全血乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)

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人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒应用方法人乳酸脱氢酶(LDH)ELISAKit

人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒应用方法人乳酸脱氢酶(LDH)ELISAKit

人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒应用方法人乳酸脱氢酶(LDH)ELISAKit人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒:(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本试验采用双抗体夹心ABCELISA法。

用抗人LDH单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的LDH与单抗结合,加入生物素化的抗人LDH,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最终加停止液硫酸,在450nm处测OD值,LDH浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中LDH浓度。

试剂盒构成(28℃保管)酶标板(CoatedWells) 96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate) 12ml 10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml 20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):80U/瓶 2瓶底物工作液(TMBSolution) 12ml第一抗体工作液(BiotinylatedAntibody) 12ml 停止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,28℃保管48小时;更长时间须冷冻(20℃或70℃)保管,躲避反复冻融。

2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成80000U/L的溶液。

设标准管8管,第一管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。

在第一管中加入80000U/L的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。

如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。

第八管为空白对照。

3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液 9ml蒸馏水)。

4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。

乳酸(LA)含量检测试剂盒说明书 微量法

乳酸(LA)含量检测试剂盒说明书 微量法

乳酸(LA)含量检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

货号:BC2235规格:100T/48S产品内容:提取液一:液体50mL×1瓶,4℃保存。

提取液二:液体8mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体6mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体34μL×1支,4℃保存。

临用前按试剂二(V):蒸馏水(V)=10μL:450μL的比例配制试剂二溶液,现用现配。

试剂三:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。

临用前加入4mL蒸馏水充分溶解,可分装后-20℃保存,避免反复冻融,-20℃保存一周。

试剂四:粉剂×1瓶,4℃避光保存。

临用前加4mL蒸馏水充分溶解,4℃保存一周。

试剂五:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。

临用前每瓶加入3mL蒸馏水混匀,可分装后-20℃保存,避免反复冻融,-20℃保存一周。

试剂六:液体2mL×1瓶,4℃保存。

标准品:粉剂×1支,4℃保存。

临用前加入1.04mL蒸馏水配成100μmol/mL的标准溶液。

显色液的配制:临用前根据用量按照试剂三(V):试剂四(V)=1:1的比例充分混匀,现配现用。

产品说明:乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物,与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关,乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。

乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸,同时使NAD+还原生成NADH和H+,H+传递给PMS生成的PMSH还原MTT生成紫色物质,在570nm处有特征吸收峰。

2自备实验用品及仪器:天平、研钵/匀浆器、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅、乙醇和蒸馏水。

操作步骤:一、样本处理:1.组织:按照质量(g):提取液一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液一)加入提取液一,冰浴匀浆后于4℃,12000g离心10min,取0.8mL上清液,再加入0.15mL提取液二,4℃12000g 离心10min后取上清待测。

乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒一站式解决方案

乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒一站式解决方案

乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒一站式解决方案乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LD 或LDH ,EC1.1.1.27 )是一类NAD依赖性激酶,有LDHA、LDHB、LDHC三种亚基,可构成6种四聚体同工酶。

动物乳酸脱氢酶是由4个亚单位组成的四聚体,常见的A、B 两种亚基构成的5种LDH同工酶(LDH1-5),C亚基则仅组成一种LDH同工酶即LDH-C4。

乳酸脱氢酶为含锌离子的金属蛋白,分子量为135-140kD,是糖无氧酵解及糖异生的重要酶系之一,可催化丙酸与L-乳酸之间的还原与氧化反应,也可催化相关的α-酮酸。

LDH广泛存在于人体组织中,以肾脏含量最高,其次是心肌和骨肌。

红细胞内LDH约为正常血清的100倍。

一、乳酸脱氢酶分类1.根据结合辅酶的不同,微生物体一般包含两种乳酸脱氢酶,NAD-依赖型乳酸脱氢酶(NAD-dependent lactate dehydrogenases,nLDHs)和NAD-非依赖型乳酸脱氢酶(NAD-independent lactate dehydrogenases,iLDHs)两大类。

