脂肪酸及其衍生物的抑菌活性

浙江大学学报（农业与生命科学版）　３９（２）：１５５～１６０，２０１３ＪｏｕｒｎａｌｏｆＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ａｇｒｉｃ．＆ＬｉｆｅＳｃｉ．）ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｊｏｕｒｎａｌｓ．ｚｊｕ．ｅｄｕ．ｃｎ／ａｇｒＥ‐ｍａｉｌ：ｚｄｘｂｎｓｂ＠ｚｊｕ．ｅｄｕ．ｃｎＤＯＩ：１０．３７８５／ｊ．ｉｓｓｎ．１００８‐９２０９．２０１２．１１．０６６基金项目：国家自然科学基金面上资助项目（３１０７１５０１）．倡通信作者（Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ）：张辉，Ｅ‐ｍａｉｌ：ｈｕｂｅｒｔ０５１３＠ｚｊｕ．ｅｄｕ．ｃｎ；冯凤琴，Ｅ‐ｍａｉｌ：ｆｅｎｇｆｑ＠ｚｊｕ．ｅｄｕ．ｃｎ收稿日期（Ｒｅｃｅｉｖｅｄ）：２０１２‐１１‐０６；接受日期（Ａｃｃｅｐｔｅｄ）：２０１３‐０１‐０２；网络出版日期（Ｐｕｂｌｉｓｈｅｄｏｎｌｉｎｅ）：２０１３‐０３‐１３ＵＲＬ：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３３．１２４７．Ｓ．２０１３０３１３．１１０６．００２．ｈｔｍｌ脂肪酸及其衍生物的抑菌活性张希，杨明，宋飞，张辉倡，冯凤琴倡（浙江大学生物系统工程与食品科学学院，杭州３１００５８）摘要　以致病性大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）Ｏ１５７：Ｈ７和白色念珠菌（Ｃａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ）为供试菌，测定１０种饱和脂肪酸、６种不饱和脂肪酸、９种单脂肪酸甘油酯、２种脂肪酸甲酯、３种脂肪酸乙酯和４种脂肪醇的抑菌活性．结果表明：中链饱和脂肪酸及其单脂肪酸甘油酯以及长链不饱和脂肪酸的抑菌活性较强，脂肪醇次之，长链饱和脂肪酸、脂肪酸甲酯以及乙酯的抑菌效果较弱，其中，脂肪酸乙酯的抑菌效果优于脂肪酸甲酯．说明脂肪酸碳链的长度，不饱和脂肪酸双键数目、双键位置以及取代基团种类是影响脂肪酸及其衍生物抑菌活性的重要因素．关键词　脂肪酸；抑菌活性；大肠杆菌Ｏ１５７：Ｈ７；白色念珠菌中图分类号　ＴＳ２２１ 文献标志码　ＡＡｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｓｅｌｅｃｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓａｎｄｔｈｅｉｒｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ａｇｒｉｃ．＆ＬｉｆｅＳｃｉ．），２０１３，３９（２）：１５５‐１６０ＺＨＡＮＧＸｉ，ＹＡＮＧＭｉｎｇ，ＳＯＮＧＦｅｉ，ＺＨＡＮＧＨｕｉ倡，ＦＥＮＧＦｅｎｇｑｉｎ倡（ＳｃｈｏｏｌｏｆＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇａｎｄＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅ，ＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００５８，Ｃｈｉｎａ）Ｓｕｍｍａｒｙ　Ｆａｔｔｙａｃｉｄｓａｒｅｕｂｉｑｕｉｔｏｕｓｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，ｗｈｉｃｈａｒｅｔｙｐｉｃａｌｌｙｂｏｕｎｄｅｄｔｏｏｔｈｅｒｃｏｍｐｏｕｎｄｓｓｕｃｈａｓｇｌｙｃｅｒｏｌ，ｓｕｇａｒｏｒｐｈｏｓｐｈａｔｅｈｅａｄｇｒｏｕｐｓｔｏｆｏｒｍｖａｒｉｏｕｓｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ．Ｔｈｅｙｈａｖｅｄｉｖｅｒｓｅａｎｄｐｏｔｅｎｔｂｉｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ，ｓｕｃｈａｓａｎｔｉ‐ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ，ａｎｔｉ‐ｔｕｍｏｒ，ａｎｔｉ‐ｐｒｏｔｏｚｏａｎ，ａｎｔｉｖｉｒａｌ，ａｎｔｉｆｕｎｇａｌａｎｄａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ．Ａｌｔｈｏｕｇｈｔｈｅａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｆａｔｔｙａｃｉｄｓａｎｄｔｈｅｉｒｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓｈａｓｂｅｅｎｗｅｌｌｋｎｏｗｎｆｏｒｍａｎｙｙｅａｒｓ，ｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒａｌａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｆｅａｔｕｒｅｓｃａｕｓｉｎｇｔｈｅｍｔｏｐｒｅｖｅｎｔｍｉｃｒｏｂｉａｌｇｒｏｗｔｈｏｒｓｕｒｖｉｖａｌａｒｅｓｔｉｌｌｕｎｋｎｏｗｎ．Ｔｈｅｐｕｒｐｏｓｅｏｆｔｈｅｐｒｅｓｅｎｔｓｔｕｄｙｗａｓｔｏｆｉｎｄｏｕｔｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｆｅａｔｕｒｅｓａｎｄｔｈｅａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ．