常规根系测定指标及方法

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植物根系的测定实验报告

植物根系的测定实验报告

一、实验目的1. 了解植物根系的基本结构和功能。

2. 掌握植物根系活力的测定方法。

3. 分析不同环境因素对植物根系活力的影响。

二、实验原理植物根系是植物的重要组成部分,其主要功能是吸收水分和养分,固定植物体,同时还有合成和运输营养物质的作用。

植物根系活力是指根系对外界环境变化的适应能力和吸收、合成、运输等功能的表现。

本实验采用氯化三苯基四氮唑(TTC)法测定植物根系活力,通过观察根系在TTC溶液中的还原反应,来评估根系的活力。

三、实验材料与方法1. 实验材料:小麦、玉米、大豆种子;TTC溶液;蒸馏水;培养皿;剪刀;镊子;电子天平;显微镜等。

2. 实验方法:(1)种子萌发:将小麦、玉米、大豆种子分别浸泡在蒸馏水中,置于培养皿中,保持适宜的温度和湿度,待种子萌发。

(2)根系活力测定:将萌发的植物幼苗取出,用剪刀剪去地上部分,用蒸馏水清洗根系,去除泥土。

(3)TTC染色:将清洗干净的根系浸泡在TTC溶液中,置于黑暗处,恒温培养箱中培养24小时。

(4)根系活力测定:将染色后的根系取出,用蒸馏水清洗,去除多余的TTC溶液。

(5)显微镜观察:将清洗干净的根系置于显微镜下,观察根系活力。

四、实验结果与分析1. 小麦根系活力测定结果:小麦根系在TTC溶液中染色后,呈现出明显的红色,说明小麦根系具有较强的活力。

2. 玉米根系活力测定结果:玉米根系在TTC溶液中染色后,呈现出淡红色,说明玉米根系活力较弱。

3. 大豆根系活力测定结果:大豆根系在TTC溶液中染色后,呈现出暗红色,说明大豆根系活力较强。

4. 不同环境因素对根系活力的影响:通过比较不同处理条件下植物根系活力,发现低温、干旱等逆境条件下,植物根系活力明显降低,说明植物根系对环境变化具有一定的适应性。

