莪术醇对人胃癌细胞凋亡、MMP2、NO影响的初步
莪术油中3种倍半萜类化合物对肝癌HepG2细胞增殖抑制作用的研究
莪术油中3种倍半萜类化合物对肝癌HepG2细胞增殖抑制作用的研究王佳丽;王秀;夏泉;汪楠;芮盼【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2014(036)007【摘要】目的观察莪术油中3种倍半萜类化合物(莪术二酮、莪术醇和吉马酮)对肝癌HepG2细胞增殖抑制的影响.方法 MTT法观察莪术油及3种倍半萜类化合物对细胞生长的影响,用流式细胞术检测其对细胞周期的影响.结果 MTT检测结果显示莪术油、莪术二酮、莪术醇和吉马酮对HepG2细胞增殖具有抑制作用(P＜0.01),且呈浓度依赖性和时间依赖性,3种倍半萜中吉马酮的增殖抑制作用最强.流式细胞术结果显示莪术油、莪术二酮、莪术醇和吉马酮能使细胞阻滞在G2期(P＜0.01).结论莪术油及其3种倍半萜类化合物对HepG2细胞增殖均有抑制作用,可能是莪术发挥抗肿瘤作用的活性成分.【总页数】5页(P1535-1539)【作者】王佳丽;王秀;夏泉;汪楠;芮盼【作者单位】安徽医科大学药学院,安徽合肥230032;铜陵市人民医院药剂科,安徽铜陵244000;安徽医科大学药学院,安徽合肥230032;安徽医科大学第一附属医院药剂科国家中医药管理局中药化学三级实验室,安徽合肥230022;安徽医科大学药学院,安徽合肥230032;安徽医科大学药学院,安徽合肥230032【正文语种】中文【中图分类】R966【相关文献】1.四味归肝经虫类中药对肝癌HepG2细胞增殖抑制作用对比研究 [J], 孙婧;田雪飞2.Src蛋白在肝癌HepG2细胞增殖凋亡中作用的初步研究 [J], 毛成毅;郑继军;杜娟;马瑜;林俐;李增鹏;陈芳3.顺铂对肝癌HepG2细胞增殖抑制作用的实验研究 [J], 周丽霞;杨森;那文婷;陆莉;王译擘;吴珏;张巍4.顺铂对肝癌HepG2细胞增殖抑制作用的实验研究 [J], 周丽霞;杨森;那文婷;陆莉;王译擘;吴珏;张巍;5.大蒜素对人肝癌HepG2细胞增殖抑制作用的研究 [J], 李鹏辉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
MMP-2、MMP-9与胃癌侵袭、转移的关系
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４ ・
实 用 临床 医 学 ２ １ ０ ２年 第 ｌ ３卷 第 ２期
Ｐ ａ￣ ａ ＣｉｉａｌＭ ｒｃ ｃｌ ｌ ｃ ｎ
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ｅ ｃｎｅ， ２ ２， ｉ１ Ｎｏ ２ ｄｉｉ ０１ Ｖｏ ３，
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移 。其 中男 ２ ４例 ， ２ 女 ０例 ， 龄 ２ ～ ７ 年 ８ ８岁 ， 均 平
（４８ １． ） 。 ５． ± ３４ 岁
