30外标法测定乙醇中的微量水分
外标法测定乙醇含量（精）
外标法测定乙醇含量（精）外标法测定乙醇含量一、实验目的1．熟悉气相色谱仪的操作步骤2．学习外标法定量的基本原理和测定方法二、基本原理用欲测组分的纯物质加稀释剂（对液体试样用溶剂稀释，气体试样用载气或空气稀释）配制成不同质量分数的标准溶液，取固定量标准溶液进样分析，从所得色谱图上测得相应信号（峰面积或峰高），然后绘制响应信号（纵坐标）对质量分数（横坐标）标准曲线。
分析时，取和绘制的标准曲线时同样量的试样（固定量进样），测得该试样的响应信号，由标准曲线即可查出其质量分数。
本实验以未知含量的乙醇样品为待测物，利用外标法，测定样品中乙醇的质量分数。
三、实验仪器与试剂1.仪器： GC7700 气相色谱仪、TCD检测器 2）微量进样器10μl 3）色谱柱试剂：2.药品乙醇（分析纯），去离子水载气：高纯氮四、实验步骤1．标准溶液的配制：配制标准系列（50–500ppb）2．GC7700（TCD）的操作步骤：（1）打开载气总阀门，至0.4 MPa，保持半小时。
（2）打开设备电源，TCD设为“开”，设置各路温度参数，TCD 电流为“0”。
3）开启T2000工作站，观测设备输出信号。
（3）15分钟后，气路稳定，确定TCD温度高于100o（4）C并初步稳定,根据分析条件设TCD电流。
（5）观测TCD基线，调至可视范围，基本稳定后，调零（0-5mv）. 6）进样分析，如出倒峰，则可通过修改TCD极性校正。
（6）进样结束后，进行降温设置，或调用关闭设置，关闭TCD 电流，各温度设置降到80oC 以下，关电源，关载气。
3．标准曲线的绘制：用微量进样器向色谱柱中进1号、2号、3号、4号、5号标准溶液各1μl，得到各标准溶液的色谱图，进行数据处理，绘制出标准曲线。
4．未知样的测定：用微量进样器吸取与标准溶液相同体积的待测样，进样，得到未知样的色谱图，套用标准曲线，从标准曲线上查得其含量。
5．注意事项：(1) 开机时必须先通载气，再开色谱仪（升温）；关机时，先关色谱仪（降温），后关载气。
乙醇检验操作规程
1目的：为乙醇的检验建立操作依据。
2适用范围：乙醇的检验。
3相关责任：化验员、质监员、化验室主任。
4内容：5.1 性状：；微有特臭，味灼烈；易挥发，易燃烧，燃烧时显淡蓝色火焰；热至约78℃即沸腾。
本品与水、甘油、氯仿或乙醚能任意混溶。
5.2 相对密度5.2.1 仪器与设备：韦氏比重称、温度计、电热恒温水浴锅、分析天平、5.2.2 操作方法:取本品适量，照相对密度测定法（相对密度测定法检验操作规程文件编号：ZL/SOP/TZ/00500）韦氏比重秤法测定。
5.2.3 结果判定：若本品的相对密度不大于0.8129[相当于含C2H6O不少于95.0%（ml/ml）]，即可判定为符合规定；否则，判定为不符合规定。
5.3 鉴别：5.3.1 试剂与溶液：氢氧化钠试液、碘试液5.3.2 仪器与设备：吸量管、试管5.3.3 操作方法：取本品1滴，加水5ml与氢氧化钠试液1ml后，缓缓滴加碘试液2ml，观察。
5.3.4 结果判定：若即发生碘仿的臭气，并生成黄色沉淀即可判定为符合规定；否则，判定为不符合规定。
5.4 检查5.4.1 酸度试剂与溶液：酚酞指示液、氢氧化钠液（0.02mol/L）仪器与设备：吸量管、锥形烧瓶操作方法：取本品10ml，加水25ml及酚酞指示液2滴，摇匀，滴加氢氧化钠滴定液（0.02mol/L）至显淡红色，再加本品25ml摇匀，加氢氧化钠滴定液（0.02mol/L）0.50ml，观察。
结果判定：若显淡红色，即可判定为符合规定；否则，判定为不符合规定。
5.4.2 水不溶性物质仪器与设备：试管操作方法：取本品，与同体积的水混合后，观察；在10℃放置30分钟后，观察。
结果判定：若溶液澄清，在10℃放置30分钟，溶液仍澄清，即可判定为符合规定；否则，判定为不符合规定。
