适用于Langendorff离体心脏灌流大鼠心肌梗死动物模型的建立
大鼠Langendroff离体心脏局部缺血再灌注模型建立及功能评价
【 摘要 】 目的
建立 大鼠 Ｌ ａ ｎ ｇ ｅ ｎ ｄ ｏ ｆ ｆ 离体 心脏局 部缺血 再灌 注模型 的方法并 进行功 ｉ ｓ ｔ ａ ｒ 大 鼠随 机 分 成 ２组 ， 对 照组 （ ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ， ｎ＝１ ２ ） 和模型组 （ ｍ ｏ ｄ ｅ ｌ ， ｎ＝１ ４ ） 。两 组 均 建 立 标 准 的 Ｌ ａ ｎ ｇ ｅ ｎ ｄ ｏ ｆ ｆ 离 体 心脏 灌 注 模 型 ： Ｋ — Ｈ液持续灌注 （ ９ ５ ％ Ｏ ＋ ５ ％ Ｃ Ｏ 过 饱 和 ， 左心室插 入球囊压力 管 ） ， Ｋ — Ｈ液持续 灌注平衡 ２ Ｏ ｍｉ ｎ后 对 照 组 Ｋ— Ｈ液 持 续 灌 注 １ ０ ５ ｍ ｉ ｎ ； 模型组同对照组平衡 ２ ０ ｍｉ ｎ后 穿 线 结 扎 冠 状 动 脉 左 前 降 支 第 一 对 角 支 下 缘部位 ， 造成局部停灌 （ 缺血 ） ３ ０ ｍ ｉ ｎ ， 而 后 剪 断结 扎 线 复 灌 （ 再灌注 ） ７ ５ ｍ ｉ ｎ 。伊 文 思 蓝 、 Ｔ Ｔ Ｃ染 色观 察 心 肌 梗 死 、 缺
血 面积 ； 记 录 左 心 室 压 力 及 心 率 变化 过程 ， 比较 各 组 平 衡 ２ ０ ｍ ｉ ｎ 、 局部 缺血 ３ ０ ｍ ｉ ｎ 、 再灌 １ ５ ｍ ｉ ｎ 、 再灌 ３ ０ ｍｉ ｎ 、 再 灌 ７ ５ ｍ ｉ ｎ的血 流 动 力 学 指 标 及 灌 流 液 中肌 酸 激 酶 （ ｃ ｒ ｅ ａ ｔ ｉ ｎ ｅ ｋ ｉ ｎ ａ ｓ ｅ ， Ｃ Ｋ） 和乳 酸 脱 氢 酶 （ １ ａ ｃ ｔ ａ ｔ ｅ ｄ ｅ ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｇ ｅ ｎ ａ ｓ ｅ ， Ｌ Ｄ Ｈ）漏 出量 。 结 果 对 照组血供正常 ， 模 型组 局 部 缺 血 、 梗死 明显 ； 对照 组、 模 型 组 平 衡 末 心 肌 酶 学 及 血 流 动 力 学 各 参 数
离体和在体大鼠心肌细胞凋亡模型的建立
离体和在体大鼠心肌细胞凋亡模型的建立姚玲玲;黄晓伟;朱依纯【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2011(027)006【摘要】目的建立离体和在体心肌细胞凋亡模型.方法离体模型:原代培养大鼠心肌细胞进行饥饿处理24 h后,培养液换成Hank′s平衡液,同时进行缺氧处理,30 min后恢复到正常氧状态再培养2 h,固定,TUNEL染色,计数凋亡细胞;细胞总DNA 抽提,agrose凝胶电泳,观察DNA ladder的产生.在体模型:150 g左右的WKY大鼠麻醉,固定,气管插管,开胸,冠状动脉左前降支结扎30 min,再灌注2 h后,心脏取出,冰冻切片,进行TUNEL染色,观察危险区细胞凋亡.结果原代培养大鼠心肌细胞缺氧/复氧处理引起大量心肌细胞凋亡,TUNEL染色阳性,DNA电泳有明显梯状条带,在体大鼠心脏冠状动脉左前降支结扎/再灌注造成心肌梗死,梗死周边危险区有大量凋亡细胞产生.结论离体细胞缺氧/复氧处理和在体大鼠心脏冠状动脉左前降支结扎/再灌注都能导致心肌细胞发生凋亡,这两种凋亡模型具有操作简单、成功率高等特点,可以用于心肌梗死机制的研究以及保护心肌药物的筛选.%Aim To establish a reliable and practic:al rat c:ardiomyocyte apoptosis model in vitro and in vivo. Methods In vitro cardiomyocyte apoptosis model: the neonatal SD rat cardiomyocytes were primarily cultured for 24 hours and the culture medium was changed to Hank's balance sodium medium, and the cells were treated with hypoxia for 30 minutes. and with normal oxygen for 2 hours. Then cells were fixed, staining with TUNEL and the apoptotic cells were measured; the total DNA was extracted and gel electrophoresis wasemployed for the observation of