流式细胞术在白血病和淋巴瘤中的应用
临床流式细胞术在白血病诊断中的应用
临床流式细胞术在白血病诊断中的应用白血病是一种危害人类健康的恶性肿瘤疾病，而临床流式细胞术作为一种高度敏感和特异的检测手段，在白血病的诊断与疾病监测中发挥着重要作用。
本文将探讨临床流式细胞术在白血病诊断中的应用，为临床医生提供更准确、更快速的白血病诊断方法。
一、渗透溶解细胞检测临床流式细胞术在白血病诊断中的首要步骤是对患者样本进行渗透溶解细胞处理，使得白细胞膜溶解并释放细胞内内容物。
这一步骤的重要性在于有效提取细胞，并将它们分散至测试管中。
二、特异性标记在渗透溶解细胞处理后，接下来的关键步骤是对白细胞进行特异性标记。
临床医生可以将荧光抗体添加到细胞中，这些荧光抗体能够与特定蛋白质结合，从而将不同类型的白细胞区分开来。
通过这种方式，临床流式细胞术可以提供全面且准确的白血病亚型识别。
三、流式细胞术仪器操作临床流式细胞术采用了先进的仪器，如流式细胞仪，有助于实现高通量的细胞检测与数据分析。
流式细胞仪通过激光束照射细胞，然后测量细胞散射和荧光信号。
这种技术使得临床医生能够快速、高效地分析数以万计的细胞，并获得准确的白血病细胞计数。
四、数据分析与结果解读得益于流式细胞术仪器的高度灵敏性，临床医生可以对获得的数据进行详细的分析与解读。
通过比较患者样本与正常对照品的差异，医生能够确定是否存在白血病细胞的存在。
此外，还可以进一步识别出不同的白血病亚型，以指导后续治疗决策。
五、临床应用与前景展望临床流式细胞术在白血病诊断中已取得显著的成果，尤其在慢性淋巴细胞性白血病 (CLL) 的诊断与监测上应用广泛。
同时，该技术在急性白血病、骨髓瘤等其他白血病亚型的诊断中也表现出了良好的应用前景。
未来，临床流式细胞术在白血病诊断领域的应用还会得到进一步的发展。
随着技术的不断更新和改进，该检测方法将变得更加高效、更加精确。
此外，流式细胞术与其他检测手段的结合也为白血病诊断提供了新的思路和方法。
结论临床流式细胞术作为一种敏感、特异的检测手段，为白血病的诊断与疾病监测提供了重要的工具。
流式细胞术的临床应用进展
对患者细胞亚群数量 的测 定来监控患者免疫状态 ， 指导治疗 。朱
立华等报道 了外周血 淋巴细胞 免疫表型的确参考值对其种族 、 性 别、 年龄等影响因素进行 了探讨 。 ２２ ２ 感染及其治疗 效果 观察 ．． 当感 染 发生 以流式 细胞 仪 （ ｌ ｙ 它 Ｆｏ Ｃ — ｗ ｔ ｔｒ为工具 ， ｏ ｅ） ｍｅ 在单细胞水平 上对 大量 细胞进 行高 速 、 准确 、 多
参数的定量分析或分选 ， 为生物医学与临床检验学发展提 供 了全
新 的 视 角 和 强 有 力 的 手 段 。 目前 流 式 细 胞 术 在 肿 瘤 、 胞 免 疫 、 细
流式细胞术（ Ｃ 是 ２ Ｆ Ｍ） ０世纪 ７ ０年代 初发展 起来 的一项 高 新技术 ，０年代 开始从 基础研 究发 展到 临床 医学研 究及 疾病 的 ８ 诊断和治疗监测 。 １ １ 细胞表型分析技术 ．
一
性 。正常组织细胞几 乎不表达突变型 Ｐ ３ 部分肿 瘤患者 的病变 ５，
细胞表 型分 析是 流式细胞仪最 常见 的
淋 巴细胞减 少 Ｄ ／ Ｄ Ｃ ４ Ｃ ８淋 巴细胞 比值 ＣＭ／ Ｄ Ｉ Ｃ ８下 降 ， 至可 甚
降低到 ０ ５以下 。对疑为艾滋病及 血清检测为 阳性 的人 ， ． Ｔ细胞 亚群是分析 了解免疫 系统被病 毒破坏 程度 的标 志 。初诊 时 ， Ｉ ＣＭ 细胞越少 Ｃ ４ Ｃ ８值越低者 ， 后越 差。所 以经治疗 后恢 复的 Ｄ／Ｄ 预 指标则是 Ｃ ４细胞 数增加 ， Ｄ ／ Ｄ Ｄ Ｃ ４ Ｃ ８比值升高。当病 毒（ 乙肝 如 病毒 、 Ｂ病 毒 、 巨细胞病毒 ） Ｅ 和 感染发生时 ， Ｄ Ｃ ８＋Ｔ细胞增多 ， 对 Ｃ ８细胞 的测定有助 于对 感染 的诊 断和治疗 效果的动态观察。 Ｄ
