野生兰属植物根部内生真菌多样性初步研究
可产生铁载体的春兰根内生细菌多样性
孙磊等：可产生铁载体的春兰根内生细菌多样性. / 微生物学报（2011）51（2）
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表 1 菌株的 16S rRNA 基因序列相似性分析
Table 1 Similarity analysis of partial 16S rRNA gene sequences of all strains
prokaryotic group
将活化后的细菌接种 到 CAS 检 测 平 板［7］上，对 具有产铁载体能力的春兰内生细菌进行初筛。28℃ 培养 48 h，观察平板 中 菌 落 周 围 橙 黄 色 晕 圈 的 形 成 和大小。对经定性检测筛选到的可产铁载体的春兰 根内生细菌进行定量测定。将初筛得到的功能菌株 接种到 MKB 液 体 培 养 基 中，28℃ 摇 床 （ 150 r / min ） 培养 48 h。然后将菌悬液离心，取上清液 3 mL 加入 3 mL CAS 检 测 液，充 分 混 匀。1 h 后 采 用 721 型 分 光光度计测 定 630 nm 波 长 处 的 吸 光 值 （ As） ，并 取 双蒸水作对照调零。另取 3 mLCAS 检测液与 3 mL 未接种的 MKB 液体培养基上清液充分混匀，同上测 定吸光值即为参比值（ Ar） 。按照文献［8 ］对铁载体 活性 单 位 的 定 义，根 据 公 式：% 铁 载 体 活 性 单 位 = ［（ Ar － As） / Ar］× 100 计算菌株产铁载体的量。 1. 3 16S rRNA 基因的 PCR 扩增
strain
nearest strain （ Accession）
对可产铁载 体 的 春 兰 根 内 生 细 菌 的 16S rRNA 基因进行序列测定，并将测序结果提交 GenBank，序 列接 收 号 为 HQ219265-HQ219311。 序 列 分 析 结 果 表明 47 株内生细菌分属于变形菌门的 α 变形菌纲 （ Alphaproteobacteria ） 、 β 变 形 菌 纲 （ Betaproteobacteria） 、厚 壁 菌 门 （ Firmicutes ） 及 放 线 菌门（ Actinobacteria）4 大类群的 17 个属 31 个种，其 中包含两个潜在的新物种 （ 表 1，图 1 ） 。其 中 20 株 细菌属于放线菌门 的 8 个 已 知 属，占 可 产 铁 载 体 内 生细菌总数 的 42. 6% ，为 最 优 势 类 群。 但 有 16 株 细菌铁载体活性低于 10% ，该 类 群 的 细 菌 产 铁 载 体 能力较弱。
春兰菌根真菌的分离及培养特征研究
内生真菌( 特别是小型丝状真菌) 分离鉴定用的培 养基有 Mart in 琼脂培养基、PDA 培养基、察氏琼脂培养 基、麦芽汁培养基、牛肉浸汁( 血) 琼脂、曲汁培 养基、 Pfeffer 液体培养基、Sabouraud 琼脂培养基、玉米粉琼脂 和燕麦粉琼脂等[9] 。可试验表明春兰内生真菌的分离 采用传统的平板培养方法也可以取得很好的效果。该 方法简便、经济, 也容易普及。兰草内生菌的分离对于 组培苗的驯化与适应能力, 或者兰草在自然条件下的栽 培均可能起到很好的帮助。兰科内生真菌与真菌形成 共生联合体, 深入了解兰科菌根的特点, 筛选优良的兰 科内生真菌资源, 加强对防御和次生代谢相关酶的研 究, 将菌剂技术应用于兰科植物工业化生产上, 对解决 兰科植物的种植方面的问题有重大意义[ 10] 。因此, 开展 兰科植物内生菌的分离与其培养特性的研究对生产实 践都具有重要的现实意义。
述试验结果为基础。基本方法不变, 做重复分离, 以对 菌。由此看出, 在 1、3 min 处理下, 明显灭菌未彻底。在
上述结果加以验证。菌株用打孔法扩大繁殖, 培养于 5、7 min 处理下, 仅有极个别平板长菌, 可能为接种感染
24 e 恒温条件下, 观察形态特征。
杂菌所致, 而对照中并无杂菌长出, 说明灭菌较为彻底,
