实验四--斐林试剂法法测定还原糖含量(1)

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综合实验之生物制品分析检测

综合实验之生物制品分析检测

综合实验之生物制品分析检测实验一:斐林试剂置换法测定还原糖的含量一、实验原理:糖类包括多糖、双糖和单糖,其中单糖和某些双糖具有游离的羰基,称为还原糖,多糖和蔗糖无还原性。

利用糖的还原性,与斐林试剂(氧化剂)中的二价铜离子还原为一价铜,进行氧化还原反应,而进行测定.非还原糖必须转化为还原糖,再进行测定。

斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂,反应的终点可用次甲基蓝作指示剂,在碱性、沸腾环境下还原呈无色。

根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量,计算出样品还原糖量。

二、试剂与材料:1、试剂:菲林试剂甲液:称取69.3g硫酸铜晶体,用蒸馏水溶解,定容至1000ml菲林试剂乙液:称取346g酒石酸钾钠,100g氢氧化钠,用蒸馏水溶解定容至1000ml2、1%次甲基蓝溶液:1g次甲基蓝溶于100ml水3、0.2%标准葡萄糖溶液:2g葡萄糖105℃烘干到恒重加水到1000ml4、碱式滴定管5、样品溶液:待测葡萄糖溶液样品1:稀释20倍,样品2:稀释50倍6、电炉三、操作方法:1、斐林试剂标定A 取甲液5ml+乙液5ml,(注意:甲液与乙液混合可生成氧化亚铜沉淀,应将甲液加入乙液,使开始生成的氧化亚铜沉淀重溶)置于250ml三角瓶中,加入10ml水,并从滴定管中加入0.2%的标准葡萄糖溶液若干毫升(约23ml)。

(量控制在后滴定时消耗葡萄糖液在0.5-1.0ml)B 电炉上加热至沸,并保持微沸2分钟,加2滴1%次甲基蓝溶液,趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液用0.2%标准葡萄糖液滴定至蓝色消失,有红棕色沉淀,溶液清亮为终点止。

记录耗用的葡萄糖液量为V0,必须在1min内完成。

注意:还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化,恢复成原来的蓝色,所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态,并且避免滴定时间过长。

2、定糖预备试验同1法取斐林试剂,加10ml样品液,摇匀于电炉上加热至沸,保持微沸2分钟,加2滴1%次甲基蓝,用0.2%葡萄糖液滴定至蓝色消失。

生物_还原糖实验报告

生物_还原糖实验报告

一、实验目的1. 了解还原糖的概念及其在生物体内的作用。

2. 掌握还原糖的鉴定方法,通过实验验证还原糖的存在。

3. 熟悉实验操作步骤,提高实验技能。

二、实验原理还原糖是指含有游离醛基或酮基的糖类,它们具有还原性,可以将某些金属离子还原成低价态。

在生物体内,还原糖是重要的能量来源之一。

本实验采用斐林试剂法进行还原糖的鉴定。

斐林试剂由甲液(质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液)和乙液(质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液)组成。

在碱性条件下,斐林试剂与还原糖发生反应,生成砖红色的氧化亚铜沉淀。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 梨汁、苹果汁、蔗糖溶液、淀粉溶液、葡萄糖溶液等。

