石河子大学烟草浸泡液对大蒜根尖细胞微核的诱变效应
烟草浸提液对蚕豆根尖的遗传损伤
１ 材 料和 方法 １１ 材 料 ．
香烟 （ 雪莲牌） ，蚕豆 ，取 自 石河子大学生科院实验室 ，数量若干。
１ 方 法 ． ２
１ ． 烟 草浸 提液 的制 备 ．１ ２ 取 ６只烧 杯 ，各 盛 ｌ０ 蒸 馏 水 ，分 别 加入 １ 、２支 、３支 、４支 、５支 、０支 香 烟浸 泡 ２天 ，分 别 Ｏｍｌ 支 制 成 Ａ、Ｂ、ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ （ 照组 ） 同浓度 香 烟浸 出液 ，备用 。 对
［ 关键词】 烟草浸提液 ；微核 ；蚕豆
【 图分 类 号 】 ９ — ３ 中 Ｑ ４ ３ 【 献标识码】 文 Ａ 【 章 编 号 】 Ｏ ８ １８ （ｏ ２ ３ ０ ８ — ４ 文 ｌＯ — ７ ｘ２ １） — ０ １ ０ ｏ
蚕＿ Ｖｉａａａ 一种 较好 的细胞 遗传 学研 究材 料 ，染 色体数 目少 ，根 尖 细胞 含有 较 多 的分裂 相 ，在 实 ￣（ ｃ ｂ） ｉｆ 是
李桂 芳 ，吴 学进 ，黄先 忠 ，张婷婷
（ 石河 子 ： 生命 科学 学 院 ，新 疆 石河子 大学
［ 摘
８２０ ） ３０ ３
要】 用不同浓度的烟草浸提液对 蚕豆根尖 进行常温处理 ，结果 对蚕豆根尖 细胞造成不 同程度 的 利
遗传损伤 ，而且根尖细胞微核率与烟草浸提 液浓度成正相关 。
１ ５
２０ ２８
１ ５
２ ０ ２８
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２３ 烟草 浸提 液 对蚕 豆根 尖微 核率 （ ２ ． 图 ）
３ ０ ２ ５ ２ ０
基 １： ５ 挺 １ ０
ａ
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香烟毒性对蚕豆根尖细胞微核的影响
香烟毒性对蚕豆根尖细胞微核的影响11生本 11112314147前言：中国是世界上最大的烟草生产和消费国，据统计，目前中国约有3.5亿烟民，并且仍然以每年300万人的速度激增，初始吸烟年龄趋于低龄化，每年将近有百万人死于由吸烟引起的疾病。
[1]香烟中含有害物质有3000多种，致癌物质30余种，比如我们所熟知的尼古丁和焦油，香烟毒性能很大程度上促成细胞癌变，诱发癌症的产生，尤其是肺癌产生与吸烟的关系十分密切[2],吸烟时间越长，次数越多，开始吸烟的年龄越小，其毒性对人体的危害越大,有研究表明吸烟者比不吸烟者的患肺癌的几率高7-20倍[3-4]。
目前国内对香烟毒性的研究较少，主要研究方向为快速检测方法[5-6]和体外细胞毒试验（中性红法）[7]来检测香烟毒性。
而尚未发现从毒性使细胞产生微核的角度对香烟对其研究。
所以笔者试图从不同浓度的香烟浸出液对微核产生数目的影响这一角度进行实验，进一步阐发香烟对人健康带来的严重危害，给世人起到警示作用。
进行该实验需要注意以下几个问题：1、香烟中主要有害物质及其毒性的查明；2、香烟浸出的时间的掌控；3、香烟浸出液浓度梯度的设定；4、学习培养蚕豆的方法；5、掌握观察微核的方法。
实验材料：1、受体材料：蚕豆。
2、诱导材料：市售红金龙牌香烟（市场价3元）。
3、试剂：固定液，解离液，95%酒精，85%酒精，75%酒精，70%酒精，醋酸洋红染液，蒸馏水。
4、器具：烧杯，培养皿，纱布，显微镜，恒温培养箱，计数器。
方案设计：对照组：用蒸馏水培养4小时的蚕豆根尖。
实验组：用低毒组，中毒组，高毒组的香烟浸出液培养的4小时的蚕豆根尖。
具体实验步骤如下：1、制得香烟浸出液。
取3只锥形瓶，分别标记“低毒组”“中毒组”“高度组”，在里面依次放入1根，2根，3根香烟，再向其中倒入100ml蒸馏水，使有毒物质溶出，浸制时间大约为2小时，收集这三中不同浓度的香烟浸出液。
2、蚕豆根尖的制备和处理。
首先将蚕豆用蒸馏水浸泡24小时，使种皮松软后放入垫有白纱布的培养皿中，在上方也盖上2层湿纱布，置于25℃的恒温培养箱中培养，每天换蒸馏水1次，待根尖长至2-3cm时，即可用于实验。
遗传学-诱变物质的微核检测
采用叠氮化钠处理作为阳性对照，水作为阴性对照，其余四种分别用果粒橙果汁、爽肤水、花露水、洗发露自选，处理时间为24h，注意写好标记。
3.3
换用没有诱变剂的自来水恢复培养24h。
3.4
将各组大蒜根尖剪下，卡诺固定液中固定24小时，移至70%乙醇中4℃下保存。
3.
