抗菌药物敏感性试验及2010CLSI
clsi国际标准
clsi国际标准
CLSI（Clinical and Laboratory Standards Institute）是一个国际性的非营利组织，致力于制定和推广临床和实验室标准。
它的标准被广泛应用于医学实验室、临床诊断和医疗保健领域。
CLSI制定了许多与临床和实验室相关的标准，其中一些重要的标准包括：
1.CLSI M100：这是关于抗菌药物敏感性测试的指南。
它提供了有关
细菌感染治疗选择的信息，包括抗生素敏感性测试方法和解释标准。
2.CLSI EP系列：这是关于实验室质量控制的指南。
EP系列标准涵盖
了各种实验室测试的质量控制程序，包括血液学、微生物学、血型学等。
3.CLSI GP系列：这是关于临床诊断的指南。
GP系列标准涵盖了各
种临床诊断测试的操作规范、试剂盒使用和结果解释等方面。
除了上述标准，CLSI还制定了其他许多与医学实验室和临床诊断相关的标准。
这些标准对于确保医学实验室的准确性、可靠性和一致性非常重要，并在医疗保健提供中起着关键作用。
需要注意的是，CLSI标准适用于全球范围，但在具体应用时可能会根据不同国家和地区的法规、规定和实践进行一些调整。
建议在具体使用时参考最新版本的CLSI标准，并结合当地的法规和实践进行应用。
微生物CLSI文件集锦（你想要的都在这里）
微生物CLSI文件集锦（你想要的都在这里）说起临床微生物的CLSI文件，大家首先想到的就是CLSI M100S——《抗微生物药物敏感性试验的执行标准》。
但是其实，与临床微生物相关的CLSI文件很多，截至2017年7月，已多达43个。
下面，小编就给您简单介绍一下吧。
1、M02-A12:Approved Standard中文：抗菌药敏试验的性能标准英文：Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests内容与解释：介绍药物纸片扩散法的质量控制标准和最新折点标准。
2、M06-A2: Approved Standard中文：脱水MH琼脂的评估程序英文：Protocols for Evaluating Dehydrated Mueller-Hinton Agar内容与解释：略3、M07-A10:Approved Standard中文：需氧菌稀释法抗菌药物敏感性试验英文：Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility T ests for Bacteria That Grow Aerobically内容与解释：描述了肉汤稀释法和琼脂稀释法，而且还包含这些方法的标准化操作流程和CLSI推荐方法的性能，局限性，适应性。
4、M11-A8:Approved Standard中文：厌氧菌抗菌药物敏感性试验英文：Methods for Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobic Bacteria内容与解释：在过去的几年内，大部分厌氧菌的耐药表型都发生了很大的改变，导致了许多菌种的经验用药的面临很大的挑战。
对于厌氧菌，琼脂稀释法仍然是参考方法，对于调查研究和科研同样都适用。
而且其他的方法的对比标准也进行了说明，肉汤稀释法也应用于临床实验室，但是现在对脆弱拟杆菌和一些抗生素没有标准。
抗菌药物敏感性试验及2010CLSI
耐药机制 None mecA
相对流行率 OX报告
一般
S
一般
R
RS
mecA（低水平表达） 少见
R*
SR
PBP改变或β-内酰胺 罕见
R*
酶的高表达（模糊的
MRSA）
葡萄球菌属:诱导性β-内酰胺酶试验
青霉素 – MIC≤0.12mg/L – 抑菌圈直径≥29mm 诱导性β-内酰胺酶试验
对于严重感染，随后分离出的菌株，实验室应进行 青霉素的MIC检测和β-内酰胺酶诱导试验
霉素诱导耐药试验阳性 ,推测此菌株对克林霉 素耐药,但在少数患者 治疗中克林霉素可能仍 有效”。
修订的建议… Re：万古霉素MIC,什么时候葡萄球菌应该被
送到一个参考实验室做进一步检测？
§金黄色葡萄球菌 ---MIC 4μg/ml—Maybe ---MIC≥8μg/ml—Yes §凝固酶阴性葡萄球菌（CoNS） --- MIC≥32μg/ml—Yes
2007版 ! M100-S17 Table 2G 青霉素
敏感 ≤2 ≤0.06 ≤0.06
中介 4
耐药 8
- 0.12
0.12-1 2
