血细胞分析作业指导书

合集下载

医院细胞遗传室外周血淋巴细胞建株作业指导书

医院细胞遗传室外周血淋巴细胞建株作业指导书

医院细胞遗传室外周血淋巴细胞建株作业指导书1目的规范外周血淋巴细胞建株操作过程,通过建立永生化大量增殖的类淋巴母细胞系,为保存家族性疾病家系成员特有的基因组资源及临床研究奠定物质基础。

2方法EB病毒转化3原理3.1环孢霉素(CYA是一种能在G0-G1期之间选择性地抑制T淋巴细胞RNA聚合酶II的免疫抑制剂,与EBV同时加入时可有效地阻止T淋巴细胞对EBV的应答反应,防止已转化的B 淋巴细胞受T 淋巴细胞攻击而退化。

3.2EB病毒一般感染B淋巴细胞,通过受体CD21进入宿主细胞后可自行环化以游离体的形式长期存在于宿主细胞体内,形成潜伏感染。

EB病毒潜伏感染人外周血B淋巴细胞后可活化B淋巴细胞,促进静息期的B细胞转化为永生化大量增殖的类淋巴母细胞系(LCL)。

4实验性能4.1EBV转化结果转化培养1 周后,倒置显微镜下观察可见聚集的细胞团块,细胞透明发亮,体积明显增大,细胞外壁有不规则毛刺状突起,即为淋巴母细胞样B细胞;3周后,镜下可见转化细胞克隆明显增多;1 个月以后,细胞增殖旺盛,形成生长密集的大克隆,标志转化成功。

4.2冻存细胞复苏后生长情况分别于冻存10 d 、1 个月、3 个月后进行了复苏,所有冻存后的细胞复苏成功率都为100%,复苏后3d 即可传代培养,镜下观察细胞形态正常,所有细胞株依然保持旺盛的增殖特性,表明成功获得永生细胞株。

4.3细胞生物学特性4.3.1染色体核型分析:采用染色体核型分析技术比较转化后永生细胞与来自同•个体新鲜外周血淋巴细胞染色体的G 带,未发现有任何变异,表明转化后的B 淋巴细胞保留了正常的染色体核型,未发生畸变,即保留了原有细胞的遗传特性。

4.3.2细胞表型分析:转化后的细胞经荧光抗体CD3/CD19。

染色,用流式细胞仪分析,结果100%表达成熟B 淋巴细胞CD19。

5样本类型及受检者准备在无菌条件下采集静脉血3ml(肝素抗凝,空腹为宜),立即送至实验室。

6仪器及耗材离心机,CO2培养箱,离心管(15ml, 50ml), 10ml吸管,电动枪,大中小Tip头及移液枪,25cm2培养瓶,0.22「m 针式过滤器,10ml注射器,冻存液,冻存管。

血液分析仪性能验证作业指导书

血液分析仪性能验证作业指导书

血液分析仪性能验证作业指导书1目的规范血液分析仪的性能验证过程,确保检测系统的分析性能可靠、检验结果准确,满足临床要求。

2范围适用于血液分析仪性能验证过程。

3职责3.1专业组长负责组织人员对仪器进行性能验证,并形成仪器性能验证报告。

3.2设备管理员对验证报告的有效性进行评价,技术负责人负责批准验证报告。

4程序4.1验证准备4.1.1进行性能验证的人员应熟悉检测系统并接受过相关培训,验证前应确认仪器运转正常,室内质控在控,试剂均在有效期内。

4.1.2性能验证频率:每12月进行一次。

4.1.3环境要求:温度15~30℃、湿度45-60%、电源220V 。

4.2本底计数4.2.1验证方法参照WS/T 406-2012《临床血液学检验常规项目分析质量要求》,用稀释液作为样本在分析仪上连续检测3次,3次检测结果的最大值应在允许范围内。