- 斐林试剂甲液、乙液。

- 蒸馏水。

- 试管、试管架、烧杯、滴管、酒精灯、石棉网等。

2. 实验仪器:- 研钵及研杵。

- 显微镜。

四、实验步骤1. 制备样液:分别取梨汁、苹果汁、蔗糖溶液、淀粉溶液、葡萄糖溶液各2mL,分别注入试管中。

2. 配制斐林试剂:- 甲液:取0.1g/mL的NaOH溶液1mL,加入蒸馏水至10mL。

- 乙液:取0.05g/mL的CuSO4溶液1mL,加入蒸馏水至10mL。

3. 滴加斐林试剂:向各试管中分别加入斐林试剂甲液1mL和乙液1mL,振荡均匀。

4. 水浴加热:将各试管放入烧杯中,用酒精灯加热至沸腾,保持沸腾状态2分钟。

5. 观察现象:观察各试管中的颜色变化,记录实验结果。

五、实验结果与分析1. 梨汁、苹果汁、葡萄糖溶液中出现砖红色沉淀,说明这些溶液中含有还原糖。

2. 蔗糖溶液和淀粉溶液中未出现砖红色沉淀,说明这些溶液中不含还原糖。

六、讨论1. 斐林试剂法是一种常用的还原糖鉴定方法,具有操作简便、结果直观等优点。

2. 本实验结果表明,梨汁、苹果汁、葡萄糖溶液中含有还原糖,而蔗糖溶液和淀粉溶液中不含还原糖。

3. 还原糖在生物体内具有重要的生理作用,如能量供应、细胞信号传导等。

七、实验总结本次实验成功鉴定了梨汁、苹果汁、葡萄糖溶液中的还原糖,验证了斐林试剂法的可靠性。

马铃薯块茎中还原糖测定的一种方法

马铃薯块茎中还原糖测定的一种方法

马铃薯块茎中还原糖测定的一种方法下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。

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还原糖的测定实验报告

还原糖的测定实验报告

1. 了解还原糖的性质和鉴定方法。

2. 掌握使用斐林试剂检测还原糖的原理和操作步骤。

3. 学习通过比色法计算还原糖的含量。

二、实验原理还原糖是指含有游离醛基或酮基的糖类,它们能够还原斐林试剂中的Cu²⁺离子为Cu⁺离子,生成砖红色的Cu₂O沉淀。

斐林试剂由斐林A液(含CuSO₄的碱性溶液)和斐林B液(含NaOH的碱性溶液)组成,两种试剂混合后,Cu²⁺离子与还原糖反应生成Cu₂O沉淀。

三、实验材料与试剂1. 试剂:- 斐林A液:称取硫酸铜(CuSO₄·5H₂O)0.1g,溶于100mL水中,加入5mL浓NaOH溶液。

- 斐林B液:称取NaOH 2g,溶于100mL水中。

- 标准葡萄糖溶液:准确称取葡萄糖1.0000g,溶于1000mL水中,配制成1mg/mL的标准溶液。

- 样品溶液:取一定量的待测样品,用蒸馏水溶解并定容至一定体积。

2. 仪器:- 烧杯- 试管- 滴定管- 移液管- 移液器- 恒温水浴锅- 移液管1. 准备标准溶液:准确移取1mL标准葡萄糖溶液,加入9mL蒸馏水,配制成0.1mg/mL的标准溶液。

2. 配制斐林试剂:将斐林A液和斐林B液等体积混合,立即使用。

3. 取一支试管,加入2mL样品溶液。

4. 加入2mL斐林试剂,混合均匀。

5. 将试管放入恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态5分钟。

6. 取出试管,观察沉淀颜色。

7. 重复步骤3-6,制作标准曲线。

8. 根据标准曲线,计算样品溶液中还原糖的含量。

五、实验结果与分析1. 标准曲线的制作:以标准葡萄糖溶液浓度为横坐标,沉淀颜色深浅为纵坐标,绘制标准曲线。

2. 样品溶液中还原糖含量的计算:根据样品溶液的浓度和沉淀颜色深浅,在标准曲线上找到对应的还原糖含量。

六、实验讨论1. 实验过程中,斐林试剂需现配现用,以免Cu²⁺离子被还原成Cu⁺离子,影响实验结果。

2. 样品溶液的浓度应控制在一定范围内,以免沉淀颜色过深,影响准确度。

还原糖的测定实验报告[生物化学实验报告]

还原糖的测定实验报告[生物化学实验报告]

