浅谈D2菌株积累PHB的影响条件
ph对发酵的影响
ph值对发酵的影响发酵过程中培养液中的PH值是微生物在一定环境条件下代谢活动的综合指标，是一项重要的发酵参数，对菌体的生长和产品的积累有很大的影响。
因此必须掌握发酵过程中PH的变化规律，以便对发酵过程进行合理有效控制。
每一类菌都有其最适的和能耐受的PH范围。
细菌和放线菌在6.5~7.5，酵母在4~5，霉菌在5~7。
微生物生长阶段和产物合成阶段的最适PH往往也不一样，这不仅与菌种的特性有关，也取决于产物的化学性质。
因此，为了更有效地控制生产，必须充分了解微生物生长和合成产物的最适PH。
选择最适PH值的准则即是有利于菌的生长和产物合成，以获得较高的产量。
以利福霉素为例，由于利福霉素分子中所有碳单位都是由葡萄糖衍生的，在生长期葡萄糖利用情况对利福酶素B生产产生一定影响。
试验证明，其最适PH在7.0~7.5范围。
当PH在7.0时，平均得率系数达最大值，在利福酶素B发酵的各种参数中从经济角度考虑，平均得率系数最重要，故PH7.0是利福酶素B的最佳条件。
发酵过程中由于菌在一定温度及通气条件下对培养基中碳氮源等的利用,随着有机酸或氨基氮的积累,会使PH产生一定的变化.在适合菌生长及合成产物的环境条件下,菌体本身具有一定调节PH的能力,但是当外界条件变化过于激烈,菌体就失去调节能力,培养液中的PH就会发生波动.引起发酵PH下降的因素有:培养基中碳氮比例不当,碳源过多,特别是葡萄糖过量,或者中间补糖过多加之溶解氧的不足,致使有机酸大量积累而PH下降.消沫剂加的过多生理酸性物质的存在,氨被利用, PH下降.引起PH上升的因素有培养基中碳氮比例不当,氮源过多,氨基氮释放使PH上升.生理碱性物质存在中间补料中氨水或尿素等的碱性物质加入过多使PH上升.PH的变化会引起各种酶活力的改变,影响菌对基质的利用速度和细胞的结构,以致影响菌体的生产和产物的合成.产黄青霉素细菌的细胞壁随PH增大而减少,其菌丝的直径在PH6.0时为2~3um，而PH7.4时，菌体直径为2~18um，呈大量膨胀酵母状细胞，随PH下降菌丝形态将会恢复正常。
研究细菌在不同pH条件下的生长
研究细菌在不同pH条件下的生长细菌是一类微小的生物体，在自然界中广泛存在。
它们可以在各种不同的环境条件下存活和繁殖，其中之一就是pH值。
细菌对于pH值的适应性研究，对于我们了解细菌的生物学特征以及环境调控机制有着重要的意义。
pH值是衡量环境酸碱性的指标，它取值范围从0到14。
其中，pH值小于7的溶液被称为酸性溶液，而pH值大于7的溶液被称为碱性溶液。
细菌对于不同pH条件下的生长和代谢有着显著的适应性。
首先，细菌在酸性环境下的适应性值得探讨。
酸性环境对于细菌的生长具有一定的抑制作用，尤其是对于一些酸敏感的细菌来说。
然而，一些酸耐受性细菌对酸性环境却有着强大的适应性。
这些细菌具有特殊的耐酸机制，使它们能够在低pH值的环境中存活下来。
例如，乳酸菌就是一类典型的酸耐受性细菌，它们能够在发酵乳制品的过程中生长繁殖。
乳酸菌能够分解乳糖产生乳酸，并且通过质子转运机制将细胞外部的酸负载降低，从而保持了细胞内部pH值的稳定。
此外，细菌对碱性环境的适应性也是研究的重点之一。
碱性环境可能对细菌的细胞膜结构和功能产生损害，因此细菌需要通过多种方式来维持细胞内部的酸碱平衡。
一些细菌通过增加细胞外部蛋白质浓度来维持细胞内部的中性pH值。
此外，一些细菌还通过调节细胞膜中钠离子的浓度来适应碱性环境。
