感染性疾病实验室诊断PPT讲稿
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(完整版)感染性疾病实验室诊断
1.尽快送检
对环境敏感的细菌应保温立即送检,其他所有采集后最好在2小时内送 检,不能及时送检,应注意保存
2. 必须注意安全防护,切勿污染环境 3.厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，有时可直接
用抽取标本的注射器运送
二、 检验方法
查病原体：形态与结构检查 分离培养和鉴定
检测病原体成分（抗原和核酸） 检测患者血清中特异性抗体 代谢产物 （生化试验） 毒素：外毒素、内毒素
SARS冠状病毒 新甲型H1N1流感病毒 高致病性禽流感病毒
(二）按疾病特征分类 1. 病原体被清除 2. 隐性感染(covert infection)，亦称亚临床感染
一般占人群的90％或以上 3. 显性感染(overt infection)又称为临床感染
发病快慢和病程长短：急性感染和慢性感染 感染部位及性质：局部感染和全身感染 全身感染： ①菌血症 ②败血症 ③毒血症 ④脓毒血症
革兰阳性
革兰阴性
抗酸染色
培养在McCoy细胞的沙眼衣原体 吉姆萨染 色的McCoy细胞，含大衣原体包涵体，使 部分细胞核不清楚。（吉姆萨染色,放大
1000倍）
狂犬病毒可于细胞浆中 可形成嗜酸性包涵体
新生隐球菌 墨汁负染
假丝酵母菌（白色念珠菌）
革兰染色
2.不染色标本
1) 检查生活状态下细菌的动力及运动状况 2） 螺旋体由于不易着色并有形态特征
对某些病原菌作出初步鉴定，如霍乱弧菌
常用方法 压片法(压滴法)或悬滴法 暗视野显微镜或相差显微镜检查
体癣皮屑可见关节孢子
3. 直接电镜检测EM 免疫电镜技术IEM
HAV形态电镜图 粪便标本负染 X200000
HAV particles found in fecal extracts by immunoelectron microscopy
对环境敏感的细菌应保温立即送检,其他所有采集后最好在2小时内送 检,不能及时送检,应注意保存
2. 必须注意安全防护,切勿污染环境 3.厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，有时可直接
用抽取标本的注射器运送
二、 检验方法
查病原体：形态与结构检查 分离培养和鉴定
检测病原体成分（抗原和核酸） 检测患者血清中特异性抗体 代谢产物 （生化试验） 毒素：外毒素、内毒素
SARS冠状病毒 新甲型H1N1流感病毒 高致病性禽流感病毒
(二）按疾病特征分类 1. 病原体被清除 2. 隐性感染(covert infection)，亦称亚临床感染
一般占人群的90％或以上 3. 显性感染(overt infection)又称为临床感染
发病快慢和病程长短：急性感染和慢性感染 感染部位及性质：局部感染和全身感染 全身感染： ①菌血症 ②败血症 ③毒血症 ④脓毒血症
革兰阳性
革兰阴性
抗酸染色
培养在McCoy细胞的沙眼衣原体 吉姆萨染 色的McCoy细胞，含大衣原体包涵体，使 部分细胞核不清楚。（吉姆萨染色,放大
1000倍）
狂犬病毒可于细胞浆中 可形成嗜酸性包涵体
新生隐球菌 墨汁负染
假丝酵母菌（白色念珠菌）
革兰染色
2.不染色标本
1) 检查生活状态下细菌的动力及运动状况 2） 螺旋体由于不易着色并有形态特征
对某些病原菌作出初步鉴定，如霍乱弧菌
常用方法 压片法(压滴法)或悬滴法 暗视野显微镜或相差显微镜检查
体癣皮屑可见关节孢子
3. 直接电镜检测EM 免疫电镜技术IEM
HAV形态电镜图 粪便标本负染 X200000
HAV particles found in fecal extracts by immunoelectron microscopy