5.4.3 杂醇油试剂与溶液：甘油仪器与设备：试管、吸量管、无臭滤纸操作方法：取本品10ml，加水5ml与甘油1ml，摇匀后，分次滴加在无臭的滤纸上，使乙醇自然挥散，观察。
乙醇中少量水份的测定
乙醇中少量水份的测定—外标法一、实验目的1、了解外标法定量的原理和方法2、能够熟练掌握进样技术3、掌握气相色谱仪的使用及维护二、实验原理外标法（又称定量进样——标准曲线法）所谓外标法就是应用欲测组分的纯物质来制作标准曲线，这与在分光光度分析中的标准曲线法是相同的，此时用欲测组分的纯物质加稀释剂配成不同质量分数的标准溶液，取固定量标准溶液进行分析，从所得色谱图上测出相应信号峰面积（或噪声），然后绘制相应信号（纵坐标）对质量分数（横坐标）的标准曲线。
分析试样时，取和制作标准曲线时同样量的试样（固定进样量）测得该试样的响应信号，由标准曲线即可查出其质量分数。
三、实验仪器和试剂仪器：气相色谱仪色谱工作站色谱柱10µl微量注射器氢气钢瓶试剂: 乙醇水溶液标准样品（1、 2、）乙醇水溶液样品（1、 2、）丙酮四、实验步骤1、打开载气（H2）钢瓶总阀，通载气10min后，打开电源开关。
2、设置柱温为120℃、气化温度为150℃和检测温度为150℃，启动加热。
3、待恒温后，设定桥流及衰减。
4、打开工作站，选择通道。
用仪器面板上的TCD调零电位器将基线调至约0.5mv处，让色谱仪走基线，待基线稳定。
5、用丙酮溶液润洗微量注射器6-8次，在用标样1润洗微量注射器6-8次6、用微量注射器，准确吸取5μL进样，启动色谱工作站采集数据，记录谱图。
7、按5、 6、步骤进标样2，采集数据。
8、按上述方法分别进试样1和试样2，采集数据。
9、实训完毕后先设置桥电流数值为0.0。
10、设置气化室温度、柱温、检测室温度在室温以上约10℃。
11、待温度达到设定值时关闭气相色谱仪电源开关。
12、关闭载气钢瓶和减压阀。
五、实验数据处理1、通过气相色谱工作站记录样品和试样的峰面积和峰高根据标样1和标样2的数据绘制以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标的一次函数图像。
2、已经得出试样1、试样2、的峰面积，通过一次函数图像得出试样的浓度。
六、气相色谱仪的使用及维护（一）气相色谱仪的使用程序1、首先检查仪器各部分连接是否正常，检查各稳压阀，针形阀及减压表旋杆是否在关闭位置。
气相色谱法测定无水乙醇中的微量水
气相色谱法测定无水乙醇中的微量水药学院13 级临床药学周谦2016/1/1一、实验目的1．了解气相色谱仪的一般使用方法。
2．掌握气相色谱仪测定样品中微量水的测定方法。
3．掌握内标法的原理。
4．掌握热导检测器的工作原理。
二、实验原理1．热导检测器是气相色谱仪最广泛使用的一种通用型检测器，它结构简单，稳定性好，灵敏度适宜，线性范围宽，对许多物质均有响应，而且不破坏样品，多用于常量分析。
2．当载气中含有测定组分时进入热导池检测器时，由于测定组分与载气热导率的不同，破坏了原有热平衡状态，使热导池热丝（铼钨丝）温度发生变化并通过惠斯登电桥测量出来，所得电信号的大小与组分在载气中的浓度成正比，经放大后，记录下来即可得到色谱图。
3．内标法：内标法是选择样品中不含有的且已知质量的适宜物质作内标物，将其加入待测样品溶液中，以待测组分和内标物的峰高比或峰面积比作为定量参数求算样品含量的方法。
三、仪器和试剂1．气相色谱仪及色谱工作站（配热导池检测器）及10?l 微量进样针等。
2.色谱柱：GDX203气相色谱柱，2m ,载气：高纯氢气（99.999% ）。
3.试剂与药品：无水甲醇（内标物）及待检无水乙醇等。
四、实验步骤（一）供试品溶液配制准确量取100ml 待检的无水乙醇，用减重法加入约0.25g 无水甲醇，精密称定，摇匀。
进样6~10?l。
