PEG沉淀法-病毒提纯方法
PEG收集沉淀病毒的方法
PEG收集沉淀病毒的方法
1、用超声波或冻融的方法使细胞破碎释放出病毒；
2、慢慢搅动并加入NaCl终浓度是0.5mol/L,有助于病毒的沉淀，再等量加入10％
PEG(一般使用的是PEG6000就可以了。
3、4过夜或放置一段时间；
4、8000r/min离心30分钟，收集病毒沉淀；
5、将病毒沉淀加入适量的PBS中，4℃过夜；
6、10000r/min离心1小时,沉淀即为浓缩的病毒。
还可以用梯度离心或其他方法进一步纯化。
取100mL毒液，10000r/min，10min，取上清。
上清中加入10Gpeg-20000和2gNaCl4℃
溶解过夜，20000r/min，离心30min，弃上清，留沉淀。
沉淀用3ml无菌PBS重悬，
转入透析袋中，2L预冷PBS透析液4℃透析，每4h换一次液，到第三次过夜透析。
将透析袋放入平皿中，覆盖蔗糖浓缩至1.5ml，500μl1支分装至EP管中。
-80℃备
用。
将细胞反复冻融3次后，则获得病毒液。
取500mL病毒液，于4℃2000rpm离心10min，取上清；在超净工作台中，向上清中加入PEG6000和10gNaCl，边加边轻轻搅拌混匀，于4℃溶解过夜（注意要溶解完全，防止有未溶解的PEG）；于4℃8500g离心30min，弃上清，留取沉淀；沉淀用1.5mL无菌的PBS重悬，转入透析袋中，置于2L的预冷的PBS中进行透析，每4h更换一次透析液，至第3次时透析过夜；用蔗糖进行浓缩，500μL/每支分装到EP管中，-80℃保存；采用紫外分光光度计和BCA进行蛋白定量，定量结果为20.5mg/mL。
【优质文档】peg8000浓缩病毒原理-实用word文档 (10页)
本文部分内容来自网络整理，本司不为其真实性负责，如有异议或侵权请及时联系，本司将立即删除！== 本文为word格式，下载后可方便编辑和修改！ ==peg8000浓缩病毒原理篇一：慢病毒浓缩方法一超速离心沉淀法1. 取6个Ultra-clear SW28离心管，用70%乙醇消毒后，放在超净工作台中打开紫外灯继续消毒30分钟。
2. 每个Ultra-clear SW28离心管中加入约32ml的预先处理的病毒上清液。
3. 取一支10ml的移液管，吸取12 ml 20%的蔗糖溶液。
将移液管一直插入到离心管的底部，缓慢将蔗糖溶液打出4 ml。
同样地，将剩下8 ml的蔗糖溶液分别加入到另两个离心管中。
另取一支干净的移液管，对剩下3管进行同样处理。
4. 用PBS调整各管的重量，使对应的离心管之间的重量相差不超过0.1g。
5. 按次序将所有6个离心管放入Beckman SW28 超速离心转头中。
6. 4℃，25，000 rpm. (82，700g) 离心2小时。
7. 小心将管子从转头中取出。
倒掉上清，将离心管倒扣在纸巾上放置10分钟使剩余的上清流干。
吸掉剩余的液滴。
在管底应当有可见的沉淀。
8. 每管中加入100ml 不含钙和镁的PBS洗下沉淀。
9. 将SW28超速离心管插入到50ml锥底离心管中，盖上盖子。
10. 在4℃溶解2小时，每隔20分钟轻轻震荡。
11. 4℃，500g离心1分钟，使溶液集中于管底。
12. 用200μl 移液器轻柔吹打使沉淀重悬。
避免产生泡沫。
将所有管中的液体集中到一个SW28离心管中。
13. 集中后的病毒悬液分装成50μl 每份，保存在成品管中。
用碎干冰速冻后储存在-80 ℃。
方法二 PEG-8000浓缩法1. 5X PEG8000+NaCl配制称取NaCl 8.766 g; PEG8000 50g溶解在200mlMilli-Q纯水中；121摄氏度 30min 湿热灭绝 30min；保存在4℃。
病毒纯化浓缩方法
病毒纯化浓缩方法方法一超速离心沉淀法1 仪器超速离心机(BECKMANOPTIMAL-80XP) 50000~80000rpm相对离心力最大可达510000X g；高速冷冻离心机(BECKMAN AVANTIJ-26XP)20000~25000rpm最大离心力为89000X g；超速离心管(Beckman 344058), Ultra-clear SW28离心管2 方法步骤(1)转染后44-48 小时，收集上清液到50ml 离心管内，并加入20ml Production培养基以便第二轮病毒的收集。
