测定浙贝母中贝母素甲含量
高效液相色谱法测定浙贝母配方颗粒中贝母素甲和贝母素乙的含量
高效液相色谱法测定浙贝母配方颗粒中贝母素甲和贝母素乙的含量何敏;郭田;杜昕;姚建标;沈利君【摘要】目的建立测定浙贝母配方颗粒中贝母素甲、贝母素乙含量的高效液相色谱法方法.方法采用DIKMA,Diamand-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水-二乙胺(70∶30∶0.03)为流动相;以蒸发光散射检测器为检测器.理论板数按贝母素甲峰计算应不低于2 000.流动相流速为1 mL· min1,柱温为30℃.结果贝母素甲进样量在1.141 7～6.850 2 μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),贝母素乙进样量在0.856 3～3.681 8 μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 8).平均回收率分别为贝母素甲103.7％、贝母素乙100.0％,RSD分别为1.8％,2.4％.结论该方法准确度、重复性好,能较准确地评价浙贝母配方颗粒的质量.【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2018(037)004【总页数】3页(P477-479)【关键词】浙贝母;贝母素甲;贝母素乙;配方颗粒;色谱法,高效液相【作者】何敏;郭田;杜昕;姚建标;沈利君【作者单位】浙江省杭州市萧山区第一人民医院药剂科,杭州311200;浙江康恩贝制药股份有限公司,杭州310052;浙江康恩贝制药股份有限公司,杭州310052;浙江康恩贝制药股份有限公司,杭州310052;浙江省杭州市萧山区第一人民医院药剂科,杭州311200【正文语种】中文【中图分类】R286;R927.2浙贝母是道地药材“浙八味”之一，为百合科植物浙贝母的干燥鳞茎，以金华磐安、宁波鄞州等为主产地。
味苦性寒，归肺心经，有清热化痰止咳、解毒散结消肿之功效，用于风热咳嗽等症状[1]。
浙贝母与川贝相比，强于通泄，适用于外感风热、痰火郁结引起的咳嗽，多适用于表邪之实证；川贝则强于清火润肺，药性缓和，最适用于虚证[2]。
HPLC-ELSD法测定清肺抑火丸中贝母素甲、贝母素乙的含量
浙贝母为百合科贝母属植物斯贝母 （ｒｉａａｔ ｎｅ ｇｉ ｑ） Ｆｉｌｔ ｕ ｂｒ ｉＭｉ． ｔｌｉ ｈ —
的鳞茎 。有止 咳化痰、清热散结之 作用。主治上 呼吸道 感染 ，咽喉肿
痛、支气管炎、肺热咳嗽、胃、乳腺炎、甲状腺肿大、痛疖肿毒。野
生于林下 或山坡草丛 中，分布 于浙 江 、江苏 、湖 南等省 。中医认为 其
中圈分类号 ：Ｒ ８ ． ２４１
文献标识码：Ｂ
文章编号 ：１７－ １４ （０２ ９ ０ １－ ： ６ １ ８ ９ ２ １ ）１— １５ ０ ２
清肺抑 火丸 （ ）是由黄芩 、栀子 、知母 、浙 贝母 、黄柏 、苦 水丸 参 、桔梗 、前胡 、天花粉和大黄 １味药材经提取精 制而成的 中药成方 Ｏ 制剂 ，临床用于治疗痰热阻肺所致的 咳嗽、痰黄稠黏 １ 咽痛 Ⅲ ： ３ 于 。
Ｒ Ｄ ． ％。结论： Ｓ ￣４ ４ ０ 本方法能够很１地测定浙贝母药材中的主要生物碱 乎
贝母素 甲的含量，可用于浙贝母药材的质量控制 。 ３ 仪器 与试 药 ３１仪器 ．
苦、寒，归肺、心经，具有清热散结、化疲止咳功能，主治风犯肺、 痰火咳嗽、肺痈、乳痈、瘰瘥和疮毒翻 。
２ ． １化学成分
母 素 甲和 贝母 素 乙的平均 回收率 分别 为 １２ ％、１２ ％，方法精 密度 （ Ｓ ０． ０ ０． ２ Ｒ Ｄ，ｎ ６ ＝ ）分 别为 Ｏ８％、０ ０ ． ３ ． ％。结 论 该 法可 用于 清肺抑 火 丸 ８