4.2.2验证要求检测项目WBC RBC HGB PLT 验证要求≤0.5×109/L≤0.05×1012/L≤2g/L≤10×109/L4.3携带污染4.3.1验证方法参照WS /T 406-2012《临床血液学检验常规项目分析质量要求》,取一份高浓度的血液样本,混合均匀后连续测定3次,测定值分别为H 1、H 2、H 3;再取一份低浓度的血液样本,混合均匀后连续测定3次,测定值分别为L 1、L 2、L 3。

按下列公式计算携带污染率。

%1003331⨯--=L H L L 携带污染率4.3.2血液样本浓度要求检测项目WBC RBC HGB PLT 高浓度值>90×109/L >6.20×1012/L >220g/L >900×109/L 低浓度值<3×109/L<1.50×1012/L<50g/L<30×109/L4.3.3验证要求检测项目WBC RBC HGB PLT 验证要求≤3.0%≤2.0%≤2.0%≤4.0%4.4精密度4.4.1批内精密度4.4.1.1验证方法取一份浓度水平在以下检测范围内的临床样本,按常规方法重复检测11次,计算后面10次检测结果的算术平均值X 和标准差SD ,按照下列公式计算变异系数。

检验科sop-生化室作业指导书(SOP)

检验科sop-生化室作业指导书(SOP)

郾城微检综合门诊部生化检验作业指导书文件编号:YCWJZHMZB-2编制:刘桂菊审核:周风霞编辑日期:2017 年8月20日生效日期:2017 年8月30 日郾城微检综合门诊部检验科目录修订页8. 操作步骤8.1 项目基本参数:参见生化检验CS-6400生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2 仪器操作步骤:参见生化检验CS-6400生化分析仪操作规程.SOP文件检验结果的判断与分析10. 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。

质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。

11. 计算方法以TruCal U复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算,以μmol/L报告。

手工测定计算方法为:△Au直接胆红素(μmol/L) =--------×校准液浓度△As12. 参考值范围:≤6.8mol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。

根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。

13. 临床意义:胆红素是血红蛋白的降解产物。

游离胆红素非极性很强,几乎不溶解于水。

在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。

在肝脏中,胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。

溶血(肝前黄疸)、实质的肝损伤(肝性黄疸)和胆管堵塞(肝后黄疸)都会导致血液胆红素增高,形成高胆红素血症。

人群中常见先天性慢性高胆红素血症,称为Gilbert综合症。

由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多,使60~70%的婴儿血液出现总胆红素增高。

常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。

直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素,因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。

14. 操作性能14.1 线性范围:1.7~171mol/L14.2 精密度:精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法5,AU1000批内精密度小于4%或SD≤0.04,总精密度小于5%或SD≤0.07。

WBC-BF作业指导手册

WBC-BF作业指导手册

W B C-B F作业指导手册(总6页)-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1-CAL-本页仅作为文档封面,使用请直接删除目录目录 (1)版序控制 (2)修改控制 (3)标本来源 (4)标本收集 (4)标本处理及运输 (4)检测仪器 (4)上机流程 (5)注意事项 (6)结果的报告 (6)临床意义 (6)版序控制修改控制注:操作手册必须由作者修改。

修改处应用“星号”做标识,修改后的文字应用下划线标识。

修改超过十处,该操作手册应更换版本。

体液白细胞计数作业指导书1、标本来源脑脊液、浆膜腔液(胸、腹水)、滑液(关节腔)2、标本收集2.1 脑脊液:分别收集于3 个无菌小瓶(或试管)中,用于细胞计数及分类取用第三管,无需抗凝,体积3-5 毫升。

2.2 浆膜腔液:用于细胞计数和分类,使用EDTA 抗凝,体积5-8 毫升。

2.3 滑液(关节腔):取第二管无菌管,肝素抗凝(肝素钠25U/ml)或EDTA 抗凝作细胞学检查。

3、样本处理及运输3.1 脑脊液:标本采集后立即送检,一般不能超过1 小时。

防止时间过久,其性质可能发生改变,影响检验结果。

3.1.1 细胞破坏或沉淀,与纤维蛋白凝集成块,导致细胞分布不均而使计数不准确3.1.2 细胞离体后迅速变形乃至渐渐消失,影响分类计数3.1.3 采集的脑脊液标本应尽量避免凝固和混入血液3.2 浆膜腔液:标本采集后尽快送检,否则细胞溶解、细胞形态退化或细菌生长,都会影响检测结果。

