浙科版高中生物选修3疑难点探讨
浙教版生物选修三知识点
浙教版生物选修三知识点浙教版生物选修三是高中生物课程中的一本教材，主要涵盖了生物学的一些重要知识点。
下面将介绍一些该教材中的重要知识点，并进行拓展说明。
1. 遗传与进化：遗传是生物学的基础，而进化是生物多样性产生的原因。
教材中会介绍遗传的基本原理，如遗传物质的结构和功能、遗传变异的产生和传递等。
此外，也会讨论进化的基本概念和证据，如自然选择、适应性辐射、化石记录等。
拓展内容可以包括人类的进化史、分子进化以及进化的应用等。
2. 生物技术与生命的发展：生物技术是现代生物学的重要分支，通过利用生物体的组成和功能来解决各种问题。
教材中会介绍基因工程、克隆技术、基因检测等生物技术的原理和应用。
此外，还会讨论生命的发展过程，如胚胎发育、生殖方式的多样性等。
拓展内容可以包括CRISPR-Cas9技术、人类基因组计划等前沿生物技术的应用与研究。
3. 生态环境与资源保护：生态环境是生物生存和发展的基础，而资源的合理利用和保护是人类可持续发展的重要保障。
教材中会介绍生态系统的组成和功能、物种多样性的维持机制以及环境污染与保护等内容。
此外，还会讨论能源与环境的关系、可再生能源的利用等。
拓展内容可以包括气候变化与生态系统、生物多样性保护与可持续发展等热点话题。
4. 生命活动与健康：生命活动是维持生物体生存和发展的基本过程，而健康是人类幸福生活的基础。
教材中会介绍生物体的营养需求、消化吸收、呼吸运动等生命活动的调节机制。
此外，还会讨论常见疾病和预防、生殖健康等方面的知识。
拓展内容可以包括生活习惯与健康、遗传病与基因检测等相关内容。
总的来说，浙教版生物选修三涵盖了生物学中的一些重要知识点，从遗传与进化、生物技术与生命发展、生态环境与资源保护到生命活动与健康等方面进行了全面而深入的讲解。
这些知识点不仅有助于学生对生物学的理解和应用，也能够引导学生关注生物科学的前沿研究和社会实践的问题。
生物选修三重点难点（2）
生物选修三重点难点(2)生物选修三重难点二：胚胎工程一、体内受精与早期胚胎发育1、胚胎发育过程2.受精过程中的“三大反应”与防止多精入卵受精的“两道屏障”(1)顶体反应：精子膜和顶体外膜发生一系列改变并释放顶体酶的过程即为顶体反应。
顶体反应的主要作用是形成精子穿越放射冠的通道，是精子和卵子结合必不可少的条件。
(2)透明带反应：精子触及卵细胞膜的瞬间，会产生阻止后来的精子进入透明带的生理反应，称做透明带反应，它是防止多精入卵受精的第一道屏障。
(3)卵细胞膜反应：精子入卵后，卵细胞膜会立即发生一种生理反应，拒绝其他精子再进入卵内，称为卵细胞膜反应，这是防止多精入卵受精的第二道屏障。
易错警示!(1)动物排出卵子的成熟程度不同，有的可能是次级卵母细胞，如猪、羊等;有的可能是初级卵母细胞，如马、犬等，但它们都要在输卵管内进一步成熟，当达到减数第二次分裂的中期时，才具有与精子受精的能力。
(2)受精的标志是在卵黄膜和透明带的间隙观察到两个极体;受精完成的标志是雌、雄原核融合成合子，受精卵是个体发育的开始。
二、胚胎工程1. 动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础动物胚胎发育的基本过程：受精卵→2细胞→4细胞→8细胞→桑葚胚→囊胚→原肠胚胚胎工程的理论基础：哺乳动物受精和早期胚胎发育规律(1)精子和卵子的产生过程中精子变形，卵子没有。
卵泡的形成和在卵巢内的储备，是在出生前完成的。
考点细化：①精细胞产生后要经过顶体形成、尾部发育、细胞质浓缩最终精子形成②卵子的发生在胎儿时期就完成了卵泡的形成和在卵巢内的储备，排卵前后进行了减数第一次分裂，减Ⅱ分裂在精子和卵细胞结合过程中完成。
(2)精、卵细胞结合前各自要发生哪些生理过程?(提示：在受精前精子要在雌性动物生殖道内获能;排出的卵子要在输卵管中进一步成熟到减Ⅱ中期才具备受精能力)。
(3)受精过程：精子获能→卵子准备阶段→受精。
卵子防止多精入卵的屏障：透明带反应和卵细胞膜反应拓展：① 桑椹胚一般指 32 个左右的细胞数目的胚胎。