将收集的上清液4C, 4000g 离心10分钟，去除细胞碎片，然后0.45卩m滤膜过滤到40ml超速离心管中。
(2)取6个Beckman超速离心管，70聽醇清洗后在生物安全柜中风干并紫外消毒30min。
(3)每个Ultra-clear SW28I加入30ml预先处理过滤过的病毒上清。
(4)取一支10ml的移液管，吸取12 ml 20%勺蔗糖溶液(PBS配制)。
将移液管一直插入到离心管的底部，缓慢将蔗糖溶液打出4 ml，形成一个蔗糖垫。
同样地，将剩下8 ml 的蔗糖溶液分别加入到另两个离心管中。
另取一支干净的移液管，对剩下3 管进行同样处理。
(5)务必确定离心管没有裂缝且用PBS调整各管重量使两两平衡。
(6)4C离心，25000rpm (82700g) 2 h。
(7)离心完毕后小心取出超速离心管，小心弃去上清液，留下管底沉淀。
管底可见少量的半透明或白色沉淀。
将超速离心管倒置在吸水纸上晾干约10min，并用Tip 头吸去管壁上多余的液体。
(8)每管中加入100ul不含钙和镁的冷PBS洗下沉淀。
(9)将SW28超速离心管插入到50ml锥底离心管中，盖上盖子。
(10)在4C溶解2小时，每隔20分钟轻轻震荡。
(11)4C, 500g离心1分钟，使溶液集中于管底。
(12)用200卩l移液器轻柔吹打使沉淀重悬。
避免产生泡沫。
λ噬菌体基因组DNA提取试剂盒(PEG沉淀法)
λ噬菌体基因组DNA 提取试剂盒(PEG 沉淀法)产品：噬菌体载体广泛用于文库筛选，目的克隆培养获得大量的噬菌体颗粒需要提取λ噬菌体DNA 来开展测序等后续工作。
λ噬菌体裂解培养物离心后的上清， 首先用RNase A /DNase Ⅰ混合酶消化去除残留的宿主菌DNA/RNA ，沉淀收集噬菌体，通过酚异戊醇等提取，残留碎片通过沉淀离心去除，通过一系列快速的漂洗、离心的步骤，将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除，获得DNA 的量很高，但是纯度一般，但是足够用于大多数分子生物学实验。
Leagene λ噬菌体基因组DNA 提取试剂盒(PEG 沉淀法)是简便的λ噬菌体基因组DNA 的试剂盒，其提取原理是通过PEG 沉淀、酚异戊醇等提取，残留碎片通过沉淀离心去除，通过一系列快速的漂洗、离心步骤，将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除，即可获得λ噬菌体基因组DNA ，可进行酶切、PCR 等下游实验，仅用于科研领域，不用于临床诊断或治疗。
组成：操作步骤(仅供参考)：以下操作以10ml 噬菌体感染细菌培养上清液为例。
1、 准备工作：向RNase A 和DNase I 分别加入TE buffer 吹打，颠倒混匀，充分溶解RNaseA 和DNase I 后，按照每次使用量分装－20℃冻存，6个月有效。
2、 将氯仿处理后的λ噬菌体感染的液体培养液转移至离心管，离心，去除细菌碎片，取上清液。
一般建议离心，如果效果不佳可以考虑，但转速过高容易导致噬菌体也沉淀至管底，降低产量。
3、 取上清液，加入 RNase A 和 DNase I ，充分混匀，37℃培养30min 。
注意：噬菌体培养上清液会因生长和裂解情况不同致使残留的RNA/DNA 量不液不同，编号 名称NE0210 50TStorage 试剂(A): RNase A 10mg RT 试剂(B): DNase Ⅰ 10mg RT 试剂(C): 噬菌体沉淀液 50ml RT 试剂(D): SM buffer 50ml 4℃ 试剂(E): 噬菌体裂解液 1ml RT 试剂(F): 蛋白清除液 100ml 4℃ 避光 试剂(G): 噬菌体漂洗液 100ml RT 试剂(H): TE buffer 5mlRT使用说明书1份RNase/DNase消化过度，可能减少产量；消化不完全，DNA、RNA可粘走部分噬菌体，一般RNase可以进行调整，可根据实际情况适当调节用量和消化时间。
PEG沉淀法_病毒提纯方法
