岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的图文操作手册
岛津LC-20AT高效液相色谱仪操作规程
1 目的：为了规范LC-20AT高效液相色谱仪的使用、维护和保养，确保测量结果的准确性，特制定此规程。
2 范围：本规程适用于LC-20AT高效液相色谱仪的使用、维护和保养。
3 责任者：化验员4 程序：4.1 开机4.1.1 接通电源，开启泵、柱温箱、检测器等辅助设备。
4.1.2 开启计算机，双击打开LC solution窗口，单击分析，进入工作站。
4.1.3 计算机与仪器连接后，把配制好的流动相放入贮液瓶中，然后将排液阀旋钮逆时针旋转180°，打开冲洗阀，再按Purge键进行排空，检查吸滤头至入口单向阀流动相管路无气泡，即再按Purge键停止排空此时检查压力显示是否为“0”，若不为“0”，执行以下零压力调整操作：在停泵状态下，按func键多次，直至进入ZERO ADJ项，按Enter键完成初始压力调零，最后顺时针旋紧排空阀。
4.1.4 最大和最小保护压力设定4.1.4.1最大压力限制是流路中的压力所不能超过的值，最大保护压力设置的目的就是保护色谱柱和其他流路部件。
如果压力超过限定值，送液就将自动停止，发出报警声并显示出错信息。
在初始屏幕上按func两次，光标会在MAX字段后闪烁，提示输入新值，然后按Enter键，屏幕上出现新值。
4.1.4.2最小压力限制是防止以下情况发生的压力下降：a) 当流路中发生了漏液；b) 当储液瓶中的流动相流完时，空气将通过流路被抽进来。
如果压力下降至最小压力限制值以下时间超过1分钟，送液也将自动停止，同时发出报警声并显示出错信息。
4.1.5泵启动和停止：按Pump键，泵就开始启动，泵运行指示灯亮。
泵运行后，须注意观察显示面板上工作压力的显示值，确保压力上升并逐渐达到一个稳定值，一般压力波动的上下幅度不应大于0.5MPa。
需要停泵就只要再按Pump键，泵一停，运行指示灯就熄灭。
4.2 方法的建立与调用4.2.1 新建方法点击文件菜单下“新建方法文件”，建立一个空白方法仪器参数视图中的高级选项中设置，数据采集：设置分析时间→LC程序时间：按需要设置时间程序→泵：设置泵的流速，流动相通道、压力上限→检测器：设置氘灯开启、池温度、检测波长→柱温箱：设置柱温。
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程岛津LC-20AT型液相色谱仪操作规程1．目的规范岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的使用维护保养，保证测量数据的准确可靠。
2．范围适用于岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的使用维护保养操作。
3．职责岛津LC-20AT型高效液相色谱仪操作人员执行本规程；质量部管理人员监督实施。
4．规程4.1 系统组成：LC-20AT型高压双泵、SIL-20A自动进样阀、SPD-20AT紫外-可见检测器、CTO-20A柱箱、LCsolution色谱数据工作站和IBM台式电脑等组成。
4.2 准备4.2.1 准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。
4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。
4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。
4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
4.3 开机4.3.1 接通电源，依次开启不间断电源、B泵、自动进样器、检测器、柱温箱、A泵4.3.2 待泵和检测器自检结束后，打开打开色谱工作站，点击按钮“1”，输入用户名:ADMIN。
4.3.3 当SPD-20A发出蜂鸣声后，说明已建立与计算机之间的连接，LC窗口打开。