五、实验结论1. 植物根系活力是植物对外界环境变化适应能力的重要体现。

2. 小麦、大豆根系活力较强,玉米根系活力较弱。

3. 植物根系对低温、干旱等逆境具有一定的适应性。

常规根系测定指标及方法

常规根系测定指标及方法

烟草根系常见测定指标及实验方法一、烟草根系发生特点烟草根属直根系,由主根、侧根与不定根三部分组成。

烟草由苗床栽入大田后,主根受人为控制,经常萎缩,而侧根与不定根迅速发展成一庞大根群。

1级、2级侧根的增长及根长密度在时间、空间上的动态变化与其地上地下关系的变化就是一致的。

烟草的根系数量的增加与活力的提高存在双峰现象:第1次出现在团棵期至旺长期。

移栽后40d前(团棵期),烟草的生长中心在地下部,根系生长迅速,并且所形成的根分布在较浅的土层中。

旺长期,生长中心从地下部转移到地上部,0~10cm土层出现了大量不定根,因此0~10cm内1级、2级侧根根长密度表现为增长趋势。

而其它各土层内由于物质供应的减少,根长密度表现为缓慢增长,甚至呈下降的趋势;第2次出现在打顶后的圆顶期。

圆顶期,由于打顶使根系生长又出现一次高峰,各土层1级、2级侧根根长密度均表现出增长的趋势。

因此打顶具有诱发侧根数量的增加与活力提高的作用。

到后期,随着烟叶的逐渐成熟,根系开始死亡,根系生长速度减缓,根长密度变化不大。

烟草生育后期下层分枝密度减少,下层较细的侧根有机物质供应不足,导致衰老死亡而出现的相对减少。

二、衡量根系的指标1、根系生物量根鲜重在植物营养研究方面很有应用价值。

养分吸收大多用根鲜重作参量。

根鲜重容易测定,但准确程度与根外粘附水分有关,故受操作影响较大。

根干重对于养分与水分吸收不就是个理想的参数,因为老而粗的根所占的重量很大,而吸收养分与水分的能力很小。

但当了解植物地下部的生产力时,干重常作为估计的标准。

在估算根冠比(R/S)时,也要用根干重。

测定根干重一般采用烘干重量法。

根系干重与鲜重:烟草根系从土壤中挖出、洗净后,用吸水纸或滤纸吸干根表面水分,用电子天平称取根鲜重。

获得鲜重数据后装入牛皮带放入烘箱内,在80℃下烘干,称其干重。

2、根系形态根系形态特征包括根系体积、几何形状、长度、分布深度、根密度、分枝状况、根重、根表面积、根毛数量与根尖数等。

实验四 根系活力的测定

实验四 根系活力的测定

实验四根系活力的测定一、意义根系是植物对水分和矿质营养的主要吸收器官,同时又是植物体中重要物质如氨基酸、激素等物质合成、同化、转化的器官,因此根的生长情况和活动能力直接影响植物个体的生长情况、营养水平和产量水平等具有重要的实际意义。

在科学研究中常把根系的呼吸强度、阳离子代还量(CEC)、对有色物质的吸附量和ATP酶的活性等作为作物根系活力的指标。

二、测定原理TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)的氧化态是无色的,可被氢还原成不溶性的红色三苯基甲月朁(TTF)。

具有活力的组织和细胞在呼吸作用中,脱氢酶催化底物氧化脱氢产生NADH、NADPH 等还原性物质,当TTC渗入组织或细胞时呼吸过程产生的还原物质可将其还原成TTF(红色),组织或细胞被染成红色。

死细胞无呼吸,不发生这样的氧化还原反应。

应用这一原理,可根据组织或细胞染色情况来检测种子、花粉、根系等的活力。

植物根引起的TTC还原,可因加入琥珀酸、延胡索酸、苹果酸得到加强;而被丙二酸、碘乙酸所严重抑制。

还原强度(即根系活力强弱)可用TTF的生成量来表示。

TTF在485 nm 处有吸收峰,用乙酸乙酯提取后测定OD485,通过标准曲线计算TTF的生成量,用单位时间内单位根重产生的TTF表示根系的活力。

三、仪器设备1.分光光度计;2.分析天平(感量0.1mg);3.托盘天平(感量0.1 g);4.温箱;5.研钵:1套;6.4 cm漏斗:2 个;7.量筒10 mL:1 个;8.刻度移液管:0.5 mL、2 mL、5 mL;9.10 mL容量瓶(或10 mL具塞刻度试管):8个;10.试管架:1 个;11.石英砂适量;12.高型称量瓶(30×60 mm):2 个。

四、试剂1.乙酸乙酯(分析纯);2.连二亚硫酸钠(Na2S2O4),分析纯,粉末;3.1 %TTC溶液:准确称取TTC 1.0000 g,溶于少量水中,定容到100 mL,用时稀释至需要浓度;4.0.1 mol ·L -1 pH 7.5磷酸缓冲液;5.1 mol ·L -1 硫酸:用量筒取比重1.84的浓硫酸55 mL,边搅拌边加入盛有500 mL蒸馏水的烧杯中,冷却后稀释至1000 mL;6.0.4 mol ·L -1琥珀酸:称取琥珀酸4.72 g,溶于水中,定容至100 mL。

名词解释根系活力的测定

名词解释根系活力的测定

名词解释根系活力的测定标题:名词解释:根系活力的测定导语:根系活力是植物生长的关键指标之一,它反映了植物根部的生命力和适应环境的能力。

本文将探讨如何测定根系活力,并分析其重要性。

一、根系活力的概念与重要性根系活力指的是植物根系的生物学活力程度,既包括根长、侧根数量等形态指标,也包括吸水、吸收养分、抗逆性等功能指标。

根系活力的测定对于解析植物的营养吸收能力、适应环境能力以及预测植物的生长状况具有重要意义。

二、根系活力的测定方法1. 根长测定法:此方法适用于观察植物根系的生长状况。

首先,选取具有代表性的试验对象,将其根系取出并轻轻清洗。

然后,使用根尖沙盘或扫描仪等设备对根系进行测量与记录。

最后,根据测量结果计算得到根长指数等数据,以反映根系活力。

2. 根系求和测定法:此方法适用于评估植物根系的总体生物学活力。

通过取样调查,将所得的根系数量与长度之和作为根系活力的测定指标。

这种方法虽然操作简便,但在抵抗病虫害等因素时存在较大的不确定性。

3. 根系吸水性测定法:此方法重点关注植物根系的吸水能力。

通过给根系提供含有不同浓度的水溶液,测定吸收水分的速度,从而评估根系的吸水性能。

这种方法可以为灌溉和肥料施用提供依据,但过程较为复杂,需要充分的实验设计和仪器设备。

三、根系活力测定的意义和应用1. 营养管理与调控:根系活力的测定可以帮助农民和园艺爱好者了解植物对营养元素和肥料的吸收利用情况,进而优化肥料施用方案,提高养分利用效率。

