疑难血型鉴定流程精编版
疑难血型分析鉴定及处理
白血病 输异型血 移植 输血反应 血型物质↑
正定型，意外抗原反应
1、获得性B抗原(类B) (临床提示感染) 2、多凝集红细胞 3、自身凝集素 (临床提示AIHA)直抗（+） 4、红细胞粘附大量蛋白 5、红细胞未洗涤,血清对 试剂反应 6、输异型血(输血史) 7、造血干细胞移植(病史) （混合视野）
0 0
± 1+
Oc 抗H 4+
Pc 4+
A1c ±
H抗原强弱：Oc > 大部分亚型> Ac
• 3、吸收放散试验： 1份Pc（生理盐水三洗后）+1份抗A 4℃吸收30-60min 4℃生理盐水洗6次 热放散后取上层放散液
放散液的检测：
Pc放散液 A细胞 IS 2+
Oc放散液 0
4℃
3+
0
通过吸收放散试验在Pc上检测出A抗原
• 4、结论
综上所述：可判断为A亚型，但还不能确定亚型的具体分型 • 输血：A型红细胞、血小板
ABO亚型的检测
人源B
抗A1
实例分析（二）
-A
室温 4+
-B
2+
-D
4+
自身c
2+
Ac
2+
Bc
4+
分析：患者的血型可能是A型。 巨球蛋白血症或部分多发性骨髓瘤患者，血液中异 常球蛋白升高，导致缗钱状凝集 对策：核对患者诊断和用药情况；盐水替代 ：A型 输血：A型红细胞、血小板
主 侧 + 自身对照 抗体筛选 +
对患者血清进行抗体鉴定，筛选对应抗原阴性 的红细胞重做交叉配血。
主 侧 + 自身对照 + 抗体筛选 +
疑难血型鉴别总结
ABO疑难血型鉴定三步法第一步:复查ABO血型，排除人为因素、操作失误。
重新采集血样、核对试剂和器材。
第二步：将需定型病人归纳进五大类33种原因分类表，“对号入座”，逐一排除，剩下几条不能排除者——第三步：针对剩下的几种不能排除的因素，设计针对性实验来验证。
ABO疑难血型鉴定1 红细胞抗原↓7种(1)年龄小于6个月或老年(临床提示)(2)白血病(临床提示)(3)异型血输注(临床提示输血史)(4)造血干细胞移植(病史)(5)血型物质升高(6)急性大失血(临床病史)(7)ABO亚型2 红细胞抗原额外反应7种(1)自身凝集素(临床提示AIAH)(2)红细胞粘附大量蛋白(红c未洗涤)(3)红细胞未洗涤，与血清试剂反应(4)造血干细胞移植(病史)(5)获得性B抗原(类B)(临床提示感染)(6)B(A)、A(B)表型(7)异型血输注(输血史)无临床提示者，仅三种3 血清抗体↓6种(1)年龄小于6个月或老年(临床提示)(2) 双胞胎嵌合体(家族史)(3)低丙种球蛋白血症(临床提示)(4)造血干细胞移植(病史)(5)先天性ABO抗体缺失(6)大量输液(输液史)4 血清抗体额外反应8种(1)自身抗体(临床提示AIAH)(2)同种抗体(3)对试剂反应的物质(4)血清蛋白异常(临床常为肝病)(5)输异型血浆(输血史)(6)造血干细胞移植(病史)(7)输含血型抗体的免疫球蛋白(输血)(8)ABO亚型无临床提示者，仅四种5 混合凝集5种(1)近期怀孕或输血(病史、输血史)(2)双胞胎嵌合体(家族史)(3)骨髓移植受者(临床提示)(4)造血干细胞移植(病史)(5)白血病(病史)常见几种疑难血型分析：例1：实验中一例A2B亚型的鉴定：临床标本，姓名：张××，标本离心分离血浆，常规操作，制备0.8%、4%红细胞悬液。
对标本进行正反定型，博迅定型试剂卡批号：20081006，反定型试剂批号：20090602，结果如下：正定型反定型抗-A 抗-B 抗-D A1 Bc3+ 3+ 4+ 4+W －分析：标本正定显示为AB型，反定显示为B型，反定该标本血清(血浆)与反定型A1细胞呈现4+W的反应格局(存在混合凝集)，正反定型不符。
血型鉴定实验步骤
血型鉴定实验步骤血型鉴定是一项常见的实验，用于确定一个人的血型类型。
通过这个实验，可以了解血液中存在的抗原和抗体，从而做出正确的血型鉴定。
下面将介绍血型鉴定的实验步骤。
实验所需材料：1. 血液样本：可以采用新鲜的全血或血清样本。
2. 血型试剂：包括抗A血清、抗B血清和抗Rh(D)血清。