1. Viruses such as baculovirus can be concentrated by polyethylene glycol precipitation.2. Adjust the pH of the virus-containing supernatant to 7.2-7.5. Polyethylene glycol (PEG, MW 6,000) is added to a final concentration of 8% (w/v).3. Stir at 4℃for 2 hours.4. Centrifuge at 10,000 x g for 2 hours.5. Resuspend the pellet in a small volume of appropriate buffer ( e.g., RNase-free ddH2 for virus RNA prep).沉淀法-病毒提纯方法主要是从稀的悬浮液中浓缩病毒，有中性盐沉淀法、聚乙二醇(PEG)沉淀法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、皂土法和鱼精蛋白沉淀法等。
1.中性盐沉淀法：病毒一般在45%以上饱和度的硫酸铵溶液中沉淀，且保持其感染性。
在含有病毒的组织培养液中加入等体积的饱和硫酸铵，可以很容易地沉淀某些病毒如狂犬病毒、鸡新城疫病毒等。
2.聚乙二醇沉淀法：聚乙二醇(PEG)为水溶性非离子型聚合物，具有各种不同的分子量，用于病毒沉淀的主要是分子量为2 000～6000的PEG。
将PEG配成50%左右的溶液，或直接将固体PEG加于病毒悬液中，使其达到所需浓度，通常在4℃搅拌过夜，然后离心使病毒沉淀。
Tanncock(1985年) 成功地用PEG浓缩了禽脑脊髓炎病毒。
3.有机溶剂沉淀法：甲醇、氯仿、正丁醇、氟碳化合物等都可用于提纯病毒，但乙醚、氯仿等脂溶剂对于具有脂质囊膜的病毒具有破坏和灭活作用，故不适于这类病毒的浓缩提纯。
PEG沉淀法-病毒提纯方法
1. Viruses such as baculovirus can be concentrated by polyethylene glycol precipitation.2. Adjust the pH of the virus-containing supernatant to 7.2-7.5. Polyethylene glycol (PEG, MW 6,000) is added to a final concentration of 8% (w/v).3. Stir at 4℃for 2 hours.4. Centrifuge at 10,000 x g for 2 hours.5. Resuspend the pellet in a small volume of appropriate buffer ( e.g., RNase-free ddH2 for virus RNA prep).沉淀法-病毒提纯方法主要是从稀的悬浮液中浓缩病毒，有中性盐沉淀法、聚乙二醇(PEG)沉淀法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、皂土法和鱼精蛋白沉淀法等。
1.中性盐沉淀法：病毒一般在45%以上饱和度的硫酸铵溶液中沉淀，且保持其感染性。
在含有病毒的组织培养液中加入等体积的饱和硫酸铵，可以很容易地沉淀某些病毒如狂犬病毒、鸡新城疫病毒等。
2.聚乙二醇沉淀法：聚乙二醇(PEG)为水溶性非离子型聚合物，具有各种不同的分子量，用于病毒沉淀的主要是分子量为2 000～6000的PEG。
将PEG配成50%左右的溶液，或直接将固体PEG加于病毒悬液中，使其达到所需浓度，通常在4℃搅拌过夜，然后离心使病毒沉淀。
Tanncock(1985年) 成功地用PEG浓缩了禽脑脊髓炎病毒。
3.有机溶剂沉淀法：甲醇、氯仿、正丁醇、氟碳化合物等都可用于提纯病毒，但乙醚、氯仿等脂溶剂对于具有脂质囊膜的病毒具有破坏和灭活作用，故不适于这类病毒的浓缩提纯。
以冷沉淀peg沉淀及色谱层析法制备血友病因子的方法
以冷沉淀peg沉淀及色谱层析法制备血友病因子的方法1. 引言1.1 概述血友病是一种遗传性出血性疾病，由于血浆中缺乏凝血因子的正常活性而导致。
目前，制备和生产血友病因子是治疗该疾病的关键步骤之一。
本文旨在探讨以冷沉淀PEG沉淀及色谱层析法制备血友病因子的方法。
1.2 研究背景传统的血友病因子制备方法主要包括冷沉淀和PEG沉淀两种。
冷沉淀法通过低温使凝集素活化因子在溶液中形成纤维素样聚集体，并通过分离纯化过程获得所需因子。
而PEG沉淀则借助聚乙二醇（PEG）引起凝集素活化因子及其他杂质的沉淀，经过多次提取和洗涤后，得到纯凝集素活化因子。