YL-11010浙贝母原料检验操作规程
【鉴别】
（1）显微鉴别
仪器与试剂：生物显微镜、酒精灯，水合氯醛、稀甘油等。
方法：取本品适量，用水合氯醛装片，置显微镜下观察：（1）本品粉末淡黄白色。淀粉粒甚多，单粒卵形、广卵形或椭圆形，直径6～56μm，层纹不明显。表皮细胞类多角形或长方形，垂周壁连珠状增厚；气孔少见，副卫细胞4～5个。草酸钙结晶少见，细小，多呈颗粒状，有的呈梭形、方形或细杆状。导管多为螺纹，直径至18μm。
计算公式：
W样+W0－W1
水分% =×100%
W样
式中：
W0----------------------------称量瓶的重量（g）。
W1---------------------------称量瓶与样品的重量（g）。
W样---------------------------样品的重量（g）。
总灰分不得过6.0％（通则2302）。
照高效液相色谱法（通则0512）测定。本品按干燥品计算，含贝母素甲（C27H45NO3）和贝母素乙（C27H43NO3）的总量，不得少于0.080%。
仪器与试剂：电子分析天平、高效液相色谱仪、乙腈、二乙胺、甲醇、贝母素甲对照品、贝母素乙对照品等。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-二乙胺（70:30:0.03）为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按贝母素甲峰计算应不低于2000◦
【性状】
仪器：直尺。
方法：取本品,置日光下观察,并用直尺测量:大贝为鳞茎外层的单瓣鳞叶，略呈新月形，高1〜2cm，直径2-3.5cm。外表面类白色至淡黄色，内表面白色或淡棕色，被有白色粉末。质硬而脆，易折断，断面白色至黄白色，富粉性。气微，味微苦。
正交实验法优选清肺平喘颗粒的提取工艺
根 据 浙 贝母 、葶 苈 子 、桔 梗 所 含 成 分 的 性 质 及 参 考 有 关 文 献 ，确 定 乙醇 用 量 （ 、提 取 时 间 Ａ）
（） Ｂ 、乙醇浓度（ ） ｃ 、提取次数 （ ４ 因素 ， 选择 Ｄ）个
３个 水平 进 行试 验 考 察 ， 采 用正 交 设计 试 验 Ｌ（ ９３）
２ Ｃ ｏ ｇ ｉｇＥ ｇｎ ｅｉｇＴ ｃ ｎ ｌｇ ｅ ｅ ｒｈ Ｃ ｎ ｒ ｏ ｅｅｉａｙＤｒｇ Ｃ ｏ ｇ ｉｇ４ ０ １ ， ｈｎ ） ． ｈ ｎ ｑｎ ｎ ｉｅ ｒ ｅ ｈ ｏｏ Ｒ ｓ ａｃ ｅ ｔ ｆ ｔｒ ｒ ｕ ， ｈ ｎ ｑｎ ０ ７ ６ Ｃ ｉ ａ ｎ ｙ ｅ Ｖ ｎ
近年来 ，畜禽生产中越来越多的疾病都伴随气 喘 的症状 ，气 喘可 引起 畜禽 的抵抗 力下 降 ，从而 引 发多种疾病 ，同时使生产性能下降 ，经济效益降 低 ，给养 殖业 造成 重 大经济 损失 。为 了减 少化学 药 物的药物残留 ， 保障食 品安全 ，应该加强对中兽药 制剂的研发和应用 。目前 ，我国中兽药制剂工艺 比
正 交 实验 法优 选 清肺 平喘 颗 粒 的提 取 工 艺
李 玉平 ，张
（１西 南大学 动物科技学院，重庆 ．
利 １，黎 晓敏 ， ２
４０ １） ０ ７ ６
４ ０ １ ：２ 重庆市兽药 工程技术研究 中心，重庆 ０７５ ．
摘
要 ：利用正 交试验法优 选清肺平喘颗粒的最佳提 取工艺。将浙 贝母 、葶苈子 和桔梗 采用 乙醇回流提取 法
键 合 硅 胶 为 填 充 剂 ； 以 乙 腈 一 一 乙胺 （０ ３ ： 水 二 ７ ：０
０ ） ． 为流动相 ，蒸发光散射检测器。理论板数按贝 ３ 母 素 甲峰 计算 应 ≥２００ ０ 。蒸 发光 散 射检 测 器参 数 ：
