高效液相色谱_质谱法测定人血浆中布洛芬浓...
反相高效液相色谱法测定血中布洛芬含量
ＨｐＪ ｏ３４ ． ｏｌＣｍｇ１３ ｐ，８ａ．，（ ｅ ｈ ｔ，４９ ｒ ｒ１ ｏ ４
Ｄｔ ｍｎｔｎ ｌ ｐ ｆ ｉＰ ｓａ Ｒｖ ｓｄ ｅ ｒｉ ｉ ｏ ｂ ｒｅ ｎ ｍ ｂ ｅ ｒ － ｅ ａｏ ｆ ｏ ｎ ｌ ｕ ａ ｙ ｅ ｅ
Ｐａｅ ｈ ｒ ｒａｃ Ｌ ｕ Ｃ ｒ ａｏｒ ｈ Ｙ ｎ ｈｓ Ｈｇ Ｐ ｆ ｍ ｎｅ ｉ ｈ ｍ ｔｇａ ｙ ｇ ｉ ｅｏ ｉ ｄ ｏ ｑ ｐ ａ
ｐａｅ ｓ ｅ ａ ｄ ｉｏｖｄ １ ｍ ｏ ｍ ｂｌ ｈｓ ｗ ｄｉ ｎ ｒｄｓ ｌｅ ｉ ． ｌ ｏ ｉ ａ ｒ ｄ ｅ ｓ ｎ ０ ｆ ｅ ｐａ ａｄ ｌ ｗ ｉ ｗａ ｉｊ ｔ ｉｔ ａ ｈｓ ｎ ２ ｅ ０ ｏ ｆ ｈｃ ｈ ｓ ｅ ｅ ｎｏ ｎ ｃ ｄ
［ ］ＪＢ Ｗｈｌｍ ｄ Ｈ Ｖｎ， Ｃｒ ａ １ ． ． ｉａ ａ Ｊ ． ｉ Ｊ ｏ － ｔ ｎ ． ｅ ｂｍ
ｃｕ ｎ Ｎ ｃ ｏ ｌ （ ４ ２ ｍ ， ， ｔ ｎ ｏ ｍ ｏ ｕｌ ｓ Ｃ ｌ ｆ ｅ ｉ ８ ． ０ ｍ ５） ｈ × ０ ｅ ｅ ｔ ｗ ｔｍ ｂ ｅ ａ ｍ ｔ ｎｌｗ ｔ －． ９ ｌ ｅ ｉ ｏｉ ｐ ｓ ｅ ａｏ－ ａ ｒ０ ４ ｕ ｄ ｈ ｌ ｈ ｅ ｈ ｅ ０ ｍｌ ｉ ｐｏ ｈｔｂｆ ｒ ２ ： ０１ｖｖａｄ ｏ ｓ ｕ ｈｓ ａ ｕ ｅ （２ １ ： ／）ｎ ｏ ｍ ｐ ｅ ｆ ｄ ００ ０
提取时，回收率仅 ０ ［ 虽然Ｈ Ｌｔ ｉ ５％ ６ ］ ．ｉ ｗｔ ｏ ｚ
等人［用异辛烷－ ６ ］ 异丙醇 （５１）提取布洛 ８ ：５ 芬 时 回 收 完 全，但 不 适 于 丙磺舒 （ 仅
７． ％ ，故经筛选，我们使用环己 异 ７６ １ 烷－ 丙醇（：） ９１，达到快速完全的目 的。
参 考 文 献
血浆中药物的浓度检测方法
血浆中药物的浓度检测方法一、引言血浆中药物的浓度检测是临床药学和药物研究的重要内容之一。
通过测定血浆中药物的浓度，可以评估药物的吸收、分布、代谢和排泄情况，从而指导药物的使用和剂量调整。
本文将介绍血浆中药物浓度检测的方法及其应用。
二、常用的血浆中药物浓度检测方法2.1 高效液相色谱法（HPLC）HPLC是目前应用最广泛的血浆中药物浓度检测方法之一。
它基于样品中药物与色谱柱固定相之间的相互作用，通过控制流动相的性质和流速，使药物在柱上以不同速度传输，从而实现药物的分离和定量测定。
2.2 气相色谱法（GC）GC是一种基于样品中药物在气相中的分配行为进行分离和测定的方法。
它适用于易于挥发的药物的检测，具有高分辨率和灵敏度高的优点。
然而，GC需要样品预处理的步骤较多，对仪器的要求也较高。
2.3 质谱法（MS）质谱法结合了质谱仪和色谱仪的优势，可以实现对样品中药物的高灵敏度和高选择性的检测。
质谱法广泛应用于药物代谢动力学研究和药物相互作用的研究中。
2.4 免疫测定法免疫测定法是利用抗体与药物结合的特异性来测定样品中药物浓度的方法。
常用的免疫测定法包括放射免疫测定法、酶联免疫测定法和荧光免疫测定法等。
免疫测定法具有操作简便、快速、灵敏度高的特点，但对抗体的选择和制备要求较高。
三、血浆中药物浓度检测方法的应用3.1 临床药学血浆中药物浓度检测在临床药学中起到了重要的作用。
通过监测患者血浆中药物的浓度，可以评估药物的疗效和安全性，指导药物的使用和剂量调整。
例如，对于某些具有副作用的药物，如抗癫痫药物，通过监测血浆中药物浓度，可以避免药物过量引起的不良反应。
3.2 药物研究血浆中药物浓度检测在药物研究中也有广泛的应用。
药物的吸收、分布、代谢和排泄过程可以通过检测血浆中药物浓度来研究。
这对于药物的药代动力学和药效学研究具有重要意义。
同时，血浆中药物浓度的检测也可以用于药物相互作用的研究，评估不同药物在体内的相互影响。
人血浆中右酮洛芬浓度的HPLC法测定
DOI ：10.13493/j.issn.1672-7878.2014.02-008网络出版时间：网络出版地址：人血浆中右酮洛芬浓度的HPLC 法测定贾樱樱1*1，拜年2*21新疆医科大学第二附属医院，新疆乌鲁木齐830063;2新疆医科大学第一附属医院，新疆乌鲁木齐830054【摘要】目的：建立HPLC 法测定人血浆中右酮洛芬的浓度。
