果蝇不同性状的观察

一、研究背景
果蝇（Drossphila）是遗传学试验中最常用的多年生物之一。

属昆虫纲，双翅目，果蝇科，果蝇属。

果蝇的染色体数目少（仅四对），具有许多自然的或诱发的可遗传突变性状，世代周期短（25℃下10~12天一代，个体小易于饲养，培养费用低廉，繁殖能力强，后代数目繁多，故被作为遗传学实验的典型模式生物。

后续实验要作果蝇的杂交实验，需要大量的果蝇，本次实验可以学会识别果蝇的各种形状、区分果蝇的性别以及基本的饲养方法，为后续的实验打下基础。

黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)，果蝇科(Drosophilidae)果蝇属(Drosophila)昆虫。

因其生活史短（在25℃左右温度下十天左右繁殖一代），繁殖力强（雌性可一次产下400个0.5毫米大小的卵），相对性状明显且可遗传，易于培养，培养成本低（酵母和细菌，腐烂水果），符合上述遗传学实验研究要求，同时因其染色体仅4对，基因组仅约165Mb，并且基因组超过60%的片段同人类疾病基因相似。

故已将其作为一种常见的模式生物(model organism）大量使用在遗传学(genetics)和发育生物学(developmental biology)的研究。

二、实验目的
三、1、了解果蝇生活史，观察各发育阶段的形态特征
四、2、掌握麻醉瓶的使用，即果蝇麻醉技术
五、3、学会用肉眼（或解剖镜、显微镜）识别果蝇的性别，以及几种果蝇的特征（大
小、形态、条纹、性梳和外生殖器等）；
六、4、了解实验室饲养果蝇的常识方法和所用器械
七、5、熟练观察果蝇几种突变性状，为果蝇杂交系列实验做准备。

八、实验器材
九、解剖镜、蓝色塑料板（10cm*10cm）一张、小毛笔、解剖针、麻醉瓶、培养皿、实
验室饲养的黑腹果蝇野生型及其突变体（在果蝇瓶，即指管内）、镊子、酒精灯
十、实验试剂
十一、乙醚、70%乙醇水溶液（含脱脂棉）
十二、
十三、实验步骤
十四、1、麻醉果蝇
十五、观察果蝇要先把果蝇麻醉，使之处于昏迷状态，便于观察。

具体步骤如下：
十六、
十七、（1）麻醉瓶灭菌
十八、用70%的酒精擦拭麻醉瓶内壁，用镊子夹着在酒精灯上方烤干，注意镊子应与麻醉瓶口大约成45°角，以免酒精高温产生的火舌产生伤害事件。

十九、原因：做果蝇杂交实验时，转移、分拣果蝇需要无菌处理，否则将影响果蝇瓶中酵母的生长，因而本次实验要求对其麻醉时需要灭菌。

二十、
二十一、（2）果蝇麻醉
二十二、将麻醉瓶冷却，用手背轻碰，直至不烫为止。

拿出培养瓶，轻拍使果蝇震落到培养基上。

拔掉培养瓶的塞子，迅速将培养瓶口倒扣在麻醉瓶口上。

向培养瓶瓶
塞中的棉团滴2至3滴乙醚，再次轻拍培养瓶，使果蝇掉入麻醉瓶内，当有足够
数量的果蝇落入麻醉瓶内时，重新盖上塞子。

部分果蝇向上爬，爬得越高摔得越
狠，因为离乙醚最近，便会被麻醉，片刻，果蝇纷纷掉落瓶底。

二十三、原因：果蝇被麻醉了
二十四、
二十五、2、果蝇的观察
二十六、将麻醉的果蝇置于解剖镜下，用小毛笔（最好不用解剖针）轻轻的拨动观察，
使其处于解剖镜下最合适的姿势
二十七、原因：果蝇很脆弱，解剖针会损害其身体结构
二十八、
二十九、（1）雌雄果蝇的辨别
三十、①大小雌果蝇通常比雄果蝇大
三十一、②形态雌体腹部稍尖，较宽厚呈卵圆形；雄体腹部钝圆，相对窄小呈柱状。