侵 袭与 转移 过程 ＿ ２ 。 引。 ＭＭＰ ２ ＭＭＰ ９是 ＭＭＰ 一、 一 ｓ家 族 的 重 要 成 员 ， 它们 能破 坏细胞 外 基质 中最 重 要 的成 分 Ⅳ 、 型胶 Ｖ 原 和明胶 ， 同时它们 可以激活 并促进 新生 血管 生成 。 它们 的过 度表 达与人 类多 种恶 性肿 瘤侵袭 转 移及 预 后 密切 相关 。潘海 邦等 研究 发现 ， 胃癌 中 ＭＭＰ ９ 一 呈 高表 达 ， 且与 胃癌 的分 化 、 浸润 、 转移 、 临床 分期 均 密切相 关 ， 示 ＭＭＰ９与 胃癌 的浸 润 、 移 、 后 提 一 转 预 有密切 关 系 。仰 丽 丽 等［ 检 测 ６ ５ ４例 胃癌 原 发 灶 标 本 中 ＭＭＰ２表达 结 果 提示 ＭＭＰ ２的表 达 与 胃癌 一 一 临床 分期 、 有无 淋 巴结 转移 及 Ｔ ＮＭ 分期 相关 。 本实 验显示 ＭＭＰ ２ ＭＭＰ ９表 达在 浆 膜 层 有 一、 － 浸 润 中的表达 高于 无 浸 润 ， 有 淋 巴结 转 移 中的表 在 达 高于无 转 移 ， 与 以往 的相 关 研 究 结论 一 致 。因 这 此 笔 者考 虑 ＭＭＰ ２ ＭＭＰ ９与肿 瘤 的发 展 和预 后 一、 － 有 关 ， 能 的原 因为 胃癌 细 胞 的 侵 袭及 转 移 须 依 赖 可 于两类 相互 作用 ， 胃癌 细胞 与 宿 主 基质 细 胞 之 间 即 的细胞一 细胞相 互 作 用 及 胃癌 细胞 与细 胞 外 基 质 之 间 的细胞一 基质 相 互 作 用 。这 ２种 相 互 作 用 的联 合 效应 就是 产生 、 释放 和 激 活 一 系列 细 胞 因子 及生 长 因子 ， 们 可 以直 接 或 间 接 调 节 ＭＭＰ ２ ＭＭＰ ９ 它 －、 一。
莪术醇对胃癌AGS_细胞增殖、凋亡的影响及机制研究
中药莪术醇构建胃癌细胞疫苗对胃癌的实验治疗效果
中药莪术醇构建胃癌细胞疫苗对胃癌的实验治疗效果徐立春;卜平;许祥裕;陈平;边可君;周娟;刘志敏;孙振华【期刊名称】《中医杂志》【年(卷),期】2007(48)5【摘要】目的研究莪术醇修饰构建的肿瘤细胞疫苗对人胃腺癌细胞(SGC-7901)等的抗瘤作用。
方法用莪术醇及新城鸡瘟病毒对SGC-7901细胞进行系列生物修饰,所构建的瘤苗分别对小鼠免疫接种3次后,接种SGC-7901胃肿瘤细胞,观察各组治疗及免疫效应。
结果莪术醇构建的SGC-7901瘤苗能显著抑制皮下肿瘤结节形成,明显阻止胃癌细胞的肺转移,延长荷瘤鼠的生存时间。
各组免疫效应淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK细胞)较同龄未免疫小鼠的LAK细胞对小鼠前胃癌细胞具有更强的抗瘤作用。
结论莪术醇修饰构建的SGC-7901新型疫苗可以增强胃肿瘤细胞的免疫原性,对胃癌有较好的实验治疗效果。
【总页数】3页(P450-452)【关键词】莪术醇;人胃腺癌细胞;新城鸡瘟病毒;生物疫苗构建;治疗效果【作者】徐立春;卜平;许祥裕;陈平;边可君;周娟;刘志敏;孙振华【作者单位】扬州大学中西医结合研究所;南京军区军事医学研究所;江苏省苏北人民医院【正文语种】中文【中图分类】R735.2【相关文献】1.莪术醇生物构建自体瘤苗治疗晚期胃癌患者近期疗效研究 [J], 高鹏;徐立春;陈平;刘晓丹;倪庆;方晓华;王家兴;周娟;刘丽娟;许祥裕2.辅助性T细胞和细胞毒性T淋巴细胞双表位修饰的树突状细胞肿瘤疫苗治疗胃癌的实验研究 [J], 李强;张轶;陈雪华;曹伟新;顾琴龙;朱正纲;刘炳亚3.莪术醇诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡与细胞内活性氧增加的实验研究 [J], 徐立春;刘丽娟;王耀霞;陈海燕4.莪术醇瘤苗治疗胃癌的实验研究 [J], 徐立春;陈平;孙振华;刘丽娟;卜平5.莪术醇生物修饰构建的瘤苗治疗胃癌的实验研究 [J], 徐立春;许祥裕;陈平;周娟;刘志敏;孙振华;边可君;朱海航;卜平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
