实验性胆石症(小鼠)的动物模型制作
动物模型

②移植性肿瘤的来源及常用动物 诱发性肿瘤、自发肿瘤、各种人和动物肿 瘤组织培养的细胞系。移植到免疫缺陷动物 或裸鼠身上。
常用肿瘤模型:鼻咽癌CNE-1、食管癌Eca-109、胃癌 MGC-803、肠癌CL-187和HCT、肝癌BAL-7402和 BAL-7721、肺癌A-549及ANIP-973、前列腺Pc-3m、 成骨肉瘤OS-732、乳腺癌B-37和MCF-7、卵巢癌 OVCAR-3、宫颈癌Hela等
1、实验动物自发肿瘤模型, ①概念 :自发性肿瘤是动物没有经过人为的控 制和处理而自生的肿瘤 ②种类:
最多的动物是小鼠,国际公认的有250多个 。C3H系、 A 系、C57系。乳腺肿瘤、肺肿瘤、肝肿瘤、白血病等。大鼠品系 有130多种。有Wistar、SD、F344。自发瘤以肉瘤居多。大鼠 容易诱发肝癌。
3、高血压病动物模型 • 动脉收缩压和(或)舒张压升高,并常伴有 心、脑、肾和外周血管功能性或器质性改变 的全身性疾病。 • 常选用犬和大鼠,有时猪、猴、羊等。 • 实验性高血压通常以刺激中枢神经系统反 射性而成,或注射加压物质以及分次手术结 扎肾动脉,诱发肾原性高血压。
• SHR是良好的模型。 ①遗传因素占主要地位; ②在高血压早期无明显器质性改变; ③血压升高随年龄增加而加剧; ④紧张刺激和大量食盐等环境因素加重高 血压的发展; ⑤血压上升早期或高血压前期有高血流动 力学的特征; ⑥发生继发性心血管损害,出现心脑肾合 并症。 GH、SHRSP、STR等
常见模式生物:植物遗传研究的代表——拟南芥
点燃基因工程的先行者——大肠杆菌 食品与酒香催生了现代分子生物学——酵母
奠定现代发育生物学里程碑的海洋中刺客——海胆 现代生物医学中的新贵族——斑马鱼 丑陋的爪蟾变成发育生物学的王子——非洲爪蟾
中药热奄包在胆结石患者中的应用研究

03
增加科研投入
鼓励科研机构和企业加大对中药 热奄包治疗胆结石的研究力度, 开展更多高水平的临床试验。
04
未来发展趋势预测
1 2
广泛应用前景
随着中药热奄包治疗胆结石的研究不断深入和标 准化程度的提高,其将在临床得到更广泛的应用 。
个性化治疗趋势
根据患者具体情况制定个性化的中药热奄包治疗 方案,提高治疗的针对性和有效性。
THANKS
总体疗效和安全性评价结果
总体疗效
中药热奄包在改善胆结石患者临床症状、降低结石形成风险、促进结石排出等方面表现出良好疗效。
安全性评价
中药热奄包治疗胆结石安全性较高,不良反应发生率低,且症状轻微,无需特殊处理。
不同病程、年龄组患者疗效比较
不同病程患者疗效比较
病程较短的胆结石患者对中药热奄包的疗效 更为敏感,而病程较长的患者疗效相对较差 。
现有治疗方法
目前胆结石的治疗方法主要包括手术治疗和非手术治疗。手术治疗风险较高, 且术后恢复时间较长;非手术治疗如药物治疗、体外碎石等,虽然风险较低, 但疗效并不十分理想。
中药热奄包治疗原理及优势
治疗原理
中药热奄包是一种传统的中医治疗方 法,通过将中药加热后敷于患处,利 用中药的渗透作用和热效应,达到消 炎、利胆、排石的目的。
机制。
拓展应用范围
根据临床反馈和持续研究,不断优化和完善 中药热奄包治疗方案,提高治疗效果和患者
舒适度。
完善治疗方案
探索中药热奄包在其他胆道疾病如胆囊炎、 胆管炎等的应用效果,拓展其临床应用范围 。
加强国际交流与合作
与国际同行开展合作研究,共同推动中药热 奄包在胆结石治疗领域的国际化进程。
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金钱对座合剂治疗胆石症的实验研究

中国中医药科技 20 年 9月第 1 0r 7 4卷第 5 Sp 20 .V 11 o5 期 e .0r o. N . 7 4
・3 9 ・ 3
金 钱 对 座 剂 治 疗 胆 症 的 实 验 研 究 * 合 石
姜 志坑 瞿 琼 周 文 豪 曹建 标 毛 洪 刚 周 大兴 阮叶 萍 葛 蕾 朱晓燕
胆汁成分测定试 剂 : 由宁波市 慈城生化试剂厂生产 。 均 13 主要仪 器 . 学显微镜 。
2 方法
¥2 C分光 光度计 ( 2P 比色 皿 d .c : =0 5 m)上
海棱 光技术有 限公 司。10 / 00d移液器 ;0t 量进样针 ; 10d微 光
21 造模及给 药 .
