动物体内常见寄生虫卵的检查+
动物粪便检查—粪便寄生虫检查
1、离心漂浮法
操作方法： 把3-5g（一茶勺）粪便放入纸杯或者塑料杯
中。猫的粪便和小反刍动物的粪便比较硬，很难 破碎，可以粉碎或者用水侵泡进行软化，如果粪 便中含有大量的脂肪或者粘液，可以用水进行清 洗。清洗后可以改变粪便的正常外观。
❖ 尽量搅拌混匀粪便和漂浮液，通过双层纱布 过滤，滤茶器进行过滤。
病毒、细菌及螺旋体检查
❖ 引起肝脏破裂，应激治病性病毒，戊型肝炎病毒在 粪便中的检出率最高；没有腹泻症状的动物，粪便 病毒量高；
❖ 引起腹泻的病毒性疾病，如猪流行性腹泻，轮状病 毒感染，猪德尔塔冠状病毒；
❖ 引起腹泻的大肠杆菌、梭菌性肠炎、沙门氏菌、胞 内劳森菌；
❖ 螺旋体，腹泻粪便样品（直肠）。
寄生虫寄生部位
❖ 吸虫类：姜片吸虫 、华支睾吸虫 、片形吸虫 、分体吸虫 、后睾吸虫、横川后殖吸虫 、胰 阔盘吸虫。（虫卵较重，漂浮不起来）
粪便沉淀原理
粪便沉淀法浓缩寄生虫卵，卵囊和其他的寄生虫材 料，让这些材料沉淀到离心管的底部，通常用水。这 个方法主要用于，不能在溶液中漂浮起来虫卵，或者 是虫卵在漂浮液中容易变形。吸虫虫卵比较重，在漂 浮方法中漂不起来。
体内寄生虫主要寄生在：口腔、食道、胃、小肠、 大肠，还有其他的内部器官。通过粪便排出，收集 粪便，显微镜检查。
诊断是在粪便中发现寄生虫生活周期的不同阶段： 卵，卵囊，幼虫，节片（绦虫），成虫。兽医人员 根据这些诊断是否存在寄生虫感染。
常见寄生虫检查
❖ 仔猪等孢子球虫、隐孢子虫、结肠小袋纤毛虫 、蛔虫、食道口线虫、肺线虫、绦虫、毛尾线 虫（鞭虫）、棘头虫。利用漂浮法检查。
❖ 也有大于1.300比重的溶液，可以用来漂浮虫 卵，不过，由于盐溶液浓度太高容易导致虫 卵形态改变。
动物寄生虫检查的几种方法
放 到屏幕 上 观察 。消化 法 ， 取 １ ０ ０克 肉样 ， 加入 １ Ｏ克 胃蛋 白酶 ， 溶 于 ２升 自来 水 中 ， 再加入 ｌ ６毫 升 ２ ５ ％
的盐 酸进 行 观察 。
３ 血 液 寄 生 虫 检 查
血 液 的涂 片 与染 色 。一般 在 病 畜高 温 时取 耳 静 脉血 涂 片 。制 成血 液涂 片 ， 然后用 姬姆 萨 液或 瑞 氏液
检 疫 检 验
动 物 寄 生 虫 检 查 的 几 种 方 法
齐 兵 刘伟峰 ：
（ １ ． 辽 宁省 黑 山县动 物检 疫站 １ ２ １ ４ ０ ０ ， ２ ． 辽 宁省 黑山县 畜 产品 安 全监察 所 １ ２ １ ４ ０ ０）
１粪便检 查
常用的粪便检查方法有肉眼观察法 、直接涂 片 法、 虫 卵 漂 浮法 、 虫 卵沉 淀 法 、 虫 卵计 数法 、 幼 虫 培养
含有成形的毛蚴 。吸虫卵常呈黄色 、 黄褐色或灰色 ， 内容 物较 充满 。
绦 虫 卵 。 圆叶 目绦 虫 卵呈 圆形 、 方 形 或 三 角形 。
滋养体。取得的腹水可在载玻片上抹 片， 以瑞 氏液或 姬 氏液染 色后 检查 。
寄生虫病学
3 斯氏虫卵计数法
用小的特制球状烧瓶，在瓶的下颈部有两个刻度，下面 为56ml，上面为60ml。 加入0.1mol/L（或4%）NaOH溶液至56ml处→徐徐加入捣 碎的粪便（大约4g）使液面达 60ml处为止→加入10多个玻 璃小球，充分振荡，呈细致均匀的粪悬液→吸管吸取0.15ml 置载玻片上 →盖上盖玻片（不小于22mm×40mm）镜检计数 →所见虫卵总数乘以100，即为每g粪便中的虫卵数（EPG） （计算过程：0.15ml×4g/60ml=0.01g 1g/0.01g=100）