三十二、③条纹雌体腹部背面有宽窄相近的5条黑色条纹；雄体腹背只有3条，上部条窄，最后1条宽且延伸至腹部腹面，呈一明显黑斑。

三十三、④性梳果蝇胸足跗节共有5个亚节。

雄体第一对胸足跗节的第一亚节基部有一梳状黑色鬃毛结构，称谓“性梳”。

雌体没有性梳。

三十四、⑤生殖器雄体外生殖器色深，雌体色浅。

三十五、
三十七、附：
三十八、（一）注意事项
三十九、1、配制培养基时要将（玉米粉）及（琼脂和绵白糖）分开煮。

四十、2、转移果蝇时要防止果蝇飞走。

四十一、3、麻醉果蝇时要掌握麻醉尺度，需要用活体时，不可以麻醉过度使果蝇致死。

实验后不用的果蝇要及时处死，不可放飞。

四十二、4、防止事故发生（燃烧、爆炸、摔瓶等）
四十三、
四十四、（二）果蝇培养基的制备
四十五、玉米培养基配方：
四十六、A：糖6.2g，琼脂0.62g，水38ml，煮沸溶解；
四十七、B：玉米粉8.25g，水38ml。

煮沸溶解；
四十八、将A、B混合调制成糊状，加0.5ml丙酸，即可分装到灭菌的培养瓶中。

冷却
凝固后在表面撒少量酵母粉。

四十九、
五十、思考题
五十一、1.果蝇的生活史分几个阶段？
五十二、答：分为6个阶段。

五十三、以25℃为例，从卵开始约4至5天，变为一龄幼虫，再一天变为二龄幼虫，再一天变为三龄幼虫，紧接着一天变成蛹，经历3到4天成为成虫。

五十四、卵：卵白色，长椭圆形，长约0.5mm，在背面的前端伸出一对触丝，它能使卵附着在柔软的食物上，不至于深陷到食物中去。

五十五、幼虫：幼虫从卵中孵化出来后，经过两次蜕皮到第三龄期，体长可达4～5mm。

在解剖镜下观察可见一端稍尖为头部，并且有一黑点即口器；稍后有一对半透明的唾腺，每条唾腺前有一条唾腺管向前延伸，然后会合成一条导管通向消化道。

神经节位于消化道前端的上方。

五十六、蛹：幼虫生活四天左右即化蛹，化蛹前从培养基中爬出附在瓶壁上，渐次形成一个棱形的蛹。

起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化，变为深褐色，这就显示即将羽化了。

五十七、成虫：成虫的前8个小时内没有繁殖能力，因而找处女蝇应在这个时期。

之后成虫交配，又将经历新的一轮周期。

五十八、
五十九、2.你如何准确鉴定果蝇的雌雄个体？要领是什么？
六十、①大小雌果蝇通常比雄果蝇大
六十一、②形态雌体腹部稍尖，较宽厚呈卵圆形；雄体腹部钝圆，相对窄小呈柱状。

六十二、③条纹雌体腹部背面有宽窄相近的5条黑色条纹；雄体腹背只有3条，上部条窄，最后1条宽且延伸至腹部腹面，呈一明显黑斑。

六十三、④性梳果蝇胸足跗节共有5个亚节。

雄体第一对胸足跗节的第一亚节基部有一梳状黑色鬃毛结构，称谓“性梳”。

雌体没有性梳。

六十四、⑤生殖器雄体外生殖器色深，雌体色浅。

六十五、
六十六、3.将野生型和几种突变型性状观察的结果填表。

六十七、答：见上页表格
六十八、
六十九、4.为什么说果蝇是遗传学研究的好材料（或模式生物）？
七十、答：因为果蝇生活史短（在25℃左右温度下十天左右繁殖一代），繁殖力强（雌性可一次产下400个0.5毫米大小的卵），相对性状明显且可遗传，易于培养，培养成本低（酵母和细菌，腐烂水果），同时因其染色体仅4对，基因组仅约165Mb，并且基因组超过60%的片段同人类疾病基因相似。

七十一、果蝇自发或诱变的数量巨大。

基因及染色体的改变引起表型性状的改变。

我们主要观察果蝇的颜色，形状，翅的形状，翅脉的形态，刚毛的颜色、形态，平衡棒的大小、形态等方面的形状。

辨明各种形状，有利于我们正确选择亲本，准确地识别杂交后代中的不同子蝇的表型。

七十二、
七十三、讨论
七十四、在遗传学实验中总是可以看到许多意想不到的现象。

比如每种果蝇对麻醉剂的反应不同，所用乙醚剂量也不尽相同，这点以后在进行麻醉时应再查些资料，因材施加麻醉剂。

另外，在初次麻醉果蝇的时候时间过长，导致小半的果蝇都死亡了，这一点在以后的实验中需要注意。

七十五、
七十六、For personal use only in study and research; not for commercial use
七十七、。