方法：血浆样品用乙醚作为萃取剂萃取，以萘普生为内标；采用DiamonsiL C 18色谱柱(5μm ，4.6mm×200mm)；流动相为乙腈-5mol/L 磷酸盐缓冲液(27∶73)，pH 值为6.9，流速为1.0mL/min ；检测波长为260nm 。
结果：右酮洛芬血浆样品的线性范围为0.078~5.000μg/mL （r ＝0.9996）；方法回收率和萃取回收率分别为99.5%~101.9%和70.8%~73.8%(n ＝5)，日内、日间RSD 分别为5.5%~10.8%和6.4%~9.4%(n ＝5)。
结论：本法简便、准确、灵敏度高、专属性强，适用于人血浆中右酮洛芬浓度的测定。
【关键词】右酮洛芬；血浆；HPLC 法；测定【中图分类号】R 915【文献标志码】A【文章编号】1672-7878(2014)02-116-003【作者简介】：*1贾樱樱（1984－），女，本科，药师【通信作者】：*2拜年（1984－)，男，硕士，药师【联系电话】：135********E-mail:357006530@（Bestatin ）溶出曲线的相似因子在pH 1.2，6.8和4.0溶液中，分别为55.73，61.00，71.61，均大于50。
拟定的处方-4中供试品的溶出曲线与对照品（Bestatin ）在各pH 值下值相似[8]，故处方-4组成为最佳。
3讨论笔者对拟定处方的各组分，制成胶囊剂后对主成分乌苯美司的装量差异、流动性、累积溶出百分比的影响进行了研究，最终确定了较佳的处方组成，为后续乌苯美司胶囊中的杂质及其稳定性等研究提供了基础数据。
药物分析布洛芬实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握布洛芬的理化性质。
2. 学习布洛芬的含量测定方法。
3. 提高对高效液相色谱法（HPLC）等分析技术的应用能力。
二、实验原理布洛芬（Ibuprofen）是一种非甾体抗炎药，具有镇痛、抗炎、解热作用。
本实验采用高效液相色谱法测定布洛芬的含量，原理如下：1. 样品制备：将布洛芬样品用适宜溶剂溶解，制成待测溶液。
2. 色谱分离：待测溶液经色谱柱分离，布洛芬与其他成分得到分离。
3. 检测：采用紫外吸收检测器检测布洛芬的吸收峰，根据峰面积计算其含量。
三、实验材料与仪器1. 材料：布洛芬对照品、布洛芬样品、甲醇、乙腈、醋酸钠缓冲液、水等。
2. 仪器：高效液相色谱仪、色谱柱、紫外吸收检测器、电子天平、移液器、容量瓶等。
四、实验步骤1. 样品制备：准确称取一定量的布洛芬对照品，用甲醇溶解并定容至一定体积，制成对照品溶液。
准确称取一定量的布洛芬样品，用甲醇溶解并定容至一定体积，制成待测溶液。
2. 色谱条件：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶；流动相：醋酸钠缓冲液-乙腈（40:60）；检测波长：263nm；流速：1.0mL/min；柱温：室温。
3. 测定：分别取对照品溶液和待测溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，根据峰面积计算布洛芬含量。
五、实验结果与分析1. 色谱图：布洛芬对照品和待测溶液的色谱图显示，布洛芬在263nm波长处有明显的吸收峰，峰形尖锐，与其他成分无干扰。
2. 含量测定：根据峰面积计算，待测溶液中布洛芬的含量为（此处插入计算结果）。
六、实验讨论1. 本实验采用高效液相色谱法测定布洛芬含量，具有分离效果好、准确度高、灵敏度高等优点。
2. 实验过程中，应注意溶剂的选择和纯度，避免对色谱分离和检测造成干扰。
3. 本实验结果与文献报道相符，说明本实验方法可行。
七、结论本实验成功采用高效液相色谱法测定了布洛芬的含量，为布洛芬的质量控制提供了可靠的方法。
八、实验报告（此处插入实验报告的详细内容，包括实验目的、原理、材料与仪器、实验步骤、实验结果与分析、实验讨论、结论等。
布洛芬液相检测方法
布洛芬液相检测方法
液相检测方法通常用于分析布洛芬的含量。
一种常用的液相检测方法是高效液相色谱法（HPLC）。
以下是其具体步骤：
1. 准备色谱柱，常用的如Ultimate®AQ-C18，尺寸为×250mm，粒径为
5μm。
2. 选择检测波长，通常为214nm。
3. 准备流动相，通常包括乙腈、水和磷酸。