如极端嗜盐菌可以通过积累高浓度的钠离子，使细胞内部的钠浓度远高于细胞外的钠浓度，从而维持细胞内部的酸碱平衡。
除了酸碱平衡的调节，细菌还可以利用环境pH的变化作为信号来调控其生长和代谢状态。
许多细菌具有pH感受性蛋白质，这些蛋白质可以感知周围环境的pH值，并且触发特定的信号传导路径。
这些信号传导路径可以调控细菌的基因表达，从而使其适应不同的环境条件。
例如，酸敏感蛋白质能够感知酸性环境，激活与酸性环境适应相关的基因表达，从而提高细菌对酸性环境的适应性。
总而言之，细菌对于不同pH条件的适应性研究是一个重要的课题。
这一研究对于理解细菌的生物学特征、环境适应机制以及其在生态系统中的作用具有重要意义。
化学因素对微生物生长的影响
化学因素对微生物生长的影响1.pH值：微生物对环境的pH值敏感，每种微生物对于其适宜生长的pH范围有所不同。
酸性条件适宜产酸性微生物生长，碱性条件适宜产碱性微生物生长。
酸碱度的改变会影响微生物酶的活性，继而影响其生长。
2.温度：温度是微生物生长的重要因素，每种微生物对于适宜生长的温度范围有所不同。
根据生长温度的不同，微生物可以分为嗜热菌、嗜温菌、嗜寒菌和嗜冷菌。
高温可以使微生物酶活性增强，提高代谢速率；低温则会减缓生长速率。
3.溶解氧：微生物需要氧气进行呼吸和能量代谢，因此溶解氧浓度的高低对微生物生长有着直接的影响。
一些微生物是厌氧生物，它们无法在有氧环境下生长，需要无氧条件。
4.营养物质：微生物的生长需要吸收营养物质，如碳源、氮源、磷源、无机盐等。
不同的微生物对营养物质的需求有所不同，一些微生物可以利用多种碳源和氮源进行生长，而其他微生物则有选择性。
5.毒物与抑制物：一些物质对微生物有毒性或抑制作用，可以杀死或抑制微生物的生长。
例如，有些化学物质如重金属、有机溶剂、抗生素等对微生物生长有毒性。
抗生素常被用于控制微生物感染。
6.环境杂质：环境中的杂质如盐分、酸碱盐等也会对微生物生长产生影响。
高盐环境下的嗜盐微生物可以在高盐浓度条件下生长，而一些微生物在高盐环境下生长受到限制。
7.光照：光照是光合微生物生长的必要条件。
光合微生物通过光能进行光合作用，将二氧化碳转化为有机物，从而维持自身生长和代谢。
总结起来，化学因素对微生物生长起着关键作用，微生物对于不同化学条件的适应性各不相同。
了解和掌握这些化学因素对微生物生长的影响，有助于控制和利用微生物的生长过程，以提高产量和防止微生物引起的有害效应。
肌苷菌种生长过程中ph变化规律
肌苷菌种生长过程中ph变化规律
肌苷（Inosine）是一种核苷酸，通常用于生产药品和营养补充剂。
肌苷的生产通常涉及微生物发酵过程，而发酵过程中的pH值是关键参数之一，它直接影响菌种的生长和代谢。
在肌苷菌种生长过程中，pH值的变化规律通常受到多种因素的影响，包括菌种特性、培养基成分、发酵工艺参数等。
一般来说，肌苷菌种的生长过程中pH值的变化可以分为以下几个阶段：
延迟期：菌种刚接种到培养基中时，由于菌种适应新环境需要一定的时间，菌体数量增长缓慢。
此时，pH值的变化通常较小，可能会因为菌种的呼吸作用而略有下降。
对数生长期：在对数生长期，菌种迅速繁殖，菌体数量呈指数增长。
由于菌体代谢产生的有机酸等物质的积累，pH值通常会逐渐下降。
这个阶段是pH值变化最显著的时期。
稳定期：当菌种数量达到一定程度后，由于营养物质的限制和代谢产物的积累，菌种的生长速度逐渐减慢。
此时，pH值的变化可能会趋于稳定或略有上升。
