流式临床检测项目之T细胞亚群及其意义
T细胞亚群进展及临床意义
极大多态性 60-70% 外周淋巴组织 100%
极少多态性 5-15% 黏膜上皮
100%
CD4+CD8- 60-65%
20-50%
CD4-CD8+ 30-35%
20-50%
CD4-CD8识别抗原 MHC限制 辅助细胞 杀伤细胞
<5% 8-17aa 经典MHC分子 Th细胞 Tc细胞
≥50% 简单多肽、HSP、脂类、多糖
STAT1
IFN-γ
T-bet IFN-γ STAT4
NFKB GADD45 p3B
T-bet
IFN-γ+++
STAT4
TCCR/ WSX-1
IL-12Rβ1
IL-12Rβ1
β2
β2
IL-12Rβ1
如果IL-2敲7 除IL-12基因细胞免疫功能下降80%
Pathogen
IL-12
IL-12
IL-23
Balb/C
Th 2 response Death
Th 1 response Recovery
BL/6
Signaling of IL-12 Receptor
p40
p35
1
2
Expression
1: Expressed on Th1, Th2, N.K., and B cells
2: Expressed on activated Naïve T, Th1, and N.K. cells
×
IL-4 inhibits TGF-β-induced Foxp3+ T cells IL-4 actively inhibits the induction of Foxp3 in the presence of TGF-β. The inhibition of Foxp3 expression by IL-4 is mediated through the IL-4-STAT6 pathway. The Foxp3 can directly interact with GATA-3 and this association inhibits GATA-3 mediated transactivation of IL-5, which is one of its target genes.
甲型H1N1流感患者中T细胞亚群检测的意义
意 义 （ Ｐ＞０ ０ ） Ｈ１ 均 ． ５ ； Ｎ１普通 组 Ｃ ＋、 ｍ＋、 Ｄ Ｄ Ｃ Ｃ ＋
１ ２ 主 要 试 剂 与 仪 器 ．
水平 均 明显高 于 Ｈ１ 重症 组 （ Ｎ１ 均Ｐ＜０ ０ ） ． １ 。但 从
（ Ｎ１重症 组 ） １ 例 为普 通 患 者 （ Ｎ１普 通 组 ） 外 周 静 脉 血 的 Ｔ 细 胞 亚 群 （ Ｄ ｃ 、 Ｄ 水 平 ， 与 ４ ＨＩ ，６ ＨＩ ］ ｃ 、 Ｄ Ｃ ） 并 ３例 正 常 对 照组 检 测 结 果 进 行 对 照 分 析 。结 果 Ｈ１ 重 症 组 Ｃ ＋、 Ｄ Ｃ ＋水 平 均低 于正 常对 照 组 （ Ｎ１ Ｄ Ｃ ＋、 Ｄ 均Ｐ＜ ０ ０ ） ．１ ，
１ 例， ｌ 年龄 １ ～ ７ ７ ６岁 。８例 为 重症 患 者 （ Ｎ１ ＨＩ 重
２ 结 果 各 组 Ｃ 、 Ｄ Ｃ 水 平 的 比 较 见 表 １ Ｄ ｃ 、 Ｄ 。由
表 １ 显示 ， Ｎ１ Ｈ１ 重症 组 Ｃ ＋、 Ｄ 、 ｍ Ｄ Ｃ ４ Ｃ ＋水平 均低 ＋ 于正常 对 照组 （ Ｐ＜ ０ ０ ） ＨＩ 均 ． １ ， Ｎ１普 通 组 Ｃ 、 Ｄ
Ｃ ４Ｃ ８ Ｃ 。 Ｄ ／ Ｄ ／ Ｄ 荧光 抗 体 、 ａｉＲＩ ｅ ｄ Ｃ ｌ ＴＥ Ｂ ａ ｓ试 Ｂ
剂盒 （ 国 Ｂ 公 司 ） 美 Ｄ 。Ｔｒｃ ｕ ＯｕＮＴ 绝 对 计 数 管 、
收 稿 日期 ： Ｏ Ｏ ８ ５ ２ １ —Ｏ 一Ｏ
均值 看 ， 常对 照组最 高 ， Ｎ１ 症组最 低 ， Ｎ１ 正 Ｈ１ 重 Ｈ１
［］ ３
Ｉｏ ， ｉ ｙ ， ｓ ， ｔａ ． ｎ ｖｔ ｏ ａ ｄ ｉ ｉ ｏ ｃ ａ ａ ｔ ｒ ｔ ｈ Ｙ Ｓｈ ｎ ａ Ｋ Ｋｉｏ Ｍ ｅ １ Ｉ ｉ ｎ ｎ ｖ ｖ ｈ ｒ ｃ ｅ － ｒ