具体比例为A: 乙腈:水:磷酸 = 340:660:，B: 乙腈，比例根据时间变化，如0min时B=0%，25min时
B=25%，55-70min时B=85%。
4. 设置温度为40度，流速为/min。
5. 处理对照品和样品。
称取对照品或样品20mg，加乙腈2mL，用流动相
A稀释到10mL。
6. 取样品溶液1mL，用流动相A稀释到100mL。
再取稀释后的溶液1mL，用流动相A稀释到10mL，作为自身对照溶液。
7. 通过高效液相色谱法进行检测，根据峰面积或峰高进行定量分析。
请注意，液相检测方法的具体参数可能因不同的应用和实验条件而有所差异。
在具体操作中，应根据实际情况进行调整和优化。
10-高效液相色谱法测定布洛芬注射液的含量及有关物质
于25mL 量瓶中,加水溶解,定容。
精密称取醋酸地塞米松4.16mg 、雌三醇3.89mg,置于同一25mL 量瓶中,用甲醇溶解,定容。
分别精密吸取上述2种溶液各0.1,0.25,1,2,3,4,5mL ,置于同一10mL 量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,配制成系列浓度溶液,在上述色谱条件下进样测定。
以峰面积为纵坐标(Y ),浓度为横坐标(X )进行线性回归,得盐酸环丙沙星的回归方程为Y =9.8924X -16.0486,r =0.9999;醋酸地塞米松的回归方程为Y =36.8673X +5.4933,r =0.9999;雌三醇的回归方程为Y =6.9251X +1.9379,r =0.9999。
结果表明:盐酸环丙沙星在15.97~798.4mg L -1、醋酸地塞米松在1.66~83.2mg L -1、雌三醇在1.56~77.8mg L -1范围内峰面积与浓度均呈良好线性关系。
2.5 精密度试验 取同一浓度对照品溶液,在上述色谱条件下连续测定6次。
盐酸环丙沙星、醋酸地塞米松、雌三醇的RSD 分别为0.34%,0.76%,0.38%,表明仪器精密度良好。
2.6 稳定性试验 取同一浓度对照品溶液,分别在0,2,4,6,8h 进样测定。
盐酸环丙沙星、醋酸地塞米松、雌三醇的RSD 分别为1.08%,0.98%,0.74%。
表明供试品溶液至少在8h 内稳定。
2.7 重复性试验 取供试品溶液6份,照 2.1!项下的色谱条件进样,记录色谱图并计算含量。
结果盐酸环丙沙星、醋酸地塞米松、雌三醇的平均RSD 分别为0.68%,0.63%,0.41%。
表明该方法测定复方雌三醇阴道生物黏附膜中3组分重复性良好。
2.8 加样回收率试验 取已知含量的药膜适量,分别精密加入盐酸环丙沙星、醋酸地塞米松和雌三醇对照品,按样品测定方法处理,依法测定3种主要成分的含量,计算回收率,结果见表1。
表1 加样回收率试验结果(n =3)T ab 1 Results of the r eco very deter minatio n(n =3)药品名称样品含量/mg 加入量/mg 测得量/mg 回收率/%平均回收率/%RSD /%盐酸环丙沙星28.4214.9643.1599.4740.4720.2960.3199.2699.670.5450.0125.1975.41100.28醋酸地塞米松3.111.584.6398.734.122.076.0798.0798.540.425.052.557.5198.82雌三醇3.121.624.6297.534.202.076.1798.5598.440.875.172.597.7099.232.9 样品测定 取面积为2cm ∀2cm 的药膜一张,按 2.2!项下方法制备成每1mL 含盐酸环丙沙星0.5mg 、醋酸地塞米松0.05mg 、雌三醇0.05mg 的溶液,在上述色谱条件下进样,记录色谱图;另取盐酸环丙沙星、醋酸地塞米松、雌三醇对照品,照 2.2!项下方法制成混合溶液,同法测定,按外标法以峰面积计算供试品中3种主药的含量。
高效液相色谱法测定人血浆中布洛芬浓度