衰亡期：随着营养物质的耗尽和代谢产物的进一步积累，菌种开始进入衰亡期，菌体数量逐渐减少。
此时，pH值可能会因为菌体自溶和代谢产物的进一步释放而发生变化。
在肌苷菌种发酵过程中，pH值的控制非常重要。
适宜的pH值可以促进菌种的生长和代谢，提高肌苷的产量。
因此，发酵过程中通常会通过添加缓冲剂、调整培养基成分、控制发酵温度等方式来调节pH值，以满足菌种生长和代谢的需求。
请注意，具体的pH值变化规律可能因菌种、培养基和发酵工艺的不同而有所差异。
因此，在实际生产过程中，需要根据具体情况进行pH值的监测和控制。
ph对发酵的影响
ph对发酵的影响发酵过程中培养液中的PH值是微生物在一定环境条件下代谢活动的综合指标，是一项重要的发酵参数，对菌体的生长和产品的积累有很大的影响。
因此必须掌握发酵过程中PH 的变化规律，以便对发酵过程进行合理有效控制。
每一类菌都有其最适的和能耐受的PH范围。
细菌和放线菌在6.5~7.5，酵母在4~5，霉菌在5~7。
微生物生长阶段和产物合成阶段的最适PH往往也不一样，这不仅与菌种的特性有关，也取决于产物的化学性质。
因此，为了更有效地控制生产，必须充分了解微生物生长和合成产物的最适PH。
选择最适PH值的准则即是有利于菌的生长和产物合成，以获得较高的产量。
以利福霉素为例，由于利福霉素分子中所有碳单位都是由葡萄糖衍生的，在生长期葡萄糖利用情况对利福酶素B生产产生一定影响。
试验证明，其最适PH在7.0~7.5范围。
当PH在7.0时，平均得率系数达最大值，在利福酶素B发酵的各种参数中从经济角度考虑，平均得率系数最重要，故PH7.0是利福酶素B的最佳条件。
发酵过程中由于菌在一定温度及通气条件下对培养基中碳氮源等的利用,随着有机酸或氨基氮的积累,会使PH产生一定的变化.在适合菌生长及合成产物的环境条件下,菌体本身具有一定调节PH的能力,但是当外界条件变化过于激烈,菌体就失去调节能力,培养液中的PH 就会发生波动.引起发酵PH下降的因素有:培养基中碳氮比例不当,碳源过多,特别是葡萄糖过量,或者中间补糖过多加之溶解氧的不足,致使有机酸大量积累而PH下降.消沫剂加的过多生理酸性物质的存在,氨被利用, PH下降.引起PH上升的因素有培养基中碳氮比例不当,氮源过多,氨基氮释放使PH上升.生理碱性物质存在中间补料中氨水或尿素等的碱性物质加入过多使PH上升.PH的变化会引起各种酶活力的改变,影响菌对基质的利用速度和细胞的结构,以致影响菌体的生产和产物的合成.产黄青霉素细菌的细胞壁随PH增大而减少,其菌丝的直径在PH6.0时为2~3um，而PH7.4时，菌体直径为2~18um，呈大量膨胀酵母状细胞，随PH下降菌丝形态将会恢复正常。
PHB产生菌发酵条件的研究
接 种到 平 板 上 ， ３ 于 Ｏ℃ 培 养 １ ２ｄ后 ， ～ 挑取 单 菌 落 ，
接 种 到种 子 培 养 基 中活 化 ，２℃ 培 养 ２ ３ ４ｈ后 ， ２ ５ 在 ３
替 代 石化 塑料 的理 想 的生 物 可 降 解 塑 料 。Ｐ ＨＢ不 仅 可 以用 于轻工 、 化工 、 品 、 业 等 现行 的塑 料 应 用 行 食 农 业 ， 可用 于 医疗卫 生 、 还 高新技 术 产 品研 制 等领域 。 自 １２ ９ ６年首次 发 现 Ｐ ＨＢ 以来 ， 国学 者 对 其 进 各 行 了大量 的研究 ， 括产 生 Ｐ 包 ＨＢ的微生 物 ， ＨＢ 的合 Ｐ