2.循序沉淀法---适宜于大多数吸虫卵
取5g被检粪便放于烧杯中→加5倍量清水，搅拌均匀 →用粪筛过滤粪汁于另一烧杯中，粪渣弃之→粪汁静 置沉淀约30min→倾去烧杯内上层液体，再加清水搅 拌→再次静置沉淀约30min→反复进行2或3次，直至 上清液清亮为止→倾去大部分上清液，留约为沉淀物 1/2的溶液量→胶帽吸管吹吸均匀后，吸取适量粪汁 （2滴左右）置于载玻片上→加盖玻片镜检
寄生虫病学实验
主讲教师: 杨光友
实验一 动物蠕虫虫卵的检查与定 量测定
一 实验目的
1.掌握动物蠕虫学常见的实验室粪便虫卵检查技 术。 2.在光学显微镜下区分虫卵和异物。 3.认识吸虫卵、绦虫卵、线虫卵等蠕虫虫卵，掌 握其一般特征。
二 实验原理
1.漂浮法：采用密度高于虫卵的漂浮液，使粪便中 的虫卵与粪便渣子分开而浮于液体表面，然后进 行检查。 2.沉淀法：利用虫卵密度比水大的特点，让虫卵在 重力的作用下，自然沉于容器底部，然后进行检 查。
2 贝尔曼氏法 ①用一根乳胶管两端分别连接漏斗和小试管，然后 置漏斗架上。 ②通过漏斗加入40℃的温水，水量约达漏斗中部。 ③漏斗内放上置有被检材料的粪筛。 ④静置1h后，拿下小试管，吸弃掉上清液，吸取管 底沉淀物，镜检。
动物寄生虫病PCR诊断技术样本
动物寄生虫病PCR诊断技术样本动物寄生虫病是指动物体内寄生的一类寄生虫引起的疾病，它们通过寄生在动物体内并侵害宿主的组织、器官和系统，引起一系列不同程度的病理损害。
动物寄生虫病对养殖业、畜牧业和野生动物保护等方面都有重要影响，因此及早、可靠地诊断寄生虫感染是非常重要的。
寄生虫病的诊断一直是医学科学家和兽医师所关注的重要领域，为了提高动物寄生虫病的诊断效率和准确性，PCR（Polymerase Chain Reaction，聚合酶链反应）技术被广泛应用于寄生虫病的诊断。
PCR技术是一种通过DNA扩增来检测目标DNA序列的技术，它采用了一种在体外复制DNA的酶，聚合酶，通过不断重复的步骤，复制目标DNA 片段从而使其增加几个数量级。
PCR技术的基本原理是将DNA样本与反向引物和正向引物结合，并加入DNA聚合酶、四种碱基和缺失单碱基的dNTP，通过反复温度循环中的DNA变性、引物结合和DNA合成，最终得到数倍于起始数量的目标DNA序列。
PCR技术具有敏感、特异性强、高通量、快速和准确等优点。
在动物寄生虫病诊断中，可以通过设计特异的引物，将寄生虫的DNA从动物组织或体液样本中扩增出来，并通过聚丙烯酰胺凝胶电泳或实时荧光PCR等方法进行分析和检测。
对于一些传统的诊断方法难以确诊的情况，如寄生虫病在早期感染、轻微感染和低密度感染等情况下，PCR技术能够提供更为敏感和准确的结论。
根据动物寄生虫病的特点，适宜的PCR样本包括动物体内组织和体液样本。
常见的动物寄生虫病的PCR样本有：1.血液样本：对于一些血吸虫感染、疟原虫感染等疾病，可以通过提取感染动物的全血样本中的寄生虫DNA进行诊断。
2.组织样本：通过对动物组织样本进行PCR扩增，可以检测到一些针对特定寄生虫的DNA片段。
例如，肉眼可见的病变组织、手术获取的寄生虫感染的组织切片等。
3.分泌物样本：对于一些存在寄生虫卵或囊泡排出的动物寄生虫病，如弓形虫感染等，可以通过采集动物的分泌物样本，提取其中的寄生虫DNA进行PCR检测。
动物肠道寄生虫的检测与驱虫方法
动物肠道寄生虫的检测与驱虫方法肠道寄生虫是一种常见的动物健康问题，对动物的生长和健康产生负面影响。
