｈ ｓ ｅｎｕｅ ｅ ｒ ｉｅｔｅ ｏｔｎ ｏ ｉ ｍｎＣｉ ｂｖｒｇ． Ｄ １ （ ． ｒ ×２０ ｂ ｔ ｔＩ ｔ ｓ ｏｋ Ｈ Ｌ ａ ｅ ｓｄｔ ｄｔ ｍ ｎ ｎｅｔ ｆ ｔ ｉ ｅｅａｅＯ ＳＣ ８ ４ ６ ｍ ａ ｎｈ ｂ ｏ ｅ ｈｃ Ｖａ ｎ ａ ５ ｍｍ， ５ ｍ）
物 中获取 。 目前常 规 的维生 素 Ｃ含量 测 定 方法 有 紫外 分 光 光 度 法 … 、 量 法 Ｊ 比 色 法 Ｊ 荧 光 碘 、 、
高效 液 相色 谱 法 ， 果表 明该 方 法对 饮 料 中维 生 结 素 Ｃ能够 快速 、 准确 的分 离ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 析 。
１ 实验 部 分
１ １ 仪器 与试 剂 ．
Ｌ 一１０高效液相色谱仪 （ Ｃ １０ 配有二极管阵列检 测器 ） Ａ ｉ ｎ 公 司； ， ｇｅｔ ｌ 色谱 柱： Ｄ ｌ ４６ ｍ× Ｏ Ｓ Ｃ８ ．ｍ （ ２０ ｍ，Ｉ 。流动 相 ：． ％ 的草 酸 溶 液 ； 温 ： ５ ｍ ５ ｍ） ｘ ０１ 柱
ｉ ｓ ｄ ａ ｅ ｅ ｓ ｄ ｐ ａ ｅ ｃ ｌ ｍｎ Ｔｈ ． ％ ｏ ａ ｉ ｃｄ ｓ ｌ ｔ ｎ ｉ ｍｏ ｉ ｈ ｓ ． ｈ ａ ｅ ｅ ｇｈ ｏ ｈ ｔ ｉ ｅ ａｒ ｙ ｄ ｔ ｃｏ ｓ ｓｕ ｅ ｓ ｒ ｖ ｒ ｅ ｈ ｓ ｏｕ ． ｅ ０ １ ｘ ｃ ａ ｉ ｏｕ ｉ ｓ ｌ ｏ ｂ ｌ ｐ ａ ｅ Ｔ ｅ ｗ ｖ ｌｎ ｔ ｆｐ ｏｅ ｅ ｒ ａ ｅ ｅ ｔｒ ｉ ｅ ｄ ｄ
２ ７ ｍ． ｔ ｒ ｃ ｖ ｒ —ａｉ ｓ ９ ． ％ ～ １ ０ ２ ．ｈ ｏ ｒ ｌｔ ｎ ｃ ｅ ｉ ｉｎ ｓ ０ ９ ６ ． ｅ ｒ ｌｔ ｅ ｓ ｎ ａ ｄ ｄ ｖ ａｉｎ ｗａ ． １ ６ ｎ Ｉ ｅｏ ｅｙｒｔ ｉ ６ ４ ｓ ｏ ０ ． ％ ｔ ｅ ｃ ｒｅａ ｉ ｏ ｆ ｃｅ ｔｉ ． ９ ３ Ｔ ｅａ ｉ ｔ ｄ ｒ ｅ ｉ ｔ ｓ ０ ６ ％ ｏ ｈ ｖ ａ ｏ
用反相高效液相色谱法测定食物、药物和生理体液中的维生素C※
表 ２
结 果 和讨 论 （ 一）流动相的ｐ Ｈ和离子强度对Ｖ 峰 ｃ 的Ｋ 值和峰形的影响 ＇
为了使 Ｖ 在色谱上有适当的保留值， ｃ 分别以 不同ｐ 和不同浓度的 Ｎ ４ ２Ｏ 为 Ｈ ＨＨＰ ４
流动相，测定了 Ｖ ｃ峰的Ｋ值，结果见表 ２ ＇
荧光法［ ］ １ 和紫外法［ 。 本文报道了用反相 ０ ３ ］ ＨＰ Ｃ分离，紫外检 测 器 检 测，测定了食 Ｌ 物、药物和生理体液 中 的 Ｖ 。并对流动相 ｃ 的ｐ Ｈ值和离子强度作了探讨，对前人报道 的各种 Ｖ ｃ提取剂进行了筛选。 实 验 部 分
摇匀，其它处理同上。 药物：取数片 （ 粒）Ｖ ， 准确称重后， ｃ 研磨。以下处理同标准 Ｖ ｃ溶液的配制。即 准确称取 ２０ ｍ Ｖ ，用３ ５０ ｇ ｃ ％ＨＰ ３ Ｏ 分级稀释
３６ １ ５ ． ９８
［ ］ Ｅ Ｋ ｅ ，． ｈ ｍ ｔ ｒ １， ３ １ ５． ７ ． ｕｒ ＪＣ ｒ ａ ｇ， ９２７（ ６） ａ ｏ ｏ． ９ ［ ］ Ｍ Ｋ ｂ ， ｏｅ ．Ｃｅ ．Ｃ ｍ ｕｉ ０ ８ ． ｕｉ Ｃｌｃ ｚ ｈ ｏ ｍ ｎ． ， ｎ ｌｔ ｃ ｔ ，３
１０（９５． １４ １６ ）
ｏ ｔｅ ｓ ｍｏ ｅｔ ｔｅ ｏｄ ｄ ｅ ｒ ｃｎ ｆ ｆ ｔ ｍ ｎ， ｈ ｓｃｎ ａ ｔ ｔｉ ｅ－ ｈ ｉ ｒ ｅ ｎ ｈ ｈ ｄ
［３ Ｓ ． ｈｎ Ｓ ． ｅｇＰｏｅ ｉｇｏＳ ｏ １ ． Ｃ ｅ，． Ｐｎ， ｒ ｅ ｎｓ ｉ － ］ Ｙ Ｙ “ ｃｄ ｆ ｎ
Ｗｅ Ｇ ｒ ａ Ｓｍ ｏｉ ｏ Ｃ ｒｍ ｔ － ｓ ｅ ｎ ｐｓ ｍ ｎ ｈｏ ａ ｇ ｔ ｍ ｙ ｕ ｏ