DNA ladder. In vivo cardiomyocyte apoptosis model: WKY rats about 150 g were anaesthetized. fixed. and ventilated with a rodent ventilator. A parasternal incision was made and myocardial ischemia was induced by passing a 6-0 silk suture beneath the left anterior descending artery. The suture was tightened over a piece of PE-20 tubing for 30 min and then released for 2 h. Detection of apoptotic cardiomyocytes was performed with TUNEL staining using an apoptosis detection kit, according to the manufacturer's instructions. Results TUNEL staining positive cells were observed in hypoxia/reoxygenation-treated cardiomyocytes,and DNA ladders were obvious. In theischemia/reperfusion treated WKY rate heart slices, TUNEL positive cells were observed compared with control group. ConclusionHypoxia/reoxygen-induced cardiomyocyte apoptosis in vitro and ischemia/reperfusion-induced cell apoptosis in vivo are reliable models inducing apoptosis.【总页数】3页(P879-881)【作者】姚玲玲;黄晓伟;朱依纯【作者单位】复旦大学上海医学院生理与病理生理学系,上海,200032;复旦大学上海医学院生理与病理生理学系,上海,200032;复旦大学上海医学院生理与病理生理学系,上海,200032【正文语种】中文【中图分类】R-332;R329.25;R336-332;R542.22【相关文献】1.大鼠活体心肌缺血再灌注损伤模型的建立与综合评估 [J], 邓宇珺;杨敏;谭卫萍;苏健;符永恒;谭宁;曾红科;单志新;林秋雄;李晓红;董小莉;余细勇2.离体大鼠心肌顿抑模型的建立 [J], 姚立农;柴伟;赵晖;杨永慧3.大鼠在体心肌缺血再灌注模型的建立 [J], 汪梦霞;廖锦华;马达;胡冬华;王成果;梁云洁;高兰;马爽;李雅兰4.大鼠心肌延迟缺血再灌注损伤模型的建立及其心功能和心肌细胞凋亡情况观察[J], 唐咏文;崔同涛;刘勇;王敏;郭涛;刘津;谭宁5.大鼠离体心肌细胞晚期“缺血”预处理模型的建立 [J], 韩君勇;陈运贞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
黄蜀葵花总黄酮研究进展_周雷
酸水解以及物理化学常数的测定，分别鉴定为槲皮 素 -3- 洋 槐 糖 苷、槲 皮 素 -3'- 葡 萄 糖 苷 (Quercetin3'-glucoside)、金丝桃苷 (Hyperin)、槲皮素 (Quercetin) 及杨梅素 (myricetin)。这是国内最早对黄蜀葵花的 研 究，后 王 先 荣 等 利 用 色 谱 和 分 部 结 晶 方 法 对 黄 蜀 葵 花 进 行 成 分 分 离，根 据 物 理 化 学 性 质 和 波 谱 学手段对化合物进行结构鉴定。结果又新发现 2 个黄酮醇单糖苷，分别鉴定为棉皮素 -3'-O-β- 葡 萄 糖 苷 (Gossypetin-3'-O-β-glucoside )、异 槲 皮 苷 (Isoquercetin) [7]。
第14卷 第6期 2012 年 6 月
辽宁中医药大学学报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 14 No. 6 Jun .，2012
黄蜀葵花总黄酮研究进展
周雷
（南京中医药大学附属医院，江苏省中医院内分泌科，江苏 南京 210029）
摘 要 ：黄蜀葵花为锦葵科秋葵属植物黄蜀葵Abelmoschus manihot(L.)Medic. 的干燥花，民间应用历史悠久。
D 法所测定的结果相对准确，所以 D 法值得推广。 采收时间的不同对黄蜀葵花总黄酮的含量会
