毛细管电泳-激光诱导荧光数字化检测分析
毛细管电泳-激光诱导荧光检测法分离检测谷胱甘肽及其构成氨基酸

毛 细 管 电泳 。 激 光 诱 导 荧 光 检 测 法分 离检 测 谷 胱 甘 肽 及 其 构 成 氨 基 酸
王 宇飞 , 蔡元丽 , 林 夏 , 晏 瑾 , 李 晖 。
( 四川大学化学工程学院, 四川 成都 6 1 0 0 6 5 )
摘要 : 以4 - 氯- 7 一 硝基苯并_ 2 - 氧杂. 1 , 3 - 二唑 ( N B D ・ C 1 ) 为柱前衍 生试剂 , 建立 了一种毛细 管 电泳. 激光 诱导荧光 直接检测氧化型 和还 原型谷胱 甘肽及其构 成氨基酸 ( 谷 氨酸 、 半胱 氨酸和甘 氨酸 ) 的新方 法。经过 实验条件 的优化 , 采用 2 5 m mo l / L硼砂- 2 0 m m o l / L聚氧 乙烯 月桂醚 ( B 川- 3 5 ) - 5 %乙腈 ( p H 9 . 5 ) 的缓 冲体系 , 在柱温 为 2 5。 c 、 分 离 电压为 2 0 k V的条件下 , 压力进样 3 4 4 7 . 5 P a ( 0 . 5 p s i ) ×3 S , 五种 物质在 1 1 m i n内实 现高效基线分 离 。在该方法下 , 还原型谷胱甘肽 、 氧化 型谷 胱甘肽 、 谷氨 酸、 半胱 氨 酸和甘 氨酸 的线 性范 围分 别 为 : 1—5 O
o f o x i d a t i o n a n d r e d u c e d g l u t a t h i o n e, g l u t a mi c a c i d, c y s t e i n e nd a g l y c i n e a f t e r d e r i v a t i z a t i o n wi t h 4 - c h l o e- r 7 - n i t eb r e n z o f u r a z a n
毛细管电泳2激光诱导荧光鞘流检测系统

毛细管电泳2激光诱导荧光鞘流检测系统优化研究及在基因分析中的应用陈 林 任吉存3(上海交通大学化学化工学院,上海200240)摘 要 对自组装的毛细管电泳2激光诱导荧光鞘流检测装置进行了系统的优化。
探讨了鞘流速度、激光功率和检测的位置对检测信号的影响以及鞘流速度与峰面积和理论塔板数的关系。
在优化的条件下,对荧光素检测的线性范围为1×10-8~1×10-10m ol ΠL ;检出限为7.5×10-11m ol ΠL (S ΠN =3)。
使用聚N ,N 2二甲基丙烯酰胺(PDM A )为双功能非胶筛分介质,将毛细管电泳2激光诱导荧光鞘流检测系统成功地用于DNA 片段及基因PCR 扩增产物分离检测。
关键词 毛细管电泳,激光诱导荧光,鞘流池,基因分析 2002212224收稿;2003208207接受;本文系国家自然科学基金(N o.20271033)、国家自然科学基金重点项目(N o.20335020)、科技部863重大专项(N o.2002AA431310)、上海市自然科学基金(N o.02Z A14057)、教育部和人事部留学归国人员启动基金资助1 引 言毛细管电泳(CE )是一种高效、快速的微量分离分析方法,被广泛地用于无机离子、有机化合物、药物和生物大分子分离分析1~3。
由于毛细管电泳进样体积小(一般为n L 级)。
因此,需要配置灵敏的检测器。
激光光源具有高强度、高相干性,可聚焦到接近衍射极限,适合于微小孔径柱的激发。
通过光纤容易聚焦于毛细管中心,使毛细管上的检测窗口长度大为缩短,既提高了激发效率,又减少了光散射,降低了检出限。
激光诱导荧光(LIF )是目前最灵敏的检测方法,它已成功地用于毛细管电泳在柱检测4,5。
在LIF 检测中,荧光背景噪音对检出限影响很大,样品Π管壁界面上的散射光是荧光背景噪音的主要来源之一。
D ovichi等首次采用鞘流池来消除界面上的散射光干扰5,这是由于鞘流与样品的缓冲溶液完全一致。
毛细管电泳激光诱导荧光分离检测脑汇编护理课件

调整毛细管电泳的电压、电解质浓度、pH值等参数,以及激光诱导荧光检测的激发波长、发射波长、增益等参数,以提高检测灵敏度和特异性。
优化实验参数
根据实验需求,对脑汇编护理样本进行预处理,如离心、过滤、稀释等,确保样本适合进行毛细管电泳分离。
