武当山区栽培重楼根茎与须根中九种重楼皂苷含量比较

合集下载

HPLC法测定人参毛状根及不同人参样品中9种人参皂苷的含量

HPLC法测定人参毛状根及不同人参样品中9种人参皂苷的含量

HPLC法测定人参毛状根及不同人参样品中9种人参皂苷的含量陈泠;李春艳;王政;贾敏;韩婷【期刊名称】《药学实践杂志》【年(卷),期】2016(034)004【摘要】Objective To establish an HPLC method for the quantitation of nine ginsenosides (Rc ,Rb1 ,Rb2 ,Re ,Rd , Rg1 ,Rg2 ,Rg3 and Rh2 ) in Panax ginseng samples .Methods An HPLC method was developed to determine the quantities of the nine ginsenosides .The determination was performed on a Zorbax SB C18 column (4 .6 mm × 250 mm ,5μm) with an Extend-C18 guard column (4 .6 mm × 12 .5 mm ,5 μm) at 35 ℃ .The mobile phase was a multi-step acetonitrile-water gradient run at a flow rate of 1 .0ml/min .The detection wavelength was 203 nm .Results The nine ginsenosides were baseline separated with-in 120 min .The method had good linearity ,precision ,stability and reproducibility with RSDs all less than 2 .0% .The sample recoveries were between 98 .3% to 102% .The quantity of total saponins in leaves and fibrous roots of Panaxginseng ,which were measured as 48 .9 mg/g and 23 .6mg/g ,respectively ,were higher than those in the other plant components .The amounts of total saponins in Panax ginseng hairy roots were similar to those in taproots and fruits of Panax ginseng ,which was7 .47 mg/g .Conclusion The established HPLC method isaccurate ,simple ,rapid ,precise and reproducible and could be used for the quantitation of these nine ginsenosides in Panax ginseng samples .%目的:采用HPLC法测定不同人参样品中9种人参皂苷(Rc、Rb1、Rb2、Re、Rd、Rg1、Rg2、Rg3和 Rh2)的含量。

重楼的组织培养

重楼的组织培养

重楼的组织培养1.外植体的选择与消毒1.1外植体的选择据李群等对重楼组织培养外植体有4个取材时期,即萌芽期、展叶期、花冠露白期和倒苗期,子房取自花冠露白期,叶片取自萌芽和展叶期,幼芽取自萌芽期、展叶期、倒苗期,试验结果表明,其中以展叶期旺盛生长的根茎作外植体,其愈伤组织的诱导频率最高,达16.6%,萌芽期取材次之,在花冠露白期和倒苗期,根茎则很难诱导产生愈伤组织。

根和叶片既不能诱导出愈伤,也不能诱导出小球茎,接种后很少启动,污染也较少,大约2个月后干枯死亡。

而根茎、子房、幼芽都能不同程度地诱导出愈伤组织,特别是幼芽,不但诱导出的愈伤组织块数最多,诱导频率最高,达68. 25%,且还能诱导出小球茎。

可见,不同的外植体的诱导频率差异很大。

在四川峨眉山海拔2000 m左右的环境下,重楼属植物的生长期一般为4月至5月中下旬,大约二个月左右的时间。

因此,取材时间应在4月至5月上旬这段时间。

但在这段时间取材培养,会发现外植体极易污染。

必须采取一些措施减轻或控制外植体的污染。

.1.2外植体的消毒接种前置于18 e 弱光下保存,一般滞留2-4d即接种培养。

取重楼的芽,自来水冲洗2-3h,去除表层的芽鞘,再用自来水冲洗干净后,蒸馏水冲洗3遍。

在无菌条件下,用75,酒精消毒30S,无菌水冲洗3-5次,0.1,升汞灭菌15min,无菌水冲洗5-8次。

将芽外部的芽鞘按层剥下,切成长宽分别为1cm 左右的小块,芽内部不能分层的部分按切外层芽鞘的大小切成小块,接种到愈伤组织诱导培养基上,一般幼嫩的芽和叶片灭菌3-4min;根茎灭菌10min,子房和根灭菌6-8min。