切取近根尖分生区的伸长区组织，1MHCl解离10min；水洗三次，每次1min；苯酚品红染色15-20min；压片观察；计算微核率。
5、
对于本次实验结果，实际上非常不可靠的。
（1）最后观测的样本容量过小。在实验操作中，我们忽视了样本容量的选择，每一组只制作了一个装片，导致样本容量过小。这样的结果是，阴性对照估计为1‰后，假使每张装片的微核数为1即为中度污染，微核数为2即为重度污染，这使得结果有很大的随机性。本着科学严谨的态度，每组必须做3个以上的装片以减少这种随机性导致的错误。
（2）可以换用其他评估标准。虽然我们设有阴性对照组，可以计算污染指数，判断诱导物质的诱变性，但是实际上由于取的样本量过少等原因没有在阴性对照观察到观察到微核，针对至观察了300多细胞的我们组来说，微核率定为1‰是不准确的。为此，我们直接参照微核率的标准划分污染等级（标准见引言），阳性对照中叠氮化钠的污染等级为中度污染，其他组低于10‰，为无污染。
已经证实，微核率的大小是和作用因子的剂量或辐射累积效应呈正相关。目前微核测试已经广泛应用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验的安全评价以及染色体遗传疾病和癌症前期诊断等各方面。
最常用方法是小鼠骨髓红细胞微核检测方法。
1.3
微核率是指一个视野中微核数与细胞数的比值。
人们常用微核率来反映环境中有害物质的污染程度，一般认为，微核率在10‰以下时无污染，为环境本底；10-18‰时，有轻度污染；18-30‰时，有中度污染；＞30‰，有重度污染。
大蒜对香烟诱发蚕豆根尖细胞微核的抑制作用
大蒜对香烟诱发蚕豆根尖细胞微核的抑制作用
张光谋;徐振平;杨保胜;孙璐;穆灵敏;丰慧根
【期刊名称】《新乡医学院学报》
【年(卷),期】2000(017)003
【摘要】目的探讨大蒜对香烟诱发蚕豆根尖细胞微核的抑制作用.方法利用蚕豆根尖微核技术,对不同浓度香烟烟雾水溶物诱发蚕豆根尖微核进行了研究,并进一步研究了大蒜对诱变剂的抗诱变作用.结果香烟烟雾水溶物(0.5～4支/100ml)能显著诱发蚕豆根尖微核的形成(P＜0.01),并呈明显的剂量效应;香烟烟雾水溶物加入大蒜蒜汁处理蚕豆根尖,微核率显著降低,与阳性组比较有显著差异(P＜0.01).结论大蒜蒜汁具有良好的抗香烟诱变能力.