临床分析中的免疫学检测技术
临床分析中的免疫学检测技术免疫学检测技术在临床分析中起着至关重要的作用。
它通过检测和分析免疫系统相关的指标，为医生提供了诊断和疾病监测的有力工具。
本文将介绍几种常见的免疫学检测技术，并探讨它们在临床分析中的应用。
一、酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA)酶联免疫吸附试验是一种常见的免疫学检测技术。
它基于抗原-抗体的特异性反应，通过酶标记的抗体与待测物质结合，再通过底物的酶反应转变为可定量测量的光学信号。
在临床中，ELISA广泛应用于病原体检测、肿瘤标志物监测、自身免疫疾病诊断等领域。
例如，ELISA可以用于检测HIV抗体、乙肝病毒表面抗原等感染性疾病的诊断。
此外，它还可以用于监测肿瘤标志物如癌胚抗原(CEA)、前列腺特异性抗原(PSA)等以及自身免疫疾病的相关指标。
二、流式细胞术(Flow Cytometry)流式细胞术是一种高精度和高通量的免疫学检测技术。
它通过将细胞悬液经过单个细胞形成的窄流柱后，利用激光光源和多种激光解译系统对细胞进行多参数的定量分析。
在临床中，流式细胞术被广泛用于免疫表型分析、细胞凋亡检测以及免疫荧光染色分析等。
例如，流式细胞术可以用于检测白血病和淋巴瘤中的异常细胞、测定淋巴细胞亚群、检测细胞表面标记物等。
三、蛋白质微阵列技术(Protein Microarray)蛋白质微阵列技术是一种高通量的免疫学检测技术。
它通过将多种特异性抗体或抗原固定在基质上，与待测样品进行反应后，利用检测系统测量样品中多种免疫反应产物的定量和定性信息。
在临床中，蛋白质微阵列技术可以用于潜在致病因子的筛查、疾病标记物的发现以及蛋白质相互作用的研究。
例如，它可以用于检测某些癌症中的肿瘤抗原、检测病毒感染中产生的抗体以及筛选特定药物的作用靶点。
四、实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative Polymerase Chain Reaction, qPCR)实时荧光定量PCR是一种敏感且高效的免疫学检测技术。
流式细胞术(FCM)的工作原理及其在免疫学上的应用
流式细胞术（FCM）的工作原理及其在免疫学上的应用摘要：流式细胞术(flow cytometry，FCM)是一种可对单细胞进行快速定性、定量分析的新技术。
它借鉴了荧光标记技术、激光技术、单抗技术和计算机技术，具有极高的检测速度与统计精确性，而且从单一细胞可以同时测得多个参数。
随着其分析技术和方法的日臻完善，流式细胞术在临床免疫及科学研究上发挥了非常重要的作用。
本文对流式细胞术的工作原理进行了概括介绍，并对其在免疫学等方面的应用进行了综述，展示了FCM 在免疫学上应用的广阔前景。
关键词：流式细胞术；流式细胞仪；工作原理；免疫学；应用；应用前景流式细胞术(FCM)是70年代发展起来的一种快速对单细胞或微粒定量分析和分选的新技术。
其检测速度之快，统计学精度之高，是其他的方法无可比拟的，可同时从一个细胞中测得多种参数(如DNA、R N A、蛋白质、细胞体积等)进行多参数分析。
流式细胞仪是近代细胞生物学、分子生物学、分子免疫学和单克隆技术、激光技术、电子计算机术等学科高度发展的结晶，在血液学、肿瘤学等学科尤其是在免疫学方面得到广泛应用[1]。
近年来，随着流式细胞免疫学技术的迅速发展，流式细胞术与单克隆抗体技术结合，使细胞表面和细胞内抗原，癌基因蛋白及膜受体的定量检测取得了很大进展。