高效液相色谱法测定人血浆中布洛芬浓度谢宁;陈清霞;林志霞;杨红梅;梁小丽;肖春燕【期刊名称】《海峡药学》【年(卷),期】2017(029)002【摘要】目的建立检测人血浆中布洛芬浓度的高效液相色谱法.方法以Agilent TC-C18反相柱(150mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,流动相为30mmol·L-1醋酸铵-甲醇-乙腈(25∶55∶20 V/V/V);流速:1.0mL·min-1;检测柱温:25℃;检测波长:230nm.以乙酸乙酯为提取剂.结果布洛芬的低、中、高(2.0,8.0,32.0μg·mL-1)3种浓度平均相对回收率分别为101.5%,99.58%,98.76%,提取回收率分别为70.82%,72.21%,75.86%;日内、日间相对标准偏差(RSD)均低于15%(n=5);分析方法的检测限0.5μg·mL-1;线性范围为1.0~48.0μg·mL-1.线性方程:Y=2.692X-1.26,r=0.9995(n=7).结论该方法简单、快速、灵敏、准确,可用于布洛芬临床血药浓度监测和药动学研究.%OBJECTIVE To establish a method for determining the concentrati on of ibuprofenc in human plasma by HPLC.METHODS The drug from plasma was analyzed in a reverse phase HPLC system C18 column(150mm×4.6mm,5μm);mobile phase consisted of 30mmol·L-1 ammonioum-methanol-acet onitrile (25∶55∶20 v/v/v);the flow rate was 1.0mL·min-1;the detectio n temperature was at 25℃,the detection wavelength was at 230nm.Ethyl acetate was used as extracting solvent.RESULTS The average recoveries of ibuprofenc in low,middle and high concentrations (2.0,8.0,32.0μg·mL-1) were 101.5%,99.58% and98.76%,respectively.The extraction recovery were 70.82%,72.21%and75.86%,respectively.The intra-day and inter-day v a riation(RSD)was less than 15% (n=5).The calibration curve of ibuprofenc showed g ood linearity,r=0.9995(n=7),over the range of 1.0~48.0μg·mL-1.The minimum detectable concentration of ibuprofenc was 0.5μg·mL-1.The reg ression equation was Y=2.692X-1.26.CONCLUSION The method issensitive,quick,simple and accurate,it can be used for clinical drug monitor ing and pharmacokinetics studies of ibuprofenc.【总页数】3页(P276-278)【作者】谢宁;陈清霞;林志霞;杨红梅;梁小丽;肖春燕【作者单位】广州市天河区妇幼保健院药剂科广州 510620;中山大学附属第二医院药学部广州 510120;广州市天河区妇幼保健院药剂科广州 510620;广州市妇女儿童医疗中心药学部广州 510120;广州市妇女儿童医疗中心药学部广州 510120;广州市天河区妇幼保健院药剂科广州 510620【正文语种】中文【中图分类】R969.1【相关文献】1.柱切换高效液相色谱法测定人血浆中布洛芬对映体浓度 [J], 向瑾;余勤;梁茂植;秦永平;南峰2.高效液相色谱-质谱法测定人血浆中布洛芬浓度 [J], 薛洪源;刘军;王宇奇;贺文涛;贾丽霞3.高效液相色谱法测定血浆中布洛芬浓度 [J], 夏霖4.高效液相色谱法测定人血浆中米卡芬净浓度及其在重症患者中的应用 [J], 赵明明;陈亚南;路童;李国飞;肇丽梅5.高效液相色谱法测定血浆中布洛芬浓度(Ⅰ) [J], 王宇;柴虹;朱钦德;贾玉蓉;赵萍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱-质谱法测定人血浆中布洛芬浓度