高效液相色谱法测定维生素C
高效液相色谱法测定维生素C的含量【摘要】高效液相色谱法已经成为解决生命科学、医药学发展中各种难题的重要手段，在实验室中也广泛应用于物质的定性定量分析。
本实验中利用高效液相色谱法对维生素C进行定量分析，所采用的定量分析方法为外标法，通过做出标准溶液浓度与峰面积的标准曲线进而对样品中的维生素C进行定量检测。
【关键词】高效液相色谱法、维生素C、含量1、引言维生素 C（Vitamin C, Vc）又叫抗坏血酸，是一种水溶性维生素。
Vc 在体内参与多种反应，如氧化还原过程，在生物氧化和还原作用以及细胞呼吸中起重要作用。
人体内缺乏 Vc 时容易导致坏血病。
同时，由于 Vc 是一种水溶性的强有力抗氧化剂并参与胶原蛋白的合成，它同时还具有防癌、预防动脉硬化、治疗贫血、抗氧化和提高人体免疫力等功效。
Vc 在蔬果中普遍存在，尤其是柑桔类水果中含量较高。
樱桃、番石榴、辣椒、猕猴桃等水果中 Vc 含量在 50-300 mg/100 g。
溶于流动相（mobile phase）中的各组分经过固定相时，由于与固定相（stationary phase）发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。
高效液相色谱法（High performance Liquid Chromatography，HPLC）是在经典液相色谱法的基础上，于 60 年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。
它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱法（High Pressure Liquid Chromatography，HPLC）。
HPLC 系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。
其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。
有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等，现代 HPLC 仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。
高效液相色谱法测定维生素C
高效液相色谱法测定维生素C的含量【摘要】高效液相色谱法已经成为解决生命科学、医药学发展中各种难题的重要手段，在实验室中也广泛应用于物质的定性定量分析。
本实验中利用高效液相色谱法对维生素C进行定量分析，所采用的定量分析方法为外标法，通过做出标准溶液浓度与峰面积的标准曲线进而对样品中的维生素C进行定量检测。
【关键词】高效液相色谱法、维生素C、含量1、引言维生素 C（Vitamin C, Vc）又叫抗坏血酸，是一种水溶性维生素。
Vc 在体内参与多种反应，如氧化还原过程，在生物氧化和还原作用以及细胞呼吸中起重要作用。
人体内缺乏 Vc 时容易导致坏血病。
同时，由于 Vc 是一种水溶性的强有力抗氧化剂并参与胶原蛋白的合成，它同时还具有防癌、预防动脉硬化、治疗贫血、抗氧化和提高人体免疫力等功效。
Vc 在蔬果中普遍存在，尤其是柑桔类水果中含量较高。
樱桃、番石榴、辣椒、猕猴桃等水果中 Vc 含量在 50-300 mg/100 g。
溶于流动相（mobile phase）中的各组分经过固定相时，由于与固定相（stationary phase）发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。
