浅谈人羊膜间充质干细胞的临床前研究进展
间充质干细胞及其迁移的研究进展

临床医学研究与实践2021年2月第6卷第6期综述DOI :10.19347/ki.2096-1413.202106064基金项目:国家自然科学基金委员会资助项目(No.81903949);浙江省基础公益研究计划项目(No.LQ19H290004)。
作者简介:戚亚钦(1999-),女,汉族,浙江绍兴人。
研究方向:临床医学。
*通讯作者:方燕,E -mail :fangyan@.间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs )是具有自我更新能力并表现出多向分化潜能的成体非造血干细胞,广泛存在于骨髓、脂肪、外周血、脐带、胎儿组织、肌肉等中。
MSCs 具有来源丰富、获取方便、增殖率高等特点,已成为组织工程和临床研究的理想种子细胞[1]。
近年来,随着国内外对MSCS 的研究越来越深入,以MSCs 为基础的细胞移植替代治疗显现出良好的效果,MSCs 在临床试验中的安全性和有效性也已得到了更好的证明[2]。
1MSCs 的临床应用1.1MSCs 在神经系统疾病中的临床研究与应用目前,许多神经系统疾病如缺血、缺氧性脑病、恶性脑胶质瘤、神经系统退行性病变等仍无有效治疗方法,预后较差。
脑缺血后神经元的坏死将导致永久性神经功能缺陷,现有治疗手段尚不能逆转神经元和神经胶质细胞变性引起的神经功能障碍[3]。
MSCs 通过旁分泌作用,增加神经生长因子和脑源性神经营养因子的释放,促进神经障碍中丢失或损坏的神经元的恢复,减少神经元细胞的凋亡[4]。
MSCs 还可通过增加血管生成因子的分泌,促进病灶区新生血管生成;通过抑制血管内皮的凋亡和氧化应激,减少血管炎性损伤,增加脑血管的完整性[5]。
Xu 等[6]通过建立缺血缺氧性脑病的大鼠模型,证实MSCs 的脑内移植可减小脑梗塞体积,有效改善神经损伤,进而改善大鼠运动功能,为临床进一步研究提供实验依据。
但研究发现,缺血区局部不利的微环境使得能够迁移并存活在损伤区的MSCs 数量很少,严重限制了MSCs 的应用前景[7]。
间充质干细胞治疗阿尔茨海默症的研究进展

间充质干细胞治疗阿尔茨海默症的研究进展云南省基础研究计划-青年项目(2019FD106)*通讯作者:曹宁 Email:******************摘要:阿尔茨海默症是一种神经退行性疾病,目前还没有找到有效的治疗方法。
间充质干细胞作为一种有着广泛应用前景的细胞治疗技术,近年来引起了研究人员的关注。
间充质干细胞是一种具有自我更新和多向分化潜能的细胞,它们还能分泌多种细胞因子,这些因子有助于促进神经再生和修复。
本文就间充质干细胞治疗阿尔茨海默症的研究进展做一综述,以期为未来的临床应用提供更深入的了解和指导。
关键词:间充质干细胞;阿尔茨海默症;治疗;研究进展阿尔茨海默症(Alzheimer's disease,AD) 是一种进行性神经退行性疾病,以进行性记忆力减退和获得性知识丧失、直至完全丧失日常生活活动能力为特征,正迅速成为老年人残疾和死亡的主要原因之一。
2022年国际阿尔茨海默病协会(Alzheimer's Disease International, ADI)发布报告[1],截至2019年,全球约有2019年患痴呆的人数估计为5500万人,预计2050年将增至1.39亿。
ADI评估,全球75%的AD患者未被确诊,在一些中低收入国家,这一比例高达90%。
世界卫生组织估计,2019年全球痴呆症的社会成本为1.3万亿美元[2]。
1.阿尔茨海默症的治疗现状AD的两大病理特征是Aβ沉积形成老年斑(Senile plaque, SP)和Tau蛋白缠结形成神经原纤维缠结(Neurofibrillary tangles, NFTs),另外还有神经退行性疾病的共有特征,即大量神经元的凋亡[3]。