莪术醇对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响
莪术醇对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响杨甲平;齐宝宁【期刊名称】《陕西中医学院学报》【年(卷),期】2009(0)6【摘要】目的研究莪术醇对人胃癌SGC-7901细胞生物学特性的影响。
方法用MTT法测定莪术醇对SGC-7901细胞增殖的影响,流式细胞仪检测莪术醇对SGC7-901细胞周期和细胞凋亡的影响。
结果10、30、100μg/mL莪术醇均能够抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖;莪术醇能使S和G2/M期肿瘤细胞比例减少,G0/G1期肿瘤细胞比例增加,其中100μg/mL浓度的莪术醇作用最强(F=88.14,P<0.01);莪术醇诱导肿瘤细胞凋亡,其中100μg/mL浓度的莪术醇凋亡作用最强(F=34.14,P<0.01)。
结论莪术醇诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞的增殖。
【总页数】3页(P69-71)【关键词】莪术醇;细胞增殖;细胞周期;细胞凋亡【作者】杨甲平;齐宝宁【作者单位】陕西省安康市汉滨区第二人民医院内科;陕西中医学院公共卫生系【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.过表达Mxi1对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响 [J], 胡圳圳;蒋秀琴;许金金;郭文文;郑大同2.GRP78在胃癌中表达水平及沉默表达后对人胃癌SGC-7901/DDP细胞增殖和凋亡的影响 [J], 陈敏捷;吴清明3.胃肠安对人胃癌细胞SGC-7901原位移植瘤细胞增殖和凋亡的影响 [J], 郑嘉岗;赵爱光;顾缨;尤圣富;赵海磊;唐莱娣4.三七总皂苷对人胃癌SGC-7901细胞增殖、侵袭及凋亡的影响 [J], 高晓会;张亚利;张治业;郭双双;郭艳珍5.SAL与EGCG联合应用对人胃癌细胞株SGC-7901增殖、凋亡的影响及其机制[J], 米志宽; 隋丽欣; 赵菊梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
黄芪莪术配伍对胃癌细胞cox-2表达的调节作用
COX-2、PPARγ、NF-κB的影响. 方法: 以黄芪 、 莪术配伍作用于 M K N-45 细 胞, 并设塞莱希布组、罗格列酮组、黄芪 组 、 莪术组和空白组相对照 . 用 MTT 法观察 各组药物对胃癌细胞的抑制率, 用RT-PCR以 及 Western blot 方法检测给药后人胃癌细胞 COX-2、PPAR γ、NF-κ B基因及COX-2蛋白 表达的变化. 结果: 各组对COX-2和NF-κ B的mRNA表达均 有抑制作用, 除莪术外对PPAR γ mRNA均有 促表达作用 , 其中以塞莱希布组和配伍组对 COX-2 mRNA表达的抑制作用最为明显, 且配 伍组作用明显强于黄芪组和莪术组, 以罗格列 酮组和配伍组对NF-κ B mRNA的表达抑制作 用和对PPARγ表达的促表达作用都是最明显. 结论: 黄芪、莪术配伍能起到增效作用, 对细 胞的抑制效应明显, 对COX-2的抑制作用大于 黄芪、莪术的单独效应, 与塞莱希布相近, 其 对COX-2的抑制作用可能是通过PPAR γ/NFκB信号途径发挥作用的.