高效液相色谱法（High performance Liquid Chromatography，HPLC）是在经典液相色谱法的基础上，于 60 年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。
它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱法（High Pressure Liquid Chromatography，HPLC）。
HPLC 系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。
其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。
有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等，现代 HPLC 仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。
橙汁饮料中Vc含量的测定
橙汁饮料中Vc含量的测定2010级环境科学1班古娟（201008011138）黄俊杰（201008041141）实验原理：1.维生素C又称抗坏血酸，分子式为C6H8O6，Vc呈酸性，具有较强的还原性，加热或在溶液中易氧化分解，在碱性条件下更易被氧化。
在弱酸性条件下，能与碘单质发生氧化还原反应，反应式为:C 6H8O6+I2=C6H6O6+2HI可利用此性质滴定，以淀粉（遇碘变蓝）为指示剂。
2.Na2S2O3见光易分解可用棕色瓶储于暗处，经8-14天后用K2Cr2O7做基准物间接碘量法标定Na2S2O3溶液的浓度，即称取一定量的K2Cr2O7，在弱酸性溶液中与过量的KI作用析出一定量的I2用K2Cr2O7滴定。
Cr2O72-+6I-+14H+==2Cr3++3I2+7H2O 此时应考虑K2Cr2O7基准物的反应条件：1）合适的酸度。
溶液酸度高反应快，酸度太大，I-易被空气，且Na2S2O3易分解，故酸度一般在0.2〜0.4 mol•L-1为宜。
2）K2Cr2O7与KI的反应速率慢，所以应在带塞的锥形瓶中暗处放置一段时间，使两者反应完全。
3）所用 KI溶液不得含有I2或K2Cr2O7。
4) 滴定前需将溶液稀释。
若滴定到终点后，溶液迅速变蓝表示Cr2O72-离子反应不完全，可能是放置的时间不够或溶液稀释过早。
3. I2可以用已标定好的Na2S2O3进行标定，考虑到I2在强酸性中也易被氧化，故一般选在PH为3-4的弱酸性溶液中进行滴定。
Na2S2O3在弱酸性及KI存在条件下定量滴定I2：I2+2S2O32-==2I-+S4O62-实验试剂：硫代硫酸钠（s） KI（s） HCl溶液（6 mol•L-1） HAc溶液（2 mol•L-1） K2Cr2O7标准溶液淀粉指示剂（5g/L） I2标准溶液（0.005mol•L-1）橙子饮料样品（Vc含量约为25mg/100ml）。
实验步骤：一、溶液的配制1、硫代硫酸钠（0.01 mol•L-1）：称取1.3g Na2S2O3•5H2O溶于500ml新煮沸的蒸馏水中，加入0.1g，保存于棕色试剂瓶中，放置一周后进行标定2、K2Cr2O7标准溶液：称取重铬酸钾固体0.5-0.6g，加水溶解后移入250 ml容量瓶中，用水稀释至刻度线处，摇匀。
高效液相色谱法测定食品和饮料中维生素C含量
中维 生 素 Ｃ含 量 的 方法 ， 现报 道 如 下 。
１ 研 究 资料
２２ 准确度试验 ．
本 试 验 采 用 猕猴 桃 为本 底 试 样 ， 均含 量 平
为 ０ ２ ２ ％ ， 了低 、 、 ３个 浓 度 的 加 标 回 收 ， 个 浓 度 ．５ ４ 做 中 高 每 各 做 ３个 。 回收 率 范 围 为 ９ ． ％ ～１ ２ ， 表 １ ９３ ０％ 见 。 表 １ 准 确度 实验
