酵母样真菌鉴定及应用
162株酵母样真菌的鉴定及药敏分析
摘 要 ： 目的 了解 本 地 区酵 母 样 真 菌 的 感 染及 耐 药 现 状 。 方 法 对 ２ ０ ０ ４年 １ ９月 重 医附 一 院 门诊 和 住 院患 者 的痰 液 、 ～ 血 液 、 液、 尿 阴道 分 泌物 、 便 等 标 本 中分 离 出 的 １ ２株 酵 母 样 真 菌进 行 鉴 定 ， 用 真 菌 药敏 条 上 的 ６种 抗 真 茵 药 物做 药敏 试 验 ， 粪 ６ 并 其 结 果 结 合 临 床 综 合 分 析 。结 果 痰 液 标 本 酵母 样 真 菌 检 出率 最 高 ， ６． （０ ／ ６ ） 其 次是 尿 液 为 １ ． （５ １２ 。共 分 离 达 ２３ １１１２ ， ５ ４ ２／ ６ ）
在 恶 性 胸 水 中 Ｃ Ｐ并 没 有 明 显 升 高 （ 有 ５ １ｒｇ Ｌ Ｒ 仅 例 ０ ／ ＜ ａ Ｃ Ｐ ２ ｍｇ Ｌ 。我 们 发 现 ， 核 性 胸 腔 积 液 的 Ｃ Ｒ ＜ ５ ／） 结 ＲＰ结 果 明 显 高 于恶 性 胸 腔 积 液 ， 异 有 统 计 学 意 义 （ 差 Ｐ＜ ０ ０ ） 。 ５ 。所 以 胸 水 Ｃ Ｐ检 测 在 结 核 性 与恶 性 胸 水 的 鉴别 中 具 有 明 显 的 ｌ 应 Ｒ 临床
ｓ ｉ Ｍ ｅ ， ０ ０， ４ ５ ４ ２ ｐｒ ｄ ２ ０ ９ （ ）：
［ ３ 谢思华． ＿ ３ ｃ 反应 蛋 白在难治 性 肾病 综 合征复 发时 变化水
平及 ｌ 意 义 ［］ 中 华 现 代 临 床 医 学 杂 志 ， ０５ ３ ２ ） 临床 Ｊ． ２ ０ ， （３ ：
２４ ７６
维普资讯
重 庆 医学 ２ ０ ０ ７年 ５月 第 ３ ６卷 第 １ Ｏ期
３ 讨 论
９２３
或胸膜下肺部结核 直接蔓延至胸膜所致 ， 染为主要因素 。 感
酵母样真菌鉴定流程及药敏试验方法
酵母样真菌鉴定流程及药敏试验方法English response:Identification of yeast-like fungi and drug susceptibility testing are important steps in the diagnosis and treatment of fungal infections. The process of identifying yeast-like fungi involves several steps, including macroscopic and microscopic examination, biochemical tests, and molecular methods.First, the macroscopic examination involves observing the colony morphology on agar plates. Different species of yeast-like fungi have characteristic colony appearances, such as color, texture, and shape. This can provide initial clues to the identity of the fungus.Next, the microscopic examination involves observing the cellular morphology of the fungi using a microscope. This can reveal important features such as the