3. 平板化玻片：用于糖胺聚糖凝集试验。
4. 微量移液器和移液管：用于加取试剂和样本。
5. 定量移液器和移液管：用于加取试剂和样本。
实验步骤：1. 用干净的平板化玻片，在玻片上标记样本来源（如A、B、C 等）。
2. 使用微量移液器，分别将要鉴定的血液样本滴在相应的标记区域上。
3. 加入相应的血型试剂。
将抗A血清滴在一个样本的标记区域上，将抗B血清滴在另一个样本的标记区域上。
4. 使用定量移液器，将抗Rh(D)血清分别滴在相应样本的标记区域上。
5. 使用棉签或棉花片，轻轻搅拌每个滴在玻片上的血液样本和试剂，使其充分混合。
6. 观察样本与试剂的反应。
根据出现的凝集情况，可以确定血型类型。
如果发生凝集，表示血液中有相应血型的抗原。
7. 结果的判断：- 若抗A血清与某个样本发生凝集，表明该样本为A型血。
- 若抗B血清与某个样本发生凝集，表明该样本为B型血。
- 若抗A血清和抗B血清与某个样本同时发生凝集，表明该样本为AB型血。
- 若抗Rh(D)血清与某个样本发生凝集，表明该样本为Rh(D)阳性（即Rh+）。
- 若抗Rh(D)血清与某个样本未发生凝集，表明该样本为Rh(D)阴性（即Rh-）。
8. 记录实验结果。
根据凝集反应的情况，可以确定血型类型，并记录在实验记录表中。
需要注意的是，在进行血型鉴定实验时，应严格遵循实验室操作规范和安全操作流程。
保持试剂和样本的洁净，避免交叉污染。
使用移液器时，应注意正确的使用方法，避免出现误差。
实验结束后，将使用过的实验器材进行妥善清洁和消毒处理。
血型鉴定实验是一项简单而重要的实验，可以为医学诊断和输血提供重要的参考依据。
红细胞 ABO 疑难血型检测分析与记录流程【最新版】
红细胞ABO 疑难血型检测分析与记录流程导语:您的实验室在遇到到ABO正反定型不符时，是如何分析与处理的?有无相关流程与相关检测记录?疑难标本有无外送其他实验室的情况?本篇文献来自中国输血杂志2014年2月第27卷第2期《红细胞ABO疑难血型检测分析与记录流程》Doi: 10.13303 /j.cjbt.issn.1004-549x.2014.02.006，作者临床输血规范流程协作组，协助组专家对中国输血医学的规范化发展做了大量前瞻性工作与研究，通过建立ABO疑难血型检测流程，可以保障输血安全，对基层医疗机构的ABO血型鉴定具有重要指导意义。
ABO 血型的正确鉴定是输血相容性检测的最重要环节，关系着患者的用血安全。
患者在输血前应常规检测红细胞ABO 血型正定型( 红细胞定型) 和反定型( 血清定型) ，只有在正反定型结果匹配一致，才能确定红细胞ABO 血型。
红细胞ABO 血型鉴定会受到年龄、疾病、遗传、药物等诸多因素的影响。
建立红细胞ABO 疑难血型检测流程，旨在规范输血前红细胞ABO 血型实验室检测程序，对红细胞ABO 疑难血型进行正确判断，以达到安全输血目的，尤其是对基层医疗机构输血科( 血库) 红细胞ABO 血型鉴定具有指导性意义。
一、一般资料(一)病例选择在常规进行红细胞ABO 血型正反定型试验时，凡正反定型试验结果不一致者均进入疑难血型鉴定程序。
所谓正反定型结果一不致，就是在应用常规血清学试验方法检测ABO 血型的红细胞定型和血清定型，结果不能得到相互印证，包括抗原、抗体反应的不凝集和弱凝集结果。
弱凝集标准为凝集强度≤2 + ，评分≤8 分。
(二) 患者信息采集与记录实验前应采集与记录患者姓名、性别、年龄、临床诊断、既往输血史、妊娠史、临床用药情况和( 或) 父母、子女红细胞ABO 血型等信息。
二、标本采集(一) 血液标本采集凡正反定型试验结果不一致者均应重新采集血标本。
应采集血清标本与EDTA 抗凝血标本2~5 mL，各1 份，做好标识。
输血科ABO疑难血型鉴定标准操作规程
输血科ABO疑难血型鉴定标准操作规程1.目的为规范ABO疑难血型鉴定操作，保证临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》4.1.7（1）条款的要求制定本规程。