若必须储存应不固定4℃冰箱保存。

因为浆膜腔液蛋白含量较高,冰箱可以充分保护巴士染色、HE 染色或其它染色的细胞达数天。

3.3 滑液(关节腔):尽快送检。

4、检测仪器:Sysmex 全自动血液分析仪 XN 系列5、上机流程体液测定只有在选定体液模式时才能使用5.1 确认分析仪器上的状态指示灯。

如果状态指示灯不亮绿灯,请等到亮起。

5.2 如果管座未伸出,按模式切换开关。

生化室作业指导书3.29

生化室作业指导书3.29

目录修订页编写者:陈晓玲审核者:王沛批准者:王沛血清总胆红素(T-BIL)测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。

2 实验原理在酸性溶液中,样本中的总胆红素被钒酸盐氧化生成胆绿素的同时,在450nm波长处可引起吸光度的下降。

其在450nm波长处引起吸光度的变化值与样本中总胆红素的浓度成正比。

通过在450nm波长处测定吸光度的变化值即可测得样本中总胆红素的浓度。

3 标本3.1 病人准备:无特殊要求。

最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。

3.2 类型:血清3.3 标本存放:15~25℃保存可稳定2天;2~8℃保存可稳定7天;-20℃保存可稳定3个月,如冰冻保存,不可反复冻融。

3.4 标本运输:常温条件下避光保存运输。

3.5 标本拒收标准:标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。

4 实验材料4.1 试剂:上海复星长征医学科学有限公司总胆红素试剂盒(沪食药监械(准)字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014)4.1.1 试剂组成试剂1(R1):柠檬酸缓冲液100mmol/L 表面活性剂 1.0%试剂2(R2):磷酸盐缓冲液200mmol/L 偏钒酸钠 3.8mmol/L4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存编写者:陈晓玲审核者:王沛批准者:王沛4.1.3.2有效期:在2~8℃避光、密封的储存条件下,试剂盒自检定合格之日起有效期为18个月。

4.1.4 变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。

4.1.5 注意事项:此试剂为体外诊断用,不要入口,毒性还末确定;避免和眼睛,皮肤或衣服接触,如果接触到,立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟,接触到眼睛或吞服,立即寻找医疗保护。

4.2 校准品:使用上海复星长征医学科学有限公司提供的TBIL校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品:使用正常值、病理值复合控制品。

ABO血型鉴定作业指导书-abo血型鉴定结果

ABO血型鉴定作业指导书-abo血型鉴定结果

ABO血型鉴定作业指导书:abo血型鉴定结果标题:ABO血型鉴定作业指导书版本号:A 修订号:0 文编号:JAZYY--LJ-SOP-018 发布日期:20xx年06月06日生效日期:20xx年07月01日发布部门:管理层编制人:*** 审核人:** 批准人(签字):页码:第1 页,共 5 页 ABO血型鉴定(玻片法)标准操作程序1 检验目的鉴定ABO血型,不仅对某种具体疾病的诊断与治疗如母婴ABO血型不合引起的新生儿溶血病,还能对输血、器官移植具有重要意义(受者与供者ABO血型必须完全符合后才能输血或移植)2 检测原理红细胞血型抗原与相应抗体特异结合,可发生凝集反应。

通过正、反定型试验来确定ABO血型。

正定型是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原和(或)B抗原;反定型是用已知A抗原和B抗原红细胞来测定血清中有无相应的抗A和(或)抗B抗体。