流式免疫技术克服了普通免疫学方法难以准确定量的不足，形成了流式免疫学独特的科学分支，成为研究细胞免疫学的先进技术之一。
随着科学技术的发展，多种新的荧光探针的不断出现，使FCM技术的应用范围不断扩大，特别是各种各样的荧光探针标记的单克隆抗体和其他蛋白质的出现，为FCM 研究各种组织细胞膜和细胞内抗原、肿瘤性蛋白等开辟了新途径[2]。
1 .流式细胞术与流式细胞仪1.1流式细胞技术：流式细胞技术是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微球，测量其产生的散射光和发射荧光的强度；经染色的细胞或微球在悬液中以单行流过高强度光源的焦点，当每个细胞或微球经过焦点时，发出一束散射光/或荧光；它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器光电倍增管或一个固态装置），光检测器把散射光定量转化成电信号，经数字转换器进行数字化后而成整数，然后进行电子存储，以后数据可以调出显示和进行分析；并可能将感兴趣的细胞进行分选[3]。
流式细胞分析在临床血液学中的应用
流式细胞分析在临床血液学中的应用
1.白血病诊断和监测：
白血病是由于骨髓内的恶性细胞大量增殖导致的一种血液系统疾病。
流式细胞术可以根据细胞大小、颜色和表面标记物的表达水平快速分析并鉴别异常细胞。
这对于白血病的早期诊断、分类和监测来说非常重要。
2.免疫功能评估：
流式细胞术可以评估患者的免疫功能。
通过将标记有特定抗体的细胞与患者的血液混合，可以测量细胞表面抗原的表达水平。
这有助于确定患者是否有免疫缺陷，以及免疫功能是否正在正常运行。
3.血液病的异常细胞鉴定：
流式细胞术可以鉴别和计数血液中的异常细胞。
例如，对于淋巴瘤等恶性疾病，流式细胞术可以检测和分类恶性细胞，以便进行早期诊断和个体化治疗。
4.红细胞和血小板计数：
流式细胞术可以用于快速准确地计数红细胞和血小板。
在患者需要进行输血或者有出血倾向的情况下，流式细胞术可以提供非常重要的信息。
5.免疫治疗监测：
流式细胞术可以用于监测免疫治疗的效果。
例如，在进行造血干细胞移植后，流式细胞术可以帮助监测移植后的免疫细胞比例和功能。
这对于治疗干细胞移植相关并发症和个体化治疗来说非常重要。
总之，流式细胞分析是一种在临床血液学中非常有用的技术，可以用于白血病诊断和监测、免疫功能评估、血液病的异常细胞鉴定、红细胞和血小板计数以及免疫治疗监测。
随着技术的发展，流式细胞分析的应用将进一步扩大，为临床血液学的诊断和治疗提供更多的帮助。
流式细胞仪的简要介绍与注意事项
流式细胞仪的简要介绍与注意事项(流式细胞仪,注意事项)来源：评论：0我要评论[流式细胞仪的简要介绍与注意事项(流式细胞仪,注意事项)] 一、流式细胞仪的检测范围1．流式细胞仪可以检测细胞结构，包括：细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、R NA 含量、蛋白质含量。
2．流式细胞仪可以检测细胞功能，包括：细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。
[关键词:流式细胞仪注意事项]…••一、流式细胞仪的检测范围1．流式细胞仪可以检测细胞结构，包括：细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、R NA 含量、蛋白质含量。
2．流式细胞仪可以检测细胞功能，包括：细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。