4.4 参数设定4.4.1 设置新的分析参数时，请从通过键盘在LC窗口的“Instrument Parameters View”中输入参数（即A、B泵的流速，波长，柱温；柱在线时流速一般不超过1ml/min）4.4.2 选择File >Save Method File As ，输入方法名称后保存。
4.4.3 点击“Download”键，将保存好的方法下载4.5 更换流动相并排气泡4.5.1 将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；4.5.2 逆时针转动A/B泵的排液阀360°4.5.3 按A/B泵的[purge]键，pump指示灯亮，1min再次按A/B 泵的[purge]键4.5.4 顺时针转动A/B泵的排液阀,关闭排液阀4.5.5 如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽4.6 平衡系统4.6.1 更换流动相并排气泡后，在工作站中输入实验信息并设定各项方法参数4.6.2 等度洗脱方式4.6.2.1 点击“Instrument on/off ”按钮，A、B泵将同时启动，pump指示灯亮。
岛津LC-20AT液相色谱操作步骤
岛津LC-20AT高效液相色谱操作步骤1、流动相的处理◆共有5个流动相储液瓶。
一般RP-HPLC中，A（无机相）、B（有机相）为分析流动相；C（水）、D（甲醇）用于柱子后处理清洗；50%甲醇-水用于清洗自动进样针◆流动相体积V A、B=100+总流速×比例系数×分析时间（mL）；V c≥300mL；V D≈350mL；V50%甲醇≈300mL◆所有流动相须用0.22um孔径滤膜过滤（根据有机相和无机相选用相应滤膜），清洗储液瓶，不能在清洗过程中留下污迹，并超声30min，超声完成后禁止剧烈摇晃2、开机◆开启插座电源电脑开机◆打开仪器电源（LC—20AT最后打开，等待数秒后“control”指示灯亮）◆打开软件（Labsolution 仪器LC—20A），若连接正常则软件显示LC就绪3、自动排气◆将各流动相过滤头缓慢放入流动相中◆在简单设置界面设置总流速为0.2mL/min；在自动排气界面设置自动排气参数（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ各流动相≥5min，自动进样器≥25min），不勾选“排气结束后运行控制器”◆“下载”“执行自动排气”◆等待排气结束4、样品处理◆稀释后的样品（浓度约1mg/mL，不宜过高）用注射器经0.22um过滤器注入样品瓶◆样品应≥2/3样品瓶体积（1.5mL样品瓶）◆按序号依次将样品瓶放入自动进样器的样品架上◆切记：将样品架推到底！5、系统平衡及设置分析条件◆自动排气完成后，设置柱温、检测波长等参数(建议柱温高于环境10℃)，用梯度洗脱初始流动相平衡柱子（流动相比例与梯度洗脱初始比例一致）◆“下载”“激活/取消激活仪器”，此时系统显示：等待柱温稳定◆缓慢增加总流速至样品分析所需流速，V max=1ml/min（每隔1分钟增大0.2mL/min，注意每次增大都点击“下载”）◆在时间程序界面设置梯度洗脱条件◆若要保存方法文件：文件方法文件另存◆等待基线平稳（留意泵压力是否稳定），待系统显示：LC就绪，右击，进行基线测试斜率（一般＜3000即可）◆开始测样6.“单次分析开始”或“批处理”6.1单次分析开始◆依次输入样品名（样品ID可有可无）、样品瓶、瓶架（1）、进样体积等◆注意数据文件所在文件夹，输入数据文件名打开◆确定6.2批处理◆“向导”◆“新建”，样品组号（1），选择“未知样品”，依次输入文件名及其他◆注意批处理文件所在文件夹，勾选“数据文件名自动递增”、不勾选“自动创建文件名”◆完成◆选中全部序列◆开始批处理7.柱子后处理：先用易溶解样品的流动相清洗（一般用高比例有机相洗15min），10%甲醇洗30min，再用90%甲醇洗30min；长期不使用保存于纯甲醇中方法一：◆在简单设置界面设置：流动相C-90%；流动相D-10% 下载◆切换柱温箱off◆30min后设置：流动相C-10%；流动相D-90% 下载方法二（推荐）：◆设置洗柱程序◆“下载”◆“单次分析开始”样品瓶输入“-1”文件名“洗柱”◆系统提示“禁用采集”确定8.