【总页数】2页(P168-169)
【作者】张光谋;徐振平;杨保胜;孙璐;穆灵敏;丰慧根
【作者单位】新乡医学院细胞生物学教研室,河南,新乡,453003;新乡医学院细胞生物学教研室,河南,新乡,453003;新乡医学院细胞生物学教研室,河南,新乡,453003;新乡医学院细胞生物学教研室,河南,新乡,453003;新乡医学院细胞生物学教研室,河南,新乡,453003;新乡医学院细胞生物学教研室,河南,新乡,453003
【正文语种】中文
【中图分类】R319.33
【相关文献】
1.香烟烟雾水溶液诱导大蒜根尖细胞产生微核 [J], 肖星辉;李予霞;徐亮;王小奎;李文超;李佳馨;刘红玲
2.麦饭石浸液抑制白酒和香烟诱发蚕豆根尖细胞微核的研究 [J], 南晓光
3.香烟烟雾水溶物诱发蚕豆根尖细胞微核的研究 [J], 嵇庆
4.不同添加物质对香烟烟雾水溶物引起的蚕豆根尖细胞微核率的影响 [J], 嵇庆
5.麦饭石对香烟诱发蚕豆根尖细胞微核的抑制作用 [J], 南晓光
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烟丝对大蒜染色体微核的影响实验
烟丝对大蒜染色体微核的影响实验The final edition was revised on December 14th, 2020.实验十植物细胞的微核检测技术实验十植物细胞的微核检测技术一、原理：微核(micronuclei)简称MCN,是真核类生物细胞中的一种异常结构，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的。
在细胞间期，微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应有主核1/3以下。
微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样，也具合成DNA的能力。
一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的断片产生的，整条染色体或几条染色体也能形成微核。
这些断片或染色体在细胞分裂末期被两个子细胞核所排斥便形成第三个核块。
微核率的大小是和用药的剂量或辐射累积效应呈正相关，这一点和染色体畸变的情况一样。
所以许多人认为可用简易的间期微核计数来代替繁杂的中期畸变染色体计数。
由于大量新的化合物的合成，原子能应用，各种各样工业废物的排出，使人们很需要有一套高度灵敏，技术简单的测试系统来监视环境的变化。
只有真核类的测试系统更能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害，在这方面，微核测试是一种比较理想的方法。
目前国内外不少部门已把“微核测试用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、染色体遗传疾病及癌症前期诊断等各方面。
二、步骤：1、大蒜幼根的培养：提前3~5天进行培养，将大蒜瓣剥去外边膜质枯皮，下端可见许多微微凸起的根原体，将蒜瓣架在烧杯（大小与蒜瓣适宜）口上，杯中盛满清水，使蒜瓣的下部浸入水中，置温暖处，注意每天换水，经3~5天后，即可长出1-2cm的嫩根。
2、处理根尖：阳性检测采用M CrO3，M NaN3，M EMS，对照用自来水处理，处理时间24h。
3、恢复培养：处理后的根尖用自来水浸洗3次，每次2-3min，洗净后在水中恢复培养24h。
4、固定：用甲醛：冰醋酸（3：1）固定液固定24h后弃去固定液，或换入70％酒精中保存。
应用大蒜根尖微核技术进行有毒污染物环境监测
中图分类号 ： ５ ６ Ｘ ０
文献标识码 ： Ａ
Ｖ ｏＩ ．２３。 ｏ Ｎ ．３
Ｓ ｅｐ． ２０ ０６
应 用大蒜根尖微核技术进行有毒污染 物环境监测
袁 家辉
