磁珠法(多糖多酚)植物组织基因组DNA提取试剂盒
基因组DNA提取试剂盒 说明书

基因组DNA 提取试剂盒使用说明书此说明书仅适用于此说明书仅适用于基因组基因组DNA 提取试剂盒提取试剂盒,,使用前请务必仔细阅读说明书有关内容使用前请务必仔细阅读说明书有关内容,,若有任何疑问若有任何疑问,,欢迎致电厦门欢迎致电厦门致致善生物科技有限公司生物科技有限公司((4006618810*************)进行咨询进行咨询,,您也可以登录我们公司的网站您也可以登录我们公司的网站(( )了解相关信息或者通过E-mail ( ****************) 与我们进行沟通与我们进行沟通。
一 产品简介基因组DNA 提取试剂盒采用本公司自行研制的磁珠,用于从抗凝全血、新鲜或冻存组织、培养细胞、石蜡包埋组织、唾液、培养细菌等一系列不同样品中分离、纯化高质量的基因组DNA。
我们根据磁珠的独特分离作用,提供了一个极其简便的操作程序:样品裂解、磁珠吸附、洗涤以及洗脱。
在最适的试剂及操作条件下,可获得高质量DNA。
该方法具有简便、快捷、高效等特点,整个提取过程无须使用苯酚、氯仿等有机溶剂。
品名规格 货号 基因组DNA 提取试剂盒100T 4hk001裂解液DL 120ml ×2 磁粒 40ml 洗涤液 50ml ×5 洗脱液 45ml 缓冲液HTL 20ml ×1 二硫苏糖醇(DTT ) 10管,0.18g/管 说明书 1份储存条件储存条件::本试剂盒所有试剂(除DTT 外)均可以室温保存,应避免阳光直射。
当室温低于15℃时,裂解液中可能有结晶析出,38℃水浴加热几分钟,恢复澄清后即可使用,提取效率不受影响。
DTT 需要于冰箱4℃保存。
本试剂盒有效期为12个月, 请于有效期内使用。
安全信息:试剂中含刺激性化合物,操作时应小心,避免沾染皮肤,眼睛和衣服,若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。
三 使用者自配试剂DTT 溶液使用浓度为1mol/L 。
组织基因组DNA提取试剂盒磁珠法

组织基因组DNA提取试剂盒(磁珠法)使用说明书(Cat#Yu-TD02-1)【产品介绍】组织基因组DNA提取试剂采用国内领先的专利技术合成的纳米磁珠颗粒和多次实验优化的缓冲液体系,能从样品中分离纯化高质量DNA。
在一定条件下,磁珠表面修饰的基团高效吸附目的DNA,而当条件改变时,磁珠释放吸附的DNA,达到快速分离纯化DNA的目的。
整个过程安全、无毒、便利,提取的DNA质量稳定、纯度高。
纯化后的DNA适用于多种后续实验。
本试剂盒可以从少量动物组织中分离纯化出高质量、高浓度的DNA。
【产品特点】1. 效率高:DNA提取得率高,操作简便。
2. 安全、无毒害:整个操作过程无需使用苯酚、氯仿等有毒物质,提取环境更加安全。
3. 高纯度:OD260/230在1.5左右,OD260/280在2.0左右。
可直接用于各种分子生物学实验。
【试剂盒组成】【规格】50T/盒【自备试剂】无水乙醇,异丙醇【贮藏与有效期】裂解吸附液和Buffer AW1必须室温(15-25℃)避光保存;磁珠室温保存;其他所有试剂室温保存,有效期为1年。
【注意事项】1、Buffer AW1使用前,加入18mL无水乙醇,混匀,使乙醇含量为60%。
★2、Buffer AW2使用前,加入21mL无水乙醇,混匀,使乙醇含量为70%。
★3、磁珠使用前必须充分混匀。
★4、组织最好置于组织核酸(DNA/RNA)保存液(Cat#Yu-TP01)或液氮中保存。
【操作步骤】1、样本的处理1.1、液氮中保存的组织将组织在液氮中磨成粉末后,使液氮充分挥发。
再以50-100mg组织中加入1mL裂解吸附液,充分研磨。
以下进入步骤2。
1.2、组织保存液中保存的样本取出在组织保存液中保存的组织,加入1mL无水乙醇洗涤组织两次。
再以50-100mg组织中加入1mL裂解吸附液,充分研磨。
以下进入步骤2。