还原糖的测定实验报告[生物化学实验报告]实验一糖类的性质实验〔一〕糖类的颜色反响一、实验目的1、了解糖类某些颜色反响的原理。

2、学习应用糖的颜色反响鉴别糖类的方法。

二、颜色反响〔一〕α-萘酚反响1、原理糖在浓无机酸〔硫酸、盐酸〕作用下,脱水生成糠醛及糠醛衍生物,后者能与α-萘酚生成紫红色物质。

因为糠醛及糠醛衍生物对此反响均呈阳性,故此反响不是糖类的特异反响。

2、器材试管及试管架,滴管3、试剂莫氏试剂:5%α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g,溶于95%酒精中,总体积达100mL,贮于棕色瓶内。

用前配制。

1%葡萄糖溶液100mL1%果糖溶液100mL1%蔗糖溶液100mL1%淀粉溶液100mL0.1%糠醛溶液100mL浓硫酸500mL4、实验操作取5支试管,分别参加1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、0.1%糠醛溶液各1mL。

再向5支试管中各参加2滴莫氏试剂,充分混合。

倾斜试管,小心地沿试管壁参加浓硫酸1mL,慢慢立起试管,切勿摇动。

观察记录各管颜色。

〔二〕间苯二酚反响1、原理在酸作用下,酮醣脱水生成羟甲基糠醛,后者再与间苯二酚作用生成红色物质。

此反响是酮醣的特异反响。

醛糖在同样条件下呈色反响缓慢,只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反响。

实验条件下蔗醣有可能水解而呈阳性反响。

2、器材试管及试管架,滴管3、试剂塞氏试剂:0.05%间苯二酚-盐酸溶液1000mL,称取间苯二酚0.05g 溶于30mL浓盐酸中,再用蒸馏水稀至1000mL。

1%葡萄糖溶液100mL1%果糖溶液100mL1%蔗糖溶液100mL4、实验操作取3试管,分别参加1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液各0.5mL。

再向3支试管中各参加塞氏试剂5mL,充分混合。

将试管同时放入沸水浴中,观察记录各管颜色。

(二)糖类的复原作用一、实验目的1、理解并掌握糖类的复原性质;2、学习常用的鉴定糖类复原性的方法。

食品中还原糖的测定实验报告

食品中还原糖的测定实验报告

一、实验目的1. 掌握食品中还原糖的测定方法。

2. 了解还原糖在食品中的分布和作用。

3. 通过实验,提高实验操作技能和数据分析能力。

二、实验原理还原糖是指具有还原性的糖类,包括葡萄糖、果糖、麦芽糖等。

在碱性条件下,还原糖能够将斐林试剂中的铜离子还原成氧化亚铜,生成砖红色的沉淀。

根据沉淀颜色的深浅,可以判断食品中还原糖的含量。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 食品样品(如水果、蔬菜、糖果等)- 斐林试剂- 氢氧化钠溶液- 硫酸铜溶液- 蒸馏水- 试管- 烧杯- 滴管- 移液器- 电子天平2. 实验仪器:- 紫外可见分光光度计- 恒温水浴锅- 移液器- 试管架四、实验步骤1. 准备斐林试剂:将硫酸铜溶液和氢氧化钠溶液按比例混合,配制成斐林试剂。

2. 称取一定量的食品样品,加入蒸馏水,充分溶解。

3. 取少量溶液,加入斐林试剂,混合均匀。

4. 将混合溶液放入恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态5分钟。

5. 取出混合溶液,观察沉淀颜色,并与标准比色卡进行对比。

6. 记录食品样品中还原糖的含量。

五、实验结果与分析1. 实验结果:| 食品样品 | 还原糖含量(%) || :-------: | :-------------: || 甜橙 | 6.5 || 苹果 | 4.2 || 红糖 | 99.8 || 白砂糖 | 0.2 |2. 结果分析:从实验结果可以看出,甜橙和苹果中含有一定量的还原糖,而红糖和白砂糖中的还原糖含量较高。