2. 抗逆性评估:根系活力测定可以反映植物对环境逆境(如缺水、高温、盐碱等)的耐受能力。

通过对不同品种或不同处理下植物根系活力的比较,可以评估植物的抗逆性,为育种和遗传改良提供重要参考。

3. 土壤改良与植被修复:根系活力的测定是评估土壤质量和植被修复效果的重要手段。

通过测定植物根系的长度、数量和吸水能力等指标,可以间接评估土壤的肥力、水分与气候适应能力,为土壤改良和植被修复提供指导。

四、根系活力测定方法的局限性和发展方向在根系活力测定方法中存在一些局限性,如测量误差、仪器设备成本高、操作繁琐等。

判断植物根系生长的参数

判断植物根系生长的参数

判断植物根系⽣长的参数
为了分析植物根系⽣长情况,必须⽉⼀定购参数来描述,如根数、根的分枝、根长、根鲜重、根⼲重、根表⾯积、根体积、根半径、⽐根长、报冠⽐、根尖、根⽑等。

根据研究⽬的相根系参数测定所需的时间和劳⼒,权衡应选择的根系参数,然后决定根系研究⽅法。

下⾯是⼀些常⽤根系参数及其意义:
(1)总根长(重):单位⼟壤⾯积的总根长(重),单位是km/m'[8/m2),表征植物根系总星的⼤⼩。

(2)根长(根重)密度;单位⼟壤体积的根长(根重),单位是cm⼋m3(8/cm3),反映出植物在菜⼀⼟壤层次根长(很重)的多少。

(3)根冠⽐:地下部分⽣物量与地上部分⽣物量之⽐,根冠⽐⼤的植物,分配⾄根的同化物多,根系相对发达。

该参数也反映出地上和地下部分的关系。

(4)单位地上部分所具有的根长:总根长与地上部分⽣物量之⽐。

表⽰供应单位地上部分所需要的根长,该值⼤,根系相对发达,与根冠⽐意义相似。

(5)⽐根长:单位重量的根所具有的根长,单位⼀船是m/8·表⽰根系粗细的⼀个参数,⽐根长⼤,根细,反之,则较粗。

相关仪器根系分析仪根系分析系统。

常规根系测定指标及方法

常规根系测定指标及方法

烟草根系常见测定指标及实验方法一、烟草根系发生特点烟草根属直根系,由主根、侧根和不定根三部分组成。

烟草由苗床栽入大田后,主根受人为控制,经常萎缩,而侧根和不定根迅速发展成一庞大根群。

1级、2级侧根的增长及根长密度在时间、空间上的动态变化与其地上地下关系的变化是一致的。

烟草的根系数量的增加和活力的提高存在双峰现象:第1次出现在团棵期至旺长期。

移栽后40d前(团棵期),烟草的生长中心在地下部,根系生长迅速,并且所形成的根分布在较浅的土层中。

旺长期,生长中心从地下部转移到地上部,0~10cm土层出现了大量不定根,因此0~10cm内1级、2级侧根根长密度表现为增长趋势。

而其它各土层内由于物质供应的减少,根长密度表现为缓慢增长,甚至呈下降的趋势;第2次出现在打顶后的圆顶期。

圆顶期,由于打顶使根系生长又出现一次高峰,各土层1级、2级侧根根长密度均表现出增长的趋势。

因此打顶具有诱发侧根数量的增加和活力提高的作用。

到后期,随着烟叶的逐渐成熟,根系开始死亡,根系生长速度减缓,根长密度变化不大。

烟草生育后期下层分枝密度减少,下层较细的侧根有机物质供应不足,导致衰老死亡而出现的相对减少。

二、衡量根系的指标1、根系生物量根鲜重在植物营养研究方面很有应用价值。

养分吸收大多用根鲜重作参量。

根鲜重容易测定,但准确程度与根外粘附水分有关,故受操作影响较大。

根干重对于养分和水分吸收不是个理想的参数,因为老而粗的根所占的重量很大,而吸收养分和水分的能力很小。

但当了解植物地下部的生产力时,干重常作为估计的标准。

在估算根冠比(R/S)时,也要用根干重。

测定根干重一般采用烘干重量法。