（ 阳市颍泉 区环境监理监测站 ， 阜 安徽 阜阳 ２ ６０ ） ３０ ０ 摘 要 ： 本文 对不同浓 度的有毒污染物 Ｃ ”、 、Ａ 、 一 发大蒜根尖微核效应的研究． ｒ Ｈｇ Ｃ Ｆ 诱 试验结果表 明微核率 随
文章编号 ：０ ４４２ （０ ６ ０—０ ６０ １０ —３ ９ ２０ ）３０ ５— ３
１ 前言
壤、 水中 ． 据报导 ， 在含 Ｆ到 几个 或 十 几个 Ｐ ｍ 浓 人 ’ Ｐ
度 的环境 里生 活 、 存就会 出现慢性 氟 中毒 现 象． 生 若 大 蒜是 一 种 分 布 较 广 的植 物 ， 验 取 材极 为 容 通 过饮 水 和 呼吸摄 取 大 量 的氟 ， 会 出现斑 釉齿 和 试 就 易 ， 吸收 环境 中 的致突 变物 ， 它 诱发 其 细胞 染色体 发 骨硬 化病 等氟 中毒症 状［． ４ ］ 生损 伤 断裂 、 出现微 核 ［． 文用 大蒜 微核 技 术对 微 １本 ］ 依据 国家地表 水 中含 Ｆ 限值 １０ｍｇ Ｌ 设 计在 一 ． ／ ． 量 的 Ｃ 抖、 ｒ 、 抖 、 一 有 毒 有 害 污 染 进行 监 限 值浓 度 的 上下 两个 量 级 之 间 的三 个 实验 组 ， 大 ｄ Ｃ ¨ Ｈｇ Ｆ 等 对 测． 根据 《 地表 水 环境 质量 标准 》 Ｇ ３ — ０ ） （ Ｂ ３８ ８２０ ２ 中 蒜 根 尖 诱 发 微 核 效 应 实 验 ． 别 配 制 含 Ｆ １． 分 一：０ ０
遗传学实验——微核
本科生课程论文遗传学实验报告论文石河子大学生命科学学院二零一二年实验名称 紫外线对大蒜根尖分生区细胞核的影响组长 张礼春 学 号 2010506076组员 朱秉坚 学号 2010506089谭志刚 2010506044杨新 2010506062所在院系 生命科学学院专业班级 2010级生科(1)班指导教师 李桂芳日期 2012年11月28日紫外线对大蒜根尖分生区细胞核的影响摘要：以大蒜根尖分生区为材料，研究了紫外线对大蒜根尖分生区正在有丝分裂细胞的致畸效应。
结果表明，紫外线可使细胞核发生结构变异，在分裂间期出现微核、多核现象，分别在紫外线照射0min、15 min、25min、45min和65min 时观察各种畸变类型，且畸变率随着照射时间的加长而增高。
关键词：微核；紫外线；大蒜；畸变引言：细胞核畸变指细胞核形状大小以及核中染色体结构或数目的改变，在显微镜下可以观察和识别。
物理因素和化学因素都能诱发细胞核发生畸变，其中诱发细胞核最明显的畸变是细胞核呈微核和多核[1]。
微核（Micronucleus, 简称MCN），也叫卫星核，是真核类生物细胞中的一种异常结构，是在细胞有丝分裂间期细胞中的一种表现形式。
微核往往是各种理化因子，如辐射、化学药剂对分裂细胞作用而产生的，微核常应运于测试辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、食品添加剂的安全评价，以及染色体遗传疾病和癌症前期诊断等各个方面[2]，所以对于研究微核具有极其重要的价值意义。
大蒜是研究微核的很好材料，大蒜在室温下3~5 天即可生根，根尖生长速度一致且生根较多[3]。
因此，在本研究中使用紫外线作为诱变剂，观察其在不同剂量的诱变剂下对大蒜根尖分生区细胞核的影响。
1 材料和方法选取个体较大，健壮无病虫害的大蒜，剥去老皮，放置于培养皿中，加蒸馏水浸没基部，每天换水2 次，室温下培养培养4天，直到根尖长到1.0cm~2.0cm 左右。
在上午11~12 时左右时，将大蒜及其根尖向上置于超净工作台上，用普通灭菌台中紫外灯进行照射，分别照射0min、15 min、25min、45min和65min。
遗传学实验(烟丝对绿豆染色体微核的影响)
石河子大学烟丝浸出液对绿豆根尖细胞的诱导实验院系：农学院2011级园艺2班姓名：许立志、杨邦杰、胡大帅、张晓莹、郝玉杰二0 一二年十一月烟丝浸出液对绿豆根尖细胞的诱导和检测小组成员：许立志2011512242 杨邦杰2011512219 胡大帅2011512215 张晓莹2011512226 郝玉杰2011512225摘要：以等量清水浸泡不同量的烟丝得到不同浓度浸泡液，用烟丝浸泡液对绿豆种子进行处理，观察绿豆根尖细胞染色体是否发生结构畸变，并统计其根尖染色体的畸变情况。