灭菌以后的材料用无菌水清洗3-5次,最后接种于培养基(1)上,置于(20?2 )?培养温度,光照时间8h/d的条件下培养。

培养基:(1)MS+BA 1.0 +IAA 2.0 和 MS+BA 2.0 +IAA 1.0 培养基上,不但能诱导愈伤组织,还能诱导出小球茎。

HPLC法测定人参毛状根及不同人参样品中9种人参皂苷的含量

HPLC法测定人参毛状根及不同人参样品中9种人参皂苷的含量
CHEN Ling ,LI Chunyan ,WANG Zheng ,JIA M in ,HAN T ing (Department of Pharmacognosy ,School of Pharmacy ,Second M ilitary M edical U niversity ,Shanghai 200433 ,China)
1 仪器与试药
1 .1 仪器 Agilent 1200 高效液相色谱仪 (美国 Agilent 公司) ,配有在线脱气机 、四元泵 、自动进样 器 、柱温箱和二极管阵列检测器 (DAD ) ;HYG-A 全 温摇瓶柜(江苏太仓) ;SW-CJ-1D 超净工作台(苏州 净化) ;YXQ-LS-75S Ⅱ 立式压力蒸汽灭菌器 (上海 博讯) ;Sartorius BS 110S 万分之一电子天平(德国 Sartorius 公司) 。 1 .2 药品和试剂 人参皂苷标准品 (纯度 > 98% , 成都曼斯特有限公司 ) ;工业用甲醇 (上海思炯化工 科技有限公司) ;色谱乙腈 (上海国药集团化学试剂 公司) ;娃哈哈纯净水 (杭州娃哈哈集团有限公司) ; 0 .45 μm 微孔滤器(FIN E Scientific L td .) 。 人参主 根 、须根 、叶 、花和果取自吉林省通化市栽培的 4 年 人参 ,经第二军医大学秦路平教授鉴定为五加科植 物人参 。 人参饮片 (批号 :150506 ,上海雷允上药业 有限公司) 。 人参毛状根由中南大学生命科学学院 医学遗传学国家重点实验室诱导并筛选获得 。 人参 毛状根在 1/2M S 培养基中悬浮培养 ,每 30 d 继代 1 次 ,在转速为 135 r /min 的摇床上暗培养 ,温度
(25 ± 2) ℃ 。
2 方法与结果
2 .1 溶液的配制 2 .1 .1 标准品溶液 精密称取人参皂苷 Rg1 40 mg 溶于 10 ml 甲醇 ;人参皂苷 Rb1 20 mg 溶于5 ml甲 醇 ;人参皂苷 Re 40 mg 溶于 2 ml 甲醇 ;人参皂苷 Rc 20 mg 溶于 2 ml 甲醇 ;人参皂苷 Rg2 8 mg 溶于 10 ml 甲醇 ;人参皂苷 Rh2 35 mg 溶于 10 ml 甲醇 ; 人参皂苷 Rg3 2 .5 mg 溶于 10 ml 甲醇 ;人参皂苷 Rb2 50 mg 溶于 10 ml 甲醇 ;人参皂苷 Rd 20 mg溶 于 2 ml 甲醇 。 得到上述各标准品母液 ,而后 ,精密 量取稀释后的母液各 50 μl ,即得混合标准品溶液 , 置于4 ℃ 冰箱保存 。 2 .1 .2 样品溶液 精密称取 0 .5 g 已干燥至恒重 的各样品粉末 (过 24 目筛 ) ,加入 250 ml 甲醇 ,于 55 ℃ 水浴恒温回流提取 1 h ,过滤提取液 ,滤渣重复 提取 2 次 ,用适量体积的溶剂洗涤残渣 ,合并滤液 , 60 ℃ 减压浓缩 ,定容至 5 ml ,用 0 .45 μm 微孔滤膜 过滤 ,取续滤液作为供试品 。 2 .2 色 谱 条 件 采 用 反 相 高 效 液 相 色 谱 C18 柱 (Zorbax SB C18 柱 ,4 .6 mm × 250 mm ,5 μm ) ,保 护柱 Ex tend-C18 柱 (4 .6 mm × 12 .5 mm ,5 μm ) ;检 测波长 :203 nm ;柱温 :35 ℃ ;进样量 :20 μl ,流速 : 1 .0 ml/min ;以乙腈-水为流动相 ,梯度洗脱程序见 表 1 ,对照品及样品的 HPLC 图见图 1 。

鄂西北地区重楼药材中皂苷含量比较

鄂西北地区重楼药材中皂苷含量比较

鄂西北地区重楼药材中皂苷含量比较叶方;杨光义;黄良永;王铮;张玲【摘要】目的分析鄂西北地区重楼药材中重楼皂苷的含量.方法收集鄂西北地区相同产区和不同产区的重楼药材样品,进行重楼皂苷的含量分析.结果不同产区、相同产区不同批次的样品中重楼皂苷含量差别较大.结论生长环境和年限都是影响重楼药材质量的重要因素;要实现中药现代化必须大力推进重楼人工种植,鄂西北地区具备推行重楼人工种植的地理条件.【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2013(032)007【总页数】3页(P933-935)【关键词】滇重楼;华重楼;重楼皂苷;含量比较【作者】叶方;杨光义;黄良永;王铮;张玲【作者单位】湖北医药学院附属太和医院药学部,十堰,442000;湖北医药学院附属太和医院药学部,十堰,442000;湖北医药学院附属太和医院药学部,十堰,442000;湖北医药学院附属太和医院药学部,十堰,442000;湖北医药学院附属太和医院药学部,十堰,442000【正文语种】中文【中图分类】R282.71重楼为百合科植物云南重楼(滇重楼)Paris polyphyllaSmithvar.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.或七叶一枝花(华重楼)Paris polyphylla Smith var.chinensis(Franch.)Hara 的干燥根茎,具有清热解毒、消肿镇痛、凉肝定惊的作用[1]。