2.按其催化底物的构型不同,NAD-依赖型乳酸脱氢酶可以分为NAD依赖型-L-乳酸脱氢酶(L-NAD-依赖型乳酸脱氢酶)和NAD依赖型-D-乳酸脱氢酶(D-NAD-依赖型乳酸脱氢酶)两大类,分别催化丙酮酸合成L-乳酸和D-乳酸。

3.根据天然电子受体的不同,可以将NAD-非依赖型乳酸脱氢酶分为三类。

第一类为膜蛋白,利用膜醌类作为外部的电子受体;第二类直接利用O2作为电子受体,根据氧化终产物的不同,又将其细分为乳酸氧化酶(Lactate oxidase,LOX)和乳酸单氧酶(Lactate monooxygenases,LMO),其中前者产生丙酮酸和H2O2,而后者产生乙酸、CO2和H2O;第三类是硫胺b2(flavocytochrome b2),存在于真菌中,它天然的电子受体为细胞色素c。

乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)试剂盒说明书

乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)试剂盒说明书

货号:MS1001 规格:100管/48样乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)试剂盒说明书微量法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义:LDH(EC 1.1.1.27)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是糖酵解途径的末端酶,催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应,伴随着NAD+/NADH之间互变。

测定原理:LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸进一步与2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性溶液中显棕红色,颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。

自备实验用品及仪器:可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:提取液:60mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体5mL×1瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入1.3 mL蒸馏水充分溶解备用,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;试剂三:液体5 mL×1瓶,4℃避光保存;试剂四:液体20mL×1瓶,4℃保存;样品测定的准备:1、细菌、细胞或组织样品的制备:细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为1000~5000:1的比例(建议2000万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。

8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

测定步骤:1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm,蒸馏水调零。

乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P比色法)

乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P比色法)
2、 手工比色检测:按照下表设置测定管,溶液应按照顺序依次加入,幵注意避免产生气泡。 如果样品中的 LDH 浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检 测最好能设置平行管。
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加入物(ml) 待测样品(血清、血浆、体液等) LDH 检测工作液
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乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P 比色法)
简介:
乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH 或 LD)属于氧化还原酶,能够催化氢氧原 子或电子从一中底物转移到另一种底物上乳酸脱氢酶是糖酵解和糖异生的一个极其重要的 酶,含有锌离子,广泛分布于人和动物组织、植物和微生物中,能可逆的催化乳酸(L)和丙 酮酸(P)之间的氧化还原反应。乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P 比色法)是利用乳酸脱氢 酶催化上述逆反应,即丙酮酸+NADH+H+→乳酸+NAD+。在上述反应过程中,丙酮酸还 原成乳酸,同时 NADH 氧化成 NAD+,引起 340nm 处吸光度的下降。该 LD-P 法的优点 是:1、操作比二硝基苯肼比色法简单;2、重复性好;3、准确性比二硝基苯肼法好;4、
2、 处理后的样品应及时检测,否则 LD4 和 LD5 易失效。 3、 血清或肝素抗凝血浆检测效果较好,草酸类、EDTA 抗凝剂对 LDH 活性有抑制作用。
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4、 避免使用溶血样本。 5、 为了您的安全和健康,请穿实验服幵戴一次性手套操作。
自动分析仪计算公式:LDH(U/L)=ΔA/min×(106/6220)×(296/10)=ΔA/min×4758.8 注意:如果待测样品加入 LDH 保护工作液,其结果应除以 0.9。

乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求lepu

乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求lepu

乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)适用范围:用于体外定量测定人血清中乳酸脱氢酶的活性。

分说明1.1 规格试剂1:3×60 mL,试剂2:1×45 mL;试剂1:1×60 mL,试剂2:1×20 mL;试剂1:1×60 mL,试剂2:1×12 mL;试剂1:2×60 mL,试剂2:2×15 mL;试剂1:1×40 mL,试剂2:1×10 mL;试剂1:1×4L,试剂2:1×1L;试剂1:1×16L,试剂2:1×4L。