Ａｔｆｉｒｓｔｓｔｅｐ，ｉｔｗａｓｎｅｃｅｓｓａｒｙｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｅｆｆｉｃａｃｙｏｆｖａｒｉｏｕｓｆａｔｔｙａｃｉｄｓａｎｄｔｈｅｉｒｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓｔｏｃｏｎｔｒｏｌｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＯ１５７：Ｈ７ａｎｄＣａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ．Ｔｈｅｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓｕｓｅｄｆｏｒｓｃｒｅｅｎｉｎｇｓｔｕｄｉｅｓｗｅｒｅｃｏｍｍｏｎｉｎｆｏｏｄ（Ｅ．ｃｏｉｌＯ１５７：Ｈ７）ａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌｓｐｅｃｉｍｅｎｓ（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）ａｎｄｗｅｒｅｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｌｙｍａｉｎｔａｉｎｅｄｔｈｒｏｕｇｈｍｏｎｔｈｌｙｔｒａｎｓｆｅｒｓｔｏｔｈｅｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｆｒｅｓｈｍｅｄｉｕｍ（Ｅ．ｃｏｉｌＯ１５７：Ｈ７ｉｎｔｒｙｐｔｉｃａｓｅｓｏｙｂｒｏｔｈａｔ３７℃；Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓｉｎＳａｂｏｕｒａｕｄ‐Ｄｅｘｔｒｏｓｅｂｒｏｔｈａｔ３０℃）ａｎｄｗｅｒｅｓｔｏｒｅｄａｔ４℃．Ｓｔｏｃｋｃｕｌｔｕｒｅｓｗｅｒｅｉｎｏｃｕｌａｔｅｄａｎｄｇｒｏｗｎｏｎｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｂｒｏｔｈｆｏｒ１８‐２４ｈｔｏｐｒｅｐａｒｅａｃｔｉｖｅａｎｄｗｏｒｋｉｎｇｃｕｌｔｕｒｅｓ．Ｔｈｅｔｅｓｔｅｄｓａｍｐｌｅｓｉｎｃｌｕｄｅｄ１０ｋｉｎｄｓｏｆｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓ，ｓｉｘｄｉｆｆｅｒｅｎｔｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓ，ｎｉｎｅｋｉｎｄｓｏｆｍｏｎｏａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌｓ，ｔｗｏｔｙｐｅｓｏｆｆａｔｔｙａｃｉｄｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒｓ，ｔｈｒｅｅｋｉｎｄｓｏｆｆａｔｔｙａｃｉｄｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒｓａｎｄｆｏｕｒｃｌａｓｓｅｓｏｆｆａｔｔｙａｌｃｏｈｏｌｓ．Ｔｈｅｙｗｅｒｅｄｉｓｓｏｌｖｅｄｉｎ９５％ｅｔｈａｎｏｌ，ｓｔｅｒｉｌｅＴｗｅｅｎ‐８０（ｆｉｎａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆ浙江大学学报（农业与生命科学版）ｅｔｈａｎｏｌａｎｄＴｗｅｅｎ‐８０ｗｅｒｅ１．５％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ）ａｎｄｔｈｅｎｗｅｒｅｆｉｌｔｅｒ‐ｓｔｅｒｉｌｉｚｅｄｕｓｉｎｇａ０．２２μｍｐｏｒｅｓｉｚｅｍｅｍｂｒａｎｅｆｉｌｔｅｒ．ＥｔｈａｎｏｌａｎｄＴｗｅｅｎ‐８０ｃｏｎｔｒｏｌｓｗｅｒｅｕｓｅｄｆｏｒｅａｃｈｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｔｏｅｎｓｕｒｅｔｈａｔａｎｙｏｂｓｅｒｖｅｄｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｗａｓｎｏｔｄｕｅｔｏｔｈｅｍ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓｗｅｒｅｄｉｓｓｏｌｖｅｄｉｎ１．５％ｅｔｈａｎｏｌａｎｄｔｗｅｅｎ‐８０ｕｓｅｄａｓｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌｓ．Ｔｈｅｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｂｒｏｔｈｓｗｈｉｃｈｃｏｎｔａｉｎｅｄ０．０１５，０．００７５ｍｏｌ／Ｌｆａｔｔｙａｃｉｄｓａｎｄｔｈｅｉｒｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓｗｅｒｅｉｎｏｃｕｌａｔｅｄｗｉｔｈａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ１．０×１０５‐５．０×１０５ＣＦＵ／ｍＬｏｆａｃｔｉｖｅｃｕｌｔｕｒｅｓ，ｔｈｅｎｔｈｅｙｗｅｒｅｉｎｃｕｂａｔｅｄｆｏｒ２４ｈａｔｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ．Ｓａｍｐｌｅｓ（１００μＬ）ｗｅｒｅｒｅｍｏｖｅｄａｎｄｉｍｍｅｄｉａｔｅｌｙｄｉｌｕｔｅｄ１０‐ｆｏｌｄｉｎｓｔｅｒｉｌｅｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｓａｌｉｎｅ．Ｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｖｉａｂｌｅｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｔｈｒｏｕｇｈａｓｔａｎｄａｒｄｐｌａｔｅｃｏｕｎｔｔｅｃｈｎｉｑｕｅ．Ａｌｌｔｈｅｔｅｓｔｅｄｍｅｄｉｕｍ‐ｃｈａｉｎｆａｔｔｙａｃｉｄｓ（Ｃ８‐１２）ａｎｄｔｈｅｉｒｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇｃｈａｉｎｍｏｎｏａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌｓ，ｌｏｎｇ‐ｃｈａｉｎｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓ（＞Ｃ１２）ｓｈｏｗｅｄｍｏｒｅａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｔｈａｎｆａｔｔｙａｌｃｏｈｏｌｓ．Ｌｏｎｇ‐ｃｈａｉｎｆａｔｔｙａｃｉｄｓ，ｆａｔｔｙａｃｉｄｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒｓａｎｄｆａｔｔｙａｃｉｄｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒｓｈａｄｆｅｅｂｌｉｓｈａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｏｆｔｈｅｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓ，ＴｈｅＣ＜１２ｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓｗｅｒｅｍｏｒｅａｃｔｉｖｅｔｈａｎｔｈｅＣ＞１３ｆａｔｔｙａｃｉｄｓ；ａｓｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｉｒｓａｔｕｒａｔｅｄｃｏｕｎｔｅｒｐａｒｔｓ，ｔｈｅＣ１４：１，Ｃ１６：１，Ｃ１６：２ｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓｗｅｒｅｍｏｒｅｈｉｇｈｌｙａｃｔｉｖｅ，ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｌｉｎｏｌｅｎｉｃａｃｉｄ（Ｃ１８：３）ｗａｓｎｏｔｖｅｒｙａｃｔｉｖｅ．Ｔｈｅｆａｔｔｙａｃｉｄｅｔｈｅｒｉｆｉｅｄｗｉｔｈｔｈｅａｌｃｏｈｏｌａｎｄｍｅｔｈａｎｏｌｓｈｏｗｅｄｎｏｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ．Ｔｈｅ１，３‐ｄｉｌａｕｒｉｎｗａｓｌｅｓｓａｃｔｉｖｅｔｈａｎｔｈｅｆａｔｔｙａｃｉｄ．Ｔｈｅｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅｗａｓｐｒｏｖｅｄｔｏｂｅｍｏｒｅａｃｔｉｖｅ．Ｉｎｓｕｍ，ｔｈｅｃｈａｉｎｌｅｎｇｔｈ，ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔ，ｎｕｍｂｅｒｓａｎｄｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｄｏｕｂｌｅｂｏｎｄａｒｅｔｈｅｉｍｐｏｒｔａｎｔｆａｃｔｏｒｓｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇｔｈｅａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｆａｔｔｙａｃｉｄｓａｎｄｔｈｅｉｒｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ　ｆａｔｔｙａｃｉｄ；ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙ；ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｉｌＯ１５７：Ｈ７；Ｃａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ 脂肪酸是一端含有一个羧基的脂肪族碳氢链．根据饱和度，脂肪酸可分为饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸．根据碳链的长短，脂肪酸可分为短链脂肪酸（碳链长度＜８）、中链脂肪酸（碳链长度８～１２）和长链脂肪酸（碳链长度＞１２）．以脂肪酸为主体可以衍生出种类繁多的脂肪酸衍生物，主要包括脂肪酸甘油酯、脂肪酸糖酯、脂肪醇、脂肪酸甲酯、脂肪酸乙酯、脂肪酸盐等［１］．脂肪酸及其衍生物在体内起着关键的生理作用，部分衍生物还具有重要的工业营养价值，比如近年来的研究热点ω‐３脂肪酸，已被证明具有抗感染、抗肿瘤、预防心脑血管疾病、糖尿病、老年痴呆、抑郁症等多种功效［２‐４］；脂肪酸甘油三酯是人体的重要供能物质，同时也可作为药物制剂的基质；脂肪酸糖酯、磺化脂肪酸酯、脂肪醇、脂肪酸盐都是优秀的表面活性剂，可广泛应用于食品、洗涤剂和化妆品中．除了上述功能之外，近年来，脂肪酸及其衍生物的抑菌活性也一直受到人们的关注．