屏障系统实验动物饲养与管理
第五章(2) 常用实验动物的饲养管理
度40%-70%;换气次数:10-20次/h;气流速度
≤0.18m/s;氨浓度≤14mg/m³ ;噪音≤60dB
2、笼具：采用无毒塑料笼具
3、垫料：选用具有良好的吸湿性、尘埃少、无
异味、无毒性、无油脂的材料。垫料必须经高温
高压灭菌处理。
4、饮水：如饮用城市生活饮水，必须经高温高
压灭菌处理或直饮水。
豚
鼠
饲养环境
1、环境 豚鼠性情温顺，喜群居，听觉灵敏、 胆小、易受惊吓，对外界突然的响声、 震动或环境的变化十分敏感，因此环境 应保持安静，饲养环境的噪声在60dB以 下，同时注意尽量减少操作的声响。 温度控制在普通环境:18-29 ℃,屏 障环境:20-26℃且温度恒定。温度的急 剧骤变，常可危及幼鼠生命，使母鼠流 产或不能分泌乳汁。
3、大鼠的一般饲养管理
大鼠的一般饲养管理应注意几点：
１、饲喂大鼠要定时定量，每日喂给新鲜水，一般 每周换垫料2-3次。 ２、大鼠扩大繁殖生产，一般采用一雄多雌间隔同 居法，当雌鼠腹部明显增大确认怀孕后，进行单 养准备分娩，并投入新的雌鼠。
IVC饲养系统的操作与管理
（一）、概述
IVC
：individual ventilated cages， 独立换气笼盒
5、饲料： ①、小鼠应饲喂全价营养颗粒饲料。饲料的营养 成分应符合营养需求标准，并保持相对稳定。 ②、随着生长发育和生产繁殖的阶段不同而制定 不同的饲料配方，保障各阶段的营养需求。 ③、饲料在饲喂前要消毒灭菌，一般采用高温高 压或60Co照射
6、一般饲养管理方法：
①、软件管理：要制定一套完整的规章制度及操作
每次换水要连同水瓶和瓶嘴一起换下；并认真清洗
水瓶和瓶嘴，然后消毒，严禁未经消毒的水瓶和瓶 嘴继续使用
实验动物设施的分类和特点
实验动物设施的分类和特点
1．普通环境普通环境设施是一种开放环境设施，饲育环境基本符合动物的生长、繁育要求，但不能完全控制传染病、寄生虫等其他干扰因子。
目前啮齿类实验动物已经取消普通环境下饲养，大动物饲育在普通环境设施下较多。
2．屏障环境屏障设施主要用于清洁级、SPF级动物的饲育和动物实验。
有正压屏障构造、负压屏障构造(生物安全屏障系统)，也有用层流架(正压／负压)或隔离器做SPF级屏障系统。
是指在污染区和清洁区之间设有严格的屏障，即饲育环境是密闭的，通过屏蔽装置与外界相通，送入饲养室内的空气要经过初效、中效、高效三级过滤，洁净度要求达到7级，除生物安全屏障系统为负压以外，通常应保持为正压，且不低于10Pa；排风口设有防空气倒流装置。
送入的一切物品都要进行严格的消毒灭菌后，经特制的传递装置送入，进入屏障内的工作人员也要进行严格的微生物控制。
3．隔离环境隔离环境主要用来饲育无特定病原体、悉生以及无菌实验动物。
隔离环境设施内的空气、饲料、水、垫料等一切物品均为无菌，动物和物品经过特殊传递，既保证了与外界隔离状态，又能保持内环境正常运转。
动物实验室管理难点与应对
动物实验室管理难点与应对[摘要]所谓屏障系统是指，由严格控制下的病原体以及微生物隔断所组成的系统。