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36、“不可能”这个字(法语是一个字 )，只 在愚人 的字典 中找得 到。--拿 破仑。 37、不要生气要争气，不要看破要突 破，不 要嫉妒 要欣赏 ，不要 托延要 积极， 不要心 动要行 动。 38、勤奋，机会，乐观是成功的三要 素。(注 意：传 统观念 认为勤 奋和机 会是成 功的要 素，但 是经过 统计学 和成功 人士的 分析得 出，乐 观是成 功的第 三要素 。
39、没有不老的誓言，没有不变的承 诺，踏 上旅途 ，义无 反顾。 40、对时间的价值没有没有深切认识 。——非洲 2、最困难的事情就是认识自己。——希腊 3、有勇气承担命运这才是英雄好汉。——黑塞 4、与肝胆人共事，无字句处读书。——周恩来 5、阅读使人充实，会谈使人敏捷，写作使人精确。——培根
高中生物选修3浙科版知识点总结
1 第一章 基因工程一、工具酶的发现和基因工程的诞生1、基因工程的概念：（1）广义的遗传工程：泛指把一种生物的遗传物质（细胞核、染色体脱氧核糖核酸等）移到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达。
移到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达。
（2）基因工程：就是把一种生物的基因转入另一种生物体中，使其产生我们需要的基因产物，或者让它获得新的遗传性状。
基因工程的核心是构建重组DNA 分子。
由于基因工程是在DNA 分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA 重组技术。
重组技术。
（3）基因工程诞生的理论基础：DNA 是遗传物质的发现过程、DNA 双螺旋结构的确立、遗传信息传递方式的认定。
双螺旋结构的确立、遗传信息传递方式的认定。
2、基因工程的基本工具（1）“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） ① 来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
主要是从原核生物中分离纯化出来的。
② 功能：能够识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并能切割（使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开），因此具有专一性。
例如：某种限制性核酸内切酶能识别的序列是GAATTC,GAATTC,能在能在G 和A 之间切割DNA DNA，如，如下图所示。
下图所示。
黏性末端黏性末端③ 结果：能将DNA 分子切割成许多不同的片段。
分子切割成许多不同的片段。
备注：不同DNA 分子用同一种限制性核酸内切酶切割形成的黏性末端都相同；同一个分子用同一种限制性核酸内切酶切割形成的黏性末端都相同；同一个 DNA 分子用不同限制性核酸内切酶切割，产生的黏性末端一般不相同。
分子用不同限制性核酸内切酶切割，产生的黏性末端一般不相同。
（2）“分子缝合针”——DNA 连接酶 ① 作用：将具有末端碱基互补的2个DNA 片段连接在一起（缝合磷酸二酯键）形成的D NA 分子称为重组DNA 分子。
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41、实际上，我们想要的不是针对犯 罪的法 律，而 是针对 疯狂的 法律。 ——马 克·吐温 42、法律的力量应当跟随着公民，就 像影子 跟随着 身体一 样。— —贝卡 利亚 43、法律和制度必须跟上人类思想进 步。— —杰弗 逊 44、人类受制于法律，法律受制于情 理。— —托·富 勒
拉
60、生活的道路一旦选定，就要勇敢地 走到底 ，决不 回头。 ——左
45、法律的制定是为了保证每一个人 自由发 挥自己 的才能 ，而不 是为了 束缚他 在、过 去和未 来文化 生活的 源泉。 ——库 法耶夫 57、生命不可能有两次，但许多人连一 次也不 善于度 过。— —吕凯 特 58、问渠哪得清如许，为有源头活水来 。—— 朱熹 59、我的努力求学没有得到别的好处， 只不过 是愈来 愈发觉 自己的 无知。 ——笛 卡儿