关键词: 黄芪; 莪术; 配伍; 胃癌; 信号通路; 环氧化 物合成酶2; 过氧化物酶增殖因子激活受体γ; 核因 子κB
沈天华, 沈洪, 骆殊, 朱学军伍对胃癌细胞COX-2表达的调节作用. 世界华人消化杂志 2008; 16(32): 3599-3604
®
wcjd@
世界华人消化杂志 2008年11月18日; 16(32): 3599-3604 ISSN 1009-3079 CN 14-1260/R
基础研究 BASIC RESEARCH
黄芪、莪术配伍对胃癌细胞COX-2表达的调节作用
沈天华, 沈 洪, 骆 殊, 朱学军, 刘 丽, 李春婷, 刘亚军
Shen TH, Shen H, Luo S, Zhu XJ, Liu L, Li CT, Liu YJ. Regulatory effect of compatibility of Astragalus membranaceus and Rhizoma curcumae on COX-2 expression in gastric cancer MKN-45 cells. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2008; 16(32): 3599-3604
Galectin-3和MMP-2在胃癌患者中的表达及临床意义的开题报告
Galectin-3和MMP-2在胃癌患者中的表达及临床意
义的开题报告
胃癌是一种常见的恶性肿瘤，其发病率和死亡率在全球范围内居高
不下。
目前，胃癌治疗的有效性和预后取决于其早期诊断和治疗。
因此，发现新的生物标志物来预测胃癌患者的预后和治疗反应具有重要的临床
意义。
Galectin-3是一种重要的细胞表面分子，在细胞增殖、细胞凋亡、细胞黏附和转移等多个生物学过程中发挥着重要的作用。
已有研究表明，Galectin-3在胃癌的发生和发展中发挥着重要的作用。
因此，其在胃癌患者中的表达水平和临床意义成为了研究的重点。
MMP-2是一种胶原酶，参与许多生理和病理过程，如胚胎发育、组
织修复和癌症转移等。
在胃癌中，MMP-2的异常活性与其侵袭和迁移的
能力密切相关。
因此，MMP-2的表达水平和胃癌患者预后的关系也成为
了研究的焦点。
本研究的目的是探究Galectin-3和MMP-2在胃癌患者中的表达及其与临床特征和预后的关系。
研究采用免疫组织化学方法检测胃癌组织和
正常胃组织中Galectin-3和MMP-2的表达水平，并分析其与胃癌患者的
临床病理特征和预后的关系。
预期结果显示，Galectin-3和MMP-2在胃癌组织中的表达水平明显
高于正常胃组织，在不同分期的胃癌患者中表达水平呈现升高趋势。
通
过统计分析发现，胃癌患者中Galectin-3和MMP-2表达水平的升高与胃
癌的恶性程度密切相关，具有一定的预测价值。
本研究将为深入了解胃癌发生和发展的分子机制提供有力的支持，
为胃癌的临床预后评估和治疗提供新的生物标志物。
黄芪、莪术配伍对胃癌MKN-45细胞COX-1、COX-2、NF—κB、VEGF、MMP-2表达的影响
［ 作者 简 介 】 骆 殊（ ９ ８ ） 男 ， 士 ， 究方 向为 中药抗 肿瘤 的分 子 机 制 。 １ ７一 ， 博 研 ［置 作 者 】 沈 洪（ ９ ９ ） 男 ， 授 ， 士生 导 师 ， 要从 事 消 化 系 统 疾病 的研 究 工 作 。Ｅ—ｍａ ：ｈｎ ｏ ｇ ９ ＠１ ３ Ｃｒ ｊ信 １ ５一 ， 教 博 主 ｉ ｓｅｈ ｎ９ ９ ６ Ｏ ｌ ｎ ［ 金 项 目】 江 苏省 中 医药 管 理 局资 助 益 气 活 血 疗 法 的 研 究 越 发 深 入 ， 在 临 床 上 取 并 得 了显 著 效 果 。 为 进 一 步 探 讨 益 气 活 血 治 法 的 抗 癌 作 用 机 制 ， 研 究 观 察 了益 气 活 血 治 法 中最 常 用 的 黄 芪 、 术 对 胃 癌 本 莪 ＭＫ 一 ４ 细 胞 环 氧 合 酶 （ Ｏ Ｎ ５ Ｃ Ｘ）一 １ Ｃ Ｘ ２ Ｎ 出 、 、Ｏ 、 Ｆ Ｖ Ｇ 、 Ｅ Ｆ ＭＭＰ一２表 达 的 影 响 ， 分 子 、 白水 平 探 讨 中 药 的 从 蛋
５ ０ ， 冰 箱 过 夜 。一 抗 孵 育 成 功 后 用 Ｔ Ｓ 洗 ３次 ， 次 ０ ） ４℃ ＢＴ 每
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现 代 中西 医 结 合 杂 志 Ｍｏ ｅｎ ｏ ｒａ ｏ Ｉ ｔ ｒｔｄ ａ ｉｏ ａ Ｃ ｉｅｅ ｎ ｅ ｅｎＭｅ ｉ ｎ ０ ９Ｆ ｂ １ （ ） ｄ ｒ ｕ ｎ ｌ ｆ ｎｅ ａｅ ｄｔ ｎ ｌ ｈ ｓ ｄＷ ｓ ｒ ｄ ｉｅ ０ ｅ ， ８ ４ Ｊ ｇ Ｔｒ ｉ ｎ ａ ｔ ｃ ２
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胃癌在我国是最常见的恶性肿瘤之一，手术是其最有效的治疗方法，对于术后复发失去再次手术机会的及晚期胃癌患者，化疗仍是最有效的手段之一，但其疗效不尽人意，因为在消灭肿瘤细胞的同时，受其毒副作用影响而表现出较差的预后。
因而寻求一种新的治疗方案迫在眉睫。