为创造出良好的屏障环境，确保动物实验研究结果的不断深化，相关部门都加大了对屏障系统动物实验室管理模式的研究力度。
而本文也将重点就实验室管理难点与应对方式两部分内容展开论述，旨在提高实验室整体管理水平，保证各项实验研究工作开展质量。
[关键词]管理难点;屏障系统;实验室管理;动物实验动物实验领域的不断发展与改革，使动物实验的重要性变得更加突出，有关工作单位也都加大了对实验环境设施的建设力度，实验室屏障系统空气清洁度均已超过1万级。
为创造出更加理想的实验环境，各部门都加大了对屏障系统管理工作的关注力度，并着手对动物实验室管理工作展开了优化。
但在实际管理过程中，还是遇到了一些阻碍，有待进行解决。
1屏障系统动物实验室管理难点1.1实验服务与依赖性方面。
为保证科研工作最终开展质量，多数实验室都会为实验开展提供相应服务，此种方式不仅能够为研究工作开展提供便利，同时也可以提高屏障系统安全系数，防止因为频繁进出以及消毒不彻底等因素，对系统性能造成影响。
但部分使用者会因此对服务产生较强依赖，可能会出现将动物实验室作为设备处以及性方面。
通过分析发现，实验室使用人员有着较为明显的时间不确定性以及流动性，主要是因为实验人员不仅要进行理论方面学习，同时还需要完成相应工作，因此导致其实验时间并不确定，可能需要在下班或者晚上开展实验，致使系统人员无法及时对其进行指导与监督，同时也使屏障系统管理受到一定程度的影响。
1.3屏障系统认知与需求脱节。
由于自身特殊性，屏障系统动物实验对操作应为有着极为严格的要求，但部分使用者对于屏障系统的认知仍然存在缺陷，出现了系统认知与需求脱节的状况，很容易会导致使用者出现操作不规范以及其他方面的问题，会直接增加屏障系统管理难度与压力。
2实验室管理难点应对策略2.1完善管理制度与操作标准。
实验室要在对国家相应法律法规进行研究的基础上，通过借鉴国内外实验室管理经验的方式，对现行实验室人员管理制度以及操作标准进行改进与完善，从而切实提升仪器设备以及人员管理等方面制度水平，保证日常卫生消毒以及实验室动物购买等操作，会更加规范、标准。
我校屏障系统动物实验设施的综合管理
【 键 词 】 屏 障 系 统 ； 物实 验 ； 施 管理 关 动 设 ｆ 中图 分类 号 】Ｒ ３ ３２ 【 献 标 识码 】Ａ 文 【 章编 号 】１７ —８６ ２ １ ） １ ０００ 文 ６ １ ５ （０ ０ Ｏ － ７ －３ ７ ０
Ｔｈｅ Ｍ ａ ｇ ｍ ｅ ｔ ｏ ｉ ａ ｐ ｒ ｍ ｅ ｔ ｌＢａ ｒ ｅ ｎｅ ｅ ｎ ｆＡｎ ｍ ｌＥｘ ｅ ｉ ｎ ａ ｒ ｉ ｒ
ｏ ｅ ａｉｎ ａ ｎ ｇ ｍｅ ｔｉ ｂ ｒｔｒ Ａｎ ｍａ ｎｅ ， Ｓ ｎ Ｙａ —ｅ Ｕｎｉｅｓｔ ｉ ｃｕ ｎ ｏ ｌｔ ｎ ｇ ｍｅ ｔｓ ｓｅ ｐ ｒ ｔｏ ｎｄ ｍａ ａ ｅ ｎ ｎ Ｌａ ｏ ａｏｙ ｉ ｌＣｅ ｔｒ ｕ ｔｓ ｎ ｖｒｉ ｙ， ｎ ｌｄｉｇ ｃ ｍｐ ｅｅ ｍａ ａ ｅ ｎ ｙ ｔｍ ｅ ｔｂｉｈ， ｔａ ｓａ ｌ ｓ ｅ ｍ ｂ ｌ ｎ ａ ｄ ｕｉ ｄｉｇ ｎ ｍａ ａ ｅ ｎ ，ｌｂ ｒ ｔｒ ｂ ｒｉ ｒ ａ ｉｉ ｅ ｍａ ｎｅ ａ ｃ ｎ ｇ ｍｅ ｔ ａ ｏ ａｏ ｙ ａ ｒｅ ｆｃｌｔ ｓ ｉ ｉ ｔｎ ｎ ｅ， ｅ ｐ ｒｍｅ ｔｌ ｔｍ ｓ ｘ ｅ ｉ ｎａ ｉ ｅ ｍａ ａ ｅ ｎ ｉ ｎ ｇ ｍｅ ｔ ｎ ｂ ￣ｉｒｆｃｌｔｅ ． ａ ｅ ａ ｉｉ ｓ ｉ
