大肠菌群计数含MPN表
mpn法检测大肠菌群的原理
mpn法检测大肠菌群的原理1. 什么是MPN法？大家好，今天咱们聊聊MPN法，也就是最可能数法，这可是检测水中大肠菌群的“神器”呢！MPN法的英文全名是“Most Probable Number”，翻译过来就是“最可能数”。
听起来是不是很神秘？其实它就是一种通过统计学的方法来估算水里大肠菌群的数量，通俗点说，就是看水中藏着多少小“坏蛋”。
首先，MPN法听起来有点复杂，其实它的工作原理还挺简单的。
咱们可以把它理解成一种通过“打样”的方法来找出水中的大肠菌群到底有多少。
这就好比我们去商场逛街，看到一件漂亮的衣服，试穿了几件差不多款式的，最终决定了买哪一件。
MPN法也是这样，它通过一系列的实验，来估算大肠菌群的数量。
要知道，大肠菌群这家伙可是影响水质的重要因素，所以咱们得好好了解一下它们的情况。
2. MPN法的基本步骤2.1 采样和稀释说到MPN法，首先要做的就是采样。
就像咱们去商场挑衣服一样，第一步是挑选你想要的样品。
这里咱们的样品是水，特别是那些咱们平时喝的水，或者用来洗菜、做饭的水。
这些水可得小心处理，不然大肠菌群的数量会被弄得不准确。
采样之后，我们需要把水样进行稀释。
稀释的目的是为了减少水中大肠菌群的浓度，使得后续的实验更容易操作。
这个过程就像是调配饮料时，加水稀释一样。
稀释得越多，水样中的细菌浓度就越低。
这样做是为了确保在实验时，能准确地找出大肠菌群的数量。
2.2 培养和观察接下来，我们把稀释后的水样放到培养基里去培养。
培养基是一种特殊的营养液，可以让细菌在里面繁殖。
就像给植物提供土壤一样，培养基给细菌提供了生长的环境。
这个过程需要一点时间，一般来说，细菌在培养基里待24到48小时，就可以看到结果了。
观察结果的时候，我们需要注意培养基的变化。
如果水样中有大肠菌群，它们会在培养基中产生一些气体或者改变颜色，这就像是植物长出了新芽一样。
通过观察这些变化，我们可以判断水样中是否有大肠菌群存在。
如果培养基的颜色发生了变化，那就意味着水中有大肠菌群，咱们可以进一步计算它们的数量。
MPN计数法实验方法(附三管、四管、五管最大或然数表参考查询)
稀释培养测数法（MPN）后附1·几种主要微生物生理群MPN计数法一览表后附2·3管/4管/5管最大或然数表一、实验目的通过对好气性自生固氮菌的计数，了解稀释培养计数（MPN）的原理和方法。
二、实验原理最大或然数(most probable number，MPN)计数又称稀释培养计数，适用于测定在一个混杂的微生物群落中虽不占优势，但却具有特殊生理功能的类群。
其特点是利用待测微生物的特殊生理功能的选择性来摆脱其他微生物类群的干扰，并通过该生理功能的表现来判断该类群微生物的存在和丰度。
本法特别适合于测定土壤微生物中的特定生理群（如氨化、硝化、纤维素分解、固氮、硫化和反硫化细菌等。
见附表1）的数量和检测污水、牛奶及其他食品中特殊微生物类群（如大肠菌群）的数量，缺点是只适于进行特殊生理类群的测定，结果也较粗放，只有在因某种原因不能使用平板计数时才采用。
MPN计数是将待测样品作一系列稀释，一直稀释到将少量（如lmL）的稀释液接种到新鲜培养基中没有或极少出现生长繁殖。
根据没有生长的最低稀释度与出现生长的最高稀释度，采用“最大或然数”理论，可以计算出样品单位体积中细菌数的近似值。
具体地说，菌液经多次10倍稀释后，一定量菌液中细菌可以极少或无菌，然后每个稀释度取3—5次重复接种于适宜的液体培养基中。
培养后，将有菌液生长的最后3个稀释度（即临界级数）中出现细菌生长的管数作为数量指标，由最大或然数表（见附件2）上查出近似值，再乘以数量指标第一位数的稀释倍数，即为原菌液中的含菌数。
如某一细菌在稀释法中的生长情况如下；根据以上结果，在接种l0-3—10-5稀释液的试管中5个重复都有生长，在接种l0-6稀释液的试管中有4个重复生长，在接种10-7稀释液的试管中只有1个生长，而接种10-8稀释液的试管全无生长。