取ห้องสมุดไป่ตู้豚 鼠 , 以基 础 饲 料 喂 养 2周 , 后 随 先 然
分 离血 清 , 分离胆囊 , 注射 器吸出全部 胆汁 , 避光待检 。
22 观 察 指 标 及 测 定 .
发病率很高 , 达普通人群 的 1 一1%_ , % 0 】 且有逐年上升 的趋 J 势。 目前 治疗仍 以手术为主 , 但术后残 石率及复发率 高。再
22 1 结石情况 ..
率 。
( 浙江省杭 州市萧山区第六人 民医院・ 州 3 16 浙江 中医药大学 ・ 州 305 ) 杭 12 1 杭 103
摘 要 目的 : 讨金 钱 对 座合 剂 治 疗胆 石 症 的作 用 机 理 。 方 法 : 致 石饲 料 诱 发 豚 鼠胆 结 石 , 模 型 对 探 以 设
照及金 钱对座合剂防 治组 。于第 7 O天后 处死动 物 , 手术取 出胆 囊观 察成石情 况。收集血 液及胆 汁, 测 检 结石情 况 , 进行胆 汁分泌量、 汁生化测定及 血清 生化测 定。结 果: 钱对座舍剂临床 成石率 明显低 于模 胆 金 型组, 汁分泌量 明显多于模型 组( 胆 P<O0 )胆 汁 中总胆红素含量 明显高于模 型组 ( .1 , P<00 )总胆汁酸 .1 ,
实验动物模拟试题及答案

实验动物模拟试题及答案一、多选题(共30题,每题1分,共30分)1、动物实验用药的影响因素 ______。
A、给药途径B、动物与人的剂量换算C、制剂D、剂量正确答案:ABCD2、______属于哺乳纲。
A、牛B、马C、猪D、羊正确答案:ABCD3、下列属于近交品系小鼠主要有______。
A、BALB/cB、DBAC、C57BL/6JD、C3H正确答案:ABCD4、对实验动物进行微生物学、寄生虫学质量控制是因为:A、携带人畜共患病病原体,直接威胁人类和动物的健康B、干扰实验结果导致实验中止、重复性差,造成人力、物力和时间的极大浪费C、烈性传染病可导致整个动物群毁灭D、整个动物群带毒,带毒群体难以净化. 会反复爆发疾病正确答案:ABCD5、实验动物的哪些指标会发生昼夜节律性变化 ______。
A、体温B、光照C、血糖D、基础代谢率正确答案:ABCD6、杂交群动物主要特性:A、具有杂交优势,生命力强,适应性和抗病力强,繁殖旺盛B、很大的程度上可以克服因近交繁殖所引起的近交衰退现象C、具有与近交系动物基本相似的遗传均质性D、以上说法都不正确正确答案:ABC7、国家实验动物控制标准有哪些A、哺乳类实验动物的遗传质量控制B、实验动物寄生虫学等级及监测C、实验动物配合伺料、环境及设施控制D、实验动物微生物学等级及监测正确答案:ABCD8、树鼩属于____动物。
A、炅长目B、啮齿目C、爬行纲D、哺乳纲正确答案:AD9、根据兔球虫病的临床症状,可将球虫病分为两大类型______A、消化道球虫病B、肺球虫病C、肠球虫病D、肝球虫病正确答案:CD10、实验动物病毒可分成______类型。
A、动物的主要传染病病原体B、人畜共患病原体C、污染生物制剂的病原体D、烈性传染病病原体正确答案:ABCD11、从事动物实验人员应 ______。
A、了解有关实验动物和动物实验的管理法规和制度B、熟练掌握动物实验基本操作技能 \C、熟练掌握动物繁育技术D、取得科技主管部门统一颁发的上岗资格证书正确答案:ABD12、有关小鼠的描述正确的是 ______。
实验动物上岗证-动物实验类练习题库及答案