感染性疾病实验室诊断
加强疾病监测与预警系统建设
监测网络
建立健全感染性疾病监测网络，覆盖各级医疗机构、实验室和社区，及时发现 、报告和追踪疫情。
预警系统
利用现代信息技术手段，建立预警系统，对疫情数据进行实时分析，预测疫情 发展趋势，为防控决策提供科学依据。
强化医疗机构的防控措施
培训医护人员
加强医疗机构医护人员的培训， 提高他们对感染性疾病的识别、
利用抗原与抗体结合的原 理，通过免疫学方法检测 病原体或其代谢产物。
分子生物学诊断
核酸检测
通过检测病原体核酸（DNA或RNA） 的存在和数量来判断是否感染该病原 体。
基因测序
生物芯片技术
利用生物芯片技术检测病原体核酸或 蛋白质，实现快速、高通量的诊断。
对病原体核酸进行测序，以确定病原 体的种类和基因型。
诊断和救治能力。
规范诊疗流程
制定并实施感染性疾病的诊疗规范 和流程，确保患者得到及时、有效 的治疗，同时降低医护人员的感染 风险。
强化消毒隔离措施
严格执行消毒隔离制度，对医疗设 施、器械和物品进行定期清洁和消 毒，防止交叉感染。
REPORT
CATALOG
DATE
ANALYSIS
SUMMAR Y
04
通过直接或间接接触患者或污 染物传播，如皮肤感染、消化
道感染等。
血液传播
通过血液接触传播，如艾滋病 、乙肝等。
母婴传播
通过母婴之间的胎盘或哺乳传 播，如巨细胞病毒、乙型肝炎
病毒等。
感染性疾病的症状与体征
发热
感染性疾病常见的症状 ，可伴有畏寒、寒战等
。
咳嗽、咳痰
常见于呼吸道感染性疾 病，如肺炎、肺结核等
REPORT
感染性疾病ppt课件
疫苗接种的时机
疫苗接种通常在儿童期进行，也有一些疫苗需 要在成年后接种，接种时间根据不同疫苗有所 不同。
疫苗接种的注意事项
接种疫苗前需要注意身体状况，不要在发热或患急性疾病时接种疫苗；接种后也需要保持局部卫生，避 免感染。 疫苗接种是预防和控制感染性疾病的有效手段，可以增强人体的免疫力，预防疾病的传播。
05
感染性疾病的治 疗与管理
治疗原则
早期治疗
感染性疾病应尽早开 始治疗，以减轻症状、 缩短病程、降低并发 症风险。
合理用药
根据病原体种类、病 情严重程度和患者个 体差异，选择合适的 药物和剂量。
综合治疗
结合药物治疗、营养 支持、休息等多种措 施，全面提升患者的 康复能力。
隔离与防护
对患者进行隔离，防 止病原体传播；同时 加强医护人员和患者 的防护措施。
疫苗接种
隔离措施
对于已经感染的患者，采取隔离措施可以有效 防止疾病的传播，保护其他人的健康。
个人卫生
保持个人卫生是预防和控制感染性疾病的基本 措施，包括勤洗手、戴口罩、避免接触患者等。
疫苗接种
疫苗接种的 重要性
疫苗接种是预防感 染性疾病的有效手 段，能够增强人体 免疫力，降低感染 风险。
疫苗接种的 时机
02
感染性疾病的症 状与诊断
常见症状
发热
发热是感染性疾病最常见的症状， 通常是感染病原体后免疫系统的 反应。
咳嗽、呼吸困难
呼吸系统疾病感染时，如感冒、 流感等，常见咳嗽、呼吸困难等 症状。
皮肤问题
如皮疹、瘙痒、红肿等，可能是 感染病毒或细菌后皮肤组织的反 应。
诊断方法
直接检查
通过观察、触诊和叩诊等直接 检查方法，发现患者体征异常。
医院感染诊断标准ppt课件
02
感染途径：包括接触、 空气、血液、器械等
03
感染类型：包括细菌、 病毒、真菌、寄生虫 等
特点
医院感染诊断标准是针对医院内发生的感染性疾病进行 诊断和治疗的规范。
诊断标准包括病原学、临床表现、实验室检查、影像学 检查等方面的内容。
诊断标准具有科学性、准确性和可操作性，有助于提高 医院感染性疾病的诊断和治疗水平。
评价与持续改进
定期评估医院感染风险 因素
制定针对性的预防和控 制措施
持续监测和跟踪感染情 况
及时调整和优化预防和 控制措施