1.2主要组成成分试剂1主要组分:试剂2主要组分:2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。

2.2 外观试剂1:无色或淡黄色透明溶液;试剂2:无色或淡黄色透明溶液。

外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。

2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不大于0.50。

2.3.2 试剂空白吸光度变化率在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,用生理盐水作为样品加入试剂测试时,试剂空白吸光度变化率(△A/min)应不大于0.002。

2.4 分析灵敏度测试300U/L的被测物时,吸光度变化率(ΔA/min)应不低于0.0085。

2.5 准确度用参考物质(GBW09177)对试剂(盒)进行测试,相对偏差应不超过±10%。

2.6 重复性用血清样品或质控样品重复测试所得结果的重复性(变异系数,CV)应不大于5%。

2.7 线性2.7.1 在[25,750]U/L区间内,线性相关系数r应不小于0.990;2.7.2 [25,100)U/L区间内,线性绝对偏差应不超过±10U/L;[101,750]U/L区间内,线性相对偏差应不超过±10%。

2.8 批间差试剂(盒)批间相对极差应不大于10%。

乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求derui

乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求derui

乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒
(乳酸底物法)
2.1外观和性状
外观和性状应符合表2要求。

表2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2试剂空白
2.2.1试剂空白吸光度
试剂以生理盐水为空白时,在温度37℃、波长340nm、光径1.0 cm 条件下,吸光度≤0.50。

2.2.2试剂空白吸光度变化率
试剂以生理盐水为空白时,在温度37℃、波长340nm、光径1.0 cm 条件下,吸光度变化率≤0.002。

2.3分析灵敏度
试剂盒测试浓度为100U/L被测物时,吸光度变化率≥0.004。

2.4线性范围
2.4.1试剂盒在25 ~750U/L区间(范围)内,其回归系数r≥0.990。

2.4.2相对偏差或绝对偏差应符合表3 要求。

表3 相对偏差或绝对偏差
2.5精密度
2.5.1试剂盒重复性CV 值应≤5%。

2.5.2试剂盒批间相对极差(R)应≤10.0%。

2.6准确度
相对偏差(Bias%)应在参考物质靶值±10%以内。

2.7液体装量
试剂盒不同规格的净含量应不少于其标示量。

乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒说明书

乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒说明书

乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒说明书(乳酸→丙酮酸连续监测法)【产品名称】中文名称:乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒(乳酸→丙酮酸连续监测法)英文名称:LACTATE DEHYDROGENASE REAGENT KIT(L→P method)【包装规格】50ml/盒(R-1:40ml×1,R-2:10ml×1),240ml/盒(R-1:64ml×3,R-2:48ml×1),250ml/盒(R-1:40ml×5,R-2:10ml×5),375ml/盒(R-1:100ml×3,R-2:75ml×1),2500ml/盒(R-1:500ml×4,R-2:500ml×1)。

【预期用途】本试剂盒用以测定人血清乳酸脱氢酶(LDH)的活力。

【检验原理】乳酸脱氢酶在催化乳酸生成丙酮酸的同时将NAD+还原成NADH。

通过测定NADH在340nm处吸光度增加的速度可求得乳酸脱氢酶的活力。

LDHL-乳酸+ NAD+─────→丙酮酸+ NADH + H+【主要组成成份】试剂成份含量R-1 L-乳酸锂76mmol/LR-2 NAD ≥31mmol/l *不同批号试剂盒中的各组份,经检验符合产品性能指标的,可以互换。

【储存条件及有效期】本试剂盒在2-8℃下避光保存可稳定一年;试剂R-1、R-2开启后在2-8℃避光保存可稳定一个月。

【适用仪器】本试剂适用于日立7020型、日立7060型、日立7080型、日立7150型、日立7170型、日立7180型、日立7600(D)型、日立7600(P)型自动分析仪以及奥林巴斯AU600、AU2700、东芝-雅培、BECKMAN CX系列、BECKMAN LX-20型等自动分析仪。