鄂西北地区主要生长华重楼[2],当地根据地上部位的结构称七叶一枝花或根据地下根和根茎部位形态称为海螺七。

由于重楼是多年生植物,而且对生长环境要求较高,近年来野生重楼资源日益减少,大力发展重楼药材的人工种植是解决其药材资源的根本途径。

笔者通过对鄂西北地区不同样本重楼的质量控制研究,可以为推动本地区重楼药材人工种植提供参考[3]。

1 仪器与试药1.1 仪器戴安UltiMateTM3000型高效液相色谱仪(美国戴安公司),包括四元梯度泵、自动进样器、柱温箱、紫外检测器和 chromeleon软件数据处理系统;AUW120D型电子天平(日本岛津公司);CQX25-06型超声波震荡器(上海必能信超声有限公司)。

HPLC测定不同产地滇重楼中的4种重楼皂苷_邹亮

HPLC测定不同产地滇重楼中的4种重楼皂苷_邹亮

华西药学杂志W C J ·P S 2009,24(5):521~523作者简介:邹亮(1979-),男,博士,讲师,从事中药制剂质量标准的教学与科研工作。

E m a i l :z o u l i a n g @c d u .e d u .c nH P L C 测定不同产地滇重楼中的4种重楼皂苷邹 亮1,周 浓2,张海珠2,夏从龙2,易秋艳3,赵 钢1(1.成都大学生物产业学院,四川成都610106;2.大理学院药学院,云南大理671000;3.四川省食品药品检验所,四川成都610036)摘要:目的 分析测定不同产地、不同部位滇重楼中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量。

方法 采用H P L C 法,色谱柱为Z o r b a x S B-C 18(250m m×4.6m m ,5μm ),流动相为乙腈-水(40:60),体积流量1.0m l ·m i n -1,柱温30℃,检测波长203n m 。

结果 4种不同产地滇重楼皂苷的含量差异较大。

栽培滇重楼中,4种重楼皂苷的总含量高于野生滇重楼,滇重楼不同部位的4种重楼皂苷的总含量为根茎>叶>果实>须根>茎。

结论 应积极配合G A P 的实施,尽快实现滇重楼人工栽培产业化,保证其质量具有可控性。

关键词:滇重楼;重楼皂苷;含量分析;高效液相色谱法;质量评价中图分类号:R 917 文献标识码:A  文章编号:1006-0103(2009)05-0521-03D e t e r m i n a t i o no f f o u rs a p o n i n s i nP a r i s p o l y p h y l l av a r .y u n n a n e n s i s f r o m d i f f e r e n t h a b i t a t s b y H P L CZ O UL i a n g 1,Z H O UN o n g 2,Z H A N GH a i -z h u 2,X I AC o n g -l o n g 2,Y I Q i u -y a n 3,Z H A OG a n g1(1.C o l l e g e o f B i o l o g i c a l I n d u s t r y ,C h e n g d u U n i v e r s i t y ,C h e n g d u ,S i c h u a n ,610106P .R .C h i n a ;2.C o l l e g e o f P h a r m a c y ,D a l i U n i v e r s i -t y ,D a l i ,Y u n n a n ,671000P .R .C h i n a ;3.S i c h u a nP r o v i n c i a l I n s t i t u t e f o r F o o da n dD r u gC o n t r o l ,C h e n g d u ,S i c h u a n ,610036P .R .C h i n a )A b s t r a c t :OB J EC T I V E T o d e t e r m i n e f o u r s a p o n i n s i nP a r i s p o l y p h y l l a v a r .y u n n a n e n s i s f r o m d i f f e r e n t h a b i t a t s a n di n t h e d i f f e r e n t p a r t s .ME T H OD S T h e s a m p l e s w e r e s e p a r a t e da t 30℃o n a Z o r b a x S B -C 18(250m m×4.6m m ,5μm )c o l u m ne l u t e dw i t h a c e t o n i -t r i l e -w a t e r (40:60)a s t h em o b i l ep h a s e .F l o wr a t ew a s s e t a t 1.0m l ·m i n -1a n dt h ed e t e c t i o nw a v e l e n g t hw a s s e t a t 203n m .R E S U L T S T h e d i f f e r e n c e o f f o u r s a p o n i n s i nP a r i s p o l y p h y l l a v a r .y u n n a n e n s i s f r o md i f f e r e n t h a b i t a t s i s s i g n i f i c a n t .T h e f o u r s a p o -n i n s f r o m c u l t i v a t i o ns h o wh i g h e r t h a nf r o m w i l d n e s s .T h e t e n d e n c y o f f o u r s a p o n i n s r h i z o m a >l e a f >f r u i t f i b r o u s r o o t >s t e m .C O N -C L U S I O N Wi t h t h e h e l po f G A P ,i n d u s t r i a l i z a t i o nc u l t i v a t i o ns h o u l db ee s t a b l i s h e dt o e n s u r e q u a l i t yo f P a r i s p o l y p h y l l av a r .y u n -n a n e n s i s t o b e c o n t r o l l e d .K e yw o r d s :P a r i s p o l y p h y l l av a r .y u n n a n e n s i s ;P a r i s s a p o n i m ;Q u a n t i t a t i v e a n a l y s i s ;H P L C ;Q u a l i t ye v a l u a t i o n C L C n u m b e r :R 917 D o c u m e n t c o d e :A  A r t i c l e I D :1006-0103(2009)05-0521-03 滇重楼为百合科植物云南重楼P a r i s p o l y p h y l l a S m i t h v a r .y u n n a n e n s i s (F r a n c h .)H a r a 的干燥根茎,具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定痉等功效[1]。