≤0.06 0.12-1 2
对于三个青霉素的判断标准我们都应该解 释和报告吗？
青霉素判断标准 脑膜炎
解释/报告？ • 是的，脑脊液标本
非脑膜炎 口服青霉素V
• 是的，其他的标本，因为我们通常不 能确定该感染是否涉及脑膜
40%
20%
0%
总体
MIC ≤1
MIC=2
*到达目标：万古霉素血浆谷浓度达到15-20µg/mL；†治疗反应：患者发热、白细胞增多症状部分或完全缓解
一项单中心、前瞻性研究，对95例罹患医院MRSA感染的住院或住护理院的老年患者静脉滴注万古霉素，对临床疗效、
2010CLSI对肠杆菌科细菌药敏折点的修订(Final)
2010 CLSI对肠杆菌科细菌药敏折点的修订内部沟通文件沟通主信息：“更合理的折点，更加准确地提示头孢菌素的临床疗效”1. 改变三代头孢的肠杆菌科细菌药敏折点2. 取消常规ESBL确诊试验以及ESBL(+)必须报所有头孢菌素耐药的规定一、背景CLSI：Clinical and Laboratory Standards Institute, （美国）临床与实验室标准化研究所，是一个国际性、跨学科、非营利的、致力于发展操作标准的教育组织。
其前身于1967年由来自15个机构的31名临床医生和实验室学家共同组成，目标是“让我们为病人做得更好”。
时过境迁，CLSI的目标仍然是“让我们为病人做得更好”。
CLSI的主要致力于在临床和实验室检验的实践中不断提高，并在全世界进行推广新技术的运用。
临床医生在治疗重症的患者过程中，高度依赖于临床微生物的检验报告。
抗生素药敏结果的临床重要性要求这些药敏试验必须在最佳的状况下，并能够用最新的标准去检验。
CLSI中的抗菌药物敏感性试验小组委员会（Subcommittee on Antimicrobial Susceptibility testing）每年组织该领域专家和医药公司的代表等对药敏相关文件M100进行一次修订。
2010年1月，CLSI发布了《抗微生物药物敏感测试：第20版修订版》（Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility: Twentieth Informational Supplement, CLSI document M100-S20）。
国内的现状: 临床微生物室的首要任务是准确快速地检测病原微生物，同时报告正确的药敏试验，加强与临床医师的沟通与合作，提高临床疗效。
近年来，由于各种抗菌药物的大量应用，尤其是广谱及超广谱抗菌药物的应用，造成了耐药性突变菌株的大量出现（如临床大量应用碳青霉烯类抗生素导致耐碳青霉烯类的产KPC酶的铜绿假单胞菌不断增加），临床上表现为经验用药失败率增高，盲目大剂量治疗也易造成药物中毒。
抗菌药物敏感性实验及细节耐药检测
抗菌药物敏感性实验与细节耐药性监测来源：查验医学在线2009-4-15 南网编辑2010-7-6一、需氧菌及兼性厌氧菌的药物敏感实验(一)纸片琼脂扩散法纸片琼脂扩散法又称Kirby-Bauer实验，是操作最简易、利用最普遍的抗菌药物敏感性实验。
1．实验原理将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上。
纸片中所含的药物吸收琼脂中的水分溶解后不断向纸片周围区域扩散形成递减的梯度浓度。
在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制，从而形成透明的抑菌圈。
抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关关系，即抑菌圈越大，MIC越小。
2．培育基和抗菌药物纸片(1)培育基：水解酪蛋白(Mueller-Hin-ton，MH)培育基是CLSI/NCCLS采用的兼性厌氧菌和需氧菌药敏实验标准培育基，pH值为～，对那些营养要求高的细菌如流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、链球菌等需加入补充物质。
琼脂厚度为4mm。
配制琼脂平板当天利用或置塑料密封袋中4℃保留，利用前应将平板置35℃孵育箱孵育，使其表面干燥。
(2)抗菌药物纸片：选择直径为6.35mm，吸水量为20ul的专用药敏纸片用逐片加样或浸泡方式使每片含量达到规定所示。
含药纸片密封贮存2～8℃或-20℃无霜冷冻箱内保留，β-内酰胺类药敏纸片应冷冻贮存，且不超过l周。