由此可得出其数量指标为“541”，查最大或然数表得近似值17，然后乘以第一位数的稀释倍数（10-5的稀释倍数为100 000）。
_食品中大肠菌群的测定
种一起按下列程序进行。
2 、分离培养
将产气的发酵管分别在伊红美兰琼脂 （EMB琼脂）平板上划线分离。然后置 36±1℃温箱内，培养18～24小时后取出， 观察菌落形态，并作革兰氏染色和证实 试验。
可疑菌落特点： 具有金属光泽的深紫黑色菌落； 不带或略带金属光泽的菌落；
中心色较深的淡紫黑色菌落。
CFU/g（mL）。
国标4789.3的08版与03版主要不同
1、名称更改
以大肠菌群计数代替原来的大肠菌群测定。
2、增加了大肠菌群的平板计数法和纸片检测法。
3、大肠菌群的MPN法以乳糖为主改为以月桂基硫 酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤为主的要培养基的MPN 法。 4、大肠菌群的MPN法中原“报告每100 ml （或g） 大肠菌群的MPN值”改为“报告每1 ml （或1g） 大肠菌群的MPN值”。
记录在24h 和48h 内产气的LST 肉汤管数。 未产气者为大肠菌群阴性，产气者则进行复 发酵试验。
3、复发酵试验
用接种环从所有48h±2h 内发酵产气的LST 肉汤 管中分别取培养物l环，移种于煌绿乳糖胆盐 ( BGLB）肉汤管中，36℃±1℃ 培养48h±2h ，
观察产气情况。产气者，计为大肠菌群阳性管。
（4） 用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10 样品匀液1mL，沿管壁缓缓注入9mL磷酸盐缓 冲液或生理盐水的无菌试管中（注意吸管或吸
头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用 1
支1mL无菌吸管反复吹打，使其混合均匀，制
成1:100 的样品匀液。
（5）根据对样品污染状况的估计，按上述操作，
经最后证实为大肠菌群阳性的试管比例乘以
（3）中计数的平板菌落数，再乘以稀释倍数，
mpn法测大肠菌群实验报告
mpn法测大肠菌群实验报告MPN 法测大肠菌群实验报告一、实验目的大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一。
本实验旨在通过MPN 法（Most Probable Number，最大可能数法）测定样品中的大肠菌群数量，以评估样品的卫生状况。
二、实验原理MPN 法是基于统计学原理，通过对不同稀释度的样品进行培养和观察，根据阳性管数查 MPN 检索表，得出样品中大肠菌群的最可能数。
大肠菌群在特定的培养基和培养条件下会产生特征性的生化反应，从而判断其存在与否。
三、实验材料与设备1、样品：＿____（注明样品的来源和种类）2、培养基月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤3、试剂无菌生理盐水4、仪器设备恒温培养箱无菌移液管（1mL、10mL）无菌试管超净工作台四、实验步骤1、样品制备称取或吸取一定量的样品，放入装有适量无菌生理盐水的均质袋中，充分均质，制成 1:10 的样品匀液。
用无菌生理盐水依次进行 10 倍系列稀释，制备成不同稀释度的样品匀液。
2、接种选择 3 个连续的适宜稀释度，每个稀释度接种 3 管 LST 肉汤。
用无菌移液管吸取 1mL 稀释后的样品匀液，加入到 LST 肉汤管中。
3、培养将接种后的 LST 肉汤管置于 36±1℃恒温培养箱中培养 48±2h。
4、观察与记录培养结束后，观察 LST 肉汤管的产气情况。
如有产气，表明可能存在大肠菌群。
5、复发酵试验从产气的 LST 肉汤管中取培养物，转接至 BGLB 肉汤管中。
将 BGLB 肉汤管置于 36±1℃恒温培养箱中培养 48±2h。
6、结果判定培养结束后，观察 BGLB 肉汤管的产气情况。
若产气，则确认为大肠菌群阳性。
7、查 MPN 检索表根据不同稀释度的阳性管数，查阅 MPN 检索表，得出样品中大肠菌群的 MPN 值。