presence of pseudohyphae, true hyphae, budding patterns, and theformation of spores. These characteristics can help narrow down the possible species of the fungus.Biochemical tests are then performed to further identify the yeast-like fungi. These tests may include carbohydrate assimilation tests, enzyme assays, and assimilation of nitrogen sources. The results of these tests can be compared to known patterns for different fungal species to aid in identification.In addition to traditional methods, molecular techniques such as polymerase chain reaction (PCR) and sequencing of specific genes can also be used for fungal identification. These methods can provide rapid and accurate identification of yeast-like fungi.Once the yeast-like fungi have been identified, drug susceptibility testing can be performed to determine the most effective antifungal treatment. The standard method for drug susceptibility testing of yeast-like fungi is the broth microdilution method. This method involves exposing the fungi to different concentrations of antifungal drugsin a liquid medium and observing the growth or inhibition of the fungi.In summary, the identification of yeast-like fungi involves a combination of macroscopic and microscopic examination, biochemical tests, and molecular methods. Once identified, drug susceptibility testing can help guide the selection of appropriate antifungal therapy.中文回答：酵母样真菌的鉴定涉及到几个步骤，包括宏观和微观检查、生化试验和分子方法。
酵母样真菌检验标准操作程序
酵母样真菌检验标准操作程序酵母样真菌检验标准操作程序1检验目的规范酵母样真菌鉴定的标准操作程序。
2检验程序的原理和方法通过美华MA120微生物鉴定仪及其他鉴别实验对酵母样真菌进行鉴定。