3 性能参数红细胞血型鉴定是一个定性试验,目前还没有测定性能指标。

4 标本 4.1抽取患者静脉血标本3mL置于紫色瓶盖的真空试管内(内含EDTA-K2抗凝剂)。

4.2 采血后应立即送到临检科血型室。

4.3 样品收到后立即分离血浆(以备反定使用),不能及时鉴定的血液标本应存2~8℃冰箱保存。

4.4 严重溶血或脂血的标本不能测定。

5 设备和试剂 5.1 血型定型试剂:标准抗血清、标准血球(长春生物制品研究所)。

5.2血型定型试剂应存放在2~8℃冰箱保存。

5.3 标准血球使用前必须颠倒彻底混匀,超过失效期的所有试剂不能使用。

5.4 清洁的一次性塑料试管(配患者5%红细胞盐水悬液,分离患者血浆标本使用)。

6 容器和添加剂采集血样使用一次性含EDTA-K2抗凝剂的真空试管(紫色盖)。

7 试剂鉴定步骤每一批试剂必须做效价、亲和力及特异性测定。

7.1 标准血清效价滴定 7.1.1 取清洁干燥的一次性塑料试管,分别标明A、B,每排标明稀释倍数2、4…….264,最后一管为对照管。

008 实验室内部比对程序---检验科作业指导书

008 实验室内部比对程序---检验科作业指导书
实验室内部比对程序
文件编号:
版本:
生效日期:
页码: 第3页共5页
血细胞计数仪比对记录表
科别: 表格编号:JYZX-LJ-TAB-0401
靶仪器:比对仪器:比对日期:
项目
标本号
靶仪器
靶仪器
均值X
比对仪器
比对仪器
均值Y
相对
偏差%
允许
偏差%
判断
WBC
1
2

5
RBC
1
2

5
HGB
1
2

5
MCV
1
2

5
PLT
3.1.2 比对参数 包括WBC、RBC、HGB、MCV、PLT等五个直接测定参数,其它计算参数不进行比对。
3.1.3 比对过程 每个项目选择至少5份标本(包含正常和异常标本),在不同仪器上各检测两次,比对仪器的结果均值与靶仪器的结果均值相差百分比绝对值在1/2CLIA’88允许误范围内(WBC≤7.5%、RBC≤3%、HGB≤3.5%、MCV≤3%、PLT≤12.5%),为比对合格。
3.2.1 靶仪器 以参加广东省临检中心及卫生部临检中心室间质评活动的优立特1500尿液分析仪为靶仪器,其他尿液分析仪与之进行比对。
3.2.2 比对参数 包括SG、pH、BIL、KET、UBG、PRO、BLD、NIT、LEU、GLU等十项参数。
3.2.3 比对过程 每个项目选择40份标本(包含正常和异常标本),在不同仪器上各检测一次,分5天完成,所有实验在2h内完成,比对仪器的结果与靶仪器的结果
检验科作业指导书
检验科
作业指导书
实验室内部比对程序
文件编号:
版本:

医学检验项目流程作业指导书

医学检验项目流程作业指导书

医学检验项目流程作业指导书第1章医学检验项目概述 (4)1.1 检验项目的分类与意义 (4)1.1.1 生化检验项目 (4)1.1.2 血液学检验项目 (4)1.1.3 免疫学检验项目 (4)1.1.4 微生物学检验项目 (5)1.1.5 分子生物学检验项目 (5)1.1.6 其他检验项目 (5)1.2 检验项目的选择与评估 (5)1.2.1 病情需要 (5)1.2.2 检验项目的敏感性和特异性 (5)1.2.3 检验方法 (5)1.2.4 成本效益 (5)1.2.5 患者意愿 (5)1.2.6 检验结果的解释和临床应用 (5)第2章标本采集与处理 (6)2.1 标本采集的基本原则 (6)2.1.1 合理性 (6)2.1.2 标准性 (6)2.1.3 及时性 (6)2.1.4 安全性 (6)2.1.5 舒适性 (6)2.2 常见标本类型及采集方法 (6)2.2.1 血液标本 (6)2.2.2 尿液标本 (6)2.2.3 粪便标本 (6)2.2.4 咽拭子标本 (6)2.2.5 痰液标本 (6)2.3 标本的运输与处理 (7)2.3.1 运输 (7)2.3.2 处理 (7)第3章血液学检验 (7)3.1 血常规检验 (7)3.1.1 检验目的 (7)3.1.2 标本采集 (7)3.1.3 检验方法 (7)3.1.4 参考范围 (7)3.1.5 结果解读 (7)3.2 血型鉴定与交叉配血 (7)3.2.1 检验目的 (8)3.2.2 标本采集 (8)3.2.4 参考范围 (8)3.2.5 结果解读 (8)3.3 血液凝固功能检验 (8)3.3.1 检验目的 (8)3.3.2 标本采集 (8)3.3.3 检验方法 (8)3.3.4 参考范围 (8)3.3.5 结果解读 (8)第4章生化检验 (9)4.1 肝功能检验 (9)4.1.1 检验项目 (9)4.1.2 标本采集 (9)4.1.3 检验方法 (9)4.1.4 结果解读 (9)4.2 肾功能检验 (9)4.2.1 检验项目 (9)4.2.2 标本采集 (9)4.2.3 检验方法 (9)4.2.4 结果解读 (9)4.3 血糖、血脂检验 (10)4.3.1 检验项目 (10)4.3.2 标本采集 (10)4.3.3 检验方法 (10)4.3.4 结果解读 (10)第5章免疫学检验 (10)5.1 传染病免疫学检验 (10)5.1.1 概述 (10)5.1.2 检验项目 (10)5.1.3 检验方法 (11)5.2 自身免疫性疾病免疫学检验 (11)5.2.1 概述 (11)5.2.2 检验项目 (11)5.2.3 检验方法 (11)5.3 肿瘤标志物检验 (11)5.3.1 概述 (11)5.3.2 检验项目 (11)5.3.3 检验方法 (11)第6章微生物学检验 (12)6.1 基本微生物检验技术 (12)6.1.1 样本采集与运送 (12)6.1.2 微生物分离与纯化 (12)6.1.3 微生物染色技术 (12)6.1.4 微生物生化试验 (12)6.2.1 细菌鉴定方法 (12)6.2.2 药敏试验原理 (12)6.2.3 药敏试验操作步骤 (12)6.2.4 药敏试验结果报告 (12)6.3 病毒检验 (12)6.3.1 病毒分离与培养 (13)6.3.2 病毒核酸检测 (13)6.3.3 病毒血清学检测 (13)6.3.4 病毒基因序列分析 (13)第7章血清学检验 (13)7.1 感染性疾病血清学检验 (13)7.1.1 样本收集与处理 (13)7.1.2 检验项目 (13)7.1.3 检验方法 (13)7.2 自身免疫性疾病血清学检验 (13)7.2.1 样本收集与处理 (13)7.2.2 检验项目 (13)7.2.3 检验方法 (14)7.3 肿瘤标志物血清学检验 (14)7.3.1 样本收集与处理 (14)7.3.2 检验项目 (14)7.3.3 检验方法 (14)第8章分子生物学检验 (14)8.1 基因扩增技术 (14)8.1.1 概述 (14)8.1.2 原理 (14)8.1.3 方法 (15)8.1.4 应用 (15)8.2 基因测序与基因分型 (15)8.2.1 概述 (15)8.2.2 原理 (15)8.2.3 方法 (15)8.2.4 应用 (15)8.3 分子生物学检验在临床诊断中的应用 (15)8.3.1 病原体检测 (16)8.3.2 遗传性疾病诊断 (16)8.3.3 肿瘤分子诊断 (16)8.3.4 个性化医疗 (16)8.3.5 疾病风险评估 (16)第9章组织病理学检验 (16)9.1 组织制片技术 (16)9.1.1 取样与固定 (16)9.1.2 脱水与透明 (16)9.1.4 切片 (16)9.1.5 粘片与烤片 (17)9.2 组织染色技术 (17)9.2.1 常规染色 (17)9.2.2 特殊染色 (17)9.2.3 免疫组化染色 (17)9.3 组织病理诊断 (17)9.3.1 诊断依据 (17)9.3.2 诊断步骤 (17)9.3.3 诊断报告 (17)第10章质量控制与实验室安全 (17)10.1 实验室质量控制 (17)10.1.1 质量控制原则 (17)10.1.2 质量控制措施 (17)10.1.3 质量控制记录 (18)10.2 实验室生物安全 (18)10.2.1 生物安全原则 (18)10.2.2 生物安全措施 (18)10.2.3 意外处理 (18)10.3 实验室废物处理与环境保护 (18)10.3.1 废物处理原则 (18)10.3.2 废物处理措施 (18)10.3.3 环境保护 (19)第1章医学检验项目概述1.1 检验项目的分类与意义医学检验项目根据其检测对象、目的和性质可分为以下几类:1.1.1 生化检验项目生化检验项目主要针对人体血液、尿液等生物样本中的各种生化指标进行检测。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