Ａ．维 生 素 Ｃ对 照 品 ； ．猕 猴 桃 样 品 ； Ｂ Ｃ．浓 缩 果 汁 ； ：维 生素 Ｃ １ 图 １ 维 生 素 Ｃ标 准 品 和样 品 色 谱 图
的试 样 ， 溶 液 颜 色 背 景 干 扰 大 ， 最 终数 据 有 影 响 。高 效 液 其 对 相 色 谱 法 具 有 高 效 、 速 、 定 、 敏 度 高 的特 点 ， 在 较 短 时 快 稳 灵 能 间 内完 成 测 定 ， 者 探 讨 了高 效 液 相 色 谱 法 测 定 食 品 及 饮 料 笔
法 ｌ 等 ， 是维 生 素 Ｃ具 有 较 强 的 还 原 性 ， 中性 和 碱 性 环 ２ 但 在
心
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触Ｉ． ｝ 且
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境 下 不稳 定 ， 热 迅 速 分 解 ， 测 方 法 操 作 步 骤 复 杂 ， 有 试 遇 检 具
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图 2 维生素 C 的标准曲线 Fig. 2 Standard curve of Vitamin C
2. 3 样品重复性实验 取同一样品 8 份，分别按 1. 4 处理并进行测
定，结果见表 2，其 RSD = 0. 61% 。果汁的色谱图 见图 3。
表 1 重复性实验结果 Table 1 Repetition of experiment results
表 3 不同果汁饮料的维生素 C 含量（ n = 3） Table 3 Content of Vc in different Beverages
名称 每日 C 橙汁饮品
美汁源果粒橙 纯果乐
维生素 C（ μg / mL） 128. 5 73. 8 72. 8
3结论
以 0. 1% 的草酸为流动相和提取液，紫外检测 波长 267 nm 的条件下分析饮料中维生素 C 含量 的研 究，具 有 良 好 的 线 性 关 系，相 关 系 数 为 0. 9983，方法的平均回收率为 96. 4% ～ 100. 2% ， 测定结果的 RSD 为 0. 61% 。该方法能够对饮料 中的维生素 C 含量进行快速、准确检测。
第8 期
张 杰等： 高效液相色谱法测定果汁饮料中的维生素 C 含量
1307
波长： 267nm。 维生素 C 标准对照品： 含量 100% ，约 100mg
（ 中国药品生物制品检定所） ； 草酸（ 纯度 99. 5% ， 分析纯，沈阳市新化试剂厂） ； 甲醇 （ HPLC 级，美 国 Tcdia 公司） ； 超纯水： 实验室自制。果汁饮料： 市售。 1. 2 色谱流动相的配制
［2］库尔班江，赛丽曼． 碘量法测水果蔬菜中维生素 C 的含 量［J］． 伊 犁 师 范 学 院 学 报 （ 自 然 科 学 版） ，2007，65 （ 3） ： 28-32．
［3］李玉红． 钼蓝比色法测定水果中还原型维生素 C［J］． 天津化工，2002，1（ 1） ： 31-32．
［4］鲍所言，李书存，胡汉芳，等． 动力学荧光法测定抗坏血
Key words： Vitamin C； high performance liquid chromatography（ HPLC） ； beverage