重楼讲义

重楼讲义

重楼ChonglouPARIDIS RHIZOMA本品为百合科植物云南重楼Paris polyphylla Smithvar.yunnanensis(Franch.)Hand .-Mazz.或七叶一枝花Parispolyphylla Smith var chinensis(Franch.)Hara的干燥根茎。

秋季采挖,除去须根,洗净,晒干。

【性状】本品呈结节状扁圆柱形,略弯曲,长5~12cm,直径1.O~4.5cm。

表面黄棕色或灰棕色,外皮脱落处呈白色;密具层状突起的粗环纹,一面结节明显,结节上具椭圆形凹陷茎痕,另一面有疏生的须根或疣状须根痕。

顶端具鳞叶和茎的残基。

质坚实,断面平坦,白色至浅棕色,粉性或角质。

气微,味微苦、麻。

【产地规格】主产地为:贵州、江西、进口、四川、云南,产地常按大小分为大重楼、小重楼,按质地分为胶质重楼及粉质重楼。

重楼来源市场较为混乱,主要来源为:滇重楼、七叶一枝花、狭叶重楼、金线重楼、长药隔重楼、五指莲、黑籽重楼、毛重楼、长柱重楼、多叶重楼、花叶重楼、凌云重楼等品种,越南等地进口品种常称之为水重楼,生长于比较干燥地区的粉质重楼较多,生长于湿热潮湿多雨密林下的植株,胶质重楼较多,川西地区以胶质药材占优,滇西北地区以粉质药材居多。

研究表明:因真菌和其它微生物寄生,会使重楼地下茎转化为胶质,胶质重楼皂苷含量一般要高于粉质[2-6]。

【性状鉴别】1 无特异气味2 环节突起不明显3 根茎常极粗大4呈圆柱形,多数全体等粗,茎痕半圆形或扁圆形,表面凹陷,明显凸出,多呈交互排列……南重楼3 根茎直径5cm以下5环节较稀疏6 根茎呈类圆锥形,常弯曲,上侧有半圆形或椭圆形凹陷的茎痕,直两边多少纵缩成结节状,凹陷内可见圆点状维管束残基……七叶一枝花类6根茎呈类圆柱形,多较平直,少数弯曲,茎痕表面较平或稍突起……滇重楼类5 环节较密7环节微突起,茎痕椭圆形或扁圆形,较平或凹陷,排列不整齐,少数呈交互排列……药隔重楼类2 环节突起明显,呈螺丝状,直径较小8 少数具分枝表面黄棕色,常皱缩,茎痕较少呈半圆形……五指莲8 无分枝8表面黄棕色或棕褐色,具多数不规则纵向皱纹……黑籽重楼,金线重楼类[7-8] 1 有特异气味8断面浅绿色,湿润后更绿,可见筋脉点(维管束)断续排列成环……蜘蛛香[9-10]滇重楼南重楼胶质、粉质螺丝状重楼蜘蛛香。