二、流式细胞仪的临床应用1．流式细胞术在肿瘤学中的应用：流式细胞术可以检测肿瘤细胞增殖周期、检测肿瘤细胞表面标记、癌基因表达产物、进行多药耐药性分析、检测凋亡；2．流式细胞术在血液学中的应用：检测白血病和淋巴瘤细胞、活化血小板、造血干细胞（CD34+）计数、白血病与淋巴瘤的免疫分型、网织红细胞计数、细胞移植的交叉配型和免疫状态监测；3．流式细胞术在免疫学中的应用：可以进行淋巴细胞及其亚群分析、淋巴细胞免疫分型、检测细胞因子。
三、流式细胞仪的科研应用主要有细胞动力学功能研究、环境微生物分析、流式细胞术与分子生物学研究。
四、流式细胞术常规检测时的样品制备(一) 直接免疫荧光标记法取一定量细胞（约1×106细胞/ml），直接加入连接有荧光素的抗体进行免疫标记反应（如做双标或多标染色，可把几种标记有不同荧光素的抗体同时加入），孵育20～60分钟后，用PBS（pH7.2 ～7.4）洗1～2次，加入缓冲液重悬，上机检测。
本方法操作简便，结果准确，易于分析，适用于同一细胞群多参数同时测定。
流式细胞术在我院急性白血病免疫分型中的应用
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． １ １ ７ ４ ８ ／ ｂ ｊ ｍｙ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ６ ． １ ７ ０ ３ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ６ ． ０ １ ６
Байду номын сангаас
Ａｐ ｐ ｌ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｆｌ ｏ ｗ Ｃｙ ｔ ｏ ｍｅ ｔ ｒ ｙ ｉ ｎ Ｉ ｍｍｕ ｎｅ ｆ ｒ ｏ ｍ ｔ ｈｅ Ｃｌ ａ ｓ ｓ ｉ ｉｃ ｆ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ａｃ ｕｔ ｅ Ｌｅ ｕｋ ｅ ｍｉ ａ
（ 福建 中医药大学附属三 明市 中西 医结合 医院， 福建 三 明 ３ ６ ５ ０ ０ １ ） 摘要： 目的 探讨本实验室所 用 １ ３种单抗对 白血病免疫分型的应用价值。方法 应 用流式细胞术 （ Ｆ Ｃ Ｍ） 使用 １ ３种单抗
对９ ９例急性 白血病 进行 免疫分型 ， 与形 态学分型相 比较。结果 使 用 １ ３种单 抗从 ９ ９例急性 白血 病 中分 出髓系 白血 病
（ Ａ ＭＬ ） ５ ９例 、 淋 系白血病 （ Ａ Ｌ Ｌ ） ２ ７例 、 混合 型（ Ｍ Ａ Ｌ ） ５例 、 未分化 型 （ Ａ Ｕ Ｌ ） ２例 ， 诊 断率达 ９ ３ ． ９ ％（ ９ ３ ／ ９ ９ ） 。Ａ ＭＬ中各 抗 原表达情况 ： ｃ Ｄ １ ３ ＞Ｃ Ｄ ”＞ ｃ Ｄ ｌ ４ 、 ｃ Ｄ ７ ＞ｃ Ｄ ２ 、 ｃ Ｄ ｌ ９＞ Ｃ Ｄ １ ０＞ Ｃ Ｄ ５＞ Ｃ Ｄ ２ ０ ， 其 中多表达 ｃ Ｄｌ ３ 、 ｃ Ｄ ３ ３ ； Ａ Ｌ Ｌ中各抗 原表 达情 况： Ｃ Ｄ ｌ ９ ＞Ｃ Ｄ ｌ ３ ＞Ｃ Ｄ ｌ ０ ＞Ｃ Ｄ ２ ０ ＞Ｃ Ｄ ３ ３ ＞Ｃ Ｄ ５ ＞Ｃ Ｄ ７ ＞Ｃ Ｄ ２ 、 Ｃ Ｄ …其中 Ｃ Ｄ ｌ ｕ 、 Ｃ Ｄ Ｃ Ｄ Ｃ Ｄ ２ ０ 表达率较高 。免疫分 型与形 态学分型结果相 比较 ， Ａ ＭＬ二者的吻合率 为 ９ ０ ． ５ ％（ ５ ７ ／ ６ ３ ） 、 Ａ Ｌ Ｌ二者 的吻合率 为 ７ ６ ． ５ ％（ ２ ６ ／ ３ ４ ） ； 其 中 １例 Ｍ ０免疫 分 型为 Ｂ ／ Ｍ混合 、 １ 例 Ｍｌ 免疫分 型为 Ｔ ／ Ｍ混合 、 １ 例Ｍ ａ 免疫分 型为 Ｔ ／ Ｍ 混合 、 １ 例Ｌ 。 免疫分型 为 Ｂ ／ Ｍ混 合 、 １例 Ｌ 免 疫分型为 Ｔ ／ Ｂ混合 、 １ 例Ｌ ： 免疫分型为 Ｌ ｙ ＋一 Ａ ＭＬ 、 ２例 Ｌ 免疫 分型 为 Ａ Ｕ Ｌ ； １ 例 形态学 为浆细 胞 白血 病的免 疫分 型为 Ａ ＭＬ 、 １ 例淋单混合型 白血病 Ｃ Ｄ 、 Ｃ Ｄ 。 、 Ｃ Ｄ 。 阳性 。结论 合型和未分化型 白血病 的诊断亦能 明确 。 关键词 ： 流式细胞术 ； 白血病 ； 免疫 分型