五、实验结果与分析1、实验结果记录详细记录不同稀释度的接种管数、产气管数以及复发酵试验的结果。
大肠菌群计数方法
版本:A/1 日期:2012-05-25页数: Page 1 of 12标题： 大肠菌群计数方法文件修改记录分发号 : ______(仅适用于控制文件) (仅盖有红色印章的文件才有效)版本 修订次数 修订日期 修 订 内 容0 0 2011-02-14 A 1 2012-05-25 修订版本:A/1日期:2012-05-25页数: Page 2 of 12标题：大肠菌群计数方法1.0目的规定大肠杆菌计数的方法。
2.0适用范围适用于加多宝凉茶、浓缩汁或原辅材料中的大肠杆菌群的计数。
3.0术语3.1大肠菌群：一群在36℃条件下培养48h能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧格兰仕隐形无芽孢杆菌。
3.2MPN最可能数（most probable number）：基于泊松分布的一种间接计数方法。
4.0职责4.1质检部：负责按此方法对加多宝来凉茶、浓缩汁或原辅材料中大肠菌群进行计数。
5.0流程图见附录A、附录B。
6.0内容及要求6.1设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其它设备和材料如下：6.1.1恒温培养箱：36℃±1℃6.1.2冰箱：2℃-5℃6.1.3恒温水浴箱：46℃±1℃6.1.4天平：感量0.1g6.1.5振荡器6.1.6无菌吸管：1ml（具0.01刻度）、10ml（具0.1刻度）或微量移液器及吸头。
6.1.7无菌锥形瓶：容量500ml6.1.8无菌试管：18×200ml6.1.9小导管6.1.10无菌培养皿：直径90mm6.1.11菌落计数器6.2培养基和试剂6.2.1月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤6.2.2煌绿乳糖胆盐（BGLG）肉汤版本:A/1日期:2012-05-25页数: Page 3 of 12标题：大肠菌群计数方法6.2.3乳糖胆盐发酵培养基（LBB）6.2.4乳糖蛋白胨培养基（LPB）6.2.5伊红美蓝琼脂培养基（EMB）6.2.6结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）6.2.775%乙醇溶液6.2.8无菌生理盐水：称取8.5g氯化钠溶于1000ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15min6.3大肠菌群MPN计数法6.3.1加多宝凉茶、浓缩汁等产品及原辅材料中大肠菌群的测定6.3.1.1样品稀释a、固体和半固体样品：称取25g样品置于盛有225ml无菌生理盐水的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1-2min，制成1：10的样品匀液。
综训-大肠菌群计数
大肠菌群MPN计数【实验目的】通过本实验学习和掌握食品中大肠菌群计数的方法。
【实验原理】大肠菌群，即在一定培养条件下（37℃、24h之内）能发酵乳酸，产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。
主要包括大肠埃希杆菌、产气肠杆菌、枸橼酸盐杆菌和副大肠杆菌。
水中的病原微生物主要来自人和温血动物的分辨，但是水中的病原微生物分析难度大，对分析者也有危害，大肠菌群在水中生存时间与病原菌基本相同，而且在粪便中数量最多，检出技术上也较为方便，最适合充当水污染的卫生指标。
目前检测大肠菌群的标准分析方法是多管发酵法，以最可能数（most probable number，MPN）来表示检测结果。
MPN是基于泊松分布的一种间接计数法。
我国《生活饮用水卫生标准》规定：生活饮用水中大肠菌群数1L不能超过3个。