样本处理
将处理后的样本注入毛细管中,进行电泳分离,使不同组分得到有效分离。
原理
用于蛋白质、多肽、核酸等生物大分子的分离分析。
生物医药
环境监测
食品安全
用于水体、土壤、空气中有毒有害物质的检测。
用于食品中添加剂、农药残留等的检测。
03
02
01
高分离效率、高灵敏度、低成本、易于自动化等。
对样品预处理要求较高,对某些复杂样品分离效果有限。
局限性
优势
02
CHAPTER
激光诱导荧光检测技术
应用前景与展望
根据实验结果,探讨毛细管电泳激光诱导荧光分离检测在脑汇编护理中的潜在应用价值和发展前景。
05
CHAPTER
展望与未来研究方向
技术创新
未来研究应致力于技术创新,提高毛细管电泳激光诱导荧光分离技术的性能,如提高检测灵敏度、分辨率和稳定性等。
1
2
3
鼓励科研机构和企业加强合作,共同推动毛细管电泳激光诱导荧光分离技术的创新与研发,提高技术性能。
环境监测
用于检测生物样本中的蛋白质、核酸等生物大分子,以及细胞和微生物等。
生物医学研究
用于分析化学样品中的有机物、无机物等,如药物、食品添加剂等。
化学分析
优势
高灵敏度、高分辨率、高选择性、可实现多组分同时检测等。
局限性
对样品预处理要求较高、仪器成本较高、对某些非荧光物质无法检测等。
毛细管电泳-激光诱导荧光法测定细胞中谷胱甘肽

毛细管电泳-激光诱导荧光法测定细胞中谷胱甘肽门雪;吴成新;陈明丽;王建华【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2023(41)1【摘要】谷胱甘肽(GSH)在抵抗氧化应激和重金属解毒过程中发挥着重要作用,建立灵敏、准确的GSH定量分析方法对于研究细胞重金属毒性机制具有深远意义。
该研究以肝癌细胞(HepG2)为研究对象,以活性基团为芳香邻二醛的2,3-萘二甲醛(NDA)为标记试剂,建立了一种高灵敏度的测定细胞中GSH含量的毛细管电泳-激光诱导荧光检测方法(CE-LIF)。
实验考察了缓冲溶液的种类、pH、添加剂等对GSH与NDA的反应速率和NDA-GSH检测灵敏度的影响。
比较了pH为7.4和9.2的三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲溶液、pH为9.2的硼砂和Tris缓冲溶液中NDA-GSH的灵敏度和反应速率,结果显示在pH为9.2的硼砂缓冲溶液中NDA-GSH的灵敏度最高且反应速率最快。
进一步比较了4种添加剂对NDA-GSH灵敏度的影响,结果显示以β-环糊精(β-CD)作为添加剂效果最好。
在最优的实验条件下,GSH与NDA可以在5 min内达到反应平衡,3 min内检测到NDA-GSH电泳信号。
采用外标法对细胞中的GSH进行定量分析,方法线性范围为0.01~20.00 mmol/L,GSH的检出限和定量限分别为0.006μmol/L和0.020μmo l/L,加标回收率和标准偏差分别为95.7%~112.6%和3.8%~5.0%(n=3)。
通过建立的方法对HepG2细胞中的GSH进行定量分析,并研究了As(Ⅲ)、As(Ⅴ)、Cr(Ⅲ)和Cr(Ⅵ)刺激细胞后胞内GSH的变化情况。
结果表明,在研究剂量水平下,As(Ⅲ)、As(Ⅴ)和Cr(Ⅲ)不会影响HepG2细胞中GSH的含量,而高剂量Cr(Ⅵ)会导致GSH含量显著降低。
结合元素毒性数据,说明HepG2细胞内GSH含量与细胞毒性相关,GSH含量会随着细胞毒性增大而降低。
毛细管电泳-激光诱导荧光检测大鼠脑组织多巴胺含量

[ 关键词 ]帕金森病 ; 多巴胺 ; 电泳 , 毛细管 ; 光诱 导荧光 ; 激 大鼠 [ 中国图书资料分类法分类号 ]R 7 2 5 R9 19 4 . ; 7 . 3
t
[ 文献标识码 ]A
De e m i to fdo a i n he br i ts u fr t t r na i n o p m ne i t a n is e o a s
w t a e — d c d f o e c n e M eh d : h o g n t f te rt ’ b an t s e wa e t f g td i o e e au e a d t e i ls ri u e u r s e c . h n l t o s T e h mo e a e o h as r i i u s c n r u a e n l w t mp r t r n h s i