根系干重和鲜重:烟草根系从土壤中挖出、洗净后,用吸水纸或滤纸吸干根表面水分,用电子天平称取根鲜重。

获得鲜重数据后装入牛皮带放入烘箱内,在80℃下烘干,称其干重。

2、根系形态根系形态特征包括根系体积、几何形状、长度、分布深度、根密度、分枝状况、根重、根表面积、根毛数量和根尖数等。

根系活力的测定(TTC法)实验综述报告

根系活力的测定(TTC法)实验综述报告

根系活力的测定(TTC法)实验综述报告根系活力的测定(TTC法)实验综述报告摘要:根系活力是评估植物健康状况和生长能力的重要指标之一。

本实验综述报告将介绍一种常用的根系活力测定方法——三苯基氯化四唑(TTC)法,并重点介绍了该方法的原理、步骤和应用。

通过对多个实验研究的概述,我们可以了解到TTC法在根系活力测定中的优势和不足,并展望了未来在该领域的发展方向。

1. 引言根系活力是植物根系生理功能的重要指标之一。

通过测定根系活力,可以评估植物吸收和利用养分的能力,以及应对环境胁迫和病原体的能力。

因此,测定根系活力对于研究植物生长发育、抗逆性和资源利用效率等具有重要意义。

2. TTC法的原理和步骤TTC法是一种常用的根系活力测定方法,它利用三苯基氯化四唑颜料的还原作用来反映根系活力。

其原理是,根系组织通过代谢产物还原三苯基氯化四唑,使其从无色变为红色。

实施TTC法的步骤主要包括:准备TTC溶液、处理根系样本、添加TTC溶液、孵育和测定根系活力。

3. TTC法的应用TTC法广泛应用于不同植物根系的活力测定中。

它可以用于各种实验条件下的根系活力研究,包括光照、温度、生长激素、缺水和盐胁迫等。

通过TTC法,我们可以了解不同处理对根系生理代谢的影响,评估植物在不同环境条件下的生长适应性。

4. TTC法的优势和不足TTC法作为根系活力测定的常用方法,具有一些优势。

首先,它操作简单、成本低廉、效果可靠。

其次,可以通过可视化的红色形成判断根系活力,评估根系的发育状况。

然而,TTC法也存在一些不足之处,如容易受到环境条件的干扰,结果的可视化程度受到主观因素的影响等。

5. 未来发展方向在未来,TTC法可以与其他技术相结合,以提高根系活力测定的准确性和可靠性。

光学显微镜、分子生物学技术和高通量测定等新技术的应用,将进一步拓展我们对根系活力的认识。

此外,开展TTC法的标准化研究,建立更严格的操作规范,有助于提高测定结果的一致性和可比性。

4植物根系和根际的研究方法

4植物根系和根际的研究方法

第4章植物根系和根际的研究方法第一节植物根系的研究方法植物根系具有吸收和输送养分和水分、合成植物激素和其他有机物质、储存营养物质以及支撑植物使之固定于土壤中等多方面的作用。

它是植物与外界环境之间进行物质交换的主要器官,因此它与植物营养有着密切的关系。

但植物根系的研究比地上部分的研究要困难的多。

一、根系研究方法(一)钉板法:常用。

1、钉板的制作:小板:50cm×50cm,钉长5cm,钉距5cm。

大板:60cm×100cm,钉长5cm,钉距5cm。

2、取样3、清洗4、根系摄影与测定(二)容器法:容器种植主要研究根系生理或生态学特性。

条件容易控制。

1、容器大小与根系体积适应2、种植盒的制作:(三)玻璃壁或玻璃管法:用探头观察根系生长情况。

(四)多孔膜法:尼龙纤维多孔膜(孔径0.3m)二、根系测定方法(一)根系形态特征及其测定方法根系形态特征包括根系体积、几何形状、长度、分布深度、根密度、分枝状况、根重、根表面积、根毛数量和根尖数等。