利用前将贮存容器移至室温平衡l～2h，避免开启贮存容器时产生冷凝水。
3．细菌接种细菌接种采用直接菌落或细菌液体生长方式。
用麦氏比浊标准的菌液浓度。
校正浓度后的菌液应在15min内接种完毕。
接种步骤如下：①用无菌棉拭子蘸取菌液，在管内壁将多余菌液旋转挤去后，在琼脂表面均匀涂片接种3次，每次旋转60°，最后沿平板内缘涂抹1周；②平板置室温下干燥3～5min，用纸片分离器或无菌镊将含药纸片紧贴于琼脂表面；③置35℃孵育箱孵育16～18h后阅读结果，对甲氧西林和万古霉素药敏感实验结果应孵育24h。
抗菌药物敏感性试验及2010CLSI
哪些需要做MIC
肺炎链球菌 苯唑西林纸片法直径≤19mm,需 要明确受试菌对青霉素的敏感性，必须做青 霉素的E-试验
革兰阳性球菌 万古霉素不敏感时（中介或 耐药），必须做万古霉素的E-试验确认受试 菌对万古霉素的敏感性（包括替考拉宁、利 奈唑胺等）
草绿色链球菌 对青霉素、氨苄西林 纸片法药敏结果不可靠，必须做上述 两药的E-test
镜下才能观察到的细小菌落应忽略
正确阅读抑菌圈内的“霾”现象
变形杆菌(迁移生长)以及磺胺类药物的纸片法药敏 注 意要读完全抑制的抑菌圈，对“霾”生长不予理会
克林霉素对葡萄球菌的抑菌圈内如有薄雾状菌苔应报告 细菌对克林霉素耐药,不管其是否显示 “D”抑菌圈
需在透射光（Transmitted light）下阅读万古霉素、 利奈唑胺和苯唑西林的抑菌圈，遇不敏感的结果需用稀 释法测定MIC法确证
E-Test
细菌报告应注意的问题
有无细菌：苛养菌、难培养细菌 正常菌群/病原菌:病史、病人体征、感染部位 药敏结果报告：耐药菌株的提示或修改
正确阅读纸片法结果
完全抑制的抑菌圈直径，包括纸片的直 径
不反光的黑色背景、反射光下阅读结果 抑菌圈的界限应该是以肉眼观察没有明
显的可见细菌生长区域 在抑菌圈边缘微弱生长的、仅能在放大
2010CLSI主要更新内容
主要格式的更新 关于药敏质控的更新（新增Doripenem等质控范围） 关于药敏试验操作的更新 脆弱拟杆菌的累积药敏报告 术语表的更新（新的抗生素亚组-抗MRSA活性的头孢菌素）
肠杆菌科新旧折点(MIC
ug/l）
Agent
头孢唑 啉 头孢噻 肟 头孢唑 肟 头孢曲 松 头孢他 啶 氨曲南
100% 80%
clsi-m100-s20_2010抗菌药物敏感性试验解释标准(中文)
抗微生物药物敏感性试验执行标准； 第二十版信息增刊
Volume 30 Number 1
Franklin R. Cockerill, III, MD Karen Bush, PhD Michael N. Dudley, PharmD,FIDSA George M. Eliopoulos, MD Dwight J. Hardy, PhD David W. Hecht, MD Janet F. Hindler, MCLS, MT(ASCP) Janet A. Hindler. MCLS, MT(ASCP) Jean B. Patel, PhD, D(ABMM) Mair Powell, MD, FRCP, FRCPath, MHRA Richard B. Thomson, Jr., PhD John D. Turnidge, MD Melvin P. Weinstein, MD Barbara L. Zimmer, PhD Mary Jane Ferraro, PhD, MPH Jana M. Swenson, MMSc
本增刊解释表格中的数据仅在使用以下文件规定的方法时有效： M02-A10─纸片法抗微生物药物敏感试验的的执行标准；已获准 的标准—第十版； 和M07-A8—需氧菌稀释法抗微生物药物敏感试 验方法；已获准的标准—第八版。
1
20 10 年 1 月
M1 0 0 - S 20
2
M100 -S20
ISBN 1-56238-716-2 ISSN 0273-301 0 0 - S 20
空
白
页
4
Vol .30 No . 1
M1 0 0 - S2 0
目录