流式细胞术在急性淋巴细胞白血病微小残留中的应用
流式细胞术在急性淋巴细胞白血病微小残留中的应用摘要：白血病是一类造血干细胞的恶性克隆性疾病，近年急性淋巴细胞白血病的治疗取得了显著的进展，儿童急性淋巴细胞白血病治疗的完全缓解率可达75%-90%[1]，但是约20%-30%儿童急性淋巴细胞白血病患者最终复发，并死于本病，而治疗缓解后患者体内残留的白血病细胞水平，即微小残留是白血病复发的独立的重要因素，目前检测微小残留的方法中，最有前景的是PCR和FCM，与PCR相比，FCM具有简单、快捷、定量、廉价等特点，因而成为更为理想的检测微小残留病的工具。
一、关于微小残留1.微小残留定义：微小残留（MRD）是指白血病经治疗后，临床上和血液细胞上达到完全缓解后，但体内仍残留白血病细胞的状态。
研究发现当白血病初发时患者体内能检测到的白血病细胞常为1012-1013，诱导后残留的白血病细胞可高达108-1010，巩固化疗后体内残留的白血病细胞仍可高达106-108 [2]，即使是经验丰富的血细胞形态学家其最大检出能力也仅为5x10一2细胞水平[3]，若不进行进一步治疗，这些白血病患者极有可能复发。
而依靠传统形态学方法难以看到这些微量残存的白血病细胞，随着免疫学、分子生物学及细胞遗传学等技术的广泛展开，使的检测方法得到了较快的改进，可更精准的检测患者体内的水平。
已有学者以“分子缓解”，即诱导缓解治疗结束时，MRD<1×10-4重新定义分子生物学完全缓解。
根据患者缓解后体内MRD水平，采取个体化缓解后治疗策略，提高完全缓解患者白血病的根治率。
2.检测微小残留的意义（1）判断化疗的疗效、指导用药：MRD检测的最终目的是通过区分两类患者，指导治疗决策，达到个体化治疗。
一类患者对化疗反应良好，无需继续化疗即可获得长期无病生存；而另一类患者则必须继续化疗，甚至强化治疗以减少复发的可能性[4]。
根据MRD值，对高水平的患者，应及时给予强化治疗或更改治疗方案，对低水平的患者减少化疗强度，避免形态学缓解后治疗的盲目性。
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1
0.5
混合细胞性白血病判断标准：每个系列积分>或=2.5分
示例：B-M型AL
示例：T-M型AL
示例：T-B-M型AL
免疫表型的预后价值
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 免疫分型在慢淋、淋巴瘤中的应用简介
肿瘤性B细胞鉴别关键：κ、λ轻链出现单克隆表达或双阴性或表达强 度明显异常。 肿瘤性T细胞鉴别关键：CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7中出现 抗原表达缺失或抗原表达强度的改变；CD45RA、CD45RO的表达情 况出现异常；表达TDT、CD10等幼稚抗原；TCRVβ系列抗原出现单 克隆表达。 浆细胞肿瘤鉴别关键：CD138+细胞表达CD56，不表达CD19，出现 cyκ、cyλ轻链的单克隆表达。 NK细胞肿瘤鉴别关键：出现CD16、CD56、CD7、CD2等抗原的缺失， CD45表达强度的改变 每种类型都必须关注异常细胞CD45表达强度、SSC、FSC的变化。