肿瘤的靶向治疗基于分子水平，通过抑制相关蛋白或基因在信号转导通路、血管生成等途径发挥较强的抗肿瘤作用，且细胞毒性作莪术醇对人胃癌细胞凋亡、ＭＭＰ２、ＮＯ影响的初步探讨徐立春陈海燕文洁陶亚玲扬州大学医学院肿瘤防治研究中心，江苏扬州225001[摘要]目的初步探讨莪术醇（Curcumol）对人胃腺癌细胞（SGC-7901细胞）凋亡、基质金属蛋白酶（MMP2）、一氧化氮（NO）的影响。
方法将莪术醇溶于无水乙醇中，初始浓度为9mg/mL，设实验1、2、3、4、5组，莪术醇的浓度分别是7.5、15、30、60、120μg/mL，并以含1%无水乙醇的培养液为对照组。
采用台盼蓝（Trypan blue）、噻唑蓝（MTT）法检测SGC-7901细胞的活性及莪术醇对SGC-7901细胞抑制增殖的影响；用流式细胞仪（FACSCalibur）检测莪术醇对SGC-7901细胞的凋亡率；用蛋白质印迹法检测莪术醇作用于SGC-7901细胞后，其MMP2的表达情况；NO试剂盒检测莪术醇作用SGC-7901细胞后的细胞培养液上清的NO含量。
结果30μg/mL的莪术醇在药物浓度与抑制肿瘤生长方面效果较佳，与对照组比较，其抑制肿瘤细胞增殖差异有统计学意义（P<0.05）；莪术醇实验组能促进细胞凋亡，与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）；莪术醇实验组作用细胞后，其MMP2蛋白表达明显下降，与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）；实验研究表明，随着莪术醇实验组浓度的增加，其细胞培养液上清中的NO含量逐渐降低，与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。
结论30μg/mL的莪术醇浓度是最佳药效组，它能显著抑制SGC-7901细胞的增殖，明显促进肿瘤的细胞凋亡，显著抑制MMP2的表达，降低细胞培养液上清中的NO含量，从而发挥系列抗肿瘤作用。
本研究从细胞分子水平探讨莪术醇治疗胃癌可能存在的部分机制，为临床应用莪术醇及其衍生物或结构类似物治疗胃癌提供理论与试验依据。
[关键词]莪术醇；SGC-7901；凋亡；基质金属蛋白酶；一氧化氮[中图分类号]R000[文献标识码]A[文章编号]1673-7210（2012）12（a）-0018-04Preliminary discussion on effect of curcumol in apoptosis,MMP2and NO in SGC-7901cellsXU Lichun CHEN Haiyan WEN Jie TAO YalingCancer Prevention Research Center,Medical College of Yangzhou University,Jiangsu Province,Yangzhou225001,China [Abstract]Objective To discuss the effects of Curcumol on the apoptosis,MMP2and NO of human gastric cancer cells (SGC-7901cells).Methods Curcumol was dissolved in dehydrate alcohol and the initial concentration of Curcumol was9 mg/mL.Group1,group2,group3,group4and group5were set up as experimental groups.The Curcumol concentrations were set as follows:7.5,15,30,60,120μg/mL,control group contained1%dehydrate alcohol(dissolvent compare).The Trypan blueand method was used to analyze the cytoactive of SGC-7901;MTT assay was performed to study the inhibitory rate of SGC-7901cells proliferation;the metastasis of SGC-7901was described through the scratches experiment;the apoptosis rate were detected by FACSCalibur and the expression of Matrix metalloproteinase2(MMP2)were detected by Western Blot.The content of NO in cell culture medium was detected by NO kit.Results Curcumol had a good effect on drug concentration and restrain the tumor growth in30μg/mL,and