T淋巴细胞及其亚群检测的临床意义
CD4+/CD8+的比值
• 评价那些自身免疫失调或被怀疑是免疫失 调或已知患有免疫缺陷的病人的免疫状态 ，此外，这一比值还可用来监测骨髓移植 病人以免受到急性GVHD的攻击 • CD4/CD8 升高：自身免疫性疾病，如类风 湿性关节炎、SLE。 • CD4/CD8 降低：病毒感染、恶性肿瘤、再 生障碍性贫血等。
辅助体液免疫 抗寄生虫感染
抑制性T细胞（Ts） 主要表面标志：CD8+CD28 功能：对免疫应答有重要的负调节功能，抑制性T 细胞功能的异常，常与T自身免疫性疾病、第I型 超敏反应等疾病发生有关。 调节性T细胞（Treg） 主要表面标记：CD4+CD25+ 功能：抑制免疫应答 可能的机制有： 直接接触； 分泌抑制性CKs； 此外，抑制CKs分泌，抑制APC等。
（自身抗原肽-MHC分子）
高亲和力结合 不结合或低亲和力结合 凋亡删除 存活
结果：成熟的SP、获得自身（中枢）免疫耐受。
2、T细胞在外周淋巴器官中的分化发育
• 初始T细胞主要定居于外周淋巴器官的胸腺依赖区 • T细胞在外周淋巴器官与抗原接触后，最终分化为 具有不同效应功能的T细胞亚群，效应T细胞和记 忆T细胞。
CD4/CD8比值与肿瘤
• 恶性肿瘤患者术前CD4/CD8比值低与术后比 值恢复正常。 • 当发生癌转移时,CD3 、CD4 细胞数明显减 少的同时CD8 细胞数明显增多,CD4/ CD8 比 值明显降低,提示恶性肿瘤患者晚期细胞免 疫功能更低,预后更差。 • 肿瘤终未期患者CD4/CD8比值异常，可预测 患者存活期。
2、TCRαβT细胞和TCRγδT细胞
• • • • • • • TCRγδT细胞 数量少，占5％ 多为CD4―CD8―（DN细胞）；少数为CD8+ 分布于皮肤、粘膜参与固有免疫，是抗感染的第一线细胞 TCRαβT细胞 数量多，CD4+或CD8+（SP细胞） TCR识别谱广，是参与免疫应答的主要细胞群
简述t细胞的亚群及功能
简述t细胞的亚群及功能
T细胞是机体免疫系统中的重要细胞，它可以调节有效地抵制外源感染物的侵害，保护机体免受病原体的入侵。
T细胞可以分为CD4+T 细胞和CD8+T细胞两类，它们在机体免疫系统中扮演着不同的角色。
CD4+T细胞被称为辅助性T细胞，它们能够抑制或促进免疫反应，参与和协调完成机体免疫对抗。
此外，CD4+T细胞还通过分泌细胞因子来促进B细胞和巨噬细胞的增殖和活化，从而发挥促进溶血和凝血的作用，产生特异性抗体。
CD8+T细胞是细胞毒性T细胞，它们主要通过分泌各种细胞因子、抗原相关物质和肽素来增强T细胞的免疫力，从而抑制机体感染病原体的活动，保护机体免受病毒传播的损伤。
另外，CD8+T细胞还可以参与增强巨噬细胞和B细胞的活化及其在抗体识别过程中的作用。
- 1 -。
2型糖尿病患者T淋巴细胞亚群测定及意义
2型糖尿病患者T淋巴细胞亚群测定及意义1. 背景糖尿病是一种常见的代谢性疾病，2型糖尿病是其中最常见的类型。
2型糖尿病患者的免疫系统功能可能有所改变，这种改变可能与疾病的发展和治疗有关。
T 淋巴细胞是免疫系统中的一部分，具有多种亚群。
测定2型糖尿病患者T淋巴细胞亚群可以帮助我们更好地了解其免疫系统功能的情况。
2. T淋巴细胞亚群及其意义T淋巴细胞是免疫系统中的一种白细胞，可分为多种亚群。
常见的T细胞亚群有CD4+ T细胞和CD8+ T细胞。
CD4+ T细胞是主要的免疫调节细胞，可以调节其他免疫细胞的功能，包括B淋巴细胞、巨噬细胞和其他T淋巴细胞。
CD8+ T细胞是杀伤病原体感染的细胞，它们可以通过产生毒素来杀死感染病原体的细胞。
2型糖尿病患者的T淋巴细胞亚群可能会发生改变。
例如，2型糖尿病患者的CD4+ T细胞数量可能会减少，导致免疫调节功能下降；CD8+ T细胞数量可能会增加，导致对胰岛细胞的杀伤作用增强，从而进一步损害胰岛功能。