已有研究表明，脂肪酸及其衍生物可抑制丝状真菌以及酵母菌的生长，比如面包中易染的桧状青霉、产黄青霉、红曲霉以及常见的黑曲霉、娄地青霉、詹森青霉、白色念珠菌、酿酒酵母等［５‐７］；同时也可抑制细菌的生长繁殖，并且对革兰阳性细菌的抑制作用强于革兰阴性细菌，但存在菌株差异性，如对大肠杆菌、沙门菌、假单胞菌等革兰阴性菌的抑制作用很弱，而对幽门螺杆菌、弯曲杆菌等革兰阴性菌具有很强的抑制作用，同属金黄色葡萄球菌的２个种也存在差异；对其他常见致腐致病细菌（鼠伤寒沙门菌、单核增生李斯特菌、副溶血性弧菌、肉毒梭状芽孢杆菌、肉杆菌、弯曲乳杆菌、清酒乳杆菌、荧光假单胞菌、液化雷氏菌、热死环丝菌、粪肠球菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌等）的抑制作用也有报道［８‐１６］．本研究以致病性肠出血性大肠杆菌Ｏ１５７：Ｈ７以及白色念珠菌为供试菌，系统研究了脂肪酸及其衍生物的抑菌特性，以期筛选出具有高活性的、可应用于食品工业的脂肪酸以及脂肪酸衍生物，并初步探讨脂肪酸及其衍生物的抑菌活性与结构之间的关系．１　材料与方法１畅１　主要材料１畅１畅１　菌种 肠出血性大肠杆菌Ｏ１５７：Ｈ７（ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＯ１５７：Ｈ７，ＣＩＣＣ２１５３０）购自中国工业微生物菌种保藏中心；白色念珠菌（Ｃａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ）由本实验室保存．１畅１畅２　主要试剂 脂肪酸及其衍生物，Ｓｉｇｍａ公司（纯度＞９９％）；其余试剂均为分析纯．１畅１畅３　培养基 胰蛋白胨大豆肉汤（ｔｒｙｐｔｉｃａｓｅｓｏｙｂｒｏｔｈ，ＴＳＢ）培养基：胰蛋白胨１５．０ｇ，大豆蛋白胨５．０ｇ，氯化钠５．０ｇ，蒸馏水１０００ｍＬ，溶解后调节ｐＨ值至７．０±０．２，经１２１℃高压蒸汽灭菌２０ｍｉｎ后备用．６５１第３９卷　张希，等：脂肪酸及其衍生物的抑菌活性营养琼脂（ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｇａｒ，ＮＡ）：蛋白胨１０．０ｇ，牛肉粉３．０ｇ，氯化钠５．０ｇ，琼脂１８．０ｇ，蒸馏水１０００ｍＬ，调节ｐＨ值至７．０±０．２，经１２１℃高压蒸汽灭菌２０ｍｉｎ后备用．马铃薯葡萄糖琼脂（ｐｏｔａｔｏｄｅｘｔｒｏｓｅａｇａｒ，ＰＤＡ）：马铃薯（去皮切块）３００ｇ，葡糖糖２０ｇ，氯霉素０．１ｇ，蒸馏水１０００ｍＬ，经１２１℃高压蒸汽灭菌２０ｍｉｎ后备用．沙堡氏培养基（Ｓａｂｏｕｒａｕｄ‐Ｄｅｘｔｒｏｓｅｂｒｏｔｈ，ＳＤＢ）：蛋白胨１０ｇ，葡萄糖４０ｇ，氯霉素０．１ｇ，蒸馏水１０００ｍＬ，溶解后调节ｐＨ值至６．５±０．２，经１２１℃高压蒸汽灭菌２０ｍｉｎ后备用．１畅２　实验方法１畅２畅１　菌种活化 将购于中国工业微生物菌种保藏中心的Ｅ．ｃｏｌｉＯ１５７：Ｈ７以及本实验室保存的Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ菌株进行活化，在最适固体培养基上进行平板划线，得到具有特征菌落形态的菌落，反复划线筛选１～３次，将得到的纯菌落接种于斜面培养基上，在最适温度下培养１～２ｄ，置于４℃冰箱保存备用．１畅２畅２　菌液制备 将活化培养后的菌种接种于液体培养基（Ｅ．ｃｏｉｌＯ１５７：Ｈ７用胰蛋白胨大豆肉汤培养基；Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ用沙堡氏培养基）中，在最适温度［Ｅ．ｃｏｉｌＯ１５７：Ｈ７为（３６±１）℃；Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ为（３０±１）℃］下培养１８～２４ｈ．采用平板计数法（Ｅ．ｃｏｉｌＯ１５７：Ｈ７用ＮＡ培养基；Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ用ＰＤＡ培养基）确定菌液浓度，然后将菌液稀释至１．０×１０５～５．０×１０５ＣＦＵ／ｍＬ．１畅２畅３　脂肪酸以及脂肪酸衍生物抗菌剂的制备将脂肪酸及其衍生物样品用９５％乙醇溶解，加入等体积无菌的吐温‐８０制得高浓度储备液，并通过０．２２μｍ滤膜除菌，而后于冰箱中保存备用．取一定量储备液于无菌液体培养基中（某些难溶样品可通过超声波处理使其分散均匀）使其达到所需起始浓度，其中乙醇含量１．５％，吐温‐８０含量１．５％，在该浓度下，二者通过预实验证明均无抑菌性；再采用２倍稀释法，用无菌液体培养基（含乙醇与吐温）在２ｍＬ离心管中配制到所需浓度，并使离心管中含有０．９ｍＬ抗菌剂，备用．１畅２畅４　抑制率测定 在１畅２畅３节所配置的离心管中加入０．１ｍＬ１．０×１０５ＣＦＵ／ｍＬ菌悬液，使每个离心管中抗菌剂浓度依次为０．０１５和０．００７５ｍｏｌ／Ｌ．将离心管密封后，放入到最适温度的恒温恒湿培养箱中培养，２４ｈ后采用平板计数法测定各个离心管中的菌液浓度，按照下式计算抑制率：　抑制率（ＩＲ％）＝阳性实验组菌落数－实验组菌落数阳性实验组菌落数×１００％．其中阳性实验组：将同浓度菌液接入含有１．５％乙醇和１．５％吐温‐８０、而不含样品的无菌液体培养基中；阴性实验组：含有乙醇和吐温‐８０的无菌液体培养基．１畅３　数据分析采用ＳＰＳＳ１６．０进行方差分析，Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义，并用Ｏｒｉｇｉｎ８．０绘图．２　结果与讨论２畅１　饱和脂肪酸的抑菌活性由图１～２可知，饱和脂肪酸对大肠杆菌以及白色念珠菌的抑制效果随碳链长度的增加呈先升高后下降的趋势，但存在菌株差异性．棕榈酸、硬脂酸、花生酸３种长链饱和脂肪酸对大肠杆菌的抑菌性较弱，抑制率均小于３０％，而白色念珠菌对脂肪酸更加敏感，棕榈酸浓度为０．０１５ｍｏｌ／Ｌ时抑制率可达７０％．中、短链饱和脂肪酸对供试菌均具有较强的抑制作用，且明显强于长链脂肪酸．中、短链脂肪酸浓度为０．