( n u P oi il et fr l i l aoao , n u Poi il o i lA h i dcl ne i , e i 30 1C ia A h i r n a ne o i c brtO, h i r n a s t ,n u Mei vrt Hf 00 ,hn ) v c C r C n aL A v c H pa a U sy e 2
r c v r swe ea o e9 . % . h n ai a r m 0一 t 0- mo / J Co cu i n : h t o f ee t g d p mi e i h r i e o e i r b v 5 6 e T e l e r y w sf i t o 1 o1 L I ’ . n l so s T emeh d o t ci o a n t e b an d n n o as i c n e in y u i gc p l r lcr p o e i wi a e — d c d f o e c n e fr t s o v ne t sn a i a ee t h r ss t ls ri u e u r s e c . b ly o h n l
基于毛细管电泳芯片的激光诱导荧光检测系统的开发和应用研究的开题报告

基于毛细管电泳芯片的激光诱导荧光检测系统的开发和应用研究的开题报告一、研究背景毛细管电泳芯片作为一种快速高效的微流控分析技术,已经广泛应用于生化分析、生物医学、环境监测等领域。
其中,检测方法的进一步提升对于毛细管电泳芯片技术的应用和推广具有重要的促进作用。
而激光诱导荧光检测技术具有灵敏度高、选择性好、快速高效等优点,已经成为了毛细管电泳芯片分析的重要检测手段之一。
二、研究目的本研究旨在开发基于毛细管电泳芯片的激光诱导荧光检测系统,针对毛细管电泳芯片进行优化设计,并应用于生化分析、生物医学、环境监测等各个领域,提高毛细管电泳芯片技术的检测灵敏度与准确度。
三、研究内容和方法1.设计基于毛细管电泳芯片的激光诱导荧光检测系统,包括激光器、荧光检测器、荧光信号采集与数据处理系统等组成,最终实现成像和荧光信号实时检测。
2.优化毛细管电泳芯片的化学处理技术,在原型芯片上实现优化并进行筛选,筛选出适用于检测系统的最终芯片。
3.在该系统中使用生物分子、环境污染物等进行生化检测试验,评价检测系统的灵敏度和准确度。
4.对系统的实验结果进行数据处理、计算机图像分析、比较分析、统计学分析等,为后续毛细管电泳芯片技术的应用提供参考。
四、研究的意义和预期成果本研究的开发基于毛细管电泳芯片的激光诱导荧光检测系统将提高毛细管电泳芯片技术在生物、环境等领域的应用,具有广阔的市场前景和社会经济价值。
预期的成果有:1.开发出基于毛细管电泳芯片的激光诱导荧光检测系统,实现了灵敏度、分辨率等优秀的检测性能。
2.在该系统中应用生物分子、环境污染物等进行生化检测试验,得出了一系列有意义的实验结果。
3.提高毛细管电泳芯片技术的检测灵敏度与准确度,推动其在生物、环境等领域的应用。
针对毛细管中单分子的激光诱导荧光检测
针对毛细管中单分子的激光诱导荧光检测本研究的目的在于发展一个新型的激光诱导光谱检测方法来有效地检测流质(毛细管)中的单分子。
通过一个氩离子在钛宝石激光器中调谐到铷原子阶跃线时产生780.023 nm的激光来激发在毛细管中IR140分子。
关于流动中单分子的探测已经有多种实验方案了,包括有效的激光激发和荧光检测。
1-3当分子经过聚焦的激光束时,它会在基本的电子状态和激发的电子状态之间循环,并且在每个循环懂释放光子,继而形成光子爆发。
本研究阐释了单分子检测中的一个重要概念,即如何提高样本中所有分子的检测效率,而不仅仅是经过探针的分子。
在以往关于单分子检测的实验中,大部分的分子没有经过激发激光束,结果整体的检测效率较低。
本文方法的独特之处在于将分子集中于一个毛细管中,用激发激光束来照射毛细管的整个内直径,并且用金属气过滤器吸收激光镜面散射。
溶液状态中敏感荧光检测受到了光学和溶剂中噪声源的限制。
