水稻耐盐指标的测定方法
粳稻品种苗期耐盐指标分析及品种耐盐力鉴定
粳稻品种苗期耐盐指标分析及品种耐盐力鉴定索巍巍【摘要】为筛选水稻耐盐品种，以10个粳稻品种为试验对象，采用对比试验的方法，分析评价1.5%NaCl水溶液对粳稻苗期各项耐盐指标的影响。
耐盐指标综合分析结果表明：辽盐2号、辽粳9234、沈农9911、丰锦、辽盐糯的总体耐盐力较强；盐丰47、铁粳4号、沈农9816的总体耐盐力中等；一见钟情、松粳7号的总体耐盐力较低。
%For the screening of salt tolerant varieties of rice, 10 japonica varieties were used as the test objects, using a comparative test to analyze the influence of NaCl water solution of 150 mmol/L on salt tolerance indices of rice seedlings. Comprehensive analysis of the salt tolerance index shows that the salt tolerance of Liaoyan No.2, Liaojing 9234, Shennong 9911, Fengjin, Liao yannuo is relatively stronger while that of Yanfeng 47, Tiejing 4, Shennong 9816 is of medium level and the general salt tolerance of Songjing 7 is low.【期刊名称】《农业科技与装备》【年(卷),期】2014(000)003【总页数】3页(P1-3)【关键词】耐盐指标;粳稻;苗期;耐盐力;株高;总根长【作者】索巍巍【作者单位】辽宁省盐碱地利用研究所，辽宁盘锦 124010【正文语种】中文【中图分类】S511.2+2水稻是我国主要的粮食作物，但受盐侵害的稻田面积约占栽培面积的1/5，且有日益扩大的趋势。
水稻耐盐_碱性鉴定评价方法
水稻耐盐/ 碱性鉴定评价方法
祁栋灵1, 2, 韩龙植1 , 张三元3
( 1中国农业科学院作物品种资源研究所, 北京 100081; 2四川农业大学园艺系, 雅安 625014; 3吉林省农业科学院水稻研究所, 公主岭 136100)
摘要: 土壤盐/ 碱化是盐/ 碱稻作区水稻生产稳定发展的主要 限制因素。为 了提高水稻 耐盐/ 碱 性, 扩 大水稻种植 面积, 减 轻盐/ 碱胁迫导致的水稻减产, 许多学者广泛开展了水稻耐盐/ 碱 性的基因型差异、生理生 化、遗 传及定位 等研究, 并取得了 显 著成绩。但国内在耐 盐/ 碱性鉴定评价方法方 面还缺乏 统一标 准, 这影响 着水稻耐 盐/ 碱 性研究 的深入 开展。本文 阐述了 国 内外至今所采用的水稻耐盐/ 碱性鉴定方法、耐盐/ 碱指标 和分级 标准等, 以期 为我国 水稻耐 盐/ 碱性 鉴定评 价技术 规范的 制 定以及水稻耐盐/ 碱性种质资源鉴定、生理生化分析和遗传育种提供参考依据。
植物遗传资源学报
6卷
法[ 17, 18] 。芽期耐盐/ 碱性鉴定时, 对水稻种 子发芽 耐盐/ 碱胁迫处理所 用的溶液浓度一般为 210% 的 N aCl 溶液、30000mg/ kg 的 N a2CO3 溶液、处理时间 4~ 10 d。发芽期耐盐/ 碱鉴定一般将种子置于 45~ 50 e 恒温箱高温处理 48h, 以打破休眠。随 机挑选 饱满种子 50~ 100 粒, 均匀置于垫滤纸的培养皿中。 加入配好的盐/ 碱溶液浸泡, 盖好皿盖, 放入 30 e 恒 温箱里催芽, 每天用所配盐/ 碱溶液洗涤 1 次。盐/ 碱胁迫处理第 4d 和 10d, 以水稻种子的芽长等于种 子长度的一半, 根长等于种子长度为发芽标准[ 19] , 调查记载种子的发芽数。该方法常采用发芽势、发 芽率、发芽指数和相对盐/ 碱害率等指标来评价。其 中相对盐/ 碱害率是芽期耐盐/ 碱性鉴定中采用较多 的一种指标。根据相对受害率大小, 以 20% 的级差 分为 1~ 9 级进行评价, 分级标准见表 1[ 19, 20] 。上 述有关指标的计算方法如下。
