染色液的配制
病理制片技术——常用试剂及染液的配制
病理制片技术——常用试剂及染液的配制一、Harris氏苏木精染色液的配制1．试剂准备：苏木精10 g，硫酸铝钾80 g，无水乙醇200 ml，蒸馏水2000 rnl，氧化汞3 g，冰乙酸40ml。
2．配制步骤(1)将2000 ml蒸馏水注入一只3000 的大号三角烧瓶内，加入80 g硫酸铝钾后置电炉或电磁炉上加热硫酸铝钾完全溶解。
(2)将200 ml无水乙醇注入一只300 ml的三角烧瓶内，加入10 g苏木精摇动使之完全溶解。
(3)将已完全溶解于无水乙醇的苏木色精液体缓缓注入已完全溶解的2000 ml硫酸铝钾液体中，继续加热至液体沸腾关闭电源。
此时液体应呈透明的玫瑰红色。
(4)将3 g氧化汞溶于20ml蒸馏水中搅匀后缓缓(一定要缓慢)方入未被氧化的苏木精液体中，边加氧化汞边搅拌。
此时苏木精被氧化，液体的颜色会迅速地变成深蓝紫色。
(5)氧化汞加完后用玻棒充分的搅拌液体并继续加热至液体再度沸腾关闭电源。
(6)用湿毛巾保护，将装有停止沸腾的热苏木精的三角烧瓶转移至冷水中迅速降温至室温。
(7)密封瓶口室温避光直射储存备用，临用前每100 ml苏木精液加入2～3 ml冰乙酸混匀。
二、伊红染色液的配制l. 试剂准备；伊红Y 20 g，蒸馏水1500 ml，95％乙醇500 ml，冰乙酸lml。
2．配制步骤(1)先将20 g伊红Y溶于500 m1蒸馏水中，用玻棒搅拌至其完全溶解后再加入1000 ml 蒸馏水并搅匀，液体呈深红色。
(2)加入500 ml 95％乙醇并搅匀，此时液体由深红色转变为荧光绿色。
(3)加入lml冰乙酸并搅匀，密封瓶口室温储存备用。
三、HE染色分化液的配制0.5％盐酸乙醇液：蒸馏水300 ml与95％乙醇700 ml混合后加入浓盐酸5 ml混匀。
四、HE染色返蓝液的配制0.5％氢氧化氨液：在1000毫拜蒸馏水中溶入5毫升浓氢氧化氨混匀。
丽春红染色液的配制及使用
丽春红染色液的配制及使用丽春红（PONCEAUS）是一种广泛用于生物化学和分子生物学实验中的缺陷染料，主要用于染色蛋白质凝胶和膜，也可用于检测核酸电泳结果。
下面将介绍丽春红染色液的配制方法和使用注意事项，并附上一些相关实验技巧。
配制丽春红染色液：材料：-丽春红染料粉末-乙醇-蒸馏水或去离子水步骤：1.称取适量的丽春红染料粉末并置于一个干燥的玻璃容器中。
建议根据实验需要确定染色液的浓度，通常可选用0.2-0.5%浓度的丽春红溶液。
2.用乙醇溶解染料粉末，可以先加入适量的乙醇湿润染料，再加入足够量的乙醇溶解。
溶解过程中可以用玻璃棒或磁力搅拌器轻轻搅拌。
3.在染料完全溶解后，加入足够的蒸馏水或去离子水将体积稀释至所需的终浓度。
4.最后，用滤纸或滤膜过滤染色液以去除悬浮物。
使用丽春红染色液的注意事项：1.染色前，确保蛋白质凝胶或膜已完成电泳，否则染色效果可能不佳。
2.准备一个干燥的容器，并将蛋白质凝胶或膜放入其中。
3.用足够的丽春红染色液完全浸泡蛋白质凝胶或膜，充分均匀搅拌，以确保染色效果均匀。
4.染色时间通常为10-30分钟，但染色时间应根据染料浓度和样品特性进行优化。
过长或过短的染色时间都可能对结果产生不良影响。
5.染色后，用蒸馏水或去离子水彻底洗涤蛋白质凝胶或膜，直至染色液中没有可见染料残留为止。
6.最后，可将染色后的蛋白质凝胶或膜进行成像或进一步处理。
一些相关实验技巧：1.在染色前，对蛋白质凝胶或膜进行固定可以提高染色效果和染色均匀性。
2.染色液中的染料浓度和染色时间可根据实验需求进行优化和调整。
3.若需要去除丽春红染色液残留在蛋白质凝胶或膜上的染色产品，可尝试用去离子水或含有10%乙酸溶液进行洗涤。