（ 解放军 白求恩 国际 和平 医 院临床药 理室 ， 石家 庄 ０ ０ ８ ） ５ ０ ２
．
摘要 ： 目的 ： 立 高 效 液 相 色谱 ・ 喷 雾 质谱 联 用 （ Ｐ Ｃ Ｅ Ｉ ） ， 建 电 Ｈ Ｌ ・ Ｓ． Ｍｓ 法 测定 人 血 浆 中 布 洛 芬 的 浓 度 。 方 法 ： 血 浆经 乙腈 沉 淀 蛋 白 后 ， 将 取 上 清 液 进 样 检 测 。液 相 分 离 采 用 Ｄａ ｏｓ ， 析 柱 ， 温 ３ ｉ ｎｉＣｓ ｍ ｌ 分 柱 ０℃ ． 乙 腈 一 ｍｏ Ｌ乙酸 铵 缓 冲 液 （ ０ ２ ） 流 动 相 ， 速 为 以 ２ｍ ｌ ／ ８： ０ 为 流
i09m8782007106枷5302肺性腑病是由慢性胸肺疾患伴呼吸衰竭出现缺氧二氧化碳潴留而引起精神神经症状的一种综合下操作参考国际规范每批样品均随行低中高3个浓度的质控样品每个浓度3份并以当日的标准曲线计算各时间点样品中布洛芬的浓度由质控样品的测定结果决定当日数据的取舍得到平均血药浓度
维普资讯 m
！ 旦 鲞 塑 兰 笙 ！ 笙鱼
ｇｏｅｉＮａ Ｃｉ ， ｃ０７ ｏ ９ 。 ｒｓ ｈ ｈａ ｅ２ ， １ ， ． Ｆｃ ｏ ｎ Ｄ ．０ Ｖ ． Ｎ６ ｎ １
・
临 床 药 学
・
高效液相色谱一 质谱法测定人血浆中布洛芬浓度
薛洪 源 ， 军 ， 宇奇 ， 文 涛 ， 刘 王 贺 贾丽霞
０５ｍ／ ｉ， ． ｌ ｎ进样莹５ ｌ 采用四极杆质谱检测器， ｍ ， ； 电喷雾源（ Ｓ）雾化气（ ： 压力为 ３ ｓ ． ＥＩ ． Ｎ） ０ｐｉ 干燥气（ ： 流速为 ｌ． ／ ｉ， ｇ Ｎ） ３０Ｌ ｍｎ干
燥 气 （ ： 温 度 为 ３０ ， 细管 电 压 ３ ５ｋ 碎 片 电 压为 ７ 峰 宽 ０ １ ， 离 子 方 式 检 测 ． Ｎ） ５＇ 毛 Ｅ ． Ｖ， ５Ｖ， ．０ 负 在选 择 离 子 监 测 （ Ｉ 模 式 下 检 测 质 荷 ＳＭ） 比 （ ｚ 为 ２ ５ ２ 布 洛 芬 ） ３６ １ 内标 吲 哚 美 辛 ） 准 分 子 离 子 ［ Ｈ］‘ 结 果 ： 浆 中 无 干 扰 测 定 的 内 源 性 物 质 ， 个 样 品 的 ｍ／） ０．（ 和 ５ ．（ 的 Ｍ・ 。 血 每
液相色谱-质谱联用法检测药品非法添加布洛芬
氏菌、氟氏志贺氏菌、绿脓杆菌、肺炎双球菌（山东大学齐鲁 医院细菌室）。 １．３培养基 肉汤培养基：Ｏ．５％牛肉膏、Ｏ．５％氯化钠、ｌ％ 蛋白胨、０．５％葡萄糖配成，以０．１％磷酸二氢钠调ｐＨ至７．６，
５、Ｏ．００６ ２５、０．００３ ｇ／ｍｌ，每支加入Ｏ．１ ｍｌ（稀释至１０。）的新 鲜菌液，置３７℃培养１８ ｈ后观察有无细菌生长。必要时可移 植到合适的培养基继续培养１８ ｈ后观察。无细菌生长的最 高药物稀释度即为实验药物的最低抑菌浓度（ＭＩＣ）。结果见
主垦塞旦匿堑！！！！至！旦釜！鲞筮！！塑垦！堕！里翌！堕塑！！业！！！！：！！！：！：堕！：！！
液相色谱．质谱联用法检测药品非法添加布洛芬
·６３·
张西如姜建国
【摘要】 目的 建立检测制剂中非法掺布洛芬入的专属性方法。方法 采用液相色谱一质谱联用 法。选用Ｖｅｎｕ８ｉｌ ＭＰ ｃ。。柱，以Ｏ．０１ ｍｏＬ／Ｌ醋酸铵（用冰醋酸调ｐＨ３．０）一乙腈（５０：５０）为流动相，对非法 制剂的提取液进行液相色谱．质谱联用分析。通过与对照品的色谱、紫外及质谱行为相比较，对此类非法 药进行定量测定和定性鉴别。结果在非法制剂中检出布洛芬，回收率为９８．８７％（ｎ＝６）。结论该方 法选择性强，灵敏度高，可作为分析检测非法制剂中的布洛芬。
参考文 献
［１］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典２００５年版二部．化学工 业出版社。２００５：９５．
复方乳酸依沙丫啶乳膏体外抑菌作用的研究
亓丕水
【摘要】 目的观察复方乳酸依沙丫啶乳膏体外抑菌作用。方法通过液体试管法检测复方乳酸 依沙丫啶乳膏的体外抑菌作用。结果复方乳酸依沙丫啶乳膏的抗菌谱广，对致病菌及真菌均有抑制 作用。结论复方乳酸依沙丫啶乳膏具有体外抑菌作用。
用于治疗关节炎或类风湿。由于此类药物价格便宜，致使一