摘要............................ ....................................................................................................................................1 本版主要内容变化摘要..................................................................................................................................9 CLSI建立的结果解释标准和QC范围摘要........................................................................................... .......13 CLSI参考方法相对商业方法以及CLSI相对FDA解释标准........................................................................14 抗微生物药物敏感性试验分会申明.............................................................................................................15 M02-A10文件(纸片扩散法)和M07-A8文件(MIC法)——表1与表2 的介绍…………..….......................16 表1. 由美国 FDA 核准的临床微生物实验室在非苛养菌常规试验和报告中应考虑的抗微生物药物推 荐分组….........................................................................................................................................................22 表1A. 由美国FDA 核准的临床微生物实验室在苛养细菌常规试验和报告中应考虑的抗微生物药物 推荐分组……………………………………………………………………………………………….…....28 表1B.对潜在生物恐怖细菌应予以试验和报告的抗微生物药物（只用MIC法）..... ..............................32 表 2A-2L.抑菌圈直径及MIC解释标准： 2A. 肠杆菌科.................................................................................................................................................34 附表 2A-S1. 表 2A.所用肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌 ESBLs的筛选 和确证试验.....................................................................................................................................................40 附表 2A-S2. 表 2A.所用疑为产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的筛选和确证试验......................................42 2B-1. 铜绿假单胞菌......................................................................................................................................46 2B-2. 不动杆菌属..........................................................................................................................................48 2B-3. 洋葱伯克霍尔德菌.......................................................……………………………………………...50 2B-4. 嗜麦芽窄食单胞菌............................................................