有影响 [16]，黄蜀葵花的花期可分为花蕾期、开放期 和凋谢期。在不同的花期内采收，其总黄酮含量变 化很大，开放期的含量最高，凋谢期的含量最低，其 总黄酮含量约为开放期的 1/5。但在同一花期内任 一时间内采收，其总黄酮含量的变化不大。
心肌梗死的动物模型制作
心肌梗死的动物模型制作心肌梗死是一种严重的心血管疾病，其主要病理特征是冠状动脉的阻塞导致心肌缺血与坏死。
为了研究心肌梗死的发病机制和寻找可能的治疗方法，研究人员常常利用动物模型来模拟心肌梗死的发生。
下面，我将介绍一种常用的大鼠心肌梗死动物模型制作方法。
制作大鼠心肌梗死动物模型可以按照以下步骤进行：1.动物选择。
常用的实验动物有大鼠和猪。
由于大鼠的心血管解剖和生理特征与人类较为接近，同时成本较低，因此大鼠是一种常见的选择。
2.麻醉动物。
使用适量的麻醉剂，如异氟醚或七氟醚等，来使动物处于麻醉状态。
确保动物处于无痛苦的状态。
3.固定动物。
将动物固定在手术台上，以避免动物在手术过程中的移动。
4.体表消毒。
在手术区域进行局部消毒，以防止感染。
5. 做出胸骨切口。
在胸骨两侧做出1-2cm的胸骨切口，用手术器械将胸骨分开，暴露出心脏。
6.找到冠状动脉。
用吸引管或者类似的器械将心包囊抽吸，暴露出心脏表面。
紧邻左心室肌肉的左前降支是心肌梗死的常见发生区域。
7.梗死诱导。
用细导管或者相似的器械将一根可以封堵冠状动脉的丝线或者微球导入至冠状动脉中，使其堵塞。
这一步骤可以模拟冠状动脉的阻塞引发心肌梗死。
8.恢复心脏正常血流。
待梗死产生一段时间后（一般为30分钟-60分钟），再次将导管或器械取出，恢复冠状动脉的血流。
9.缝合胸骨。
将胸骨进行缝合，确保伤口能够愈合。
10.外科处理。
术后外科处理，如用抗生素进行预防性治疗，避免可能的感染。
研究人员可以通过观察心肌梗死后的心电图变化、心肌组织的病理切片等方式来评估心肌梗死的程度与发展。
总的说来，大鼠心肌梗死动物模型是一种常见的研究心肌梗死发病机制的实验模型。
通过制造大鼠心肌梗死动物模型，研究人员可以更好地模拟心肌梗死的发生，寻找新的治疗策略和探索其发病机制。
当然，在制作动物模型时，需要严格遵循相关伦理规范和动物保护法律法规，确保动物的利益和权益不受损害。
此外，动物模型只是研究的一部分，结合体外实验和临床数据，才能更全面地了解心肌梗死的病理机制及治疗方法。
大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估-最新文档资料
大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估1 对象与方法?1. 1研究对象清洁级雄性Spreague-Dawley (SC)大鼠20 只，体质量250〜300 g (275± 15. 3) g,由广州中医药大学实验动物中心提供。
随机分为假手术组和心肌梗死组。
1 .2 研究方法?1 . 2. 1 MI 模型的建立[2-3] 氯胺酮( 75 mg/kg )腹腔注射麻醉，经口人工呼吸(导管置于大鼠的舌体与上颌之间)，连接小动物呼吸机予以正压通气，潮气量3〜5 ml/100 g ，呼吸频率60次/min，吸呼比1? : ?1。
左侧胸部备皮，消毒手术区域，经胸骨左缘第4 肋间开胸，钝性分离肌肉，以眼科开睑器撑开肋间肌切口，暴露心脏，剪开心包，于肺动脉圆锥与左心耳之间距主动脉根部2~3 mm处，用7-0眼科无创缝合针，穿过前降支深部连同一小束心肌一并结扎。
根据心电图和心肌组织颜色确定冠脉结扎成功。
逐层缝合胸壁，自主呼吸恢复后拔出通气导管。
大鼠清醒后送动物房饲养,规律照明,自由进食和饮水。
术后连续3 d 予以青霉素40 万U 腹腔注射以预防感染。
假手术对照组除不结扎冠状动脉外，其余步骤相同。
1. 2. 2 超声心动图检查[4]3% 戊巴比妥钠( 45 mg/kg )腹腔注射麻醉，用Philips Sonos 5500型多功能超声诊断仪( S12探头，频率5~12 MHz),在胸骨旁以二维超声和M型超声测量左室收缩末径（LVSd、左室舒张末径（LVDd、舒张期左室后壁厚度（PWd、舒张期左室前壁厚度（AWd Ml组为梗死区室壁厚度）、左室射血分数（LVEF和短轴缩短率（FS）,分别计算梗死区变薄指数（BBZS即舒张期左室前壁厚度/后壁厚度）和非梗死区增厚指数（ZHZS即舒张期左室后壁厚度/前壁厚度）。
所有参数均在3 个连续的心动周期中进行测量并取平均值。
1．2．3 血流动力学检查[5]3%戊巴比妥钠（45mg/kg）腹腔注射麻醉，气管切开插管，保持呼吸道通畅。
大鼠心肌梗死模型建立方法选择及心电图表现
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中国实验动物学报 2011 年 12 月第 19 卷第 6 期