文 章 编 号 ：６ ２ ５ ２ （Ｏ １Ｏ －０ ６ —０ １７— ４５２ｌ）９ ０７ ４
由于 石化 塑料 的 难 降解 性 ， 量废 弃 塑 料 流 人 自 大 然 界 ， 成 严 重 的 环 境 污 染 ， 聚一 造 而 羟 丁 酸 （ ｏｙ Ｐ ｌ ｈ ｄｏ ｙ ｕ ｙａｅ Ｐ ） 一 种 在 生 态 环 境 中 能被 完 ｙ ｒ ｘ ｂ ｔｒｔ ， ＨＢ 是
势 。对 Ｓ Ｊ）３ Ｉ进 行 革 兰 氏 染 色， 检 观 察 其 为 革 兰 氏 阳 性 茵 ， 茵 ， 有 芽孢 产 生 ， 步 鉴 定 为 芽 孢 杆 菌属 。 通 过 正 ＮＩ 一 － 镜 杆 并 初
交 实验 确 定 了 Ｓ 【 ３ Ｉ 产 Ｐ ＮＪ －一 ） ＨＢ 的 最佳 发 酵 条 件 ， 以基 础 发 酵 培 养 基 为 基 础 、 萄糖 为碳 源 、 白胨 为 氮 源 时 ， 制 即 葡 蛋 控
成 途径 、 成动 力学 和机 制 ， ＨＢ的结 构 、 形 Ｐ 分子 量 及 生
pH的影响与控制.ppt
（2）菌体的形态： pH值还会影响某些霉菌的形态，如细胞壁厚
度、菌丝直径。
（3）细胞膜的电荷状态：引起膜渗透性的变化，从而影响菌对
养分的吸收和代谢产物的分泌
（4）产物的稳定性 （5）对某些生物合成途径有显著影响： pH值往往引起菌体
代谢过程的不同，使代谢产物的产量和比例发生改变。
微生物生长和生物合成的最适pH
目前，已比较成功地采用补枓的方法来调节pH值，
如氨基酸发酵采用流加尿素的方法，特别是次级代谢产物抗
生素发酵，更常用此法。这种方法，既可以达到稳定pH值的
目的，又可以不断补充营养物质，特别是能产生阻遏作用的
物质。少量多次补加还可解除对产物合成的阻遏作用，提高
产物产量。也就是说，采用补料的方法，可以同时实现补充
利用上述方法调节pH值的能力是有限的，如果达不
到要求，可以用在发酵过程直接补加酸或碱和补枓的方式
来控制，特别是补料的方式，效果比较明显。
过去是直接加入酸或碱来控制，但现在常用的是以
生理酸性物质(硫酸铵)和碱性物质(氨水)来控制。它们不 仅可以凋节pH值，还可以补充氮源。当发酵的pH值和氨 氮含量都低时，补加氨水，就可以达到调节pH 和补充氨氮 的目的。反之， pH值较高，氨氮含量又低时，就补加硫 酸铵。
营养、延长发酵周期、调节pH值和培养液的特性（如菌浓等）
等几个目的。
ห้องสมุดไป่ตู้
最成功的例子就是青霉素的补枓工艺，利用控制葡萄
糖的补加速率来控制pH值的变化范围（现已实现自动化），
其青霉素产量比用恒定的加糖速率和加酸或碱来控制pH值的
产量高25%。
产品菌生长最适ph范产物合成最适ph范围青霉素65726268链霉素63696773四环素61665963土霉素60665861红霉素66706873灰黄霉素64706265几种抗生素发酵的最适ph范围发酵过程中ph的变化发酵过程中由于菌种在一定温度及通气条件下对培养基中碳氮源等的利用随着有机酸或氨基氮的积累会使ph产生一定的变化
不同培养基和pH值对双孢菇母种菌丝生长的影响
不同培养基和pH值对双孢菇母种菌丝生长的影响摘要进行不同培养基及pH值对双孢菇母种菌丝生长的影响试验，结果表明：①双孢菇母种在麦粒+PDA综合的培养基上长势及生长速度都明显好于单纯的PDA培养基，说明在适当的C/N范围内增加养分可以更好满足双孢菇母种菌丝对养分的需求。
因此，麦粒+PDA综合的培养基或麦粒培养基可作为大面积生产双孢菇菌种的培养方案。