水稻耐盐碱精准鉴定技术规程
水稻耐盐碱精准鉴定技术规程1范围本文件规定了水稻耐盐碱精准鉴定技术规程的术语和定义、环境条件、水稻育苗、盆栽移栽和管理、收获、耐盐碱指标调查和生产档案。
本文件适用于水稻耐盐碱精准鉴定及评价。
2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB3095环境空气质量标准GB5084农田灌溉水质标准GB/T4404.1粮食作物种子第1部分：禾谷类GB/T8321农药合理使用准则NY/T496肥料合理使用准则通则DB23/T020水稻生产技术规程DB23/T3222水稻耐盐碱性大田鉴定技术规程3环境条件环境空气质量应符合GB3095的规定，盆栽灌溉水质应符合GB5084的规定。
4水稻育苗4.1鉴定用水稻种子标准应符合GB/T4404.1的规定。
选择5份耐盐碱等级不同的水稻品种做确定标准的依据。
不同耐盐碱等级水稻模式参照品种见附件1。
4.2水稻育苗方法按照DB23/T020的规定执行。
5盆栽土配制5.1选择无农药残留的中重度盐碱土和黑土备用。
盐碱土宜选择8.5＜pH≤14.0，土壤表层0～20cm含盐量＞0.3%的中重度盐碱土；黑土宜选择6.0＜pH≤7.5。
盐碱土和黑土均用网眼0.3～0.5cm筛子筛一遍，分别充分混匀后备用。
5.2盆栽试验桶宜选择直径25～35cm底部无孔的塑料桶。
装土量为桶高度的2/3～3/4，每盆装入相同重量的土。
按照黑土与盐碱土比例分别为：10:0（CK）、9:1、8:2、7:3、6:4、5:5、4:6、3:7、2:8、1:9、0:10进行盆栽土配制，配制后的试验用土充分混合均匀。
6施肥每个盆栽桶加水到满桶，待水下渗后施入基肥，将肥料均匀搅拌到土壤中，施肥按照NY/T496的规定进行。
基肥和追肥的施用时期和数量按照DB23/T020规定执行。
水稻材料耐盐碱性大田鉴定技术规程
水稻材料耐盐碱性XX鉴定技术规程1范围本文件规定了水稻材料耐盐碱性XX鉴定技术规程的术语和定义、设备、水稻材料耐盐碱性XX鉴定、成熟期盐碱性指标调查及鉴定档案。
本文件适用于普通栽培稻（OryZaSaIiVaL）的耐盐性XX鉴定及评价。
2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款,其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T4404.1粮食作物种子第1部分：禾谷类GB/T8321（所有部分）农药合理使用准则NY/T1300农作物品种区域试验技术规范水稻NY/T496肥料合理使用准则通则NY/T499旋耕机作业质量NY/T501水田耕整机作业质量NY/T1276农药安全使用规范总则DB23/T020水稻生产技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
3. 1水稻耐盐碱性水稻耐受一定浓度盐碱胁迫的能力，用水稻耐盐碱指数进行综合判定。
3.2耐盐碱级别定量水稻材料对盐碱胁迫耐受能力的等级。
3.3耐盐碱指数评价水稻品种全生育期耐盐碱性强弱的指标，主要是成熟期耐盐碱指数。
耐盐碱指数=（对照处理小区产量一盐胁迫小区产量）/对照处理小区产量XlO0。
4. 设备盐份测定仪（电导率测量范围为0∙01μS∕cm~1000mS∕Cm）、酸碱性测定仪（PH仪测量范围：1~14）。
电子天平（测量范围：O.OOlg-l5Og）o5水稻材料耐盐碱性XX鉴定5. 1水稻育苗水稻育苗方法参照DB23/T020水稻生产技术规程。
6. 2XX选地盐碱地选择土壤9.02pH>8.5的水田地，土壤含盐量0.4%~0.6%的重度盐碱地，对照非盐碱地选择在同一积温带、同一生态类型区pHW7.5的水田地。