实验动物上岗证-动物实验类练习题库及答案一、单选题(共40题,每题1分,共40分)1、以下哪种不是封闭群动物具有较强的繁殖力和生活力的表现 ( )A、每胎产仔多B、对疾病抵抗力達C、生长快D、食欲强正确答案:D2、感染淋巴细胞性脉络丛脑膜炎康复后的小鼠,成为无症状的带毒者,并通过子宫和乳汁传给后代,其后代可成为________。
( )A、终生带毒者B、老年期带毒者C、少年期带毒D、短期带毒者正确答案:A3、清洁级大、小鼠配合饲料中维持饲料常规营养成分为______。
( )A、水份≤10 蛋白质≤18 粗脂肪≤4 粗纤维≤5 粗灰分≤8B、水份≤11 蛋白质≤20 粗脂肪≤4.5 粗纤维≤3 粗灰分≤9C、水份≤11 蛋白质≤17 粗脂肪≤3 粗纤维≤10-15 粗灰分≤9D、水份≤11 蛋白质≤14 粗脂肪≤3 粗纤维≤10-15 粗灰分≤9正确答案:A4、小型猪属于________。
( )A、哺乳纲B、爬行纲C、食肉目D、灵长目正确答案:A5、确诊病毒的存在可以通过检查________、接种动物和鸡胚以及细胞、应用荧光抗体技术或免疫电镜技术、血清学等方法来确定病毒的存在。
( )A、组织B、器官C、包涵体D、细胞6、检疫的目的是确定有无________存在,避免新引进动物造成本设施内已经饲养的健康动物群感染疾病。
( )A、病毒B、体外寄生虫C、潜在性疾病D、血液寄生虫正确答案:C7、__________的出现,使器官移植成为可能,并使人们发现了与移植相关的组织性抗原,从而为人类的器官移植奠定基础。
( )A、转基因动物B、免疫缺陷动物C、近交系动物D、无菌动物和悉生动物正确答案:C8、下面哪种药剂是吸人式麻醉用到的 ( )A、1%盐酸普鲁卡因B、氣仿C、硫喷妥钠D、戊巴比妥納正确答案:B9、寄生虫感染动物机体后,常常会使血液中的________数量增多,干扰血液学指标的观察,进而影响实验研究。
金钱草替以广金钱草或聚花过路黄的利胆排石片对小鼠胆结石防治的药效影响

金钱草替以广金钱草或聚花过路黄的利胆排石片对小鼠胆结石防治的药效影响李飞艳;罗晓云;刘群群;余家乐;赵月珍【期刊名称】《内蒙古中医药》【年(卷),期】2022(41)9【摘要】目的:评价利胆排石片中金钱草替以广金钱草或聚花过路黄后对结石模型小鼠结石防治的药效。
方法:利用致石饲料连续喂饲8周,制备结石模型小鼠;依照《中国药典》制备利胆排石片(简称LDPS),及广金钱草替代金钱草的利胆排石片(简称LDPS-G)、聚花过路黄替代金钱草的利胆排石片(简称LDPS-J),3个药物组动物造模的同时灌胃上述3种药物,所有动物摘眼球采血,酶标法检测血清中的总胆固醇、钙的浓度,剖取肝胆,观察其形态、胆囊中胆结石的形成。
结果:与空白组比较,模型组、LDPS-G组、LDPS-J组动物胆囊体积明显增大,模型组成石率100%,LDPS组成石率20%,LDPS-G组成石率40%,LDPS-J组成石率60%,除LDPS-J组外均可见大型结晶;与空白组比较,模型组小鼠血清中钙离子浓度显著降低(P<0.05)、总胆固醇浓度增加非常显著(P<0.01),3个药物组小鼠血清中钙离子、总胆固醇浓度无明显差异;与模型组比较,其他3个药物组血清中的钙离子浓度均显著升高(P<0.05),LDPS、LDPS-J组血清中总胆固醇浓度降低非常显著(P<0.01),LDPS-G组降低显著(P<0.05);与LDPS组比较,其他两个药物组的钙离子、总胆固醇浓度无明显差异(P>0.05)。
结论:LDPS、LDPS-G、LDPS-J对胆结石的形成均有一定抑制作用,LDPS可能通过促进胆汁排出、降低血胆固醇浓度起到防治结石作用,但其抑制结晶的聚集生长作用不明显;LDPS-G抑制结晶的聚集作用不明显;LDPS-J虽然对胆结石形成率较低,但能抑制细小结晶的进一步聚集,防止大型结石形成。