2.适用范围适用于医疗机构输血科对ABO血型鉴定正反定型不相符，常规方法不能确定ABO血型的进一步确认试验。
3.职责医疗机构输血科技术人员负责ABO疑难血型鉴定。
4.原理ABo血型鉴定正反定型不相符时，通过采用单克隆抗-A、抗-B、抗-Ai、抗-AB、抗-H试剂与受检者红细胞反应监测ABH抗原，A、B、。
型试剂红细胞及自身红细胞与受检者血清（血浆）反应监测血型抗体，红细胞洗后放散试验监测弱A、弱B抗原，凝集抑制试验监测唾液ABH血型物质，血清（血浆）吸收试验排除ABO血型以外的抗体对鉴定的影响，从而获得确定受检者ABO血型的依据，确定ABo血型。
5.检测环境条件室温应控制在18-27βC,湿度应保持30%—70%。
6.步骤与方法6.1收集受检者临床资料当执行《试管法鉴定ABO和RhD血型标准操作规程》鉴定ABO血型出现正反定型不相符，并已排除试剂及操作因素时，应调查受检者的疾病史、输血史、药物治疗情况、组织或器官移植史、孕产史及以前的血型记录，分析可能影响ABO血型鉴定的临床资料。
6.2根据受检者正反定型的反应结果及临床资料，初步分析引起正反定型不符的可能原因。
6.2.1当正定型红细胞与抗-A和（或）抗-B物凝集，而反定型未检出预期的凝集反应时，应首先确实是否因红细胞表达弱A和（或）弱B,与抗-A和（或）抗-B不凝集。
经吸收放散等试验确认红细胞不表达A和（或）B抗原后，可考虑是否为低免疫球蛋白血症、免疫抑制等致血型抗体异常。
当反定型检出了与正定型不相符的凝集时（如反定型与0型试剂红细胞凝集）6.2.2应考虑血清（血浆）中是否存在红细胞不规则抗体。
6.2.3出生3个月内的婴儿ABO血型鉴定只做正定型，不做反定型，具体执行《试管法鉴定ABO和RhD血型标准操作规程》。
疑难血型鉴定及临床输血
医学课件ppt
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举例
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ABO定型常见问题的解决方法
ABO亚型
正定：抗-A、抗-B、抗-AB、抗-A1、抗-H 反定：A1c、A2c、Bc、Oc、自身对照 吸收放散试验 唾液型物质检测 血型基因检测 有条件者可作家系调查
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ABO定型常见问题的解决方法
应尽可能运用全自动检测系统，以减少结 果解释和抄录错误的风险。
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ABO血型
ABO血型定型的方法 正反定型不符的原因 解决正反定型不符的程序 ABO亚型 ABO血型定型常见问题的解决方法 ABO血型与临床输血
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ABO血型的分型原则
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6
ABO血型的定型
ABO正定型中各种试剂用途
抗-A、抗-B 抗-AB 确认弱A、B抗原，与弱A、B抗原亲
和力强,会产生较强反应，主要用 于鉴定Ax和Bx。 抗-H 用于检查ABO亚型及孟买及类孟买型。 抗-A1 用于A亚型检测。
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ABO反定型中各种试剂用途
A1、B细胞 O细胞 检查是否存在ABO系统以外室温反应性
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ABO亚型
ABO亚型的发现—正反定型不符 成人、未患使抗原、抗体减弱的疾病
正定凝集强度应 4+，反定凝集强度> 2+。 正定凝集强度弱于4+提示可能是亚型。