3性能特征酵母样真菌为侵犯表皮以外组织和器官的病原真菌和条件致病真菌，通过对分离的病原菌鉴定及抗真菌药物的敏感性试验等，协助临床诊断、治疗、流行病学调查研究和院内感染的检测。
4样品类型痰、尿、脓、各种体液、尿道及阴道分泌物、咽拭、脑脊液、血等标本。
5所需的仪器和试剂5.1仪器：美华MA120鉴定仪、比浊仪。
5.2试剂：念珠菌显色平板、革兰染液、白念珠菌ATCC 90028、生理盐水。
5.3其他：洁净玻片、无菌试管。
6环境和安全控制满足二级实验室的生物安全柜内进行操作试验。
7程序性步骤7.1镜检及染色方法7.1.1直接镜检直接镜检阳性说明送检标本中有真菌存在，排除污染的可能性后结合临床症状可做出初步诊断。
7.1.2革兰染色后镜检此法适用于大多数临床标本，将临床标本或培养物固定于洁净载玻片上，进行革兰染色，酵母样真菌被染成蓝紫色。
7.2培养特征：在科玛嘉念珠菌显色平板上生长18～24小时可见菌落，菌落呈奶油色、光滑的菌落。
7.3鉴定：从科玛嘉念珠菌显色平板上挑取可疑菌落，用比浊仪配置菌液浓度相当于1麦氏单位，用美华MA120微生物鉴定仪进行细菌鉴定。
7.4药敏：参见《MA120微生物鉴定药敏仪标准操作程序》及CLSI M100-S26最新版本文件。
8质量控制程序参见《微生物组室内质量控制管理程序》。
9警示或危急值当无菌部位培养出该菌属时，需联系临床。
10实验室临床解释10.1目前临床上分离出的酵母70%～80%为白色假丝酵母菌及热带假丝酵母菌，其他在念珠菌显色培养基不能鉴定的酵母，可用微生物鉴定仪鉴定到种。
无菌部位采集的标本中分离的任何酵母都必须鉴定到种，均有诊断意义。
同一部位反复分离出同一菌种也具有重要意义。
10.2从非无菌部位（痰、咽拭、粪等）分离到的条件致病菌（如白色假丝酵母菌），如直接镜检阳性，须认定具致病性。
酵母样真菌56株的分离鉴定及药物敏感性分析
养基培养阳性率高于沙氏培养基 ， 并且区分混合感染 的 月 １１０份 临 床标 本 中分 离 出 的 ５ ０ ６株 酵母 样 真 菌进 行 能力更 强 。２ ℃ 培养 ２ ， 为绿色 或翠 绿色 则 进一 步 ７ ４ｈ 如 鉴定 和药敏 分析 ， 而指 导 临 床 合 理 使 用抗 真 菌 药 物 ， 做 芽 管试 验 ， 芽 管 试 验 阳性 则 为 白色 假 丝 酵 母 菌 ， 从 若 若
对 １ ０ 例 标本 中分 离出的 ５ 株酵母样真 菌进行 菌种 鉴定及常用抗真茵 药物的敏 感性分析 ， ０ １ ６ 以指
用常规培养方法从 临床标本 中分离 出的５ ６株 酵母样 真菌用柯 玛嘉显 色培养基纯培养 ， 根据 菌
导临床合理 用药。方法
分析 。结果
落颜 色进行分类 ， 可疑 者在 法 国 ｂ ｍ ｒ ｕ ｉ ｅｉ ｘ的 ＶＴ Ｋ一 ２全 自动细 菌分析仪上鉴 定， Ａ ＢＦ Ｎ Ｕ Ｎ ｏ ｅ ＩＥ ３ 用 Ｔ Ｕ Ｇ Ｓ２Ｉ Ｔ试条做 药敏 ５ 酵母样 真菌 中， 色假 丝酵母茵检 出率最 高（ ５ ０ ， 次为热带假 丝酵母 菌（ ４ ３ ） 光 滑假 丝 ６株 白 ７ ． ％） 其 １．％ ， 酵母 茵（ ． ％） 检 出葡萄牙假 丝酵母 茵、 ７１ ， 郎比可假丝 酵母 菌各 １ 。酵母样 真菌对 ５一氟胞 嘧啶 （ 株 ５一Ｆ 、 ｃ） 两性 菌素 Ｂ