【总页数】4页(P46-49)【作者】李飞艳;罗晓云;刘群群;余家乐;赵月珍【作者单位】湖南中医药高等专科学校药学院;湖南中医药高等专科学校【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.金钱草与聚花过路黄的鉴别2.金钱草与聚花过路黄的微性状比较研究3.利胆排石片与金钱草片中金钱草替以广金钱草或聚花过路黄后对大鼠尿液、胆汁排出量的影响研究4.金钱草与其混淆品聚花过路黄鉴别因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
茶多酚干预豚鼠胆色素结石形成的药理药效研究

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茶多酚干预豚鼠胆色素结石形成的药理药效研究
(、 1 南阳理工学院生化 学院 , 河南 , 南阳 43 0 2 南 阳理工学院校医院, 70 4 、 河南, 南阳 4 30 ) 7 0 4
摘 要: 观察茶 多酚对豚 鼠胆 色素结石的干预作用 , 并从分子层面探讨茶 多酚对豚 鼠胆 色素结石 的影响机制。方法: 用致石饲料建立豚鼠的胆 色素结石模型 , 用药组用 05 1 . %,%的茶多酚作 为唯一饮用水进行饲喂 , 比较各组豚鼠的死亡率及成石 率, 并检测血脂 、DL 及 UG Al L L R T1 mlNA的 表达, 结果表明, 多酚的饲喂 能够 降低 由致石饲料诱导的豚 鼠的死亡率及成石率 , 茶 改善血脂指标, 并能够明显地提 高 L L 及 uG 1 1 躲N DR T A m A的 表达, 提示茶 多酚能够有效地干预 由致石饲料诱 导的豚鼠胆石症 的发生。 关键词 : 色素结石 ; 多酚; 胆 茶 血脂 ;DL L RmR NA; T1 mPNA UG Al . S 一小块肝脏 , 迅速投入液氮中, 后保存 近正常, 与模型组相比有显著性差异 (<O 0 ) P . 1, O 胆色素结石是我 国常见的消化道疾病 , 其发 素结石; t 用药组 T G略 生机制还不是很清楚,目前也没有满意的治疗药 在 一 0 8 ℃冰箱中 ,用于 m N R A表达的测定 。13 且具有剂量依赖性。与模型组相比, . 2 低剂量组和高剂量组 的 P 值分别小于 物。 茶多酚是从绿茶中提取的活性成分 , 大量报道 血脂的测定。按试剂盒提示的方法测定 T 、C 有降低 ( GT 、 D 、 L .4半定量 R — C 。用 Ti l 2 TPR r o提取 0 5 0 1;高剂量组 H L C略有升高 ( < z . 和 .) 0 0 D— P 证明其具有降血脂、 抗菌消炎、 抗氧化 、 抗肿瘤等 L LHD 。1 . N Ol L . )币 氐 0 作用 , 并能够提高 L L D R的表达活性目 。又有报道 总 R A,在 2 逆转录体系中以 MM V反转录 0 5 , 剂量组无显著性差异。 证实茶多酚具有提高尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移 酶逆转录合成第—链 c N 。以第—链 c N DA D A为 表 2 各组动物的血脂水平比较陋s ) 酶(— G ) b u T 的活性的药理作用日而这些作用与改 模版 , , 进行 P R扩增 L L , G 1 1 内参照 为 C D RU T A , 善胆色素结石的各项病理指标密切相关。