维生素 C 又称抗坏血酸，是水溶性维生素，是 知名度最高的营养素，不但是美容灵药，更是抗氧 化，保护细胞，甚 至 有 效 抗 癌 的 维 生 素，它 普 遍 存 在于蔬菜水 果 中，但 容 易 因 外 在 环 境 改 变 而 遭 到 破坏，人体自身无法合成维生素 C，必须额外从食 物中获取。目前常规的维生素 C 含量测定方法有 紫外 分 光 光 度 法［1］、碘 量 法［2］、比 色 法［3］、荧 光 法［4］等，这些方法操作步骤复杂，具有试剂和试样 溶液不稳定、灵敏度低、费时等缺点。近年来发展 用高效液相色谱法测定维生素 C［5-7］。本文采用
保健品中维生素 C 含量的研究［J］，中国卫生检验杂 志，2006，16（ 10） ： 1175-1176．
（ 责任编辑 李 方）
高效液相色 谱 法，结 果 表 明 该 方 法 对 饮 料 中 维 生 素 C 能够快速、准确的分离分析。
1 实验部分
1. 1 仪器与试剂 LC-1100 高效液相色谱仪（ 配有二极管阵列检
测器） ，Agilent 公 司； 色 谱 柱： ODS C18 （ 4. 6mm × 250mm，5μm） 。流动相： 0. 1% 的草酸溶液； 柱温： 40℃ ； 流速 1. 0mL / min； 检测器： DAD 检测器； 检测
2. 2 标准曲线 用流动相将维生素 C 标准储备液逐级稀释得
到浓度为 20. 0、40. 0、80. 0、100. 0、160. 0μg / mL 的 标准工作液，在 优 化 的 条 件 下 浓 度 由 低 到 高 进 样
图 3 果汁样品的色谱图 Fig. 3 Chromatogram of beverage sample
张 杰，许家胜* ，刘连利
（ 渤海大学科技实验中心，化学化工与食品安全学院，辽宁 锦州 121013）
摘要： 建立饮料中维生素 C 含量的高效液相色谱检测方法。采用 ODS C18（ 4. 6mm×250mm，5μm） 反相色谱柱， 以 0. 1% 草酸溶液为流动相，光电二级管阵列检测器，检测波长为 267nm。线性范围为 20 ～ 160μg / mL，相关系 数为 0. 9983，方法的回收率为 96. 4% ～ 100. 2% ，相对标准偏差为 0. 61% 。该方法简便、分析速度快，能够满 足果汁饮料中维生素 C 的检测要求。 关键词： 维生素 C； 高效液相色谱； 饮料 中图分类号： O657. 72 文献标识码： A
酸［J］． 分析实验室，2001，20（ 5） ： 4-6． ［5］侯冬岩，回瑞华，刘晓媛，等． 苹果汁中 VC 的 HPLC 分
析及抗氧化性的测定［J］． 食品科技，2006，7： 239-242． ［6］姜波． 菠萝中维生素 C 的高效液相色谱分析［J］． 大连
民族学院学报，2003，5（ 1） ： 52-53． ［7］王爱月，张向兵，李发生． 高效液相色谱法测定食品及
将果汁饮料用布氏漏斗过滤，称取 1. 0g 样品 于 25mL 的容量瓶中，用 0. 1% 的草酸溶液定容， 摇匀，使用前用 0. 45μm 滤膜过滤。
2 结果与讨论
2. 1 检测波长的选择 取维生素 C 标准样品，在 150nm ～ 375nm 波
长范围内进行波长扫描，得到光谱扫描图，如图 1。 结果显示在 267nm 处有最大吸收，维生素 C 也能 达到基线分离，因此本次实验选择 267nm 作为检 测波长。
收稿日期： 2011-09-12； 修回日期： 2011-10-19 基金项目： 辽宁省教育厅省级工程技术研究中心建设计划（ 2009402007） 资助 联系人简介： 许家胜（ 1977-） ，男，博士，副教授，主要从事新材料和食品科学研究。E-mail： jiashengxu@ bhu. edu. cn