流式细胞术 在白血病、淋巴瘤免疫分型中的 应用
免疫分型的作用
区分淋系、髓系白血病 区分淋系白血病中的T、B-ALL 鉴定混合细胞性白血病的类型：
T-M、B-M、T-B、T-B-M
于治疗过程中监测MRD，评价疗效 提示某些遗传学异常：
CD56+APL---t（11；17）？ CD19+AML---t（8；21）（q22；q21）？ 提示预后：
正常成人骨髓标本
正常幼稚B细胞：<5.0%,表达CD10、 CD19、CD22、弱表达CD20，少量 CD10stCD34+TDT+
免疫分型常用的抗体
AML
CD34、CD117、CD33、CD13、HLA-DR、CD11b、CD15、CD64、CD14、CD65s、 MPO 怀疑M6加做CD71、GPA 怀疑M7加做CD61、CD41 CD34、CD10、CD19、CD20、CD22、c/mIg、TDT、cCD22/CD79a CD34、CD10、CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7、 HLA-DR 、CD1a、 TDT、 cCD3 CD16、CD56、CD57 CD38、CD138、cκ、cλ、CD19、CD56
CD7、CD11b、CD56等阳性的AML患者预后不良 CD15阳性的AML患者CR率高
免疫分型的原理
正常造血细胞
髓系:CD33+,T系:CD7+
白血病细胞
出现抗原跨系表达
髓系: CD33+ CD7+
抗原表达遵循系列保守性
抗原表达有一定的时序性
原始细胞:CD34+CD11B-
出现抗原时序混乱表达
急性早期T前体细胞 白血病 early T-precursor ALL
CD7
CD2
TdT
CD3c/m CD1a
FAB分 型
+
－
+
－/+
-
L1、L2
胸腺皮质T-ALL
+
+
+
+
+
L1、L2
急性T细胞白血病 T-ALL
+
+
－
+
-
L1、L2
示例：T-ALL 初筛CD7+CD19-CD33+/-HLA-DR-CD117+/-
B-ALL免疫亚型
亚型
early B-precursor ALL Common B-ALL
CD19
CD34
TdT
CD10
CyIg
SmIg
FAB分型
+
+
+
（－）
-
-
L1、L2
+
+
+
+
（－）
-
L1、L2
Pre B-ALL
+
－/+
+
+
（+）
-
L1
B-ALL
+
－
－
－
－/+
（+）
L3
T-ALL免疫亚型
分型
双表型：一种白血病细胞同时表达两个或 两个以上系列标志。
双克隆型：同时存在两种或两种以上异常 细胞，分别表达各自的系列特异性标志。 类型：T-M、B-M、T-B、T-B-M
白血病中各种抗原的积分情况
Points 2 B-lymphoid CD79a cCD22 cIgM CD19 CD10 CD20 TdT CD24 T-lymphoid Myeloid CD3 MPO TCR a/b TCR g/d CD2 CD8 CD117 CD13 CD5 CD10 CD65 CD33 TdT CD7 CD1a CD14 CD15 CD64
免疫分型的步骤二
第二步：确诊，进一步确定白血病类型，并且将 某一系别的白血病根据分化程度的不同再分为不 同亚型 根据初筛结果加做其他系别特异性标记
T-ALL:CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD1a、 TDT、cCD3 B-ALL: CD20、CD22、c/mIg、TDT、cCD22/CD79a AML:CD13、CD11b、CD15、CD64、CD14、CD65s、MPO,怀 疑M6加做CD71、GPA,怀疑M7加做CD61、CD41