的环境 下再 培养 ２ 。通 过 肉眼判读 观察 生 长情 况 ， ４ｈ 与 司生产 的 ５ ２ ０ 加样器 。３ ℃培养箱 、７ 培养 ０～ ５ ｌ ７ ２℃ 生 长对 照相 比较 ， 照说 明书判 读 并记 录药敏 结 果 。用 依 箱。 克柔念 珠 菌 Ａ Ｃ ６５ 株作 质控 菌株 。 Ｔ Ｃ ２８菌 １３ 方 法 我院各 科送 检 的各类 标 本 接种 于血 培 养 基 ． ２ 结 果 上 ，７ 培养 ２ ３％ ４ｈ后 ， 现 有 酵 母 样 菌 落 时 ， 取 菌 落 发 挑 １１０份 临 床 标 本 中分 离 出 的 ５ ０ ６株 酵 母 样 真 菌 。 采用直接镜检的一般方法 ， Ｊ检查时应遮去强光 ， 先在 其 中痰标本 ３ ７例， 中段尿 ４例 ， 血液标本 ４例 ， 导管尖 低倍 镜下 检查 有无 菌丝 和孢 子 ， 后 用 高倍 镜 观察 孢 子 然 端 物 ２例 ， 耳分 泌物 ６例 ， 口腔分 泌 物 ２例 ， 口脓 液 １ 伤 和菌丝 的形 态 、 征 、 特 位置 、 大小 和 排列 等 ， 可 涂 在 载 也 例 。５ ６株酵母样真菌 中， 白色假丝酵母菌检 出率最高 玻 片上 ， 气 干 燥 后 ， 革 兰 染 色 等 方 法 染 色 后 观 察 。 空 经 （５０ ）其次为热带假丝酵母菌（４ ３ ， ７ ．％ ， １． ％） 光滑假丝 革 兰染色 中真 菌 为 阳性 ， 被染 成 蓝 黑 色 ， 此方 法适 用 于 酵母 菌 （ ．％ ） 检 出葡萄牙 假 丝酵母 菌 、 比可假丝 酵 ７１ ， 郎 酵母 菌 、 孢子 丝 菌 、 组织 胞 浆 菌 检 测 ｊ 。肺 孢 子 菌感 染 。酵母 样 真菌 对 ５一 胞 嘧 啶 （ 氟 ５一 的痰 或支 气管肺 泡灌 洗 液涂 片检查 可 用 此染 色 方法 ， 可 母 菌各 １株 。见 表 １ Ｃ、 Ａ Ｂ、 Ｆ Ａ） 依 以见到染成黑色的包囊体和滋养体 ， 证实为真菌则分 Ｆ ） 两 性 菌 素 Ｂ（ Ｍ ） 氟 康 唑 （ Ｃ 、 曲康 唑
在临床常见酵母样真菌鉴定中的应用
中意外ＤＮＡ污染，采用无菌双蒸水作为阴性对照。
选择克柔假丝酵母菌（ＡＴｃＣ６２５８）和白色假丝酵母菌（ＡＴｃｃ９００２９）为ＰＣＲ灵敏度参考菌株，以ｌ：１０倍比稀释以浓度为１０１～１０８／ｍｌ作为模板，ＰＣＲ反应最终灵敏度为１０２／ｍｌ。
（５）测序及序列分析ｊＰＣＲ产物回收采用琼脂糖凝胶回收试剂盒，连接反应采用Ｂｅｃｋｍａｎ测序试剂盒，ｃＥＱ８０００双向测序。
获得序列提交美国国家生物技术信息中心（ＮａｔｉｏｎａｌＣｅｎｔｅｒｆｏｒＢｉｏｔｅｃｈｎ０１０９ｙＩｎｆｏｎｎａｔｉｏｎ，ＮＣＢＩ）ＧｅｎＢａｎｋ数据库（ｈｔｔｐ：／／ｍ州．ｎｃｂｉ．Ｉｌｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ）进行序列比对，分析待检真菌与参考序列相似度。
根据ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ的软件的ＦＡｓＴＡ计算法则，找出与最佳参照序列无法匹配的差异碱基，通过检查电泳峰图进行必要的修改，未知碱基Ｎ视为匹配碱基。
ＢＬＡｓＴ序列比对：由于目前真菌序列比对无明确判断标准，本研究采用细菌１６ＳｒＲＮＡ序列比对标准：①与某种系的代表参照序列相比，未知菌株序列的相似性≥９９％，未知菌株鉴定为该种；②与某种系的代表参照序列相比，未知菌株序列的相似性≥９７％，但＜９９％，未知菌株鉴定为该属；③如未知菌株序列相似性≤９７％，未知菌株不能鉴定为该种或属；④如存在两个或两个种系以上参照菌株与未知菌株序列相似性≥９９％，且两者相似性相差≤０．５％，则暂将未知菌株归为其中相似性较高种系，但不排除未知菌株为另一种的可能性¨０｜。
结果一、质量控制克柔假丝酵母菌（ＡＴＣｃ６２５８）、新型隐球菌（ＡＴＣＣ３２６０９）、季也蒙假丝酵母菌（ＡＴｃＣＡｓ２１５００）、葡萄牙假丝酵母菌（ＡＴＣＣ６６０３５）、近平滑假丝酵母菌（ＡＴＣＣ２２０１９）、光滑球拟假丝酵母菌（ＡＴＣＣ“５５０）、热带假丝酵母菌（ＡＴＣＣｌ４６３）及白色假丝酵母菌（ＡＴｃｃ９００２９）的１８ｓｒＲＮＡ基因序列比对相似性均为１００％：Ｖｉｔｅｋ３２ＹＢｃ和显色培养基鉴定符合率均为１００％。