本试剂在日立7020自动分析仪上已通过第三方验证,并备有以上各种自动分析仪的参数可供参考。

【样本要求】空腹血清,保存于室温可稳定3小时,保存于0℃以下可稳定1周。

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全血乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)
简介:
乳酸(Lactic acid,LD)又称 2-羟基丙酸是一种化合物,是一种含有羟基的羧酸,分子 式是 C3H6O3,参不生物化学很多反应过程。乳酸检测有化学氧化法、酶催化法、电化学法、 酶电极感应器法。
使用说书
1份
操作步骤(仅供参考):
1、 配制蛋白沉淀工作液:取 1 瓶蛋白沉淀剂,直接加入蒸馏水至 100ml,充分混匀,即 为蛋白沉淀工作液。
2、 配制空白对照液。4℃避光保存 1W 有效。 3、 制备无蛋白上清液:抽血前,取试管或离心管编号,分别称重(Wt)幵记录,加入 6ml
蛋白沉淀工作液,再次分别称重(Wm)幵记录,冰浴或 4℃保存备用。在空腹和休息状 态下抽血,丌用止血带,丌可用力握拳,如果使用止血带,应在穿刺后除去止血带至少 等待 2min 后再抽血。最好用肝素化的注射器抽血,抽取血液后立即注入预先称量的含 有蛋白沉淀工作液(预冷至 4℃)的试管或离心管中,每管 1ml。颠倒混匀 3 次,丌可产 生气泡。待试管或离心管的温度不室温一致时,再称重(Wb)幵记录。 4、 全血 LD 检测:按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔,溶液应按照顺序依次加入,幵 注意避免产生气泡。如果样品中的 LD 浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进 行测定。样品的检测最好能设置平行孔。
计算结果: 血清、血浆乳酸(mmol/L)=(A 测定/A 对照)×1.0×D
也可根据 NADH 毫摩尔吸光度计算:血清、血浆乳酸(mmol/L)=A 测定×(2.33/6.22) × (D/0.1)
参考区间:
全血乳酸 血浆乳酸 脑脊液乳酸 成年人尿液乳酸排出量
0.5~1.7mmol/L(5~15mg/dl) 0.54~1.82mmol/L(5.4~16mg/dl)
0.5~1.7mmol/L(5~15mg/dl) 5.5~22mmol/d
注意事项:
1、 本法适用于自动分析仪,分别监测测定管和标准管的吸光度升高速率,计算乳酸的浓 度。
2、 如果没有分光光度计,也可以使用酶标仪测定。 3、 抗凝剂用肝素钠-氟化钠较好。抗凝血样品置于冰浴中送检,尽快分离出血浆等。 4、 草酸抗凝剂对 LDH 有一定的抑制作用。 5、 为了您的安全和健康,请穿实验服幵戴一次性手套操作。
全血乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)其检测原理是在 NAD 存在条件下,乳酸脱氢 酶(LDH)催化乳酸生成丙酮酸,同时生成 NADH。通过分光光度比色法测定 340nm 处吸光 度,据此通过比色分析就可以计算出全血或血浆中 LD 水平。该试剂盒仅用于科研领域,丌 宜用于临床诊断或其他用途。
组成:
名称
北京雷根生物技术有限公司
加入物 空白对照液/μl 乳酸标准(1mmol/L)/μl 无蛋白上清液/μl LD Assay buffer/μl
LD 显色液/μl
空白孔 10 — — 200
充分混匀 23
标准孔 — 10 — 200
23
测定孔 — — 10 200
23
5、 室温放置 15min,用酶标仪检测,以空白孔调零,读取空白孔、标准孔、测定孔的 340nm 吸光度(即 A 空白、A 标准、A 测定),一般应数小时内检测完毕。
编号
TC073 9 50T
Storage
试剂(A): 乳酸标准(1mmol/L)
1.5ml
4℃ 避光
试剂(B): 蛋白沉淀剂
3瓶
RT 避光
试剂(C): LD Assay buffer
25ml
-20℃ 避光
试剂(D): D1: LD 显色液 A LD 显色液
0.2ml -20℃ 避光
临用前,按 D1:D2=3:200 的比例混合,即为 LD 显色液,即配即用。
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