色谱柱安装与保养
一.毛细管柱的安装(一)毛细管柱安装前的检查项目(1)检查气瓶压力以确保有足够的载气、尾吹气和燃气。
载气的纯度不低于99.995%;(2)清洁进样口,必要时更换进样口密封垫圈,进样口衬管和隔垫;(3)检查检测器密封垫圈,必要时更换。
如有必要,清洗或更换检测器喷嘴;(4)仔细检查柱子是否有破损或断裂。
(二)毛细管柱的安装(1)从柱架上将色谱柱两端各拉出大约0.5 m,以用于进样口和检测器安装,避免色谱柱锐折;(2)在柱两端安装柱接头和石墨密封垫圈,向下套柱接头和密封垫圈,离端口大约5厘米;(3)标记和切割柱子。
在柱距两端大约4-5cm处用标记笔标记,拇指和食指尽量靠近切割点抓牢,轻轻地拉并弯曲柱子, 柱会很容易折断。
如果柱子不容易折断,不要用力强行折,换个在离柱端更远的地方再刻一下,使其折断口处光滑。
为确保柱两头切口截面没有聚酰亚胺和玻璃碎片, 可用放大镜检查切口;(4)在进样口安装色谱柱时,先查看仪器说明书找到正确的插入距离,并且用涂改液把这个距离标出来。
将色谱柱插入检测器,用手指拧紧柱螺帽直到它固定住色谱柱,然后再拧螺帽1/4-1/2圈,这样当加压时色谱柱不会从接头脱出来;(5)打开载气,确定合适的流速。
设定柱头压力,分流比和隔垫吹扫至合适的水平。
如果使用分流和不分流进样口,检查清洗分流阀至ON(开)状态,确认载气流过色谱柱,将色谱柱一端浸入丙酮瓶中检查是否有气泡;(6)将色谱柱安装到检测器上时,查看仪器说明书所提供的正确插入距离;(7)检查有无泄漏。
在未仔细检查色谱柱有无泄漏之前对柱子不能加热;(8)清洗系统中的氧气至少数10 min,如果色谱柱被打开暴露到空气中很长时间(几天),那么需要更长时间(1~2h)来清洗系统以排除所有的氧气;(9)设定正确的进样器和检测器温度;(10)设定正确的尾吹气和检测器气流。
点火、打开检测器至ON状态下;(11)注射非保留物质[甲烷(FID)、乙晴(NPD)、二氯甲烷(ECD)、空气(TCD)、.氩气(质谱)]以检验进样器是否正确安装。
如果出现对称峰则安装正确,如果有峰拖尾,重复进样口安装程序。
(三)毛细管柱的老化(1)在比最高分析温度高20℃或最高柱温(温度更低者)的条件下老化柱子两h,如果在高温10min后背景不下降,立即将柱子降温并检查柱子是否有泄漏;(2)如果用Vespel密封垫圈的话,老化完后重新检查密封程度;(3)注射非保留物质以确定合适的平均线速度。
二.毛细管柱的保护在使用毛细管柱过程中,主要是防止固定液流失,因为固定液流失会使柱效能降低。
事实上色谱柱固定液流失是自然的、是热力学平衡过程。
色谱柱固定液聚硅氧烷通过聚合物本身的取代基形成环状分子。
聚合物碎片之间由于取代基作用也可形成一些短键聚合物碎片。
当这些碎片从色谱柱流出,它们会被检测到,从而导致信号的增强。
在毛细管柱使用的全过程中这种反应一直发生。
因此,所有的色谱柱都有不同程度的流失。
氧是导致严重柱流失的主要因素,在色谱分析时尽量减少色谱仪气路系统氧的含量、使用好材料的部件以及选择正确的操作条件,可降低柱固定液的流失,延长柱子使用寿命。
下面介绍几点注意事项:1、使用高纯度的载气。
氧气含量不宜高于1 x10-6g/g;2、利用净化器可以除去较低级别气体中的氧和碳氢化合物杂质。
通常杂质含量可减少到100 x10-6g/g或更少;3、聚合物材料通常不稳定。
因此,调节器主体,阀盘座,密封圈和隔膜应首选金属材料;4、管线只能使用没有油或其它污染物的铜管或不锈钢管,推荐使用制冷级铜管。
5、O形圈或其它聚合物垫圈的阀最好用有焊接金属、波纹形密封垫。
6、整个系统必须无泄露,并且确保样品中不存在非挥发性物质。
因为氧和污染物对固定液的分解有催化作用,会导致柱流失增强;7、在柱子安装后加热柱箱之前,柱子必须用干净的载气清洗15 min。
如果色谱仪是新的,或进样器和仪器管线进行维护或修理过,仪器应当再清洗15至30 min;8、各种固定液的热稳定性不一样,柱流失对背景信号的影响随固定液种类和所受温度变化而变化。
当柱箱温度接近于柱温的上线时柱流失也会增加。
所以应当尽量在较低的温度下工作以延长柱子的使用寿命;9、一旦柱子损坏,由于固定液降解的程度不同,重新老化后有可能改善柱性能。
正确安装毛细管柱毛细管色谱柱安装步骤1.检查气体过滤器、载气、进样垫和衬管等;2.将螺母和卡套装在柱上,并将色谱柱两端口小心切平;3.将色谱柱连于进样口上;4.接通载气;5.将色谱柱连于检测器上;6.进行气体捡漏;7.确定载气流量,再对色谱柱的安装进行检查;8.色谱柱的老化;9.设置确定载气流速;10.柱流失检测;11.分析测试实验混合样品。