数据处理（打开Labsolution 再解析）8.1标准曲线◆数据处理打开文件“向导”◆勾选特征峰、外标法◆依次输入最大级别数（标曲的点数）、单位、化合物名、浓度等完成◆应用到方法方法另存为◆主项目批处理打开批处理文件◆填写表格：首行（标准、初始化标准点），（标准样数与前面的最大级别数相对应，剩下的为未知）、（文件方法为先前保存的方法，向下填充）、（标准样品级别号分别1.2.3.4.5未知样品0）◆批处理再解析开始批处理文件另存◆主项目校准曲线（可找到已做成的标曲）8.2生成报告◆打开要生成报告的数据文件◆视图手动积分栏，处理数据文件◆生成报告◆右击“属性”进行调整，预览、打印8.3检测限、定量限的确定、扣除背景（略）9.实验结束后，“切换泵ON/OFF ”确认泵泵压力降为零关软件10.电脑关机关闭插座电源。
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程一、开机前准备1、流动相按照标准要求配制流动相，需使用色谱纯试剂，有机相和纯水不用过滤，可直接超声脱气后使用。
无机盐溶液流动相必须使用溶剂过滤器过滤，根据溶液不同选择不同的滤膜（有机相/水相），过滤后超声脱气使用。
脱气时需盖上瓶盖，但不拧紧。
有机相流动相脱气必须在通风橱或高温室操作。
将配制好的流动相接入液相色谱仪的流路。
一般纯有机相接入A泵，纯水接入D泵，无机盐溶液接入B 泵。
注意观察洗液瓶是否还有洗针水，洗针水为1：1甲醇水。
2、色谱柱按标准要求选择色谱柱，一般为C18柱，苯并芘有专用柱，糖类分析用氨基柱。
色谱柱安装：色谱柱上有箭头，按流路方向安装，根据所要使用的检测器在色谱柱的出口端接上不同接头。
二、开机1、打开Labsolution。
点击自动进样器上Purge键，使自动进样器进入自动清洗状态，25分钟自动停止。
双击选择适用的检测器，SPDA为二极管阵列检测器，RF为荧光检测器，ELSD为蒸发光散射检测器。
标准要求使用紫外检测器或者二极管阵列检测器的均选择二极管阵列检测器，此检测器为最常用检测器，一般项目均使用此检测器。
要求使用示差折光检测器或者蒸发光散射检测器的均选用蒸发光散射检测器，本实验室应用主要为葡萄糖、蔗糖、果糖、麦芽糖、乳糖、三氯蔗糖，使用该检测器需打开气体，气体为氮气或空气，需使用99.999%纯度以上。
荧光检测器本实验室主要用于黄曲霉毒素B族和G族、苯并芘的检测。
2、新建方法文件文件→新建方法文件将等度洗脱修改为低压梯度，最高柱压由10MPa改为20MPa，设置柱流速为1ml/min，根据标准要求选择光源，检测波长小于350nm打开D2灯，350nm以上打开W灯。
设置完成后点击“下载”。
流路排气根据选择的流路进行排气，所需要使用的每个流路均需排气。
以选择A、B流路为例，逆时针旋转打开排气阀，将B、C、D泵流量设为0，点击“下载”，然后在泵上点击Purge键，显示屏上显示“Purge line”，进入A泵排气阶段。
高岛津lc20a效液相色谱仪操作流程
高岛津lc20a效液相色谱仪操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!高岛津LC-20A高效液相色谱仪是一种广泛应用于化学分析领域的仪器，主要用于药品分析、生物样品分析、环境监测等方面。
岛津LC-20A液相色谱仪面板操作
低压梯度设定
1、设定流路切换阀类型 2、设定泵的SYS参数为4 3、在泵上设定总流速 4、等度分析时,按泵上的 conc 键， 设定流动相B、C、D的浓度 梯度分析时，使用泵时间程序（BCON、 CCON、 DCON命令）设定浓 度梯度 5、按泵的 pump 键，开始输液。
HPLC Business Dept Shimadzu Corporation
漏液传感器检查
CE
CALIBRATION
Input PASSWORD