②对双孢菇2796，pH值为6.5～7.5，菌丝生长速度和长势稍好。
关键词双孢菇；培养基；pH值；生长影响双孢蘑菇（Agaricus bisporus）又称白蘑菇、蘑菇、洋蘑菇，是世界性栽培和消费的菌类之一，属食药两用菌类。
食用，味道鲜美，双孢菇蛋白质含量高达42%（干重），氨基酸种类十分丰富，核苷酸和维生素也很丰富，有5′-腺苷酸、5′-鸟苷酸、5′-尿苷酸及V■、V■、VD等；药用因其含大量酪氨酸酶，对降低血压十分有效，而且铁元素含量很高，适于贫血或低血糖人群食用。
近年来，辽宁省的双孢菇产量迅猛增长，优良的菌种是发展双孢菇产业的首要条件，该研究对双孢菇母种菌丝生长的适宜培养基及其pH值进行了筛选，旨在培育高质量的双孢菇菌种，更好地为生产者服务[1-2]。
1 材料与方法1.1 试验材料菌种及来源：双孢菇2796，由辽宁省农业科学院蔬菜所食用菌研究室提供。
1.2 试验方法1.2.1 培养基筛选。
试验按照培养基的种类设4个处理，处理A（PDA培养基）：土豆200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，水1 000 mL，pH值自然。
处理B（麦粒培养基）：麦粒30 g（浸泡12 h，用纱布包好，煮开，过滤，取其滤液），土豆200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，磷酸二氢钾0.3 g，硫酸镁0.15 g，水1 000 mL，pH值自然。
处理C（稻草发酵物水煮液培养基）：已发酵好的稻草30 g（纱布包好，煮开，过滤，取其滤液），土豆200，葡萄糖20 g，琼脂20 g，磷酸二氢钾0.3 g，硫酸镁0.15 g，水1 000 mL，pH值自然。
金针菇栽培技术pH值与培养基配方的影响分析
金针菇栽培技术pH值与培养基配方的影响分析金针菇是一种广泛栽培的可食用菌类，其可供给丰富的营养素及独特的口感使其备受欢迎。
在金针菇的栽培过程中，pH值和培养基配方是两个重要的因素，它们对菌丝生长和菌柄发育都有一定的影响。
本文将重点分析金针菇栽培技术中pH值和培养基配方的影响。
一、pH值对金针菇生长的影响pH值是指土壤或培养基酸碱度的测量指标，它对金针菇的生长起着至关重要的作用。
不同的菌种对pH值有不同的适应范围，而金针菇对酸性环境的适应性较强。
在金针菇的生长过程中，pH值影响菌丝生长速度、菌柄发育和产量。
首先，pH值对菌丝生长速度有明显的影响。
研究表明，在适宜的pH范围内，金针菇的菌丝生长速度较快。
一般来说，pH值在5.5-7.5之间对金针菇的生长最为有利。
当pH值过高或过低时，会抑制菌丝的生长，从而影响到产量和品质。
其次，pH值对菌柄发育也有重要影响。
适宜的pH范围能够促进金针菇菌柄的生长和发育，使其达到理想的形态和口感。
过高或过低的pH值都会导致菌柄形态不正常，如变短、变粗、变细等，降低整体的品质。
最后，pH值的调节还与金针菇的产量密切相关。
金针菇对酸性环境的适应性较强，因此调节培养基的pH值能够提高产量。
一般来说，将培养基的pH值控制在6左右，可以获得较高的金针菇产量。
二、培养基配方对金针菇生长的影响除了pH值外，培养基配方也对金针菇的生长起着重要的影响。
培养基是提供养分的基质，其中包含碳源、氮源、矿质元素等多种营养物质，合理的配方能够满足金针菇的生长需求。
1. 碳源的选择：碳源是金针菇生长的能量来源，常用的碳源有蔗糖、葡萄糖、玉米粉等。