加强培训和教育，提高员 工对医院感染风险因素的
认识和应对能力
6
案例分析
某医院呼吸科HAP病例分析
1
患者基本信息：性别、年龄、职业等
2
感染症状：发热、咳嗽、呼吸困难等
3
诊断过程：实验室检查、影像学检查等
医疗行为因素
手术操作：手术过程中可能 造成感染
医疗器械：使用不当或消毒 不彻底可能导致感染
药物使用：药物使用不当可 能导致感染
医护人员：医护人员操作不当 或防护措施不足可能导致感染
医院感染的管理
5
与控制
预防措施
加强个人卫生：勤洗手、戴口罩、 01 保持良好的生活习惯
加强环境消毒：定期对医院环境
01
毒等 医务人员的防护措施：口罩、手
02
套等 医务人员的培训和知识水平：感
03
染控制知识、操作技能等 医务人员的工作压力：工作强度、 04 心理压力等
环境因素
医院环境：包括病房、手术室、门诊等 卫生设施：如洗手台、卫生间等 医疗设备：如呼吸机、监护仪等 医护人员：包括医生、护士、护工等 患者：包括住院患者、门诊患者等 探视人员：包括家属、朋友等
术前感染性疾病筛查ppt课件
第三代抗体试验
第一代抗体试验
第二代抗体试验
ü 抗-HCV检测 ü HCV抗原检测 ü 定量HCV RNA检测 ü HCV基因型测定 ü 确认实验- 重组免疫印迹实验（RIBA）
.
14
丙型肝炎的诊断
抗HCV
阴性 阳性 阴性
阳性
HCV RNA HCV抗原
阴性 阳性 阳性
阴性
说明
未感染
活动性感染（急性或慢性）
阳性: S/CO >6
加做RPR（科华）
RPR -，加做TPPA RPR +，报阳性
阴性 S/CO<1
报阴性
.
27
HIV
.
28
HIV Ag/Ab 联合检测缩短窗口期
3代HIV抗体EIA
p24 Ag EIA
抗HIV抗体 1代 HIV抗体EIA
HIV p24 Ag
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
126.5
Elecsys HIV Combi（罗氏）
126.5
Source: Journal of Virological Methods: Volume 143, Issue 1, July 2007, pp 86-94
.
33
评估结果摘选
P24 Ag 灵敏度 总体灵敏度 总体特异性
Abbott
Roche
.
32
ARCHITECT HIV Combo P24抗原检测高灵敏度
第四代HIV检测试剂名称
AFSSAPS SFTS(pg/ml HIV Ag)
AxSYM HIV Combo
21
ARCHITECT HIV Combo
EB病毒感染的实验室诊断方法及合理运用PPT课件
3
EB病毒持续感染示意图
• 原发感染后， EBV 在人体B淋巴细胞建 立潜伏感染，只表 达潜伏抗原，受感 染者成为终生病毒 携带者
• EBV健康携带者咽 部不定时排毒
• 在机体免疫功能下 降和某些因素触发 下 ， 潜 伏 的 EBV 可 以被再激活，引起 病毒复制及临床症 状
Rev. Med. Virol. 2008; 18: 305–319
在罕见的病例中抗CA 抗体(IgM)会持续阳 性
20-30% 的EBV新近感染 抗 EA抗体（IgG）阴 性
抗EBNA抗体(IgG)阴 性
14
实验室指标四：EBV病毒核酸检测
• Real-time PCR是目前最主要的监测EBV载量的方法，可以指导治 疗和判断疗效，如PTLD/EBV-HLH/CAEBV等
• 人群感染率高，终身潜伏感染， 具有感染-潜伏-活化的特性
• 肿瘤相关病毒，每年EBV相关 肿瘤死亡病例达15-20万
• 与很多疾病相关，几乎可引起 所有脏器和组织的相关疾病
• 细胞免疫非常重要
Khan G et al. Infectious Agents and Cancer, 2014, 9:38.