（ ｘ ｅｉ ｎａ Ａｎｍａ Ｃ ｎｅ ｆ ｕ ｔｓｎ Ｕ ｉｅｓｔ， ｕ ｎ ｚ ｏ １０ ０， ｈｎ ） Ｅ ｐ ｒｍｅ ｔｌ ｉ ｌ ｅ ｔｒｏ ｎＹａ—ｅ ｎｖｒｉ Ｇ ａ ｇ ｈ ｕ５ ０ ８ Ｃ ｉａ Ｓ ｙ
【 ｓ ａｔ Ｗｉ ｈ ｅｅ ｐ ｅｔｏ ｍ ｄ ａ ｅｐｒ ｅｔ ｎｍ ｌ ｓｉ ｃ ｎ ｈ ｍ ｌ ｅｔ ｉ ｆ ａｏａ ｒ Ａｂｔ ｃ】 ｒ ｔ ｔｅｄｖｌ ｍ ｎ ｆ ｅｉ ｌ ｘｅｉ ｎａ ａｉａ ｃ ｎｅａｄｔｅｉｐｅ ｎ ｔ ｎｏ ｂｒｔｙ ｈ ｏ ｃ ｍ ｌ ｓ ｅ ｍ ａｏ ｌ ｏ
实验动物环境设施与国家标准
（2）物品的移动路向： 物品→高压蒸汽消毒炉（包装好的
消毒物品可经过传递窗，笼具经泡有消 毒液的渡槽）→ 清洁准备室→清洁物品 储存室→饲养室或动物实验室→污物经 包装处理→污物走廊→外部区域。
实验动物环境设施与国家标准
（3）实验动物的移动路向： 外来实验动物→传递窗→检疫室
安全贮存，垫料高温）方可应用，笼具水瓶集中洗刷消毒。
实隔绝。表现为无窗或密封门窗，有缓冲间。 • 空气经过滤后进入，设施内不同的区域之间存在着一定
的空气压力差，室内保持正压 。 • 出风口要有过滤装置或U型液体控制阀，出口风速不低于
每秒4米，以防止空气逆流形成污染。 • 物品经高压灭菌、化学灭菌和紫外线照射后进入，即灭
菌）；垫料布袋装均经高压消毒；鼠盒用牛皮纸包装， 工作服、帽、手套、口罩等经高压灭菌。 • 饲料装两层袋，装后密封连同卡片、剪刀等，经CO60 照射灭菌。
实验动物环境设施与国家标准
2. 人、物、动物流程 • 人员流程：准备室→更衣→淋浴→更无菌衣→风淋→
清洁走廊→动物室→缓冲间→屏障外。 • 物品流程： 洗刷包装室→灭菌室→洁净贮存室→洁
• 饲料双层塑料袋Co60照射消毒，传入隔离器前先 在清水中浸泡，检漏，然后撕去第一层塑料袋， 放入传递舱内。
• 鼠盒、工作服、鞋、帽、用具均经高压灭菌。 2．入室要求 • 更换拖鞋、工作服、帽。工作前用药皂洗手。
实验动物环境设施与国家标准
第三节 我国实验动物与动物实验设施标准
一、设施建筑要求
（一）选址
实验动物环境设施与国家标准
（二）建筑卫生要求 动物繁育、生产、实验场所有围护结构材料 均应无毒、无放射性。内墙表面应光滑平整， 阴阳角均为圆弧形，易于清洗、消毒。墙面 应采用不易脱落、耐腐蚀、无反光、耐冲击 的材料。地面应防滑、耐磨、无渗漏。天花 板应耐水、耐腐蚀。
实验动物环境设施控制之环境设施管理(PPT 56页)
三、隔离环境
• 隔离器：隔离器：整个由高强度软透明塑料薄膜 制成，或是前部操作面由高强度透明塑料薄膜制 成，长方形，一侧装有橡皮手套，饲养人员通过 手套进行操作，不直接接触动物。
• 鼓风机：将洁净空气通向隔离器，维持隔离器内 的换气次数，气流速度及正压。
• 灭菌渡舱：装在隔离器的一侧，呈桶状，两端具 有塑料薄膜套盖，一端在隔离器内，有内盖，一 端在外界，有外盖，两盖不能同时打开，专为传 入传出物品及动物用。