【设备和材料】除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：恒温培养箱：36℃±1℃冰箱：2℃～5℃天平：感量0.1g无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头菌锥形瓶：容量500mLpH计或pH比色管或精密pH试纸菌落计数器【培养基和试剂】月桂基硫酸盐胰蛋白胨（Lauryl Sulfate Tryptose，LST）肉汤：见附录A 中A.1煌绿乳糖胆盐（Brilliant Green Lactose Bile，BGLB）肉汤：见附录A 中A.2 无菌生理盐水：见附录A 中A.3无菌1 mol/L NaOH：见附录A 中A.4无菌1 mol/L HCl：见附录A 中A.5【检验程序】【操作步骤】1 样品的稀释1.1 以无菌吸管吸取25 mL样品置盛有225 mL生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10的样品匀液。
1.2 样品匀液的pH值应在6.5～7.5之间，必要时分别用1mol/L NaOH或1mol/L HCl调节。
大肠菌群检测知识及MPN法检测的注意要点
大肠菌群检测知识及MPN法检测的注意要点一、大肠菌群的定义：1、指一群在36℃条件下培养48h能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。
2、该菌群主要来源于人畜粪便, 作为粪便污染指标评价食品的卫生状况, 推断食品中肠道致病菌污染的可能。
3、大肠菌群不是细菌学上分类命名，而是一组与粪便污染有关的细菌。
这群细菌包括：大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌。
4、生化特征及血清学反应并非完全一致。
5、典型大肠杆菌的IMVIC与硫化氢试验结果：++---。
二、分布：1、广泛分布于自然环境。
2、来源于人和温血动物的粪便。
三、卫生学意义：1、大肠菌群作为粪便污染的指标菌评价样品中是否受到粪便的污染。
2、大肠菌群计数的高低，直接反映了样品受粪便污染的程度。
3、表示对人体健康是否具有潜在的危险性。
大肠菌群是理想的粪便污染的指标菌4、是人类和温血动物肠道菌群，在数量上占优势。
5、随粪便排出体外后，在外界环境影响下，其存活时间应与肠道致病菌大致相似或稍长。
6、检验方法简便，易于检出与计数。
7、对消毒剂的抵抗力应不低于肠道致病菌。
四、主要修改内容：将原标准拆分为大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌计数三个独立的标准方法，标准名称变化。
大肠菌群的MPN法中乳糖胆盐等培养基改为月桂基硫酸盐胰蛋白眎(LST)肉汤为主的培养基；增加了对样品匀液的pH范围要求；增加了大肠菌群的平板计数法；MPN法的结果报告由原每100g（mL）大肠菌群的MPN值，修改为每1 g（mL）大肠菌群的MPN值。
五、大肠菌群在不同培养基上的形态：六、大肠菌群检验MPN法：新老标准异同，结果报告单位不同：原方法：MPN/ 100g(mL)；现方法：MPN/ g(mL)；操作过程请大家仔细阅读 GB4789.3-2010。
1、MPN法注意事项：•全过程不得超过15min。
•样品匀液的pH值应在6.5～7.5之间，•（如接种量需要超过1mL，则用双料LST肉汤）•以48h±2h为最终观察结果时限。
大肠菌群检测MPN法与平板计数法全方位比较
大肠菌群检测MPN法与平板计数法全方位比较1、二者范围不同：GB 4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》范围中规定：“本标准第一法适用于大肠菌群含量较低的食品中大肠菌群的计数；第二法适用于大肠菌群含量较高的食品中大肠菌群的计数。
”这里所说的含量高低通常以100CFU为准，即含量低于100CFU采用MPN 计数法，含量高于100CFU采用平板计数法。