结果表明：高浓度的烟丝浸泡液能诱导绿豆根尖细胞染色体变异效果明显，说明吸烟有害健康。
关键字：绿豆烟丝浸泡液染色体变异前言：染色体是生物遗传物质的载体，它的结构、形态、功能是细胞遗传学中的核心内容。
任何一个物种的染色体形态、结构和数目是相对稳定的，但绝非永恒不变。
在自然条件下，某些环境因素的异常变化往往能引起植物染色体形态、结构和数目的变异。
如果用物理、化学因素认为的处理植物，则可以大大提高变异频率。
烟丝中含有烟焦油，尼古丁，氯化氢等有毒物质。
本实验就是为了观察这些物质是否影响细胞的正常分裂，并引起染色体变异，从而进一步说明吸烟有害健康。
实验目的：1.是了解微核测定的方法与意义。
2.为寻找新的测试系统或测定更多的环境因素。
实验原理：微核(micronucleus，MN)是一种类似细胞核的结构，它位于间期细胞的细胞质中，其形状近似椭圆形、卵圆形或圆形，而且边缘光滑整齐。
虽然它在染色性质，结构特征和折光性等方面与细胞核(主核)相似，但它独立存在，不与主核连在一起。
微核大小不一，有的较大，有的较小，不仅在不同植物和同种植物的不同细胞中是这样，即使在同一细胞中也常常是如此。
无论它存在于何处，是何因子诱导而成，其体积总比所在细胞的主核小，其直径一般只有主核的1／20～l／3，所以称它为微核。
在通常情况下，绝大多数细胞没有微核，微核只存在于少数细胞中。
温度骤变对大蒜根尖微核的诱导
［７］丛娟，甄卓，彭悦．重金属污染对大蒜根尖细胞的诱变效应研究 ［Ｊ］．安徽农业科学，２０１０，（３３）：１８６３８—１８６４０． ［８］高汝勇．低温预处理对大蒜根尖细胞有丝分裂的影响［Ｊ］．农业
科技与装备，２００９，（１）：３—５．
Ｔｈｅ Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ
Ｍｉｃｒｏｎｕｃｌｅｕｓ
ｉｎ Ａｌｌｉｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ ｂｙ Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ Ｓｈｏｃｋ
６ｈ
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．一●ｔ——一…一
１２ｈ １８ｈ
０
处理时间
图３单视野最大微核率统计
在统计过程中，单独记录一个视野中产生微核数最多的
万方数据
总第１１５期
叶石成，李桂芳：温度骤变对大蒜根尖微核的诱导
１９
图２和图３表明，诱导微核产生需要一定时间，在所设 计时间范围内，微核率随胁迫时间的延长有明显的增大趋 势，其中最高微核率接近最低微核率的十倍，并且仍有上升 趋势． 由图４可知，同种温度处理下（４℃），设定时间内，随着
或陈蒜对实验进展会有怎样的影响？微核率会因之发生变 化吗？（２）处理材料时，根尖长度是否会影响实验结果？鳞 茎皮的有无呢？（３）变量的范围及梯度的设置需要认真思 考，如本实验中温度过低或胁迫时间过长均会使试验不成
功；（４）由于条件限制，试验中遗憾的一点是未考虑根际环境 的含水量，有待进一步探究． 有学者认为微核的产生是由于温度骤变的胁迫作用导
［２］袁家辉．应用大蒜根尖微棱技术进行有毒污染物环境监测［Ｊ］． 阜阳师范学院学报，２００６，（３）：５６—５８． ［３】王晓桐，张金凤．大蒜多倍体诱导的撂究性实验［Ｊ］．青海农林科
技，２０１０，（２）：５—８．
［４］沈光平，王钬南，周社侦．微核与染色体畸变的相关性［Ｊ］．遗传，
微核诱导
洗手液对大蒜根尖的微核诱导摘要本实验选用大蒜根尖为实验材料，某品牌洗手液为待测样品，依据化学诱变剂可以改变细胞染色体复制、分离中的完整性及数目，从而产生有染色体或其片段形成微核结构的原理，展开实验。