这可能与食品的来源和加工过程有关。

六、实验讨论1. 实验过程中,应注意控制实验条件,如温度、时间等,以保证实验结果的准确性。

2. 斐林试剂的配制和使用过程中,应注意避免交叉污染,以保证实验结果的可靠性。

3. 实验结果受多种因素影响,如食品样品的来源、处理方法等,因此在实际应用中,应结合具体情况进行分析。

七、实验结论通过本次实验,我们掌握了食品中还原糖的测定方法,了解了还原糖在食品中的分布和作用。

菲林试剂

斐林试剂法测定还原糖的含量
一、实验原理
还原糖可以将二价铜离子还原成为一价铜。

反应终点可以由次甲基蓝指示,根据一定量的菲林试剂完全还原所需的还原糖量,可以计算加入样品中还原糖的含量。

二、实验器材
①菲林试剂
甲液:称取15.0g硫酸铜(CuSO4·5H2O),0.05克四甲基蓝,用水溶解并稀释到1000ml.
乙液:称取50.0g酒石酸钾钠,75g的氢氧化钠,4.0g的亚铁氰化钾,用水溶解并稀释到1000ml。

② 0.10%标准葡萄糖溶液:精密称取1.000g经95~105℃烘干的无水葡萄糖,用少量水溶解,移入1000ml容量瓶中,加入5ml盐酸,用水稀释到刻度,摇匀。

③滴定管、电炉、锥形瓶等。

三、实验步骤
1.样品溶液的配备
称取样品—mg,稀释后在100ml容量瓶定容。

2.菲林试剂的标定
准确吸取菲林甲乙液各5.00ml,置入150ml的锥形瓶,加水10ml,从滴定管中预先加入约10ml 0.1%的标准葡萄糖液,(用量控制在后滴定消耗0.10%标准葡萄糖1ml以内),摇匀,电炉上加热使其在2min内沸腾。

沸腾状态下以每2s/滴的速度滴入标准葡萄糖溶液,至蓝色刚好消失为终点,记录前后总共消耗的标准葡萄糖溶液的总体积Vo。

同法平行操作三份,取接近的两次体积的平均值。

3.预备实验
准确吸取菲林甲乙液各5.00ml,置入150ml的锥形瓶,加水10ml,加玻璃珠3粒。

电炉上加热使其在2min内沸腾,准备沸腾30s,趁沸以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品液(需始终保持溶液的沸腾状态)待溶液蓝色变浅时,以每2s/滴的速度滴入样品,至蓝色刚好消失为终点,记录消耗溶液的体积V1。

《还原糖的测定方法国标》

《还原糖的测定方法_国标》还原糖的测定方法_国标一、范围本标准规定了用斐林试剂比色法测定试样中还原糖的含量。

本标准适用于所有食物样品中还原糖的测定。

二、原理还原糖与斐林试剂在加热条件下生成砖红色沉淀,通过与标准曲线对比,可以得出样品中还原糖的含量。

三、试剂和材料斐林试剂:甲液(称取14.3g硫酸铜(CuSO4·5H2O)和0.05g次甲基蓝(C13H16N3OClS)溶于水中,定容至100ml)、乙液(称取173g酒石酸钾钠(C4H4O6NaK·4H2O)和50g氢氧化钠溶于水中,定容至500ml)。

使用时将甲液、乙液等体积混合。

四、仪器和设备1.实验室用粉碎机2.水浴锅3.消煮炉或普通炉灶(能调节温度)4.容量瓶(100ml)5.移液管(10ml)6.比色管(10ml)7.试管(25ml)8.三角瓶(250ml)9.定时钟五、样品制备1.固体样品:取样品适量,用粉碎机粉碎,然后称取约0.2g样品置于试管中。

2.液体样品:直接取适量样品置于试管中。

3.在每个试管中加入4ml斐林试剂,充分混匀后静置10min。

4.将试管中的溶液倒入三角瓶中,加入约80ml水稀释,加热至沸后保持1min。

5.用移液管向每个试管中加入1ml样液,摇匀后置于试管架上。

6.在温度达到要求时将试管放入水浴中加热,同时开启计时器。

当时间达到要求时立即取出试管,用自来水冷却至室温。

7.将冷却后的溶液用移液管倒入比色管中,再加入约1ml的样液摇匀。

8.将比色管置于比色槽中,与标准曲线进行比色,得出样品的含量。

9.将整个测定过程中每个环节的时间、温度等条件记录下来,以便后续分析。

六、结果分析通过与标准曲线对比,可以得出样品中还原糖的含量。

计算公式为:含量=测定管吸光度÷校准管吸光度×标准品浓度。

其中吸光度需要在一定波长下测定。

同时需要注意实验过程中操作条件的控制,以保证结果的准确性。

如果操作条件不稳定或样品复杂性较高,需要进行适当调整或采取其他适合的方法进行测定。

实验报告还原糖测定(3篇)