21试验方法的影响211升汞灭菌时间对菌落数量形成的影响由于春兰的根有典型的兰科植物菌根结构菌根真菌菌丝团主要分布在兰根中部的皮层细胞中所以在灭菌时根据其材料的特性做适当的调整通过该试验证明用升汞处理时最好保持在5min为宜配合以酒精处理时间维持30s时效果更为明显而且由于在相关文献中报道在根基和根尖中存在的内生菌较少所以在取材时也应注意尽量选取根中部的材料做切片
养兰易养根难，教你用“真菌”养兰花，养好“菌根”兰花自然变美
养兰易养根难，教你用“真菌”养兰花，养好“菌根”兰花自然变美你有没有想过一个问题，为什么兰科植物的根又光又白还没有根毛？没有根毛它怎么从土壤里吸收养分？有些兰根长满一盆，但是依然不影响它“吸收”养分继续生长，很多人说：“养兰即养根”，还有人说：“养兰易养根难”。
兰科植物的根与其它开花不开花植物的根到底有什么不同呢？如何才能把兰花的根养好呢？兰科植物是所有开花植物中最多样，分布最广的植物之一，一般我们将兰科植物俗称为兰花。
虽然兰科植物的花朵不像牡丹、月季那样艳丽，但中国人似乎从兰花植物种品除了“另一种美”，兰花已经慢慢的融入了中国的文化，这也是兰花的魅力所在。
今天我们不是要介绍兰花有多美，而是要说一下它的根，很多人对它根的认识可能就是“傻白傻白的”，没有一点“根”的样子，因为兰花的根没有根毛，而是光秃秃的，但这并没有影响它吸收土壤中的水分和营养物质。
这也是兰科植物与其它植物的特别之处，兰花可以与真菌共生，真菌就寄生在它的根上，与其说是兰花的根在吸收营养，不如说是那些共生菌在发挥作用。
下面就来说一下，兰花的根和菌如何共生？以及这种共生菌根如何发挥作用？有什么优点又有什么缺点。
不过在讲兰科植物的菌根之前，需要先说一下兰科植物。
兰科植物（一）兰科植物有哪些？兰科植物的分布遍及世界各地，其中亚洲和南美洲的热带地区物种最为丰富，其中常见的栽培品种有：蕙兰、春兰、寒兰、建兰、墨兰、文心兰、石斛兰、兜兰、蝴蝶兰、万代兰还有嘉德丽亚兰等，这些都是很多花友都养过的品种，另外喜欢养兰花的朋友对野生兰花可能也不陌生，比如常见的野生兰花有：石豆兰、兜兰、春兰、万代兰、贝母兰、独蒜兰、指甲兰、鹤顶兰、石仙桃、虾脊兰等。
私挖野兰违法不过在这里要强调一下，野生兰花属于国家保护植物，私自采挖是违法的，为了保护野生兰花还希望那些痴迷野兰的朋友手下留情。
四种兰花的花（左上顺时针起）：圣字蝴蝶兰、叶蜂眉兰、条叶颚唇兰、同色兜兰（二）兰科植物的特点兰花被认为是植物界的“高等植物”，因为它根据自己的特性演化出对昆虫授粉的高度适应性，比如常见的兜兰花朵形似迷宫，就是为了让昆虫粘上花粉；而我们看到都觉得非常可爱的飞鸭兰很像一直鸭子在飞，蜂兰很像一直鸟在飞，这种外形可以让授粉媒介误以为是交配对象得以传播花粉，最重要的是兰花可以与真菌建立共生关系就更厉害了。
野生蓝莓根际真菌群落特征研究
野生蓝莓根际真菌群落特征研究
杨秀丽
【期刊名称】《农业与技术》
【年(卷),期】2022(42)18
【摘要】为了更加全面了解大兴安岭北部地区野生蓝莓的根际真菌多样性状况,对其根际土壤中的真菌进行了调查。
本研究采用454高通量测序技术对野生蓝莓根际土壤中的真菌18S rRNA基因的ITS1可变区进行测序,进而对其根际土壤真菌群落特征进行了分析。
本研究共获得24090条有效序列,282个OUTs,共涉及真菌领域的3个门和4个潜在的菌门和其它未分类菌门,分属于165个属。
本地区野生蓝莓根际真菌以Sordariomycetes属最多,占比0.275;多样性分析表明,根际真菌类群较丰富,且是一个异源的群体。
【总页数】5页(P41-45)
【作者】杨秀丽
【作者单位】呼和浩特职业学院医药卫生系
【正文语种】中文
【中图分类】S-3
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2.东乡普通野生稻根际微生物群落特征的研究
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4.胡杨根际