4.染色后的蛋白质凝胶或膜应避免长时间曝露在光线下，以免染色产品褪色。
美蓝染色液的配制方法
美蓝染色液的配制方法
美蓝染色液是一种常用的染色液，可以用于染色各种纤维素材料，如棉、麻、丝、毛等。
以下是美蓝染色液的配制方法：
材料：
美蓝染色剂、醋酸、水、染色器皿、搅拌棒、手套、面罩、眼镜等。
步骤：
1. 按照美蓝染色剂的配方要求，量取适量染色剂。
一般来说，
染色剂的用量应该是纺织品重量的1-3%。
2. 在染色器皿中加入适量水，将水加热至40-60℃左右。
3. 将美蓝染色剂缓慢倒入已加热的水中，并用搅拌棒均匀搅拌。
一般来说，染色液的浓度应该控制在0.5%左右。
4. 加入适量醋酸，醋酸的用量是染色剂用量的1/10-1/5左右。
醋酸的作用是调节染色液的酸碱度，有助于染色剂的溶解和纤维素材料的染色。
5. 继续搅拌染色液，直到染色剂完全溶解，并且染色液呈现出
均匀的深蓝色。
6. 将纤维素材料放入染色器皿中，并用搅拌棒轻轻搅拌，使其
充分浸泡在染色液中。
7. 根据需要，可以在染色过程中适当调整染色温度、时间等参数。
8. 染色完成后，将纤维素材料取出，用清水冲洗干净，直至水
清为止。
然后晾干或烘干即可。
注意事项：
1. 在配制和使用美蓝染色液时，一定要戴上手套、面罩、眼镜等防护用品，以免染料对皮肤和呼吸系统造成伤害。
2. 染色液的浓度、酸碱度等参数，应该根据不同的纤维素材料和染色要求进行调整。
3. 染色液在加热、搅拌等过程中，应该保持均匀和充分，以确保染色剂能够充分溶解和分散。
4. 染色完成后，应该注意对染色器皿和工具进行清洗，以免染色液残留对下次染色造成影响。
常用染色液配方
实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。
常用染色液的配制
常用染色液的配制１．染料饱和酒精溶液的配制配制染色液常先将染料配成可长期保存的饱和酒精溶液，用时再予以稀释配制。
配制饱和酒精溶液，应先用少量95％酒精先在研钵中徐徐研磨，使染料充分溶解，再按其溶解度加于95％酒精之中，贮存于棕色瓶中即可。
附表1 几种常用染料在95%酒精中的溶解度(26℃)染料名称美蓝结晶紫龙胆紫碱性复红沙黄溶100mL95％酒精中的重量(g) 1.4813.8710.003.203.412．常用染色液的配制（１）碱性美蓝(亦称骆氏美蓝)染色液：取美蓝饱和酒精溶液30ml，加入0.01％氢氧化钾水溶液l00mL，混合即成。
此染色液在密闭条件下可保存多年。
若将其在瓶中贮至半满，松塞棉塞，每日拔塞摇振数分钟，并不时加水补充失去的水分，约1年后可获得多色性，成为多色美蓝染色液。
（２）草酸铵结晶紫(亦称赫克结晶紫)染色液：取结晶紫饱和酒精溶液2mL，加蒸馏水18mL稀释10倍，再加入1％草酸铵水溶液80mL，混合过滤即成。
（３）革兰氏碘溶液：将碘化钾2g置乳钵中，加蒸馏水约5mL。
再加入碘片1g，予以研磨，并徐徐加水，至完全溶解后，注入瓶中，被加蒸馏水至全量为300mL即成。
此液可保存半年以上，当产生沉淀或褪色后即不能再用。
（４）沙黄水溶液：沙黄也称番红花红。
将沙黄饱和酒精溶液以蒸馏水稀释10倍即成。
此液保存期以不超过4个月为宜。
（５）石炭酸复红染色液：取3%复红酒精溶液10mL，加入5％石炭酸水溶液90mL混和过滤即成。
（６）稀释石炭酸复红染色液：将石炭酸复红染色液以蒸馏水稀释10倍即成。
（７）3％盐酸酒精(亦称含酸酒精)：加浓盐酸3mL于95%酒精97mL中即成。
（８）瑞士染色色液：取瑞氏染料0.1g置乳钵中，徐徐加入甲醇，研磨以促其溶解。
将溶液倾入有色中性玻瓶中，并数次以甲醇洗涤乳钵，亦倾入瓶内，最后使全量为60mL即可。
将此瓶置暗处过夜，次日滤过即成。
