硫酸软骨素提取工艺及药理学作用的研究进展

ｐ 乙酸水溶液提取硫 酸软骨 ａａｏ 素 。通 过此 工 艺 ，可 以把 牛 鼻 软 骨 中 ７ ％ 以上 ０ 条件温和 ，不会使硫酸软骨素发生降解。常用的 酶制剂 有胰 酶 、 胃蛋 白酶 、木瓜 蛋 白酶等 。采用 胰酶从 新鲜 猪 喉骨 中提取 硫酸 软骨 素 ，可 得到含 氮量 为 ３ ６ ％ 的 提 取 物 Ｊ ．２ 。采 用 胰 酶 与木 瓜 蛋 的硫酸软骨素缩糖浸出。影响硫酸软骨素浸 出率 主要影响因素是 ｐ Ｈ值 ，若在抽提硫 酸软骨素时 加入乙酸钠 ，在相 同条件下 ，可使硫酸软骨素浸 出率提高 ６ ％。该工艺 流程简单 ，成本较低 ，可 以考虑商业化大规模生产。 白酶 的复合酶可得到含氮量仅为 ３５ ％的硫酸 ．０ 软骨素 提取 物 － １ 。王 凤 琴等 － 复合 酶 解 法从 １ 引用 猪肋 、喉 、气管 等软 骨 中提取硫 酸软 骨素 。影 响 ２ 硫 酸 软 骨 素 的分 离 制 备 利 用 各 种 糖 胺 聚 糖 （ ｌ ｏａ ｉｏｌ ａｓ Ｇｙ ｓｍ ｎｇ ｃｎ ， ｃ ｙ Ｇ Ｇ ）类 物质 不 同 的溶 解 度 、 电荷 密 度 进行 分 Ａｓ 级 分离 纯 化 Ｃ 。常 用 分 离 方 法 有 乙醇 沉 淀 法 、 Ｓ 该工艺水解反应 的因素为酶解温度、ｐ Ｈ值与加 酶量 ，利用 正交 试验 得 出 优化 条件 为 温 度 ５ ℃ 、 Ｏ ｐ 值 ８６ —８９ Ｈ ． ． 、加 酶 量 ０３ ｇＬ ．９／ ，收 率 达 １．４ 。采用 全 新 的 双酶 酶 解 工 艺 和 中 空 纤 维 ７ ８％ 一 超滤等现代技术生产硫酸软骨素 ，由于酶作用专 性强 的特点 ，质量稳定 ，收率高 ，产品颜色洁 白，生 产周 期 较 短 。华 子 义 － 提 出 了 双 酶 生 １ 也 产硫酸 软 骨素 的新 工 艺 ，该 法 以猪 、牛 、鲨 鱼 、 盐液沉淀法、季铵盐络合法和离子交换色谱法 ， 其 中乙醇沉 淀 法 最 常 用 。高 华 等 － 用 先 低 温 １ 采 减 压浓缩 酶解 液 、再加 乙醇沉 淀 的工艺 ，可 减少 乙醇用量 ，同时提高产品收率。张峥等 在分 离纯化 ｃ ｓ时，先采用 Ｓ ｐ ａｅ ． 凝胶过滤 ， ｅｈｄｘＧ１ ０ 再以 Ｄ ６ 大孔型离子交换树脂进 行离子交换色 ０１ 谱 ，纯度可提高至 ９． ％。近 年膜 技术也被用 ９７ 于Ｃ Ｓ的分离 纯化 。Ｌｇｏ等 经 比较研 究 证 实 ｉ ｔ ｎ 鸡 、鸭等动物软骨为原料 ，与传统生产法相 比， 该工艺得率可提 高 １ 一 ％ ，产品洁 白，生产 ％ ２ 周期缩短 １３ ／ ，生产成本降低 ５ 。 ％ １４ 超声波提取法 ． 蒲志军等－ 利用超声波法制备硫酸软骨素 ， ２ ０ 其 原理 是在碱 性 条件下 蛋 白质易 离解 和超声 波 的 了超滤技术用于浓缩纯化 Ｃ Ｓ的可行性 ，并证 明 孔径 ０ １ ｍ的超滤膜分离效果最佳。 ．“ 热学机制可促进蛋白质快速解离而达到去杂蛋 白 的目的，升温 （ ５— Ｏ ８ ９ ℃）均可使解 离 的蛋 白 ３ 硫酸软骨素的药 理学作 用 ３ １ 治 疗风湿 病和 关节 炎 ． 维普资讯 ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｑｖｉｐ．ｃｏｍ 第 ２期 陈守平等：硫酸软骨素提取工艺及药理学作用的研究进展 ｃ 作 为 风湿病 、关节 炎、肩 周炎 、腰 痛、 Ｓ 神经痛 、偏头痛等 的治疗药物具有很好 的效果 ， 其机理为硫酸软骨素可直 接补充软骨 的基 质成 分 、减少软骨成分 的降解、促进 软骨细胞 的代 谢 、恢复软骨细胞基质分泌