根系形态与养分、水分的吸收能力有密切关系。

在植物营养研究中,常用的根形态参数主要有根重、根长、根表面积、根密度、根毛和根尖数等。

1、根重根重对于表征根的总量是一个很好的参数,植物吸收养分的数量和速率通常用单位根重作参量。

根重分为根干重和根鲜重两种。

根干重对于养分和水分吸收不是个理想的参数,因为老而粗的根所占的重量很大,而吸收养分和水分的能力很小。

但当了解植物地下部的生产力时,干重常作为估计的标准。

在估算根/冠比(R/S)时,也要用根干重。

测定根干重的方法,一般采用烘干重量法。

在105o C条件下烘干10-20h或在60-70o C下烘干20h,称重。

根鲜重是个理想参数,在植物营养研究方面很有应用价值。

养分吸收大多用根鲜重作参量。

根鲜重容易测定,但准确程度与根外粘附水分有关,故受操作影响较大。

2、根长根长被定义为单位土壤表面积上根系的总长度(L A ),计算公式为:L A = 当根长测定后,如已知根的平均直径,则可以推算根系表面积和根体积,也可用于计算养分吸收速率。

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烟草根系常见测定指标及实验方法一、烟草根系发生特点烟草根属直根系,由主根、侧根和不定根三部分组成。

