人类免疫缺陷病毒(酶联免疫法)SOP
人类免疫缺陷病毒(酶联免疫法)SOP
[结果判断]
1,阴阳性对照和被检样本的OD值减去空白对照OD值即为计算值.
2,若阴性对照OD均值小于0.02按0.02计算.
3,临界值(cut off值)的设定:
cut off值=阳性对照均值X 0.10+阴性对照OD均值
4,被检样本的OD值>=临界值应判为HIV抗体阳性反应,<临界值为阴性反应.
[试剂厂家]
北京万泰生物药业有限公司。
[试剂组成]
1．HIV微孔板4．HIV阴阳对照
2．HIV酶标抗原5.底物液A.B
3．浓缩洗涤液6.终止液
[试剂的稳定性与贮存]
试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内（六个月）稳定。
[标本的收集与处理]
标本为新鲜无溶血血清或血浆。
[操作步骤]
1．取出试剂盒平衡至室温，将浓缩洗涤液用蒸溜水或去离子水按1：19稀释后备用。
待测样本的OD值>=临界值判为HIV抗体阳性,应重新取样双孔复试,复试阳性者应按照"全国HIV检测管理规范"送"HIV确认实验室"进行确认实验.
[质量控制]
为确保测试结果准确可靠，每批测试均应放置阳性质控血清与被检样品同时测试，用以检查试剂性能。
[临床意义]
人体受到免疫缺损病毒（HIV）感染后，试验呈阳性反应，如男性同性恋、静脉药瘾者（吸毒者）、血友病患者、艾滋病人的配偶。个别献血员中也有阳性反应的报告。
5．每孔加入底物液A.B各50ul,轻拍混匀,置37 C避光显色20分钟.
6．显色完毕后,每孔加入终止液50ul,轻拍混匀,立即以空白孔调零,置酶标仪450nm波长测BCD-SOP-01-40
人类免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗体（ELISA）
《中国药典》2020版—人类免疫缺陷病毒抗原抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)
剂分装后，对留样进行无菌检
防腐剂分装后，对留样进行微生物
查，采用直接接种法，应符合规
限度检查，需氧菌总数应不高于
定。
102cfu/ml, 霉菌和酵母菌总数应不
高于10 cfu/ml。
1
附件 2：人类免疫缺陷病毒抗原抗体诊断试盒（酶联免疫法）
品种名称
原公示稿内容（2019年5月）
拟修订内容
人类免疫缺陷病
3.1.3 无菌检查
3.1.3 微生物限度检查
毒抗原抗体诊断
依法检查（通则1101）含有蛋白
依法检查（通则1105 通则1106）含
试剂盒（酶联免
成分的液体组分，半成品加防腐
有蛋白成分的液体组分，半成品加
人类免疫缺陷病毒抗体检测规程
人类免疫缺陷病毒抗体检测规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。
2、将标本对应微孔按顺序编号。
3、配液：将50ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释至1000ml备用。
4、编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照3孔，阳性对照一型、二型各一孔，空白对照一孔。
5、加样：分别在相应孔中加入待测样品或阴、阳性对照100ul。
6、温育：覆盖黏胶纸，置37度孵育30分钟。
7、取出已孵育完毕的反应板，弃去粘胶纸，吸干板内液体，将洗涤液注满各孔（约300微升/孔），吸干，反复5次，在干净纱布上将板拍干。
8、每孔加酶结合物100微升，取新粘胶纸覆盖放映板，置37度孵育30分钟。
9、取出已孵育完毕的反应板，弃去粘胶纸，吸干板内液体，将洗涤液注满各孔（约300微升/孔），吸干，反复5次，在干净纱布上将板拍干。
10、每孔加入底物缓冲液50微升，TMB50微升，混匀，置37度显色10分钟。
11、加终止液50微升震荡反应板5秒钟，使之充分混匀。
12、在酶标度数仪上，取波长450nm（建议使用双波长酶标仪比色，参考波长630nm），仪空白对照孔校零，读取每孔吸收值（加终止液后，务必在15分钟内读数完毕）二、结果判断：抗HIV阳性对照OD值大于0.8，抗HIV阴性对照OD值小于0.08。
Cutoff Value=阳性对照值乘以10%（若阳性对照OD值大于2.5按2.5计算）标本OD值小于等于Cutoff Value为阴性。
标本OD值大于Cutoff Value为阳性。