2、吸取400µL研磨后的裂解吸附液转入1.5mL的EP管中,加入5µL蛋白酶K,60℃1500rpm10分钟。
磁珠法ffpe组织基因组dna提取试剂盒

磁珠法FFPE组织基因组DNA提取试剂盒MagBeads FFPE DNA Extraction Kit【目录号】FFDE-5010、FFDE-5030、FFDE-5100;【运输条件】2~25℃;【保存条件】磁珠悬浮液2~8℃,蛋白酶K -20℃,其它组分室温;【试剂盒组成】【本卷须知】1)磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心,以免磁珠受到损害,使用前务必充分混匀;2)使用前检查裂解液中是否出现沉淀,如有沉淀请置于37℃水浴温热至恢复澄清;3)蛋白酶K溶液长期不使用,请置于-20℃保存,融化后4℃保存,并尽快使用;4)本操作指南经公司反复验证,使用前请仔细阅读,并且按照操作指南的建议操作。
【产品简介】本试剂盒适用于从石蜡包埋组织切片、石蜡块、或福尔马林等固定液中的组织样本中别离纯化基因组DNA。
试剂盒首先使用二甲苯去除样本中的石蜡或者福尔马林,基因组DNA在裂解液环境下得以快速释放,并结合于磁珠外表,经清洗、洗脱等步骤之后,得到高质量的基因组DNA,~1.9之间,完好性好,可直接应用于PCR模板、杂交、STR、以及SNP等下游分子生物学实验。
操作过程简便、快速。
本试剂盒可手动法进展操作,也可以配合核酸提取仪实现自动化操作。
【试剂盒说明】本试剂盒提取结果和组织类型、样本固定效果以及储存条件等因素亲密相关。
一般来讲,固定时间越久、保存时间越长的样本,基因组DNA受损程度越高。
制作FFPE样本时应注意:1〕组织在福尔马林中固定时间不宜过长,否那么DNA易交联和断裂;也不可以太短,否那么组织固定不充分,核酸易降解。
一般来讲,以固定时间在8~24h为宜;2〕确保样本在石蜡包埋以前脱水完全,并尽量去除残留的福尔马林。
【自备试剂】异丙醇、80%乙醇、二甲苯、PBS溶液〔pH值7.4〕、RNase A溶液(100mg/mL,分散液10mM Tris-HCl, 1mM EDTA, pH值8.0)。
【自备仪器和耗材】手动版:EP管、EP管用磁力架、金属浴、涡旋震荡仪。
磁珠法基因组DNA 提取试剂盒 (细胞)

磁珠法基因组DNA 提取试剂盒(细胞)样本前处理:细胞用PBS洗两次后,6000rpm/min 离心3min,弃上清,加入500ul Buffer CGP重悬沉淀,12000rpm/min离心1min,弃上清,取沉淀备用。
2.裂解结合:在细胞沉淀中,加入500μLBuffer CGL,室温放置5-10min,再加入500μl异丙醇和30ul磁珠悬浮液(MB) (使用前充分重悬),颠倒混匀,室温放置5min(期间不时颠倒混匀);将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体。
3.漂洗:(1)将离心管从磁力架上取下,向离心管中加入500 μl Buffer CGW 0,涡旋振荡5s,重悬磁珠,将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体,重复该步骤1次。
(2)将离心管从磁力架上取下,向离心管中加入500 μl Buffer CGW I,涡旋振荡5s,重悬磁珠,将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体。
重复该步骤一次,待磁珠完全吸附后吸弃液体(液体一定要弃尽,不然残留会影响下游实验),晾干2min。
实验准备56°C加热源磁珠用前一定要充分混匀;使用前需在Buffer CGW I中加入相应体积的无水乙醇。
4.洗脱:将离心管从磁力架上取下加入50-100μl Buffer EB ,涡旋振荡结合移液器吹打,充分吹散磁珠(一定要完全吹散磁珠,若未充分重悬会影响DNA 得率),56°C 放置5min(每隔2min振荡混匀重悬磁珠),置于磁力架上,将上清DNA转移至一新的离心管中,放入-20 °C保存备用,保质期为2 年。