因此，测定2型糖尿病患者T淋巴细胞亚群可以帮助我们更好地了解其免疫系统功能的情况，为糖尿病的防治提供指导意义。
3. 测定方法测定2型糖尿病患者T淋巴细胞亚群可以使用多种方法。
目前常用的方法有流式细胞术和酶联免疫吸附法（ELISA）。
3.1 流式细胞术流式细胞术是一种能够对细胞进行快速和准确分析的方法。
它可以同时测定多个表面标志物，包括T细胞亚群标志物。
通过识别细胞表面的标志物，可以将T 细胞区分为不同的亚群。
流式细胞术具有高灵敏度、高分辨率、低样本量的优点，广泛应用于生物科学领域。
3.2 酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法（ELISA）是一种基于抗体与抗原结合的方法。
通过在试剂盒中加入特定的抗体，可以将T细胞亚群分离出来，并且通过添加染色剂来检测分离出的T细胞亚群的量。
ELISA具有操作简单、成本低的优点，在一定程度上可以取代流式细胞术。
但是，它的灵敏度和准确性可能会受到影响。
t淋巴细胞亚群临床意义
t淋巴细胞亚群临床意义t淋巴细胞是免疫系统中的一类重要细胞，它们在维护机体免疫平衡和抵抗外界病原体方面起着重要作用。
t淋巴细胞根据表面抗原的不同可以分为多个亚群，每个亚群在免疫反应中发挥着不同的作用。
因此，对于t淋巴细胞亚群的临床意义的研究对于诊断和治疗一些疾病具有重要价值。
t淋巴细胞亚群的检测可以用于辅助诊断某些疾病。
例如，在艾滋病的诊断中，t淋巴细胞亚群CD4+和CD8+的测定是非常重要的指标。
艾滋病病毒（HIV）可以攻击和破坏CD4+ T细胞，导致机体免疫功能受损。
因此，通过检测CD4+ T细胞的数量，可以判断艾滋病的病情和预测疾病的进展程度。
t淋巴细胞亚群的检测可以用于评估免疫功能状态。
免疫功能的衰退会导致机体对感染和肿瘤的抵抗力下降。
通过检测t淋巴细胞亚群的比例和数量，可以评估机体免疫功能的状态。
例如，CD4+/CD8+比值的改变可以反映免疫功能的紊乱，提示机体免疫功能受损。
t淋巴细胞亚群的检测还可以用于监测免疫治疗的效果。
对于一些免疫性疾病和恶性肿瘤，免疫治疗已经成为重要的治疗手段。
通过监测t淋巴细胞亚群的变化，可以评估免疫治疗的效果。
例如，在免疫抑制剂治疗过程中，CD4+ T细胞和CD8+ T细胞的数量和比例的变化可以反映治疗的效果和安全性。
t淋巴细胞亚群的研究还可以为新药的研发和临床应用提供指导。
不同亚群的t淋巴细胞在免疫反应中的作用不同，对于某些疾病的治疗可能具有潜在的作用。
因此，研究t淋巴细胞亚群的功能和相互作用，可以为新药的研发和临床应用提供重要的理论依据。
t淋巴细胞亚群的临床意义非常重要。
通过对t淋巴细胞亚群的检测和研究，可以辅助诊断疾病、评估免疫功能状态、监测治疗效果，并为新药的研发和临床应用提供指导。
随着技术的不断进步和对t 淋巴细胞亚群功能的深入了解，相信其在临床应用中的价值将会越来越大。
希望未来能有更多的研究能够深入探讨t淋巴细胞亚群的临床意义，为人类健康做出更大的贡献。
流式细胞术检测T细胞亚群
4，实验步骤
①
混匀抗凝全血，加100ul全血于试管中，分别加入抗人 CD4-FITC,CD8-PE单克隆荧光抗体各10ul，用振荡器混匀， 避光放置15~30min（室温200C~250C) 加入溶血素2ml溶解红细胞，与振荡器上混匀，室温避 光放置10min，1000rpm离心10min，弃上清液。
三，流式细胞术的基本原理及应用
一） 流式细胞术（FCM）是一种可以对细胞或亚细胞结构
进行快速测量的新型分析技术和分选技术。
1，其基本原理是将悬浮分散的单细胞悬液，经特 异荧光染料染色后，放入样品管。
2，在气体压力的作用下，悬浮在样品中的单细胞悬液形成 样品流垂直进入流式细胞仪的流动室，沿流动室的轴心向 下流动，流动室轴心至外壁的鞘液也向下流动，形成包绕 细胞悬液的鞘液流，鞘液和样品流在喷嘴附近组成一个圆 柱流束，自喷嘴的圆形孔喷出，与水平方向的激光束垂直 相交相交点称为测量区。