本研究 B a i 引物 设 计 如 下 : L — cn t。 L R上 游 引 物 为 D 用上海 中医药大学附属龙华医院的徐长生, 朱培 5 A I G A G T A A C 一 ’ 下 游 为 ' T Tr G G A G G AG AG 3, - TGT GAGAA一 ; 3’ UGTI AI 庭教授研制低蛋白饮食方法建立了豚鼠的胆色素 5’ AGGGCGGGGAGG 一C 结石模型 并用 0 %和 1 , L 5 %的茶多酚作为唯一饮 上游引物 为 5 A T G C A GC A A G ' c G G A c T AG A G一 - 用水进行饲喂, 通过观察对照组、 模型组 、 用药组 3, 下 游 为 5 A T G C A GC AA A G ’ ' C G G A C T G A G一 - 的生理状况 、 死亡率、 成石率及血脂 、D R R A 3。 B—a L Lm N ’ 和 U T A1的指标 , G1 探讨 E C G G对胆色素结石模 ci t n上游 引物 为 5- A T G A G G 'C C GA G G 与模 型 组 比 较 ,P<0 0 , <0 1 P * . 1 AP . 。 < 0 0 # 型豚鼠的药理学作用及作用机理。 G CG A C C A C ‘ C G T T 一3.下游引物 为 5- A ' A T -5 】 A A C TT A A G 一3, G C GCC A C C A T ’ 预期扩增片 0( 1实验材料和方法 2 D R 及 U T A1mR A的表达 。如 表 .L L 3 G1 N 11 -实验材料。1 .实验动物。 生白色红 目 断 的长 度为 L L R 3 b ,G 1 2 2p2 0 .1 1 雌I D 9 1 p U T A16 b ,4 DR G1 豚鼠, 月龄 , 2 体重 20 :1g清洁级, 6 只 , b 。 8 gt0 , : 共 0 由 p 分别扩增出 I R U T A1 p— cn然后以 3所示 ,模 型组动物肝组织 L L 及 U T A1 DL , G 1 , af , i N P 上海中医药大学实验中心提供,实验动物合格证 B—c n at 为内参照调节加样量使其达到亮度 ( i 丰 mR A的表达明显低于正常组和高剂量组 ( < 号 :C K 2 0 — 0 1。1 2饲料。 S X (0 2 0 1 ) . 1 造模用致石性 度 )一致,再按 B—ei at n的加样量加 L L D R和 0 5 , . )而高剂量组 L L 0 D R及 U T A R A的表 G 1 1m N 饲料, 在正常饲料基础上添加致石药物。 具体配方 U T A1的P R产物 ,%琼脂糖凝胶电泳检测扩 达均 有 明显 的提 高 ( <o 5 ;低剂 量组 中 , G1 C 1 P _) 0 D R R A的表达与模型组相 比有明显的升高 为: 正常饲料 4 . g 5 3, 4 致石性药物 4 7g其中酪蛋 增产物 , 5 ( 经凝胶分析软件对电泳条带进行灰度分 L L m N 白1 昏蔗糖 1 g 猪油 1 5、 昏微 晶纤 维素 1、 g 胆酸 析 ,分别计算出各个条带的吸光度与内参照的比 (<0 5 ,而 U T Al R P  ̄) G I m NA的表达与模型组相 00g胆固醇 0 5 )上述配方中所需药品均购 自 值, . 、 2 . g, 0 即为 mR A的相对含量。 