纯度效果评价通过测定洗脱液中DNA的A260来确定RNA产量,通常情况下A260值在0.1~1.0之间数据比较可信。
如果不在此范围内,请稀释或浓缩样品调整;通过测定洗脱液中RNA的A280和A230来确定DNA纯度,A260/A280比值在1.8-2.0之间,小于1.8表示可能有蛋白质污染。
磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒

磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒概述本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统,从样品中分离纯化高质量基因组DNA,特殊包被的磁珠,在一定条件下对目的DNA 具有很强的亲和力,而当条件改变时,磁珠释放吸附的DNA,能够达到快速分离纯化DNA的目的。
整个过程不涉及有毒试剂,安全、便捷、提取的DNA纯度高。
使用本试剂盒纯化的基因组DNA (OD260-OD320)/(OD280-OD320)均在1.7~2.0之间,可以应用到各类下游分子生物学实验。
适用范围适用于从各种革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌等中提取基因组DNA,适用于自动化核酸提取平台。
试剂盒包装及组成试剂盒组成数量Buffer A20 ml×1瓶Buffer B 1 ml×1瓶Buffer C 1 ml×1瓶磁珠结合液25 ml×1瓶洗涤液Ⅰ50 ml×1瓶洗涤液Ⅱ30 ml×1瓶,使用前加入80 ml无水乙醇,混匀洗脱液10 ml×1瓶使用说明书1份注意事项1. Buffer A在使用前在温浴设备中温育至白色沉淀完全溶解后使用。
2.如果下游实验对RNA污染比较敏感,可在裂解中第⑶步加1µl RNaseA(10mg/ml)。
3. Buffer B 4℃保存,可能会析出白色粉末状沉淀,使用前混合均匀,不影响使用效果。
4.磁珠结合液用前一定要充分混匀。
5.溶菌酶用缓冲液稀释,缓冲液为(20mMTris,pH8.0;2mMNa2-EDTA;1.2%TritonX-100 )。
6.如果同等取样量下欲得到更多DNA可以增加洗脱次数(洗脱次数最好不要超过3次)。
操作方法1.裂解⑴取1ml过夜培养的菌液至1.5ml EP管中,12000 rpm离心1min,尽量吸净上清。
⑵如果样品为革兰氏阳性菌(葡萄球菌除外,葡萄球菌可直接按照阴性菌步骤操作,加入适量溶葡萄球菌酶裂解效果更好)可加入25µl20mg/ml的溶菌酶(客户自备)反复吹打使菌体充分悬浮,37℃消化30~60min(注:消化时间取决于所用的菌种),如果样品为革兰氏阴性菌可直接进行步骤⑶。
EASYspinPlus多糖多酚复杂植物RNA快速提取试剂盒操作方式和步骤说明书

EASYspin Plus Complex Plant RNA KitEASYspin Plus多糖多酚/复杂植物RNA快速提取试剂盒目录号:RN53适用范围:适用于快速提取植物组织细胞总RNA,利用独有基因组DNA清除柱技术可有效清除电泳可见gDNA残留,RNA可用于反转录PCR,荧光定量PCR等。
试剂盒组成、贮存、稳固性:试剂盒组成保存50次(RN5301)裂解液CLB 室温50 ml裂解液RLT Plus室温25 ml去蛋白液RW1室温40 ml10 ml漂洗液RW室温第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O室温10 ml基因组DNA清除柱室温50套和收集管RNase-free室温50套吸附柱RA和收集管本试剂盒在室温贮存12个月不阻碍利用成效。
贮存事项:1.不适合的贮存于低温(4℃或-20℃)会造成溶液沉淀,阻碍利用成效,因此运输和贮存均在室温下(15℃-25℃)进行。