输入口令：00000
func
FLOW COMP FACT .00
输入流速补偿参数
func
PRESS COMP FACT 1: 456 5: 8535
输入压力传感器补偿参数
HPLC Business Dept Shimadzu Corporation
func LEFT 320 back
基本设定屏幕和辅助功能设定屏幕
0.000mL MAX 200.0 0.0 kgf MIN 0.0
func
初始屏幕
mL MAX 0.0 kgf MIN
func
200.0 0.0
流速
0.000mL MAX 0.0 kgf MIN
0.000 MONITOR Enter to Select
CE
参数设定组
0.000 SV Select Port No. 0.000 EVENT 0, 1, 2 or 12 0.000 COMP .45 Input 0.00－3.00 0.000 LPGE MODE 0: Auto 1, 2, 4: ( c )
func
岛津LC-20AT型高效液相色谱仪标准操作规程
标准操作规程第 1 页共 4 页1 仪器组成和开机1.1 仪器组成本系统由LC-20AT泵、SPD-20A紫外检测器、DGU-20A5真空脱气机、CTO-10ASvp柱温箱、SIL-20AC自动进样器、LCsolution色谱工作站（1.21SP1版本）和打印机组成。
1.2 开机将电源插头分别插入插座，打开泵、真空脱气机、紫外检测器、柱温箱和自动进样器的电源开关；打开计算机，鼠标双击桌面上的【LCsolution】图标打开一个窗口。
如需进行在线操作，点击图标，输入用户名和密码，点击【OK】即进入工作站的在线操作页面；如要进行离线分析方法的建立和修改则点击下方的图标；点击【Postrun】图标则进入数据分析和处理界面。
进入在线操作页面后，可看到如下几部分组成：--最上方为命令栏，依次为File、Edit、View、Method等；--命令栏下方为常用命令的快捷操作图标，分别用于样品序列分析、单个样品分析、管路排空、仪器开关等；--左侧为辅助栏，显示几个分析作业流程的操作图标，如系统设置，数据采集，序列表，离线分析等；--中部为数据信号显示栏；--下部为仪器工作参数栏：包括泵、检测器、柱温等；1.3 开机清洗打开泵的排液阀，点击上方快捷命令按钮【Auto Purge】，可对仪器管路进行冲洗。
清洗的管路和清洗时间可在仪器工作参数设置界面中的【Auto Purge】窗口进行选择和设置，可对A、B、C、D四个流动相管路和自动进样器进行清洗。
2 分析方法的建立、保存和调用2.1 分析方法的建立在仪器运行参数设置界面，点击【Normal】出现主要运行参数，点击【Advanced】出现全部运行参数。
2.1.1 采样时间设置在【Data Acquisition】窗口中，左侧【LC Stop Time】框中输入样品运行时间；右侧【Acquisition Time】打勾同时输入检测起始时间和检测结束时间。
2.1.2 输液泵参数设置在【Pump】窗口中，选择【Low pressure gradient】模式，输入总流速和流动相比例。
LC20AT岛津输液泵说明书
岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的图文操作手册一、岛津LC-20AT型高效液相色谱仪：1、色谱柱的安装本仪器配备了SPD-M20A二极管阵列检测器、RF-10AXL荧光检测器和Varian380-LC蒸发光散射检测器。
样品分析前首先要确定用什么检测器，然后把色谱柱连接到所需的检测器上。
2、开机a、首先打开UPS，然后依次打开DGU-20A3真空脱气机、LC-20AT溶液传输单元（泵）、CBM-20A系统控制器、所选用的检测器、自动进样器SIL-20A，CTO-20A柱温箱电源打开。
（HPLC组件的电源开关大都在仪器的右下角）b、将两个泵上部中间的黑色旋钮逆时针旋转90~180度，按purge键进行自动脱气，一般设置为3分钟；然后按自动进样器软键盘的purge键，对自动进样器上的样品进行脱气，一般为25分钟。
