酯化度测定

实验原理
高甲氧基果胶中超过一半的羧基以甲酯化（—COOCH 2）的形式存在，剩余的羧基以游离酸（—COOH ）及盐（—COO -Na +）的形式存在。

首先将盐形式的—COO -Na +转换成游离羟基，用碱液溶液滴定计算出果胶中游离羧基的含量，即为果胶的原始滴定度，然后加入过量浓碱将果胶进行皂化，将果胶分子中—COOCH 3 转换成—COOH ，再加入等摩尔的酸中和所加的浓碱，再用碱液滴定新转换生成的—COOH ，可测得甲酯化的羧基的量，由游离羧基及甲酯化羧基的量可计算果胶的酯化度。

实验步骤
精确称取1-5g 果胶粉末（基于检测项目的多少和样品的纯度）置于100mL 烧杯中，记录重量为W1g ；
加入100mL60%酸化乙醇，用磁力搅拌器搅拌10min ；用恒重后的砂芯漏斗过滤，再用用60%酸化乙醇清洗6次，每次15mL ；用60%乙醇清洗，始终保持果胶湿润，直到最终滤出液加入1mL 硝酸银溶液不再变混浊；用20mL95%乙醇清洗，保持真空抽滤，使果胶尽量干燥。

将清洗后的果胶在105℃干燥箱中干燥1-2.5h ，冷却、称重，记录干燥后果胶净重为W2g ，用药匙或玻璃棒将成块的果胶固体弄碎；分别精确称取约0.5g 果胶转入两个锥形瓶，记录果胶粉重量为W3g ；用约2mL95%乙醇润湿果胶，加入100mL 蒸馏水，酰胺化果胶或低甲氧基果胶需边搅拌边缓慢准确加入0.1MNaOH 7.00mL ，加塞，用磁力搅拌器搅拌，直到果胶完全溶解。

操作步骤
把前期准备好的果胶溶液中加入5滴1%的酚酞指示剂；用0.1MNaOH 溶液滴定至溶液为淡粉红色，记录NaOH 溶液消耗量为V1mL ，酰胺化果胶或低甲氧基果胶包括5.1.3.8中加入的7.00mL NaOH ；一边搅拌，一边用清洁的移液管加入20.0mL0.5MNaOH ，加塞，充分混合，室温下用磁力搅拌器搅拌15min ；一边搅拌，一边用另一支清洁的移液管加入20.0mL0.5MHCL ，加塞，充分混合；滴定前向溶液中加入3滴酚酞指示剂，用0.1MNaOH 滴定，，记录NaOH 溶液消耗量为未修正的皂化滴定值Vs mL ；
空白检验，所有0.5M 试剂，每次重新配制或每隔一周，取100mL 蒸馏水，做空白滴定值V C ，从Vs 中减去VC ，得到修正的皂化滴定值V2；
结果计算
酯化度（DE ）=
T 2V V 100⨯酰胺化度（DA ）=T 3V V 100⨯
半乳糖醛酸含量原样（GA ）=
312T W W 10W V 19.41⨯⨯⨯⨯
半乳糖醛酸含量EEC （GA ）=
3T W 10V 19.41⨯⨯
果胶含量=1
2W W 1⨯00
注：VT=V1+V2+V3 （非酰胺化果胶V3=0）。