示例：MM
示例：浆样淋巴瘤
流式细胞术检测BCR-ABL融合蛋白
示例：正常淋巴细胞
正常T细胞
正常B细胞
正常NK细胞
示例：B-CLL/SLL
示例：MCL
示例：HCL
示例：Burkkit淋巴瘤
示例：FL
示例：脾边缘区淋巴瘤
示例：NK-T淋巴瘤
示例：T-NHL
82.5%
15.6%
示例：细针穿刺 B-NHL
示例：脑脊液标本 B-NHL
示例：正常浆细胞
成熟单核细胞：约占2-8%，表达 CD11b、CD64、CD14、HLA-DR， 不表达CD34、CD117
幼稚髓系细胞： 〈5.0％
成熟淋巴细胞：约占20-40%
有核红细胞： <50%,表达GPA
T细胞：表达CD3、CD4、CD8、CD CD5、CD7,不表达CD10、CD34、 TDT等
B细胞：表达CD19、CD20、CD22， 不表达CD10、CD34、TDT等 NK细胞：CD3-(CD16+CD56)+
示例：AML 初筛CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR+
示例：AML-M3 初筛CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-
示例：AML-M3V 初筛CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-
混合细胞性白血病的免疫分型
原始细胞:CD34+CD11B+
各阶段细胞按一定的比例分布
原幼细胞<5%
出现分化阻滞
原幼细胞>20%
免疫分型需要掌握什么理论知识？
正常造血细胞的抗原表达规律
不同系列的细胞表达的抗原？ 同一系列不同阶段的细胞表达的抗原？ 每种抗原的表达强度？
正常B系细胞分化图
源于王建中等编著的《临床流式细胞分析》
正常T系细胞分化图
源于王建中等编著的《临床流式细胞分析》
正常粒细胞分化图
源于王建中等编著的《临床流式细胞分析》
正常单核细胞分化图
源于王建中等编著的《临床流式细胞分析》
免疫分型中的重要抗原CD45
成熟粒细胞：约占40-60%， 表达CD11b、CD13、CD33、 CD15、CD16、CD10、CD64, 不表达CD34、HLA-DR、 CD14、CD117
B-ALL
T-ALL
NK细胞
浆细胞
免疫分型的步骤一
第一步：初筛，初步筛选白血病类型
CD7/CD19/CD33/CD10/CD117/HLA-DR/CD34/CD45
CD7+CD19-CD33+/-HLA-DR-CD117+/-疑为T-ALL CD7+CD19-CD33+HLA-DR+CD117+疑为AML伴CD7+ CD19+CD7-CD33-CD10+/-CD117-疑为B-ALL CD19+CD7-CD33+CD10+CD117-疑为B-ALL伴CD33+ CD19+CD7-CD33+CD10-CD117+疑为AML伴CD19+ CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR+疑为AML CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-疑为APL
示例：AML伴CD7+ 初筛CD7+CD19-CD33+HLA-DR+CD117+
示例：B-ALL 初筛CD19+CD7-CD33-CD10+/-CD117-
示例：BALL+CD33 初筛CD19+CD7-CD33+CD10+CD117-
示例：AML+CD19 初筛CD19+CD7-CD33+CD10-CD117+