2.幸免试剂长时刻暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值转变,各溶液利用后应及时盖紧盖子。
注意事项1.所有的离心步骤均可在室温完成(4℃离心也能够),利用转速能够达到13,000 rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或类似离心机。
2.需要自备β-巯基乙醇,乙醇,研钵(可选)。
3.样品处置量绝对不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱RA处置能力,不然造成DNA残留或产量降低。
开始试探实验条件时,若是不清楚样品DNA/RNA含量时可利用较少的样品处置量,以后依照样品实验情形增加或减少处置量。
4.裂解液CLB和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,幸免沾染皮肤,眼睛和衣服。
假设沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或生理盐水冲洗。
5.关于DNA 的微量残留:一样说来任何总RNA提取试剂在提取进程中无法完全幸免DNA的微量残留(DNase 消化也无法做到100%无残留),本公司的EASYspin Plus RNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA清除柱技术,绝大多数DNA已经被清除,不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。
游离DNA提取试剂盒(磁珠法)说明书

游离DNA提取试剂盒(磁珠法)说明书【产品名称】通用名称:核酸提取或纯化试剂商品名称:游离DNA 提取试剂盒(磁珠法)英文名称:Magbind CFDNA Kit 该试剂盒提供了一种简单、快速、高效的游离DNA (Free circulating / Cell-free DNA)提取方法,适用于从血清、血浆、淋巴液、尿液等无细胞体液中提取游离DNA 。
纯化得到的离DNA 质量稳定、可靠,可用于下游常规实验。
该试剂盒可与转移液体法的核酸提取仪配套使用,简单、快速地进行大规模提取,大大降低了实验者的工作量和实验中的人为误差。
【预期用途】 样品裂解后,在高盐存在时,DNA 结合于硅基包被的磁珠表面,漂洗后,高纯度DNA 被洗脱于洗脱缓冲液或去离子水中。
DNA 得率与样品的类型、储存条件、时间以及个体间差异有很大关系。
【检验原理】50次/盒;400次/盒【包装规格】版本号:11/2020【样本要求】1.适用标本类型:新鲜或冷冻的全血(用柠檬酸盐、EDTA 或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)、血浆、血清、淋巴细胞、无细胞体液等样本。
2.标本处理与保存:血清及血浆样本按常规方法制备,新鲜样本应尽快处理或分装后于-70℃冻存,避免反复冻融。
3.样本运输:应采用冰壶或者泡沫箱加冰或干冰密封运输。
【检验方法】实验前准备:向蛋白酶K 中加入指定用量的蛋白酶K 保存液使其溶解,终浓度为20 mg/ml ,-20℃保存。
1.向1.5 ml 离心管中加入20 μl 蛋白酶K 溶液。
2.向上一步的离心管中加入200 μl 血清/血浆样品。
注意:冻存样品需提前在4℃冰箱中放置使其溶化。
溶化过程中反复颠倒样品储存管使其混匀。
3.向上一步的离心管中加入200 μl 裂解缓冲液,涡旋振荡5秒钟使其充分混匀后将离心管放于56℃、1300 rpm 的Thermomixer 上振荡裂解10分钟。
注意:1)如无Thermomixer ,需将离心管放于56℃水浴锅或金属浴中孵育10分钟,期间每隔2分钟涡旋振荡5秒钟。
植物基因组DNA提取试剂盒(北京天根)