浙科版高三生物选修3_难点剖析：基因工程的基本操作步骤
难点剖析：基因工程的基本操作步骤知识·巧学一、目的基因的获取基因操作的第一步，是取得人们所需要的特定基因，也就是目的基因。
例如，前面提到的苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因，还有植物的抗病（抗病毒、抗细菌）基因、种子的储藏蛋白的基因，以及人的胰岛素基因、干扰素基因等，都是目的基因。
1.从基因文库中获取目的基因要从浩瀚的“基因海洋”中获得特定的目的基因，犹如大海捞针，是十分不易的。
科学家们经过不懈地探索，想出了许多办法，概括地说，主要有两条途径：一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因；另一条是人工合成基因。
将某种生物体内的DNA全部提取出来，选用适当的限制酶，将DNA切成一定范围大小的DNA片段，然后，将这些DNA片段分别与载体连接起来，导入受体菌的群体中储存，每个受体菌都含有一段不同的DNA片段。
这个群体包含了这种生物的所有基因，叫做这种生物的基因组文库。
如果用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA（也叫cDNA）片段，与载体连接后储存在一个受体菌群体就叫做这种生物的cDNA文库。
知识拓展直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”，又叫“散弹射击法”。
这种方法犹如用猎枪发射的散弹打鸟，无论哪一颗弹粒击中目标，都能把鸟打下来。
鸟枪法的具体做法是：用限制酶将供体细胞中的DNA切成许多片段，将这些片段分别载入运载体，然后通过运载体分别转入不同的受体细胞，让供体细胞所提供的DNA （外源DNA）的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制（在遗传学中叫做扩增），从中找出含有目的基因的细胞，再用一定的方法把带有目的基因的DNA 片段分离出来。
如许多抗虫、抗病毒的基因都可以用上述方法获得。
用“鸟枪法”获取目的基因的缺点是工作量大，具有一定的盲目性。
又由于真核细胞的基因含有不表达的DNA片段，不能直接用于基因的扩增和表达，因此，在获取真核细胞中的目的基因时，一般是用人工合成基因的方法。
2.利用PCR技术扩增目的基因20世纪80年代以后，随着DNA核苷酸序列分析技术的发展，人们已经可以通过DNA序列自动测序仪对提取出来的基因进行核苷酸序列分析，并且通过一种扩增DNA的新技术（也叫PCR技术），使目的基因片段在短时间内成百万倍地扩增。
生物选修三重点难点
生物选修三重点难点考试是检测学生学习效果的重要手段和方法，考前需要做好各方面的知识储备。
下面是店铺为大家整理的生物选修三重难点知识点，希望对大家有所帮助!生物选修三重难点一：基因工程一、基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA 重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。
二、基因工程的原理及技术原理：基因重组技术基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
(2)功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。
(3)结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端.2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较：①.相同点：都缝合磷酸二酯键。
②.区别：E•coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA 片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。
DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——载体(1)载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。