土壤真菌群落代谢特征及其土壤影响因子研究5.华中五味子根际土壤真菌群落特征研究
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雾灵山保护区野生兰科植物多样性及保护研究
雾灵山保护区野生兰科植物多样性及保护研究
陈彩霞;张东坡;夏秦超;杨野;魏巍;张艳侠;张宝华;王水;崔华蕾
【期刊名称】《现代园艺》
【年(卷),期】2024(47)5
【摘要】通过野外调查、查阅文献资料,对河北雾灵山国家级自然保护区内野生兰科植物的多样性、分布、生境特点进行了调查。
结果表明,区内共有兰科15属22种,占河北总属和总种数的71.43%、78.57%,以陆生型为主(19种,86.32%),有国家Ⅱ级保护兰科6种,濒危3种,易危2种,资源相对丰富,具有极高的保护价值,应进一步加大保护力度;区内兰科植物种类分布较集中的区域为小莲花池、百草洼和大坑,分布集中的海拔为1300~1800m;区内兰科除角盘兰外,其余均在林下有分布,有9种兰科分布在疏林或草地,腐生兰主要分布在华北落叶松林中;本研究对现有的保护情况进行了分析,结合实际提出合理化的建议。
【总页数】3页(P18-20)
【作者】陈彩霞;张东坡;夏秦超;杨野;魏巍;张艳侠;张宝华;王水;崔华蕾
【作者单位】河北雾灵山国家级自然保护区管理中心;河北省林业和草原技术推广总站
【正文语种】中文
【中图分类】Q94
【相关文献】
1.雾灵山自然保护区野生兰科植物及其在园林中的应用
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入侵植物紫茎泽兰(Eupatorium adenophorum Spreng)叶内生真菌多样性研究
入侵植物紫茎泽兰（Eupatorium adenophorum Spreng）叶内生真菌多样性研究外来植物入侵是目前生态学和环境科学研究的热点问题之一,其核心是阐明为何外来植物能在入侵地表现出较强的生存竞争力问题。
关于生物入侵的机制有很多假说,但植物入侵是一个极其复杂的过程,包括了入侵物种的自身特性,新栖息地环境变化的适应以及入侵种与本地种之间错综复杂的竞争关系。
要深入阐明其入侵机理,需要对多个要素进行研究。
近年来,人们发现植物叶内共生真菌对外来植物生存竞争力具有重要影响,但主要的工作集中在禾本科植物,对其他入侵植物的内共生真菌组成情况很少开展研究。
本实验以在中国西南地区广泛入侵的菊科植物紫茎泽兰(Eupatorium adenophorum Spreng)为对象,系统研究了其叶内共生真菌的多样性,初步获得了以下几个结论:1、紫茎泽兰叶内共生真菌物种多样性随叶片年龄的增加而增加。
第1至第5对叶真菌物种数呈明显递增趋势,到第6对叶物种数有所降低;2、不同生境的紫茎泽兰叶内生真菌的季节变化并不相同。
在阴蔽的环境,叶内生真菌在冬季有最高物种数;但在向阳的样地,物种数在冬季是最低的;3、不同种类的内生真菌受宿主植物叶化学物质的影响不同。
Didymella的生长受到叶片化学物质的明显刺激作用,且叶片越老,刺激作用越明显。
相反,Alternaria的生长明显受到叶片化学物质抑制;4、内生真菌之间的相互作用关系主要表现为中性或偏抑制作用,很少有协同作用关系。
5、紫茎泽兰叶内生真菌出现频率和多样性随海拔、纬度的增加而减少,但随入侵历史的增加而增加;6、通过MEA小片段培养方法和ONFIT方法,我们从云南、四川不同样地,共分离得到紫茎泽兰叶内生真菌840株。
这些菌株经过RFLP分型并测定代表菌株的ITS rRNA基因,发现紫茎泽兰叶内生真菌的组成丰富多样,涵盖了47个属的真菌。
优势属包括炭疽菌属(Collectotrichum),链格孢菌属(Alternaria),炭角菌属(Xylaria)和间座壳属(Diaporthe)。
福建3种野生兰科植物繁殖生物学的初步研究
福建3种野生兰科植物繁殖生物学的初步研究福建是中国野生兰资源较为丰富的省份之一。
目前,我省兰科植物的研究主要集中在本底资源调查和区系分析上,而有关该科繁殖生物学等领域的深入研究鲜见报道。