然而，这两种方法都存在一定的局限性和不足之处。
1.3 目的基于以上问题，在本文中我们将结合冷沉淀与PEG沉淀的优点并应用色谱层析技术来改进血友病因子的制备方法，以提高制备效果和纯度。
同时，我们将探讨不同色谱层析方法在制备血友病因子中的应用，并对其实验条件与技术要点进行详细描述。
通过本研究，将为血友病因子的制备提供一种全面而有效的工艺方法，并为未来相关研究方向提出建议。
2. 冷沉淀PEG沉淀制备血友病因子方法2.1 冷沉淀法原理冷沉淀法是一种常用的蛋白质分离纯化方法，通过调节温度和盐浓度，使蛋白质发生凝聚沉淀。
其原理是蛋白质在低温条件下与盐结合形成复合物，从而使蛋白质变得不溶于水，并最终以沉淀的形式分离出来。
2.2 PEG沉淀原理聚乙二醇（PEG）是一种常用的沉淀剂，在制备血友病因子中起到促进凝聚反应的作用。
当PEG加入到体系中时，通过与血友病因子发生相互作用，形成较大的复合物，这些复合物具有较高的溶解度和稳定性。
2.3 实验步骤及操作要点（1）制备样品：将含有血友病因子的样品进行预处理，如去除杂质、浓缩等。
（2）调节pH值：根据实验要求，调节样品溶液的pH值以利于冷沉淀过程。
（3）加入盐溶液：选取合适的盐溶液加入样品中，以提高蛋白质与PEG的结合能力。
（4）冷却沉淀：将样品置于低温环境中，一般在4℃以下进行沉淀反应。
peg共沉淀转化原生质体
PEG共沉淀转化原生质体是一种有效的基因转移和转化方法。
这种方法利用聚乙二醇（PEG）的高分子量、极性和水解性质，能够使原生质体和DNA之间发生瞬时结合，进而
使DNA进入细胞内部。
在具体的操作过程中，首先需要将需要转化的细胞进行培养，并收集其原生质体。
然后，将含有目的基因的DNA 与PEG混合，形成复合物。
当复合物与原生质体混合时，PEG 会介导复合物与细胞膜的融合，从而使目的基因进入细胞。
这一方法的应用范围广泛，但并不是所有类型的细胞都适用于这一方法。
值得注意的是，PEG转化法不适用于所有类型的细胞，只适用于一定范围类型的细胞。
此外，也有观点认为PEG转化原生质体的原理是利用PEG介导的细胞融合过程，将外源基因导入细胞内，实现基因转移和转化。
这种方法最终能够使DNA被吸收到细胞内部，与细胞核内的染色体结合，并在细胞内进行表达。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1. Viruses such as baculovirus can be concentrated by polyethylene glycol precipitation.2. Adjust the pH of the virus-containing supernatant to 7.2-7.5. Polyethylene glycol (PEG, MW 6,000) is added to a final concentration of 8% (w/v).3. Stir at 4℃for 2 hours.4. Centrifuge at 10,000 x g for 2 hours.5. Resuspend the pellet in a small volume of appropriate buffer ( e.g., RNase-free ddH2 for virus RNA prep).沉淀法-病毒提纯方法主要是从稀的悬浮液中浓缩病毒，有中性盐沉淀法、聚乙二醇(PEG)沉淀法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、皂土法和鱼精蛋白沉淀法等。
1.中性盐沉淀法：病毒一般在45%以上饱和度的硫酸铵溶液中沉淀，且保持其感染性。
在含有病毒的组织培养液中加入等体积的饱和硫酸铵，可以很容易地沉淀某些病毒如狂犬病毒、鸡新城疫病毒等。
2.聚乙二醇沉淀法：聚乙二醇(PEG)为水溶性非离子型聚合物，具有各种不同的分子量，用于病毒沉淀的主要是分子量为2 000～6000的PEG。
将PEG配成50%左右的溶液，或直接将固体PEG加于病毒悬液中，使其达到所需浓度，通常在4℃搅拌过夜，然后离心使病毒沉淀。
Tanncock(1985年) 成功地用PEG浓缩了禽脑脊髓炎病毒。