③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
(2)最常用的载体是质粒：它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
(3)其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。
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51、山气日夕佳，飞鸟相与还。 52、木欣欣以向荣，泉涓涓而始流。
53、富贵非吾愿，帝乡不可期。 54、雄发指危冠，猛气冲长缨。 55、土地平旷，屋舍俨然，有良田美 池桑竹 之属， 阡陌交 通，鸡 犬相闻 。
41、学问是异常珍贵的东西，从任何源泉吸 收都不可耻。——阿卜·日·法拉兹
42、只有在人群中间，才能认识自 己。——德国
43、重复别人所说的话，只需要教育； 而要挑战别人所说的话，则需要头脑。—— 玛丽·佩蒂博恩·普尔
44、卓越的人一大优点是：在不利与艰 难的遭遇里百折不饶。——贝多芬
45、自己的饭量自己知道。——苏联
浙科版选修3问题释疑课件
《现代生物科技专题》 现代生物科技专题》 问题释疑
宁波效实中学 邵江樵
2008－10
1．限制酶和质粒都是只存在与细菌中吗？ 限制酶和质粒都是只存在与细菌中吗？
不是。 不是。 不但细菌中存在限制酶和质粒， 不但细菌中存在限制酶和质粒，在酵母菌 中也有限制酶和质粒。 中也有限制酶和质粒。
6.双标记基因问题 6.双标记基因问题
下图a示基因工程中经常选用的载体 pBR322质粒 下图a示基因工程中经常选用的载体——pBR322质粒，Ampr表示氨 pBR322质粒， 苄青霉素抗性基因， 表示四环素抗性基因。 苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因。目的基因如果插 入某抗性基因中，将使该基因失活，而不再具有相应的抗性。 入某抗性基因中，将使该基因失活，而不再具有相应的抗性。为 了检查载体是否导入原本没有Amp 的大肠杆菌， 了检查载体是否导入原本没有Ampr 和Tetr的大肠杆菌，将大肠杆 菌培养在含氨苄青霉素的培养基上，得到如图b的结果（ 菌培养在含氨苄青霉素的培养基上，得到如图b的结果（黑点表示 菌落）。再将灭菌绒布按到图b的培养基上，使绒布面沾上菌落， 菌落）。再将灭菌绒布按到图b的培养基上，使绒布面沾上菌落， ）。再将灭菌绒布按到图 然后将绒布平移按到含四环素的培养基上培养，得到如图c 然后将绒布平移按到含四环素的培养基上培养，得到如图c的结果 空圈表示与b对照无菌落的位置）。 （空圈表示与b对照无菌落的位置）。
3．限制酶所识别的序列有什么特点？ 限制酶所识别的序列有什么特点？
限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基， 限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基， 都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA 都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA 上的碱基是反向对称重复排列 回文结构) 反向对称重复排列( 上的碱基是反向对称重复排列(回文结构)的。
浙科版高中生物选修3难点剖析：生态工程的发展前景
生态工程的发展前景1.“生物圈2号”生态工程的实验及启示（1）设计目的：制造人工模拟的生命支持系统，以验证人类在离开地球的情况下，利用人工生态工程，仅仅依靠太阳能，能否维持生存。
（2）组成：密闭的钢架构型＋7种模拟的生态群落区＋两个大气扩张器＋阳光。
（3）失败的原因：温度失调；空气中CO2的含量猛增；O2量减少，不足以维持人及动物的生存。
（4）给人类的启示：认识到人与自然和谐共处的重要性，深化了对自然规律的认识；人类仍然没有能力完全模拟出自然系统。