重楼的药理作用及其资源现状探讨

重楼的药理作用及其资源现状探讨678300摘要:重楼是临床上比较常用的中药之一,种类多且资源极为丰富,可用于消肿止痛。

现代药理表明该药物具有多种药理作用,比如镇痛、抗肿瘤、止血等等。

近年来临床上对于重楼的研究主要用于保护肾脏与抗肿瘤面,鲜少有其他的研究。

因此,本研究综述了重楼的药理作用最新的研究进展。

关键词:重楼;药理作用;资源现状重楼是七叶一枝花的干燥根茎,具有诸多功效,可用于治疗多种疾病,如跌打损伤、蛇虫咬、咽喉肿痛等,目前该中草药的应用相当广泛[1]。

近年来重楼在临床上的应用越来越广泛,但是目前我国在种植重楼方面技术仍然有待规范,资源短缺,价格一路攀升,供不应求。

因此,本研究对分析了重楼的药理作用及其资源现状,并提出解决这一问题的建议。

1重楼的药理作用1.1保护肾脏具体来说,重楼肾脏保护效果较高主要因为薯蓣皂苷和偏诺皂苷两种有效成分可以保护因微囊藻毒素导致的肾损伤,且研究表明前一种成分的效果比后一种效果更好。

不少学者针对重楼保护肾脏方面的作用开展了各种研究,通过动物模型试验证实重楼的肾脏保护价值,主要因为该药物可以对动物高胆固醇血症与膜性肾病大鼠都可以起到减轻作用。

杨黎江,沈放,仝向荣等人[2]的研究这对微囊藻毒素浸染的小鼠开展了连续灌胃试验,试验中将薯蓣皂苷和偏诺皂苷作为主要材料,之后给予小鼠肾脏进行HE染色与组织制片,结果表明微囊藻毒素致肾单位结构异常,而薯蓣皂苷和偏诺皂苷可以保护肾损伤,且薯蓣皂苷的效果更佳。

由此可见,重楼可以对炎症反应起到抑制作用,阻碍细胞外基质产生,从而有效地调节免疫功能,因而在保护肾脏方面效果较好。

1.2抗肿瘤近年来有研究表明重楼地上与地下部分的总皂苷具有一定的抗肿瘤作用。

李菊,张荣平,贺智勇等人[3]的研究,在正常生长期的肿瘤细胞接种到小鼠体内,研究结果表明无论是地上部分的总皂苷还是地下部分的总皂苷在小鼠胃癌细胞株、人宫颈细胞株以及人乳腺细胞株生长都可以起到一定的抑制作用。

UPLC-ELSD法同时测定重楼中重楼皂苷I、II、VI、VII

UPLC-ELSD法同时测定重楼中重楼皂苷I、II、VI、VII中草药Chinese Traditional and Herbal Drugs 第43卷第2期2012年2月·305·UPLC-ELSD法同时测定重楼中重楼皂苷I、II、VI、VII韩燕全1,洪燕2,夏伦祝1*,左冬2,姜蕾2,罗欢21. 安徽中医学院第一附属医院国家中医药管理局中药制剂三级实验室,安徽合肥 2300312. 安徽中医学院,安徽合肥 230031摘要:目的建立同时测定重楼中重楼皂苷I、II、VI、VII的超高效液相色谱-蒸发光散射(UPLC-ELSD)分析方法。

方法采用Waters Acquity UPLC H-Class色谱系统,ELSD检测器,BEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7 μm),流动相为乙腈-水,以体积流量0.45 mL/min进行梯度洗脱,柱温30 ℃。

结果被测成分在线性范围内均具有良好的线性关系(r>0.999 5);平均回收率在98.36%~100.11%,RSD≤1.56%。

结论UPLC法分离效果及重现性好,且快速、简便,可作为重楼的质量控制方法。

关键词:重楼;超高效液相色谱-蒸发光散射;重楼皂苷I;重楼皂苷II;重楼皂苷VI;重楼皂苷VII中图分类号:R286.02 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2012)02 - 0305 - 03Simultaneous determination of Paris saponins I, II, VI, and VII in Paridis Rhizoma by UPLC-ELSD methodHAN Yan-quan1, HONG Yan2, XIA Lun-zhu1, ZUO Dong2, JIANG Lei2, LUO Huan21. The First Affiliated Hospital, Anhui College of Traditional Chinese Medicine, Grade 3 Laboratory of Traditional Chinese Medicine Preparation, State Administration of TCM, Hefei 230031, China2. Anhui College of Traditional Chinese Medicine, Hefei230031, ChinaKey words:Paridis Rhizoma; UPLC-ELSD; Paris saponin I; Paris saponin II; Paris saponin VI; Paris saponin VII重楼是百合科(Liliaceae)重楼属Paris L.植物的泛称,以蚤休之名首载于《神农本草经》。

中药重楼的抗炎作用机制研究进展

中药重楼的抗炎作用机制研究进展重楼为临床常用中药,其多种活性成分在体内外具有抗炎作用,表现在免疫调节、抗氧化作用以及对炎症细胞和因子、下丘脑-垂体-肾上腺轴、细胞凋亡、凝血/纤溶系统的影响,呈现出多成分、多靶点、多途径的起效方式,笔者就近年来中药重楼抗炎活性成分的药理机制作一综述。