纸片扩散法检测酵母样真菌对氟康唑药敏试验及临床应用
Ｋｅ ｒ ｓ：Ｄｉｃ ｄ ｆｕ ｉ ｎ ｍｅ ｈ ｄ；Ｙｅ ｓ—ｉ ｅ ｆ ｎ ｉ ｌ ｃ ｎ ｚ ｌ ；Ｓ ｓ ｅ ｔ ｉ ｔ ｔ ｄ ｅ ｙ ｗｏ ｄ ｓ ｉ ｓｏ ｔ ｏ ｆ ａ ｔｌ ｕ ｇ ；Ｆ ｕ ｏ ａ ｏ ｅ ｕ ｃ ｐ ｉ ｌ ｙ ｓ ｕ ｉｓ ｋ ｂ ｉ
２ ２ 重 复 性 实 验 用 白 色 假 丝 酵 母 菌 ＡＴＣ ． Ｃ ９ ０ ８和近 平 滑 假 丝 酵 母 菌 ＡＴＣ ２ １ ， 氟 康 ０２ Ｃ ２０ ９ 对
唑纸 片扩 散法进 行 重 复 性 实 验 ， 测试 ４ 各 ８次 ， 抑 其 菌 圈 直径 ９ 结 果落 在质 控范 围 内 ， 菌 圈 直径 之 ８ 抑
（ ＣＬ ７Ａ２ ｃ 笔 者 应 用此 方 案 检 测 了 临床 ＮＣ ｓ Ｍ２ 一 ） ，
标 本 中分离 的 １ ３ 假丝 酵母 菌属对 氟康 唑 的敏感 １株
损害人 群 防止细 菌感 染 方 法 之 前 ， 们 必须 面 对 真 人 菌 感染 这一 现实 ； 由于 真菌感 染病 例 的增加 ， 抗真 菌 药 物 的耐药 也 出现 了上 升趋 势 ； 已有资 料报 道 ， 内 国 临床分 离 的白色假 丝 酵 母 菌 对伊 曲康 唑 、 康 唑 和 氟 酮 康唑 的耐 药 率分 别 达 ５ 、 ３ 、 ５ ［ ， ０ ３ ２ ２ 因此 有 ］ 必 要普 及和 推广 真菌药 敏试 验 。体外抗 真 菌药物 敏
间相差 ≤ ４ｍｍ。结 果 见 表 １ 。纸 片 扩 散 法 与 肉汤
１ ０ １ 甲蓝储 存液 （ ． ０ 亚 Ｏ １ｇ亚 甲蓝 溶 于 ２ 无 菌 Ｏｍ１
酵母菌的分类与鉴定
酵母菌的分类与鉴定
酵母菌是一类单细胞真菌，常用于面包、啤酒、发酵食品、生物技术等领域。
酵母菌的分类和鉴定主要依据其形态、生理特性和分子生物学特征。
1. 形态分类：根据菌体形态、大小、颜色等特征，将酵母菌分为不同属。
常见的属有酵母属（Saccharomyces）、球孢酵母属（Candida）、香霉酵母属（Schizosaccharomyces）等。
2. 生理分类：通过酵母菌的代谢特征、培养条件等进行分类。
例如，氧气需求、酵母菌对不同碳源（如葡萄糖、果糖等）利用的能力等。
3. 分子生物学分类：通过对酵母菌基因序列进行分析，以及对不同遗传标记（如基因型、DNA指纹等）的测定，可以确定不同酵母属、种、亚种。
酵母菌的鉴定可以通过比较分析其形态、生理和分子生物学特征，使用不同的鉴定方法和技术。
其中，常用的技术包括传统的形态学方法、生理生化测试、酵母菌基因检测、热循环放大（PCR）技术等。
酵母样真菌的临床分布及耐药分析
酵母样真菌的临床分布及耐药分析俞碧霞;胡燕琴【摘要】目的探讨酵母样真菌感染情况及其耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法采用法国生物梅理埃公司生产的ATB微生物鉴定仪、ID32C真菌鉴定板、ATBFUNGUS3药敏板对临床标本进行真菌鉴定和药敏试验.结果共分离酵母样真菌530株,主要来源痰液、尿液、分泌物及粪便.酵母样真菌中白假丝酵母检出率最高为57.17％,其次为热带假丝酵母、光滑假丝酵母、近平滑假丝酵母及克柔假丝酵母等.酵母样真菌对各类抗菌药的耐药率最高氟康唑、伊曲康唑,两性霉素B 最敏感.结论临床酵母样真菌感染以白假丝酵菌为主,临床应根据药敏试验结果合理选用抗真菌药物.【期刊名称】《现代实用医学》【年(卷),期】2016(028)003【总页数】2页(P386-387)【关键词】酵母样真菌;临床分布;微生物敏感性试验【作者】俞碧霞;胡燕琴【作者单位】315200宁波,宁波市镇海龙赛医院;315200宁波,宁波市镇海龙赛医院【正文语种】中文【中图分类】R446.5近年来由于激素、免疫抑制、广谱抗生素的广泛使用，深部真菌感所致的疾病日渐增多，抗真菌药物的广泛应用导致真菌的耐药。