第1篇一、实验目的1. 学习还原糖的检测原理和方法。

2. 掌握斐林试剂的使用方法。

3. 通过实验了解还原糖在食品、生物样品中的应用。

二、实验原理还原糖是指在水溶液中能将斐林试剂还原成砖红色沉淀的糖类物质。

斐林试剂是一种含有CuSO4和NaOH的混合溶液,在加热条件下,Cu2+被还原成Cu2O,形成砖红色沉淀。

还原糖与斐林试剂反应,生成砖红色沉淀的多少与还原糖的浓度成正比。

三、实验材料1. 试剂:斐林试剂、NaOH溶液、CuSO4溶液、葡萄糖标准溶液、蒸馏水。

2. 仪器:试管、试管架、酒精灯、恒温水浴锅、移液器、滴定管。

四、实验步骤1. 准备斐林试剂:将CuSO4溶液和NaOH溶液按1:9的比例混合,现配现用。

2. 配制葡萄糖标准溶液:准确称取1.0g葡萄糖,用蒸馏水溶解并定容至100ml,配制成10mg/ml的葡萄糖标准溶液。

3. 样品处理:准确称取待测样品0.1g,用蒸馏水溶解并定容至10ml,配制成0.01mg/ml的样品溶液。

4. 实验步骤:a. 取一支试管,加入1ml斐林试剂;b. 取另一支试管,加入1ml样品溶液;c. 将两支试管同时放入恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态2分钟;d. 观察颜色变化,记录结果。

5. 结果处理:a. 将实验结果与葡萄糖标准溶液进行对照;b. 计算样品中还原糖的浓度。

五、实验结果与分析1. 实验结果:样品溶液加入斐林试剂后,加热至沸腾,观察到样品溶液变为浅蓝色,随后逐渐变为棕色,最终形成砖红色沉淀。

2. 结果分析:根据实验结果,样品溶液中加入斐林试剂后,发生了还原反应,生成了砖红色沉淀。

这说明样品中含有还原糖,且其浓度与斐林试剂反应生成的沉淀量成正比。

六、实验讨论1. 实验过程中,样品溶液加热至沸腾时,需保持沸腾状态2分钟,以确保还原糖与斐林试剂充分反应。

2. 实验结果中,样品溶液的颜色变化过程为浅蓝色→棕色→砖红色沉淀,说明还原糖在加热条件下,与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。

还原糖测定(斐林法)

还原糖的鉴定(斐林试剂法)一、实训目的:1、掌握斐林试剂的配制2、掌握以斐林试剂鉴定还原糖的方法二、基本原理还原糖可以将斐林试剂中的二价铜离子还原为一价铜离子,反应终点可以由次甲基兰指示(蓝色消失形成砖红色),根据一定量的斐林试剂完全还原所需的还原糖量,可计算加入样品中的还原糖的含量。

三、试剂和仪器1、试剂(1)斐林试剂甲液:称取7.5g CuSO4,0.025g次甲基蓝,用蒸馏水溶解,定容至500ml(2)斐林试剂乙液:称取25g酒石酸钾钠,27g NaOH,2g 亚铁氰化钾,用蒸馏水溶解,定容至500ml(3)0.1%标准葡萄糖溶液:准确称取干燥至恒重的葡萄糖1.00 g,用少量蒸馏水溶解后加入8 ml盐酸,再用蒸馏水定容至1000 ml(4)淀粉2、玻璃器材:三角瓶、容量瓶、酸式滴定管、烧杯等3、仪器:天平、恒温水浴锅、电炉、石棉网、滤纸等四、操作步骤1、待测糖液制备:(1)淀粉液(还原糖液)制备:称取2.00 g淀粉,在烧杯中用少量蒸馏水调面糊状,再加入约70 ml水,于50℃下保温15 min,取出后用蒸馏水定容至100ml,经过滤,取滤液用于还原糖测定。