7. 3XX整地盐碱地应洗田1~2次。
洗盐碱时水层应没过空块，泡2~3天后排水。
经过洗盐碱使稻田水层降至PH≤8.0后施肥和耙地。
水稻耐盐碱鉴定标准评价及建议与展望_杨福 - 副本
植物遗传资源学报2011，12（4）：625-628，633Journal of Plant Genetic Resources水稻耐盐碱鉴定标准评价及建议与展望杨福，梁正伟，王志春（中国科学院东北地理与农业生态研究所，长春130012/中国大安碱地生态试验站，吉林大安131317）摘要：对国内外水稻耐盐碱鉴定评价标准进行了评述，指出目前采用的评价标准存在着对盐碱害判断不够全面、准确的问题，只适用对水稻进行生物耐盐力的鉴定，而不适合对水稻的农业耐盐力进行鉴定；提出了对水稻耐盐碱鉴定的标准品种、方法、鉴定胁迫浓度等进行改进的建议，强调对水稻进行全生育期的耐盐碱性鉴定。
关键词：水稻；盐碱；评价标准；改进Evaluation ，Suggestion and Prospect on IdentificationStandards of Saline-alkali Tolerance in RiceYANG Fu ，LIANG Zheng-wei ，WANG Zhi-chun（Northeast Institute of Geography and Agroecology ，Chinese academy of sciences ，Changchun 130012/Da ，an Sodic Land Experiment Station of China ，Da ，an ，Jilin 131317）Abstracts ：The identification standards of saline-alkali tolerance in rice were evaluated according to the resear-ches in both China and abroad．This study pointed out that the present adopted evaluation standards was inaccurate in distinguishing harms of salinity and alkalinity and they could only be used for the biological salt tolerance and could not be used for agricultural salt tolerance．Some suggestions on identification standards of rice saline-alkali tolerance in varieties ，methods and stress concentrations were also provided in this paper．The saline-alkali toler-ance abilities in the whole life cycle of rice should be emphasized in the future．Key words ：Rice ；Saline-alkalinity ；Evaluation standard ；Improvement 收稿日期：2010-10-19修回日期：2011-01-24基金项目：国家科技支撑计划项目（2009BADB3B03）；吉林省产业技术研究与开发专项（吉发改高技字【2007】1033号）；吉林省与中国科学院科技合作资金项目（2009SYHZ0022）作者简介：杨福，研究员，主要从事水稻新品种选育及耐盐碱机理研究。
几个水稻品种的耐盐性鉴定试验
区中的东营、 滨州等黄河三角洲地 区分布大面积 的盐碱地 ， 筛选并培育耐盐碱 品种对于 当地水稻
种 植具 有 重要 意义 。
１ 材 料 与 方 法
１ １ 供试 品 种 ．