为了确保动物的健康，检测和驱虫是必不可少的步骤。
本文将介绍动物肠道寄生虫的检测方法以及常用的驱虫方法。
一、动物肠道寄生虫的检测方法1. 粪便检测法粪便检测法是一种常用且有效的方法来检测动物肠道寄生虫。
这种方法简单易行，可以快速确定动物体内是否存在寄生虫。
具体操作步骤如下：（1）收集动物新鲜粪便样本：使用干净的容器收集动物新鲜粪便样本。
（2）制备粪便涂片：将收集到的粪便样本均匀涂在玻璃载玻片上，制备成粪便涂片。
（3）镜检寄生虫卵：使用显微镜观察粪便涂片，并搜索寄生虫卵的存在。
常见的寄生虫卵包括蛔虫、钩虫、圆条虫等。
2. 血液检测法某些寄生虫，如犬细小病毒和猫心丝虫等，可以通过血液检测法来诊断。
这种方法可以准确检测动物体内的寄生虫感染情况。
具体操作步骤如下：（1）采集动物血液样本：使用消毒的器械采集一定量的动物血液样本。
（2）离心分离血清：对采集到的血液样本进行离心处理，分离出血清。
（3）使用血清诊断试剂盒：将分离得到的血清样本与血清诊断试剂盒反应，根据结果判断动物是否感染寄生虫。
二、动物肠道寄生虫的驱虫方法1. 药物驱虫法药物驱虫法是目前最常用的动物肠道寄生虫驱虫方法之一。
通过给动物服用驱虫药物，可以有效清除体内的寄生虫。
常见的驱虫药物包括螺旋藻素、伊维菌素等。
具体操作步骤如下：（1）选择适当的药物：根据动物种类和感染的寄生虫种类选择适当的药物。
（2）根据药物说明书使用：按照药物说明书的指导，准确计量给动物服用驱虫药物。
（3）注意剂量和频率：根据动物的体重和药物的推荐剂量，合理控制服药的频率和剂量。
2. 生物防治法生物防治法是一种相对环保和安全的驱虫方法，通过引入天敌来控制寄生虫的繁殖和感染。
这种方法适用于一些特定的寄生虫。
具体操作步骤如下：（1）了解寄生虫的生活习性：了解寄生虫的生物学特性，选择适合的天敌。
浅谈动物寄生虫病粪便虫卵检查技术
此项调查可确定感染率、感染强度，感染种类和优势虫 种，为科学研究、监测预警、区域性寄生虫病防控服务。
根据驱虫前后虫卵转阴率，判断驱虫效果。 2 仪器设备材料
铁架台、漏斗、粪筛、纱布、粪勺 、烧杯、玻璃 棒、镊子、载玻片、盖玻片、粗天平、锥形瓶、吸管、铁丝圈等。
2018 年第 3 期 33
Байду номын сангаас
虫卵被漂浮在溶液的上层。操作方法： （1）取粪：取 5~10g 粪便放入 100mL 烧杯中； （2）化粪：加 10～20 倍的饱和盐水，用玻璃棒搅开； （3）过滤：用 3~4 层纱布或铜筛网过滤； （4）静置：40min 左右； （5）镜检：用直径 0.5～1cm 的金属环平着接触液面，提起后 将液面抖落在载玻片上加盖玻片用显微镜检查。
试验研究
浅谈动物寄生虫病粪便虫卵检查技术
潘德彦
（辽宁省大连市普兰店区城子坦动物卫生监督所，辽宁 大连 116200）
DOI:10援3969/J.ISSN援1671-6027援2018援03.020
粪便虫卵检查是寄生虫病、特别是蠕虫病生前诊断的重 要方法，其原理是：大多数寄生性蠕虫寄生在消化道内，它们 的卵、节片、幼虫或成虫随宿主粪便排至外界；某些寄生于呼 吸道的蠕虫，它们的虫卵和幼虫随痰液到口腔又被动物咽下 也随粪便排出；一些寄生于血液的蠕虫，它们的虫卵也可随 血流到达肠壁，并进入肠腔而随粪排出. 1 应用范围
3 粪便的采集及保存
原则：新鲜未被污染。 方法：直肠采粪或排出的新鲜粪便，采集粪堆上面未被 污染的部分。采集的粪便要装入洁净的容器中。