2、概念不同：MPN（most probable number）计数法：即最近似数法，也称为最可能数法，是食品检验中常用的方法。
1915年，McCrady首次发表了用MPN法 (最大可能数法) 来估算细菌浓度的方法，这是一种应用概率理论来估算细菌浓度的方法。
平板计数法(colony forming units）：CFU 即菌落形成单位，样品经过处理培养后我们数出平板上所生长出的菌落个数，从而计算出每毫升或每克待检样品中可以培养出多少个菌落，以CFU/mL或CFU/g报告之。
滤膜法（membrane filter method）：将一定量水样注入已灭菌的微孔薄膜的滤器中，经过抽滤，细菌被截留在滤膜上，将滤膜贴于培养基上，经培养后计数和鉴定滤膜上生长的菌落，依据过滤水样计算每升或每100毫升水样中的菌落总数。
菌落：是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌集合而成。
3、原理不同：MPN法：利用待测微生物的特殊生理功能的选择性来摆脱其他微生物类群的干扰，并通过该生理功能的表现来判断该类群微生物的存在和丰度。
因为细菌在样本内的分布是随机的，所以检测细菌时，可应用概率理论计算菌数，实验结果以MPN值表示，但MPN值并不能表示实际菌落数，实际菌落数有可能落在置信区间内的任何一点，MPN值是落在这个置信区间内概率最大的一点。
举例说：稀释度为0.01，0.001，0.0001所对应的阳性管数分别为2-0-0；查MPN检索表可知：MPN值为92CFU/mL(g), 当置信度为95%，则其下限和上限分别为14，380，即对应的菌落浓度区间为14~380CFU/mL(g)，意思是：这个检验结果显示细菌浓度落在14～380CFU/mL(g)区间均有可能，只不过92CFU/mL(g)出现的概率最大。
大肠菌群检测的实验报告
大肠菌群检测的实验报告大肠菌群检测实验报告一、实验目的本实验旨在通过检测样品中的大肠菌群数量，评估其卫生质量，为食品安全和人类健康提供重要依据。
二、实验原理大肠菌群是指一群革兰氏阴性、无芽孢、兼性厌氧的细菌，主要包括埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠球菌属等。
这些细菌可在25-37℃的环境下生长，且在伊红美蓝培养基上形成典型的大肠菌群菌落。
本实验采用MPN（最大可能数）方法进行大肠菌群的检测。
通过在不同浓度的样品中接种不同体积的培养基，并按照MPN表进行统计分析，以获得样品中大肠菌群的数量。
三、实验步骤1.样品处理：将样品按照10倍递增的方式进行稀释，以适应不同浓度的大肠菌群检测。
2.接种培养：分别取0.1mL、0.01mL、0.001mL的样品稀释液，接种于伊红美蓝培养基中，每个稀释度接种三管。
轻轻摇匀，倒置培养。
3.培养观察：将培养基放入37℃的培养箱中，培养24小时。
观察每个稀释度的培养管中是否有典型的大肠菌群菌落形成。
4.结果统计：根据MPN表，统计每个稀释度下形成菌落的管数，并计算大肠菌群的数量。
5.结果报告：根据实验数据，得出样品中大肠菌群的数量，并评估其卫生质量。
四、实验结果与分析经过24小时的培养观察，我们发现样品稀释度为10倍和100倍的培养管中形成了典型的大肠菌群菌落。
根据MPN表进行统计分析，得出样品中大肠菌群的数量为9.0×10²CFU/mL。
根据国家相关标准，该样品的大肠菌群数量超过了安全阈值（<10³CFU/mL），因此该样品的卫生质量不达标。
五、结论与建议通过本实验的检测和分析，我们得出样品中大肠菌群的数量超出了安全阈值，说明该样品的卫生质量不符合要求。
这可能是由于生产过程中的污染、储存条件不当或运输环节不卫生等原因导致的。
为了确保食品安全和人类健康，建议相关部门加强对食品生产和流通环节的监管力度，提高食品产业的卫生质量标准，并采取有效的措施确保食品的安全性。
食品中大肠菌群计数检测标准(GB 4789.3-2016)及解读.