注意：凝集强度和凝集状态（正常凝集、混合 外观）
反定凝集强度<2+，或仅存在冷反应性不规则抗-A、 抗-B提示可能是亚型。 注意：靠反定预测亚型不如正定可靠 ！
ABO亚型
疑难血型鉴定及交叉配血处理流程
疑难血型鉴定及交叉配血处理流程一、正反定型不一致1、重复试验（严格正规操作）。
2、重新取血（以纠正污染或弄错标本造成的不符），溶血标本不能用于合血。
3、洗涤红细胞后进行以下试验（正反定型凝集低于2+的，应首先怀疑是由于亚型或抗原抗体活降低引起。
）1）、用自身血清、红细胞做定型对照，检验自身有无完全抗体。
2）、用O型红细胞做反定型对照，确认是否存在ABO系统以外完全抗体。
3）、用抗A、抗AB、抗A1和抗H进行正定型：①A亚型细胞与抗A、抗AB的凝集强度低于A1细胞，但与抗H的凝集强度高于A1细胞（3+以上）；②A亚型（特别是A2中约有1-8%会产生抗A1），与抗A1基本不发生凝集。
③用抗AB（O型血清或血浆）是因为它的抗A效价较高，与弱A和弱B抗原亲和力强。
4）、分别用A1型和A2型红细胞反定型检查血清中有无抗A1存在（A亚型中有部份会产生抗A1，能与A1发生凝集，但不与A2凝集。
）5）、询问病史，判断是否是由于病人抗体缺失或减弱引起反定型错误，可延长反应时间，或用灵敏度更高的血型卡做反定型。
6）、被检红细胞做直抗（观察有无被抗体致敏的情况），若为阳性，应将细胞放散至阴性后再定血型。
4、若还不能确定血型，应增加血型物质的检测（如唾液等）。
二、交叉配血不合（一）主侧端不相合1、血型鉴定不正确,重新鉴定血型。
2、病人血清中存在同种抗体，与供血者红细胞上的相应抗原反应。
3、供血者红细胞上已经包被了抗体，导致抗球蛋白试验阳性。
4、病人血清不正常，如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状凝集，血清中存在高分子聚合物的血浆扩容剂引起假阳性。
5、试验系统被污染。
（二）次侧端不相合1、供血者血浆中存在针对病人红细胞抗原的抗体。
2、病人与供血者的ABO血型不相合。
3、病人的红细胞已经包被了抗体，直接抗人球蛋白试验阳性。
4、抗筛阴性，而次侧不合多由自身抗体引起（此是抗人球配血不合，而聚凝胺配血通过可输血）。
（三）配血不合的主要因素1、血型是否正确。
常见ABO疑难血型案例分析
1）抗体减少或缺失：加大待测血清量、延长反应时间 2）额外抗体：
三、反定型处理流程（试管法复查）
• 额外抗体
反定型
Ac、Bc、Oc、自身对照（AC）
非特异性
都有凝集
盐水置换
仅自身对 照无凝集
特异性
AC _
冷同种 抗体
凝集消失 凝集不 消失
三组Ac/Bc
蛋白干扰
AC+
冷自身
抗体
直\间接抗球 蛋白试验
选抗原阴性 Ac/Bc重测血型
不规则抗 体筛查
Oc冷吸附后 重测血型
四、实例（一）
一、简要病历 患者，男，56岁，咳嗽数月加重入急诊科，无既往输血史，无既往血型
史 二、血型检测
四、实例（一）
三、疑难血型检测 1、试管法复查 试剂
室温
抗-A 4+
抗-B 0
抗-D A1细胞 B细胞 O细胞 自身对照
四、实例（二）
三、疑难血型检测 5、重做反定型验证结果
试剂细胞 洗涤三次后
四、实例（二）
四、结论 A型Rh(D)阳性，反定考虑患者对试剂物质有反应造成的干扰。
四、实例（三）
一、简要病历 患者，男，45岁，耳鼻喉科，行咽乳头状瘤切除术，无输血史。
二、血型检测
四、实例（三）
三、疑难血型检测
1、试管法复查 试剂
三、疑难血型检测 2、试管法复查 试剂
室温
抗-A 4+
抗-B 3+
抗-D A1细胞 B细胞 O细胞 自身对照
4+
4+
4+
4+
4+
正定型用温盐水洗涤三次
疑难血型鉴定和疑难交叉配血
疑难血型鉴定与疑难交叉配血1、疑难血型鉴定疑难血型就是一种血型难以检定或判定（正反定型不一致）得现象,多由血型抗原减弱形成亚型、疾病原因引起抗体减弱或部分血型系统罕见表型等原因引起。