其中用蒸馏水设置一组阴性对照。
关键词洗手液、大蒜、微核诱导前言微核（micronucleus, 简称MCN）也叫卫星核，是真核类生物细胞中的一种异常结构，是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式，呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应在主核1/3以下，折光率及细胞化学反应性质和主核一样，也具合成DNA的能力。
微核往往是各种理化因子，如辐射、化学药剂对分裂细胞作用而产生的。
一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体断片形成的。
一、诱导对象及方法：1.实验材料的培养本实验选取大蒜根尖为实验材料。
将筛选好的大蒜（2头）放盛有蒸馏水的小烧杯中，液面刚好淹没大蒜底部以保证根尖垂直、同步生长。
室温培养约2-4天，待根尖长出2-3 cm即可备用。
2.待测液处理将某品牌洗手液分别稀释5倍、10倍、50倍、100倍、200倍，配置成20 ml的溶液。
将备用的大蒜根尖浸于相应浓度的待测液中（2颗/浓度）。
另外取2颗备用大蒜根尖浸于蒸馏水中，作为阴性对照。
室温处理时间为48 h。
3.恢复培养取出待测液中的大蒜根尖用蒸馏水反复冲洗3-5次，1-2 min/次，再置于盛有蒸馏水的小烧杯中继续室温培养24 h。
4.解离与染色恢复培养后将根尖剪下约2 cm，分别置于1M的盐酸溶液中、60°C水浴中经10 min解离取出。
取一个根尖用蒸馏水冲洗后放在干净的载玻片，用吸水纸吸取根尖周围的水分，取根部尖端约0.5-1 cm进行染色。
将一滴吉姆萨染液滴于待染的根尖，染色约10-15 min。
5.制片与镜检吸取根尖周围的染液，滴一滴45%的醋酸溶液，盖上盖玻片，轻压。
用吸水纸包住玻片，用铅笔的橡皮头敲打盖玻片至标本呈散开的云雾状。
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遗传学实验自主设计性实验
实验名称：烟草浸泡液对大蒜根尖细胞微核的诱变效应专业年级：2010级农学一班
成员及学号：孙国乐2010512036
孙文庆 2010512024 _______
陈才 2010512003 ______
烟草浸泡液对大蒜根尖细胞微核的诱变效应
成员及学号：孙国乐2010512036 孙文庆2010512024 陈才2010512003 摘要：
本实验用大蒜根尖细胞微核技术检测同一种类香烟对微核的诱变效果。
设置了不同浓度的香烟剂量分别对每组大蒜根尖进行处理。
结果发现香烟的剂量在对微核千分率大小方面影响明显，由此说明香烟具有诱导微核产生的作用。
关键字：大蒜根尖；香烟；微核；微核千分率
前言
随着现代社会的发展，越来越多的化学物质运用到人们的日常生活之中，如各种香烟的烟气量。
而其中有些物质具有较强的危害，如致畸，致癌，致突变性。
为了检测已存在或潜在的危害，各种检测技术应运而生。
微核试验是检测染色体或有丝分裂器损伤的一种遗传毒性试验方法。
无着丝粒的染色体片段或因纺锤体受损而丢失的整个染色体，在细胞分裂后期仍留在子细胞的胞质内成为微核。
用微核试验来评价药物、放射线、有毒物质等对人体细胞或体外培养细胞遗传学损伤仍是一个直观有效可行的方法,在遗传毒理、医学、食品、药物、环境等诸多方面得到了广泛的应用。
微核技术经济,迅速,简便,不需要特殊技能,可以统计更多的细胞。
我们采用大蒜作为实验材料，采用植物微核技术来观察香烟对大蒜根尖微核千分率的影响进而来映射香烟中的化学物质对人体是否产生危害。
香烟是日常生活中经常接触到的东西，其市场在中国乃至世界也是相当巨大的，在超市中我们可以看到各种品牌各种样式的香烟。