高效液相色谱-质谱联用法检测药品非法添加布洛芬研究
RSD(%)
0.44
2.4.7 样品含量测定 , 分别将对照以及试验品的溶液添加到液相色谱 - 质谱 联用仪中进行测定，按 2.3 项下制备供试品溶液，进行分析，可以确定在供试品溶 液中检出了与对照品时间相同的色谱峰并且色谱峰的一级质谱分子离子峰和质 谱主要离子碎片与对照品一致。可以确定检测对象中含有非法添加的布洛芬，通 过计算，在供试品溶液中每粒中含有 21 毫克的布洛芬 . 3. 讨论
回收率 (%)
(%)
0.2044 0.1816 0.3831 98.40
0.2045 0.1816 0.3830 98.29
0.2210 0.2131 0.3026 0.3026 0.5155 0.5088 97.32 97.72
98.03
0.2077 0.3631 0.5637 98.04
0.2163 0.3631 0.5736 98.40
临床经验
医药界 2020 年 04 月第 08 期
高效液相色谱 - 质谱联用法检测药品非法添加布洛芬研究
任 虹
（辽宁省朝阳市检验检测认证中心，辽宁 朝阳 122000）
【摘要】：目的：通过高效液相色谱 - 质谱联用法进行样品中非法添加布洛芬的检测分析。方法：通过色谱柱以流动性，利用高效液相色谱与质谱联用的方式进行非法 制剂提取液的分析。结果：通过高效液相色谱 - 质谱联用方式进行药品中非法添加布洛芬的检测，进行加样回收试验测定，回收率为 98.03%；RSD 为 0.44%，确定在试验品 溶液中每粒中含有 21 毫克的布洛芬。 结论：该方法进行药品中是否非法添加布洛芬灵敏性、选择性较高，是一种有效的分析方式。
2.2 质 谱 条 件 , 通 过 电 喷 雾 化 的 方 式 进 行 检 测 分 析，其 中 离 子 源 温 度 为 120℃；毛细管电压 3.0 千伏，萃取电压 2.0 伏，孔电 20 伏，透镜电压 1.0 伏，脱溶 剂温度 350 度，脱溶剂气体流速每小时 500 升，通过全扫描质谱法进行处理。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
药学与临床・临床药学・高效液相色谱2质谱法测定人血浆中布洛芬浓度薛洪源,刘军,王宇奇,贺文涛,贾丽霞(解放军白求恩国际和平医院临床药理室,石家庄050082)摘要:目的:建立高效液相色谱2电喷雾质谱联用(HP LC2ESI2MS)法,测定人血浆中布洛芬的浓度。
方法:将血浆经乙腈沉淀蛋白后,取上清液进样检测。
液相分离采用D ia monsil C18分析柱,柱温30℃,以乙腈-2mmol/L乙酸铵缓冲液(80∶20)为流动相,流速为0.5m l/m in,进样量5μl;采用四极杆质谱检测器,电喷雾源(ESI),雾化气(N2)压力为30p sig,干燥气(N2)流速为13.0L/m in,干燥气(N2)温度为350℃,毛细管电压3.5k V,碎片电压为75V,峰宽0.10,负离子方式检测,在选择离子监测(SI M)模式下检测质荷比(m/z)为205.2(布洛芬)和356.1(内标吲哚美辛)的准分子离子[M2H]-。
结果:血浆中无干扰测定的内源性物质,每个样品的分析时间小于5.0m in;布洛芬在1.25～48μg/m l范围内呈良好的线性关系,回收率为98.5%～102.3%,日内精密度(RS D)﹤319%,日间RS D<8.1%。
结论:本方法操作简便、选择性好、准确、灵敏,可用于布洛芬的药代动力学和生物利用度研究。
关键词:布洛芬;血药浓度;高效液相色谱2质谱法中图分类号:R969.1 文献标识码:A 文章编号:100920878(2007)0620051203D eter m i n a ti on of I buprofen i n Hu man Pl a s ma by HP LC2M SXUE Hong2yuan,L IU Jun,WANG Yu2qi,HE W eng2tao,J I A L i2xia(Depart m ent of Clinical Phar macol ogy,Bethune I nternati onal Peace Hos2 p ital of P LA,Shijiazhuang050082,China)Abstract:O bjecti ve:T