…………………………………….…….51 2B-5. 其它非肠杆菌科菌.........................................................………………………………...…………..52 2C. 葡萄球菌属...............................................……………………………………………………………..54 附表 2C-S3. 金黄色葡萄球菌群的筛选试验： β-内酰胺酶的产生， 苯唑西林耐药， 用头孢西丁检测mecA 介导的苯唑西林耐药，万古霉素MIC值 ≥ 8 μg/mL，诱导性克林霉素耐药，以及高水平的莫匹罗星耐 药；结合表2C使用……………................................................................................................................ ..64 附表 2C-S4. 凝固酶阴性葡萄球菌（路邓葡萄球菌除外）的筛选试验：β-内酰胺酶，用头孢西丁筛选 mecA介导的苯唑西林耐药以及可诱导性克林霉素耐药；结合表2C一起使用…..................................68 2D. 肠球菌...................................................................................................................................................70 附表2D-S5. 高水平氨基糖苷类耐药(HLAR)和耐万古霉素肠球菌的筛选试验....................................73 2E. 流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌.......................................................................................................74 5
抗菌药物的敏感性试验及报告解读
明确提出在二级以上医院设立感染科与感染临床药师（第12、
13条），及临床微生物室（第14条）
6
Company name
概况和制定过程
第一章 总则
第六章 附则 第五章 法律责任
共六章 53条
第二章 组织机 构和职责
• 组织医院管理、临床、药学 、微生物检验、感染等方面 专家起草《抗菌药物临床应 用管理办法》
19
Company name
培养条件（一）
需氧菌： 35℃ ±2 ℃ ，16-18小时 嗜麦芽窄食单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌：20-24小时 葡萄球菌：33-35 ℃ ，OXA、MET、NAF、VAN24小时 肠球菌：VAN 24小时 溶血性链球菌、肺炎链球菌、奈瑟氏菌属等：20-24小时
20
Company name
操作：
无菌棉签蘸取菌液，在管壁内将多余菌液旋 转挤去后，在琼脂表面均匀涂布接种3次， 每次旋转平板60度，最后沿平板内缘涂抹1 周。 室温干燥或35℃干燥5-15分钟 用纸片分配器或无菌镊子将药物纸片紧贴于 琼脂表面 纸片间距 20mm 纸片离平板内缘 15mm
15
Company name
抗生素药敏试验质控
• 4月11日起征求全国意见
• 制定《抗菌药物临床应用分
第三章 抗菌药物 级管理目录》
临床应用管理
• 4月15日期征求全国意见
第四章 监督管理
7
Company name
第三章 抗菌药物临床应用管理
• 三级医院 不得超过50种，二级医院 不得超过35种 • 同一通用名称药品的品种，注射剂型和口服剂型各不得超过2种，处方组成
葡萄球菌属 Mueller-Hinton（MH）琼脂
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增加的…MRSA的定义
“MRSA是指表达mecA基因或其它甲氧西林耐药机制( 如青霉素结合蛋白对苯唑西林亲和力改变等）的金黄
色葡萄球菌 MRSA=表达mecA基因 和/或 苯唑西林MIC>2 μ g/ml
CLSI M100CLSI M100--S20. pp. 60