浙贝母中贝母素甲含量测定方法
浙贝母中贝母素甲含量测定方法：
测定法取本品粉末（过四号筛）约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液4ml，浸润1小时，加三氯甲烷-甲醇（4:1）混合溶液40ml，置80℃水浴加热回流2小时，放冷，滤过，残渣加适量三氯甲烷-甲醇（4:1）混合溶液洗涤3次，洗液合并滤液，蒸干。
残渣加三氯甲烷使溶解，转移至50ml量瓶中，加三氯甲烷至刻度，摇匀。
取3ml至50ml量瓶中，加三氯甲烷至刻度，摇匀。
精密量取15ml，置分液漏斗中，照标准曲线的制备项下的方法，自“精密加入邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液（PH5.0）2.0ml”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中贝母素甲的重量（mg）,计算，即得。
本品按干燥品计算，含生物碱以贝母素甲（C27H45O3）计，不得少于0.50%。
贝母甲素含量测定方法研究进展
贝母甲素含量测定方法研究进展作者：张玲来源：《今日财富》2015年第10期摘要：综述了贝母甲素含量测定方法的研究进展，包括紫外一可见分光光度法、薄层扫描法、高效液相色谱法、超高效液相色谱法、高效液相色谱一差热联用技术等，为贝母甲素的含量测定提供参考。
关键词：贝母甲素；含量测定；研究进展O引言贝母甲素来源于百合科植物川贝母和浙贝母的干燥鳞茎。
贝母甲素是一种生物碱，白色针状晶体，可溶于有机溶剂，不溶于水、石油乙醚。
贝母甲素有清热润肺、止咳化痰功效，用于治疗痰热咳嗽，心肺郁积，咳嗽及气管炎。
目前贝母甲素含量测定方法很多，如分光光度法、薄层扫描法、高效液相色谱法等。
本文对其含量测定方法研究进展进行综述。
1 紫外一一可见分光光度法紫外——可见分光光度法是根据物质分子对波长为200～760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。
操作简单、准确度高、重现性好。
邝翠仪等人发现贝母甲素在2368～11.84μg/ml范围内线性关系良好，贝母甲素平均回收率测定为97.7%，RSD=4.2%。
尹尚军等采用超声波辅助提取法分离浙贝母生物碱，并用分光光度法测定其含量。
结果表明，吸光度值与贝母素甲质量浓度呈良好的线性关系，不同产地对浙贝母生物碱含量的影响较大，而且不同组织部位的含量不尽相同。
2 薄层扫描法（TLC）薄层扫描法检测的灵敏度、结果的精密度与准确度均良好。
与高效液相色谱法相比，具有多通道效应，可同时平行分离分析多个样品；流动相用量少且选择范围宽、更换方便；固定相为一次性使用，对样品的预处理要求不高等优点。
在中药制剂检验中，已成为重要的常用分析方法之一。
《中国药典》中有33个中成药品种采用该法进行含量测定。
薄层扫描法的薄层板多采用硅胶G，展开剂多采用氯仿一甲醇一水（65：35：10），显色剂一般为10%硫酸乙醇。
宋红湘等用薄层扫描仪对妇康消肿丸中贝母素甲进行了含量测定。
其中做层析分析时，贝母素甲在502 nm处有最大吸收；扫描结果表明在0.41-2.05μg之间；积分值与点样量间线性关系良好。
2005版药典.1-023浙贝母
浙贝母拼音名：Zhebeimu英文名：BULBUS FRITILLARIAE THUNBERGII本品为百合科植物浙贝母 Fritillaria thunbergii Miq.的干燥鳞茎。
初夏植株枯萎时采挖，洗净。
大小分开，大者除去芯芽，习称“大贝”；小者不去芯芽，习称“珠贝”。
分别撞擦，除去外皮，拌以煅过的贝壳粉，吸去擦出的浆汁，干燥；或取鳞茎，大小分开，洗净，除去芯芽，趁鲜切成厚片，洗净，干燥，习称“浙贝片”。