本文由ｃｍｙｌｘｊｊ贡献 ｐｄｆ文档可能在ＷＡＰ端浏览体验不佳。建议您优先选择ＴＸＴ，或下载源文件到本机 查看。 维普资讯 ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｑｖｉｐ．ｃｏｍ 福 建水 产 ，２０ ０７年 ６月第 ２期 Ｊ ｏＵＲＮＡＬ ＵＪ ＡＮ ｓ ｏＦ Ｆ Ｉ ＦＩ ＨＥＲⅢ Ｓ ＮＯ． ２ Ｊｎ ２ ２ ０ ｕ ． ６． ０ ７ 硫 酸 软 骨素 提 取 工艺 及 药 理 学 作 用 的研 究进展 陈守平 ，许永安２ （． １ 、福建农林大学食品学 院，福建 福州 ３０ ０ ； 、福建省水产研究 所 ，福建 厦 门 ３ １ １ ） ５ ０２ ２ ６０ ２ 摘要 ：硫酸软骨素是从 动物软骨中提取 的粘性多糖 ，在 医药、化妆 品和食 品工业上 有广泛 的用途 ，市 场前景广阔 。本文主要阐述了硫 酸软骨素提取方 法及其药 理学 作用 的研究 进展 ，为该 领域的生产 和研 究工 作 者提供参考 。 关键词 ：硫酸软骨素 ；提取 工艺 ；药理学作用 硫酸 软 骨 素 （ ｈｎｒｉｎｓｌｔ，简 称 Ｃ ） Ｃ ｏｄｏｉ ｕａｅ ｔ ｆ Ｓ 是一种天然酸性粘多糖 ，属生物高分子 化合物 。 Ｃ 有Ａ ｓ 、Ｃ和 Ｄ 的 ３种异构体 ，均是 由 Ｄ 葡萄 一 糖醛酸和 Ｎ 乙酰一 一 一 Ｄ氨基半 乳糖 硫酸酯为单位组 成－ ，只是硫酸基位置不 同。Ｃ 广泛存在 于人 ３ Ｊ Ｓ 和一些动物如猪、牛、羊和鱼等软骨组织中，且 通过共价键与核心蛋 白相结合 ¨ 。Ｃ Ｊ ｓ为 白色、 无臭、略带咸 味 的固体粉末 ，吸水性 强 ，易 ］ 溶 于水 而 成 粘 度 大 的溶 液 Ｊ ，难 溶 于 乙 醇 、丙 合，近年来的研究多利用二者相结合来提取 ，可 制得高质量的 Ｃ ［ 。邹 开 朗等 提出稀碱与酶 ｓ１ 解相结合生产硫酸软骨素。该工艺以菜牛喉骨、 鼻软骨和气管 为原料 ，每 ２ ｇ ｋ 原料可获得 １８— １ １５ 最高可达 １ ｇ ２ｇ（ ３ ）硫 酸软骨素。葡萄糖醛酸 ０ 含量达 ３ ％以上 （４ 以上 即达部 颁标 准 ，可 用 ５ ２％ 于制药 ， ０ ３％以上可出口） 。因此按该工艺制得 的 产品可达优级纯 。与其他提取方法相比较，该工 艺缩短了一半工艺流程 ，同时提高了纯度和得率 ， 减轻了碱法提取所带来 的环境污染。罗曼等 用 稀碱和双 酶解 法生 产硫 酸 软 骨素 ，原料 同上 ，其 酮等有机溶剂 ．，其盐类对热较稳定。Ｃ 具有 ７ Ｉ ｓ 促进 冠状 动脉 循 环 、降血脂 、抗凝 血 、抗 肿瘤 和 心血管硬化等活性Ｌ 。 ８ ，主要是 治疗风湿 和类 。 风湿疾病的药物 ，对冠心病 、动脉粥样硬化、心 肌梗 塞 等心血 管疾 病 的防 治有一定 疗效 。 方法操作也与邹开朗等的基本一致。根据该工艺 生产 ，每 ｌｇ ｋ 原料 可 获硫酸软 骨素 １８— ２ ｇ（ １ １５ 最 高为 １０ ） ３ｇ ，葡萄糖醛酸含 量为 ２．％。还指 出 ７７ 在酶解后 ，按 ５ ％体积 比加人 ５ ％预冷 的三 氯醋 酸 ，静置后 离 心 去 沉 淀 ，并 立 即对 清 液 调 节 ｐ Ｈ 值为 ６８— ． ，然后 再用 乙醇沉 淀实 验 品 ，可提 ． ７２ ｌ 硫 酸 软 骨 素 的提 取 工 艺 硫酸 软 骨素 的提 取 方法 有碱 法 、碱盐 法 、酶 解 、超声波法和乙酸 抽提法等 ；其分离纯 化有 乙醇 沉淀法 、盐液沉淀法 、季铵盐络合法和 离子交 换色 高硫酸软骨素 的产量。高华等Ｌ 应用浓碱 一 １ 复合 酶酶解从牛鼻软 骨中提取硫酸软骨素，该法与上 述稀碱酶解 法 基本 一致 ，只是 在 碱提 取 时 增 大 了 碱 的浓度 。该 法 制得 的产 品为 白色 粉末 ，纯 度达