标签:重楼;抗炎作用;活性成分;机制重楼(Rhizoma Paridis)为临床常用中药,又名灯台七、草河车、蚤休、枝花头、白甘遂、海螺七等,主要来源为百合科重楼属植物云南重楼和七叶一枝花的干燥根茎[1]。

重楼属植物全世界约有24种10变种[2],主要分布在欧亚大陆温热带地区,我国种类最多,拥有19种18变种[3],主要分布在云贵高原至邛崃山区,以云南、四川、贵州等地较为丰富,是云南白药[4]、重楼克感滴丸[5]、宫血宁胶囊[6]等药品的主要成分,也是中药组方重楼荠菜生化汤、连休蜈蚣地龙汤、清热解毒通淋汤的组成成分。

《滇南本草》记载“为外科之至药,主治一切无名肿毒,攻各种疮毒痈疽,发背痘疔等症最良”。

姚勤等[7]采用耳肿法及毛细管通透性法观察不同剂量重楼醇提物的抗炎作用,结果发现大、中剂量的重楼醇提物对二甲苯所致的耳廓肿胀及醋酸所致的毛细血管渗漏有明显的抑制作用。

临床研究显示,重楼在抗炎方面具有抑菌[8,9]、抗病毒[5]、抗寄生虫[10]、器官保护[11]等功效。

随着中国传统医药不断发展,中药重楼的抗炎特性逐步被重视,本文就近年来中药重楼抗炎活性成分的药理机制作一综述。

1重楼的抗炎活性成分重楼的主要成分包括甾体皂苷(Rhizoma Paridis saponins,RPS)、蜕皮激素、甾醇、多糖、黄酮及脂肪酸酯等,还富含β-氨基异丁酸、丙氨酸、γ-氨基丁酸、丝氨酸、天冬氨酸及Mg,Ca等微量元素[1-3,12]。

其中RPS为主要活性成分,已分离的约72种[12],按苷元的不同分为薯蓣皂苷(diosgenin)和偏诺皂苷(pennogenin)糖苷,并以薯蓣皂苷为主,主要分布在重楼须根中,地上部分仅果皮和叶片中含有[13]。

不同产地滇重楼根茎及根际土壤中无机元素含量比较

不同产地滇重楼根茎及根际土壤中无机元素含量比较李卓蔚;谷文超;许凌峰;周浓;尹福强;詹万龙;赵晶晶【期刊名称】《西南农业学报》【年(卷),期】2022(35)10【摘要】【目的】研究滇重楼根茎及根际土壤无机元素的分布规律,分析栽培品与野生品中无机元素含量的差异,为滇重楼规模化种植及缓解野生资源危机问题提供参考。

【方法】采用微波消解仪对滇重楼根茎及根际土壤进行消解,运用电感耦合等离子体质谱仪对15种无机元素进行测定,并利用SPSS 20.0软件进行统计分析。

【结果】不同产地滇重楼根茎及根际土壤中各无机元素具有显著差异,其中,滇重楼根茎中Ca、Mg、Fe、Al、Na、Cu、Zn、Mn和Ba元素含量较高,根际土壤中Fe、Al、Ca、Mg、Na、Mn、Ba和B元素含量较高;野生品根茎中Mg、Ca、Al、Fe、Cu、Zn、Mn、Ba、B、Co、Ni元素含量整体高于栽培品,野生品根际土壤中Na、Mg、Al、Fe、Mn、B、Co、Se、Sb元素含量整体高于栽培品根际土壤。

从变异系数来看,野生品根茎中(Zn、Ba、Co)和根际土壤中(Mg、Ca、Mo、Sb)元素变异系数大于100%,说明上述无机元素在野生品根茎、根际土壤中的分散程度较大,受野生生长环境影响较大;栽培品根茎中各无机元素变异系数均小于100%,栽培品根际土壤中Mg、Ca、Ba和Sb元素变异系数大于100%,说明栽培品根茎受栽培产地环境影响较小。

由主成分分析可知,Al、Fe、Cu、Zn、Mn、Co、Se等元素为滇重楼根茎中的特征性无机元素,在Zg-4根茎中含量最为丰富;Mg、Al、Se、Ca、Mo等元素为滇重楼根际土壤中的特征性无机元素,在Yt-3产地根际土壤中含量最为丰富。

【结论】大部分无机元素含量在野生品根茎和根际土壤中较栽培品高,且根茎与根际土壤中的无机元素存在显著相关性,这说明滇重楼对无机元素的吸收与各产地根际土壤中无机元素具有一定的关联性,因此在不同地区人工栽培滇重楼时需因地制宜科学施肥。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