料膜， 将土壤填 回试 验 田。５月 １ 日播种 ， ４ ６月 ２ 日插 秧 。 由于水稻 幼苗 期 的 耐盐 力 弱 ， 避免 ４ 为
全 全 全 碱 氮 速 磷 速 钾 有 质 Ｈ ± 查 ： 氮 磷 钾 解 效 效 机 信 簦重 ２
（ ｋ ｇｇ ｋ ｍ ｋ）ｍ ｋ）ｍ ｋ）（ｋ） ‘ ０ ０ ０ ２ ｇｇ ／ ）（ ｇ ｇ ｇ（ｇｇ（ｇ ｇ ｇ ｇ １ ， ）（ ｋ ）（ ／ ／ ／ ／ ｍ １ ０ ∞
Ｏ
０ ４ ．
１． ２ ４ ９
（ ｈ ｎｏｇＲｃ ｅｅｒｈＩｓｔｔ， ｉ ｎ２ ００ Ｃ ｉ ） Ｓ ａ ｄｎ ｉ Ｒｓａｃ ｔｕ Ｊｎ ５ １０， ｈｎ ｅ ｎｉ ｅ ａ ａ
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ｔ ｅ ｓ ｌ ｔｌｒ ｎ ｅ ｏ ｉ ｉ ｅ ｅ ｔｔｐ ｓ ｏ ｃ ａ ｅ ｉｓ ｆ ｍ ｉ ｅ ｅ ｔｒ ｇｏ ｓ ｗ ｒ ｄ ｎ ｉ ｅ ｓｒ ｃ ｈ ａｔ ｏ ｅ ａ ｃ ｆ ｘ ｄｆ ｒ ｎ ｙ ｅ ｆｒ ｅ ｖ ｒ ｔ ｒ ｄ ｆ ｒ ｎ ｅ ｉｎ ｅ ｅ ｉ ｅ ｔ ｄ ｓ ｆ ｉ ｉ ｅ ｏ ｆ ｉ ｆ ｂ ｄ ｉ ｇ ｓ ｌ ａｔ ｃａｌ ｎ ｔ ｅ ｅ ｐ ｒ ｎ ａ ａ ｍ ｆＳ ａ ｄ ｎ ｃ ｓ ａ ｃ ｎ ｔ ｕ ｅ ｈ ｅ ｄ ｏ ｄ ｒ ｔ ｙ ａ ｄ ｎ ａ ｔ ｒ ｆ ｉ ｌ ｉ ｈ ｘ ｅ ｍｅ ｔｌｆｒ ｏ ｈ ｎ ｏ ｇ Ｒｉｅ Ｒｅ ｅ ｒ ｈ Ｉ ｓ ｔ ｔ ．Ｔ ｅ ｆ ｌ ｆｍｏ ｅ ａｅ ｉ ｉ ｙ ｉ ｉ ｉ
水稻耐盐性基因的鉴定和功能分析
水稻耐盐性基因的鉴定和功能分析水稻是我国主要的农作物之一，而且是世界上最重要的粮食作物之一。
然而，随着气候变化和人口增长的压力，土地盐碱化问题越来越严重，给粮食作物的生产带来了很大的挑战。
水稻耐盐性是解决这个问题的关键，而水稻耐盐性基因的鉴定和功能分析对于培育抗盐水稻具有重要的意义。
1. 盐胁迫对水稻生长的影响盐胁迫是指土壤中钠离子或氯离子的浓度升高，导致水稻根部细胞内外离子浓度失衡，影响水稻的生长发育。
盐胁迫环境下，水稻的叶片会出现焦枯和黄化现象，表现为植株矮化、生长缓慢、减少叶面积、减少产量等。
2. 水稻耐盐性基因的鉴定水稻耐盐性基因的鉴定主要是通过转录组学和基因组学分析来实现的。
通过比较正常生长和盐胁迫下水稻基因的表达谱，找到在盐胁迫环境下高表达的基因。
这种方法可以鉴定出许多具有耐盐抗旱功能的基因，包括转录因子、膜通道、信号传导和抗氧化等基因。
3. 水稻耐盐性基因的功能分析在水稻耐盐性基因鉴定的基础上，还需进行对功能的研究以便深入了解基因的功能和调节机制。
水稻耐盐性基因功能分析方法主要有四种：鉴定突变型、过量表达、RNAi抑制和信使RNA互换。
通过这些方法，可以深入了解相应基因对水稻耐盐性的作用机制，同时也为培育更加耐盐的水稻品种提供了重要合理的科学依据。
4. 未来的研究方向虽然这项研究已经有了一定成果，但是也有一些问题需要我们克服。
未来研究的重点应该放在以下几个方面：(1)深入探究水稻极端干旱或盐碱胁迫下基因调控机制。
(2)深入研究水稻耐盐、抗逆基因网络，重点解决调控机制不明、作用机理不详等难题。
(3)通过编辑基因工艺，将水稻抗旱、耐盐、抗病等基因直接注入水稻中，进一步提高水稻的抗逆性。
(4)推广高产、耐盐的水稻种质资源，缓解全球粮食危机。
总之，水稻耐盐性基因的鉴定和功能分析对于培育抗盐水稻和增加粮食产量具有重要的意义，未来的研究应该更加深入和系统，通过多个渠道不断推进水稻品种的改良和提高，为粮食生产做出贡献。
几个水稻品种的耐盐性鉴定试验_孙公臣
摘 要：选用不同类型和地区的 6 个水稻品种在大田条件下人工加盐进行品种耐盐性试验。结果表明， 可能的耐盐能力为 IR36 ＜ R998 ＜ 辽粳杂 ＜ 圣稻 14 ＜ 汉盐优 1 号 ＜ 扬两优 6 号。