Acta Lab Anim Sci Sin ， December ， 2011 ， Vol． 19. No． 6
spectively． There was no myocardial infarction and the survival rate was 100% in the sham operation group． ECG ： QRS-T wave displayed an intersection “M ” shape in the sham group and before left coronary artery ligation． The R wave and T wave fused into one large tent-like single wave after the left coronary artery ligation ，and without visible ST segment． Histopathological changes of myocardial infarction were seen at 4 weeks after operation． Conclusions tip ，and all ECG showed no visible ST segment in the rats． 【Key words 】 Rat ； Model ，myocardial infarction ； Electrocardiogram It is a novel method to establish myocardial infarct model that the suture is placed about 2 mm distal to the horizontal line of left atrial appendage
大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估
大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估【摘要】目的建立一种稳定可重复的大鼠急性心肌梗死模型。
方法SD大鼠经氯胺酮麻醉后，经口人工呼吸，开胸结扎左冠状动脉前降支。
4周后行超声心动图、血流动力学和组织病理学检查。
结果①心电图和组织病理学检查证实，成功建立了大鼠急性心肌梗死模型，梗死面积40%~45%（平均42%）；②与假手术组比较，心肌梗死大鼠左室收缩末径、左室舒张末径和非梗死区增厚指数明显增加（P＜0．01），左室后壁、左室前壁、梗死区变薄指数、左室射血分数和左室短轴缩短率显著降低（P＜0．05，P＜0．01）；③心肌梗死大鼠动脉收缩压、舒张压、左室收缩压、左室内压最大上升和下降速率均低于假手术组（P＜0．01），心率和左心室舒张末压高于假手术组（P ＜0．01）；④两组大鼠左、右心室实际和相对重量以及胶原容积积分之间的差异有统计学意义（P＜0．01）。
结论本文建立心肌梗死动物模型的方法操作简单、重复性好、结果可信。
【Abstract】Objective To develop a steady and reproducible myocardial infarction(MI) model in rats.Methods SD rats were anaesthetized with ketamine.After linking with respiration machine，left anterior decending coronary artery was ligated.Echocardiogram，haemodynamics and histopathology were done four weeks after ligation.Results ①The model of MI was established successfully and proved by electrocardiogram and histopathology.Infarct sizes were 40%~45%(average 42%).②Compared with sham operation group，MI rats had higher left ventricular systolic diameter，left ventricular diastolic diameter and non-infarcted region thickening index (P＜0．01)，and lower posterior wall diameter，anterior wall diameter，infarcted region thinningz index，left ventricular ejection fraction and fractional shortening (P＜0．