现代的FCM数据采集和分析技术是从组织化学发 源的，其开拓者是Kamentsky。1965年，他在组织 化学的基础上提出了两个新设想 1）细胞的组分是可以用光光度学来定量测定的， 即分光光度术可以定量地获得有关细胞组织化学 的重要信息。
2）细胞的不同组分可以同时进行多参数测量，从 而可以对细胞进行分类。换句话说，对同一细胞 可以同时获得有关不同组分的多方面的信息，用 作鉴别细胞的依据。
②
③
加入PBS缓冲液（有0.1%的NaN3）1ml洗细胞，1000rpm 离心10min，倾去上清液，加入固定液300ul重悬细胞， BD-FACBCalibur流式细胞仪检测。 细胞的吸入，将装有细胞的FACS测定管放置到机器吸 管孔处，先预检测样品，然后进行实际检测。课根据细 胞的浓度选择测定的速度（低，中或高）。所有的数据 将自动存入微机。
血液透析患者血清T细胞亚群检测及临床意义
将T细胞亚群标记上荧光染料，以便在流 式细胞仪中识别和计数。
抗体特异性识别
利用特异性抗体与T细胞亚群结合，提高 检测的特异性和敏感性。
检测步骤
抗体标记
将特异性抗体与T细胞亚 群结合，并标记上荧光染 料。
样本采集
采集血液透析患者的血清 样本，确保样本无污染。
流式细胞仪检测
将标记好的样本通过流式 细胞仪进行检测，获取T 细胞亚群的计数和比例。
通过监测T细胞亚群的变化，可以评估疾病的发展和预后。
T细胞亚群参与疾病进程
02
T细胞在多种疾病中发挥重要作用，如感染、肿瘤和自身免疫性
疾病。
T细胞亚群可作为治疗靶点
03
针对T细胞亚群的免疫治疗策略正在研究中，可能为疾病治疗提
供新的途径。
04
血液透析患者血清T细胞亚群检测的临床 意义
对疾病诊断的价值
预后判断
根据T细胞亚群的变化情况，可以评 估患者的预后和康复情况，为制定个 体化治疗方案提供依据。
对治疗方案选择的指导意义
免疫调节
了解血液透析患者血清T细胞亚群分布，有助于制定针对性的免疫调节治疗方 案，改善患者的免疫功能。
感染预防
通过检测T细胞亚群，可评估患者的感染风险，为预防性使用抗菌药物或免疫调 节剂提供依据，降低感染发生率。
血液透析患者血清T细胞亚群检 测及临床意义
CONTENTS
• 引言 • 血液透析患者血清T细胞亚群检
测方法 • 血液透析患者血清T细胞亚群检
测结果分析 • 血液透析患者血清T细胞亚群检
测的临床意义 • 结论
01
引言
研究背景
血液透析是治疗肾功能衰竭的重要手 段之一，但长期透析可能导致液透析患者血清T细胞亚 群，可以辅助医生判断患者是否存在 免疫功能异常或感染等情况，有助于 早期发现潜在疾病。
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CD4+/CD45RO+
T辅助细胞诱导亚群
检测辅助/诱导记忆T细胞亚群，CD45RO阳性，识别记忆性T细胞；某些病毒感染性疾病处于进展期时它的数量增加，当接受抗病毒治疗后其数量又会下降。
%
CD4+/CD45RA+
抑制细胞诱导亚群
用于检测纯真（Nave）细胞亚群,也叫抑制细胞诱导亚群，CD62L阳性，当某些病毒感染性疾病处于进展期时它的数量下降，而当接受抗病毒治疗后其数量又会增加。在后一种情况下，它有助于区分病人在经抗病毒治疗后，免疫细胞（如CD4）数量增加是由于外周血中现有淋巴细胞亚群扩增而产生的纯真细胞，还是胸腺增生和正直的免疫重建。
④抗HIV药物疗效的重要判断指标。
414-1123 cells/μl
CD3+/CD8+/CD38+（%）
活化CD8细胞
CD38+细胞亚群是一群激活亚群，当HIV感染时高度扩增，对疾病的进程有重要的预后意义。这个细胞亚群对于在HAART中的儿童的60个变量参数中是个强大的指示器，具有极重要的驱势指示作用。
CD3+/HLA-DR+（%）
活化总T细胞