通过将探针的体积降低到最可能小的水平,从本底发光和喇曼散射中隔离分子荧光的主要问题得到了解决。
探针体积的减小可以通过光学上限制发光\观察到的体积,或者物理上减小样本监禁的大小,或者同时采用光学和物理学上的方法。
许多实验方法已经用到了单分子检测中的样本监禁,比如鞘流动单元和电动悬浮微滴法。
通过让分子在样本流中流动,Keller等人1利用激光诱导荧光(LIF)观察单分子中的光子爆发。
运用电动悬浮将单分子限制到微滴里面,Ramsey等人2通过信噪比3检测到单分子。
Soper等人3证明了近红外分子(IR132)通过集中的高斯激光束的检测效率为97%。
通过一个非常简单的毛细管实验系统,我们运用二极管激光器产生了流动液体中的近红外荧光团,并且一次探针中检测了103-104分子。
随着更多通用激光源的发展,这种基于毛细光的方案可以简便地运用到毛细管区电泳和毛细管液相色谱的实践分析,或者是任何包括非常小样本的分析技术中。
但是,由于需要将空间探测的效率降低到单元值以下,进而最小化激光散射和本地噪音,单分子检测并未取得100%的方法效度。
毛细管电泳-激光诱导荧光检测分枝杆菌DNA多态性
设计引物扩增了 该 基
因第 "’( 至第 ("$ 碱 基 对 之 间 的 片 段, 并采用限制 性内 切 酶 对 扩 增 片 段 进 行 酶 解, 经 -./ 分 析 其 67- 片段长度, 发现大多数分枝 杆菌 具 有 独特 的 内 切酶图谱, 可以用 于 分 枝 杆 菌 的 鉴 别。 贺 小 玲 等
收稿日期: !"". /"$ /"0 作者简介: 黎源倩, 女, 教授, 博士生导师, 123 : ( "!0 ) 0##"$+"$ , 4/5&63 : 36*(&’76&’8 9:;5&63< =:5< 基金项目: 国家自然科学基金资助项目 ( >:< +""-"?-0 , >:< +""-"?0# ) <
"#$%&’(%’)* +*,-.# /0%%#&* 1*02-$’$ )3 4-()50(%#&’0 671 5- 809’220&- +2#(%&)9:)&#$’$ ;’%: <0$#& =*>?(#> @2?)&#$(#*(# 6#%#(%’)*
*+ 9:;<=>;< ,?.%5 5:"=><@ ,A+ B>;<3><@ ,CD8E 9><@ ,C)%5 D"<@F;< ,CD.%5 (1;"G:
[#]
技术服务有限公司) ; :!J 67- 聚 合 酶, A7:E% ( A&; $K0#,9$2L(’&$%,A& % M;)#,*+$%*+!)&% ) , *?1#’ 67- C ’"0 # ( $0% ! ) I!#N&# !" ( 华美生物工程有限公 司) ; 引物由 上 海 生 工 生 物 工 程 技 术 服 务 有 限 公 司 合成。溴乙啶、 甲基纤维素购自美国 >,"<! 公司。 ! ! #" 实验方法 ! ! # ! !" 分枝杆菌基因组 67- 的提取和 E1G 扩增 8 8 在罗氏培养基 上, 取 培 养 物 # + ! 接 种 环, 加灭 菌重蒸水 #* % <3 , 研磨成混悬液, 用 67- 抽提试剂 盒提 取。 E1G 反 应 液 含 有 模 板 67- ! $ 3 , #& , 缓 冲液 % $ 3 , A7:E% ) $ 3 , 引 物 *# 、 *! 各 # $ 3 , 灭菌 高纯水 "%* % $ 3 , :!J 酶 ( " ? C $ 3 )#* % $ 3 ; 总体积 %& $ 3 。 E1G 反应条件为: 预变性 ’) O ( % <,2 ) , 变 性 ’) O ( # <,2 ) , 退火 %( O ( # <,2 ) , 延伸 -! O (# <,2 ) , 循环数 "% , 最后保持在 -! O ( % <,2 ) 。 ! ! # ! #" 限制性内切酶酶切 8 8 将 E1G 扩增产物分别用 限制性 内 切 酶 !"# / ! 和 $%& " 进行酶切。分别 取 E1G 产 物 !& $ 3 , 灭菌 高纯水 !" $ 3 , #& , 酶 缓 冲 液 % $ 3 , 限制性内切酶 ( #& ? C $ 3 )! $ 3 。 反应体 系总体 积为 %& $ 3 , 反应 条件为 "- O ( # +) 。 ! ! # ! $" 高效毛细管电泳 ; 激光诱导荧光检测 8 8 调整 好 1/;3456 装 置 的 光 路 系 统。 在 电 泳 分 甲基纤 析前, 将毛细 管 柱 先 填 充 &* # P( 质 量 分 数 ) 维素,再 充 入 加 有 67- 内 插 荧 光 试 剂 溴 乙 啶 的 &* % P( 质量分 数 ) 甲 基 纤 维 素, 分离所用的缓冲溶 液为 :H/ 溶 液 ( )% <<$’ C 3 三 羟 甲 基 氨 基 甲 烷 ;)% <<$’ C 3 硼酸 ;#& <<$’ C 3 乙 二 胺 四 乙 酸, *D (* % ) 。 ( $0% ! )I!#N&# !" 、 分 别 取 *?1#’ 67- C ’"0 # E1G 扩增产物、 !"# / ! 酶切产物 和 $%& " 酶 切 产 物 各 #& $ 3 , 加 入 内 标 ! $ <$’ C 3 N,)$2 #&A ( 购 自 >,"; <! 公司) # $3, 以 #& NQ R #% % 电动进样, 采用在 ## NQ 恒压电泳模式, 用激光诱导荧光检测 67- 片段。 每次 电 泳 后 用 &* &# <$’ C 3 D " EF ) 冲 洗 毛 细 管 % <,2 , 再进行下一次检测。 ! ! # ! %" 琼脂糖凝胶电泳 8 8 分别取 E1G 扩增产物、 !"# / ! 酶切产物和 $%& 加 $ , 上 样 缓 冲 液 ! $3, 混 " 酶切产 物 各 #& $ 3 , 匀, 将样液加到 ! P( 质量分数) 的琼脂糖凝胶板 (含 溴乙啶) 上, 电泳场强为 ( + #& Q C (< , 电泳 -& <,2 。 取下凝胶, 于凝胶成像仪上观察电泳图谱。
毛细管电泳-激光诱导荧光检测法分析胃癌组织及癌旁正常组织蛋白质的差异性
D 5 3 2 S( T a K a R a 公司) ; 二 甲苯 为化 学纯 ; 苏 木精染
液、 伊红染 液 、 1 % 盐 酸乙醇 分化液 由本实 验室 配制 。
1 . 2 样 品采集及 苏木 精一 伊红 ( I - I E) 染 色
胃癌 组织及 癌旁 正常组 织样 品取 自兰州军 区兰
。
目前 人们 通常 采 用极 端 p H、 添加 剂 、 外 加 径 向
电场和 聚合物 涂层 等几种 方法来 抑制 蛋 白质 在管壁
的 吸 附 。本 实 验 对 毛 细 管 管 壁 添 加 化 学 涂 层 , 并
采用 p H l 0的 l×T B E( T r i s — b o r a t e — E DT A) 作 为缓
例、 胃溃 疡 癌 变 1例 。HE染 色 按 常 规 病 理 染 色 方
法进 行 。
( 2 D — P A G E) 、 质谱 ( MS ) 等 。虽 然 这 些 技术 分 离 蛋
白质 具有较 高 的灵敏 性 , 但 如 何 从繁 杂 的信 息 中发
1 . 3 毛 细 管 柱 修 饰
蛋 白质 吸附是 影响 毛细管 分离蛋 白质 的难题 之
一
现差 异蛋 白质并 从 中提 取 有 用 的信 息 , 使 其成 为 敏
感性 和特异 性均 高 的标 记物 是研究 的重 点和难 点 。 毛细管 电泳 ( C E ) 易 与其他分 析技术 联用 , 从而 大大 增加 了其应 用 范 围 , 是 目前 发展 最 为 迅 速 的分 离分 析技 术 之 一 。关 于 毛 细 管 筛 分 生 物 大 分 子 的机 理 已有 报 道 ’ , 且 毛 细 管 电泳 与 激 光 诱 导 荧 光检 测法 ( C E — L I F) 联 用 检测 核 酸 和 蛋 白质 的技 术 已经 成熟 , 比紫外 检测 的 灵敏 度 高 l 0—1 0 0 0倍 。
毛细管电泳与激光诱导荧光检测耦联法检测酿造过程及啤酒样品中的生物胺
通过 比较 样 品 峰 和 不 同浓 度 标 样 峰位 移 时 间来进 行 定 性 分 析 , 用标准 添加 法进行 定量分
析。
1 . 4 衍 生化处 理
I 、 N H :
^ — — \ / N H :
2 苯基Z 胺 ( 9 )
腿 丁胺 ( 1 )
维普资讯
维普资讯
乏 五 壹 薪 型 巴 氏 杀 菌 监 嬲 仪 贝膛 1 0 -
8 4 8O1
.