０１５ｍｏｌ／Ｌ时抑制率超过９０％，其中癸酸 ＨＡ：己酸；ＳＡ：山梨酸；ＯＡ：辛酸；ＣＡ：癸酸；ＵＡ：十一酸；ＬＡ：月桂酸；ＴＡ：十三酸；ＰＡ：棕榈酸；ＳＴＡ：硬脂酸；ＥＡ：花生酸．ＨＡ：Ｈｅｘａｎｏｉｃａｃｉｄ；ＳＡ：Ｓｏｒｂｉｃａｃｉｄ；ＯＡ：Ｏｃｔａｎｏｉｃａｃｉｄ；ＣＡ：Ｃａｐｒｉｃａｃｉｄ；ＵＡ：Ｕｎｄｅｃａｎｏｉｃａｃｉｄ；ＬＡ：Ｌａｕｒｉｃａｃｉｄ；ＴＡ：Ｔｒｉｄｅｃａｎｏｉｃａｃｉｄ；ＰＡ：Ｐａｌｍｉｔｉｃａｃｉｄ；ＳＴＡ：Ｓｔｅａｒｉｃａｃｉｄ；ＥＡ：Ｅｉｃｏｓａｎｏｉｃａｃｉｄ．图１　饱和脂肪酸对大肠杆菌的抑制效果Ｆｉｇ．１　ＡｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓａｇａｉｎｓｔＥ．ｃｏｌｉＯ１５７：Ｈ７抑菌效果最佳．相较于其他中链脂肪酸，白色念珠菌对月桂酸具有更高的抗性．短链脂肪酸抑菌活性与中链脂肪酸抑菌活性相近，但前者可显著降低培７５１　第２期浙江大学学报（农业与生命科学版） ＨＡ：己酸；ＳＡ：山梨酸；ＯＡ：辛酸；ＣＡ：癸酸；ＵＡ：十一酸；ＬＡ：月桂酸；ＴＡ：十三酸；ＰＡ：棕榈酸；ＳＴＡ：硬脂酸；ＥＡ：花生酸．ＨＡ：Ｈｅｘａｎｏｉｃａｃｉｄ；ＳＡ：Ｓｏｒｂｉｃａｃｉｄ；ＯＡ：Ｏｃｔａｎｏｉｃａｃｉｄ；ＣＡ：Ｃａｐｒｉｃａｃｉｄ；ＵＡ：Ｕｎｄｅｃａｎｏｉｃａｃｉｄ；ＬＡ：Ｌａｕｒｉｃａｃｉｄ；ＴＡ：Ｔｒｉｄｅｃａｎｏｉｃａｃｉｄ；ＰＡ：Ｐａｌｍｉｔｉｃａｃｉｄ；ＳＴＡ：Ｓｔｅａｒｉｃａｃｉｄ；ＥＡ：Ｅｉｃｏｓａｎｏｉｃａｃｉｄ．图２　饱和脂肪酸对白色念珠菌的抑制效果Ｆｉｇ．２　ＡｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓａｇａｉｎｓｔＣ．ａｌｂｉｃａｎｓ养基ｐＨ．添加０．００７５ｍｏｌ／Ｌ己酸与山梨酸可使液体培养基ｐＨ低于５，而添加同浓度中、长链脂肪酸对培养基的中性环境影响不显著，ｐＨ仍大于６．故短链脂肪酸的抑菌活性强弱是取决于脂肪酸本身的结构还是因添加脂肪酸所引起的培养基ｐＨ变化还有待进一步研究，且短链脂肪酸中的山梨酸、己酸随着浓度下降抑制率也下降明显．２畅２　不饱和脂肪酸的抑菌活性由图３～４可知，与饱和脂肪酸抑菌规律不同，所选６种不饱和脂肪酸对供试菌的抑菌活性规律较为复杂．在２种浓度下，所选不饱和脂肪酸对大肠杆菌的抑制率均超过５０％，对白色念珠菌的抑制率也均超过４５％，具有良好的抑菌效果，但随着浓度的下降，其抑菌活性均有不同程度的下降．在所选不饱和脂肪酸中，十一烯酸对供试菌抑制效果最佳，油酸最差．油酸、亚油酸、亚麻酸和二十碳五烯酸的抑菌活性分别高于碳链长度相同的硬脂酸、花生酸；亚油酸、亚麻酸抑菌效果强于碳链长度相同且具有单一双键的油酸，即长链脂肪酸分子中双键数目增加可增强其抑菌效果，但亚麻酸抑菌活性低于亚油酸，即双键数目增加其抑菌活性反而下降，这表明抑菌活性与碳链长度、双键数目以及双键位置有关．但十一烯酸与同样碳链长度的饱和脂肪酸（十一酸）抑菌活性基本一致，即添加一个双键对Ｃ１１脂肪酸的抑菌活性影响较小，不同于其余长链饱和脂肪酸．２畅３　单脂肪酸甘油酯的抑菌活性由图５～６可知，随着脂肪酸碳链长度的增加， ＵＣ：十一烯酸；ＰＯＡ：棕榈油酸；ＯＬＡ：油酸；ＬＬＡ：亚油酸；ＬＮＡ：γ‐亚麻酸；ＥＰＡ：二十碳五烯酸．ＵＣ：Ｏｌｅｆｉｎｅａｃｉｄ；ＰＯＡ：Ｐａｌｍｉｔｏｌｅｉｃａｃｉｄ；ＯＬＡ：Ｏｌｅｉｃａｃｉｄ；ＬＬＡ：Ｌｉｎｏｌｅｉｃａｃｉｄ；ＬＮＡ：γ‐ｌｉｎｏｌｅｎｉｃａｃｉｄ；ＥＰＡ：Ｅｉｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃａｃｉｄ．图３　不饱和脂肪酸对大肠杆菌的抑制效果Ｆｉｇ．３　ＡｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓａｇａｉｎｓｔＥ．ｃｏｌｉＯ１５７：Ｈ７ ＵＣ：十一烯酸；ＰＯＡ：棕榈油酸；ＯＬＡ：油酸；ＬＬＡ：亚油酸；ＬＮＡ：γ‐亚麻酸；ＥＰＡ：二十碳五烯酸．ＵＣ：Ｏｌｅｆｉｎｅａｃｉｄ；ＰＯＡ：Ｐａｌｍｉｔｏｌｅｉｃａｃｉｄ；ＯＬＡ：Ｏｌｅｉｃａｃｉｄ；ＬＬＡ：Ｌｉｎｏｌｅｉｃａｃｉｄ；ＬＮＡ：γ‐ｌｉｎｏｌｅｎｉｃａｃｉｄ；ＥＰＡ：Ｅｉｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃａｃｉｄ．图４　不饱和脂肪酸对白色念珠菌的抑制效果Ｆｉｇ．４　ＡｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓａｇａｉｎｓｔＣ．ａｌｂｉｃａｎｓ单脂肪酸甘油酯对供试菌的抑菌活性同饱和脂肪酸抑菌规律相同，呈现先升高后下降的趋势（单丁酸甘油酯除外）．其中，单十一酸甘油酯以及单月桂酸甘油酯在浓度为０．００７５ｍｏｌ／Ｌ时对Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ的抑菌效果下降明显．中链脂肪酸甘油单酯抑菌效果最强，在浓度为０．０１５ｍｏｌ／Ｌ时抑制率超过９０％，其中单辛酸甘油酯，单癸酸甘油酯以及单十一酸甘油酯对Ｅ．ｃｏｌｉＯ１５７：Ｈ７抑菌效果最佳，在浓度分别为０．０１５ｍｏｌ／Ｌ和０．００７５ｍｏｌ／Ｌ时抑菌活性基本不变；而单癸酸甘油酯以及单十三酸甘油酯对８５１第３９卷　张希，等：脂肪酸及其衍生物的抑菌活性 ＭＢ：单丁酸甘油酯；ＭＣＬ：单辛酸甘油酯；ＭＣ：单癸酸甘油酯；ＭＤ：单十一酸甘油酯；ＭＬ：单月桂酸甘油酯；ＭＴ：单十三酸甘油酯；ＭＭ：单肉豆蔻酸甘油酯；ＭＳ：单硬脂酸甘油酯；ＭＯ：单油酸甘油酯．ＭＢ：Ｍｏｎｏｂｕｔｙｒｉｎ；ＭＣＬ：Ｍｏｎｏｃａｐｒｙｌｉｎ；ＭＣ：Ｍｏｎｏｃａｐｒｉｎ；ＭＤ：Ｍｏｎｏｕｎｄｅｃａｎｏｉｎ；ＭＬ：Ｍｏｎｏｌａｕｒｉｎ；ＭＴ：Ｍｏｎｏｔｒｉｄｅｃａｎｏｉｎ；ＭＭ：Ｍｏｎｏｍｙｒｉｓｔｉｎ；ＭＳ：Ｍｏｎｏｓｔｅａｒｉｎ；ＭＯ：Ｍｏｎｏｏｌｅｉｎ．