6
临床实践诊断EBV感染时需要回答的问题
• 是否感染EBV? • EBV感染的时相？ • 是否EBV活动性感染？ • 组织或器官中EBV感染的细胞定位如何？
7
EBV感染相关的实验室指标
• 血常规：淋巴细胞比例＞50%（学龄以上儿童）
• 嗜异凝集抗体 • 异型淋巴细胞
非特异 性指标
• EBV特异性抗体
• 荧光定量PCR检测EBV核酸 • EBERs原位杂交实验：EBV感染受累的组织学证据
特异性 指标
EB病毒持续感染示意图
• 原发感染后， EBV 在人体B淋巴细胞建 立潜伏感染，只表 达潜伏抗原，受感 染者成为终生病毒 携带者
• EBV健康携带者咽 部不定时排毒
• 在机体免疫功能下 降和某些因素触发 下 ， 潜 伏 的 EBV 可 以被再激活，引起 病毒复制及临床症 状
Rev. Med. Virol. 2008; 18: 305–319
在罕见的病例中抗CA 抗体(IgM)会持续阳 性
20-30% 的EBV新近感染 抗 EA抗体（IgG）阴 性
抗EBNA抗体(IgG)阴 性
14
实验室指标四：EBV病毒核酸检测
• Real-time PCR是目前最主要的监测EBV载量的方法，可以指导治 疗和判断疗效，如PTLD/EBV-HLH/CAEBV等
• 人群感染率高，终身潜伏感染， 具有感染-潜伏-活化的特性
• 肿瘤相关病毒，每年EBV相关 肿瘤死亡病例达15-20万
• 与很多疾病相关，几乎可引起 所有脏器和组织的相关疾病
• 细胞免疫非常重要
Khan G et al. Infectious Agents and Cancer, 2014, 9:38.
6
临床实践诊断EBV感染时需要回答的问题
• 是否感染EBV? • EBV感染的时相？ • 是否EBV活动性感染？ • 组织或器官中EBV感染的细胞定位如何？
7
EBV感染相关的实验室指标
• 血常规：淋巴细胞比例＞50%（学龄以上儿童）
• 嗜异凝集抗体 • 异型淋巴细胞
非特异 性指标
• EBV特异性抗体
• 荧光定量PCR检测EBV核酸 • EBERs原位杂交实验：EBV感染受累的组织学证据
特异性 指标
感染性疾病ppt课件
感染性疾病ppt 课件
汇报人：XXX
01
感染性疾病的定义与分类
02
感染性疾病的症状与诊断
03
感染性疾病的预防与控制
04
感染性疾病的治疗与康复
05
常见感染性疾病介绍
06
感染性疾病的社会影响
目 录
01
感染性疾病的定 义与分类
定义
感染性疾病是什 么
感染性疾病是由各种 病原体引起的能在人 与人、动物与动物或 人与动物之间相互传 播的一类疾病。
诊断方法
1
临床检查
通过观察患者的症状、体征 和病史，医生可以对感染性
疾病进行初步判断。
2
实验室检测
通过血液、尿液、痰液等样 本的化验，可以进一步确定 病原体类型和感染程度。
3
影像学检查
通过X光、CT、MRI等影像 学检查，可以观察感染部位 和病变程度，有助于诊断感
染性疾病。 介绍常用的诊断方法，如实 验室检测、影像学检查等， 以辅助医生进行准确诊断。
对公共卫生体系的影响
感染性疾病爆发时，公共卫生体系 需增加医疗资源，如床位、医护人 员等，以满足患者需求。
针对特定感染性疾病，政府可能调 整公共卫生政策，如实施旅行限制、 隔离措施等。
感染性疾病的爆发可增强公众对公 共卫生的关注，促使人们更加重视 个人卫生和预防措施。
公共卫生资源配置
公共卫生政策调整
分类
感染性疾病按照病原 体种类可以分为病毒 性感染、细菌性感染、 立克次体感染、螺旋 体感染、原虫感染、 蠕虫感染等。
分类
细菌性感染
由细菌引起的感染性疾病，如肺炎、痢疾等。
病毒性感染
由病毒引起的感染性疾病，如流感、水痘等。
汇报人：XXX
01
感染性疾病的定义与分类
02
感染性疾病的症状与诊断
03
感染性疾病的预防与控制
04
感染性疾病的治疗与康复
05
常见感染性疾病介绍
06
感染性疾病的社会影响
目 录
01
感染性疾病的定 义与分类
定义
感染性疾病是什 么