Abstract： In this work，HPLC has been used to determine the content of Vitamin C in beverage. ODS C18（ 4. 6mm × 250mm，5μm） is used as reversed phase column. The 0. 1% oxalic acid solution is mobile phase. The wavelength of photodiode array detector is 267nm. Its recovery-ratio is 96. 4% ～ 100. 2% ，the correlation coefficient is 0. 9963. The relative standard deviation was 0. 61% . This HPLC method is simple and convenient，and is easy to control. This analysis method is fast-speed，high sensitivity，and be able to meet requirements of the Vitamin C in beverage industry.
检测，以浓度 为 横 坐 标，色 谱 峰 面 积 为 纵 坐 标，绘 制标准曲线。表 1 为维生素 C 标准溶液的浓度及 测定的结果，图 2 为标准曲线。由图 2 可见，标准 工作曲线的线性方程为： y = 45. 743x+125. 63，R2 = 0. 9985。以 2 倍基线噪声所对应的浓度计本方法 的检出限，维生素 C 的检出限为 0. 006 μg / mL。
按照 1. 5 色谱条件，将市售的饮料样品溶液 按 1. 4 处理后上机进行液相色谱分析，测定维生 素 C 的含量，结果见表 3。
参考文献：
［1］郑京平． 水果、蔬菜中维生素 C 含量的测定–紫外分光 光度快 速 测 定 方 法 探 讨［J］． 光 谱 实 验 室，2006，11 （ 4） ： 731-735．
第 24 卷第 8 期 2012 年 8 月
化学研究与应用
Chem化ica学l Re研sear究ch a与nd A应ppl用ication
文章编号： 1004-1656（ 2012） 08-1306-03
Vol． 24，No． 8
Aug．第，202142 卷
高效液相色谱法测定果汁饮料中的维生素 C 含量
2. 4 回收率实验 在 5 个维生素 C 含量均为 118 μg 的果珍样
品，分别加入 40 μg，80 μg，160 μg，240 μg，320 μg 维生素 C 标准品，测定其回收率，其结果见表 2。
1308
化学研究与应用
第 24 卷
表 2 回收实验结果 Table 2 Experiment results of recovery experiments
准确称取 1. 005g 的草酸于小烧杯中，用超纯 水溶解后转移至 1000mL 容量瓶中，用超纯水定 容，摇匀备用。 1. 3 标准溶液的配制
用电子天平准确称量 0. 0500g 维生素 C 标准 品于干净干燥的小烧杯中，用 0. 1% 的草酸溶液溶 解，转移到 50mL 棕色容量瓶中，稀释至刻度，摇 匀。得到维生素 C 的标准储备液，密封贮存。 1. 4 样品前处理
测定结果（ μg / mL）
86. 9，87. 4，87. 8，86. 1， 87. 3，86. 5，86. 8，87. 0
平均值 （ μg / mL）
86. 9
RSD（ % ） 0. 61
图 1 维生素 C 波长扫描图 Fig. 1 Scan image of wavelength of Vitamin C
Determination of content of Vitamin C in beverage by HPLC