o intr oduce the method f or the deter m inati on of I bup r ofen in hu man p las ma using HP LC2ESI2MS.M ethods:The p las2 ma was p reci p itated by the additi on of acet onitrile.The supernatant was used for injecti on,then separated on a D ia monsil C18analytical col2 u mn.The mobile phase consisted of acet onitrile22mmol/l ammoniu m acetate s oluti on(80∶20),at a fl ow rate of0.5m l/m in.A Agilent quad2 rup le M S D equi pped with an electr os p ray i onizati on(ESI)s ource was used as detect or and was operated in the negative i on mode.The nebu2 lizer(N2)p ressure was at30p sig.The drying gas(N2)fl ow and its te mperature were set at13.0L/m in and350℃.Cap illary voltage and frag ment or voltage were set at3.5k V and75V,res pectively.I n selected i on monit oring(SI M)mode,the i on combinati ons of m/z205.2and 356.1was used t o qualify I bup r ofen and internal standard(I ndometacin).Results:Chr omat ogra m s showed no endogenous interfering peaks with the res pective blank hu man p las ma sa mp les.Each analysis was comp leted within5.0m in.The linear range of I bup r ofen in p las ma was 1.25～48μg/m l.The method recoveries were98.5%～102.3%.The intra2day and inter2day RS D s were less than3.9%and8.1%,re2 s pectively.Conclusi on:The method is supposed t o be convenient,s pecific,accurate and sensitive enough t o be app lied t o the phar macokinetic and bi oavailability studies of I bup r ofen in hu man p las ma.Key words:I br porfen;Plas ma concentrati on;HP LC2MS 布洛芬(I bup r ofen)是一种非甾体解热镇痛抗炎药,临床广泛用于治疗神经痛、牙痛、痛经、关节痛及感冒综合征等,现已收载于中国、美国、英国、日本等国家的药典。
国内测定血浆中布洛芬多为高效液相色谱2紫外(HP LC2UV)法,未见高效液相色谱2质谱(HP LC2 MS)方法的报道。
本试验采用高效液相色谱2电喷雾离子源质谱联用(HP LC2ESI2MS)法,在提高检测灵敏度的前提下,用于人体药代动力学研究时,减少了受试者服药剂量,降低了不良反应发生率,为临床合理用药及布洛芬制剂的药代动力学研究提供依据。
1 仪器与试药111 仪器 Agilent1100LC/MS D联用系统(美国安捷伦公司),含1100二元输液泵、在线真空脱气机、自动进样器、柱温箱、MS D四极杆质谱检测器、A.09.01化学工作站,配有电喷雾源(ESI源)。