此染色液须置于暗处，其保存期约为数月。
常用染色液的配制
一、常用染色液的配制⒈碘—碘化钾（I2-KI）溶液能将淀粉染成蓝紫色，蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测定的重要试剂.配方:碘化钾2g ;蒸馏水300ml ；碘1g先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，待全溶解后再加碘，振荡溶解后稀释至300mL，保存在棕色玻璃瓶内.用时可将其稀释2—10倍,这样染色不致过深，效果更佳。
⒉苏丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ)能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色，是著名的脂肪染色剂。
配方：（1)苏丹III或苏丹Ⅳ干粉；95％酒精10ml ；过滤后再加入10ml甘油（2)先将苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中，再加入70％酒精50ml.（3）苏丹III 70%乙醇的饱和溶液.⒊1％醋酸洋红（aceto carmine）酸性染料，适用于压碎涂抹制片，能使染色体染成深红色,细胞质成浅红色。
配方：洋红1g ；45％醋酸100ml煮沸2h左右，并随时注意补充加入蒸馏水到原含量，然后冷却过滤，加入4％铁明矾溶液1～2滴（不能多加，否则会发生沉淀)，放入棕色瓶中备用.⒋改良苯芬品红染色液（Carbol fuchsine) 核染色剂。
配制步骤：先配成三种原液，再配成染色液。
原液A:3g碱性品红溶于100ml 70％酒精中。
原液B：取原液A10ml加入到90ml 5％石炭酸水溶液中。
原液C：取原液B 55ml，加入6ml冰醋酸和6ml福尔马林（38％的甲醛）.（原液A和原液C可长期保存，原液B限两周内使用）染色液：取C液10～20ml，加45％冰醋酸80～90ml，再加山梨醇1～，配成10％～20％浓度的石炭酸品红液，放置两周后使用，效果显著(若立即用，则着色能力差）。
适用范围：适用于植物组织压片法和涂片法，染色体着色深，保存性好，使用2～3年不变质。
山梨醇为助渗剂，兼有稳定染色液的作用,假如没有山梨醇也能染色，但效果较差。
⒌中性红(neutral red)溶液用于染细胞中的液泡,可鉴定细胞死活。
常用染色液的配制
常用染色液的配制1.吕氏（Loefflev）美蓝染色液A液：2%美蓝（Methylene blue）95%酒精溶液B液：10%KOH溶液取A液30ml、B液0.1ml与100ml蒸馏水混合。
2.石炭酸复红染色液A液：4%碱性复红（basic fuchsin）95%酒精溶液将碱性复红在研钵中研磨后，逐渐加入95%酒精，继续研磨使其溶解、配成A液。
B液：5%石炭酸溶液取A液10ml、B液90ml混合即可。
一般可将此溶液稀释5-10倍使用。
但稀释液易变质失效，一次不宜多配。
3.革兰氏（gram）染色液（1）草酸铵结晶紫染液：A液：1%结晶紫（Crystal violet）95%酒精溶液B液：1%草酸铵（Ammonium oxalate）溶液取A液20mlB液80ml，静置48/小时后使用。
（2）路哥氏（Lugol）碘液：碘片1.0g、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液另，待碘全部溶解后，加够水即成。
（3）95%酒精溶液（4）蕃红（沙黄）复染液：2.5%蕃红（Safranlne O）95%酒精溶液。
取此液10ml与90ml蒸馏水混匀即成。