不同碳源的含量和配比会影响菌丝生长速度和产量。
例如，适量添加蔗糖可以促进金针菇的菌丝生长和菌柄发育。
2. 氮源的选择：氮源是金针菇菌丝生长的重要组成部分，常用的氮源有蛋白质、氨基酸等。
在培养基中添加适量的氮源能够促进金针菇的菌丝生长和产量。
3. 矿质元素的添加：矿质元素是金针菇生长所必需的，包括钙、镁、铁等多种元素。
真养产碱杆菌发酵生产聚β—羟基丁酸（ＰＨＢ）的研究
真养产碱杆菌发酵生产聚∥一羟基丁酸(P隅)的研究杨明李红旗赵焕铸章银良沈忠耀(清华大学化工系北京100084)抽姜本文对真养产碱杆菌(A／caligcnos eutrophus)NCIMB ii 599在10L发酵罐中利用葡萄糖作为唯一碳承发酵生产聚芦一羟基丁酸《PHB)的发酵过程进行了研究．在咀葡萄糖为唯一碳器的发酵中，分别在缺氧情况下，限氧情况下．限磷情况下厦限磷扫缺氧情况下对茼体生长厦PIIB积累规律进行了研究．实验表明，氧和磷在茵体生长厦PHB的积】I【过程中起着重要作用．缺氧不利于茵体生长度积累PHB；在一定程度上睢制溶解氧则可促进PHB的积累；在供氧充足时．限磷有利于PHB大量积累：而限磷和缺氧条件下则抑制茵体生长和PHi]积累．采用限磷法发酵生产PHB，经72．5h后得到菌体细胞干重为138．29／L，PHB含量为111 789／L，PHB占细胞干重80．9x．关t词真养产碱杆茸聚芦一羟基丁酸发酵限氟限磷1引言聚卢羟基丁酸酯(PHB)是微生物在不平衡生长条件下作为储能物质而贮存于细胞内的一种高分子聚合物”“。
1925年法国巴斯德研究所M．Lemoigne在巨大芽孢杆菌中首次发现，并于1927 年从细胞中分离出来。
PHB不仅具有与化学合成塑料(如聚丙烯)相似的性质，而且还具有化学合成塑料所没有的特殊性能，如生物降解性，生物相容性，光学活性以及可利用再生资源进行生物合成等”“。
近十年来，随着化学合成塑料对环境造成日趋严重的“白色污染”，可生物降解材料的研究受到人们的广泛重视。
人们期待一种新型可生物降解塑料替代现有的石化合成材料。
其中，聚卢羟基丁酸(PHB)最为引人注目。
英国ICI公司经过15年努力，率先于1990 年采用真养产碱杆菌(Alcaligenes eutrophus)小批量生产出了商品名为“Biopol”的生物可降解塑料并继续对其进行研究开发。
目前，其生产规模已达年产1000t左右的水平并计划扩大生产规模■目前PHB大规模工业生产的最大障碍是成本较高。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
浅谈D2菌株积累PHB的影响条件
【摘要】DS9701-D2菌，细胞干重高为3.01mg/mL，PHB含量高达17.21%，实验发现，积累PHB最适的生长条件为30 oC左右，pH大概在6.0-7.0的范围，培养时间较短为35 h-55 h，最有效的碳源为丁酸。
预测所分离培养的D2菌具有培养PHB的工业化前景。
【关键词】D2；PHB生产菌；菌株；影响条件
聚-β-羟基丁酸酯（PHB）是许多细菌非平衡生长状态下积累的碳源、能源储藏物，它作为一种新型的可生物降解材料，不仅具有与化学合成塑料相似的物理机械特性，还具有完全的生物降解性以及较好的生物相容性，成为国内外生物材料领域的研究热点。
D2菌细胞呈球状，大小在2 μm×2 μm.左右，以单个、成对或不规则的堆状出现，不产生芽孢和孢囊，可产生大量粘液的荚膜，鞭毛端生，能运动，革兰氏染色阴性。