金黄色葡萄球菌或路登葡萄球菌检测苯 唑西林（OX）和头孢西丁（FOX）
“头孢西丁被作为苯唑西林耐药的替代药物；报 告苯唑西林敏感或耐药是基于头孢西丁的结果 。假如头孢西丁和苯唑西林都被用于测定金黄 色葡萄球菌或路登葡萄球菌，那么两种药物中 任一种耐药，该菌株即应被报告为对苯唑西林 耐药。”
金黄色葡萄球菌或路登葡萄球菌检测苯 唑西林（OX）和头孢西丁（FOX）
OX S R R S FOX S R S R 耐药机制 None mecA 相对流行率 OX报告 一般 S 一般 R R* R*
纸片扩散法
– Kirby-baure(K-B)法）
稀释法
– 试管稀释法（肉汤稀释法
– 平板稀释法（琼脂稀释法）
E-Test
细菌报告应注意的问题
有无细菌：苛养菌、难培养细菌 正常菌群/病原菌:病史、病人体征、感染部位
药敏结果报告：耐药菌株的提示或修改
正确阅读纸片法结果
完全抑制的抑菌圈直径，包括纸片的直径 不反光的黑色背景、反射光下阅读结果 抑菌圈的界限应该是以肉眼观察没有明显的 可见细菌生长区域
β-内酰胺酶的诱导试验
葡萄球菌属
青霉素 MIC≤0.12mg/L 抑菌圈直径≥29mm
苯唑西林
(诱导剂）
•菌种划线(BAP、MHA)
•贴β-内酰胺类纸片(OXA、FOX)
•过夜培养
•检测抑菌圈边缘的菌落
葡萄球菌属-D试验
15～26mm erm 基因编码的23S rRNA 甲基化 报告评论: “由于克林 霉素诱导耐药试验阳性 ,推测此菌株对克林霉 素耐药,但在少数患者 治疗中克林霉素可能仍 有效”。
肠杆菌科新旧折点(MIC
Agent 头孢唑啉 头孢噻肟 头孢唑肟 CLSI M100-S19 S ≤8 ≤ 8 ≤8 I 16 16-32 16-32 R ≥32 ≥64 ≥64 CLSI M100-S20 S ≤ 1 ≤ 1 ≤ 1 I 2 2 2
ug/l）
R ≥4 ≥4 ≥4
头孢曲松
头孢他啶
≤ 8
mecA（低水平表达） 少见 PBP改变或β -内酰胺 罕见 酶的高表达（模糊的 MRSA）
葡萄球菌属:诱导性β -内酰胺酶试验
青霉素 – MIC≤0.12mg/L – 抑菌圈直径≥29mm 诱导性β -内酰胺酶试验
对于严重感染，随后分离出的菌株，实验室应进行 青霉素的MIC检测和β-内酰胺酶诱导试验
方法 CLSI M100-S19 (2009) S I R ≤4 ≥21 CLSI M100-S20 (2010) S I R ≤4 ≥8 ≥21 ≤20
MIC(ug/ml） 抑菌环直径（mm）
♦对利奈唑胺不敏感的的金葡较少，占0.05%（7/15280）。
CLSI agenda book June 2009
试条两边产生不同的交界点， 读取较高数值侧的MIC。如 果两侧差＞1个稀释度，则须 重复试验。 MIC 0.5ug/ml
忽略变形杆菌的迁延现象， MIC 0.064ug/ml
哪些需要做MIC
肺炎链球菌 苯唑西林纸片法直径≤19mm,需要明 确受试菌对青霉素的敏感性，必须做青霉素的E-试 验 革兰阳性球菌 万古霉素不敏感时（中介或耐药） ，必须做万古霉素的E-试验确认受试菌对万古霉素 的敏感性（包括替考拉宁、利奈唑胺等） 草绿色链球菌 对青霉素、氨苄西林 纸片法药敏结果不可靠，必须做上述 两药的E-test
修订的MIC折点与相关的抑菌圈直径标准尚未确立
需要进一步的研究 可能需要使用一种改变含药剂型的新型纸片
ESBLs检测（1）
最初的建议*是基于： --研究观察到某些产ESBLs菌株，药物的MICs有升
高但仍然在敏感区（旧折点）
--有限的临床观察发现，对于产ESBLs菌株引起的感 染，病人预后差。
对于三个青霉素的判断标准我们都应该解 释和报告吗？
青霉素判断标准
脑膜炎 非脑膜炎 口服青霉素V
解释/报告？
• 是的，脑脊液标本 • 是的，其他的标本，因为我们通常不 能确定该感染是否涉及脑膜 • 可能不需要，如果你们实验室不用口
服青霉素（阿莫西林经常被用做口服
青霉素的首选）
不可能出现的药敏结果
同一株细菌不可能出现的矛盾的药敏结果 金葡菌：青霉素S，苯唑西林R；万古霉素R 肠球菌：万古霉素S，替考拉宁R 肠杆菌科细菌：第三代头孢菌素R，第二、第 一代S CLSI附录E（Appendix E)指出的少见或罕 见的结果 如遇到上述菌株必须重新鉴定细菌和药敏！
≥ 23
≥ 20 ≥ 21 ≥ 18
15-22
15-19 14-20 15-17
≤ 14
≤ 14 ≤ 13 ≤ 14