感染性疾病是由各种 病原体引起的能在人 与人、动物与动物或 人与动物之间相互传 播的一类疾病。
诊断方法
1
临床检查
通过观察患者的症状、体征 和病史，医生可以对感染性
疾病进行初步判断。
2
实验室检测
通过血液、尿液、痰液等样 本的化验，可以进一步确定 病原体类型和感染程度。
3
影像学检查
通过X光、CT、MRI等影像 学检查，可以观察感染部位 和病变程度，有助于诊断感
染性疾病。 介绍常用的诊断方法，如实 验室检测、影像学检查等， 以辅助医生进行准确诊断。
对公共卫生体系的影响
感染性疾病爆发时，公共卫生体系 需增加医疗资源，如床位、医护人 员等，以满足患者需求。
针对特定感染性疾病，政府可能调 整公共卫生政策，如实施旅行限制、 隔离措施等。
感染性疾病的爆发可增强公众对公 共卫生的关注，促使人们更加重视 个人卫生和预防措施。
公共卫生资源配置
公共卫生政策调整
分类
感染性疾病按照病原 体种类可以分为病毒 性感染、细菌性感染、 立克次体感染、螺旋 体感染、原虫感染、 蠕虫感染等。
分类
细菌性感染
由细菌引起的感染性疾病，如肺炎、痢疾等。
病毒性感染
由病毒引起的感染性疾病，如流感、水痘等。
医院感染诊断标准ppt课件
泌尿道感染：如尿道炎、 膀胱炎、肾炎等
血液感染：如败血症、 脓毒血症等
06
神经系统感染：如脑 膜炎、脑炎等
医院感染的诊断 方法
病史和临床表现
病史：患者就诊时的症 状、体征、既往病史等
临床表现：发热、咳嗽、 呼吸困难、胸痛等
实验室检查：血常规、 生化检查、病原学检查
等
影像学检查：X线、CT、 MRI等
医院感染诊断标 准（WS/T 3122020）：由国家 卫生健康委员会 颁布，适用于各 级各类医疗机构
医院感染诊断标 准（WS/T 3122022）：由国家 卫生健康委员会 颁布，适用于各 级各类医疗机构
不同医疗机构根据自身特点制定的诊断标准
1 综合医院：根据患者症状、体征、实验室检查等综合判断 2 专科医院：根据专科特点，制定针对性的诊断标准 3 基层医疗机构：根据基层医疗资源，制定简便易行的诊断标准 4 传染病医院：根据传染病特点，制定严格的诊断标准 5 民营医院：根据市场需求，制定灵活的诊断标准
医院感染的防控 策略
预防措施
加强个人卫生：勤洗手、戴口罩、 01 保持社交距离Байду номын сангаас
加强环境消毒：定期对医院环境
02
进行消毒，保持清洁卫生 加强医疗设备管理：定期对医疗
03
设备进行消毒，确保设备安全 加强培训教育：提高医护人员的
04
感染防控意识和技能
早期发现和隔离病例
01
早期发现：对疑似病例 进行及时、准确的诊断
医院感染的现状和挑战
医院感染现状：全球范围内，医院 感染问题日益严重，对患者健康和
医疗资源造成严重影响。
医院感染原因：多种因素导致医院 感染，包括患者自身免疫力低下、 医疗设备污染、医护人员操作不当
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感染性疾病实验室诊断课件
第一节 概 述
• 感染性疾病：病原体 宿主 疾病 • 病原体（细菌、真菌、病毒、寄生虫 ）
一、当今感染病的特点 1 感染性病原体的种类不断发生变迁
2 宿主的免疫防御能力下降 3 内源性感染与条件致病菌的感染增加
二、 感染类型
（一）按病原体分类
1. 传统病原体感染 细菌： 病毒： 真菌：
（一）直接显微镜检查（形态与结构检查）
•
1. 染色标本检查法
染色标本：了解病原体的形态、染色性或观察宿主细胞内包涵体
• 临床意义：
1.镜检可以了解有无病原体及大致的量
2.根据细菌形态、结构和染色性有助于对病原体的初步识别和分类
3.通过形态学检查可得到初步诊断，对临床早期诊断和治疗疾病有
一定的参考意义
HAV particles found in fecal extracts by immunoelectron microscopy
（二）分离培养和鉴定
分离培养是微生物学诊断的金标准，是最 可靠的传统诊断技术