4.芽孢染色液（1）5%孔雀绿(Malachite green)溶液。
（2）0.5%蕃红溶液。
（3）苯酚品红溶液称取11g碱性品红溶于100ml无水酒精中。
再取上述溶液10ml与100ml 5%的苯酚溶液混合，过滤备用。
（4）黑色素(nigrosin)溶液10%黑色素溶液，置沸水浴中30min后，滤纸过滤二次，补加水到100ml，然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。
5.荚膜染色液（1）黑色素水溶液将黑色素在蒸馏水中煮沸5min，配成5%溶液，然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。
（2）蕃红染色液与革兰氏染色液中的蕃红复染液相同。
6.鞭毛染色液A液：单宁酸5.0g、FeC131.5g、蒸馏水100ml，福尔马林（15%）2.0ml、NaOH(1%)1.0ml。
常用染色液配方范文
常用染色液配方范文
染色液是一种常见的化学染料，用于染色纺织品、皮革、木材等材料。
下面是一些常用的染色液配方，供参考：
1.酸性染色液配方：
-甲醛：5%（染色前处理）
-醋酸：2%（酸洗、pH调节）
-染料：1-3%（根据颜色需求）
-辅料：盐酸、硫酸、硫酸铵等（根据具体工艺条件）
2.碱性染色液配方：
-乙醇胺：5-10%（碱性调节）
-染料：1-3%（根据颜色需求）
-辅料：碱性添加剂（根据具体工艺条件）
3.偶氮染料染色液配方：
-偶氮染料：0.5-2%（根据颜色需求）
-萃取剂：1-5%（用于溶解染料）
-辅料：乙醇、盐酸、润湿剂等（根据具体工艺条件）
4.基于金属盐的染色液配方：
-金属盐：如铜盐、铁盐、铅盐等
-酸洗剂：如盐酸、硝酸等
-辅料：酸性调节剂、沉淀剂等（根据具体工艺条件）
5.响应性染料染色液配方：
-响应性染料：根据所使用的响应性染料种类和需求量决定
-辅料：如还原剂、氧化剂等（根据具体工艺条件）
注意事项：
-在配制染色液时，选择合适的溶剂和添加剂，确保染料能够均匀分
散在溶液中，达到较好的染色效果。
-不同类型的染料有不同的适应pH范围，因此在选择配方时需要考虑
染料的酸碱性。
-染色液的具体配方需根据不同的染色物料和工艺要求进行调整。
这些仅是一些常见的染色液配方，实际应用中还需要根据具体的染料、染色物料和工艺要求进行调整和优化。
最佳的染色液配方应该结合实验室
试验和生产实际，以确保染色效果的质量和稳定性。
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染色液的配制
一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液
A液：美蓝(methylene blue) 0．6g
95%酒精 30ml
B液：KOH 0．01g
蒸馏水 100ml
分别配制A液和B液，配好后混合即可。
二、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液
A液：碱性复红(basic fuchsin) 0．3g
95%酒精 10ml
B液：石炭酸 5．0g
蒸馏水 95ml
将碱性复红在研钵中研磨后，逐渐加入95%酒精，继续研磨使其溶解，配成A 液。
将石炭酸溶解于水中，配成B液。
混合A液及B液即成。
通常可将此混合液稀释5—10倍使用，稀释液易变质失效，一次不宜多配。
三、革兰氏(Gram)染色液
1．草酸铵结晶紫染液
A液：结晶紫(crystal violet) 2g
95%酒精 20ml
B液：草酸铵(ammonium oxalate) 0．8g
蒸馏水 80ml
混合A、B二液，静置48小时后使用。