BP211D型十万分之一天平(德国Sart orius公司);X W280A旋涡混合器(上海精科实业有限公司);LDZ522型低速自动平衡离心机(北京医用离心机厂);G L216G2Ⅱ型冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂)。
112 试药 布洛芬对照品(中国药品生物制品检定所,批号1001792200303);吲哚美辛(内标,中国药品生物制品检定所,批号1002582200403);布洛芬缓释胶囊(商品名:芬必得,规格:每粒300mg,中美史克制药有限公司,批号05070335);乙腈、甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯;空白血浆(解放军白求恩国际和平医院输血科)。
2 方法与结果211 色谱条件与质谱条件21111 色谱条件:色谱柱为Dia monsil C18(4.6mm×・15・150mm,5mm ),保护柱为Z orbax S B 2C 18(4.6mm ×12.5mm,5mm );流动相为乙腈22mmol/L 乙酸铵缓冲液(80∶20);柱温为30℃;流速为0.5m l/m in;进样量5μl 。
21112 质谱条件:电喷雾离子源(ESI ),电晕放电电流4μA,雾化气(N 2)压力30psig,干燥气(N 2)流速13.0L /m in,干燥气(N 2)温度350℃,毛细管电压3.5k V,碎片电压75V,峰宽0.10;负离子方式检测;在选择离子监测(SI M )模式下检测质荷比(m /z )为205.2(布洛芬)和356.1(内标吲哚美辛)的准分子离子[M 2H ]-。
212 标准溶液的配制21211 内标溶液的配制:精密称取吲哚美辛,用乙腈溶解并定容,配制成1mg/m l 的储备液;精取该溶液用乙腈稀释得2.0μg /m l 的内标工作液。
21212 含内标的布洛芬标准溶液的配制:精密称取布洛芬,用2.0μg/m l 的内标工作液溶解并定容,配制成1280μg/m l 的含内标储备液;精密吸取该溶液,用2.0μg/m l 的内标工作液为稀释剂,分别得含布洛芬为640、240、80、40、20、7.5、2.5、1.25、0.625μg/m l,内标均为0.5μg /m l 的系列标准溶液。
213 血浆样品处理 取血浆样品100μl,加入2μg/m l 内标工作液20μl,混匀,加入乙腈300μl,涡旋振荡1.5m in,离心15m in (12000r/m in ),取上清液进样5μl 。
214 方法专属性考察 采用扫描(SCAN )方式得到布洛芬及内标信号最强的准分子离子峰质荷比(m /z ),分别为205.2和356.1;对其负离子进行选择离子监测,而后进行定量分析。
取空白血浆100μl,按“2.3”项下操作,不加内标溶液(以20μl 乙腈代替),得空白血浆色谱图;直接将含内标的标准溶液进样,得标准液及内标的色谱图;将空白血浆加入含内标的布洛芬标准液,按“2.3”项下“混匀”后操作,得空白血浆加入布洛芬及内标的色谱图;受试者口服布洛芬后4h 的血浆样本,按“2.3”项下操作,得血浆样本色谱图。
布洛芬和内标的保留时间分别为4.6、4.2m in 。
结果表明,空白血浆中的内源性物质不干扰布洛芬及内标物的测定,见图1。
A.空白血浆;B.标准溶液;C .空白血浆加标准溶液;D.受试者服药后血浆样品;1.总离子流色谱图;2.选择m /z 205.2(布洛芬)离子色谱图;3.选择m /z 356.1(吲哚美辛)离子色谱图图1 HP LC 2ESI 2M S 色谱图215 标准曲线的绘制 取空白血浆100μl,加入含内标的标准系列溶液20μl,配制成布洛芬浓度为0.125、0.25、0.5、1.5、4、8、16、48μg/m l,内标为0.4μg/m l 的血浆样品,按“2.3”项下“混匀”后操作。
以布洛芬浓度(c )为横坐标,布洛芬与内标峰面积比(Y )为纵坐标,采用加权(1/c 2)最小二乘法进行回归运算;典型的回归方程为:Y =1.1988c -0.0173,r =0.9984,线性范围0.125～48μg/m l,最低定量浓度为0.125μg/m l,仪器最低检测浓度为0.03125μg/m l 。