血细胞分析检验程序 1 检验目的 检测血液中血细胞(红细胞、白细胞和血小板)数量、白细胞分类及相关参数(HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW及MPV等)的变化对临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价值。 2 检测原理 血常规检查方法采用血细胞自动分析仪法,参见《全国临床检验操作规程》p7~11,部分白细胞分类计数采用显微镜检查法,参见《全国临床检验操作规程》p5~7。 2.1 电阻抗法血细胞计数(光电6318-K):即在细胞检测器微孔的两侧各有一个电极,两电极间通有恒定电流,经过稀释液(电解质溶液)稀释的血样(血细胞)在通过检测器微孔时,产生了一个电脉冲;脉冲的高低代表细胞体积的大小,脉冲的个数代表细胞的数量。 2.2 细胞化学和光散射法白细胞计数(Ac.T 5-diff):即将血液经过细胞化学试剂染色,不同的白细胞胞浆内部即可出现不同的酶化学反应。当这些细胞通过测量区时,由于酶反应强度不同和细胞体积大小差异,激光束射到细胞上的前向角和散射角不同,以X轴为吸光率,Y轴为光散射,每个细胞产生两个信号结合定位在细胞分布散点图上。计算机对存储的测量信息进行分析处理,得出白细胞总数和分类计数结果。 2.3 多角度激光法白细胞计数(XE-2100 XT-1800i):在白细胞分类通道:全血加入溶血剂(FD-Ⅰ和FD-Ⅱ)作用后,嗜酸性粒细胞内颗粒被染色;其它白细胞略有皱缩。WBC/BASO通道:全血加入溶血剂(FB)溶血。除BASO外,其它白细胞均明显皱缩。仪器从低角度及高角度分析白细胞的内部结构。计算机对存储的测量信息进行分析处理,得出白细胞总数和分类计数结果。 2.4 光电比色法测量血红蛋白:在稀释的血样中加入溶血剂使红细胞膜破裂释放出血红蛋白,后者与溶血剂中有关成分结合形成Hb衍生物,进入Hb测试系统,在特定波长(一般在530~550nm)下比色,吸光度的变化与液体中Hb含量成正比,仪器便可显示其浓度。不同型号的血细胞分析仪配套溶血剂配方不同,形成的Hb衍生物亦不同,其吸收光谱各异但最大吸收均接近540nm。 2.5 光散射法红细胞和血小板计数(Ac.T 5-diff):以二维激光散射法检测红细胞和血小板。红细胞测试原理是:在测试系统中,全血与红细胞/血小板稀释液混合,使自然状态下双凹盘状扁平圆形的红细胞成为球形并经戊二醛固定,此种处理并不影响MCV体积。红细胞无论以何种方位通过测量区时,被激光束照射后所得的信号是相同的。激光束以低角度前向光散射和高角度光散射同时测量一个红细胞,根据低角度光散射转换能量大小,测量单个红细胞体积与总数;根据高角度光散射得出单个红细胞内血红蛋白浓度。血小板与红细胞在一个系统中测量,其原理是:根据同质性球体光散射的Mie理论,当球形化的血小板单个通过激光照射区时,仪器在两个角度测定激光的散射强度:高角度主要测细胞的折射指数(RI),它与细胞的密度有关;低角度主要测细胞体积的大小。血小板的体积在1~30fl,RI在1.35~1.40之间。计算机对存储的测量信息进行分析处理,得出红细胞和血小板计数结果。 2.6 显微镜白细胞分类计数:把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片,经瑞氏染料染色后,在显微镜下根据白细胞形态特征予以分类计数,得出相对比值(百分率),并观察细胞形态的变化。 3 设备性能参数 血细胞分析仪的操作性能因仪器的种类与型号不同而异。 3.1 XE-2100 XT-1800i血细胞分析仪