另一方面，在各媒体的报道中，经常出现有关香烟的危害，但是我国的烟民量却居高不下，所以这也是我们进行本实验的一个原因。
物化因素可以对染色体发生影响，从而使生物的性状产生变异。
它们可以引起染色体在数量和结构上发生变化，还可导致微核的产生。
微核是真核生物细胞中的一种异常结构，在间期呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应在主核的1/3以下。
微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的断片产生，一整条或好几条染色体也能产生。
这些断片或染色体在细胞分裂末期被两个子细胞核所排斥，便形成了第三个核块。
1、实验材料和方法
1.1、实验材料：烟草、大蒜根尖、卡诺固定液、自来水、盐酸、改良苯酚品红溶液、
青霉素小瓶、显微镜、计算机、载玻片、盖玻片、培养皿
1.2、实验方法和步骤：
1、浸种催芽
取大蒜若干，等分为六组，分别标记为1、2、3、4、5、6号，然后放
在培养皿中加水使其发芽。
待大蒜发芽后，分别将一根、一根半、两根、两根半、三根、三根半烟的量
依次放入由小到大标号的培养皿中对大蒜芽进行处理。
一段时间大蒜根尖长至2-3cm后，取出大蒜，将其所发的芽剪下，放在标有
相应标号的青霉素小瓶中，加入固定液，然后放入冰箱冷藏24小时。
约24小时后，取出青霉素小瓶准备实验。
2、解离分别在青霉素小瓶中对供试采料大蒜根尖水洗3遍，弃去水。
再加入
1mol/L盐酸，放入60°C恒温箱解离10min后，弃去盐酸，水洗根尖
3遍。
3、染色取一根尖于载玻片上，切取生长点部位，弃去其余部分。
加一滴改良
苯酚品红溶液，边用镊子夹碎边染色10min，再加上盖玻片。
4、制片吸水纸包住盖玻片和载玻片，镊柄敲碎，敲至材料呈云雾状即可，然
后对每个标号的大蒜根尖按以上步骤制两个玻片。
5、镜检观察微核的细胞形态，并进行拍照，在每个根尖中数1000个细胞，统
计其中微核的个数；另外统计不同剂量与微核率的关系。
2、实验结果与分析
2.1显微镜下图片
大蒜根尖实验组1 大蒜根尖实验组1 微核细胞（1）微核细胞（2）
大蒜根尖实验组2 大蒜根尖实验组2
微核细胞（1）微核细胞（2）
大蒜根尖实验组3 大蒜根尖实验组3
微核细胞（1）微核细胞（2）
大蒜根尖实验组4 大蒜根尖实验组4 微核细胞（1）微核细胞（2）
大蒜根尖实验组5 大蒜根尖实验组5 微核细胞（1） 微核细胞（2）
大蒜根尖实验组6 大蒜根尖实验组6
微核细胞（1） 微核细胞（2）
剂量
第一视野微核千分率（‰） 第二视视野千分率（‰）
平均（‰）
1 1 1
2 10 11
2 1.5 15 14 14.5
3 2 19 16 17.5
4 2.
5 22 19 20.5 5 3 25 24 24.5
6 3.5 29 27
28
得到视野微核的千分率，以下是与表格相对应的函数图象。
11
14.5
17.5
20.5
24.5
28
05101520
25301
2
3
4
5
6
2.3数据分析
视
野 微 核 组
别
平均（‰）
组别
从上表中我们可以看出试验所用的诱导剂对大蒜根尖的染色体都有一定的损害作用，从而使大蒜根尖细胞产生微核，且对于同一种诱导剂其所用剂量越大，则其对应的微核千分率越高，即微核千分率的大小与诱导剂的剂量呈正比。
3、讨论
实验设计时考虑不周没有设计对照组且实验数据统计分析时，也存在不足，微核数据的统计有一定的人为观察的影响，也与每个根尖的生长状况有关，本组仅仅是取了数据的平均数，并未对实验整体进行统计学的估定，因此实验数据有误差。
4、参考文献
【1】：孙亦阳，陈荣。
微核测试教学实验的两点改进——生物学通报2004
【2】：杜峰涛，李林。
细胞微核形成机理探讨——现在医学杂志2007
【3】：龚慧明。
诱变物质微核测试实验的改进——生物学教学2006,31（12）
【4】：张杰，王友保，刘登义。
应用大蒜根尖细胞微核技术监测镜湖水质的研究——2003。