N 比 无统计学差异 , 提示 0 % 和 1 5 %的茶多酚对上 D R及 U T A1m N G 1 R A的表达有一定的剂 上海维思生物制品有限公司,茶多酚由上海碧能 l _ 计学方 法 。各 组间 表达水 平 采用 调 L L 3统 量依赖陛。 生物制品 有限公司提供 , 纯度为 9 %, 8 其中水溶性 S S 1.进行单因素方差分析。 PS0 0 2实验结果 表 3豚 鼠肝 组 织 L L 及 U T A1mR A 的表 DR G1 N EC G G的含量不低于 6%。1 _ 0 .3试剂 。T T 、 1 G、C L L H L试剂盒购 自浙江东瓯生物试剂有 限公 D 、D 2 1各组动物的生理状况、 死亡率及成石率 。 达 ) 司;R Z L R aet nioe 公司;a T IO egn, vrgn I t T q聚合酶, 各组动物的死亡率和成石率见表 1正常组皮毛有 。 反应灵敏 , 活动敏捷 , 死亡率和成石率分别 Gbo公司;T-P R试剂盒 , L ic R- C MM V逆转录酶 , 光泽 , Po ea r g 公司 ; m 引物由上海生工生物工程公司合 为 1. 和 1. 模型组豚 鼠明显消瘦 , 3% 3 4 %; 3 皮毛欠 成。. 1 4仪器。 C 基因扩增仪,i e a 1 PR B m t 公司; o r 生 光泽 , 容易脱落 , 活动迟缓 , 反应迟钝 , 死亡率和成 物 电泳 图象分 析 系统 ,上 海复 日科技 公 司 ; 石率分别为 4 . 和 7. 表明模型建立成功; 6% 7 2 %, 7 E S30 P 一 0 A电泳仪 ,天熊科技 ( 上海)有限公司; 治疗组皮毛稍欠光泽,其余情况与模型组大体相 与模 型 组比较 , P . <0 5 0 3% 3 M — 垂直板电泳槽,大连高新 园区捷迈科 贸 Vl 有 似,低剂量组死亡率和成石率分别为 3 . 和 3讨 1 限公司;高速冷冻离心机,p ed r E l no 公司; 2  ̄ f 7 紫 4 . 高剂量组死亡率和成石率分别为 2. 和 5 1 %, 7 6% 7 茶是我国的传统饮料 , 饮茶具有很多的保健 外光栅分光光度计, 上海第三分析仪器厂。 4. 2 %。经解剖 , 9 致石饲料喂养的豚 鼠主要死于肠 功能。 据上海的流行病学调查显示 , 饮茶与胆结石 l _ 2实验方法。1 豚刚 旦 21 色素结石模型的 胀气。 或胆囊癌症等胆道疾病的发生负相关臣 c本研究首 建立。将 6 只豚鼠分为空白对照组 、 0 胆色素结石 表 1各组 动物 的死亡 率和成石 率 次提出茶多酚及其主要活性成分 E C G G能够显著 模型组 、 低剂量组、 高剂量组 , 每组 l 只。豚鼠购 5 地降低 由 致石饲料喂养的豚鼠的生理状态、死亡 回置于 2 o左右的动物房中 O c 笼养,正常驯养一周 率及胆色素结石的发生率。茶多酚改善胆色素结 以适应环境。正常组豚 鼠 按国家标准啮齿类动物 石模型豚鼠的生理状态可能与其抗菌消炎 、清除 干燥饲料喂养, 饮食; 自由 模型组��
《实验动物学》习题及答案

《实验动物学》习题及答案一、单选题(共30题,每题1分,共30分)1、犬属于( )动物。
A、哺乳纲B、啮齿目C、偶蹄目D、爬行纲正确答案:A2、根据我国国家技术监督局发布的实验动物环境设施监测标准,小鼠、大鼠繁育、生产设施(生产型)环境指标(静态)工作照度和动物照度是( )。