图５　单脂肪酸甘油酯对大肠杆菌的抑制效果Ｆｉｇ．５　ＡｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｍｏｎｏａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌｓａｇａｉｎｓｔＥ．ｃｏｌｉＯ１５７：Ｈ７ ＭＢ：单丁酸甘油酯；ＭＣＬ：单辛酸甘油酯；ＭＣ：单癸酸甘油酯；ＭＤ：单十一酸甘油酯；ＭＬ：单月桂酸甘油酯；ＭＴ：单十三酸甘油酯；ＭＭ：单肉豆蔻酸甘油酯；ＭＳ：单硬脂酸甘油酯；ＭＯ：单油酸甘油酯．ＭＢ：Ｍｏｎｏｂｕｔｙｒｉｎ；ＭＣＬ：Ｍｏｎｏｃａｐｒｙｌｉｎ；ＭＣ：Ｍｏｎｏｃａｐｒｉｎ；ＭＤ：Ｍｏｎｏｕｎｄｅｃａｎｏｉｎ；ＭＬ：Ｍｏｎｏｌａｕｒｉｎ；ＭＴ：Ｍｏｎｏｔｒｉｄｅｃａｎｏｉｎ；ＭＭ：Ｍｏｎｏｍｙｒｉｓｔｉｎ；ＭＳ：Ｍｏｎｏｓｔｅａｒｉｎ；ＭＯ：Ｍｏｎｏｏｌｅｉｎ．图６　单脂肪酸甘油酯对白色念珠菌的抑制效果Ｆｉｇ．６　ＡｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｍｏｎｏａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌｓａｇａｉｎｓｔＣ．ａｌｂｉｃａｎｓＣ．ａｌｂｉｃａｎｓ的抑制作用最强，但随浓度下降，抑制率也下降．有关文献［１６］报道，单脂肪酸甘油酯的抑菌作用强于相应的脂肪酸，但在本研究中二者相差不大，这可能是因为样品所选浓度过高，完全抑制了供试菌的生长，未能体现出差异性．长链脂肪酸甘油单酯对Ｅ．ｃｏｌｉＯ１５７：Ｈ７抑制作用较弱，而对Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ抑制作用较强，这与饱和脂肪酸抑菌规律相近，且随浓度的下降，其对Ｅ．ｃｏｌｉＯ１５７：Ｈ７的抑菌活性下降明显．在低浓度条件下，不饱和脂肪酸甘油单酯———单油酸甘油酯的抑菌活性强于其余中长链饱和脂肪酸甘油单酯（Ｃ１２～１８），且对２种供试菌抑菌活性存在差异，对Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ有较强抑制作用，抑制率可达８０％，而对Ｅ．ｃｏｌｉＯ１５７：Ｈ７抑制率仅为３８％．２畅４　脂肪醇、脂肪酸甲酯和脂肪酸乙酯的抑菌活性由图７～８可知：脂肪酸甲酯、脂肪酸乙酯对供试菌的抑制效果较弱，抑制率均低于４０％，同样碳 ＥＡＬ：辛酸乙酯；ＭＥＣ：癸酸甲酯；ＥＴＣ：癸酸乙酯；ＭＥＬ：月桂酸甲酯；ＥＴＬ：月桂酸乙酯；ＬＡＡ：十二醇；ＴＥ：十四醇；ＨＥ：十六醇；ＳＡＬ：十八醇．ＥＡＬ：Ｅｔｈｙｌｃａｐｒｙｌａｔｅ；ＭＥＣ：Ｍｅｔｈｙｌｃａｐｒａｔｅ；ＥＴＣ：Ｅｔｈｙｌｃａｐｒａｔｅ；ＭＥＬ：Ｍｅｔｈｙｌｌａｕｒａｔｅ；ＥＴＬ：Ｅｔｈｙｌｌａｕｒａｔｅ；ＬＡＡ：Ｌａｕｒｙｌａｌｃｏｈｏｌ；ＴＥ：Ｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｌ；ＨＥ：Ｈｅｘａｄｅｃａｎｏｌ；ＳＡＬ：Ｓｔｅａｒｙｌａｌｃｏｈｏｌ．图７　脂肪酸衍生物对大肠杆菌的抑制效果Ｆｉｇ．７　ＡｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｆａｔｔｙａｃｉｄｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓａｇａｉｎｓｔＥ．ｃｏｌｉＯ１５７：Ｈ７ ＥＡＬ：辛酸乙酯；ＭＥＣ：癸酸甲酯；ＥＴＣ：癸酸乙酯；ＭＥＬ：月桂酸甲酯；ＥＴＬ：月桂酸乙酯；ＤＬ：双月桂酸甘油酯；ＬＡＡ：十二醇；ＴＥ：十四醇；ＨＥ：十六醇；ＳＡＬ：十八醇．ＥＡＬ：Ｅｔｈｙｌｃａｐｒｙｌａｔｅ；ＭＥＣ：Ｍｅｔｈｙｌｃａｐｒａｔｅ；ＥＴＣ：Ｅｔｈｙｌｃａｐｒａｔｅ；ＭＥＬ：Ｍｅｔｈｙｌｌａｕｒａｔｅ；ＥＴＬ：Ｅｔｈｙｌｌａｕｒａｔｅ；ＤＬ：１，３‐ｄｉｌａｕｒａｔｅ；ＬＡＡ：Ｌａｕｒｙｌａｌｃｏｈｏｌ；ＴＥ：Ｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｌ；ＨＥ：Ｈｅｘａｄｅｃａｎｏｌ；ＳＡＬ：Ｓｔｅａｒｙｌａｌｃｏｈｏｌ．图８　脂肪酸衍生物对白色念珠菌的抑制效果Ｆｉｇ．８　ＡｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｆａｔｔｙａｃｉｄｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓａｇａｉｎｓｔＣ．ａｌｂｉｃａｎｓ９５１　第２期浙江大学学报（农业与生命科学版）链长度的乙酯抑菌活性强于甲酯；脂肪醇的抑制效果相对较好，抑制率均大于４０％，其中十二醇抑菌性很强，但仍远远低于相应碳链长度的月桂酸和单月桂酸甘油酯，这表明脂肪酸衍生物中不同取代基可影响其抑菌活性．３　结论本研究表明，部分脂肪酸及其衍生物作为一种优良的乳化剂以及防腐剂能有效抑制致病菌大肠杆菌Ｏ１５７：Ｈ７以及白色念珠菌的生长繁殖，这主要是因为脂肪酸及其衍生物可作用于微生物细胞膜，引起电子传递链中断、氧化磷酸化解偶联、细胞内容物溶出，同时可抑制胞内酶活性，减弱细胞对营养物质的吸收利用，也可通过自身过氧化、自动氧化反应产生的Ｈ２Ｏ２以及活性氧杀死细菌［１７］．本研究表明，脂肪酸及其衍生物对供试菌的抑制活性与其碳链长度、取代基种类、分子中双键的数目以及位置等因素有关．不同菌株因其细胞膜组成不同，抑菌规律也存在一定的差异．脂肪酸甲酯、乙酯对供试菌抑制效果较差，中链脂肪酸（Ｃ８～１２）以及多不饱和脂肪酸及其甘油单酯在０．０１５ｍｏｌ／Ｌ高浓度条件下可明显抑制供试菌生长繁殖．