武当山区栽培重楼根茎与须根中九种重楼皂苷含量比较吴建平;叶方;陈黎;胡培;朱敏;孙良学;雷攀【摘要】目的:比较武当山区栽培重楼根茎与须根中九种重楼皂苷含量,考察皂苷类次生代谢产物在重楼不同生长部位的分布情况,为重楼药材综合开发利用、节约资源提供参考。

方法采集武当山区种植基地里重楼药材样本,采用高效液相色谱法测定各个样本中九种重楼皂苷的含量。

结果七叶一枝花(华重楼)和云南重楼(滇重楼)中皂苷成分在根茎与须根中均有分布。

多叶重楼、长药隔重楼、狭叶重楼、宽叶重楼等须根中含有部分皂苷成分,但根茎中皂苷含量非常低。

结论重楼须根与重楼根茎有一定的化学等同性,建议重楼须根作为中成药原料使用。

%Objective To investigate the distribution of nine polyphyllins in different parts of Paris polyphylla-by comparing the contents of relative constituents in Paris polyphylla rhizome and fibril in Wudang Mountain, and to pro-vide reference for comprehensive exploitation and saving Paris polyphylla resources. Methods Paris polyphylla sam-ples were collected from planting base in Wudang mountain area. The high performance liquid chromatography (HPLC) method was used to determine the contents of nine polyphyllins. Results Polyphyllins were distributed in both of rhi-zome and fibril in Paris polyphylla Smith var. chinensis (Franch.) Hara and Paris polyphylla Smith var. yunnanensis (Franch.) Hara-Mazz. There were some polyphyllins distributed in the fibril of Paris polyphylla, Paris polyphylla Sm. var. thibetica, Paris polyphylla Sm. var. stenophylla, Paris polyphylla var. latifolia, and the polyphyllins content was higher than that in the rhizome. Conclusion Paris polyphylla have a certain chemical equivalence betweenrhizome and fibril, and the fibril of Paris polyphylla was suggested to be used as raw materials of proprietary Chinese medicine.【期刊名称】《海南医学》【年(卷),期】2016(027)022【总页数】5页(P3613-3617)【关键词】重楼;重楼皂苷;根茎;须根;高效液相色谱法【作者】吴建平;叶方;陈黎;胡培;朱敏;孙良学;雷攀【作者单位】湖北医药学院附属十堰市太和医院药学部,湖北十堰 442000; 湖北医药学院药学院,湖北十堰 442000;湖北医药学院附属十堰市太和医院药学部,湖北十堰 442000; 湖北医药学院药学院,湖北十堰 442000;湖北医药学院附属十堰市太和医院药学部,湖北十堰 442000; 湖北医药学院药学院,湖北十堰442000;湖北医药学院药学院,湖北十堰 442000;湖北医药学院药学院,湖北十堰 442000;湖北济世药业有限责任公司,湖北十堰 442000;湖北医药学院附属十堰市太和医院药学部,湖北十堰 442000; 湖北医药学院药学院,湖北十堰442000【正文语种】中文【中图分类】R280.5重楼是常用中药,始载于《神农本草经》,称“蚤休”,列为下品[1]。

我国境内重楼分布有7种8变种[2],武当山区分布有2种6变种[3],当地统称“七叶一枝花”或“海螺七”,除《中国药典》[4]2015版收载的云南重楼(滇重楼)[Paris polyphylla Smith var.yunnanensis (Franch.)Hand.-Mazz.]或七叶一枝花(华重楼)[Paris polyphylla Smith var.chinensis(Franch.)Hara.]外,药农在采集过程中将其他品种均作为药用重楼采挖。

根据药典规定,重楼药材炮制时要去除须根,而随着中药材资源日趋减少,除积极开展人工种植外,开发法定品种的替代品种或者替代药用部位也是重要手段。

课题组与当地中药种植企业合作在当地开展重楼的人工种植,采集重楼样本,测定重楼皂苷类成分,研究不同部位是否具有化学成分等同性,探讨重楼须根作为药用的可能性,为重楼药材的综合开发利用提供参考。

1.1 仪器戴安UltiMateTM3000型HPLC仪,包括四元梯度泵、自动进样器、柱温箱、紫外检测器、Chromeleon软件数据处理系统(美国戴安公司);JJ200型精密电子天平(美国双杰兄弟集团有限公司常熟双杰测试仪器厂);FA-2004型电子分析天平(上海精科天平);AUW-120D型电子分析天平(日本岛津)。

科盟牌超声清洗机(广州市科洁盟实验仪器有限公司,240 W,40 kHz);顶帅DS-T100A型高速多功能粉碎机(上海市顶帅工贸有限公司,29 000 r/min,1 000 W);H.H.S11-2型电热恒温水浴锅(上海医疗器械五厂,500 W)。