有助于了解移植、自身免疫、免疫缺陷、免疫失调及T-ALL时细胞激活状态。如外周血单核细胞表面HLA-DR的表达与手术和创伤后患者的预后成正相关，可作为手术患者一种可靠的免疫监测手段了解病人的天然免疫，有助于防止感染。
（ห้องสมุดไป่ตู้）
静止总T细胞
项目名称
项目说明
临床意义
绝对数
造血干细胞
流式细胞仪的应用为鉴定和计数造血干细胞提供了一个快速、定量、重复性好的方法。并且实现了造血干细胞的快速，准确的绝对计数。
最近，有人研究在此基础上加上CD38抗体，可以使造血干细胞的富集提高近十倍。
的检测
胞内细胞因子（IFN-γ,IL-4）
Th亚群细胞因子的平衡对于人体正常生理功能的维持发挥着极其重要的作用,细胞因子分泌的失调会导致各种疾病的发生，是很多疾病发生的根源和恶化的动力,将细胞因子调节到平衡状态是治疗这些疾病的重要手段。
1．CD4淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂的患者。
2．CD8淋巴细胞增多：见于自身免疫病，如SLE、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等。
3．CD4／CD8比值异常：艾滋病患者比值显着降低，多在0．5以下。比值降低的还有：SLE肾病、传染性单核细胞增多症、急性巨细胞病毒感染、骨髓移植恢复期等。比值增高见于类风湿性关节炎、I型糖尿病等。此外还可用于监测器官移植的排斥反应，若移植后CD4/CD8较移植前明显增加，则可能发生排异反应。
CD8+/CD28+（%）
细胞毒T细胞
检测细胞毒/抑制性T细胞，CD8+/CD28+为细胞毒T细胞，CD8+/CD28-为抑制性T细胞；可作为一些自身免疫性疾病、爱滋病及免疫缺陷的免疫检测指标。CD28亚群随HIV病程发展时数量降低。急性乙肝患者外周血CD8+CD28+细胞呈现明显的升高。
（%）
抑制性T细胞
50-84%
CD3/CD4（%）
T辅助细胞
27-51%
CD3/CD8（%）
T抑制毒细胞
15-44%
CD3-/CD19（%）
总B细胞
5-18%
CD3-/CD16+56（%）
NK细胞
7-40%
CD4绝对数（个/μl）
T辅助细胞绝对计数
CD4+T淋巴细胞记数测定的主要意义：
①用于HIV感染者的疾病分期：凡CD4+T淋巴细胞＜200/μl或CD4+T淋巴细胞的百分比＜14%的HIV感染者可归入艾滋病。
②判断HIV感染者的临床合并症（各种机会性感染与CD4+T淋巴细胞的相关性），如CD4+T淋巴细胞＜200/μl时，很容易发生卡氏肺囊虫肺炎；而巨细胞病毒感染和鸟分支杆菌感染常发生于CD4+T淋巴细胞＜50/μl的病人，极少见于CD4+T淋巴细胞＞100/μl的病人。
③帮助确定抗HIV药物治疗及机会性感染预防性治疗的适应症，例如，当CD4+T淋巴细胞＜200/μl时，应给予抗卡氏肺囊虫肺炎的预防性治疗。
流式临床检测项目之T细胞亚群及其意义
淋巴细胞亚群分析项目及其临床意义：
项目名称
项目说明
临床意义
正常值范围
CD3
总T细胞
淋巴细胞亚群的测定是检测机体细胞免疫和体液免疫功能的重要指标，它可以辅助诊断某些疾病(如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等)，分析发病机制，观察疗效及监测预后有重要意义；
自身免疫病：Th1↑
过敏性哮喘、过敏性皮炎：Th2↑
细胞外感染：Th2↑；细胞内感染：Th1↑
恶性肿瘤：Th2↑
器官移植：急排：Th1↑；
耐受：Th2↑
Th1:±
Th2:±
正常值范围
CD4+/CD25+（%）
调节性T细胞
CD4+CD25+调节性T(Tr)细胞是维持机体免疫耐受的重要因素之一，它由胸腺产生后输出至外周，并通过主动调节（dominant regulation）的方式抑制存在于正常机体内潜在的自身反应性T细胞的活化与增殖，从而调节机体的免疫力，如防止自身免疫性疾病的发生。CD4+C25+Tr细胞的数量减少或功能异常均有可能导致自身免疫病的发生。