3.有机溶剂沉淀法：甲醇、氯仿、正丁醇、氟碳化合物等都可用于提纯病毒，但乙醚、氯仿等脂溶剂对于具有脂质囊膜的病毒具有破坏和灭活作用，故不适于这类病毒的浓缩提纯。
4.等电点沉淀法：病毒粒子在等电点时，所携带的正电荷与负电荷相互中和，因而失去相互排斥的作用而发生沉淀。
多数病毒的等电点在pH4.5～5.5之间，因此在pH3～6范围内均可沉淀，由于一部分细胞成份在等电点时亦发生沉淀，此法效果不太理想，但从感染的组织培养液中浓缩病毒，可以获得较好结果。
应用酸性范围的等电点沉淀或分级沉淀病毒时，必须注意pH对病毒活性的影响及病毒粒子电荷与组织蛋白电荷的差异。
5.皂土法：Girin(1989年)应用皂土在酸性条件下(pH4～4.5)吸附轮状病毒SA-11，再在碱性条件下（pH8.5），又使其洗脱下来，从而达到纯化目的。
6.鱼精蛋白沉淀法：鱼精蛋白为碱性蛋白，具有携带其它蛋白质共沉淀的作用，能和直径大于50nm的病毒共同沉淀而不影响病毒的感染力。
当向这种沉淀物加入1mol/LNaCl时，病毒又重新释放到悬液中，而鱼精蛋白仍然沉淀。
直径小于50nm的小型病毒则不与鱼精蛋白共同沉淀。
因此，可利用鱼精蛋白去除病毒材料中直径大于50nm的异种蛋白质。
聚乙二醇HOCH2(CH2OCH2)nCH2OH(n＞4)( Polyethylene Glycol 简写为PEG)，它的亲水性强，溶于水和许多有机溶剂，对热稳定，有广泛围的分子量，在生物大分子制备中，用的较多的是分子量为6000～20000的PEG。
PEG 的沉淀效果主要与其本身的浓度和分子量有关，同时还受离子强度、溶液pH 和温度等因素的影响。
在一定的pH 值下，盐浓度越高，所需PEG 的浓度越低，溶液的pH 越接近目的物的等电点，沉淀所需PEG 的浓度越低。
在一定范围内，高分子量和高浓度的PEG 沉淀的效率高。
以上这些现象的理论解释还都仅仅是假设，未得到充分的证实，其解释主要有：①认为沉淀作用是聚合物与生物大分子发生共沉淀作用。
②由于聚合物有较强的亲水性，使生物大分子脱水而发生沉淀。
③聚合物与生物大分子之间以氢键相互作用形成复合物，在重力作用下形成沉淀析出。
④通过空间位置排斥，使液体中生物大分子被迫挤聚在一起而发生沉淀。
有机聚合物沉淀的优点是：①操作条件温和，不易引起生物大分子变性；②沉淀效能高，使用很少量的PEG 即可以沉淀相当多的生物大分子；③沉淀后有机聚合物容易去除。
水溶性非离子型聚合物沉淀法常用的聚合物为聚乙二醇（PEG）及硫酸葡聚糖。
水溶性聚合物沉淀蛋白质的机制尚不清楚，大致有如下解释：①聚合物与蛋白质形成共沉物；①聚合物与蛋白质之间发生水的重分配；①聚合物与蛋白质形成复合物。
此法受许多因素影响，主要是pH、离子强度、蛋白质浓度和PEG的分子量等。
分子量为2000～6000的PEG皆适宜于做蛋白沉淀用。
如若使用得当，效果甚为满意。
一般认为，PEG浓度在3％～4％时沉淀免疫复合物，6％～7％可沉淀IgM，8％～12％可沉淀IgG，12％～15％可沉淀其他球蛋白，25％可沉淀白蛋白。
最突出的应用是用3％～4％的PEG沉淀免疫复合物，未结合的抗原和抗体留在溶液中。
按此原理设计了快速测定法和循环免疫复合物测定法从网上搜索到得关于PEG沉淀提纯病毒的方法，先汇总至此贴，希望大家支持本版1、用超声波或冻融的方法使细胞破碎释放出病毒；2、慢慢搅动并加入NaCl终浓度是0.5mol/L,有助于病毒的沉淀，再等量加入10％PEG(一般使用的是PEG6000就可以了。
如果对样品的纯度不是严格要求的话，可以建议使用Millpore公司的离心浓缩柱，Amicon系列的可以一次浓缩15ml样品。
)；3、4℃过夜或放置一段时间；4、8000/min离心30分钟，收集病毒沉淀；5、将病毒沉淀加入适量的pbs中，4℃过夜；6、10000r/min离心1小时,沉淀即为浓缩的病毒。
还可以用梯度离心或其他方法进一步纯化。
PEG沉淀法提纯病毒1、用超声波或冻融的方法使细胞破碎释放出病毒；2、慢慢搅动并加入NaCl终浓度是0.5mol/L,有助于病毒的沉淀，再等量加入10％PEG(一般使用的是PEG6000就可以了。
如果对样品的纯度不是严格要求的话，可以建议使用Millpore公司的离心浓缩柱，Amicon系列的可以一次浓缩15ml样品。
)；3、4℃过夜或放置一段时间；4、8000/min离心30分钟，收集病毒沉淀；5、将病毒沉淀加入适量的pbs中，4℃过夜；6、10000r/min离心1小时,沉淀即为浓缩的病毒。