采集的新鲜粪便应当天检查，不能当天检查的粪便要密 封后放在 4℃的冰箱中保存。如需转送别处检查，则可将粪样 浸入 5%～10%的福尔马林中，将虫卵固定，使其失去活力。 4 常用的粪便虫卵检查方法
动物检疫中实验室检验的主要方法
动物检疫中实验室检验的主要方法动物检疫是通过对动物体内的样本进行实验室检验，以便检测出一些疾病、寄生虫及其他有害生物。
以下是动物检疫中常用的实验室检验方法：1. 细菌培养：用于检测动物体内的细菌感染，主要通过从样本中取得细菌并将其培养在适当的培养基上。
培养后，通过观察细菌的形态特征、生长速率和产生的代谢产物来确定细菌的种类和数量。
2. 病毒分离和鉴定：针对动物患病的病毒感染，可以采用细胞培养、鸡胚培养或小鼠接种等方法，将动物体内的病毒分离出来。
分离后，可以使用免疫荧光、酶联免疫吸附试验（ELISA）或PCR等技术对病毒进行鉴定和定量。
3. 血清学检验：检测动物体内的免疫反应，主要通过血液样本中的血清进行。
血清中的抗体水平可以通过酶联免疫吸附试验、补体结合试验或中和试验等方法进行测定，以确定动物是否感染某种病原体，并评估其免疫状态。
4. 寄生虫检测：用于检测动物体内的寄生虫感染，包括内寄生虫和外寄生虫。
内寄生虫的检测常通过粪便检查，利用显微镜观察寄生虫卵或幼虫的存在和数量。
对于外寄生虫，可以通过沾取动物毛发或皮肤组织样本，用显微镜观察或进行分离培养来检测寄生虫的存在。
5. 分子生物学方法：包括PCR、实时定量PCR和基因测序等技术，可以用于检测动物体内的病原体DNA或RNA。
这些方法在诊断疾病、监测感染水平以及进行病原体基因型鉴定等方面具有高灵敏度和高特异性。
6. 组织学检查：对于一些疑难病例，可以通过组织学检查来确定疾病的诊断。
常用的方法包括组织切片染色和显微镜观察，可以帮助确定动物体内的病理变化和病因。
总之，动物检疫中的实验室检验方法丰富多样，根据需要选择合适的方法进行检测，以确保动物的健康和防控有害生物的传播。
这些检验方法的应用可以帮助监测和预防动物病原体的传播，保护人畜健康和农业生产安全。
常见寄生虫卵、包囊和幼虫的一般鉴定
Disease Control and Prevention疾病防控人们在对寄生虫、卵或包囊进行鉴定的时候，首先应学会区分寄生虫和假寄生虫（表面看起来相似但不相关的物体）。
蛔虫卵的卵壳厚，呈椭圆形至球形。
粪便中的线虫幼虫参照所寄生的宿主比较容易鉴定。
吸虫卵一般呈金黄色至暗褐色，一端有卵盖。
绦虫一般以节片形式随粪便排出。
棘头虫的虫卵呈长形，卵壳由三层组成。
1寄生虫与假寄生虫的比较在兽医临床上，首先必须学会区分寄生虫和表面看起来相似但不相关的物体，比如气泡、花粉颗粒、毛发、植物纤维、脂肪滴和真菌孢子。
假寄生虫的鉴定有时可说明宿主近期饮食的异常。
例如，在犬粪中发现了扩展莫尼茨绦虫的虫卵，那么就知道该犬最近吃了绵羊的粪便，因为扩展莫尼茨绦虫是绵羊的寄生虫，从来不在犬体内寄生。
实际上，因为扩展莫尼茨绦虫是绵羊体内真正的寄生虫，当其在犬粪中发现时应称为欺骗性寄生虫而不是假寄生虫，但是这种差异可能有点过于学术化。
在临床实践中，如果犬或猫的粪便中发现一个无法鉴定的目标，应给它们洗肠并限制活动24~36h，并再做一次粪便检查。
如果该虫体仍然存在，有可能就是寄生虫；但如果该虫体消失了，表明其可能是假寄生虫。
不要试图去鉴定显微镜视野里所有的物体，而要学会辨别真正的寄生虫，并忽视分散其中的不相关物体，这样做效率可能会更高。
然而，某些常见的物体通常形状也很规则。