1.2 试药重楼皂苷Ⅰ(批号:111590-201103,含量92.1%)、重楼皂苷Ⅱ(批号:111591-201103,含量93.4%)、薯蓣皂苷(重楼皂苷Ⅲ,批号:111707-201402,含量96.2%)、重楼皂苷Ⅵ(批号:111592-201203,含量95.1%)、重楼皂苷Ⅶ(批号:111593-201303,含量92.5%)等对照品均购自中国食品药品检定研究院;纤细薯蓣皂苷(批号:141125,含量98%)、重楼皂苷D(批号:141105,含量98%)、重楼皂苷V(批号:150716,含量98%)、重楼皂苷H(批号:150714,含量98%)均购自成都普菲德生物技术有限公司。

重楼药材样品采自十堰市茅箭区马家河龙王寨重楼种植基地(见表1)。

样品打粉,过三号筛备用;甲醇、乙腈为色谱纯,水为自制超纯水,其他试剂为分析纯。

2.1 色谱条件色谱柱:Waters Atlantis®T3(3μm,150 mm×4.6 mm),预柱(10 mm×4.6 mm);以乙腈为流动相A,以水为流动相B,梯度洗脱(见表2)。

流速0.8 mL/min,检测波长203 nm,柱温30℃,进样量10 μL。

2.2 溶液的制备2.2.1 对照品溶液的制备精密称取重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷H、重楼皂苷D、重楼皂苷V、重楼皂苷Ⅲ、纤细薯蓣皂苷(X)对照品适量,分别配成4.992 mg/mL、4.900 mg/mL、5.200 mg/mL、5.172mg/mL、4.812 mg/mL、4.780 mg/mL、5.172 mg/mL、5.072 mg/mL、4.852 mg/mL对照品贮备液。

取9种对照品贮备液各1 mL稀释至10 mL容量瓶中,以甲醇定容至刻度,作为对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备精密称取上述重楼药材粗粉0.5 g,置具塞锥形瓶中,精密加入乙醇25 mL,称定重量,水浴加热回流30 min,放冷后再称定,用乙醇补足减失的重量,摇匀,以0.45 μm滤膜滤过,取续滤液作为供试品溶液。

2.3 线性关系考察精密移取混合对照品溶液0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、5.0 mL、10.0 mL分别置10 mL容量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇匀。

分别取10 μL进样,在上述色谱条件下进行分析。

以对照品进样量X(μg)为横坐标,峰面积Y为纵坐标,绘制标准曲线并进行回归计算,得到九种皂苷的回归方程。

结果重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、D、V、Ⅵ、Ⅶ、H、纤细薯蓣皂苷的回归方程分别为:yⅠ=6.688 3x+0.474 9(r2= 0.999 4),yⅡ=6.103 9x-0.155 2(r2=0.999 7),yⅢ=6.626 2x+ 0.027(r2=0.999 7),yD=7.258 7x+0.086 9(r2=0.999 8),yV= 8.423 4x+0.522 6(r2=0.999 6),yⅥ=7.886 1x+0.062 8 (r2=1.000 0),yⅦ=5.959 5x+0.009 9(r2=0.999 8),yH= 6.751 2x+0.131(r2=0.999 8),yX=7.150 7x+0.349 3(r2= 0.999 6)。

表明重楼皂苷Ⅰ在0.099 8~4.992 0 μg、重楼皂苷Ⅱ在0.098 0~4.900 0 μg、重楼皂苷Ⅲ在0.104 0~5.200 0 μg、重楼皂苷D在0.103 4~5.172 0 μg、重楼皂苷V在0.096 2~4.812 0 μg、重楼皂苷Ⅵ在0.095 6~4.780 0 μg、重楼皂苷Ⅶ在0.103 4~5.172 0 μg、重楼皂苷H在0.101 4~5.072 0 μg、纤细薯蓣皂苷在0.097 0~4.85 μg范围内呈良好的线性关系。

2.4 精密度试验取混合对照品溶液10 μL自动进样,重复6次,测定峰面积,结果重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、D、V、Ⅵ、Ⅶ、H、纤细薯蓣皂苷的RSD分别为0.83%、1.05%、1.27%、1.79%、1.25%、1.09%、1.08%、1.83%、1.65%,表明仪器精密度良好。

2.5 稳定性试验取同一供试品溶液分别于0、2 h、5 h、10 h、15 h、24 h进样,每次10 μL,测定峰面积,计算重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、D、V、Ⅵ、Ⅶ、H、纤细薯蓣皂苷的RSD分别为1.41%、1.63%、1.71%、1.83%、1.90%、1.52%、1.79%、1.29%、1.85%,n=6,说明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

相关文档
最新文档