05，P＜0．01).③Systolic blood pressure，diastolic blood pressure，left ventricular systolic pressure and the maximum rising and dropping rates of left ventricular pressure decreased，while heart rate and left ventricular end-diastolic pressure increased after MI.④There were significant differences in left ventricular actual weight，right ventricular actual weight，left ventricular relative weight，right ventricular relative weight and collagen volume fraction between sham operation group and MI rats (P＜0．01).Conclusion This experiment provided an easy way to establich the MI model，which was reproducible and credible.【Key words】Coronary artery;Myocardial infarction;Modelanimal;Rats心肌梗死（myocardial infarction，MI）是21世纪医学亟待解决的难题之一[1]。
langendorff检测指标
Langendorff检测指标是指在心脏离体灌流模型中，用于评估心脏功能和生理状态的一系列指标。
Langendorff技术是一种常用的实验方法，通过将小鼠、大鼠或其他动物的心脏取出，然后连接到灌流系统进行人工循环，以模拟心脏在体内的工作状态。
这种方法可以排除外界因素的干扰，全面评估心脏的功能和受到不同因素影响后的变化，是心脏生理和药理学研究中广泛应用的技术之一。
1. 心率Langendorff检测中，心率是一个重要的指标。
通过记录灌流心脏的搏动次数，可以了解心脏的基本节律和频率。
心率的改变常常反映了心脏受到某种药物或生理条件的影响，比如心率加快可能是由于交感神经兴奋或者心脏刺激物质的作用。
心率的监测是Langendorff检测不可或缺的一项指标。
2. 收缩压和舒张压Langendorff检测中还需要关注心脏的收缩压和舒张压。
通过监测心室压力曲线，可以了解心脏泵血功能的变化。
收缩压反映了心脏收缩时产生的最大压力，而舒张压则反映心脏在舒张期的压力。
这两个参数的变化不仅反映了心脏本身的功能状态，也可以反映出心血管系统的整体状况。
3. 心肌收缩力心肌收缩力是评估心脏机械功能的重要指标之一。
在Langendorff检测中，可以通过测量心室内压力和容积等参数，计算出心肌的收缩力指标，如+dp/dtmax（心肌最大升压速率）和dp/dtmin（心肌最大降压速率）。
这些指标可以客观反映心肌收缩力的强弱，进而评估心脏的机械泵血功能。
4. 冠脉灌注Langendorff检测中还需要关注心脏的冠脉灌注情况。
通过监测冠脉灌注压和冠脉血流，可以了解心脏供血情况。
冠脉是心脏的营养血管，其灌注情况直接影响心肌的供氧和营养情况。
通过评估冠脉灌注情况，可以间接反映心脏的代谢状态和对不同干预措施的敏感性。
Langendorff检测指标的全面分析可以帮助研究人员深入了解心脏的生理功能和对外界因素的反应，为心脏疾病的研究和药物治疗提供重要参考。
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2007年1月第17卷 第1期中国比较医学杂志CHINESE JOURNA L OF COMPARATIVE ME DICINEJanuary,2007V ol.17 N o.1研究报告适用于Langendorff离体心脏灌流大鼠心肌梗死动物模型的建立汪进益,范慧敏,刘中民(同济大学附属东方医院心胸外科,上海 200120) 【摘要】 目的 建立适用于Langendor ff离体心脏灌流大鼠心肌梗死的动物模型,为评价干细胞移植对急性心肌梗死后的心功能变化提供基础。
方法 选用S prague-Dawley(S D)大鼠16只,结扎其左冠状动脉前降支中远1Π3处,在结扎前后通过MPA多导生理记录仪连续描记心电图;4周后再次开胸进行Langendor ff离体心脏灌流测定左室心功能和心肌组织病理学检查;另选仅开关胸后存活的10只S D大鼠作为对照组。