关键词：水稻； 耐盐性； 鉴定试验 中图分类号：S511. 037 文献标识号：A 文章编号：1001 － 4942（ 2011） 0 共 6 个： IR36（ 籼稻，引自国际水稻研究所） 、
R998（ 籼稻，由深圳绿源生物公司提供） 、辽粳杂 （ 杂交粳稻，由辽宁省农业科学院稻作所提供） 、 圣稻 14（ 粳稻，山东省水稻研究所提供） 、汉盐优 1 号（ 杂交籼稻，由陕西省农业科学院水稻研究所 提供） 、扬两优 6 号（ 杂交籼稻，由扬州市农业科 学研究所提供） 。 1. 2 试验设计
DOI:10.14083/j.issn.1001-4942.2011.06.019
山 东 农 业 科 学 2011，6： 24 ～ 25，29
Shandong Agricultural Sciences
几个水稻品种的耐盐性鉴定试验
孙公臣，赵庆雷，陈 峰，张士永，朱文银，朱其松，杨连群*
（ 山东省水稻研究所，山东 济南 250100）
34 85． 0 2 5． 0
8 20． 0
汉盐优 1 号 36 90． 0
38 95． 0 32 80． 0
38 95． 0 26 65． 0
36 90． 0 4 10． 0
9 22． 5
扬两优 6 号 40 100
39 97． 5 35 87． 5
39 97． 5 28 70． 0
37 92． 5 9 22． 5
2 结果与分析
2. 1 不同品种的秧苗素质 表 3 结果表明，移栽前秧苗素质较好。
水稻耐盐性和抗旱性候选基因的筛选和功能鉴定
水稻耐盐性和抗旱性候选基因的筛选和功能鉴定水稻是世界上最受欢迎和重要的食物作物之一，但是全球气候变化带来的高温、干旱和盐碱化等问题给水稻生产带来了很大的挑战。
因此，寻找耐盐和抗旱的水稻品种成为了近年来许多科研工作者的关注点。
这其中，对水稻耐盐性和抗旱性候选基因的筛选和功能鉴定尤为重要。
一、水稻盐碱胁迫和水分胁迫对生长发育的影响盐碱化是指土壤中含有过量的盐分及钠离子，这会对水稻的生长发育造成不利影响。
角叉菜素的积累使得细胞内钾离子和钙离子水平下降，细胞质膨胀基本停止并导致细胞的活性下降，影响根吸收水分和养分、进行气体交换和水分输导。
水分胁迫则指土壤中水分严重不足导致植物生长发育停滞。
长时间水分胁迫会影响水稻植株的代谢过程，导致植物的死亡和产量的下降。
二、水稻耐盐基因的筛选耐盐基因的筛选通常会经过多步骤，包括对水稻种质的选择，产生转化水稻基因工程的材料，以及进行基因转化等。
在这里，我们可以通过PCR技术、基因芯片等高通量技术来快速鉴定诸如Na+/H+和K+/Na+等离子转运基因、钾膜转运基因、糖脯氨酸代谢相关基因等与耐盐性相关的基因。
三、水稻抗旱基因的筛选抗旱基因的筛选同样需要多步骤，包括对水稻种质的选择，在不同水分胁迫环境下筛选出“抗旱型”材料，进行基因定位和克隆等。
基于RNA测序和DNA芯片技术的转录组学和代谢组学技术可以广泛应用于水稻抗旱基因筛选的过程。
例如通过比较受胁迫和未受胁迫的样品之间的转录组差异得到抗旱基因的筛选结果。
四、水稻耐盐基因的功能鉴定功能鉴定是为了确定基因是否与特定的生物学特征相关。
基于基因克隆技术，通常会将某些耐盐基因进行克隆和表达，进而转入水稻材料进行转化。
之后，我们可以通过形态学和生理学对转化水稻进行发育和响应盐碱胁迫的观察，可以发现盐胁迫时，转化水稻有较强的生长能力。
此外，我们还可以利用CRISPR/Cas9等基因编辑技术，剔除某些耐盐基因后观察生长发育和胁迫响应，来进一步验证这些基因是否与耐盐性有关。
旱稻种质资源的耐盐性鉴定评价
旱稻种质资源的耐盐性鉴定评价造成土壤盐碱化的原因有很多，其中一种主要的原因是灌溉水中含有过多的盐分，导致土壤盐分积累过高。
盐碱土壤的存在严重限制了农作物的种植和发展。
对于旱稻种质资源的耐盐性评价，既可以为盐碱地上的农田选择耐盐稻种提供参考，又可以帮助研究人员深入了解旱稻的耐盐机制，为品种改良提供基础。
一、耐盐性评价的方法1.田间鉴定：田间鉴定是对旱稻品种在盐碱土壤上的适应性进行评价。
可以将不同品种的旱稻分别种植在盐碱土壤和正常土壤中，通过观察旱稻的生长状况、产量和品质等指标来评价其耐盐性。