还可以用梯度离心或其他方法进一步纯化。
Concentrating virus (PEG6000)--------------------------------------------------------------------------------1. Viruses such as baculovirus can be concentrated by polyethylene glycol precipitation.2. Adjust the pH of the virus-containing supernatant to 7.2-7.5. Polyethylene glycol (PEG, MW 6,000) is added to a final concentration of 8% (w/v).3. Stir at 40Cfor 2 hours.4. Centrifuge at 10,000 x g for 2 hours.5. Resuspend the pellet in a small volume of appropriate buffer ( e.g., RNase-free ddH2 for virus RNA prep).PEG-it™慢病毒浓缩试剂•价格：￥3802.5•说明：欢迎询价详谈•货号：LV810A-1PEG-it™慢病毒浓缩试剂原理PEG是高分子聚合物，具有高亲水性，在溶液中会吸收大量水分，减少病毒之间的距离，使病毒与病毒能够很容易的聚合在一起，病毒的相对浓度提高，达到沉淀浓缩的目的。
PEG-it™中还含有特定的（SBI专属的）缓冲液，它能够保持病毒的活性。
少量残留的PEG-it™还会提高感染效率，使病毒更稳定。
图1 使用简便快捷只需将5倍的PEG-it™溶液与包含病毒颗粒的细胞培养基混合离心30分钟，即可得到10-100倍的病毒浓缩液特点快捷：全程只需30min高效： 能使病毒颗粒浓缩10-100倍安全： 对所有靶细胞，包括胚胎干细胞是无毒的使用方便：无需使用特别的仪器，避免了昂贵的超高速离心机的使用， 只需普通离心机，低速离心即可无残留： 没有细胞残片的残留，避免对细胞的毒性和免疫原性纯化病毒用终浓度10%PEG处理后8000g离心，溶解于PBS。
这样的方法对吗？PEG沉淀的原理是什么啊？是这样的，纯化病毒和噬菌体都可以，原理就是PEG8000是一种高度的网状聚合物，很粘稠，可以把病毒沉淀下来。
超速离心法-病毒提纯方法录入时间:2009-6-26 9:30:33 来源：青岛海博病毒粒子经过初步浓缩之后，要进一步纯化，通常采用超速离心法，它是分离提纯不同大小的病毒的有效方法之一。
在应用超速离心法沉淀病毒时，必须了解所用离心机的离心力。
离心机由于转头的回转产生了强大的离心力，这种离心力是随转头的大小和离心管至转轴中心的距离而变化的。
高速和超速离心机的离心条件，有的以每分钟速度(r/min)表示，有的则以离心力——重力加速度g(980cm/S2)为单位来表示。
离心沉淀时，沉降]速度与离心力有关。
当运转角速度为ω，运转半径为R时，则：[JZ]离心力g=ω2Rav，ω=(2πr/min)/60，[JZ]g=[SX(]4πr/min2[]3]600×980[SX)]×Rav[HT5”SS][JZ]图13-2〓角转头的横剖面图[JZ]表明从旋转中心到离心管顶部、中部及底部的距离。
[HT5SS]上式中，Rav为离心管中心至转轴中心的平均距离(如图13-2)。
从上式可以作]出r/min、R与g三者关系的贯线图(如图13-3)。
三者中如知其二，就可推算另一数值。
如转速超过7万，或R为英寸时，可参阅图13-4。
[HT5”SS][JZ]图13-3〓推算转头离心力的贯线图[JZ]图13-4〓推算转头离心力的贯线图由此图可以获得与半径相关的相对离心力的值。
将尺放在图左侧表示离心头中的离心管距转轴中心的距离(即旋转半径的标尺)上，]然后使之与预选转速(即图右侧的离心速度标尺)成一直线，在图中央的标尺上即可读出相对]离心力之值。
图中点线表示测量一个相对离心力的例子。
[HT5SS]离心机转速在4000r/min左右的称为低速(普通)离心机；转速至25]000r/min左右的]称为高速]离心机；转速25]000r/min以上的称为超速离心机。