目前,治疗阿尔茨海默病(AD)的主要药物包括乙酰胆碱酯酶抑制剂,如多奈哌齐、利瓦斯汀和加兰他敏,以及NMDA受体的部分拮抗剂美金刚。
这些药物的作用是通过不同的机制来改善AD患者的症状和延缓疾病的进展。
临床研究用人间充质干细胞质量评价

临床研究用人间充质干细胞质量评价一、引言人间充质干细胞(MSCs)由于其多向分化潜能、免疫调节特性以及易于体外培养等特点,被广泛用于临床研究。
在众多疾病的治疗中,MSCs 都展现出了巨大的潜力。
然而,要确保其在临床研究中的有效性,首先需要对MSCs的质量进行严格控制和评价。
本文将探讨如何评价临床研究用MSCs的质量。
二、MSCs的质量评价标准1、细胞的纯度和活性:这是MSCs质量评价的核心指标。
纯度是指MSCs中目标细胞的比例,而活性则是指MSCs的增殖能力和分化能力。
2、细胞的遗传稳定性:通过基因测序等方法,可以检测MSCs是否存在基因突变,以及是否存在潜在的致癌风险。
3、细胞的免疫调节特性:MSCs具有免疫调节特性,可以通过抑制免疫反应来降低排斥反应的风险。
因此,评价MSCs的免疫调节特性也是非常重要的。
4、细胞的来源和生产过程:MSCs的来源和生产过程也会对其质量产生影响。
例如,来自患者的自身MSCs可能比来自捐献者的MSCs更适合用于治疗。
同时,生产过程中的质量控制,如无菌操作、细胞培养基的质量等,也会影响MSCs的质量。
三、MSCs质量评价的方法1、细胞形态观察:通过观察MSCs的形态,可以初步判断其是否具有正常的形态学特征。
2、生长曲线测定:通过绘制MSCs的生长曲线,可以评估其增殖能力。
3、细胞表面标志物检测:通过检测细胞表面标志物,可以确定MSCs 的纯度和活性。
4、染色体核型分析:通过染色体核型分析,可以评估MSCs的遗传稳定性。
5、免疫调节特性检测:通过检测MSCs对免疫反应的调节作用,可以评估其免疫调节特性。
6、生产过程质量控制:通过监控生产过程中的关键控制点,可以确保MSCs的生产过程符合质量标准。
四、结论人间充质干细胞(MSCs)在临床研究中的应用前景广阔,但其质量评价是关键环节。
通过对MSCs的纯度、活性、遗传稳定性、免疫调节特性以及生产过程的质量控制等多方面的评价,可以确保其满足临床研究的需求。
人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)的分离、体外培养及诱导分化

万方数据
万方数据
人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)的分离、体外培养及诱导分化
作者:丛姗, 宋瑾, 张惠娟, 李岩, 白立恒, 曹贵方, CONG Shan, SONG Jin, ZHANG Hui-Juan, LI Yan, BAI Li-Heng, CAO Gui-Fang
作者单位:丛姗,宋瑾,张惠娟,李岩,曹贵方,CONG Shan,SONG Jin,ZHANG Hui-Juan,LI Yan,CAO Gui-Fang(内蒙古农业大学兽医学院/动物组织胚胎学与发育生物学实验室,呼和浩特,010018), 白立恒,BAI Li-Heng(内蒙古
妇幼保健医院妇产科,呼和浩特,010020)
刊名:
农业生物技术学报
英文刊名:Journal of Agricultural Biotechnology
年,卷(期):2015,23(1)
引用本文格式:丛姗.宋瑾.张惠娟.李岩.白立恒.曹贵方.CONG Shan.SONG Jin.ZHANG Hui-Juan.LI Yan.BAI Li-Heng.CAO Gui-Fang 人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)的分离、体外培养及诱导分化[期刊论文]-农业生物技术学报 2015(1)。