c、双击Lc solution图标。
输入用户名Admin，点击OK。
单击系统配置的图标，出现系统配置的对话框。
单击自动配置，仪器自动将能找到的仪器配置，也可以用图示中的蓝色和红色箭头分别添加和去掉配置的仪器。
需要注意的是，仪器优先选择自动进样器，如果需要手动进样，需将自动进样器去掉。
单击仪器（通讯设置），选择正确的仪器类型，然后单击自动获取IP地址。
单击系统控制器，出现系统控制器的对话框，继电器的四个选项需要设置为start。
d、单击仪器开关按钮，将软件与仪器连接e、仪器参数视图里面，简单设置里面，模式选择二元高压梯度，设置总流速，泵B浓度，时间，柱温箱温度，时间程序。
然后选择下载，跑基线。
单击绘图，可以看查看基线。
3、方法编辑a、下图中看到仪器参数视图，选择高级，然后依次改变其中的参数。
如果仪器为PDA检测器时，则按以下进行设置。
数据采集：LC停止时间为0.01。
采集时间打勾，结束时间为分析样品的时间。
LC时间程序：如果等度洗脱，则设置如图中0.01 controller stop。
进行梯度洗脱时需要如图所示进行设置。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的图文操作手册一、岛津LC-20AT型高效液相色谱仪：岛津LC-20AT型高效液相色谱仪二、功能和用途：1、功能：本仪器采用高压梯度通过高压输液泵分别独立精确控制流量、调整溶剂浓度比例，实现高效率、高精度混合；即配备了可提供全波长三维信息的二极管阵列检测器，全新的光路设计与有效的梯形狭缝池设计保证了高分辨率和高灵敏度；也配备了灵敏度更高、选择性更好的荧光检测器；还配备了具有高灵敏度、检测范围更广的蒸发光检测器。
2、用途：本仪器可以高效地分离分析高沸点、热不稳定的有机及生化试样；二极管阵列检测器对大部分有机化合物有响应；荧光检测器可以检测产生荧光的物质，对如多环芳烃、维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应；蒸发光散射检测器对碳氢化合物、表面活性剂、聚合物、脂肪酸和氨基酸、油和挥发性低于流动相的任何样品、不含发色团的化合物有响应。
三、操作步骤：1、色谱柱的安装本仪器配备了SPD-M20A二极管阵列检测器、RF-10AXL荧光检测器和Varian380-LC蒸发光散射检测器。
样品分析前首先要确定用什么检测器，然后把色谱柱连接到所需的检测器上。
2、开机a、首先打开UPS，然后依次打开DGU-20A3真空脱气机、LC-20AT溶液传输单元（泵）、CBM-20A系统控制器、所选用的检测器、自动进样器SIL-20A，CTO-20A柱温箱电源打开。
（HPLC组件的电源开关大都在仪器的右下角）b、将两个泵上部中间的黑色旋钮逆时针旋转90~180度，按purge键进行自动脱气，一般设置为3分钟；然后按自动进样器软键盘的purge键，对自动进样器上的样品进行脱气，一般为25分钟。
c、双击Lc solution图标。
输入用户名Admin，点击OK。
单击系统配置的图标，出现系统配置的对话框。
单击自动配置，仪器自动将能找到的仪器配置，也可以用图示中的蓝色和红色箭头分别添加和去掉配置的仪器。
需要注意的是，仪器优先选择自动进样器，如果需要手动进样，需将自动进样器去掉。
单击仪器（通讯设置），选择正确的仪器类型，然后单击自动获取IP地址。
单击系统控制器，出现系统控制器的对话框，继电器的四个选项需要设置为start。
d 、单击仪器开关按钮，将软件与仪器连接e、仪器参数视图里面，简单设置里面，模式选择二元高压梯度，设置总流速，泵B浓度，时间，柱温箱温度，时间程序。
然后选择下载，跑基线。
单击绘图，可以看查看基线。
3、方法编辑a、下图中看到仪器参数视图，选择高级，然后依次改变其中的参数。
如果仪器为PDA检测器时，则按以下进行设置。
数据采集：LC停止时间为0.01。
采集时间打勾，结束时间为分析样品的时间。
LC时间程序：如果等度洗脱，则设置如图中0.01 controller stop。