≥ 26
≥ 25 ≥ 23 ≥ 21
23-25
22-24 20-22 18-20
≤ 22
≤ 21 ≤ 19 ≤ 17
氨曲南
≥ 22
16-21
≤ 15
≥ 21
8-20
≤ 17
*纸片扩散法折点标准还未建立
Yes,假如需要的话
Yes
Yes,假如需要的话
No
未被CLSI重新评估的折点 头孢孟多 头孢尼西 头孢哌酮 拉氧头孢
在USA这些药物通常是不可行的或为被使用 假如使用这些药物的话，我们必须继续在大肠埃希菌 、克雷伯菌属和变形杆菌中做ESBL初筛及确证实验
--ESBL阳性，将头孢菌素类、青霉素类和氨曲南等药物
在抑菌圈边缘微弱生长的、仅能在放大镜下 才能观察到的细小菌落应忽略
正确阅读抑菌圈内的“霾”现象
变形杆菌(迁移生长)以及磺胺类药物的纸片法药敏 注意要读完 全抑制的抑菌圈，对“霾”生长不予理会
克林霉素对葡萄球菌的抑菌圈内如有薄雾状菌苔应报告细菌对 克林霉素耐药,不管其是否显示 “D”抑菌圈
葡萄球菌：某些情况下，对万古霉素
纸片法的分辨率低
Clinical Infectious Diseases 2007; 44:1536–42
万古霉素的MIC方法为常规药敏试验的方法
2009 2008
2009年取消了万古霉素对葡萄球菌纸片法药敏
增加万古霉素剂量不能改善临床疗效
大剂量万古霉素治疗医院获得性MRSA感染， MIC=2µg/mL仍导致高治疗 失败率
ESBLs试验建议是处理一个新型耐药机制 的短期解决方案
ESBLs检测（2）
•多重耐药机制的出现可能会使ESBL确证实验受阻
----ESBL+AmpC ----ESBL+孔蛋白突变 • ESBLs产生于肠杆菌科细菌，而不仅仅是大肠埃希菌、克雷伯 菌属和奇异变形杆菌,对于其他的菌株确证实验则存在许多问 题
为什么CLSI降低了头孢菌素及氨曲南的折点
以前的折点标准建立于20年前（ESBLs以前） 老的和新的β-内酰胺酶耐药机制等相关知识的 增加 --ESBL问题的复杂化；多种酶导致ESBL检测的准确性降低 新的建立折点标准工具的出现 --PK/PD知识的增加
为什么头孢唑啉没有纸片扩散法折点？
改为“R”
“ S ”修
葡萄球菌属相关的更新
MRS的结果报告原则
MRSA和MRCNS菌株对β -内酰胺类药物，如青霉 素类、 β -内酰胺/ β -内酰胺酶抑制剂、头 孢类（除外新型的有抗MRSA活性的头孢菌素， 如Ceftaroline 、Ceftobiprole ）以及碳青 霉烯类体外敏感但临床无效，均需报告为耐药
需在透射光（Transmitted light）下阅读万古霉素、利奈唑胺 和苯唑西林的抑菌圈，遇不敏感的结果需用稀释法测定MIC法 确证
E-test试验结果阅读
忽略溶血，读取生长完全被抑 制处 MIC 0.032ug/ml
杀菌型药物如氨基糖苷类产 生“干脆利落”椭圆球 MIC 0.064ug/ml
CLSI M100CLSI M100--S20. Table 2A.
已评估但未修正的肠杆菌科药敏折点
药物 CLSI M100-S20(2010) S I R ≤8 16 ≥32
16 32 16 ≥ 32 ≥ 64 ≥ 32
头孢呋辛 （非口服） 头孢吡肟 ≤8 头孢替坦 ≤16 头孢西丁 ≤8
CLSI M100CLSI M100--S20. Table 2A.
药敏试验及2010年CLSI更新
华中科技大学同济医院 朱旭慧
细菌耐药性变迁—G+
金葡菌 MRSA VISA VRSA CA-MRSA 青霉素不敏感肺炎链球菌 PISP PRSP 耐万古肠球菌 VRE（vanA vanB vanC）
细菌耐药性变迁—G肠杆菌科细菌 大肠、肺克、奇异变形杆菌 产ESBLs，AmpC酶等 大肠埃希菌－耐FQ
♦耐药机制已被识别 ---rRNA突变和cfe基因介导的耐药（其可被质粒编码） Mendes et al. 2008. Antimicrob Agents Chemother. 52:2244.
修订的建议… Re：万古霉素MIC,什么时候葡萄球菌应该被
送到一个参考实验室做进一步检测？
§金黄色葡萄球菌 ---MIC 4μ g/ml—Maybe ---MIC≥8μ g/ml—Yes §凝固酶阴性葡萄球菌（CoNS） --- MIC≥32μ g/ml—Yes
葡萄球菌属—利奈唑胺 增加的…“R”折点
2010CLSI主要更新内容
肠杆菌科相关的更新 葡萄球菌属相关的更新 其他菌种相关的更新 表1和表2介绍内容中的更新