（二）色谱条件色谱柱：GDX203,2m 玻璃柱；载气：氢气，流速：40~50ml ；柱温120 C,汽化室温 度150C ，检测器温度：140C .（三）测定1.打开载气（高纯氢气）阀门，调节减压器指示约为0.3MP, 然后用两个稳流阀进行并联双路的调节，用皂膜流量计调节流量为 40~50ml/min 。
2. 打开仪器电源，按色谱条件设定柱温箱温度、热导池温度、 汽化室温度及过热保护温度（200 C ）。
3. 调节数码电阻，设置桥温为180C ，通入载气5min 后，打开 热导电源开始升温。
气相色谱法测定无水乙醇中的微量水
气相色谱法测定无水乙醇中的微量水药学院 13级临床药学周谦 2016/1/1 一、实验目的1．了解气相色谱仪的一般使用方法。
2．掌握气相色谱仪测定样品中微量水的测定方法。
3．掌握内标法的原理。
4．掌握热导检测器的工作原理。
二、实验原理1．热导检测器是气相色谱仪最广泛使用的一种通用型检测器，它结构简单，稳定性好，灵敏度适宜，线性范围宽，对许多物质均有响应，而且不破坏样品，多用于常量分析。
2．当载气中含有测定组分时进入热导池检测器时，由于测定组分与载气热导率的不同，破坏了原有热平衡状态，使热导池热丝（铼钨丝）温度发生变化并通过惠斯登电桥测量出来，所得电信号的大小与组分在载气中的浓度成正比，经放大后，记录下来即可得到色谱图。
3．内标法：内标法是选择样品中不含有的且已知质量的适宜物质作内标物，将其加入待测样品溶液中，以待测组分和内标物的峰高比或峰面积比作为定量参数求算样品含量的方法。
三、仪器和试剂1．气相色谱仪及色谱工作站（配热导池检测器）及10ɥl微量进样针等。
2．色谱柱：GDX203气相色谱柱，2m，载气：高纯氢气（99.999%）。
3．试剂与药品：无水甲醇（内标物）及待检无水乙醇等。
四、实验步骤（一）供试品溶液配制准确量取100ml待检的无水乙醇，用减重法加入约0.25g无水甲醇，精密称定，摇匀。
进样6~10ɥl。
（二）色谱条件色谱柱：GDX203,2m玻璃柱；载气：氢气，流速：40~50ml；柱温120℃，汽化室温度150℃，检测器温度：140℃.（三）测定1．打开载气（高纯氢气）阀门，调节减压器指示约为0.3MP ，然后用两个稳流阀进行并联双路的调节，用皂膜流量计调节流量为40~50ml/min 。
2．打开仪器电源，按色谱条件设定柱温箱温度、热导池温度、汽化室温度及过热保护温度（200℃）。
3．调节数码电阻，设置桥温为180℃，通入载气5min 后，打开热导电源开始升温。
4．待温度（检测器、柱箱及气化室）都已达到要求后（需20~30min ）调节电位器零点。
乙醇含量测定操作规程
目的：建立乙醇含量测定操作标准操作程序。
范围：生产部门使用的乙醇的在线测定及检验室对乙醇浓度的测定。
责任：检验员、QC主管对本SOP实施负责。
规程：1. 比重测量法1.1. 仪器与用具1.1.1. 乙醇比重计一套；1.1.2. 1000ml量桶一只；1.1.3. 乙醇浓度与温度变化表。
1.2. 适用范围：生产部门使用的乙醇的在线测定。
1.3. 方法1.3.1. 初估所测乙醇的大致浓度，选取相应范围的乙醇比重计。
1.3.2. 量取约1000ml乙醇，置量桶中。
1.3.3. 将所选的乙醇比重计放入量桶中，以乙醇比重计能浮于量桶中部，不得沉达底部或浮于液面，否则需更换合适范围的乙醇比重计。
1.3.4. 从水平方向读取乙醇比重计处于液面处的数值。
1.3.5. 查乙醇浓度与温度变化数据表，根据室温下所测的浓度数值修定为20℃的乙醇浓度（乙醇浓度随温度变化的大致规律：20℃的乙醇浓度，当温度上升或降低10℃，乙醇浓度相应升高或降低3.5~5度）。
2. 蒸馏法2.1. 仪器与用具2.1.1. 500ml蒸馏瓶一个；2.1.2. 50cm直形冷凝管一只2.1.3. 100ml容量瓶一只2.1.4. 蝶形夹三支2.2. 适用范围检验室对乙醇浓度的测定。