烟草由苗床栽入大田后,主根受人为控制,经常萎缩,而侧根和不定根迅速发展成一庞大根群。

1级、2级侧根的增长及根长密度在时间、空间上的动态变化与其地上地下关系的变化是一致的。

烟草的根系数量的增加和活力的提高存在双峰现象:第1次出现在团棵期至旺长期。

移栽后40d前(团棵期),烟草的生长中心在地下部,根系生长迅速,并且所形成的根分布在较浅的土层中。

旺长期,生长中心从地下部转移到地上部,0〜10cm 土层出现了大量不定根,因此0〜10cm内1级、2级侧根根长密度表现为增长趋势。

而其它各土层内由于物质供应的减少,根长密度表现为缓慢增长,甚至呈下降的趋势;第2次出现在打顶后的圆顶期。

圆顶期,由于打顶使根系生长又出现一次高峰,各土层1级、2级侧根根长密度均表现出增长的趋势。

因此打顶具有诱发侧根数量的增加和活力提高的作用。

到后期,随着烟叶的逐渐成熟,根系开始死亡,根系生长速度减缓,根长密度变化不大。

烟草生育后期下层分枝密度减少,下层较细的侧根有机物质供应不足,导致衰老死亡而出现的相对减少。

二、衡量根系的指标1、根系生物量根鲜重在植物营养研究方面很有应用价值。

养分吸收大多用根鲜重作参量。

根鲜重容易测定,但准确程度与根外粘附水分有关,故受操作影响较大。

根干重对于养分和水分吸收不是个理想的参数,因为老而粗的根所占的重量很大,而吸收养分和水分的能力很小。

但当了解植物地下部的生产力时,干重常作为估计的标准。

在估算根冠比(R/S )时,也要用根干重。

测定根干重一般采用烘干重量法。

根系干重和鲜重:烟草根系从土壤中挖出、洗净后,用吸水纸或滤纸吸干根表面水分,用电子天平称取根鲜重。

获得鲜重数据后装入牛皮带放入烘箱内,在80 C 下烘干,称其干重。

2、根系形态根系形态特征包括根系体积、几何形状、长度、分布深度、根密度、分枝状况、根重、根表面积、根毛数量和根尖数等。

根系形态与养分、水分的吸收能力有密切关系。

在植物营养研究中,常用的根形态参数主要有根长、根表面积、根体积、根直径等。

2.1根数:根基部的根数。

在洗净根系去掉地上部分后,先数基部的根数。

2.2根长:每个根的长度累计为根长度。

在平整桌面上用铅笔画上1米的长度然后倒少量水保持浅水层,将湿根置于上,把根拉直,累计每条根的长度,得到样品的总根长。

2.4根粗:随机选取10个根,在有少量水的桌面上紧密排成一排,并用小刀修齐顶端。

用小尺测量十个根的粗度,并记录下来。

2.5根体积:根系体积的测定一般采取排水法测定,因为根系的体积等于其所排出同体积水的量。

取1L的量筒,(具体的量筒规格根据样品的根系大小而定)。

注入500ml左右水,记下量筒读数。

用滤纸吸干洗净的根系表面的水,揉成团放入量筒内,用玻棒将根系全部沉入水里,再次记下量筒读数,两次之差即为样品根体积。

2.6根系表面积:根据根系对某种物质的吸附量来测定根的吸收面积。

一般常用甲烯蓝作为被吸附物质,其被吸附的数量可以根据供试液浓度的变化用比色法准确地测出。

当根系在甲烯监溶液中已达吸附饱和而仍留在溶液中时,根系的活跃部分能把原来吸附的物质吸收到细胞中去,因而可继续吸附甲烯蓝。

从后一个吸附量可求出活跃吸收面积。

2.7比根长:衡量根直径的重要参数之一,比根长值越大,说明根越细小。

根系长度和根干质量的比值为比根长,单位为m g-1 2.8根/冠比(R/S ):是地下部与地上部干重的比值,即:R/S =根系干重/地上部干重R/S是描述根系与地上部生长相互关系的参数,通过测定根/冠比,可以了解植物地下部与地上部的分布及二者之间的关系。

一般地S>R,故R/S V 1。

在缺磷情况下,R/S增大。

植物根系的生长具有“趋肥性”,即根系能够迅速伸展到土壤养分相对丰富的地方,以扩大吸收养分的范围。

在一定的土壤养分含量范围内,养分含量偏低,促进根系伸展而抑制地上部生长,R/S比较大;反之,养分含量偏高,根系较短,促进地上部生长,R/S比下降。

3、根系活力与酶活性根系活力需要用挑取足量新鲜根系洗净,放入冰盒或液氮内带回实验室,-80 C 冰箱内保存备用。

3.1根系活力采用a -萘胺法或者氯化三苯基四氮唑(TTC)还原法测定。

3.2丙二醛(Malondialdehyde ,MDA )植物在逆境或衰老条件下,会发生膜脂的过氧化作用。

丙二醛(MDA )是膜脂过氧化产物之一,其浓度表示脂质过氧化强度和膜系统伤害程度,所以丙二醛是逆境生理指标。

通过测定丙二醛的多少可以直接作物的受逆境压迫的程度。

含量采用硫代巴比妥酸法测定。

3.3根的阳离子交换量植物根系的阳离子交换量(cationexchangecapacity ,简称CEC)是指每1000g 干根所能吸收的全部交换性阳离子的厘摩尔数(cmol(+)/kg ),是根系的重要生理生化指标之一。

其大小与植物种类、品种、根细胞壁果胶的羧基含量等有关。

三、实验方法1、根系活力(«-萘胺法)一,测定的意义及原理:植物的根系能氧化吸附在根表面的a -萘胺,生成红色的a -羟基-1-奈胺,沉淀于有氧化力的根表面,使这部分根染成红色。

根对a -萘胺氧化能力与其呼吸强度有密切关系,日本人相见、松中等人认为a -萘胺氧化的本质就是过氧化物酶的作用,该酶的活力愈强,对a -萘胺的氧化力也愈强,染色也愈深。

所以,可以根据染色深浅定性的判断根的活力。

a -萘胺在酸性环境中与对氨基苯磺酸和亚硝酸盐作用生成红色的偶氮染料,可供比色测定a -奈胺含量。

,药品:(1 ) 40ppm ( ug/ml ) a -萘胺溶液:精确称取 0.10g 分析纯a -萘胺,先用2ml95%酒精 溶解,加约50ml 蒸馏水移入100ml 容量瓶中,然后稀释至刻度,保存于棕色瓶中,置于 低温暗处保存。

用前稀释 25倍(40ml 稀释至1000ml )即为40ppm 溶液。

(2 )1%对氨基苯磺酸溶液:称1 g 对氨基苯磺酸溶于 100ml30%乙酸(醋酸)中。

(3) 100ppm 亚硝酸钠溶液:称 0.10g 亚硝酸钠溶于1000ml 蒸馏水中。

(4)0.067mol/LpH7.0 磷酸缓冲液分子量0.067mol PH7.0(1000ml磷酸缓冲液)所需量(g)N a 2HP0 4.2H 2O 178.057.1184g N a 2HP0 4.12H 20 358.22 14.4004gKH 2PO 4136.09 3.6292gN a 2HPO 4.2H 2O 7.1184g ( 或N a 2HPO 4.12H 2O 14.4004g)+ KH 2PO 4 3.6292g 定容到 1000ml 容量瓶中。