A、150~300 lx,15~20 lxB、150~300 lx,100~200 lxC、100~300 lx,150~200 lxD、100~200 lx,15~20 lx正确答案:A3、选用金黄地鼠观察微循环的优点是。
A、颊囊是双侧对称,可在同一动物身上进行自身对照B、颊嗝的伸缩性很大,一般较大的刺激对微循环影响不大C、以上都是D、颊囊壁组织藻而颜色淡,透光性好,微血管清晰正确答案:C4、中国地鼠有( )对乳腺。
A、3B、5C、4D、6正确答案:C5、世界最大的实验大、小鼠商品化生产、销售公司是( )。
A、美国查士利华实验室B、实验动物研究所C、杰克逊实验室D、北京维能利华实验动物技术有限公司正确答案:A6、B 病毒对实验人员和饲养人员有严重威胁,它会引起人的( ),造成不可挽回的损失。
( )A、致死性肾感染B、致死性心感染C、致死性脑感染D、致死性脾感染正确答案:C7、( )和生殖、泌乳有关,缺乏后可引起动物不育症。
鲜草和其他青绿饲料、干草以及种子的胚芽中含量丰富。
A、维生素 DB、维生素 AC、维生素 ED、维生素 B 族正确答案:C8、实验动物从业从员上岗需持有什么证书。
A、以上 3 个证书均需要B、实验动物生产许可证C、实验动物使用许可证D、实验动物从业人员岗位证书正确答案:D9、雌性 KM 小鼠的每胎产仔数为( )只。
A、20B、6C、4D、8-15正确答案:D10、大鼠的正常体温为( )度。
A、35.5B、38.5C、37.5D、36.5正确答案:C11、牛是多胃动物,它有( )个胃。
A、4B、5C、3D、2正确答案:A12、小鼠的哺乳期为( )天。
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实验性胆石症(小鼠)的动物模型制作
胆石症(cholelithiasis)中有胆固醇胆石症和胆红素胆石症。
后者的发病率较前者高。
但近些年,胆固醇胆石症发病率有所上升。
究其原因一般认为:①动物性脂肪,特别是胆固醇的摄取量增多。
②能量摄取过剩。
因此本节仅对胆固醇性胆石症模型的研究进行叙述。
一、模型制作
在动物中诱发胆固醇性胆石症的方法有:
1.胆固醇负荷法
多用小鼠、犬、猴等。
2.高糖、无(低)脂肪食物法
使动物肝脏的胆固醇合成能力亢进,一般用仓鼠来做这一实验。
这里介绍的是小鼠的胆固醇性胆石症的制作方法。
小鼠的胆石症模型制作是由Trepperman 1964年偶然发现的,他用致动脉粥样硬化日粮(atherogenic diet)饲喂小鼠。
该日粮组成是:酪蛋白15.3%,葡萄糖51.0%,猪油30.60%,胆固醇1.0%,胆酸0.5%,盐类1.6%。
实验开始后2个月后即可见胆石症症状。
8个月后,75%的实验小鼠出现胆石症,其中胆固醇性胆石症占94%。
即使只在普通的实验饲料中加1.0%的胆固醇,0.5%的胆酸,也可在4个月左右的时间中获得胆石症小鼠。
日本的大原氏报道,在市售的粉末状饲料中添加0.5%的胆固醇和0.25%的胆酸,饲喂ICK系小鼠,连续饲育5周,亦可诱发轻度的胆固醇性胆石症,且发病率很高。
延长饲育时间,会进一步提高胆石症的发病率,病变的程度也日趋严重。
取代胆酸,把脱氢胆酸添加于食物中,或仅添加胆酸而不添加胆固醇,也可诱发小鼠的胆石症,只是所需要的实验时间较长。
二、临床症状及病理变化
实验开始后5周,受试小鼠的胆囊内由微细的结晶样物质形成的结石还很小。
但10周以后,大部分结晶样物质可形成结石,且大小结石混杂在一起。
胆汁的稳定性或胆固醇的析出度受胆汁中胆固醇的绝对浓度和相对浓度(与总脂质相比)的影响。
用能形成胆石的饲料来饲喂小鼠,胆汁的分泌量和胆汁总脂质浓度显著增高。