2.3. 方法本法系用蒸馏后相对密度的方法测定各种制剂中在20℃时乙醇的含量（ml/ml）。
按照制剂的性质不同，分为下列三种方法。
2.3.1. 第一法适用于测定多数流浸膏、酊剂及甘油中的乙醇含量，根据制剂中含乙醇量的不同，可分为两种情况。
2.3.1.1. 当供试制剂中含乙醇量低于30％者，取供试品，调节温度至20℃，精密量取25ml，置150~200ml蒸馏瓶中，加水约25ml，加玻璃珠数粒或沸石等物质，连接冷凝管，直火加热，缓缓蒸馏，速度以馏出液一滴接一滴为准。
馏出液导入25ml量瓶中，待馏出液约达23ml时，停止蒸馏。
将馏出液温度调节至20℃，加20℃的水至刻度，摇匀，在20℃时按《相对密度测定法》测定相对密度。
乙醇中微量水分的测定
内标法
定义：是将一定量选定的标准物（称内标物s）加入到
一定量试样中，混合均匀后，在一定操作条件下注入 色谱仪，待出峰后分别测量组分i和内标物s的峰面积 （或峰高），按下式计算组分i的含量。 计算公式 以内标物为基准，即fs’=1.0，有
或
内标物的选择原则
内标物是样品中不存在的纯物质。 内标物的性质应与待测组分性质相近，以使内标物的
色谱峰的色谱峰与待测组分色谱峰靠近并与之完全分 离。 内标物与样品应完全互溶，但不能发生化学反应。 内标物的加入量应接近待测组分的含量，以使两者色 谱峰大小相近。
谢谢观看！
操作步骤
3、打开主机电源开关 4、设定温度 色谱柱温度为90 oC、进样器温度为120 oC、检测器温度为120 oC。 5、调节桥电流 按下热导电源开关，指示灯即亮，调节电流为150mA。 6、选择衰减倍数 7、色谱数据处理机的准备 （1）用导线连接处理机信号输入端与色谱仪信号输出端。 （2）将处理机后板数据保护开关置“保持”位置。 （3）打开处理机电源开关，预热10min。 （4）按下记录键，观察基线变化。当基线稳定后，再按一下记录键，即停止记录。 （5）按下输入电平键，打印色谱仪的零漂，其数值在 100以内即可进样。否则用 调零旋钮调节。 （6）斜率测试（70） （6）列表—峰宽（条件检测，打印默认条件） （7）选择文件号 （8）设定分析日期及时间 （9）设定定量方法（43，内标法）
实验方法
采用气相色谱法测量乙醇中水的含量
采用内标法准确测定操作条件：
操作条件： （1）色谱柱温度： 90 oC （2）气化温度： 120 oC （3）检测温度：120 oC
乙醇中微量水分的测定解析
实验方法
采用气相色谱法测量乙醇中水的含量 采用内标法准确测定操作条件： 操作条件： ✓ （1）色谱柱温度： 90 oC ✓ （2）气化温度： 120 oC ✓ （3）检测温度：120 oC ✓ （4）载气（H2）的流速：30mL/min ✓ （6）桥电流：150mA
实验原理
用气相色谱法测定有机物中的微量水分时，常选用聚 合物固定相，如GDX系列或有机401~408系列。这 类多孔高分子微球的表面无亲水基团，对氢键型化合 物如水、醇等的亲合力很弱，一般按分子量大小顺序 出峰。水先出峰，有机物主峰在后，对测定水峰无干 扰。
调零旋钮调节。 （6）斜率测试（70） （6）列表—峰宽（条件检测，打印默认条件） （7）选择文件号 （8）设定分析日期及时间 （9）设定定量方法（43，内标法）
内标法
定义：是将一定量选定的标准物（称内标物s）加入到 一定量试样中，混合均匀后，在一定操作条件下注入 色谱仪，待出峰后分别测量组分i和内标物s的峰面积 （或峰高），按下式计算组分i的含量。
乙醇中微量水分的测定
质量标准
无水乙醇国家标准 GB/T678-2008 乙醇含量： 优级=99.8 分析纯=99.7 化学纯=99.5