2.对我国生态工程发展前景的分析与展望（1）西方国家发达工程的特点：目的是治理环境污染，集中对破坏的生态系统进行生态恢复，应用范围小，不太强调经济效益。
（2）我国生态工程的特点：不但重视生态环境的保护，更注重与经济、社会效益的结合。
（3）我国生态工程存在的问题：缺乏定量化的指导，难以设计出标准化、易操作的生态工程样板，缺乏理论性指导等。
（4）发展前景：符合国情，有政府支持，得到广泛的应用，随着我国社会、经济的发展，以及可持续发展战略的实施，我国的生态工程一定会展现出广阔的发展前景。
问题·探究问题1 城市化产生的主要生态环境问题是什么？探究:（1）自然生态环境遭到彻底破坏，居民与大自然长期隔离：城市化确实使人类为自身创造了方便、舒适的生活条件，满足了自己的生存、享乐和发展上的需要，但也使得人类与大自然长期隔离。
（2）污染严重，生活环境质量恶化：废水、废气、固体废弃物以及噪声成为现代城市最突出的四大环境问题，被人们称为“四害”。
（3）水资源缺乏：现代化城市由于人口和工业高度集中，加之有些城市规模过大，水的需求量剧增，因而水资源的缺乏成为全世界城市的普遍问题。
问题 2 对小流域进行综合治理时，为什么要针对不同的地形采取不同的措施？这体现了生态工程的什么原理？探究:山顶土壤条件、气候条件恶劣，不宜蓄水，交通不便，改造成本高，适宜封山，依靠自然恢复力来恢复植被；山腰、荒地等土壤，虽然水分条件较好，但是仍不适宜种植农作物，对于这样的地方可以自然恢复，也可以人为种植适宜的林木、草或果树等，加快植被恢复速度，这样既能降低土壤侵蚀，又能创造一定的经济效益；对沟底而言，应建设堤坝系统，它可以蓄水和淤积土地，还能够减少山体的崩塌和滑坡，保证人民的生命财产安全；对坡地和山脚农田来说，土壤、水分条件良好，交通也较方便，土地生产力高，适宜种植农作物来解决人们的粮食和收入等问题，但是在坡地上要水平梯田种植，以减少水土流失。
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【饲养层细胞】：在细胞培养中其分化抑制作用的单层贴壁 细胞，就是指一些特定细胞（如颗粒细胞、成纤维细胞、输 卵管上皮细胞等已在体外培养的细胞），经有丝分裂阻断剂 （常用丝裂霉素）处理后所得的细胞单层。是细胞培养，尤 其是胚胎干细胞培养常用的生长增值促进剂和分化抑制剂。 【成纤维细胞】：普遍存在于结缔组织中的一种中胚层来源 的细胞。分泌前胶原、纤连蛋白和胶原酶等细胞外基质成分， 伤口愈合过程中可迁移到伤口进行增殖。成纤维细胞较大， 轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞 核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞对不同程度 的细胞变性、坏死和组织缺损以及骨创伤的修复有着十分重 要的作用
Ti质粒是在根瘤土壤农杆菌细胞中存在的一种染色体外自 主复制的环形双链DNA分子。它控制根瘤的形成，可作 为基因工程的载体。此质粒既有在细菌中表达的基因，又 有在高等植物中表达的基因，这是很独特的。 农杆菌转化法
第一部分：基因工程
二、疑难问题
在目的基因的表达前先进行目的基因是否导 入受体细胞的筛选有无多此一举？
第三部分：胚胎工程
一、易混概念
受精 授精 体外受精 （人工）体外受精
体内受精
人工授精
【受精】：精子进入卵子后，雌雄原核相融合形成合子的过程。 【授精】：因精子一般仅能在液体中运动，所以作为受精的前提 条件是需要使精子和卵处于同一液体介质中，特别是在多细胞动 物，把充满这种受精条件的称为授精（还需完善）。 【体内受精】：凡在雌、雄亲体交配时，精子从雄体传递到雌体 的生殖道，逐渐抵达受精地点（如子宫或输卵管），在那里精卵 相遇而融合的，称体内受精。多发生在高等动物如爬行类、鸟类、 哺乳类、某些软体动物、昆虫以及某些鱼类和少数两栖类。 【体外受精】:凡精子和卵子同时排出体外，在雌体产孔附近或 在水中受精的，称体外受精。多发生在水生动物的普遍生殖方式， 如某些鱼类和部分两栖类等。 【人工授精】：是指采用非性交的方法，在体外留取精液，经过 处理后直接将精液置于女性的生殖道内，任其精子和卵子自然受 精、妊娠，达到生育目的。 【（人工）体外受精】：采集雌性动物的卵细胞和雄性动物的精 子，使其在试管中受精。浙科教材P47