因此,本论文以细茎石斛、葱叶兰和镰翅羊耳蒜为对象,开展这3种野生兰繁殖生物学的初步研究,内容包括生境调查、开花物候期观测及其繁殖过程中影响因子的检测分析等,研究结果不仅补充了福建兰科植物繁育系统的基础资料,而且为上述3种野生兰的保育策略提供科学依据。
初步研究结果如下：1、细茎石斛繁殖生物学方面三明尤溪的细茎石斛花期5-6月,5月下旬始花,种群花期20～30 d,单花花期7-16 d,平均为10.85 d。
花开当日,柱头即具可授性,花粉活力为57.88%,2 d内柱头可授性和花粉活力最高,且可持续10 d左右。
因此,在单花花期内,野生细茎石斛均有授粉结实的可能性。
人工授粉实验结果表明,细茎石斛花不存在无融合生殖和自动自花授粉现象,且自交不亲和,但异交的结实率很高,达85%以上。
因此,细茎石斛的结实必须异花授粉。
目前,野外未观察到其有效的传粉者,自然结实率仅1.03%或更低,推测野生状态下细茎石斛花的传粉者不足或缺乏。
野生种子活力为90.84%,显著大于人工异花(76.29%)和异源(76.93%)结实的种子(p<0.05),但人工异花与异源处理间的种子活力差异不显著(p>0.05)。
因此,繁殖种苗最好选野生种子。
以野生种子为材料开展非共生萌发实验,结果表明：细茎石斛种子无菌播种的最适培养基为MS+NAA0.20 mg·L-1,而原球茎增殖分化的适宜培养基是1/2MS+NAA 0.20 mg·L-1,生根培养基,则在1/2 MS 培养基上添加质量浓度为0.20mg.L-1的NAA或0.40 mg.L-1的IBA时效果较好。
2、葱叶兰繁殖生物学方面在垂直水平分布上,葱叶兰属低海拔野生兰,植株呈斑块状聚集分布。
兰科菌根真菌研究方法的概述
兰科菌根真菌研究方法的概述郑超文;肖娅萍【摘要】兰科植物资源在全球分布广泛，其中有许多是重要的药用植物和名贵的珍稀花卉，由于具有较高的商业价值，受到各界人士的广泛关注。
兰科植物生长习性的特殊性导致其在自然状态下繁殖率极低，因此难以满足市场的广泛需求。
近年研究表明，几乎所有兰科植物都能与相应的菌根真菌建立共生关系，并且必须依赖于这些内生真菌才能完成其整个生活史。
因而对菌根真菌在提高兰科植物生长速度和繁殖能力过程中机制的研究以及将研究成果运用于工业化育苗中将是缓解兰科植物市场供求紧张问题的关键。
通过对近几年有关天麻和铁皮石斛等兰科植物的问题研究中所采用的研究方法加以阐述，以期对今后兰科菌根真菌的研究提供一定的参考。
%Resources of orchid family distribute widely over the globe. Many among them are important officinal and rare flower plants;they have drawn wide attention from all walks of life for their fairly high business values. Orchid plants have very low rate of reproduction in natural conditions because of their growing particularities;they could not meet wide market demand. Recent studies showed that almost plants of orchid family can establish symbiosis with cor-responding mycorrhizalfungi,moreover,they must rely on these endophytic fungi they could complete their whole life history. Therefore study on the mechanism of mycorrhiza in the process to promote the growth rate and fertility of or-chid plants and apply