- 40~70
1、美国保暖、冷却和空调工程师学会；2、实验动物资源研究所；3、欧洲实验 动物学会；4、经济合作和发展组织；5、医学研究委员会
空气相对湿度（Relative air humidity）
高湿： 80%-85%，动物将停止生长； 高湿容易引起代谢紊乱； 利于微生物滋生； 氨易溶于水，湿度高，室内氨浓度增加。
（二）建筑卫生要求
动物繁育、生产、实验场所有围护结构材料 均应无毒、无放射性。内墙表面应光滑平整， 阴阳角均为圆弧形，易于清洗、消毒。墙面 应采用不易脱落、耐腐蚀、无反光、耐冲击 的材料。地面应防滑、耐磨、无渗漏。天花 板应耐水、耐腐蚀。
（三）建筑设施要求
建筑物门、窗应有良好的密封性，走廊宽度 不应小于1.5m，门宽度不应小于1m。动物繁 育、生产及实验室通风空调系统保持正压操 作，应合理组织气流布置送排风口的位置， 避免死角，避免断流。各类环境控制设备应 定期维修保养。
二、设施区域设置要求 （一）区域布局 1．前区的设置 包括办公室、维修室、库房、饲料
室、一般走廊。 2．饲育区的设置 • 繁育、生产区 包括隔离检疫室、缓冲间、育种室、
扩大群饲育室、生产群饲育室、待发室、清洁物 品贮藏室、清洁走廊、污物走廊。 • 动物实验区 包括缓冲间、实验饲育间、清洁物品 贮藏室、清洁走廊、污物走廊。 • 辅助区 包括仓库、洗刷间、废弃物品存放处理间 （设备）、密闭式实验动物尸体冷藏存放间（设 备）、机械设备室、沐浴间、工作人员休息室。
实验动物学 第四章 实验动物设施环境和质量控制
隔离 普通 环境 环境
屏障 隔离 环境 环境
普通 环境
屏障 环境
隔离 环境
屏障 环境
20～26
15a
20
10
50c
18～29
20～26
16～28 4 40～70
8b
15a
20
8b
0.20
—
10
50c
—
20～26
16～28
15a
20
—
10
50c
50
7
5或7d
—
3
无检 出
—
15～20
7
5或7d
—
3
无检 出
2.单走廊式：
普通环境、屏障环境、隔离环 境都可以这样布局，小型的屏障系 统一般采用这种方式。由于清洁走 廊和污物走廊共用一条通道，该类 设施在运营中也较难达到微生物和 寄生虫控制标准。
3.双走廊式：
可以有效的将清洁区和污染区分 开，避免交叉感染，长期实验及动物 生产单位可以采用这种方式。
4.三走廊式：
2、理化因素：光照、噪声、粉尘、 有害气体（氨等）。
3、营养因素：饲料和水。 4、生物和栖居因素：菌落数、
社会因素和饲养密度。
一、气候因素： （一）温度对实验动物的影响
（1）影响生长发育和繁殖； （2）影响代谢； （3）影响健康与抗感染能力； （4）激发应激反应； （5）影响实验结果。
表4-表4-1 不同环境温度时戊巴比妥钠给药（95mg/kg， 腹腔注射）导致雌性Wistar大鼠死亡率比较
普通环境的构造和功能因饲养不同 的动物品种而有一定的区别。
普通环境动物室
（二）屏障环境
屏障环境设施符合动物居住的 要求，严格控制人员、物品和空气 的进出，适用于饲育清洁级和/或 无特定病原体（specific pathogen free，SPF）级实验动物。