短链脂肪酸抑菌效果较为突出，但其抑菌性强弱是由脂肪酸本身结构还是培养基ｐＨ降低所引起的还有待进一步研究．在食品工业中，具有抑菌作用的脂肪酸及其部分衍生物已经作为安全高效的天然食品防腐剂应用于食品加工以及食品保藏中，如我国食品添加剂卫生标准已允许使用丙酸及其钠、钙盐，山梨酸及其钾盐，乙酸钠，单、双脂肪酸甘油酯，蔗糖脂肪酸酯等，但仍可根据脂肪酸及其衍生物抑菌活性与结构之间的关系，开发出更加安全、高效、广谱的新型食品防腐剂．Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：［１］　冯凤琴，叶立扬．食品化学．北京：化学工业出版社，２００６：１２０‐１５０． ＦｅｎｇＦＱ，ＹｅＬＹ．ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ．Ｂｅｉｊｉｎｇ：ＣｈｅｍｉｃａｌＩｎｄｕｓｔｒｙＰｒｅｓｓ，２００６：１２０‐１５０．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）［２］　ＶｒａｂｌｉｋＭ，ＰｒｕｓｉｋｏｖａＭ，ＳｎｅｊｄｒｌｏｖａＭ，ｅｔａｌ．Ｏｍｅｇａ‐３ｆａｔｔｙａｃｉｄｓａｎｄｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｄｉｓｅａｓｅｒｉｓｋ．ＰｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈ，２００９，５８（ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ１）：Ｓ１９‐Ｓ２６．［３］　ＲｉｖｅｌｌｓｅｓＡＡ，ＬｉｌｌｉＳ．Ｑｕａｌｉｔｙｏｆｄｉｅｔａｒｙｆａｔｔｙａｃｉｄｓ，ｉｎｓｕｌｉｎｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｅｓ．Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ＆Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ，２００３，５７（２）：８４‐８７．［４］　ＭｉｌｔｅＣＭ，ＳｉｎｎＮ，ＨｏｗｅＰＲ．Ｐｏｌｙｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓｔａｔｕｓｉｎａｔｔｅｎｔｉｏｎｄｅｆｉｃｉｔｈｙｐｅｒａｃｔｉｖｉｔｙｄｉｓｏｒｄｅｒ，ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ，ａｎｄＡｌｚｈｅｉｍｅｒ ｓｄｉｓｅａｓｅ：ｔｏｗａｒｄｓａｎｏｍｅｇａ‐３ｉｎｄｅｘｆｏｒｍｅｎｔａｌｈｅａｌｔｈ．ＮｕｔｒｉｔｉｏｎＲｅｖｉｅｗｓ，２００９，６７（１０）：５７３‐５９０．［５］　ＫａｂａｒａＪＪ，ＶｒａｂｌｅＲ，ＬｉｅｋｅｎｊｉｅＭＳＦ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｌｉｐｉｄｓ‐ｎａｔｕｒａｌａｎｄｓｙｎｔｈｅｔｉｃｆａｔｔｙ‐ａｃｉｄｓａｎｄｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ．Ｌｉｐｉｄｓ，１９７７，１２（９）：７５３‐７５９．［６］　Ｂｕ ｋｏｖáＬ，ＫｒｅｊˇＣíＪ，Ｊａｎｉ比Ｒ，ｅｔａｌ．Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｍｏｎｏａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌｓｏｎｇｒｏｗｔｈｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏｍｙｃｅｔｅｓｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｏｎｂｒｅａｄ．ＥｕｒｏｐｅａｎＪｏｕｒｎａｌＬｉｐｉｄＳｃｉｅｎｃｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１０，１１２（２）：１７３‐１７９．［７］　ＲａｉＭＫ，ＵｐａｄｙｈｙａｙａＳ．ＩｓｏｌａｔｉｏｎｏｆｆｕｎｇｉｆｒｏｍｌｏｃａｌｂｒｅａｄｏｆＣｈｈｉｎｄｗａｒａ．ＩｎｄｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＰａｔｈｏｌｏｇｙａｎｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９９０，３３（２）：１７９‐１８１．［８］　ＡｂａｂｏｕｃｈＬ，ＣｈａｉｂｉＡ，ＢｕｓｔａＦＦ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｂａｃｔｅｒｉａｌｓｐｏｒｅｇｒｏｗｔｈｂｙｆａｔｔｙａｃｉｄｓａｎｄｔｈｅｉｒｓａｌｔｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，１９９２，５５（１２）：９８０‐９８４．［９］　ＡｕｒｅｌｉＰ，ＣｏｓｔａｎｔｉｎｉＡ，ＺｏｌｅａＳ．ＡｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｓｏｍｅｐｌａｎｔｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｓａｇａｉｎｓｔＬｉｓｔｅｒｉａｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，１９９２，５５（１２）：３４４‐３４８．