八
大肠菌群平板计数法的操作步骤
九
结果与报告
— 1—
过渡页
一
大肠菌群的概念
食品营养与检测专业教学资源库
定义：一群在36℃培养48h可发酵乳糖、产 酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏染色阴 性无芽孢杆菌。
— 2—
过渡页
二
大肠菌群的检测意义
食品营养与检测专业教学资源库
该菌主要来自于人畜粪便，故以 此作为粪便污染指标来评价食品 的卫生质量，推断食品中有无污 染肠道致病菌。
— 2—
大肠菌群MPN计数的检验程序
检样 25g(mL)样品+ 225mL稀释液，均质
10倍系列稀释
选择适宜三个连续稀释度的样品匀液，接种LST肉汤管
36℃±1℃
48h±2h
不产气
产气
36℃±1℃
BGLB肉汤
48h±2h
不产气
产气
大肠菌群阴性管 大肠菌群阳性管
查MPN表 报告结果
食品营养与检测专业教学资源库
食品营养与检测专业教学资源库过渡页大肠菌群的检测操作流程1大肠菌群mpn计数的检验程序2大肠菌群平板计数法的检验程序食品营养与检测专业教学资源库大肠菌群mpn计数的检验程序25gml样品225ml稀释液均质10倍系列稀释选择适宜三个连续稀释度的样品匀液接种lst肉汤管48h2h361bglb肉汤48h2h361大肠菌群阴性管大肠菌群阳性管查mpn表报告结果食品营养与检测专业教学资源库大肠菌群平板计数法的检验程序选择2个3个适宜连续稀释度的样品匀液接种vrba平板25gml样品225ml稀释液均质10倍系列稀释36118h24h计数典型和可疑菌落bglb肉汤36124h48h报告结果食品营养与检测专业教学资源库过渡页大肠菌群的检测设备及材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外其他设备和材料如下恒温培养箱冰箱恒温水浴箱天平均质器振荡器无菌吸管或微量移液器及吸头无菌锥形瓶ph计或ph比色管或精密ph试纸菌落计数器
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大肠菌群计数
是一种估计悬浮在水溶液中活菌数的方法。
一般分几组进行，每一组各有数重复，分别以渐次的方式加入不同量的待测水溶液于培养液中进行培养，随后观察每一组中的试管是否有菌生长，然后再利用统计表估计菌数。
例如水中coliform数的测定，将待测水溶液以10ml,1ml及0.1ml的量分别加入各组，每组三重复，经培养后观察coliform是否有生长，统计有菌生长的管数，以统计表统计菌数。
活菌的浓度可利用MPN的方式来估计，方式简单，可分为下列两步骤：在培养基中作数个重复稀释；
记录有菌生长的试管。
若试管中无生长，则可能代表连一支菌都没有生长。
从统计观点，MPN这个方法是一种非常没效率的方式，因为每一试管与培养皿表面生长的菌数只有很小部分符合。
然而MPN的好处有以下：
若菌无法长在固态培养基时，便可使用；
若菌的生长的动力学具有很大变化，便可使用：假设某些菌会会立即且迅速
的生长，且会在固态培养基产生很大的菌落，且与我们要的菌落接触到或盖过时；因为较少且具高度游动性或快速生长的菌，可能形成小菌落，因而其数量是很多而导致无法计数；
假如非我们所要菌存在，或无筛选的方法存在时，便可使用。
虽然有污染的细菌可以大量生长，但仍可藉由我们所要看的菌产生特定的产物来估计；
假如琼脂或其他固化材料有某些因素会干扰我们计数时，便可使用
大肠菌群MPN表
3 3 1 460 71 2,400
3 3 2 1,100 150 4,800
3 3 3 > 1,100 > 150 > 4,800
说明：
若稀释倍数为10，100，1000倍（即每ml LST中0.1，0.01，0.001 ml（g）之检体），且LST均产气（正反应试管数3-3-3），经接种至EC，而其产气试管数为3-1-0，对照MPN为43，即为该检体大肠杆菌MPN数为43/ml（g）。
若稀释倍数为原液，10，100倍(即每ml LST中含1，0.1，0.01ml之检体而EC接种之正反应试管数亦为3-1-0，则该检体大肠杆菌MPN数为43÷10=4.3/ml。
若稀释倍数为100，1000，10000倍时，结果同上，则该检体大肠杆菌MPN数为43×10=430/ml，其余类推。
计算公式：×中间试管之稀释倍数＝MPN／g （ml）
平板计数法：采用常规涂布平板法，37℃24h后计数。
培养基为营养琼指和伊红美兰琼脂。
多管发酵法：采用五管法，培养剂为液体EC培养基。
细菌总数：采用AODC法，具体操作按徐怀恕方法进行。
活菌直接计数：采用Kogure等方法：向水样加入0.002%萘啶酮酸和0.025%酵母膏，在37℃下培养6-24h，加入甲醛（最终浓度为2%）固定，再按AODC法镜检计数。