1.PH的影响
将DS9701-D2菌株分别接入pH=4、5、6、7、8、9的丁酸培养液中，于培养摇床上在30oC，180 r/min条件下培养48 h。
烘干菌细胞，用10 mL氯仿-乙醇液（氯仿：乙醇=2：1）提取PHB，各取0.01 mL PHB氯仿液，在325 nm下，测得吸光度，通过标准曲线算得PHB的浓度，得到PHB浓度与PH值的关系曲线（图1）。
由图可以看出，在pH=7时，即培养液为中性时，所培养的菌株生长数量最多，所以积累PHB浓度相对最高。
2.温度的影响
DS9701-D2菌株接种于7份pH=7的丁酸培养液，置于摇床中，分别设置温度为10、20、25、30、35、40、50 oC，培养时间为48 h。
测得PHB浓度，得到PHB浓度与温度的关系曲线（图2），可知30 oC为DS9701-D2菌株的最佳培养温度，另外25oC-40 oC是适应于DS9701-D2菌生长并积累PHB的温度。
3.生长时间的影响
准备8份丁酸培养液调节pH为7.0，接入D2菌株，置于30 oC的摇床中，分别在培养时间为0、6、8、12、24、36、42、48、54、60、72 h时，取出，烘干，提取PHB测得的PHB的浓度，绘出PHB浓度与培养时间的关系曲线（图3）。
可以看出10h后，菌株开始进入对数生长期。
35h后，进入成熟稳定期，此时PHB 浓度开始趋于稳定，但当培养时间超过55h后，PHB开始被降解，PHB浓度下降。
4.碳源的影响
将DS9701-D2菌株接种于葡萄糖、月桂酸、丁酸、乙酸钠、辛酸钠5种碳源的培养液中，调节PH=7.0，在30 oC的条件下，培养48 h。
测得各种碳源培养液PHB的浓度，见图4。
可知除乙酸钠外，其余4种碳源对DS9701-D2菌株积累PHB的影响不大，但是丁酸的效果最好。
5.成果意义
由以上数据可知，用DS9701-D2菌生产PHB的最适温度是30 oC左右，最适pH为7.0左右，培养时间最好是在35 h-55 h的稳定生长期，并且不会对PHB 产生降解作用，碳源选择丁酸。
D2积累PHB浓度在较大范围的温度20 oC-40 oC 之间都可以达到较高的满意值，PHB浓度在4.9-5.3 μg/mL左右，生长周期较短，8-25 h为对数生长期，25 h-55 h是稳定生长期，此时段PHB浓度达到稳定，大约在5.3 μg/mL左右，55h后细胞开始降解PHB，PHB浓度减少，最适pH=7.0，综上所述D2菌完全可以尝试用于工业上发酵生产PHB，相信会有不错的效果。
参考文献：
[1]罗玲，张大洋，赵鸣玉.聚32羟基丁酸酯的单体—3-丁内酯的制备[J].沈阳化工学院学报，2000，14 （3）：164-167.
[2]王加宁，杨合同，马沛生，姚碗生.聚羟基丁酸酯的化学合成及生物降解性[J].化学工业与工程，2005，22（2）：100-103.
[3]孙义，马沛生.据羟基丁酸酯的合成及应用[J].天津化工，2006.7，20（4）：40-42.
[4]吴桂芳，沈忠耀.转基因植物生产生物可降解塑料的研究进展[J].科技进展，2002，22（2）：5-10.
[5]杨宇等.生物合成材料聚β-羟基丁酸（PHB）的研究进展[J].生命科学研究，2006.12，10（4）：64-65.
[6]张伟，姜成英，戴欣等.微生物学通报，2004，31 （1）：26.
[7]黄建新，董兆麟.西北大学学报（自然科学版），1995，25 （6）：663.。