SPF屏障系统
SPF级动物屏障系统导读：【摘要】总结SPF级动物屏障系统的运营管理经验，包括屏障系统设施的维护，饲料质量的保证，大小鼠的饲养操作执行情况，实验动物质量的保证等几个方面。
【关键词】…【摘要】总结SPF级动物屏障系统的运营管理经验，包括屏障系统设施的维护，饲料质量的保证，大小鼠的饲养操作执行情况，实验动物质量的保证等几个方面。
1屏障系统设施的运行和维护1.1空调系统：这是屏障系统的核心，也是保持设施正常运转的重要因素。
为保证该系统能正常工作，我们专门设置了一名电工技术人员专职负责此工作，严格按照空调系统控制程序与操作规程进行操作。
每天检查整个机组的运行情况并记录，发现问题及时报告，以保证屏障内的温度、湿度及压差的控制平衡。
每天保持机房的清洁卫生，以减少新风口空气的尘埃粒子。
同时，我们还与厂方的技术人员签定了维护保养协议，由他们定时为我们的主机维护保养，以便发现问题及时解决，避免对主机造成巨大损害，延长主机寿命，保证该系统的正常运行。
1.2净化系统：该系统涉及到屏障内的空气洁净度。
按规定每周对初效过滤棉进行清洗，每3个月对中效过滤棉进行清洗，高效过滤器按实际使用情况进行更换（一般为一年左右）。
同时，每天清洁空调机房内的卫生，尽量减少灰尘进入新风口。
1.3 监控系统：我们有一套比较好的监控系统。
我们在屏障系统内的每个房间装有半球型自动调焦摄像头，便于进行全方位观察，并配有对讲机，可以做到适时监控与交流。
为便于对实验过程和动物行为进行观察，我们配备了一台硬盘录象存储器，可以连续的，大量储存影象资料。
1.4消毒灭菌：高压灭菌器的工作人员，必须取得压力容器作业人员操作证，做到持证上岗。
严格按照高压灭菌器操作规程进行操作，做到消毒灭菌每锅均有记录，严格认真把关，防止因灭菌不够将病原微生物带入屏障内造成污染。
2实验动物的饲料实验动物的生长、发育、繁殖以及体质均依赖于饲料。
饲料的原料组成和营养成分应力求稳定。
但对于SPF级动物来说，饲料必须要灭菌，我们使用的是高压灭菌，这使得其中的营养成分不可避免地受到高温的破坏。
第二章实验动物的饲养与培育
实验动物的饲养与培育
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
第一节
实验动物的分类
实验动物是指经人工培育、对其携带的微生 物实行控制、遗传学背景明确或来源清楚， 用于科学研究、教学、生物制品或药品鉴定 以及其他科学实验的动物。(狭义) 实验用动物泛指所有用于科学实验的动物。 （广义 ）
实验动物的微生物学控制分类
普通级动物 (Conventional animal，CV)： 不携带所规定的人兽共患病病原和动物 烈性传染病病原动物。 清洁级动物 (Clean animal，CL)：除普 通动物应排除的病原外，不携带对动物 危害大和对科学研究干扰大的病原。
封闭群（远交群） （closed colony or outbred stock） 以非近亲交配方式进行繁殖生产的一 个实验动物种群，在不从其外部引入新个 体的条件下，至少连续繁殖4代以上。