the research achievements to industrialized seedling will be the key to allay strained relationship between the supply and demand of orchid plants. In this paper research methods used in the issuebetween Gastrodia elata and Dendrobium officinalei recently were expounded,so as to provide certain references to the research on orchid mycorrhizal fungi.【期刊名称】《微生物学杂志》【年(卷),期】2014(000)004【总页数】5页(P85-89)【关键词】兰科植物;菌根真菌;共生机制;研究方法【作者】郑超文;肖娅萍【作者单位】陕西师范大学生命科学学院，陕西西安 710062;陕西师范大学生命科学学院，陕西西安 710062【正文语种】中文【中图分类】Q93-31兰科植物作为自然界中的第二大科植物[1]，在世界范围内分布十分广泛，目前据统计约有800属，大约25 000种[2]。
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新 疆 农 业 大 学 学 报
２ １ ，４ ５ ：７ ￣３ ０ ０ １３ （）３４ ８
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆ Ｘ ｎ ｉｎ ｒ ｕｔｒ ｌ ｎｖｒｉ ｏ ｒ ａ ｉｊａ ｇＡｇ ｉ ｌ ａ ｉ ｓｔ ｏ ｃ ｕ Ｕ ｅ ｙ
文 章 编 号 ：１ ０ — ６ ４ ２ １ ） ５０ ７ — ７ ０ ７８ １ （ ０ １ ０ — ３ ４０
野 生兰 属植 物 根 部 内生真 菌 多样性 初步 研 究
代 晓宇 ，毛益 婷ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 马 荣 ，
（ ． 京 林 业 大 学 森 林 培 育 和 保 护 国家 重 点 实 验 室 ， 京 １０ ８ ；２ 新 疆 农 业 大 学 林 学 与 园 艺 学 院 ， 鲁 木 齐 １北 北 ００３ ． 乌
ｄｘ（ ｅ Ｄ）ｏ ｎｄｏ ｈｔｅｆ ｎｇ ｒ ｍ ｈｅ ｏ ｃ ｉ ｒ ｗｉ ｇ ｉ ｏｒ ｓ ａ ｔ ｔｗｅ ｅｈｉ ｈｅ ｈａ ｈｏ ｅ ｉ ｈｅ ｈ ｂ ｔ ｔ ｆｅ ｐ ｉ ｕ ｉｆ ｏ ｔ ｒ ｈ ｄｓｇ ｏ ｎ ｎ ｆ ｅ ｔｈ ｂｉａ ｒ ｇ ｒ ｔ ｎ ｔ ｓ ｎ ｔ ａ ｉａ ｏｆｏ ｎｎ ｓ ． ｐｅ ｅ ｓ Ｋｅ ｙ ｗｏｒ ： Ｃｙｍｂ ｄｉ ｄｓ ｉ ｕｍ ；ｅ ｄｏ ｈｙ ｉ ｕ ｉ ｉ ｅ ｓｔ ｎ ｐ ｔｃ ｆ ｎｇ ；ｄ ｖ ｒ ｉｙ；Ａｓ ｏ ｙ ｏ ａ ｃ ｍ ｃ ｔ
担 子 菌 分 别 进 行 的 系 统 发 育 树 构 建 结 果 显 示 ， 囊 菌 为 优 势 菌 种 ， 中镰 刀 菌 属 （ ｕａ ｉｍ ， ２ ２ ） 炭 角 菌 属 子 其 Ｆ ｓｒ ｕ ２．０ ， （ ｙａ ｉ ， ． ６ ） Ｘ ｌｒａ ６ ０ 和木 霉 属 （ ｒ ｈｄ ｒ ， ． ５ ） Ｔ ｉ ｏ ｅｍａ ５ ０ 为优 势 菌 属 。物 种 丰 富 度 和 Ｓｍｐｏ ｃ ｉ ｓ ｎ多样 性 指 数 （ ） 析 结 果 Ｄ分 表 明 ， 林 生 境 的 兰属 植 物 的菌 根 真 菌多 样 性 高 于开 阔 生境 。 密 关 键 词 ： 兰 属 植 物 ；内生 真 菌 ；多样 性 ；子 囊 菌 中图 分 类 号 ：Ｑ９ ９３ ４．１ 文 献标 识 码 ： Ａ
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摘
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