三、注意事项：1、在试剂的使用单位必须使当地卫生行政部门标准的HIV初筛试验室。
2、整个检测工作必须符合HIV试验室管理范围和生物安全守则规定，严格防止交叉感染。
操作时必须带手套，穿工作服，严格健全和执行消毒隔离制度。
3、HIV检测结果的判定不许以酶标仪的读数为准。
4、标本和酶结合物均应用加样器加注，并经常校对其准确性。
人类免疫缺陷病毒抗体的操作流程
人类免疫缺陷病毒抗体的操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor.I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!人类免疫缺陷病毒抗体检测的操作流程详解人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体检测是诊断HIV感染的关键步骤，它能帮助识别个体是否已经暴露于病毒并产生了免疫响应。
HIV实验室SOP文件-新版
目录HIV筛查实验室的设置及人员情况 (3)HIV筛查实验室工作管理程序 (4)HIV筛查实验室工作流程图 (6)HIV筛查实验室规章制度 (7)一、实验室工作制度 (7)二、岗位责任制 (7)三、标本管理制度 (8)四、试剂管理制度 (11)五、污染区工作守则 (12)六、清洁区工作守则 (13)七、环境消毒隔离制度 (13)八、实验台消毒措施 (14)九、废弃物处置和实验室消毒 (15)十、消毒液的配置及使用措施 (16)十一、消防安全制度 (16)十二、生物安全防护制度 (16)十三、职业暴露的防护及处理措施 (17)十四、筛查检验程序 (18)十五、检测结果的判定方法 (25)十六、检测结果报告规程 (25)十七、检测结果的判定方法 (26)十八、检验结果的解释 (27)十九、检测数据的记录与保存 (28)二十、呈阳性反应标本的处理程序 (28)二十一、检测数据季报方案和程序 (29)二十二、感染追踪处理方案 (30)二十三、保密程序制度 (31)二十四、质量管理制度 (32)二十五、室内质控分析管理制 (33)二十六、外部质控血清的制备和保存 (34)二十七、仪器的使用维护 (35)人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（酶联免疫法） (36)程序HIV-抗体初筛试验标准操作（酶联免疫法） (37)人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（酶联免疫法） (38)人类免疫缺陷病毒抗体检测（胶体金法） (39)科华酶标仪的标准操作程序（SOP） (40)科华全自动洗板机标准操作规程 (40)加样器的维护保养程序 (41)加样枪校准记录 (41)生物安全柜的标准操作程序（SOP） (42)离心机操作维护规程 (47)室内质量控制的标准操作程序 (48)室间质量评价的标准操作程序（EQA） (55)实验室意外和事故处理 (58)艾滋病的职业暴露后预防 (60)附表1 HIV抗体筛查报告 (61)附表2 HIV抗体复检检测单 (62)附表3 HIV抗体检测数季报表 (65)附表4 艾滋病职业暴露个案登记表 (66)附表5 艾滋病防治工作人员职业暴露事故汇总表 (70)HIV筛查实验室的设置及人员情况为了更好发挥艾滋病检测在艾滋病防治工作中的作用，根据《全国艾滋病检测技术规范》对于艾滋病的检测要求，我院检验科设置了独立的HIV筛查实验室。
HIV初筛实验室标准操作规程
HIV初筛实验室标准操作规程人类免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗体酶联免疫原理和方法（上海科华生物）原理：用HIV-1+2型抗原包被酶联板。
待检血清或血浆中的抗-HIV抗体与包被抗原反应，再与酶标HIV-1+2型抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物。
加底物（TMB显色，在酶标仪上测定后根据0D值判定有无HIV抗体的存在。
操作步骤：1、取出HIV抗原包被板。
每次试验设空白对照1孑L,阴性对照各1孑L,阳性对照各3孔（其中阳性对照1两孔，阳性对照2 一孔），质控一孔。
分别加入HIV阴、阳性对照质控血清各100微升，其余孔加入待检样本各100微升。
贴上封口胶，置37C温育60分钟。
2、将浓缩洗液用纯化水25倍稀释后洗涤用。
3、弃去各孔中样品、拍干。
每孔加满洗液，静置数秒后弃去，如此重复洗5次，拍干。