8 46 01 3 6
3 6 ; 8 4 F 6 0 1 3 1 1 3 0 9 昌 : “
CH 3 NH 2
甲胺 ( 1 5 )
组胺 ( 8 )
S
图 2 各种胺类的化学结构
图1 F I T C和胺 化合物间的衍 生化 反应
为获得最佳分辨率 和最高灵敏度 , 我们研究
1 . 5 电泳 方法
了实 验 和 仪 器 条 件 , 最后 确 定 : 电 压 最 佳 值 为 3 0 k V, 因 为 在 此 条 件 下 可 以 获 得 最 短 的分 析 时 间; 进 样 的最 佳 时 间 为 1 2 s ; p H=9 . 3时 分 离度 最 好 。在 本研究 中 , 离子 强 度 和有 机 修 饰 剂 是 影 响 生 物胺 分离 效果 最 显 著 的变 量 。在 p H=9 . 3时 , 我们 用 1 5 % 的丙 酮 溶 剂研 究 了离 子 强度 对 1 5 种 生物胺 分离度 的影 响 , 通 过 改 变 硼酸 钠 缓 冲液 的
n 8 c o n
E  ̄ - ma i t : I I q 自 h
缱阻颐 贝 复套 日中』 羁甚 代理
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
在分析 过程 中 , 着 计算 机 的应 用 , 得 人 工 随 使
收到本文时间 :0 7年 3月 5日 20 基金项 目: 国家 自然科学基金资助 ( 编号 :04 0 1 项 目。 2 5 50 ) 作者简介 : 康彦 , 士研究 生。 硕
维普资讯
() 2 检测
②在线方式(nl e , o n )分析仪器和计算机可通 i 过电子接 口直接通讯 , 从仪器 出来 的信号在电子接 口里被整合和数字化并 由计算机存储起来 , 用于计 算 机 中的大 规模数 据存 储和 数据 处理 , 同时仍 可 但
以按离线 方 式操作 。
在检测 中 , 们使 用诸 如红 外 、 外 、 我 紫 电导等 分 析方 法时 , 以将 检测 器直 接安装 在 流体经 过途 径 可 上或将 流体 分 流导 入 检 测 器样 品池 。 在分 析 实 验 中 , 如文 中所 提 的 毛细 管 电泳 实 验 中 , 例 自动 化 检 测样 品 , 以采 用两 种 方 法 , 由 固定程 序 控 制 的 可 即 样 品检测 系统或 由分 析 人 员 按 实 验 不 同要 求 编 程
必 须 以与 计算机 联用技 术为基 础 。
另外 , 毛细管 电泳 己实 现 操 作 自动 化 , 以和 可
数字数 据则是 一 系列不连 续 的测量值 , 例如 隔段 时 间测量 的 P 熔点 、 H、 沸点 、 折光 率等 , LS 和紫 外 E IA
维普资讯
第3 5卷 (0 7 第 1 期 20 ) 1
计算机与数字工程
17 4
毛 细管 电泳 一激 光诱 导荧 光数 字化 检 测 分 析
康
( 中科技大学生命 科学 与技术学院 武汉 华
彦
危宏 平
407 ) 30 1
4 07 ) 中国科学 院武汉病毒研究所 武汉 304 (
18 4
康
彦等 : 毛细管 电泳 一激光诱导荧光数字化检测分析
第3 5卷
质量 。
毛细管 的 内径 很小 ( O 1 , 条 5 m长 毛细 <l 0 m) 一 x 0c
④数 据处 理
管 的容积 只 有 1 L, 样 体 积 只 有 数 纳 升 (L) 进 I x n 这
现代数据采集采用计算机在线数据采集和记
摘
要
计算机 , 尤其是微型计算机和微处理器 , 在现代各种实验仪器 已经成 为了不 可缺少得集 成部分 。实验室所用