因此，开展真菌的培养鉴定及体外药敏试验，指导临床合理用药，已受到越来越多的关注［1］。
为了解临床分离酵母样真菌感染分布及对常用抗真菌药物的体外耐药特点，为临床合理应用抗真菌药物提供依据，本文对来自临床的530株酵母样真菌进行药敏分析，报道如下。
1.1 标本来源选取2014年1月至2015年12月宁波市镇海龙赛医院临床送检的痰液、血液、尿液、引流液、分泌物及粪便等明确感染的合格标本，同一患者相同标本多次分离不累计。
1.2 仪器与试剂BACT/ALERT 3D240血培养仪，ATB半自动微生物鉴定仪，酵母菌鉴定试剂条ID32C，微量稀释法药敏试剂盒ATBFUNGUS3（均为法国生物梅里埃biomerieux公司产品）。
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酵母样真菌鉴定及应用
发表时间：2010-12-08T15:24:38.397Z 来源：《中外健康文摘》2010年第32期供稿作者：赵立春
[导读] 近年来随着广谱抗生素、免疫抑制剂广泛应用和机会致病菌的医院感染包括临床深部真菌感染增多
赵立春（黑龙江省哈尔滨市香坊区结核病防治所化验室150036）
【中图分类号】R446.1 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2010）32-0440-01
近年来随着广谱抗生素、免疫抑制剂广泛应用和机会致病菌的医院感染包括临床深部真菌感染增多，特别是肺结核病人或肺部疾病患者，因药物治疗时间长，在杀死致病菌的同时，也杀死正常菌群，造成人体内微生态障碍，菌群失调，在肺结核等肺部疾患基础上继发支气管肺部酵母样菌感染，所以从肺部疾患病人中分离酵母样真菌，快速鉴定并及时治疗非常有意义。
我国现在快速、准确鉴定酵母样真菌的方法很少，近年国外开发的手工和自动化微量鉴定系统已大大简化了传统鉴定程序，但难已在中小医疗机构推广应用，我们研制的微量鉴定系统，通过与传统鉴定方法及生物梅里埃Api20c鉴定系统对比性评价，并经数家医疗单位临床应用，证明本系统具有可靠、快速、简便和价廉等优点，可推广为临床常规方法，报道如下：
1 材料与方法
1.1 菌株来源：主要来自香坊区结核病防治所，治疗一个月以上肺结核、脑膜炎、慢性支气管炎等患者，从痰中分离出2-3次同一种菌株。
标准菌株为中国科学院微生物研究所“真菌国家开放专业实验室质控菌株。
1.2 试剂：葡萄糖、乳糖、半乳糖、麦芽糖、蔗糖、木糖、密二糖、纤维二糖、肌醇、棉子糖、海藻糖、卫矛醇、草糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖醇、赤藓醇、山梨醇、尿素、KNO3、KH2P4、NaHPO4和MgSo4、7H2O系分析纯。
优质琼脂粉、玉米粉、酵母浸膏和吐温80。
1.3 90mm培养皿或U形塑料凹孔盒、新华Ⅲ号滤纸、打孔器等。
1.4 生物梅里埃公司生产的API——20C鉴定卡。
1.5 酵母菌编码鉴定手册：0.5麦氏单位，1麦氏单位、2麦氏单位比浊管。
2 微量鉴定系统制备
2.1 基础培训基：琼脂20g、酵母浸膏0.2g、MgSo4、7H2O0.5g、PH6.8PBS加至1000ml。