3.1.1 本仪器检测血细胞的线性范围为:WBC:(0.0~100.0)×109/L,RBC: (0.0~8.00)×1012/L;HGB:0.0~250g/L,PLT:(0.0~1000)×109/L。 3.1.2 本仪器检测血细胞的精密度为:WBC:±2.0%,RBC:±2.0%,HGB:±2.0%,PLT:±5.0%。 3.2 MEK-6108K MEK-6318K血细胞分析仪

3.2.1 本仪器检测血细胞的线性范围为:WBC:(0.0~99.99)×109/L,RBC:(0.00~9.99)×1012/L,HGB:0~299g/L,PLT:(10~999)×109/L。 3.2.2 本仪器检测血细胞的精密度为:WBC:±3.0%,RBC:±2.0%,HGB:±2.0%和PLT:±5%。 3.3 Ac.T 5diff 血细胞分析仪 3.3.1 本仪器检测血细胞的线性范围为:WBC:(0.4~90.0)×109/L,RBC:(0.23~7.70)×1012/L,HGB:0~229g/L,PLT:(4~1000)×109/L。 3.3.2 本仪器检测血细胞的精密度为:WBC:±3.0%,RBC:±2.0%,HGB:±2.0%和PLT:±6%。 4 标本 4.1 临床护士抽取患者抗凝静脉血2~3ml。 4.2 采血后立即送到临床检验科。 4.3 血量不够1ml或血液凝固、溶血或严重脂血标本不能作检测。 5 设备和试剂 5.1 设备:XE-2100、XT-1800i、MEK-6108K、MEK-6318K 血细胞分析仪。 5.2 试剂 5.2.1 稀释液、溶血剂和清洗液。 5.2.2 CBC试剂、DIFF试剂、消泡剂和鞘液冲洗液。 5.2.3 瑞氏染液及缓冲液。 5.3 购买的试剂应放室温保存,注意防尘、防潮。 5.4 开封后的试剂应尽快用完,变质、超过有效期的试剂不能使用。 6 容器及试剂添加剂 血液标本采集的容器是一次性含EDTA-K2抗凝剂的真空采血管;血液标本必需添加剂是EDTA-K2抗凝剂。 7 校准步骤 血细胞分析仪的操作过程分别见XT-2100 XT-1800i血细胞分析仪标准操作程序、Ac.T 5-diff血细胞分析仪标准操作程序、和MEK6108-K MEK6318K血细胞分析仪标准操作程序中仪器校准程序。 8 操作步骤 8.1 申请单及标本编号 整理血液常规检验申请单及血液标本,审核合格后,对检验申请单和血液标本进行编号。 8.2 上机测试 操作过程分别见XE-2100血细胞分析仪标准操作程序、XT-1800i血细胞分析仪标准操作程序、Ac.T 5diff血细胞分析仪标准操作程序和MEK6108-K MEK-6318K血细胞分析仪标准操作程序标准操作程序。 8.3 检验结果的输入 8.3.1 打开电脑,启动“检验程序”,输入用户名及口令后,进入检验程序。 8.3.2 单击“检验”菜单,选择“检验结果录入\修改”,进行检验结果的录入及修改。通过申请序号进行结果的输入,选择“工作单号”(XE-2100 XT-1800i自动传输:扫入当前检验标识序号;Ac.T 5diff自动传输:扫入当前检验标识序号;MEK-6108K MEK-6318K测定结果和其它非自动传输标本:输入病人姓名),仪器会自动传输入检测结果;同时输入当前患者的样品“采集时间”和“接收时间”。 