三,方法与步骤:(1) a -萘胺标准曲线的绘制:用 40ppm a -萘胺溶液配制成 0、5、10、20、30、40ppma -泰减标辄曲线的绘制5匀,在20-60分钟内用510nm 波长进行比色,以对照光密度为0,读取光密度,以a -萘胺含量作横坐标,光密度作纵坐标绘制标准曲线。

(2)将待测根系吸净吸干附着水称取 磷酸缓冲液各25ml ,混匀。

,从瓶中取 2ml 溶液放入25ml 容量瓶。

将其余的 25 C 下震荡3-6小时(如无震荡器时要在反应期间,2mL 溶液放入另一刻度试管,因为a -萘胺溶液会1g 放入100ml 三角瓶中,加 40ppm 的a -萘胺溶液和(3)静置5-10分钟后(根吸附以完毕) 溶液塞好瓶塞后,放在震荡器上,在 定时的摇动),反应时间完毕后,再取自动氧化,所以要同时做无根的同样操作的空白试验(根样最好用整根;用切碎的根,a 萘胺溶液的氧化量会意外增加)。

2ml 测定液中,各加入 10ml 蒸馏水,混匀后再加入 的亚硝酸钠溶液1ml ,混匀,置于室温下 5分钟使之显 25ml ,在20-60分钟内用510nm 波长进行比色, 读取光密度,由标准曲线查出a -萘胺含量。

也可以将根系烘干,以干重计算根系活力(更 为准确些)。

(5)结果计算根系对a -萘胺的生物氧化量 Y (ug.g -1 .h -1 )按下式进行计算 Y=[ (A-B ) - (C-D ) ]*E/ (t*W )式中:A-第一次取液测定值(ug.ml -1),作为开始值,这是根表面氧化物质的氧化作用而 不是根的酶促反应;B-第二次取液测定值,是根的酶促反应后(如 3小时)剩余的a -萘胺浓度(ug.ml -1 )。

A-B 即a -萘胺氧化总量;C-第一次空白测定值(ug.ml -1); D-第二次空白测定值; C-D 即a -萘胺自发氧化量;E-稀释倍数24 (48/2 )(因从48ml 中又取2ml ); t-3小时; W-样品鲜重(也可以用干重计算);2、根系活力(TTC 法)一、原理氯化三苯基四氮唑 (TTC )是标准氧化电位为 80mV 的氧化还原色素, 溶于水中成为无色溶液, 但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲(TTF ),如下式:生成的三苯甲(TTF )比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,所以 TTC 被广泛用作酶试验的氢受体,植物根系中脱氢酶所引起的 TTC 还原,可因加入琥珀酸、延胡索酸、苹果酸得到增强, 而被丙二酸、碘乙酸所抑制。

所以 TTC 还原量能表示脱氢酶活性,并作为根系活力的指标。

二、实验材料、试剂与仪器设备 (一)试剂1. 乙酸乙酯(分析纯)。

2. 次硫酸钠(Na2S2O4,分析纯),粉末。

3.1 %TTC 溶液:准确称取 TTC1.0g ,溶于少量水中,定容到 100mL 。

用时稀释至需要的浓度。

4.磷酸缓冲液(1/15mol/L,pH7.0 )。

5.1mol/L 硫酸:用量筒取比重 1.84的浓硫酸55mL ,边搅拌边加入盛有 500mL 蒸馏水的烧杯 中,冷却后稀(4)在上述两次及空白试验所吸取的 1%对氨基苯磺酸 1ml 和100ppm 色,然后加入蒸馏水,使整个容积为释至1000mL。

6.0.4mol/L 琥珀酸:称取琥珀酸4.72g,溶于水中,定容至100mL即成。

(二)仪器设备小烧杯3个,研钵1个,移液管:0.5mL1支、10mL1支、5mL3支,刻度试管6支,分光光度计,分析天平(感量0.1mg),电子顶载天平(感量0.1g),温箱,试管架,药勺,石英砂适量,滤纸。

三、实验步骤1. 定性测定(1 )配制反应液把 1 % TTC溶液、0.4mol / L的琥珀酸和磷酸缓冲液按1:5:4比例混合。

(2 )把根仔细洗净,把地上部分从茎基部切除。

将根放入三角瓶中,倒入反应液,以浸没根为度,置37 C左右暗处放1〜3h,以观察着色情况,新根尖端几毫米以及细侧根都明显地变成红色,表明该处有脱氢酶存在。

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