选修3疑难点探讨
瑞安中学 林娜
第一部分：基因工程
一、易混概念
基因探针 基因诊断 基因敲除
【基因探针】：即核酸探针，是一段带有检测 标记，且顺序已知的，与目的基因互补的核酸 序列(DNA或RNA)。根据杂交原理，作为探针的 核酸序列至少必须ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ备以下两个条件：
①应是单链，若为双链，必须先行变性处理。 ②应带有容易被检测的标记。
第二部分：克隆技术部分
二、疑难问题
动物细胞培养中卡氏瓶为什么要放在5%CO2 培养箱，明明有盖子？
放入二氧化碳培养箱时，瓶口不是完全封死的。 （对大多数以碳酸盐作为pH缓冲系统的培养液而 言，以为了维持稳定的pH，培养箱中的二氧化碳 需要维持在2-10%之间，以保持培养液中溶解的二 氧化碳的浓度。同时细胞培养的器皿需要一定程 度的透气，以便于气体的交换。）
第二部分：克隆技术部分
二、疑难问题
为什么胚胎细胞核移植成功率远高于成体细 胞核，两者核遗传物质不是相同吗？
端粒酶能延长缩短的端粒（缩短的端粒其细胞复制能力受 限），从而增强体外细胞的增殖能力。端粒酶的表达与人 细胞的永生化程度高度相关，Thomson（分离人的胚胎干 细胞的学者）等研究证明hES（人的胚胎干细胞）高表达 端粒酶。因此可以推测来自囊胚和胎儿的ES细胞的增殖能 力可能比采用体细胞核转移技术获得的ES细胞强，因为通 过体细胞核转移技术获得的ES细胞端粒酶活性不会很高， 从而限制了细胞的分裂能力。
一、易混概念
基因探针 基因诊断 基因敲除
【基因敲除】：是自80年代末以来发展起来的 一种新型分子生物学技术，是通过一定的途径 使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意 义上的基因敲除主要是应用DNA同源重组原理， 用设计的同源片段替代靶基因片段，从而达到 基因敲除的目的。
第一部分：基因工程
一、易混概念
基因探针 基因诊断 基因敲除
DNA分子杂交技术
抗原-抗体杂交技术
【DNA分子杂交技术】：互补的核苷酸序列通过 Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链分 子DNA分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特 异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特 异性的靶序列检测。
第一部分：基因工程
一、易混概念
第一部分：基因工程
二、疑难问题
不同限制酶处理获得的不同黏性末端也可形 成重组DNA分子吗？
限制酶产生的末端的连接有三种情况： ①匹配末端。用同一种酶酶切产生的带相同突出端的两个片段； 用不同的酶酶切但带有相同突出端的两个片段，如用BamHⅠ及 BglⅡ酶切相同的突出端都可以匹配，并在连接酶作用下连接。 ②平末端。平末端可以直接连接，但连接效率比黏性末端低。 ③不匹配黏端。不配对黏端的连接可采用两种方法：A.用S1酶 切除突出的核苷酸，将黏端修平，再用连接酶连接。B.用 Klenow酶将黏端部分补平，如HindⅢ与XbaⅠ产生的黏端不能 匹配，可分别用两种核苷酸填补，使之产生匹配黏端，再用连 接酶连接，该法的优点在于可防止片段的自身连接。
以蔗糖作为碳源，主要有三个方面的原因： ①同样作为碳源为植物细胞提供能量来源，蔗糖较葡萄糖能 更好地调节培养基内的渗透压。配制相同质量分数的培养基， 蔗糖形成的渗透压要明显低于葡萄糖，因此若采用葡萄糖作 为碳源，易使植物细胞脱水而生长不良。同时，植物细胞吸 收蔗糖的速率要明显慢于吸收葡萄糖的速率，所以蔗糖形成 的渗透压可相对长期的保持稳定。 ②植物组织培养过程中，要时刻注意防止培养基受到微生物 的污染。微生物生长所需的碳源最常用的是葡萄糖，一般很 少利用蔗糖。因此，采用蔗糖作为培养基的碳源，可一定程 度上减少微生物的污染。 ③诱导作用。在培养基成分中，增加生长素的浓度，导致木 质部形成，增加蔗糖浓度则导致韧皮部形成。当生长素水平 恒定时，2％蔗糖使分化出的全部是木质部，4％蔗糖使分化 出的几乎全部是韧皮部，3％蔗糖则可以分化出两者。所以， 生长素和蔗糖浓度决定愈伤组织中维管束的类型与数量。因 此，在植物组培中要选用蔗糖而不选用葡萄糖。
