实验四 血涂片形态检查

实验四血涂片形态检查

Examination of Blood Smear

实验原理

血细胞经涂片、固定和染色后，可体现出不同发育阶段及病理生理改变的白细胞，在细胞体积、细胞质成分及酸碱性、细胞核染色质含量及空间排列状态的差异，借助显微镜对上述差异进行总体分析而将各种白细胞区别开来。

成熟红细胞不含细胞核，细胞质的主要成分是血红蛋白，略呈碱性。制成血涂片经瑞-吉染色后，血红蛋白与染液中呈酸性的伊红结合而显桔红色或淡粉红色。同时也展现出红细胞的各种形态学特点。

试剂器材

1．试剂香柏油、二甲苯或乙醇—乙醚清洁液

2．器材经瑞氏染色的血涂片、拭镜纸、目镜测微尺。

操作步骤

1．肉眼观察血涂片的外观和染色情况，正面向上置于显微镜载物台上。

2．镜检

（1）调试好显微镜。

（2）低倍镜观察：采用10×目镜观察血涂片的质量，选择细胞分布均匀、染色良好、细胞排列不拥挤（即红细胞单个分散不重叠）的区域（一般在血涂片的体尾交界处），准备进一步检测。

（3）高倍镜观察：转换40×目镜，整体观察血涂片细胞着色，有无特殊细胞。

（4）油镜观察：在选定的观察区域，滴加香柏油1滴，转换油镜，仔细观察白细胞的形态结构，红细胞的大小、形态是否正常，细胞内有无内容物，以及血红蛋白的充盈度和着色是否正常。同时作好记录。

2．结果统计与报告白细胞分类计数百分比报，对异常形态白细胞描述；对所见大小、形态异常的红细胞及有核红细胞按百分比报告；红细胞内出现异常结构及血红蛋白充盈度异常和着色异常者按有或无报告。

注意事项

应用低倍镜浏览全片，特别是血膜的两侧和尾部，以防异常成分漏检。

参考范围

一、镜下所见正常白细胞形态：

1．中性粒细胞成熟的中性粒细胞胞体呈圆形，直径10µm ~15µm，细胞核呈分叶和单个杆状两种形态。核染色质疏密不匀，部分聚集成块状，DNA和组蛋白分别被美蓝和伊红着色染成深紫红色。细胞质内因充满大量细腻均匀的紫红色中性颗粒，染色后呈均一的呈粉红色。一般以核径最窄处小于最宽处1/3者，视为分叶核；核径最窄处大于最宽处1/3即为杆状核。中性杆状核粒细胞核形多样，胞核细长，弯曲，可呈C形、S形、V形或不规则形。中性分叶核粒细胞细胞核分2叶~5叶，甚至5叶以上，叶间以核丝或核桥相连。

2．嗜酸性粒细胞细胞体呈圆形，直径约13µm ~15µm，略大于中性粒细胞。细胞核多分为两叶，中间以细丝相连呈“眼镜”状，偶见分为3叶~4叶者。细胞核染色质粗糙，染成紫红色。胞质中充满粗大、均匀的桔红色嗜酸性颗粒，颗粒富有立体感，排列整齐、紧密。

3．嗜碱性粒细胞细胞体呈圆形，直径约10µm ~12µm，略小于中性粒细

胞。细胞核着色较浅，呈淡红色，分叶不明显，形态不规则。胞质较少，含有少量粗大的紫黑色嗜碱性颗粒，颗粒大小不均、排列不整齐，常覆盖于细胞核上而使细胞核外形及染色质结构不易观察。

4．单核细胞为周围血中最大的白细胞。胞体呈圆形或不规则形，直径约15µm ~25µm。细胞核大且不规则，为肾形、马蹄形、蚕蛹状或不规则形，扭曲折叠；核染色质纤细、疏松如网状，染淡紫红色。细胞质丰富，染淡蓝或灰蓝色，半透明，偶可出现空泡。部分细胞含有弥散分布、数量不等的嗜天青颗粒，颗粒呈紫红色、细小灰尘样。

5．淋巴细胞胞体呈圆形或椭圆形，小淋巴细胞直径约6µm ~10µm，大淋巴细胞直径约10µm ~15µm。细胞核外形规则，呈圆形或椭圆形，偶见凹陷，多偏向一侧。核染色质呈深紫红色、板块状排列。核膜较厚，偶见核仁。小淋巴细胞胞质很少，有的仅在核的一侧出现一线天蓝或深蓝色胞质，甚至完全不见，一般无颗粒；大淋巴细胞胞质较小淋巴细胞丰富，呈透明蓝色，常有少量粗大、稀疏、大小不等的紫红色嗜天青颗粒。

二、正常红细胞呈双凹圆盘形，细胞大小均一，平均直径7.2µm（6.7µm～

7.7µm）；油镜下，瑞氏染色红细胞为淡粉红色，血红蛋白充盈良好，有过渡平滑的向心性淡染，中央部位为生理性淡染区，其大小约为直径的1/3；细胞内无异常结构及细胞核；无寄生虫。高倍镜下所有红细胞的颜色趋于一致。

临床意义

一、异常白细胞形态：

1．中性粒细胞的毒性变化

（1）大小不均：中性粒细胞体积大小悬殊。

（2）中毒颗粒：中毒颗粒常出现在中毒性粒细胞胞浆内，较中性粒细胞颗粒粗大，大小不等，分布不均，染成兰紫甚至呈黑色，常与空泡变性并存出现（3）空泡形成：中性粒细胞胞质中出现一个或数个空泡。概因细胞质发生脂肪变性，被染液中的甲醇溶解所致

（4）杜勒小体（Döhle bodies）：是中性粒细胞胞质因毒性变化而保留的局部嗜碱性区域。呈圆形、梨形或云雾状，天蓝色或灰蓝色，直径1µm ~2µm。

（5）核变性：可有核固缩、核溶解和核碎裂等现象。细胞核发生固缩时核染色质凝集成深紫色粗大凝块。细胞核核溶解时，则胞核膨胀增大，常伴有核膜碎碎，核染色质结构松散或模糊，着色较浅。

上述异常多见于严重感染及中毒，密切观察白细胞数量及中性粒细胞的毒性变化对判断感染的程度、病人抵抗能力和判断预后有重要的临床价值。

2．中性粒细胞的其它异常变化

（1）巨多分叶核中性粒细胞成熟中性粒细胞的体积增大，直径约16µm ~25µm，核分叶常在5叶以上，甚至在10叶以上，核染色质疏松。多见于巨幼细胞贫血。

（2）棒状小体（Auer bodies）在Wright或Giemsa染色的血涂片中，胞质中出现紫红色的细杆状物，长约1µm ~6µm，一条或数条不定。不但可出现于中性粒细胞，还可出现于单核细胞。主要见于急性非淋巴细胞白血病。

（3）其它异常粒细胞多是与遗传有关的异常形态变化。如①Pelger-Huët 畸形：与成熟中性粒细胞核分叶能力减退有关，细胞核为杆状或分成孤立的两个叶，肾形或哑铃形。为常染色体显性遗传，也可继发于某些严重感染、白血病、骨髓增生异常综合征、肿瘤转移和某些药物（水仙胺、磺胺甲基异恶唑等）治疗