人羊膜组织及羊膜干细胞的研究进展

胱、 脐膨 出和预防 腹部 、 颈部 和盆 腔手 术后 的粘 连 , 面 骨及 软 骨 的缺损 , 胎膜 早破 、 膜 突出部 位 的修 复 等 , 脊 均取 得 良好 的效 果 。 目前 , 通过 生物 工程 技术对 羊 膜 进行 生物 学 改 良 , 使得 羊膜 的应 用有 了更 为广 阔 的前 景 。T d o a等 将 羊 膜制 备 成 “ 干 羊 膜 ” 与 冻存 新 超 , 鲜羊 膜相 比 , 处理更 方 便 , 疗效 果更 好 。 治
生 物材 料 , 的 主要 成 分 是 Ⅲ、 V型 胶原 蛋 白 、 它 Ⅳ、 蛋 白多糖 、 蛋 白及 整合 素 、 层体 , 提供 一定 的力 学 糖 板 可
支持 并具 有一 定 的物理 强度 , 是一 种极 为 特殊 的细 胞
外基 质 。
19 9 7年 , e T e g等分 别 将 羊膜 用 于 临 床重 L e及 sn
子 ( G ) 色 素 上 皮 衍 生 因 子 ( E F 等 , 些 活 性 K F、 PD ) 这 因子 可促 进种植 细胞 的增 生 、 附 、 化 、 育 等多 种 黏 分 发
重要 的生 物学 功 能 。这 也 可 能正 是 羊 膜 移 植 后 能 够
只 眼恢 复 到 良好 水 平 , 3只 眼 视 力 恢 复 较 差 。 Ta si 等 将 严重 眼表 疾病 患 者 健 眼 的 自体 角 膜 缘 干 细胞
用 含羊 膜 的胎膜 供体 移植 于烧 伤 和溃疡 创 面的报 道 ,
直 至今 日已相继 有 学 者 采用 羊 膜 修 复 人 工 阴道 及 膀
织 纤 维束构 成 , 具有 一定 弹性 。
人 羊膜 细 胞 外 基 质 ( u n a i i et cl l h ma mno c x ael a t r ur ma i, A— C 是 指将 羊膜 经 过组 织 工 程 技 术 处 tx H r E M) 理后 , 去除其 细胞 和可 溶 性 蛋 白成 分 , 只保 留原 有 组 织 中的不 可溶 性成 分 , 主要是 保 留了基 膜 与致 密层 的
人羊膜间充质干细胞在微载体动态培养体系中的扩增和成骨诱导分化

Z O a, Z O a, Y hoyn , T N We— n H U Qi n H UY h EZ a-ag A ns g o
(tt Ke a oaoyo oe co n ie r g E s ia iesyo ce c n eh oo y S a yL b rtr f ratr gBi E n Ch Un t S
e g n e i g Ho v r t eru i t sr sr ie y l e pa so aea dp o se g n cdfe e tai n u d r n ie rn . we e , h i tl y i e tan d b i ow x n i nr t o ro to e i ifr n ito n e n sa i ut r o d t s n te pr s n t d ,h M S e e s e e d c l r d i 一 el l e ssai t c c l e c n ii .I h e e tsu y A t u on Csw r e d d a ut e n 1 w lsp a sa t tc n u 2 t
接种至三维支架材料 中,经体外培养和成骨分化诱导后填充至病损处 以促进组织修复及再生。