进行梯度洗脱时需要如图所示进行设置。
单击绘制曲线，可查看梯度曲线。
泵：模式选择二元高压梯度，设置泵B的浓度。
最大压力根据色谱柱的最大压力进行设置。
PDA：一般同时选择D2和W等，然后输入开始和结束时的波长。
柱温箱：设置柱温箱的温度。
控制器：将四个时间全部打勾。
自动进样器：不需要重新设置。
自动排气：不需要重新设置。
方法设置完后，选择文件，另存为方法文件。
当仪器稳定，基线稳定后，可以下载方法，进行样品的分析。
b、如果选择荧光检测器，首先需要色谱柱接荧光检测器，打开荧光检测器的电源，系统配置自动配置荧光检测器。
仪器参数设置部分检测器需要输入激发光和发射光的波长。
其他同PDA检测器。
c、4、如果选择蒸发光检测器，将色谱柱连接蒸发光散射检测器。
打开Varian-380电源开关，打开Varian ELSD Control软件方法编辑器单击Method，出来一对话框，Use my own instrument sett，则可以改变参数，设置新的方法。
也可以不打勾，直接选择已经设置好的方法。
仪器开启时即处于STANDBY模式，加热块关闭，雾化气流速设定为较低的1.2SLM。
Standby模式下用户可设定仪器参数（雾化气流速，雾化温度，蒸发温度），然后将模式切换至RUN。
Run模式是正常工作模式，仪器处于完全设定控制状态。
在加热或降冷却程中，仪器会显示“NOT READY”，表明仪器未达设定条件。
当仪器平衡完毕，会显示“READY”。
方法使用打开机器后，选择合适的方法。
将工作模式设定为RUN，使仪器加热平衡。
打开LC solution 软件，自动配置选择AD2，即选择了蒸发光检测器。
其它设置同PDA检测器。
仪器平衡后检察基线。
在洗脱液未接入时噪音应低于0.2mv，这表明雾化气洁净干燥。
基线毛刺一般是由雾化气中的粒子或水分造成的。
引入洗脱液并待其平衡15min。
再次检查基线，应不超过1mv，如是为纯水应不超过0.25mv，纯有机溶剂也应不超过1mv。
缓冲体系和稳定剂可显著增加噪音。
然后进行样品分析。
4、运行a、单次运行单击单次运行，出现对话框，选择已经编辑的方法，输入文件名，输入样品瓶，样品架和样品的体积，单击确定可以进行样品的分析。
点击辅助栏停止或者停止的快捷键，可以将分析停止。
b、批处理运行单击批处理，打开二级菜单，单击向导，可以新建，也可以附加一个批处理文件。
选择方法文件，输入开始样品瓶，样品架，进样体积。
下一步。
输入样品组数，选择标准品和未知。
下一步。
输入标准品名字，ID，校准级别，数据文件名。
下一步。
输入未知品名字，ID，数据文件名。
下一步。
下一步，完成。
出现批处理文件。
另存批处理文件。
单击批处理开始，开始分析样品。
5、关机样品分析完毕，按照色谱柱的冲洗要求进行冲洗。
冲洗完后，仪器参数视图，将总流速设为0，下载。
然后单击仪器开关，关闭软件，最后将电源关掉，关闭UPS。
6、积分单击再解析，打开已经完成的数据，会看到数据、方法、报告格式、批处理、全部文件形式。
点击分析图标，选择多色谱，提取所要波长下的峰。
在积分页面，选择通道，半峰宽，斜率，最小峰面积，一般选择面积选项。
识别页面，利用时间窗或时间带限制峰。
也可以选择积分页面的程序，进行手动积分。
如果不了解方法，可以单击帮助。
点击确定，分析完成。
结果在视图，峰表内查看。
7、标准曲线a、外标法定量单击向导，打开化合物表向导窗口，选择通道，半峰宽，斜率，最小峰面积，一般选择面积选项，下一步。
选择要标定的峰，下一步。
选择外标法。
计算面积。
输入校准级别，曲线拟合类型，一般选择线性。
零点，一个校准级别，选择强制通过，其它选择未强制。
加权方法无。
输入浓度，下一步。
识别，选择时间窗或者时间带。
一般来说保留时间小的用时间窗。
下一步。
定义峰的名字和标样的浓度。
完成。
保存方法。
单击校准，双击已经建立的方法。
然后将标样图谱拖动到左下角数据文件的级别中，有几个级别，则相应的拖到相应的级别中。
则自动生成标准曲线。
另存为方法。