【性状】大贝为鳞茎外层的单瓣鳞叶，略呈新月形，高1～2cm,直径2～3.5cm。
外表面类白色至淡黄色，内表面白色或淡棕色，被有白色粉末。
质硬而脆，易折断，断面白色至黄白色，富粉性。
气微，味微苦。
珠贝为完整的鳞茎，呈扁圆形，高1～1.5cm，直径1～2.5cm。
表面类白色，外层鳞叶2 瓣，肥厚，略似肾形，互相抱合，内有小鳞叶2～3枚及干缩的残茎。
浙贝片为鳞茎外层的单瓣鳞叶切成的片。
椭圆形或类圆形，直径1～2cm，边缘表面淡黄色，切面平坦，粉白色。
质脆，易折断，断面粉白色，富粉性。
【鉴别】 (1) 本品粉末淡黄白色。
淀粉粒甚多，单粒卵形、广卵形或椭圆形，直径6～56μm，脐点点状、裂缝状、人字状或马蹄状，位于较小端，层纹大多明显；偶见半复粒及复粒，复粒由2 分粒组成。
表皮细胞类多角形或长方形，垂周壁连珠状增厚；有时可见气孔，副卫细胞4～5个，草酸钙结晶细小，多呈颗粒状，有的呈棱形、方形或细杆状。
导管多为螺纹，直径至18μm。
(2) 取本品粉末5g，加浓氨试液2ml 与苯20ml，放置过夜，滤过，取滤液8ml ，蒸干，残渣加氯仿1ml 使溶解，作为供试品溶液。
另取贝母素甲与贝母素乙对照品，加氯仿制成每1ml 各含2mg 的混合溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液10～20μl、对照品溶液10μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶Ｇ薄层板上，以醋酸乙酯－甲醇－浓氨试液(17:2:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。
蒸发光散射测定浙贝母中贝母素甲、贝母素乙的含量探究
蒸发光散射测定浙贝母中贝母素甲、贝母素乙的含量探究黄长煌【摘要】Objective To explore a feasibility method for determination of peimine A and peimine B.Methods HPLC were carried out with conditions:column:agilent hypersil BDS-C18(4.0 mm×250 mm,5μm),mobile phase:acetonitrile-water-diethylamine(65:35:0.03), ELSD to determinate of peimine,peiminine.Results The average percentages of peimine A from three batches of Jinhua were (0.124 ± 0.07)% and peiminine B were(0.061 ± 0.004)%.Conclusion ELSD for determinatio n of peimine,peiminine is a accurate and reliable and rapid method.%目的：探究蒸发光散射（ELSD）测定浙贝母中贝母素甲、贝母素乙含量的可行性。
方法色谱柱：Agilent Hypersil BDS-C18（4.0 mm×250 mm，5μm）；流动相：乙腈-水-二乙胺（65：35：0.03），ELSD检测器对浙贝母中贝母素甲、贝母素乙含量进行测定。
结果来自金华磐安三批次样品贝母素甲平均百分含量为（0.124±0.07）%、贝母素乙平均百分含量为（0.061±0.004）%。
结论 ELSD测定浙贝母中贝母素甲和贝母素乙，方法准确可靠，测定较为快捷。