ｐａｇｅ １
谱法等。目前国内普遍采用稀碱和浓碱的提取法 ， 国 外报道用稀碱稀盐综 合提取法，而这些制备工艺 一 般都要经过酶解和活性碳或白陶土等处理。 到 ９．％，得率为 ３．％。此工艺提高了产品的 ５２ ２６ 纯度和得率 ，降低了生产成本。 １２ 稀碱一 ． 盐提取法 碱盐法是利用碱性条件下 ，连 接硫酸软骨素 和蛋 白质的糖 一 肽键发生断裂 ，使硫酸软骨素 以 游离态释 放，并且通过控制一定的离子强度 ，使 软骨 中 的某 些 蛋 白质 沉 淀 析 出 ，便 于 滤 除 。 １ １ 碱 法 ． 碱法提取硫酸软骨素的原理是基于硫 酸软骨 素与蛋 白 质结合 的 ０一 糖苷键可在强碱作用下发 生 Ｂ 消去反应 ，使 糖 一 一 肽键断裂 ， 硫酸软骨素 从蛋白多糖中释放出来Ｌ 但在强碱作用下硫酸 １ ”， 软骨素易发生降解。碱法 的提取通常与酶解相结 维普资讯 ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｑｖｉｐ．ｃｏｍ 福 一 建 水 产 总第 １３期 １ 定 范 围 内 ，提取 物 中硫酸 软骨 素 的含 量 和得率 质变性吸附到 白陶土上 ，从而使硫酸软骨素与蛋 白质分离 ，提高产品质量 。以猪喉骨为原料 ，在 对其进行预处理后 ，使用超声波手段进行稀碱抽 提 ，浸出液再用超声波二次处理使杂蛋 白解离 ， 经 白陶土和活性炭去杂脱色 ， 酒精沉淀后 ，干燥 即得合格 的硫酸软骨素 ，收率为 ８ ％。与传统 的 稀碱 工艺 提取 相 比 ，超声 波提 取工 艺所 制得 的硫 酸软 骨 素 色 泽 雪 白、颗 粒 疏 松 ，澄 清 度 在 ００ ．５ 是随着碱 液浓 度的增加 而提高 ］ 。朱瑞芬等［ ７ ］ 用 ＮＯ ａ Ｈ碱 化 的 Ｎ Ｃ 溶 液 从 鸡 、鸭 、鹅 及 猪 等 ａ１ 动 物气 管 中提 取硫 酸软 骨 素 。该 工艺 的合 适 的操 作 条件 为碱盐 两 次 浸 提 时间 总 和 ２ ５—３ｈ ０ ，水 解 时间 ２ ４ ｈ Ｏ一 ０ ，乙醇 最终 浓度 为 ６ ％ 一 ０ 。 ０ ７％ 马 叔 涛 等 对 文 献 报 道 的 稀 碱 一浓 盐 法 ［Ｉ 、稀碱稀盐法 ［ ］ Ⅱ］和稀碱法 ［ Ⅲ］进行 了改进 ，并将 此 三 种 工艺 与 １％Ｎ Ｏ ５ ａ Ｈ提 取 工艺 ［ 、２ ％ Ｎ Ｏ Ⅳ］ ０ ａ Ｈ提 取工艺 ［ Ｖ］ 和酶解工艺 ［ Ⅵ］进行了对 比，结果显示，工艺 Ⅱ和 Ⅲ产品 质量较高 ，分子量大 ，但周期长，Ⅳ和Ｖ提取时 间短 、分子 量较 小 ，可通 过控 制好碱 浓度 、提取 以下 ，氮含量达标 ，其余各项指标均符合部颁标 准 。两种 工艺 所得 产 品质 量差 别不 大 。超声 波工 艺法 提 取 、除 杂过程 只需 ３个 多小 时 ，稀碱 酶解 法则 一 般要 ２ Ｏ多个 小 时。前 者 大 大 缩 短 了 生产 周期 ，节约了生产成本 ，不使用酶，而且提取和 除杂过程无需加热 ，操作 起来 比较简便 。超声波 工艺法缺点是产量太低 ，收率仅为 ８ ，这可能 ％ 是 由于 抽提 的时 间不够 造成 的 。 １５ 乙酸抽提 法 ． 时间、温度的关系也可制得质量较高的产品 。 １３ 酶法 ． 酶法是利用蛋 白酶水解蛋 白质的特异性 ， 使 胶原蛋 白和粘蛋 白等 水解 成氨基 酸 ，再依 据氨基 酸与硫 酸软 骨素 在某 些溶 剂 中的溶解 性不 同 ，实 现硫 酸软骨 素 与其它 杂质 的提 取分离