b、内标法定量定量方法为内标法，确定内表物的峰。
8、利用标准曲线计算样品的浓度打开需要计算的谱图，文件选择需要加载的方法参数，查看峰表可以看结果。
9、报告编辑单击报告模板，拖动到报告模板中即可，然后另存为报告格式文件。
显示报告，将数据拖动到报告模板中即显示报告。
四、注意事项：1、高压恒流泵的维护：泵的密封圈是最易磨损的部件，密封圈的损坏可引起系统的许多故障，要注意保养和定期更换。
应采取下列措施以延长使用寿命：绝对不允许在没有流动相的或流动相还没有进入泵头的情况下启动泵而造成柱塞杆的干磨。
每天使用后应将整个系统管路中的缓冲液体冲洗干净，防止盐沉积，整个管路要浸在无缓冲的溶液或有机溶剂中。
长期不用也要定期开泵冲洗整个管路。
要用HPLC级试剂。
输液管前端要用烧结不锈钢沉子过滤流动相。
要注意防止管路阻塞造成压力过高而损坏仪器。
压力下限应设置在0.5~1MPa，以防止储液器中的流动相被抽干或严重渗漏而引起柱塞的干磨。
2、流动相的使用：必须使用HPLC级或相当于该级别的流动相，并先经0.45µm薄膜过滤。
过滤后的流动相必须经过充分脱气，以除去其中溶解的气体O2等，如不脱气易产生气泡、基线噪声增加、灵敏度下降，甚至无法分析。
如果管路中使用peek树脂部件，不可使用浓硫酸、浓硝酸、二氯乙酸、丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿和二甲基亚砜等试剂。
特别注意HPLC使用过后的系统清洗：含有缓冲溶液流动相的清洗方法：a、先用100%的纯水冲洗，打开排放阀，用3~5ml/min的流量，洗20min左右后停泵，主要是针对吸液系统、泵头、进出口单向阀等体积较大的空间的清洗。
b、再用95/5的甲醇/水清洗整个系统，关闭排放阀，用1ml/min的流量，洗30~60min后停泵，主要是用水清洗整个系统中的盐，用5%的甲醇主要是为了保护色谱柱。
c、最后用100%的甲醇清洗整个系统，用1ml/min的流量，洗2min左右，然后关机。
如果流动相中不含盐，则只使用上述第三步清洗即可。
3、更换流动相：在分析过程中，有时需要更换流动相进行分析。
一定要注意前一种使用的流动相和所更换的流动相是不是能够相溶。
如果前一种使用的流动相和所更换的流动相不能够相溶，要采用一种与这二种需更换的流动相都能相溶的流动相进行过滤、清洗。
较为常用的过滤流动相为异丙醇，但实际操作中要看具体情况而定，原则就是采用与这二种需更换的流动相都能相溶的流动相。
一般清洗时间为30~40分钟，直至系统完全稳定。
更换流动相时，要用100ml的烧杯，放入需要更换的流动相，将虑头放入烧杯中，上下反复冲洗，然后将排液阀逆时针180度，purge。
然后将排液阀顺时针180度。
储液器的注意事项：保持流动相储液器的清洁是保证仪器正常使用的关键。
要使用HPLC级的溶剂，对试剂含有缓冲盐及非HPLC级的流动相一定要用0.45µm过滤器除区去其中的微量物质。
4、色谱柱的使用：a、使用前色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。
在使用前，一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。
在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出，堵塞色谱柱。
b、样品样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。
在用正相色谱法分析样品时，所有的溶剂和样品应严格脱水。
c、色谱柱的保存如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。
对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。
储存的温度最好是室温。
d、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰的现象，一般来说可能是柱效下降。