2.室内鉴定：室内鉴定是通过模拟盐碱环境，以浸种或种子萌发等方式进行耐盐性评价。
具体操作可以采用浸种法、溶液培养法、萌发试验等方法来评价旱稻的耐盐性。
通过观察旱稻种子的发芽率、幼苗的生长状况等指标来评价其耐盐性。
二、耐盐性评价的指标对于旱稻种质资源的耐盐性评价，可以从生物学性状、形态性状、生理性状和分子生物学性状等多个方面进行评价。
1.生物学性状：评价旱稻种质资源的生物学性状，可以包括旱稻的生长状态、株高、叶片颜色、茎粗、穗长度和耐倒伏性等指标。
通过对比不同品种在盐碱土壤和正常土壤中的差异，来评价旱稻的耐盐性。
2.形态性状：评价旱稻种质资源的形态性状，可以包括旱稻的叶片形态、根系发育情况、根长、根重和根毛密度等指标。
通过观察这些形态性状的差异，来评价旱稻的耐盐性。
3.生理性状：评价旱稻种质资源的生理性状，可以包括旱稻的叶绿素含量、气孔导度、光合速率和叶片电导率等指标。
通过测试这些生理性状的差异，来评价旱稻的耐盐性。
4.分子生物学性状：通过分析旱稻种质资源在盐胁迫下的基因表达谱，可以研究旱稻的耐盐基因。
通过检测旱稻种质资源的脱落酸（ABA）含量、活性氧（ROS）含量和抗氧化酶活性等指标，来评价旱稻的耐盐性。
三、旱稻种质资源耐盐性的评价结果及应用通过耐盐性评价，可以筛选出具有较强耐盐性的旱稻品种，并进一步研究其耐盐机制。
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一、相对电导率的测定
1.4转基因植株相对电导率测定（南京农业大学王景艳）
将新鲜的对照及转化植株烟草叶片用300mmol/LNaCI胁迫处理4h,分别称取.02g各两份,各加5ml超纯水,用DDs一12数字电导仪测定电导率(所用的电极参数为.095)(RC),之后再放入沸水中煮沸15min以杀死植物组织,取出放在自来水中冷却10min,测定其煮沸电导率扭(Rc’),相对电导率为Rc/R c’xloo%(汤章成,1999).
2.8相对电导率的测定方法(湖南农业大学张亚州)
取相同部位的转基因植株叶片和非转基因植株叶片,用去离子水冲洗,再用洁净滤纸吸干表面水分"用剪刀剪成大小基本一致的叶片,各40片,分装在两个大试管中,每管20片，然后在装有叶片的试管中各加入20mL的去离子水,放入真空干燥箱中用真空泵抽气lh以抽出细胞间隙的空气或放在摇床上摇动3h使叶片沉入水底，然后将上述试管置室温放lh,期间不断摇动。
lh后用电导仪测其初电导值(S1).测毕将各试管放入沸水浴中,以杀死植物组织.取出试管后用自来水冷却至室温,摇匀,测其终电导值(52).计算公式:相对电导率L=S,/52.
二、脯氨酸含量的测定
1、（华中农业大学万丙良）
游离脯氨酸含量的测定采用磺基水杨酸提取法。
分别取0.5g新鲜叶片,加少量(2-3ml)3%磺基水杨酸研磨,磺基水杨酸最终体积为5ml.转入离心管中,沸水浴中提取10min。
冷却后以3000rpm离心10min,取上清液待测。
取2ml上清液,加2ml冰乙酸,2ml茚三酮,混匀后沸水显色60min,取出冷却后用4ml甲苯萃取,静置片刻,取甲苯相(粉红色)于离心管。
3000rpm离心5min,然后在520nm波长处测定OD值.以甲苯为空白对照,在1-6µg/ml范围内作标准曲线。
2、华中农业大学彭英
胁迫处理后第4d取苗5株，-80℃保存以备测定叶片脯氨酸含量。
脯氨酸含量测定按照Bates(1973)的方法稍作改动。
称取约0.3g~0.5g的水稻叶片加入5ml3%磺基水杨酸溶液,冰浴研磨至匀浆,13000r/min4℃离心15min；吸取2ml上清液加入2ml冰乙酸和2ml2.5%酸性茚三酮(l..25g茚三酮溶于30ml冰乙酸和20ml6mol/L磷酸)显色液,沸水浴加热lh;置于冰上30min 终止反应;加入4ml甲苯后剧烈振荡数秒后,待分层后吸取红色萃取液,测定520nm处吸收值。
以纯L一脯氨酸(AJINOMoTO)制作0-10µg/mL的标准曲线。