临床意义： 1.明确感染病原体 2.为临床提供体外抗微生物药物敏
感试验结果
1. 细菌的分离培养和鉴定
1.尽快送检
对环境敏感的细菌应保温立即送检,其他所有采集后最好在2小时内送 检,不能及时送检,应注意保存
2. 必须注意安全防护,切勿污染环境 3.厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，有时可直接
用抽取标本的注射器运送
二、 检验方法
• 查病原体：形态与结构检查
分离培养和鉴定
• 检测病原体成分（抗原和核酸） • 检测患者血清中特异性抗体 •代谢产物 （生化试验） • 毒素：外毒素、内毒素
一 、临床标本的采集与处理
（一）标本采集的一般原则
1.早期 病程早期、急性期或症状典型时
使用抗生素前 2.无菌采集 应无污染，严格进行无菌操作
采集的标本均应盛于无菌容器内
3.根据目的菌的特性用不同的方法采集
4.适量标本,不同病程采集不同部位标本
5.安全采集
做好标记
（二）标本的处理
原则：保持病原体活力，保持标本不被污染，也不污染环境
➢ 常用鉴定试验：
中和实验 血凝抑制实验
病毒学诊断
virus
红细胞凝集抑制（HI）试验
原理： 病毒 +
红细胞
凝集
血凝现象
病毒（特异性抗体） +
红细胞
不凝集
血凝抑制现象
Confocal image showing a macrophage in the lung of a mouse infected with SARS-corona virus. Double immunofluorescence labels the macrophage in red with antibodies against Mac-2 and viral protein in green with antibodies against spike.
2.不染色标本
1) 检查生活状态下细菌的动力及运动状况 2） 螺旋体由于不易着色并有形态特征
对某些病原菌作出初步鉴定，如霍乱弧菌
常用方法 压片法(压滴法)或悬滴法 暗视野显微镜或相差显微镜检查
体癣皮屑可见关节孢子
3. 直接电镜检测EM 免疫电镜技术IEM
HAV形态电镜图 粪便标本负染 X200000
敏感动物合适部位
卵黄囊接种、绒毛尿囊膜接种 尿囊接种及羊膜腔接种
3．组织细胞培养： 目前培养病毒应用最广的方法
（1）原代和次代细胞培养 （2）二倍体细胞培养 （3）传代细胞培养
二）病毒鉴定
识别病毒在培养细胞中增殖
病毒在培养细胞中增殖的指标 1）细胞病变: 细胞病变效应（CPE）、包涵体 2）红细胞吸附（hemadsorption）
如CSF找到抗酸杆菌，应初步考虑结核分枝杆菌感染
革兰阳性
革兰阴性
抗酸染色
培养在McCoy细胞的沙眼衣原体 吉姆萨染 色的McCoy细胞，含大衣原体包涵体，使 部分细胞核不清楚。（吉姆萨染色,放大
1000倍）
狂犬病毒可于细胞浆中 可形成嗜酸性包涵体
新生隐球菌 墨汁负染
假丝酵母菌（白色念珠菌）
革兰染色
(三）按病原体来源 外源性感染 内源性感染
三、感染性疾病的实验诊断
（一）一般实验检测 WBC常规检查 C-反应蛋白（CRP） 血清降钙素原（PCT） 器官功能改变的检测
（二）病原学实验诊断
临床病原体检查目的
明确感染病原体 指导治疗，预防，判断预后
第二节 感染性疾病的常用病原学检测
病原学检测基本程序 ①正确、规范采集和运送标本 ②显微镜对标本或组织中的病原体的形态学检查 ③病原体的分离培养和鉴定 ④用免疫学技术对病原体抗原或相应抗体的检测 ⑤用分子生物学方法对病原体特异性基因的检测
（三）真菌的分离培养
－常用培养基 沙保（Sabourud）培养基
真菌的菌落有两种：酵母型菌落和丝状菌落
酵母型菌落
丝状菌落
新生隐球菌
假丝酵母菌（白色念珠菌）
（三）鉴定
1.糖(醇)类发酵试验 37℃孵育，观察糖发酵情况。 2.同化碳源试验 含菌生理盐水与已融化的固体同化碳
培养特征 形态特征 生化试验 血清学试验 毒力试验 药物敏感试验
培 养 特 征Biblioteka 形态特征细菌学诊断