结果 造模成功率为62150% (10Π16);心电图动态监测在冠脉结扎后出现ST-T抬高的融合波,30min后可见病理性Q波;4周后Langendor ff离体心脏灌流装置系统检测显示左室收缩压峰值(LVSP)、左室内压等容相最大上升及下降速率(+dpΠdtmax,-dpΠdtmax)等指标较对照组降低,左室舒张末压峰值(LVE DP)则反之;病理组织切片可见结扎区域心肌纤维排列紊乱、坏死心肌被纤维组织取代。
结论 通过结扎左冠脉前降支的方法,4周后能够形成稳定的适用于Langendor ff离体心脏灌流的心肌梗死动物模型,该模型能应用于干细胞移植对心脏功能影响的研究。
【关键词】 Langendor ff灌流;离体心脏;心肌梗死;大鼠;模型,动物【中图分类号】Q95-33 【文献标识码】A 【文章编号】167127856(2007)0120022204Establishment of Langendorff Perfusion of the Isolated H eart afterAcute Myocardial I nfarction Model in R atsW ANGJin-yi,FAN Hui-min,LI U Zhong-min(Department of Cardiovascular and Thoracic Surgery of East H ospital A ffiliated T ongji University,Shanghai200120,China)【Abstract】 Objective T o create a standard rat m odel of Langendor ff per fusion of the is olated heart after acute my ocardial in farction(AMI)by silk suture ligation for the research of stem cell.Method 16adult S prague-Dawley(S D)rats in m odel group were established by ligating the middle-distal1Π3segment of left anterior discending artery with8～0sutures to shut the blood supply of my ocardium.E lectrocardiogram(ECG)were per formed both before the ligating and after the ligated by MPA system.The cardiac function were observed by langendor ff per fusion of the is olated heart methods and histogram study with HE stain was carried out4weeks late to see whether there were any tisse necrosis and its extension.10adult S D rats without ligating coronary artery in control group.R esults The rate of establishing m odel success fully was62150%(10Π16).A fter ligation of left anterior discending artery,ECG displayed ST elevated continuously immediately and pathologic Q wave after ligating30min.Pathologic section suggested my ofibers chaotically arranged,necro-my ocardium were superseded by fibrous tissue.Meanwhile,The cardiac function indicated by these parametes of LVSP,LVE DP and±dpΠdtmax descend markedly after ligating4weeks late.Conclusion S ilk surure ligating is a g oog method in creating a standard rat m odel of Langendor ff per fusion of the heart in4weeks after AMI,and the animal m odel w ould be conducive to the basic study on the treatment of stem cell for AMI.【K ey w ords】 Langendor ff per fusion;Is olated heart;My ocardial in farction;Rats;M odels,animals[基金项目]国家自然科学基金资助项目(30471719)。