compared with controls,it had significant difference in restrain the proliferation of tumor cell(P<0.05);Curcumol could promote the apoptosis,it showed significant difference when compared with controls(P<0.05);Curcumol could make the expression of MMP2protein descend to varying de-grees,it had significant difference when compared with controls(P<0.05);this research showed with the increasing of the concentration of curcumol,the content of the NO in the supernate gradually reduced,it had significant difference when compared with controls(P<0.05).Conclusion Curcumol in30μg/mL is the best efficacy group,it can significantly inhib-it the proliferation of SGC-7901cell,significantly promote the tumor cell apoptosis,significantly inhibit the expression of MMP2,reduce the content of NO in supernate,and express the series antitumor function.This study discusses the possible mechanism of curcumol cure the stomach cancer from cell and molecular level;provide the basis in theory and experiment for clinical application that Curcumol and its derivatives or structure analogues treat stomach cancer.[Key words]Curcumol;SGC-7901;Apoptosis;MMP2;NO[基金项目]江苏省医学卫生重点基金资助项目（编号：K200511）。
[作者简介]徐立春，研究员，教授，主要从事肿瘤防治基础与临床方面的研究。
用明显减少，故成为肿瘤治疗的新希望。
近年来，中药及其有效成分抗肿瘤作用的研究取得很大进展。
研究显示，天然药物及有效成分可以通过诱导细胞凋亡、细胞分化、抑制血管生成、逆转多药耐药等发挥抗肿瘤作用。
同时中药具有多靶点、多环节、多效应、毒副作用低、提高机体免疫力、不易产生耐药等优点。
莪术醇（Curcumol）又名姜黄环奥醇，为具有半缩酮的氢化奥类化合物，为莪术的提取物———莪术挥发油中抗肿瘤活性成分。
目前研究发现莪术提取物莪术醇能杀伤肿瘤细胞，诱导肿瘤细胞凋亡，有抑制血管生成的作用，且不良反应少，有学者认为抑制肿瘤生长与抑制环氧化酶2mRNA和血管内皮生长因子mRNA的表达有关[1-4]。
本研究以人胃腺癌（SGC-7901）细胞为研究对象，采用现代高新技术从细胞分子水平探讨莪术醇抑制胃癌细胞生长可能存在的部分机制，为临床应用莪术醇及其衍生物或结构类似物治疗胃癌提供理论与实验依据。
1材料与方法1.1材料①莪术醇（纯度95%）：扬州大学中西医结合研究所提供。
②RPMI-1640培养基：美国GIBCO公司；③Annexin V-FITC试剂盒：上海晶美生物工程有限公司；④Braford检测蛋白含量试剂盒、Mouse Anti-actin、山羊抗兔IgG-HRP、山羊抗鼠IgG-HRP：武汉博士德生物工程有限公司；⑤Rabbit Anti-MMP2：美国eBioscience公司；⑥NO试剂盒：南京建成生物公司；⑦MTT、DMSO：上海生工生物工程有限公司；⑧细胞株：人胃腺癌SGC-7901细胞株由上海细胞生物所提供。
1.2方法1.2.1将莪术醇溶于无水乙醇溶液，其工作浓度中乙醇的最终浓度为1%，设实验组和对照组，实验组莪术醇的浓度为7.5、15、30、60、120μg/mL。
SGC-7901细胞复苏后加入RPMI1640培养液（pH=7.2，10%小牛血清，青霉素及链霉素各100U/mL）后置于CO2培养箱中培养，2～3d传代一次。
用对数生长期的细胞进行实验。
1.2.2采用MTT法检测不同浓度组的莪术醇对人胃腺癌SGC-7901细胞细胞增殖的影响。
将对数生长期的SGC-7901细胞计数接种于96孔培养板，每孔约5000个细胞，设6个复孔，200μL/孔，置于CO2培养箱中培养，24h后，更换含莪术醇的培养液，药物浓度及分组按实验设计进行。