在做寄生虫学检查时，粪便样品应该新鲜，注意不要被土壤或垫料污染。
2蛔虫卵的鉴定家畜的蛔虫卵一般卵壳厚，形状为椭圆形至球形。
某些蛔虫卵如鹰的前盲囊线虫的虫卵具有一个明显的卵盖。
随粪便排出时，卵内一般含有一个单细胞。
某些虫卵如弓蛔属、副蛔属和蛔属的虫卵，在其卵壳表面覆盖一层雌虫分泌的蛋白质外膜，该蛋白质层可能是光滑的，如弓蛔属虫卵；也可能是粗糙的，如副蛔属的虫卵；或者呈现均匀而独特的图案，如弓蛔属虫卵。
某些虫卵随粪便排泄过程中会被鞣化，呈现暗褐色，如蛔属和副蛔属。
这些物质有时可从卵壳上脱落，此时虫卵将呈现光滑的外壳。
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d)血吸虫(吸虫纲一多有腹背扁平,舌状 或叶状,有吸盘,雌雄异体,常见的有日本 血吸虫等。) 虫卵为椭圆形,淡黄色。大小约74106×55-80微米,卵壳较薄无盖,壳的一 侧有小棘,一般在镜下不易见到。成熟的 卵内含有一个毛蚴。
注意事项
1.高倍镜下观察必须加盖玻片；
2.采用直接涂片法时，不要涂得太多， 必须分散开，均匀； 3.观察寄生虫卵前，需在高倍镜下校对 目镜每格的长度，才能算出虫卵大小； 4.先在低倍镜下观察，发现后换为高倍 镜。
各种虫卵的区别形,大小约40-60微米(35-50×4576),卵壳的表面有一层凸凹不平的蛋白质膜,被胆汁 染成棕黄色,整个虫卵呈棕黄色。卵壳厚而透明。 卵内有一近圆形的卵细胞。 未受精卵多为长椭圆形,大小约40一60微米(3940×88-94),卵壳与蛋白质膜较薄,卵内充满大小不 等的屈光颗粒。 无论受精卵和未受精卵其蛋白质膜有时缺失,无 蛋白质膜的受精卵是无色透明,请注意与其它虫卵 的区别。
2)虫卵收集法 a. 沉淀集卵法:取粪便加适量清 水,混匀后过滤,重复数次至液体清亮为 止,静止沉淀十分钟后,取底部沉淀物作 镜检。此法适于检查血吸虫卵。 b.饱和盐水漂浮法:利用虫卵的比 重小于饱和盐水的原理,使线虫卵和几 种绦虫卵或包囊漂浮于液面上,提高检 查效果。
实验过程
1)自然感染蠕虫的调查 取猕猴粪便在盛有生理盐水的培养皿 中漂洗,直接查找寄生虫虫体和虫卵,根据虫 体和虫卵的形态,签别虫种。 2)直接涂片法或沉淀集卵法检查寄生虫卵 3)观察蛔虫、蛲虫、绦虫和血吸虫卵标本 装片 注意:观察各种虫卵的大小、形状、颜色、 卵膜结构等。
b)蛲虫(线虫纲：虫体细小,乳白色,似一白色 线头。)
虫卵为椭圆形,两侧不对称,一侧扁平,一侧 稍凸。大小约25-55微米(20-30×50-60),卵壳 较厚,无色透明,内含幼虫。
c)绦虫(绦虫纲：腹背扁平、带状、分节,雌雄 同体,常见的有链状带绦虫。)
虫卵近球形,较小,大小约45-70微米,虫卵自 孕节排出时卵壳己脱落,镜下所见是具胚膜的 六钩蚴,胚膜较厚,棕黄色有放射状的条纹。
目镜每格长度=
物镜格数×0.01㎜
目镜格数
实验报告
1)绘出镜下观察到的蛔虫、蛲虫、 绦虫和血吸虫卵。 2)概括总结蛔虫、蛲虫、绦虫 和血吸虫卵的形态区别要点。 3)在整过操作过程中的注意事项。
绦 虫 卵 示 意 图
实验内容
动物体内常见寄生虫 卵检查
实验目的
1)学习常见实验动物虫卵 标本的采集和检查方法。 2)学会对不同虫卵进行鉴 定。
检查方法
1)直接涂片法 包括粪便、血液、肠内容物等直接涂 片检查。
取一载玻片,在其上加一滴生理盐水,取 少许粪便或肠内容物与生理盐水混匀后， 在显微镜下观察。 血液可直接滴于载玻片上，制成涂片， 加盖玻片观察。