2．卢戈氏(Lugol)碘液
碘片 1．0g
碘化钾 2．0g
蒸馏水 300ml
先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液中，待碘全溶后，加足水分即成。
3．95%的酒精溶液。
4．番红复染液
番红(safranine O) 2．5g
95%酒精 100ml
取上述配好的番红酒精溶液10ml与80ml蒸馏水混匀即成。
四、芽孢染色液
1．孔雀绿染液
孔雀绿(malachite green) 5g
蒸馏水 100ml
2．番红水溶液
番红 0．5g
蒸馏水 100ml
3．苯酚品红溶液
碱性品红 11g
无水酒精 100ml
制法取上述溶液10ml与100ml5%的苯酚溶液混合，过滤备用。
4．黑色素(nigrosin)溶液
水溶性黑色素 10g
蒸馏水 100ml
称取10g黑色素溶于100ml蒸馏水中，置沸水浴中30分钟后，滤纸过滤
二次，补加水到100ml，加0．5ml甲醛，备用。
五、荚膜染色液
1．黑色素水溶液
黑色素 5g
蒸馏水 100ml
福尔马林(40%甲醛) 0．5ml
将黑色素在蒸馏水中煮沸5分钟，然后加入福尔马林作防腐剂。
2．番红染液
与革兰氏染液中番红复染液相同。
六、鞭毛染色液
A液：单宁酸 5g
FeCl3 1．5g
蒸馏水 100ml
福尔马林(15%) 2．0ml
NaOH(1%) 1．0ml
配好后，当日使用，次日效果差，第三日则不宜使用。
B液：AgNO3 2g
蒸馏水 100ml
待AgNO3溶解后，取出10ml备用，向其余的90mlAgNO3中滴入浓NH4ON，使之成为很浓厚的悬浮液，再继续滴加NH4OH，直到新形成的沉淀又重新刚刚溶解为止。
再将备用的10mlAgNO3慢慢滴入，则出现薄雾，但轻轻摇动后，薄雾状沉淀又消失，再滴入AgNO3，直到摇动后仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为止。
如所呈雾不重，此染剂可使用一周，如雾重，则银盐沉淀出，不宜使用。
七、富尔根氏核染色液
1．席夫氏(Schiff)试剂
将1g碱性复红加入200ml煮沸的蒸馏水中，振荡5分钟，冷至50℃左右过滤，再加入1mol/LHC120ml，摇匀。
待冷至25℃时，加Na2S2O5(偏重亚硫酸钠)3g，摇匀后装在棕色瓶中，用黑纸包好，放置暗处过夜，此时试剂应为淡黄色(如为粉红色则不能用)，再加中性活性炭过滤，滤液振荡1分钟后，再过滤，将此滤液置冷暗处备用(注意：过滤需在避光条件下进行)。
在整个操作过程中所用的一切器皿都需十分洁净、干燥，以消除还原性物质。
2．Schandium固定液
A液：饱和升汞水溶液
50ml升汞水溶液加95%酒精25ml混合即得。
B液：冰醋酸
取A液9毫升+B液1毫升，混匀后加热至60℃。
3．亚硫酸水溶液
10%偏重亚硫酸钠水溶液5ml，1mol/LHCl5ml，加蒸馏水100ml混合即得。
八、Bouin氏固定液
苦味酸饱和水溶液 75ml
福尔马林(40%甲醛) 25ml
冰醋酸 5ml
1g苦味酸可制成75ml饱和水溶液。
先将苦味酸溶解成水溶液，然后再加入福尔马林和冰醋酸摇匀即成。
九、乳酸石炭酸棉蓝染色液
石炭酸 10g
乳酸(比重1．21) 10ml
甘油 20ml
蒸馏水 10ml
棉蓝(cottolue) 0．02g
将石炭酸加在蒸馏水中加热溶解，然后加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，使其溶解即成。
十、瑞氏(Wright)染色液
瑞氏染料粉末 0．3g
甘油 3ml
甲醇 97ml
将染料粉末置于干燥的乳。