体外扩增 间充质 干细胞大多在平皿中进行培养,该培养 方式不仅 劳动强度 大,易造成 污染 ,而且单 个平皿 的培养 面积 有限 ,使扩增后收获的细胞数量有限;更为重要 的是 ,由于对 间充质干 细胞体外培养 环境知之甚少 ,且平皿培养体系中培养环境难以调控,导致在体外培养过程 中干细 胞容易丧 失增殖和多 向分化能力【 】 以满 足组织构建过程 中对种子细胞质和量的需求,因此许多研究者尝试采用微 载体和 2 ,难 生物 反应器系统进行 种子细胞的扩增[ 1 4。 , 5 在体外采 用间充质干细胞进行工程化骨组织构建过程中,特 别是 在静态 培养和 诱导系统中,由于缺
临床研究用人间充质干细胞质量检验规范-讨论版
临床研究用人间充质干细胞质量评价规范(讨论稿)前言人间充质干细胞(human MSCs, hMSCs)是一类具有一定的自我复制更新和多向分化潜能的成体干细胞,广泛存在于胎儿和成人各组织中,如骨髓、脂肪、皮肤、牙髓、肌腱,以及新生儿附属组织,如脐带、胎盘、羊膜等等组织。
除一定程度的分化潜能外,hMSCs还具有独特的免疫调控和组织再生功能,参与调控异常免疫反应、维护免疫平衡,帮助机体形成有利于病损组织细胞修复或再生的微环境,以促进损伤组织细胞的修复或再生。
hMSCs独特的生物学功能决定了其应具有广泛的临床适应症,并使其成为近十年来细胞治疗领域中发展最为广泛、最为迅速的干细胞类型。
过去10年来所积累的大量临床前及临床研究数据显示,不同组织来源的hMSCs均具有不同程度,针对不同临床适应症的治疗效果。
目前在登记的各种自体或异体组织来源的hMSCs临床适应症类型或疾病亚型已有上百种,其中常见的临床适应症类型包括骨关节疾病、心血管疾病、器官功能衰竭、神经退行性疾病、移植物抗宿主病、多发性硬化、脊髓损伤、炎性结肠炎、脊髓侧索硬化、系统性红斑狼疮,等等。
然而,无论是临床前或临床研究阶段,现有的研究结果仍都存在不同程度的问题,而所有问题又都不同程度地汇聚到hMSCs的质量问题上。
其中临床前研究所表现的问题是,不同研发者所使用的hMSCs来源、培养体系、制备工艺、质量标准、评价技术等存在很大差异,也存在质量评价内容和技术的合理性等问题,因此导致不同研究者间的研究结果很难具有可比性,或结果难以重复,因此也很难形成相对统一的质量标准。
而临床研究中所存在的问题是,绝大多数临床研究还处在早期阶段,所观察的病例数还很有限,临床研究中细胞质量的标准化和细胞使用的规范性仍存在巨大差异,所有这些尚不足以完全支持hMSCs的安全性和/或疗效。
除此以外,因hMSCs临床前研究还远不够完善,对其临床研究的指导作用还不强,或者临床前研究与临床研究存在严重脱节现象,临床研究阶段细胞质量的稳定性研究欠缺,细胞质量评价和受试者评估体系尚未建立,等等。
人羊膜间充质干细胞的研究进展
原代 h A M S C s 呈 梭形 、 星形 或 多角 形 , 进 行传 代 培养 后 , 细胞表 现 为成纤 维 细胞样 克 隆 , 呈 细长 的梭
形, 排 列 紧密 , 多呈放 射状 或漩 涡状 贴壁 生 长 。电镜
观察 发现 , h A MS C s 平均 大小许 多和肠 道 上 皮 细胞 不 一 样 的微 绒 毛 , 胞 浆
内含 有 丰富 的中 间丝 , 脂 质小滴 和 空泡 也 比较常见 ,
含 有 中等量 的高尔基 复合 体 、 粗面 内质 网 、 线 粒体 和 致 密体 , 胞 浆周 围有 自噬 空泡 和胞饮 小泡 , 细 胞或 突
细胞 表 面标记 物 S S E A - 4 、 O C T - 4 , 而 O C T - 4被认 为是 多 能干 细 胞 自我 更 新 和 多 项 分 化 潜 能 的基 因 。 进行 定 向诱 导并 检测是 文献 报道 常用 的鉴 定 干细胞 的方 法 …, 一般 对 细胞 进 行 成 骨 成 脂 诱 导 , 经 成 骨
将 其作为替代细胞移植治疗各种疾病 , 并 且 取 得 了较 好 的 临 床 效 果 。本 文 就 h A MS C s的分 离 培 养 、 生物学 特性 、 分化潜 能 、 致 瘤 性及临床前研究等进展进行综述 。