4、每孔加入酶标抗原工作液100微升，贴上封口胶。
37E温育30分钟。
5、弃去各孔中酶液，用洗液反复洗涤5次（操作同步骤3）。
&每孔加入底物液A50微升，再加入底物液B50微升，轻拍混匀，置37E 避光显色30分钟。
7、显色完毕后，每孔加入终止液50微升，轻拍混匀，置酶标仪450nm波长处测定OD fi （参考波长为630nm。
结果判定：阴、阳性对照和被检样本的0D值减去空白对照0D值即为计算值。
2、若阴性对照0D均值小于按计算。
3、临界值（cut off 值）的设定：cutoff 值=PCx X 10% （若PCx＞按算）4 、被检样本的OD®》临界值应判为HIV抗体阳性反应，＜临界值为阴性反应。
检测样本的OD值》临界值判为HIV抗体阳性，应重新取样双孔复试，复试阳性者应按照“全国HIV检测管理规范”送“ HIV确认实验室”进行确认实验。
注意事项：1、本试剂的使用单位必须是当地卫生行政部门批准的HIV初筛实验室。
2、整个HIV检测必须符合《全国艾滋病检测工作规范》严格防止交叉感染。
操作时必须戴手套，穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度。
人类免疫缺陷病毒(HIV 1+2)抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)
人类免疫缺陷病毒（HIV 1+2）抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）说明书批准文号：国药准字S2*******本品系用HIV特异性抗原gp160和gp36等包被酶标反应板，用gp160和gp36标记辣根过氧化物酶，应用双抗原夹心法原理（ELISA）检测人血清或血浆中的HIV-1/HIV-2抗体。
【样本要求】人血清和血浆。
【使用方法】1、每次试验设阴性、阳性对照各两孔，分别加入阴性、阳性对照血清100μl，再设一孔空白对照，其余孔加入100μl被测样本，置37℃孵育30分钟。
弃去孔内样本，扣干。
2、用洗涤液注满每孔（至少300μl洗涤液/孔），勿溢出，静置5秒钟后扣干，重复5次。
3、每孔加酶结合物100μl（空白对照孔不加），置37℃孵育30分钟，同上法洗反应板5次。
4、每孔加显色剂A液、B液各50μl，轻轻振荡后，37℃避光静置15分钟。
5、每孔加入终止液50μl终止反应，以空白调零，在酶标仪中读取各孔OD450。
【结果判定】1、 实验设计要求阳性对照平均值大于1.20，阴性对照平均值小于0.10，阳性、阴性对照OD值之差应大于1.20，否则本次实验无效。
2、 若阴性对照读数小于0.05时，按0.05计算。
3、 临界值（Cut off value）=阴性对照平均值+0.10。
4、 测试样本的计算值小于Cut off value则为HIV抗体阴性。
5、 测试样本的计算值等于或大于Cut off value则为HIV抗体阳性。
（注意：初试阳性标本应重新取样进行双孔复试，复试阳性者应按“全国艾滋病检测管理规范”送HIV确认实验室进行确认实验）。
【注意事项】1、 本试剂的使用单位必须是经当地卫生行政部门批准的HIV初筛实验室。
2、 整个HIV检测必须符合《HIV实验管理规范和生物安全守则规定》，严格防止交叉感染。
操作时必须戴手套、穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度。
3、 HIV抗体测定结果的判定必须以酶标仪读数为准。
酶联免疫法sop文件
酶联免疫法sop文件1、原理：本法采用间接酶联免疫吸附实验原理，在微孔上预包被基因重组HCV结构和非结构区，配以酶标记Ig G抗体及TMB显色等其他试剂，检测人血清和血浆中的丙型肝炎病毒抗体。
2、标本采集与处理（1）受检者准备:对于体检对象，抽血前保持平时的饮食习惯，采血前应禁食4-6个小时（2）静脉采血：除非是卧床病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，因此影响测定水平，故在采血前至少应静坐五分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
（3）采血管：一般采用血清做检查，可以用一般洁净的塑料管和玻璃试管作为容器（4）标本处理：血液标本应尽快的送实验室，试剂使用样品为人血清和血浆，含EDTA，柠檬酸钠和肝素等抗凝剂的样品可用于本实验（5）标本接收：接受标本时，应检查标本是否符合要求，所用试管是否正确，试管是否填写完整。