(2)蔗糖液制备:称取2.00 g蔗糖代替淀粉,重复上述步骤2、还原糖鉴定(1)空白:250 ml三角瓶中加入斐林试剂甲、乙液各5 ml,加蒸馏水5 ml,加热至沸腾,用酸式滴定管连续滴加标准葡萄糖溶液,直到蓝色消失出现土黄色停止滴定(2 min内完成)。

记录滴定用去G溶液用量V0。

注:若三角瓶离开电炉后又出现蓝色,不能再继续滴定。

(2)还原糖测定:分别用5 ml淀粉液、5 ml蔗糖液代替蒸馏水重复上述实验。

记录滴定用去G溶液用量V。

五、结果计算:还原糖含量(以葡萄糖计)=(V0-V)×标准G浓度×稀释倍数÷样品质量(g)思考:蔗糖是还原糖吗?淀粉有还原性吗?。

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实验四斐林试剂法测定果品蔬菜中还原糖含量
一、实验目的:
掌握园艺产品中糖的测定方法。

二、实验原理
利用糖的还原性,与斐林试剂(氧化剂)中的二价铜离子还原为一价铜,进行氧化还原反应,而进行测定。

非还原糖必须转化为还原糖,再进行测定。

斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂,反应的终点可用次甲基蓝作指示剂,在碱性、沸腾环境下还原呈无色。

根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量,计算出样品还原糖量。

三、试剂与材料
1、斐林试剂
甲:69.3g CuSO4.5H2O加水溶解并定容至1000ml;
乙:346g酒石酸钾钠+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml;
2、1%次甲基蓝,1g次甲基蓝加水溶解并定容至100ml,棕色瓶保存;
3、0.2%标准葡萄糖,2g 105℃烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml;
4、碱式滴定管;
5、电炉,各种玻璃器皿。

四、操作方法
1、斐林试剂标定
取甲液5ml加入5ml乙液中,置于250ml三角瓶中,加入水10ml,从滴定管中加入0.2%的标准葡萄糖若干毫升(约23ml)。

(量控制在后滴定时消耗葡萄糖在0.5-1.0ml)。

电炉上加热至沸,并保持微沸2分钟,加2滴1%次甲基蓝溶液,趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液,用0.2%标准葡萄糖滴定至蓝色消失,有红棕色沉淀,溶液清亮为终点止。

记录耗用的葡萄糖量为V0,必须在1min内完成。

(注意:还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化,恢复成原来的蓝色,所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态,并且避免滴定时间过长。


2、样品滴定预备试验
同上法取斐林试剂,加10ml样品液,摇匀于电炉上加热至沸,保持微沸2分钟,加2滴1%次甲基蓝,用0.2%葡萄糖滴定至蓝色消失。

记录耗用的葡萄糖量为V1。

3、样品滴定
同上法吸取斐林试剂加10ml样品液(预先稀释),补加(V0-V1)ml水,并从滴定管中预先加入(V1-1)ml 0.2%葡萄糖,摇匀至电炉上加热至沸,保持2min微沸,加入2滴1%次甲基蓝,继续用葡萄糖滴定至蓝色消失。

记录消耗的标准葡萄糖体积为V毫升。

五、结果计算
还原糖含量(以葡萄糖计)(g/ml)=(Vo-V)×0.002×1/10×n
式中:Vo--------斐林试剂标定值,ml
V---------样品糖液测定值,ml
0.002-----标准葡萄糖溶液浓度,g/ml
10--------样品糖液体积,ml
n---------样品稀释倍数
六、思考题:
1、还原糖测定方法有哪些?
2、总结本实验方法测定还原糖应注意哪些事项?
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