[ 关键词 ] 人羊膜间充质干细胞 ; 生物学特性 ; 临床 前 研 究 ; 干 细 胞
口腔 生 物 医学 2 0 1 3年 6月 ( 第 4卷 第 2期 ) O r a l B i o m e d i c i n e , V o 1 . 4 , N o . 2 , J u n . 2 0 1 3
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95 ・
不同人羊膜间充质干细胞冻存液冻存细胞效果比较
Preli m inary study on cryop reservation of human amniotic mesenchymal stem cells
YAN G D ongbin, SON G L a ijun, YAN G B o, L I X iangsheng D epa rtm en t of N eu rosu rgery, the F irst A ffilia ted Hospita l, Z hengzhou U n iversity, Z hengzhou 450052
郑州大学学报 (医学版 ) 2009年 5月 第 44卷 第 3期
化等 。 综上所述 ,胰岛素预处理能够上调神经元 GAP2
43、BDNF蛋白的表达 ,并通过抑制细胞凋亡 ,改善 OGD /R对神经细胞的损伤 。随着进一步的深入研 究 ,胰岛素有望成为治疗缺血性脑卒中经济有效的 药物 。
参考文献
[ 1 ] Zhu CZ, Auer RN. Op timal blood glucose levels while u2 sing insulin to m inim ize the size of infarction in focal cere2 bral ischem ia [ J ]. J Neurosury, 2004, 101 (4) : 664
[ 4 ] Van Den Berghe G, Schoonheydt K, Becx P, et al. Insulin therapy p rotects the central and peripheral nervous system of intensive care patients[ J ]. Neurology, 2005, 64 (8) : 1 348
间充质干细胞外泌体的研究进展
间充质干细胞外泌体的研究进展发布时间:2021-06-17T16:32:21.307Z 来源:《世界复合医学》2021年4期作者:孙亮[导读] 近年来,研究发现,来源于MSCs的外泌体(MSCs-Exo)具有与MSCs相似的组织损伤修复和再生功能孙亮天津市康婷生物工程集团有限公司 300380摘要:近年来,研究发现,来源于MSCs的外泌体(MSCs-Exo)具有与MSCs相似的组织损伤修复和再生功能。
外泌体(exosome)是多种细胞分泌的膜外小囊泡,直径30~200nm,可以转运核酸、脂质和蛋白质,参与细胞间的信息交流。
与MSCs相比,外泌体用于临床疾病的治疗更加稳定,体内同种异体给药后免疫排斥反应的可能性较低,并可为各种疾病提供替代疗法。
MSCs-Exo逐渐成为新的研究热点,本文将对MSCs-Exo的生物学特性、免疫调节作用和在临床疾病治疗中的研究进行综述。
关键词:间充质干细胞;外泌体;研究中图分类号:R197 文献标识码:A1 引言ADSCs是一种来自脂肪组织的成体间充质干细胞,是继骨髓间充质干细胞之后,又一个细胞治疗和再生医学领域中种子细胞的重要来源,具有资源丰富、取材方便、无免疫原性等优点。
ADSCs产生的外泌体(ADSCs-derived exosomes,ADSCs-Exos)广泛参与细胞间通信和细胞信号传输,能够改变多种生物过程,如增殖、迁移和凋亡,并显示出广阔的应用前景。