并问讯采血日期，对不合格标本应退回重采并填写记录。
（6）标本储存: 样品中应无微生物，在2-8℃储存一周。
长期储存应低温冷存，避免反复冻融。
试剂配制：8*12孔或12*8HCV酶标试剂12ml*1瓶HCV阳性对照0.2ml*1支HCV阴性对照0.2ml*1支底物液A、B液各6ml*1瓶终止液6ml/*1瓶自封袋1个封版膜2张3、操作步骤（1）配液：浓缩洗涤用蒸馏水或去离子水20倍稀释（2）编号：将样品对应微孔按续编号，每板应设阴性对照3孔和空白对照1孔，其余各孔加入100ul样品稀释液（3）加样：分别在相应孔中加入待测样品，阴，阳对照，十微升轻轻震荡混匀（4）温育: 用封板膜封板后。
至37℃温育60分钟（5）洗涤：揭掉封版膜，用洗板机洗涤5遍，最后一次尽量扣干（6）加酶标抗体：空白对照孔不加酶标试剂，每孔加入酶标记抗体100ul轻轻震荡混匀。
（7）温育：置37℃温育30分钟（8）洗涤：揭掉封板膜，用洗板机洗涤5遍，最后一次尽量扣干（9）显色：每孔加终止液1滴（50ul）轻轻震荡混匀（10）测定：10分钟内测定结果，设立酶标仪单波长450nm或双波长450nm/600-650nm测定。
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[结果判断]
1,阴阳性对照和被检样本的OD值减去空白对照OD值即为计算值.
2,若阴性对照OD均值小于0.02按0.02计算.
3,临界值(cut off值)的设定:
cut off值=阳性对照均值X 0.10+阴性对照OD均值
4,被检样本的OD值>=临界值应判为HIV抗体阳性反应,<临界值为阴性反应.
待测样本的OD值>=临界值判为HIV抗体阳性,应重新取样双孔复试,复试阳性者应按照"全国HIV检测管理规范"送"HIV确认实验室"进行确认实验.
[质量控制]
为确保测试结果准确可靠，每批测试均应放置阳性质控血清与被检样品同时测试，用以检查试剂性能。
[临床意义]
人体受到免疫缺损病毒（HIV）感染后，试验呈阳性反应，如男性同性恋、静脉药瘾者（吸毒者）、血友病患者、艾滋病人的配偶。个别献血员中也有阳性反应的BCD-SOP-01-40
人类免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗体（ELISA）
版序：ABCD
页码：第1页，共2页
[原理]
本实验采用双抗原夹心ELISA方法检测血清或血浆中人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体。酶联板用HIV-1+2型抗原包被，待测血清中的抗HIV抗体与包被抗原反应，再与酶标HIV-1+2型抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物。加底物（TMB）显色，在酶标仪上测定后根据OD值判断有无HIV抗体的存在。
5．每孔加入底物液A.B各50ul,轻拍混匀,置37 C避光显色20分钟.
6．显色完毕后,每孔加入终止液50ul,轻拍混匀,立即以空白孔调零,置酶标仪450nm波长测定OD值.
ABCD医院
HIV实验室
文件编号：
ABCD-SOP-01-40
人类免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗体（ELISA）
版序：ABCD
2．取出HIV抗原包被板,每次试验设空白对照1孔，阴阳对照各2孔.除空白对照孔外,分别加入HIV阴阳对照各20ul，其余孔加入待检血清各20ul。
3．分别在每孔加入酶标记抗原100ul ,轻拍混匀，封口胶封好，置于37 C温育60分钟。
4．用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完毕后扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。
[试剂厂家]
北京万泰生物药业有限公司。
[试剂组成]
1．HIV微孔板4．HIV阴阳对照
2．HIV酶标抗原5.底物液A.B
3．浓缩洗涤液6.终止液
[试剂的稳定性与贮存]
试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内（六个月）稳定。
[标本的收集与处理]
标本为新鲜无溶血血清或血浆。
[操作步骤]
1．取出试剂盒平衡至室温，将浓缩洗涤液用蒸溜水或去离子水按1：19稀释后备用。