密度(20C): 0.789-0.791 0.789-0.791 0789-0.791 蒸发残留物： 0.0005% 0.001 0.001 水分： 0.2% 0.3% 0.5% 酸度（H+/mmol/100gr.)0.02 0.04 0.1 碱度（OH-/mmol/100gr.)0.005 0.01 0.03
皂膜上升到10mL或100mL时，停止秒表，计算每分钟流过载气的体积，应 为30mL/min。 （6）调节载气流量 载气流量不是30mL/min时，必须调节载气压力调节阀，改变压力，以同样 的方法重新测定载气流量，直至其流量为30mL/min。 此时载气压力调节阀不可再动，记录其压力值，作为以后调节气路流量的参 考。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
外标法
标准曲线法也称外标法或直接比较法，它与可见分光光度法、原子 吸收分光光度法中所学习过“标准曲线法”完全类似。
外标工作曲线的绘制
➢ 用标准样品配制成不同浓度的标准系列，在与待测组分相同的色 谱条件下，等体积准确进样，测量各峰的峰面积或峰高，用峰面积 或峰高对样品浓度绘制标准曲线，此标准曲线应通过原点。 ➢若标准曲线不通过原点，则说明存在系统误差。 ➢标准曲线的斜率即为绝对校正因子 问题：能否配制相同浓度的标样，以不同体积进 样，绘制A（h）～V曲线？
外标法乙醇中微量水份
水饱和苯溶液的配制
试样的测定
➢ 注意：配制完毕的溶液需测量其 ➢在测定样品中的组分含量时，
相应温度，为什么？ 外标工作曲线的绘制
➢ 仪器开机，设置参数，调试。 ➢ 待仪器调试至基线平直后，进样 ➢ 绘制h～V工作曲线。
要用与绘制标准曲线完全相同 的色谱条件作出色谱图，测量 色谱峰面积或峰高，然后根据 峰面积和峰高在标准曲线上直 接查出注入色谱柱中样品组分 的浓度或相应体积，从而计算
➢ 每次样品分析的色谱条件很难完全相同，因此容易出现较大误差。 ➢ 标准工作曲线绘制时，一般使用欲测组分的标准样品，而实际样品的组 成却千差万别，因此必将给测量带来一定的误差。
外标法操作注意事项
➢ 进样量要准确，进样速度要快 ➢ 标准溶液浓度配制要准确 ➢ 色谱操作条件要 外标工作曲线的绘制与试样的测定 ➢ 外标法的特点
复习
➢标准加入法的计算公式 ➢标准加入法的测定过程 ➢标准曲线法
课程引入
在可见分光光度法、原子吸收分光光度法中我们大家都学习过 “标准曲线法”的相应知识与技能，我们先请一位同学起来简 述一下其相应的测定过程。
问题：能否将这种定量方法应用于气相色谱分析？比如测定乙 醇中的微量水份。 ➢ 提示：可以峰面积或峰高对组分浓度或体积绘制标准曲线。
问题与讨论
问题1：气相色谱分析法“安全问题”讨论。 ➢ 要点：一是气路，二是电路，三是化学试剂。
问题：可以用外标法测定丙酮试样中微量水份的含量吗？如果 可以，请写出相应实验方案。 ➢ 回答：可以。方法同乙醇中水份的测定。
问题：可以用外标法测定甲苯试样中甲苯的含量 吗？如果可以，请写出相应实验方案。 ➢回答：可以。方法同乙醇中水份的测定。
出样品中组分的浓度。
外标法乙醇中微量水份
乙醇中微量水份的测定 ➢ 在完全一致的操作条件下，取1.0µL无水乙醇试样进样，分析结 束后，打印出色谱图和分析结果。重复进样两次。
计算公式
w水＝
m水 m
100%
SVx wS 乙醇 V0
100%
外标法的特点与应用
外标法的特点 ➢ 因此特别适合于大量样品的分析。
单元技能训练
外标法测定乙醇中的微量水分
课程任务
职业关键能力 ：培养学生提取信息的能力；工作中发现问题、分 析问题、解决问题的能力;促类旁通的能力；
知识目标 ：掌握用外标法进行定量分析的方法与计算。 专门技能 ：熟练掌握TCD检测器的使用方法与操作注意事项；水
饱和苯溶液的配制；外标工作曲线的测定与绘制；乙醇中微量水分 的测定 。 素质目标 ：培养学生组织开展工作的能力和协调能力；培养学生 的安全意识。