并且ADSCs-Exos无论是在常氧环境还是低氧环境中,在体外都已被成功分离,现已成为国内外学术界研究的热点。
本文将主要综述ADSCs-Exos的分离提取、特征、功能及主要研究进展。
2 外泌体的概念2.1 外泌体的起源、结构外泌体来源于晚期胞内体,是胞外囊泡的一种类型。
作为囊泡运输的载体,外泌体的形成主要经历3个过程:首先形成早期内涵体(early endosome),随后以内生芽的方式形成囊泡小体(multivesicular bodies,MVBs),最后部分MVBs与细胞膜融合释放到胞外,形成大小均一的囊泡,即外泌体。
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浅谈人羊膜间充质干细胞的临床前研究进展羊膜位于胎盘的最内层,主要由来源于外胚层的上皮细胞和来源于中胚层的间充质细胞构成。
其不含血管,细胞成分相对简单,在胎儿娩出后即成为废弃物。
人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells, hAMSCs)有着来源丰富、无需有创操作、取材几乎不受限制、分离培养方法简便、有向3个胚层来源的组织细胞分化的潜能、免疫原性低等多种优点,可能成为一种更加理想的间充质干细胞(mcscnchymal stem cells, MSC)临床研究及应用的来源。
1 hAMSC、的生物学特性1. 1免疫表型及基因表达目前,hAMSC、还没有统一的表面标志物,但是大多数表面抗原和骨髓间充质干细胞(bonemarrow mesenchymal stem cells, BM-MSCs)相似。
Kim等万Zes通过分离羊膜间充质细胞并在体外扩增至第2,3代后获得成纤维样细胞,通过不同的培养条件分化为脂肪细胞、骨细胞、软骨细胞、神经元细胞。
免疫表型分析结果显示,其表达SSFA-3 , SSEA-4、胶原蛋白-Ⅰ、-Ⅱ、-Ⅲ、-Ⅳ、-Ⅷ、纤维连接蛋白、a-SMA ,波形蛋白(Vimcnti )、结蛋白、细胞角蛋18 (CK18),HCAM-1、成纤维细胞表面蛋白和人类白细胞抗原(HLA)-A BC;弱表达ICAM-1蛋白;不表达TRA-1-60, VCAM-1,vWF, PFCAM-1和H LA-DR。
用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测发现无论传至几代,一些基因[如:Oct-4,Rex-1,SCF、神经细胞熟附分子(nerve cellular adhesion molecul,NCAM)、巢蛋白(Nestin)、骨形态发生蛋白(bone morphogc-ncticprotcin, BMP) 4、心肌特异性转录因子DATA-、肝细胞核因子(hcpatocytc ncclcar factor, H NF)-4a,波形蛋白(Vimcn-ti),CK18]始终持续表达。
而一些基因(如:鼠短尾突变体表型、FGF-5, Pax-6和PMP2)不表达。
其中,研究发现,a-甲胎蛋白、HLA-ABC, HLA-DR基因表达于早期(2~3代)的细胞中而不表达于晚期(7-13代)的细胞中,且在第3代以上的细胞中可检测出端粒酶活性。
近年来,流式细胞仪分选干细胞侧群技术广泛应用于提取多分化潜能干细胞。
朴正福等州利用流式细胞分选技术hAMSC、中分离提纯干细胞(hA MC-SP细胞),通过FAGS分析结果示,此细胞表达Ncstin, Vimcntin、整合素家族成员(CD496, CD49c, CD49d, CD49e), CD9, CD13,CD19,CD29,CD44,CD46,CD51,CD59,CD166及干细胞相关的Oct 3/9 抗原。