［１０］　ＪｕｖｅｎＢＪ，ＫａｎｎｅｒＪ，ＳｃｈｅｄＦ，ｅｔａｌ．Ｆａｃｔｏｒｓｔｈａｔｉｎｔｅｒａｃｔｗｉｔｈｔｈｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｏｎｏｆｔｈｙｍｅｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌａｎｄｉｔｓａｃｔｉｖｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｐｐｌｉｅｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９９４，７６（６）：６２６‐６３１．［１１］　ＫａｂａｒａＪＪ．Ｆａｔｔｙａｃｉｄｓａｎｄｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓａｓａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｇｅｎｔｓ：ａｒｅｖｉｅｗ．ＡＯＣＳＭｏｎｏｇｒａｐｈ，１９７８（５）：１‐１４．［１２］　ＫａｂａｒａＪＪ．Ｆｏｏｄ‐ｇｒａｄｅｃｈｅｍｉｃａｌｓｆｏｒｕｓｅｉｎｄｅｓｉｇｎｉｎｇｆｏｏｄｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅｓｙｓｔｅｍｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，１９８１，４４（８）：６３３‐６４７．［１３］　ＫａｒａｐｉｎａｒＭ，ＡｋｔｕｇＳＥ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｆｏｏｄｂｏｒｎｅｐａｔｈｏｇｅｎｓｂｙｔｈｙｍｏｌ，ｅｕｇｅｎｏｌ，ｍｅｎｔｈｏｌｅａｎｄａｎｅｔｈｏｌｅ．ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９８７，４（２）：１６１‐１６６．［１４］　ＫｉｍＪＭ，ＭａｒｓｈａｌｌＭＲ，ＣｏｒｎｅｌｌＪＡ，ｅｔａｌ．Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｃａｒｖａｃｒｏｌ，ｃｉｔｒａｌ，ａｎｄｇｅｒａｎｉｏｌａｇａｉｎｓｔＳａｌｍｏｎｅｌｌａｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍｉｎｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉｕｍａｎｄｏｎｆｉｓｈｃｕｂｅｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅ，１９９５，６０（６）：１３６４‐１３６８，１３７４．［１５］　ＫｉｍＪ，ＭａｒｓｈａｌｌＭＲ，ＷｅｉＣ．Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｓｏｍｅｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓａｇａｉｎｓｔｆｉｖｅｆｏｒｂｏｒｎｅｐａｔｈｏｇｅｎｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌａｎｄＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９５，４３（１１）：２８３９‐２８４５．［１６］　ＢｌａｉｓｅＯ，ＲｏｎａｌｄＥ．Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｓｅｌｅｃｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓａｎｄｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｓａｇａｉｎｓｔｓｉｘｍｅａｔｓｐｏｉｌａｇｅｏｒｇａｎｉｓｍｓ．ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９９７，３７（２‐３）：１５５‐１６２．［１７］　ＡｎｄｒｅｗＰ，ＤｅｓｂｏｉｓＶＪ．Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｆｒｅｅｆａｔｔｙａｃｉｄｓ：ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ，ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆａｃｔｉｏｎａｎｄｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌｐｏｔｅｎｔｉａｌ．ＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙａｎｄＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１０，８５（６）：１６２９‐１６４２．０６１第３９卷　脂肪酸及其衍生物的抑菌活性作者：张希， 杨明， 宋飞， 张辉*， 冯凤琴*作者单位：浙江大学生物系统工程与食品科学学院 ,杭州 310058刊名：浙江大学学报(农业与生命科学版)英文刊名：Journal of Zhejiang University(Agriculture & Life Sciences)年，卷(期)：2013(2)本文链接：/Periodical_zjdxxb-nyysm201302007.aspx。