的分析仪器乃至整个分析 实验室 的操作 、 通讯和管理 日益 自动化 和智能化 , 将分 析工作 者从复 杂 、 复的数据 控制和处理 重
中解脱 出来 , 而可以致力于更富有创造性的科学研究并能快速 反应在 实际 中所 遇到 的新 问题 和挑战 。计算 机技术在仪 从
录 , 据 包 括 了两 个 方 面 : 拟 数 据 和 数 字 数 据 。 数 模 模拟数 据 在生物 实 验 中, 括变 量 的 联续 变 化 值 , 包
例如在 电泳 图 4中时 间与检测 器响应 的连 续 曲线 。
样的进样效果液只有通过计算机的控制才能做到。 因此 毛细 管电泳 高速 、 高效 和样 品消耗少 等优 点都
了方法 选择 、 品收集 和制备 、 性检测 、 量校 正 样 定 定 和信 息提取 等步骤 , 每一个 步骤 都涉 及信 息 的产 而 生 、 取 、 理和传 输 。 因此 , 存 处 计算 机可 以协 助完 成 分析 过程各 个步骤 , 分析 仪器 中各相 应部 分进 行 对 控制 , 实现各 步骤 的 自动化 。
控制 的检测 系统 。 () 3 分析
③嵌入方式 ( n ) 现在 大多数仪 器采 用 i le , ni
的, 分析 人员 拜托 了离 线方式 通 过计算 机和分 析仪
器进行通讯并指挥分析仪器的 自动运行 。 后 两 种方 式 的优点 是 对 实 时数 据处 理 与数 据
采 集 同时进行 , 仅可 明显 降低所 需数 据存储 的空 不 间, 而且 如果 数据 采 集 点 问 的空 间足 够 , 理过 的 处 信 号可 以 用 来 调 整 仪 器 而 改 善 后 续 输 出信 号 的
1 引言
1 1 计算机 与生 物分 析 .
介 入 的程 度 日益 减 少 。计 算 机 与分 析 仪 器联 接 的
方 式有 三种 , 图 1 如 所示 。
— H 磊
:: l 、
析 员} 析 器 分 人 . 分 仪 I —
分人 I 析 员
,1 . . r ..
生物分析过程其实和化学分析过程类似 , 包括
器分析 中应用如此广泛 , 将借 助在 实验中利用毛细管激光诱导荧光检测的方法 , 肉毒毒素 A进行检测的例子 。探讨在 生 对
命科学研究 中 , 计算机数 字化研究的重要性。 关键词 仪器分析 毛细管 电泳 激光诱导荧光检测 肉毒毒 素 A;D SS
中 图分 类号 o 5 / 6 9 Q 1T 29 6 8 o 2 / 5/ N 4
() 1 进样
. ห้องสมุดไป่ตู้ .
]
分 人 . 析 员} I —
_—' l_ ・
图 1 计 算 机 与分 析仪 器 的联 接 方式
①离线方式(fl e 的特点主要是需要分析 o n ) i
人 员操作 和 控制 分 析仪 器 , 收集 数 据 之 后 , 用键 盘 等 输入 到计算 机 中进 行 处 理 以及 分 析 结果 。在 实 验 中我们 使 用高分 辨 率 的毛细管 电泳 , 每秒 可 出几 个 峰 , 和机 械式 记录 仪 的记 录 反应能 力都不 够 。 人
在我们 的生 物分析 的实 验 中 , 通过 计算 机对 流 体样 品 ( 包括 气体 、 液体 、 浊 液 等 ) 行 直接 取 样 悬 进
和制样 。这 样 比较 而 言 , 仅节 省 了时间 而且能 够 不 更好 的控制 进样 量 , 证 了实 验 的准确 性 。在实 现 保
计算 机 的控 制 中 , 我们 通 过 计算 机控 制 步 进 马 达 、 电磁 阀 门 、 泵和 注射进 样器 等 。