[作者简介]汪进益(1974-),男,博士,研究方向:离子通道与外科疾病、顽固性心衰的外科治疗及分子心脏病学。
[通讯作者]刘中民。
E-mail:zhongm in-liu@ 心肌梗死模型的建立为缺血性心肌病的研究提供了可能,在选择好实验动物和实验方法及保证实验正常进行的同时,选择合适的检测方法对心肌梗死模型制备的结果至关重要,要了解干细胞心肌移植对心肌梗死灶内的心肌或血管再生情况,组织病理学检查可达要求,但如果要了解对心功能的影响,那就需要进一步检测[1]。
本研究通过结扎左冠脉前降支的方法,建立稳定的大鼠急性心肌梗死动物模型,并于结扎前后利用MPA多导生理记录仪描记心电图,4周后进行离体Langendorff心脏灌流测定左室心功能和心肌组织病理学检查,评价模型的构建情况,为研究干细胞移植对心肌梗死后的心功能变化提供基础。
1 材料与方法111 实验动物成年S prague-Dawley(S D)大鼠,雌雄不限,体重为(350±50)g[合格证号:SCXK(沪)200320002],购自上海西普尔2必凯实验动物有限公司,动物饲养环境为清洁级[饲养设备:SY XK(沪):200420005],上海中医药大学动物实验中心。
本研究遵循国家实验动物管理条例及国家实验动物管理实施细则。
112 模型制作模型组选用S D大鼠16只,用氯胺酮腹腔注射麻醉后,先行气管切开插管并接通微型动物呼吸机(第二军医大学生理学研究所生产,江湾Ⅰ型),待呼吸机参数调整好后(呼吸频率每分钟110～120次,吸与呼之比为1∶115),在胸骨左侧4、5肋间开胸,显露左冠动脉前降支,于其中远段1Π3交点处(从前降支的起始到心尖部拉一细线,三折后确定中远1Π3交点),以8～0proline线直接结扎,进针深度012～014mm。
逐层关胸,清醒后拔除气管插管,送回动物房精心饲养4周。
另选仅开关胸后存活的10只S D大鼠作为对照组。
113 评价方法11311 心电图和离体心脏指标的检测:将3根电极分别置于两上肢和右下肢,接MPA多导生理记录仪(上海奥尔科特生物科技有限公司)系统,在冠脉结扎前至冠脉结扎后连续描记心电图。
于4周后开胸经下腔静脉注入肝素(015mgΠkg),剪断上下腔静脉、肺动脉、主动脉(保留1cm左右)及心脏周围组织,迅速取出心脏置于4℃的K rebs-Henseleit(K-H)灌流液(NaCl11810mm olΠL、K Cl417mm olΠL、K H2PO4 112mm olΠL、MgS O4・7H2O112mm olΠL、CaCl2219mm olΠL、NaHC O3215mm olΠL、G licose1111mm olΠL、E DT A015mm olΠL,pH7138～7146)中,轻轻挤压心脏,排空心脏内残留的血液,立即将主动脉固定于Langendorff灌流装置(上海奥尔科特生物科技有限公司)插管固定器上的一个插管上,经三通开关接K-H灌流液,灌流液以95%O2和5%C O2充分饱和、灌流压约719K pa左右、灌流液温度为35℃～37℃左右。
从左室插入尖端带有水囊的导管,然后通过压力传感器,接MPA系统记录左心室最大收缩压峰值(LVPSP)和左室舒张末压峰值(LVE DP)、左室内压等容相最大上升及下降速率(+dpΠdtmax,-dpΠdtmax)。
11312 病理组织切片:完成离体心脏指标的检测后,迅速取下心脏,进行心肌组织的病理学检查,观察梗死区域的病理变化(由专业人员完成)。
114 统计分析数据采用均数±标准差表示,利用S AS810软件进行统计学处理。
对照组和实验组采用组间t检验,差异显著性水平设为a=0105或者0101。
2 结果211 急性心肌梗死模型的建立情况本此实验的麻醉效果好,术中呼吸道分泌物少且无麻醉意外发生。
呼吸参数设定合适、呼吸机性能稳定。
本实验造模成功率为62150%(10Π16),由于不明原因的窦性停搏及室性心动过速致使心脏停跳而死亡2只,术中引起肺部损伤、气管切开出现的凝血块及分泌物引起呼吸道梗阻等导致呼吸衰竭而死亡的例数为3只,而术后肺部感染导致的死亡例数为1只。
因实验动物模型手术操作是在心脏不停跳的情况下进行冠脉结扎,易造成心脏损伤,对动物的创伤较大,严格的无菌操作和熟练的手术技能可减少动物的死亡率。