血清学鉴定
吲哚试验
甲基红试验
枸椽酸盐利用试验
VP试验
大肠埃希菌 对照-
大肠埃希菌 对照- 大肠埃希菌 对照+ 大肠埃希菌 对照+
生化试验
（二） 病毒的分离与鉴定
一）病毒分离培养
1．动物接种
2．鸡胚培养
寄生虫 2. 新发病原体：
SARS冠状病毒 新甲型H1N1流感病毒 高致病性禽流感病毒
(二）按疾病特征分类 1. 病原体被清除 2. 隐性感染(covert infection)，亦称亚临床感染
一般占人群的90％或以上 3. 显性感染(overt infection)又称为临床感染
发病快慢和病程长短：急性感染和慢性感染 感染部位及性质：局部感染和全身感染 全身感染： ①菌血症 ②败血症 ③毒血症 ④脓毒血症
细胞病变效应（CPE）：
病毒感染细胞后引起的细胞病变，可出现细胞圆缩、裂解或细胞 肿大、数个细胞融合成多核巨细胞等。
N
36h
48h
72h
Cytopathic effect (CPE) of primary severe acute respiratory syndrome–associated coronavirus strain
第一节 概 述
• 感染性疾病：病原体 宿主 疾病 • 病原体（细菌、真菌、病毒、寄生虫 ）
一、当今感染病的特点 1 感染性病原体的种类不断发生变迁
2 宿主的免疫防御能力下降 3 内源性感染与条件致病菌的感染增加
二、 感染类型
（一）按病原体分类
1. 传统病原体感染 细菌： 病毒： 真菌：
（一）直接显微镜检查（形态与结构检查）
•
1. 染色标本检查法
染色标本：了解病原体的形态、染色性或观察宿主细胞内包涵体
• 临床意义：
1.镜检可以了解有无病原体及大致的量
2.根据细菌形态、结构和染色性有助于对病原体的初步识别和分类
3.通过形态学检查可得到初步诊断，对临床早期诊断和治疗疾病有
一定的参考意义
HAV particles found in fecal extracts by immunoelectron microscopy
（二）分离培养和鉴定
分离培养是微生物学诊断的金标准，是最 可靠的传统诊断技术
临床意义： 1.明确感染病原体 2.为临床提供体外抗微生物药物敏
感试验结果
1. 细菌的分离培养和鉴定
1.尽快送检
对环境敏感的细菌应保温立即送检,其他所有采集后最好在2小时内送 检,不能及时送检,应注意保存
2. 必须注意安全防护,切勿污染环境 3.厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，有时可直接
用抽取标本的注射器运送
二、 检验方法
• 查病原体：形态与结构检查
分离培养和鉴定
• 检测病原体成分（抗原和核酸） • 检测患者血清中特异性抗体 •代谢产物 （生化试验） • 毒素：外毒素、内毒素
一 、临床标本的采集与处理
（一）标本采集的一般原则
1.早期 病程早期、急性期或症状典型时
使用抗生素前 2.无菌采集 应无污染，严格进行无菌操作
采集的标本均应盛于无菌容器内
3.根据目的菌的特性用不同的方法采集
4.适量标本,不同病程采集不同部位标本
5.安全采集
做好标记
（二）标本的处理
原则：保持病原体活力，保持标本不被污染，也不污染环境
➢ 常用鉴定试验：
中和实验 血凝抑制实验
病毒学诊断
virus
红细胞凝集抑制（HI）试验
原理： 病毒 +
红细胞
凝集
血凝现象
病毒（特异性抗体） +
红细胞
不凝集
血凝抑制现象
Confocal image showing a macrophage in the lung of a mouse infected with SARS-corona virus. Double immunofluorescence labels the macrophage in red with antibodies against Mac-2 and viral protein in green with antibodies against spike.