HLA-ABC, TRA-1-81及SSFA-1为弱表达;CD34、CDR 5、CD117、CD5 6、CD90, CD105、CD106、CD133、Fit 1、Musashil及H LA-DR无阳性结果,TRA-1-60及SSFA-3也表达阴性。
实验结果提示此细胞与其他间充质干细胞一样,不表达造血干细胞标记,表达整合素分子成员及间充质干细胞特征性表面标志蛋白。
1.2增殖能力、兔疫原性及致瘤性SSFA-3、SSFA-4是胚胎干细胞和胚胎生殖细胞的表面标志特征,成体干细胞包括YMMSC、无表达。
研究发现羊膜间充质细胞表达SSFA-3 ,SSFA-4,说明AMMSC、可能是介于胚胎干细胞和成体干细胞之间的一个中间等级的干细胞,因此,其增殖能力比HMMSC、更强。
同时发现传至(14. 5士0. 9)代、培养(146.8士8. 9) d后、群体培增平均数( 36. 9士4. 7}后细胞衰老。
人羊膜细胞的低免疫原性和人羊膜组织移植不易引起免疫排斥反应。
有学者通过实验发现将AM-MSC、与人外周血单个核细胞(PYML)或纯化的T细胞直接transwcl!共培养都可以抑制同种异体混合淋巴细胞反应诱导的淋巴细胞增殖,随着AM-MSC、细胞的增多,其抑制效应越明显,当细胞比例达到1:1时,抑制效应最强。
近来有学者进一步研究表明hAM-SC、通过分泌可溶性因子在抑制淋巴细胞增殖中起作用,其中前列腺素可能是关键的效应分子。
并且首次证实了hAMSCs抑制淋巴细胞增殖的能力是其本身所具有的,而不是像H人}MSC、抑制淋巴细胞增殖需要活化刺激等条件。
近来研究报道,采用原代或第1 ~3代的间充质干细胞进行治疗,不会有致瘤的危险。
而目前对于hAMSC、的致瘤性问题,国内外的研究均较少。
朴正福等州通过在体外进行癌化实验,提示hAMSC、传代培养时保持细胞原有的特性,不具有致瘤性。
利用体外细胞集落分析方法对hAMSC、的致瘤性进行了简单的研究,发现AMC-SP细胞未形成集落,而作为阳性对照的HcpU2形成了多数较大集落。
2 hAMSC、的临床前研究干细胞是具有自我更新、高度增殖和多系分化能力的细胞群体,是替代、修复或加强受损或衰老组织、器官功能的理想种子细胞,是组织工程再生医学领域的重要生物材料来源。
hAMSC、能分化为多种细胞,且因其自身的诸多优势,使其在再生医学应用中具有很高的应用价值。
近年来己有不少学者对其做了许多临床前的探索研究。
有研究证实羊膜间充质干细胞可促进人脐血单个核细胞和CD34干细胞扩增,扩增后两者在甲基纤维素半固体培养基中能够形成造血祖细胞集落,其造血支持作用与YM-MSC、相似,二者比较差异无统计学意义。
最近有学者首次使用hAMSC、移植治疗大剂量顺铂诱导的骨髓抑制,发现hAMSCs移植治疗较早地改善顺铂所致骨髓抑制小鼠的造血功能。
Kim等发现hAMSC、较脂肪来源的间充质干细胞表达更高水平的血管内皮生长因子一A,血管生成素-1、肝细胞生长因子、纤维母细胞生长因子-2 ( FUF-2 ),特别是抗凋亡因子(Akt 1)也在hAMSC、中高表达。
进一步研究发现,当移植hAMSC、入小鼠缺血性后肢中,观察到其自发的形成血管样结构以及表达特定的内皮基因和蛋白。
移植hAMSC、后增强血液灌注及毛细血管密度,表明hAMSC、能增加新血管形成,且实验证实其移植率高。
以上说明移植hAMSC、在治疗缺血性下肢中可能具有可观的疗效。
Warricr等采用实时荧光PCR(RT-PCR)、免疫组织化学法等方法显示羊膜来源的间充质干细胞在体外有生成内皮和血管的能力。
进一步研究证实其本身表达促血管生成因子(如:Tic2, Angl , VFUF, VFUFR,vWF,KDR和Flt通)。
这表明可将其应用于创伤愈合、中风、缺血性疾病和组织修复中。