第三部分：胚胎工程
一、易混概念
滋养细胞
滋养层细胞
饲养层细胞 成纤维细胞
【滋养细胞】：如滋卵细胞，卵巢中来自卵原细胞的滋 养细胞，提供卵发育所需物质。 【滋养层细胞】：在胚胎发育成桑椹胚后，桑椹胚进一 步发育，细胞开始出现分化。聚集在胚胎的一端，个体 较大的细胞，称为内细胞团（inner cell mass，ICM）， 将来发育成胎儿的各种组织，而沿透明带内壁扩展和排 列的，个体较小的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发 育成胎膜和胎盘。 所以做基因诊断时，通常取少量滋养 层细胞诊断是否患有遗传病，这样不会影响胎儿发育。
第一部分：基因工程
一、易混概念
基因探针 基因诊断 基因敲除
【基因诊断】：又称DNA诊断或分子诊断，通过 分子生物学和分子遗传学的技术，直接检测出 分子结构水平和表达水平是否异常，从而对疾 病做出判断。进行基因检测有两个必要条件， 一是必需的特异的DNA探针；二是必需的基因组 DNA。
第一部分：基因工程
第二部分：克隆技术部分
二、疑难问题
植物组织培养过程中何时需光照？
植物组织培养中光照也是重要条件，它对生长和分化有很大影响。 愈伤组织的培养分为两个阶段。 脱分化培养阶段：由于光会阻碍组织的脱分化，所以脱分化培养 阶段应避光培养，在无光的条件下愈伤组织长得更快。 再分化培养阶段：将良好的愈伤组织转接至分化培养基上进行再 分化培养。这时应见光，愈伤组织见光后，颜色可以转为绿色。 不同植物对各种条件的要求也往往不同。光对生长和分化有很大 影响，这与材料的性质、培养基情况以及由于光照而引起的温度 上升等方面因素有关。菊花是短日照植物，在短日照下易分化， 在长日照下产生愈伤组织。
第三部分：胚胎工程
二、疑难问题
胚胎干细胞究竟属于全能干细胞还是多能干 细胞？ 全能性干细胞：处于8细胞期之前的每一个胚胎 细胞（包括受精卵）
基因探针 基因诊断 基因敲除
DNA分子杂交技术
抗原-抗体杂交技术
【抗原-抗体杂交技术】：Western杂交──蛋 白质分子（抗原—抗体）之间的杂交。它是检 测目的基因是否表达出蛋白质的一种方法。
第一部分：基因工程
二、疑难问题
限制性核酸内切酶能识别RNA序列吗？
限制性核酸内切酶是能够识别和切割DNA 分子内一小段特殊核苷酸序列的酶。P2
包括抗虫、抗病的接种实验，以确定是否具有抗 性以及抗性的程度；基因工程产品需要与天然产 品的活性比较，以确定功能活性是否相同等
第二部分：克隆技术
一、易混概念
植物细胞工程 【植物细胞工程】培养植物细胞（包括原生质 体），借助基因工程方法，将外源遗传物质 （DNA）导入受体细胞（包括原生质体受体） 中，或通过细胞融合、显微注射等到将不同来 源的遗传物质重新组合，再通过对这些转基因 细胞或重组细胞进行培养，获得具有特定性状 的新植株。
第三部分：胚胎工程
二、疑难问题
精子在体内和体外分别是如何获能的？
【精子获能】当精子射入阴道内，精子离开精液，经宫颈管进 入子宫腔及输卵管腔，精子顶体表面的糖蛋白被生殖道分泌物 中的α、β淀粉酶降解，同时顶体膜结构中胆固醇与卵磷脂比 率和膜电位发生变化，降低顶体膜稳定性的过程。即是指精子 获得穿透卵子透明带能力的生理过程，是精子在受精前必须经 历的一个重要阶段。 【精子获能的生育意义】①去除精子表面的覆盖物，暴露出精 子膜表面与卵子相识别的位点。②增加精子活力，改变膜的通 透性。③精子头部出现流动性不相等的区域，为精子膜与顶体 膜融合做好准备。④精子顶体后区膜的流动性加大，以准备与 卵膜结合。 【精子获能的处理方法】 （1）培养法：对啮齿动物、家兔和猪等动物，将取自附睾的精 子，放入人工配制的获能液中，培养一段时间后，精子就可获 能，这种方法称为培养法。 （2）化学诱导法：对于牛、羊等家畜，将精子放在一定浓度的 肝素或钙离子载体A23187溶液中，用化学药物诱导精子获能， 称之为化学法。