2.不染色标本
1) 检查生活状态下细菌的动力及运动状况 2） 螺旋体由于不易着色并有形态特征
对某些病原菌作出初步鉴定，如霍乱弧菌
常用方法 压片法(压滴法)或悬滴法 暗视野显微镜或相差显微镜检查
体癣皮屑可见关节孢子
3. 直接电镜检测EM 免疫电镜技术IEM
HAV形态电镜图 粪便标本负染 X200000
敏感动物合适部位
卵黄囊接种、绒毛尿囊膜接种 尿囊接种及羊膜腔接种
3．组织细胞培养： 目前培养病毒应用最广的方法
（1）原代和次代细胞培养 （2）二倍体细胞培养 （3）传代细胞培养
二）病毒鉴定
识别病毒在培养细胞中增殖
病毒在培养细胞中增殖的指标 1）细胞病变: 细胞病变效应（CPE）、包涵体 2）红细胞吸附（hemadsorption）
如CSF找到抗酸杆菌，应初步考虑结核分枝杆菌感染
革兰阳性
革兰阴性
抗酸染色
培养在McCoy细胞的沙眼衣原体 吉姆萨染 色的McCoy细胞，含大衣原体包涵体，使 部分细胞核不清楚。（吉姆萨染色,放大
1000倍）
狂犬病毒可于细胞浆中 可形成嗜酸性包涵体
新生隐球菌 墨汁负染
假丝酵母菌（白色念珠菌）
革兰染色
(三）按病原体来源 外源性感染 内源性感染
三、感染性疾病的实验诊断
（一）一般实验检测 WBC常规检查 C-反应蛋白（CRP） 血清降钙素原（PCT） 器官功能改变的检测
（二）病原学实验诊断
临床病原体检查目的
明确感染病原体 指导治疗，预防，判断预后
第二节 感染性疾病的常用病原学检测
病原学检测基本程序 ①正确、规范采集和运送标本 ②显微镜对标本或组织中的病原体的形态学检查 ③病原体的分离培养和鉴定 ④用免疫学技术对病原体抗原或相应抗体的检测 ⑤用分子生物学方法对病原体特异性基因的检测
（三）真菌的分离培养
－常用培养基 沙保（Sabourud）培养基
真菌的菌落有两种：酵母型菌落和丝状菌落
酵母型菌落
丝状菌落
新生隐球菌
假丝酵母菌（白色念珠菌）
（三）鉴定
1.糖(醇)类发酵试验 37℃孵育，观察糖发酵情况。 2.同化碳源试验 含菌生理盐水与已融化的固体同化碳
培养特征 形态特征 生化试验 血清学试验 毒力试验 药物敏感试验
培 养 特 征Biblioteka 形态特征细菌学诊断
血清学鉴定
吲哚试验
甲基红试验
枸椽酸盐利用试验
VP试验
大肠埃希菌 对照-
大肠埃希菌 对照- 大肠埃希菌 对照+ 大肠埃希菌 对照+
生化试验
（二） 病毒的分离与鉴定
一）病毒分离培养
1．动物接种
2．鸡胚培养
寄生虫 2. 新发病原体：
SARS冠状病毒 新甲型H1N1流感病毒 高致病性禽流感病毒
(二）按疾病特征分类 1. 病原体被清除 2. 隐性感染(covert infection)，亦称亚临床感染
一般占人群的90％或以上 3. 显性感染(overt infection)又称为临床感染
发病快慢和病程长短：急性感染和慢性感染 感染部位及性质：局部感染和全身感染 全身感染： ①菌血症 ②败血症 ③毒血症 ④脓毒血症
细胞病变效应（CPE）：
病毒感染细胞后引起的细胞病变，可出现细胞圆缩、裂解或细胞 肿大、数个细胞融合成多核巨细胞等。
N
36h
48h
72h
Cytopathic effect (CPE) of primary severe acute respiratory syndrome–associated coronavirus strain