植物基因组DNA提取试剂盒1 取植物新鲜组织约100 mg或干重组织约30 mg,加入液氮充分研磨。
2 将研磨好的粉末迅速转移到预先装有700 μL 65℃预热缓冲液GP1的离心管中(实验前在预热的GP1中加入巯基乙醇,使其终浓度为0.1%),迅速颠倒混匀后,将离心管放在65℃水浴20 min,水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。
3 加入700 μL氯仿,充分混匀,12,000 rpm(~13,400×g)离心5 min。
注:若提取富含多酚或淀粉的植物组织,可在第3步前,用酚:氯仿/1:1进行等体积抽提。
4 小心的将上一步所得水层上相转入一个新的离心管中,加入700 μL缓冲液GP2,充分混匀。
5 将混匀的液体转入吸附柱CB3中,12,000 rpm(~13,400×g)离心30 s,弃掉废液。
(吸附柱容积为700μL左右,可分次加入离心。
)6 向吸附柱CB3中加入500 μL缓冲液GD(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm(~13,400×g)离心30 s,倒掉废液,将吸附柱CB3放入收集管中。
7 向吸附柱CB3中加入600 μL漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm(~13,400×g)离心30 s,倒掉废液,将吸附柱CB3放入收集管中。
8 重复操作步骤7。
9 将吸附柱CB3放回收集管中,12,000 rpm(~13,400×g)离心2 min,倒掉废液。
将吸附柱CB3置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,漂洗液中的乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
10 将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200 μL洗脱缓冲液TE,室温放置2-5 min,12,000 rpm(~13,400×g)离心2 min,将溶液收集到离心管中。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
磁珠法多糖多酚植物组织基因组DNA提取试剂盒MagBeads Polysaccharide & Polyphenol Plant Genomic DNA Extraction Kit
【目录号】PTDE-6005、PTDE-6030;
【运输条件】2~25℃;
【保存条件】磁珠分散液、β-巯基乙醇2~8℃;蛋白酶K -20℃;其它组分室温保存;
【试剂盒组成】
【注意事项】
1. 使用前请检查裂解液(组分①)和结合液(组分②)是否出现结晶,如有结晶请置于
65℃温浴至重新溶解完全;
2. 初次使用全新试剂盒前,请按照结合液(组分②)标签标注量加入异丙醇,稀释备用;
3. 磁珠悬浮液(组分③)不可反复冻融或离心,使用前需充分摇匀;
4. 蛋白酶K(组分⑤)于-20℃长期保存,避免反复冻融;融化后4℃保存,并尽快使用;
5. 请仔细阅读本说明书,并按照操作指南建议操作。
【产品简介】
本试剂盒采用针对富含多糖多酚植物组织进行杂质去除的特殊磁珠,配合高性能缓冲液体系,可从各种富含多糖多酚植物组织样本中高质量的分离纯化基因组DNA。
特殊技术包埋的磁珠在特定条件下对核酸具有极强的亲和力,而当条件改变时,磁珠会释放所吸附的核酸,从而达到快速分离纯化核酸的目的。
提取所得的基因组DNA产物片段大、纯度高、质量稳定可靠,尤其适合高通量仪器自动化提取,特别是本公司生产的各类型号自动化核酸提取仪或工作站。
使用本试剂盒纯化所得核酸产物可适用于各种常规分子生物学下游实验,如:酶切、PCR、荧光定量PCR、文库构建、Southern杂交、芯片检测和高通量测序等。
【试剂盒说明】
【自备仪器及耗材】