8.3.3 仪器检测结果必要进一步镜检标准 8.3.3.1MEK-6318K和MEK6108-K血细胞分析仪等三分类仪器检测的标本全部需要镜检血涂片。 8.3.3.2XE-2100 XT-1800i和Ac.T 5diff血细胞分析仪等五分类仪器检测结果根据本程序第18款[白细胞五分类血细胞分析仪的白细胞分类筛选原则]选出需要做血涂片检查的血标本。 8.3.3.3 临床医生要求做红细胞、白细胞、血小板等形态检查的血标本。8.4 显微镜检查操作步骤 8.4.1 制片:静脉抗凝血标本混匀或末梢血标本,采血后推成厚薄适宜的血膜片,血膜应呈舌状,头、体、尾清晰可分。推好的血膜在空气中晃动,以促使快干,以免细胞变形缩小。 8.4.2 染色:平置玻片于染色架上,滴加瑞氏染色液3~5滴,使其迅速盖满血膜,约1分钟后,滴加缓冲液5~10滴,轻轻摇动玻片或对准血片吹气,与染液充分混和,5~10分钟后用水冲去染液,待干。 8.4.3 镜检:先用低倍镜或高倍镜阅览全片,注意观察血片染色情况:如有无血小板或红细胞聚集,片尾有无巨大异常细胞,再结合仪器警告的内容,分别重点从白细胞分类、红细胞参数和血小板参数等方面进行观察,记录各类细胞结果。 8.5 镜检结果的输入及报告确认 单击“结果处理”菜单,选择“报告确认”进入结果确认,通过选择“工作单元”、“报告日期”、“单张”或“批量”后,按“提取”键提取检测结果,对检验结果进行逐一确认。 8.6 检测过标本及废物的处理 检测过的血液标本、废液及经血液标本污染的各种废物按血液常规标本的采集与处理程序(文件编号:PLA301-LJK–CJ-001)中4.14进行处理。 9 质量控制 9.1 室内质控:周一~五每天做室内质控(厂家提供的质控物)。测定过程是:从4~8℃冰箱取出全血质控物置室温,血细胞分析仪开机后预热20min,分别将质控物混匀后上机检测,打印结果并与允许值范围对比,质控合格后才能检测病人血标本。对于失控应按质量控制程序处理,仪器质量控制当天的情况进行逐一登记。 9.2 室间质控:每月参加科内的室间质控考评2次。每年参加卫生部和WHO室间质控。 9.3 细胞分类计数的质量控制 9.3.1 影响分类计数准确性的因素 9.3.1.1 细胞分布不均 在一般涂片的尾部中性粒细胞较多,淋巴细胞较少。涂片越薄细胞分布越差,粗糙的推片所制成的血涂片,细胞分布明显不均。当白细胞有聚集现象时,细胞分布极不规则,以致无法准确地进行分类。胞体在的细胞和幼稚细胞分布在涂片的尾部和边缘,相反,淋巴细胞和嗜碱性粒细胞则位于涂片的头部和体部。因此,在日常操作中,应尽量注意这些问题,减少 10 干扰因素 10.1 严重的黄疸或脂血使血红蛋白结果假性增高。 10.2 红细胞冷凝集可使红细胞和血小板计数结果假性减低,白细胞假性增高(电阻抗法)或假性减低(激光法)和MCV假性增高。 10.3 冷凝球蛋白增高使白细胞和血小板计数结果假性增高。 10.4 有血小板凝集者可使血小板计数结果假性减低。

相关文档
最新文档