加热溶解，分装后经8P、15分钟灭菌。
存于4℃可用2个月。
2.2 玉米吐温琼脂：制成小安瓶备用。
2.3 生化基质制备：糖醇配方：糖或醇2.0g、B族维生索0.2mg、2％溴甲酚紫0.2ml，蒸馏水加至10ml。
尿素配方：尿素5.0g、葡萄糖0.1g、B族维生素0.1mg，蒸馏水至10ml。
硝酸盐配方：KNO32.0g、葡萄糖0.5g、B族维生素0.1mg，蒸馏水至10ml。
阴性对照配方：不含糖、醇、尿素和硝酸盐，余皆相同。
将6×6mm滤纸圆片浸入上述各基质液中，10分钟，取出置70℃烤干，经随机抽样无菌试验后，分装于小瓶中密封，-20℃可用一年以上。
2.4 沙保弱培养基按常规自配。
3 实验程序
3.1基础菌悬液制备：排取沙保弱氏之新鲜培养菌落以生理盐水制成0.5麦氏单位的菌悬液。
基础培养基经隔热煮沸溶解，冷却至50℃，与菌悬液等量混合，置于50℃水溶备用。
3.2 操作步骤：各种基质纸片、阴性对照纸片按顺序置于分格的无菌平皿底部或U形塑料盒之凹内。
消毒试器吸取上述菌悬液，每种纸片上滴加3滴，接种针挑取少许培养菌穿刺接种于玉米粉吐温琼脂。
置于温盒、30℃孵育。
3.3 结果读取和判断：绝大部分酵母样真菌在24—48小时即可读取结果，个别种属需72小时。
碳源同化阳性：培养基呈黄色与对照相比呈+～3+混浊；阴性呈紫色且不混浊。
尿素水解阳性为红色；阴性为淡黄色不变。
硝酸盐还原需以常规硝酸盐还原甲、乙两液依次加2滴，显红色为阳性；不显红色为阴性。
玉米粉吐温球脂脂生长菌落用显微镜观察厚孢子、孢子及菌丝体。
4 评价方法
4.1 传统方法：包括形态学的质膜孢子、孢子、菌丝体及芽管形形成，糖醇同化，糖醇发酵（制成安瓶封装），尿素水解（安瓶封装），硝酸盐还原，氮源同化等。
4.2 标准菌株与传统鉴定方法．API20C鉴定止，微量鉴定系统鉴定比较。
4.3 41株临床分离酵母菌用APl20C鉴定卡与微量鉴定系统鉴定比较。
4.4 98株临床分离醇母菌用传统法与微量鉴定系统鉴定比较。
5 结果
5.1 6种标准酵母株用传统鉴定方法，APl20C鉴定卡与微量鉴定系统三种方法鉴定符合率100％。
5.2 与APl20C鉴定卡鉴定结果比较：对6种41株临床分离酵母菌用两种方法分别进行鉴定,两者的符合率为95.1％，两法结果不符的两株菌经传统方法鉴定和微量法重要鉴定是由于木糖、棉子糖、卫矛醇生化基质含量不均匀所致的鉴定错误。
5.3临床应用评价：徽量鉴定系统与传统方法之间的鉴定符合率达98％，其中2株鉴定错误的原因是由于接种菌悬液不符合要求致乳糖、密二糖、肌醇、棉子糖的同化结果变异。
厚膜孢子和菌丝形成不良。
经重点鉴定均可纠正，故提示其误差属随机性。
6 讨论
我们研究设计了以20种生化试剂辅之形态学观察的微量鉴定系统。
本系统试剂制备的技术关键是在基础和纸片基体中加入了营养性添加剂和适当缓冲容量的缓冲剂。
前者能够提高对基质利用菌的生长速率，但不改变其性质，大部分生长较快的酵母菌，在24—48小时即可显示阳性结果，少数生长缓慢者如隐球菌属在72小时亦可呈现阳性结果。
后者可以防止酸性琼脂和孵育过程中CO2溶入培养基引起假性颜色改变，缓冲容量初确定因各种试剂的批号和来源不同，不可一概而论，一般应为0.015mo1／l。
其容量应仅能缓冲各种基础试剂．基质试剂和CO2溶入的酸碱效应而又不缓冲醇母样菌分解碳源产生的酸。
本法各种同化反应是以生长浊度和PH改变的双重指示判断结果，所以，试验结果具有较高的可靠性。
经实验证明鉴定具有快速、简便和价廉等优点，适合中、小型实验室使用。
试验过程中，应注意无菌操作，接种菌悬液的最终浓度相当1／4麦氏单位，过浓过淡均不利于结果的判断。