Kim等和Fatimah等-采用糖尿病的NOD/SC口)小鼠模型,也证实了羊膜间充质干细胞通过分泌血管新生因子和增强移植分化能力,促进伤口愈合。
最近有学者发现连续传代培养后羊膜间充质干细胞对血管生成素-1的表达增强。
因胎儿的创伤愈合需要最小的炎性反应和有限的疤痕,Klcin等采用胎羊羔模型发现,虽hAMSC、不是创伤愈合过程中绝对必需的,但其能加快创伤闭合,增加伤口处的细胞外基质。
而对其中转化的影响还需进一步研究。
近来有研究发现hAMSC、在体外经自然生物诱导剂RPF(老鼠再生胰腺提取物)诱导可分化为分泌胰岛素的细胞。
也有学者通过实验观察到羊膜间充质干细胞能形成胰岛样细胞团(7LC}采用免疫组织化学法显示己分化的7LC可表达人胰岛素、胰高血糖素、生长抑素。
而实时定量PCR显示除表达人胰岛素、胰高血糖素、生长抑素,还表达Ngn3,ls11。
将其移植入实验性糖尿病小鼠,可使小鼠恢复正常的血糖且没有免疫排斥万。
以上说明羊膜间充质干细胞具有形成新生胰岛的能力,使其可能用于细胞替代治疗糖尿病。
hAMSC、也能分化为神经元细胞。
有研究证实将经YHA诱导的hAMSC、移植入小鼠局灶缺血模型(此模型有不同程度的左侧偏瘫伴随右侧霍纳氏综合征),分别于1,3,6,8周后检查,发现与对照组比较,移植组小鼠的神经系统症状有明显的改善。
且移植入小鼠体内的hAMSC、主要集中于移植部位及其周边区域,而在某些特定的情况下,其向缺血部位迁移。
未检测到缺血部位的胶质增生及淋巴细胞浸润。
以上实验说明,用YHA诱导过的hAMSC、能分化为表达NSF的神经元样细胞。
此外,hAMSC、移植可能改善局灶性脑缺血后造成的神经系统症状。
近来以大鼠为模型研究发现hAMSC、能显著改善脑缺血大鼠的行为障碍、减少脑梗死体积及提高功能恢复。
将hAMSC、移植入阿尔茨海默病老鼠中,发现其通过免疫调节及旁分泌机制持久地改善了老鼠的记忆功能。
Paracchini等研究发现羊膜间充质干细胞有可能分化为与囊胞性纤维症(CF)发病相关的器官(肝与肺)的上皮细胞,并能有助于部分修复CF的表型。
有研究表明,hAMSC、能分化为心肌细胞,且能高效率地重组成为诱导性多能干细胞(MiPSCs)由MiPSC、分化得来的心肌细胞表达c-kit细胞的表面标志,其能纯化心肌细胞群且能用于同种异体的心脏干细胞疗法。
最近研究发现三维培养系统能增加hAMSC、分化为心肌样细胞,使其能更有效地应用于再生医学。
还有学者通过将羊膜间充质干细胞直接移植入心肌梗死的NOD/SCID小鼠模型中的缺血心肌组织的周边,发现羊膜间充质干细胞能显著表达相关的趋化因子及其受体,并改善了心脏功能,这一试验表明了将羊膜间充质干细胞应用于缺血性心血管病的治疗的可能性。
有学者建立有气管缺陷的胎儿羊羔模型,发现移植羊膜间充质干细胞能增加其气管的修复,表明了将来应用于围产期儿气道修复的可能性。
在博来霉素诱发的肺损伤活体模型中研究中发现,hAMSC能减轻肺纤维化、炎性反应,以及恢复肺的通气功能。
近来有学者用载有hAMSC、的羊膜直接移植到有皮肤伤口的小鼠模型中,发现其通过促进表皮干细胞和毛细血管的再生促进皮肤愈合。
也有学者用hAMSC、与hAFC、细胞构建双层膜结构的皮肤组织,发现其与人皮肤组织有相似的形态,拥有表皮和真皮,且能成功修复无胸腺小鼠的全层皮肤缺损州。
在移植hAMSC、入四氯化碳诱导的小鼠肝硬化模型中实验中,发现其能减少肝细胞凋亡,促进肝细胞再生,改善肝的纤维化。
这为临床提供了一种治疗肝纤维化疾病的新方法。
Lange-Consiglio等首次比较了羊膜间充质干细胞与YM-MSC、在治疗马的肌腿、韧带损伤的疗效,结果发现羊膜间充质干细胞的疗效优于BM-MSCs。
还有学者研究证实YM-MSC、的一些治疗应用可被羊膜间充质干细胞等其他来源的间充质干细胞所取代,包括移植物抗宿主病的治疗。