因此,疑难血型鉴定主要从弱抗原、弱抗体与特殊抗原或抗体检测角度出发，结合血型血清学与分子生物学研究方法对患者样本进行检测。
而对于不规则抗体筛查与鉴定，主要就是对抗体种类与特性进行研究，尤其就是利用吸收/放散试验对同时存在多种同种抗体或自身抗体进行分离鉴定，从而较为准确得分析患者血清抗体得特异性。
在工作中遇到此类情况时，应按照以下步骤进行分析与处理：(１)分析可能存在得原因先排除人为操作因素,再通过了解患者临床资料分析可能得原因，主要包括抗原类影响因素与抗体类影响因素，抗原类影响因素一般包括ABO亚型、血液病、骨髓移植等,抗体类影响因素一般包括不规则抗体、药物抗体、先天抗体缺失、丙种球蛋白过低、冷凝集素等。
（2）设计实验进行验证疑难血型鉴定流程见流程图1。
流程图1 疑难血型鉴定流程2014年１月，在工作中发现正反定型结果不符样本一例,经一系列血清学试验确证该患者为P１Pｋ血型系统得ｐ表型，经分子生物学基因测序,初步推断Ａ4GALT 基因第3外显子得９０3Ｃ＞G突变就是患者p表型形成得分子生物学基础,该研究成果从不同角度与深度撰写论文,先后发表《临床军医杂志》与《中国输血杂志》论文各一篇，并由此逐步展开疑难血型鉴定。
在此之后得工作中，通过阅读文献自修学习,鉴定出Am、Bm、B３等血型亚型，形成了一套相对完整得疑难血型鉴定思路与流程。
２014年2月与2015年10月，在工作中分别遇到一例反复进行输血治疗得患者,经一系列血清学试验，确证此两例患者均因多次输血治疗而产生多种不规则抗体，该研究成果先后以论文形式发表于《临床军医杂志》。
在后期工作中，通过对解放军174医院住院患者不规则抗体筛查与鉴定结果进行分析，对厦门地区住院患者不规则抗体得分布特征有了较为清晰得了解，该研究成果以论文形式发表于《国际医药卫生导报》,并形成了一套相对完整得不规则抗体筛查与鉴定流程。
疑难血型鉴定和疑难交叉配血
疑难血型鉴定和疑难交叉配血1.疑难血型鉴定疑难血型是一种血型难以检定或判定（正反定型不一致）的现象，多由血型抗原减弱形成亚型、疾病原因引起抗体减弱或部分血型系统罕见表型等原因引起。
因此，疑难血型鉴定主要从弱抗原、弱抗体和特殊抗原或抗体检测角度出发，结合血型血清学和分子生物学研究方法对患者样本进行检测。
而对于不规则抗体筛查和鉴定，主要是对抗体种类和特性进行研究，尤其是利用吸收/放散试验对同时存在多种同种抗体或自身抗体进行分离鉴定，从而较为准确的分析患者血清抗体的特异性。
在工作中遇到此类情况时，应按照以下步骤进行分析和处理：（1）分析可能存在的原因先排除人为操作因素，再通过了解患者临床资料分析可能的原因，主要包括抗原类影响因素和抗体类影响因素，抗原类影响因素一般包括ABO亚型、血液病、骨髓移植等，抗体类影响因素一般包括不规则抗体、药物抗体、先天抗体缺失、丙种球蛋白过低、冷凝集素等。
（2）设计实验进行验证疑难血型鉴定流程见流程图1。
流程图1 疑难血型鉴定流程2014年1月，在工作中发现正反定型结果不符样本一例，经一系列血清学试验确证该患者为P1Pk血型系统的p表型，经分子生物学基因测序，初步推断A4GALT 基因第3外显子的903C＞G突变是患者p表型形成的分子生物学基础，该研究成果从不同角度和深度撰写论文，先后发表《临床军医杂志》和《中国输血杂志》论文各一篇，并由此逐步展开疑难血型鉴定。
在此之后的工作中，通过阅读文献自修学习，鉴定出Am、Bm、B3等血型亚型，形成了一套相对完整的疑难血型鉴定思路和流程。
2014年2月和2015年10月，在工作中分别遇到一例反复进行输血治疗的患者，经一系列血清学试验，确证此两例患者均因多次输血治疗而产生多种不规则抗体，该研究成果先后以论文形式发表于《临床军医杂志》。
在后期工作中，通过对解放军174医院住院患者不规则抗体筛查和鉴定结果进行分析，对厦门地区住院患者不规则抗体的分布特征有了较为清晰的了解，该研究成果以论文形式发表于《国际医药卫生导报》，并形成了一套相对完整的不规则抗体筛查和鉴定流程。