杂交群 由不同品系或种群之间杂交产生的后代称 为杂交群。用于实验研究的杂交群是指两个近 交系之间交配所繁殖的子一代动物，简称F1动 物。
3. 支系（ subline）：近交系或亚系经人为技术处置 后称为支系，如卵子移植、胚胎冷冻、种群转移。通过 实验手段获得的遗传工程小鼠也称之为支系。
重组近交系(recombinant inbred strain) 和重组同类系(recombinant congenic strain)
（1）重组近交系(RI)：由两个近交系杂 交后， F2 代重新编组，并连续 20 代以上兄 妹交配育成的近交系。 （ 2 ）重组同类系（ RC）：由两个近交 系杂交后，子代与两个亲代近交系中的一个 近交系进行数次回交 ( 通常回交 2 次 ) ，再经 过对特殊基因选择的近亲交配而育成的近交 系。
悉生动物（ Gnotobiotic animals， GN）也称已知菌动物或已知菌丛动 物，是指在无菌动物体内植入已知 微生物的动物。必须饲养于隔离系 统。
屏障环境ABCE区动物实验室操作流程及考试内容（20160406）
屏障环境ABCE区动物实验室操作流程及考试内容（20160406）屏障环境ABCE区动物实验室操作流程及考试内容⼊该区域的必须知晓，不需要进⼊该区的可以不看。
字体标红的为重点。
⼀、分区: (1)⼆、门禁 (2)三、灭菌 (3)四、穿戴与通⾏ (3)五、饲养间内 (5)六、标签： (6)七、补给 (7)⼋、压差与风机 (7)九、废物及⼩⿏⼫体处理 (8)⼗、动物转运 (8)⼀、分区:1.屏障环境AB区是保种繁殖区（⽤于遗传修饰⼩⿏保种和繁殖），屏障环境C区为实验区（⽤于⼤⼩⿏实验操作和观察），屏障环境E区为实验和检疫区（⽤于ABSL-2⼤⼩⿏实验和外购种源动物检疫），普通环境G区为实验和检疫区（⽤于普通级⼤动物饲养、实验和⼿术操作）。
普通环境F区正在改造暂不提供使⽤。
2.实验动物中⼼实⾏不同洁净度控制的分区管理，洁净度等级为A⼩区、A⼤区和B区 >C⼤区和C⼩区> E区> G区。
实验动物中⼼要求同⼀个⼈同⼀天需要进不同洁净度区域时，应先进⼊洁净度⾼的区域，再进⼊洁净度低的区域，不得逆反或随意顺序进⼊到两个不同洁净度等级区域。
同⼀洁净度A、B区中，应该先到保种繁殖区（A⼩区或B 区保种房间）再到实验扩⼤区（A⼤区或B区房间）。
门卫登记处必须填写每个区域的房间号。
3.AB区不允许任何实验操作，所有实验操作均在屏障环境C区或E区进⾏。
4.C区实验室⼜分为C⼤区和C⼩区，其中C⼩区包括转基因平台实验区、备⽤实验区，C⼤区包括外科操作实验区、基础代谢实验区、免疫缺陷动物实验区及其他单个实验房间。
5.区为动物⽣物安全⼆级实验室（ABSL-2），动物实验⽅案必须经过该区⽼师统⼀审核管理，递交实验动物中⼼质量安全负责⼈审批，同意后⽅可安排实验。
⼆、门禁1.实验动物中⼼所有出⼊通道及饲养间都设有门禁，培训通过后发给门禁卡，每卡押⾦10元，退卡时返还押⾦。
考试没通过⽆法取得门禁卡权限的不收取押⾦。
2.获取门禁卡流程：①参加每⽉⼀次的理论培训，培训前会提供相关资料。