特别是肝脏中的胆固醇浓度和相对于总脂质的比率明显升高。
经5周,这两个指标分别达到(2.55±0.2)μmol/mL、(5.5±0.8)mol/L%,是正常小鼠(0.51±0.05)μmol/mL,(1.4±0.2)mol/L的4~5倍,而且会持续性地保持这种水平。
Admirand和SmaⅡ以胆固醇、卵磷脂和胆汁酸三组分的相对浓度绘制三角图形和胆固醇的最大容存曲线。
不同的研究者所绘制的这种曲线的位置有较大的差异。
胆汁脂质组成如果是位于曲线内侧的话,则意味着胆固醇有溶存能力。
正常小鼠的胆汁脂质组成都处于曲线的内侧,而用胆石形成饲料饲喂的小鼠,在5周后曲线变化急剧地向高胆固醇、高卵磷脂、低胆汁酸方向移动。
经10~15周卵磷脂开始下降,胆汁酸上升。
23周后胆固醇明显上升,横断曲线,胆固醇处于一种饱和状态。
表示胆固醇溶存能力的Isausson系数(胆汁酸+卵磷脂/胆固醇),正常小鼠的为60~70,而患胆石症的小鼠在20周前后这个系数值开始下降。
正常小鼠的胆汁酸组成:胆汁酸约50%,鹅脱氧胆酸约为10%,脱氧胆碱约5%,α和β胆汁酸加起来约为20%,其他未检定的胆汁酸约为15%,胆石症小鼠胆汁酸的比率增加到80%,脱氧胆酸也有相应程度的增加,结果使其他胆酸相对减少。
用能形成胆石的饲料饲喂的小鼠,肝重量显著增加。
经过5周的时间,肝脏重量约增长1倍,肉眼观察呈脂肪肝样变性。
血浆中胆固醇上升(P<0.05),5周后达到最高值。
许多小鼠的血浆GPI升高,显示肝脏已发生了损伤。
肝脂质分析,脂型胆固醇是正常值的10倍。
病理组织学观察,胆囊呈急性炎性变化,肝脂肪变性和坏死,甲状腺发育不全,肾上腺的可染性脂肪增多。
三、用途
作为胆固醇性胆百症的病态模型,在胆汁脂质组成比例和胆汁酸的构成比方面,灵长类动物与人类相似,尤其栗鼠猴是最好的胆石症的病态模型动物。
但小鼠和仓鼠更容易获得,便于实验操作,胆结石形成的速度也快,更有利于实验研究。
仓鼠的胆汁组成与人的相近,但需要饲喂高糖低脂饲料,实验期间容易发生急性细菌性痢疾,所以在管理上需要严密注意。
而通常情况下,小鼠的健康状态比较好,可以通过在食物中添加不同量的胆固醇、胆汁酸和根据不同的饲育时间获得症状程度不同的胆石症动物模型。
最近,把鹅脱氧胆酸作为胆石溶解剂使用而倍受注目。
通过胆石症小鼠模型证明它有明显的抑制胆石形成的作用。
这一点充分说明小鼠胆石症模型的用途。
四、相关的动物模型
仓鼠:用高糖低(无)脂肪含量的饲料饲喂仓鼠,胆固醇负荷实验不能诱发胆石症,这一特点与其他动物明显不同。
饲料的基本组成是:葡萄糖74.3%,酪蛋白20%,盐类5.0%,维生素类0.5%,氯化胆碱0.2%。
这一组方多用于仓鼠胆石症模型制作和病态表现的研究。
豚鼠:所用饲料中的各种成分为,蛋白质15%,脂肪3.6%,糖类42%,消胆安脂1%。
据报道用这一组分的饲料饲喂豚鼠可获得胆石症模型。
动物胆汁中胆固醇含量高达50%,但再现性不稳定。
兔:用含40%酪蛋白、20%半精制脂肪酸或三油酸酯的饲料饲喂兔,也可造成胆石症模型。
胆汁中胆固醇含量高达12%~25%。
犬:用含酪蛋白(10%)、蔗糖(50%)、淀粉(26%)、猪油(5%)、胆固醇(1%)的饲料饲喂受试犬连续10个月以上,或用卵黄饲喂Prairie犬(其胆汁脂质组成、胆汁酸组成与人的相近)2~6个月,也可形成胆石。
猴:Osuga和Portman在饲料中添加25.5%奶油、0.5%胆固醇,饲喂栗鼠猴,经9个月左右的时间可诱发胆石症,且发病率很高。