研钵&研磨棒(或者研磨机、匀浆机)、水浴锅、涡旋混合仪、高速离心机、EP管(1.5mL 或2.0mL)、EP管配套用磁力架、核酸提取仪(仪器自动版操作步骤需准备)。
【自备试剂】
液氮、乙醇(80%, v/v)、异丙醇、RNase A溶液(100mg/mL,分散液10mM Tris-HCl, 1mM EDTA, pH值8.0)。
【仪器自动法版操作步骤】
该方法配合磁棒法核酸提取仪使用,以英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪为例,可同步完成32份植物样本提取工作。
1. 准备96孔板
注:1)每次吸取磁珠悬浮液前尽量摇晃均匀;2)为提高效率建议使用排枪。
2. 组织样本前处理和裂解
取适量(≤100mg)植物组织样本,液氮研磨至粉末状,尽量完全转移至EP管中。
加入400μL 裂解液、0.8μL β-巯基乙醇和20μL蛋白酶K,涡旋振荡1~3min至混合均匀,呈云雾状。
65℃温浴15min,每隔5~10min上下颠倒混匀一次。
注:1)若样本量大于100mg,但不超过400mg,需增加裂解液使用量,可按照每增加100mg组织样本增加150μL裂解液使用量,并延长裂解时间,其余试剂用量不变;
2)若样本个数较多,可预先将蛋白酶k、β-巯基乙醇和裂解液提前混合备用;
3)如需去除RNA,需在加入蛋白酶K之前额外加入5μL RNase A溶液。
3. 上机提取
将裂解完毕样本室温(勿低于15℃)、13000rpm离心10min,吸取200~400μL上清液转移到在96孔板的2/8列孔位。
将96孔板置于ETP-300型核酸提取仪中,并插入磁棒套;打开仪器操作软件,调用“植物组织DNA提取实验方法”程序,点击“运行”执行程序。
“植物基因组DNA提取程序”各参数设置如下,如机器和说明书不一致,请以说明书为准:
(s)
4. 核酸转移
程序运行完毕,取下96孔板,将洗脱液转移至干净的EP管或者PCR板中,提取过程完毕,此时可以弃去96孔板。
【手动法版操作步骤】
1. 组织样本前处理和裂解
参照【仪器自动版操作步骤】中步骤2进行操作。
2. 核酸结合
将裂解完毕EP管室温(勿低于15℃)、13000rpm离心10min,吸取200~400μL上清液转移至另一只干净EP管中,加入80μL磁珠悬浮液以及550μL结合液(已加异丙醇),颠倒混合均匀。
将EP管高速涡旋振荡6min,使磁珠与核酸充分结合,振荡完毕静置2min。
3. 磁性分离
将EP管置于磁力架上静置20s至磁珠吸附完全;如果EP管内盖有磁珠,可保持EP管在磁力架上,整体上下颠倒2~3次至磁珠被完全吸附。
保持EP管固定于磁力架上,用移液枪吸弃上清液,期间避免接触磁珠。
4. 清洗1
向EP管中加入600μL清洗液,将EP管从磁力架上取下,用移液枪吹散磁珠,涡旋震荡2min,磁性分离(参照步骤3操作)。
5. 清洗2
使用600μL 80%乙醇,参照步骤4操作2次。
6. 除醇
将除尽上清夜后的EP管保持在磁力架上,切勿取下,加入800μL除醇液,迅速手动摇动EP管冲洗磁性吸附的磁珠表面,并快速弃去除醇液。
注:若植物组织糖类或多酚类物质含量较高,此时EP管壁上会吸附少量特异性结合了杂质的磁珠,尽量弃去除醇液和管壁上的除杂磁珠。
7. 洗脱
取出除醇完毕的EP管,加入100μL洗脱液(或去离子水)至管底,小心吹散磁珠,切勿溶解或吸取到管壁上的除杂磁珠。
将重悬后磁珠转移至另一干净EP管中,65℃温浴5min,然后涡旋洗脱2min,确保磁珠与核酸完全洗脱解离。
注:洗脱液要求大于50μL,100~200μL较好,洗脱液体积较少时会影响核酸得率。
8. 核酸转移
洗脱完毕后,将EP管置于磁力架上静置20s至磁珠吸附完全,用移液枪将洗脱液转移至另一干净EP管中,提取过程完毕,此时可弃去磁珠。
(0702修订版)
版权声明:© 英芮诚生化科技(上海)有限公司保留本使用指南所有权利。
版本:V201702.231。