需要的安装工具和附件1.切割工具如金刚石头或碳头笔、宝石笔头或瓷楔;2.放大镜(10—20X);3.标尺;4.扳手;5.卡套;6.溶剂瓶;7.干净的注射针;8.适用的非柱保留化合物样品;9.色谱柱测试混合样品;10.流量计;11.其他附件:进样垫、干净的衬管、衬管卡套/O形环等。
步骤1:检查气体过滤器、载气、进样垫和衬管等检查进样垫和气体过滤器,保证辅助气和检测器用气通畅有效。
如果以前做过较脏样品或活性较高的化合物,需要将进样口衬管清洗或更换。
步骤2:将螺母和卡套装在柱上,小心切平柱子两端口在色谱柱的一端装上相应的螺母和卡套,此时色谱柱端口无前后之分,色谱柱支架的支撑部分应总是朝向着柱箱门。
安装好螺母和卡套后,将色谱柱端口切平,并用放大镜进行检查。
[熔融石英毛细管和切割]将色谱柱所要切割的部分用一根手指顶住,用合适的切割工具(见需要的安装工具和附件列表)在外壁轻轻的划上一个标记,不要直接进行切割。
然后捏柱子在标记处折断。
再使用放大镜对切割后的端口进行检查,以确定切口和管壁成直角,并且没有残留的碎屑,没有毛边或不平的切割面(见图2)。
如果没有问题,最好在切割一次。
步骤3:色谱柱连于进样口上色谱柱在进样口中的嵌入溶度根据所使用的GC不同而不同。
正确合适的嵌入能最大可能地保证实验结果的重现性。
通常来说,色谱柱的顶端应保持在进样口衬管中的中下部,当进样针穿过隔垫完全插入进样口后,如果针尖与衬管中的色谱柱顶端相差1-2cm,这就是较为理想的状态(具体的嵌入浓度和方法参见所使用GC的随机手册)。
从色谱柱架上取出需要连接的足够的长度,并按步骤2切割柱子,连接到进样口。
避免用力弯曲压挤毛细柱,并小心不要让标记牌等有锋利边缘的物品与色谱柱接触摩擦,以防柱身断裂或受损。
连接螺母的安装:将色谱柱正确嵌入进样口后,用手把连接螺母拧上,拧紧后(用手拧不动了)用钣手再多拧1/4-1/2圈,如果色谱柱还有松动,在拧1/4圈,保证安装的密封程度。
因为不紧密和安装,不仅会引起装置的泄漏,而且有可能对色谱造成快速永久的损害。
在螺母完全连接后,小心不要再将色谱柱柱上下移动。
注意:如果在进样口或检测器有一定温度时安装色谱柱,安装效果可能会更好,因为卡套,特别是那些材质为石墨/Vespel的,在一定温度下会软化,易变形,也就更容易封住所要密封的部位。
色谱柱装好后,等进样口或检测器的温度降下来,再安装其他部件。
步骤4:接通载气当色谱柱与进样口连接好后,接通载气。
调节柱前压力得到合适的载气流速(见表2)。
在色谱柱的另一端(空端),插入装有己烷的样品瓶中,正常情况下,我们可以看见瓶中稳定持续的气泡,如果没有气泡,就要重新检查一下整个气路有无泄漏。
等所有问题解决后,将色谱柱端口从瓶中取出,擦拭干净,保证柱端口无溶剂残留,再进行下一部安装。
警告:当空气中氢气的含量在4-10%时,这样的混合气体就有爆炸的危险。
虽然气体本身的扩散会降低爆炸的可能,但还是有一定的危险性,所以一定要保证实验室有良好的通风系统,防止氢气过分的聚集。
步骤5:将色谱柱连于检测器上其安装和所需注意的事项与以上色谱柱与进样口联接(步骤3)部分所讲述的大致相同。
如果在应用中系统所使用的是ECD或是NPD等,那么在老化色谱柱时,使它不与检测器相接,那么这一类的检测器会更快地达到稳定,关于色谱柱老化请见步骤8的内容。
步骤6:进行气体检漏在色谱柱加热前,一定要对GC系统进行检漏,当我们对进样口和检测器进行载气捡漏时,使用电子检漏是最为有效的方法之一。
建议不要使用Snoop等肥皂泡,它有可能由被检测处进入色谱柱和其它装置中,从而对系统有所损害。
而且不能使用Snoop对正在加热的进样口和检测器装置进行检漏。
如果一定要用液体检漏,建议使用50/50的异丙醇/水的混合溶液。
步骤7:确定载气流量,再对色谱柱的安装进行检查警告:如果不通入载气就对色谱柱进行加热操作,就会快速并且永久性地损坏色谱柱。
当色谱柱安装好后,在依照步骤4对载气流量进行确定,或者使用非保留化合物样品进行检测,我们可以通过分析得到的样品谱图来确定进样口和检测器的安装是否正确。
表3中列出了常用的非保留化合物样品。
实验过程:如果使用分流/不分流进样口,将色谱柱的温度保持在35-40 ℃,使用分流模式进1-2mL样品。
如果使用的是不分流大口径进样口,由于样品不被分流进样,进样前应先对样品进行稀释,以免得到饱和的平头峰形。
这样,我们应该得到一张峰形尖锐的谱图,而使用不分流大口径进样口,色谱柱可能会有轻微拖尾。
如果得不到色谱图,有可能是根本就没有载气通过系统。
那就需检查一下调节器、气体附件和流量控制器的设置是否正确。
当然也可能是检测器、记录仪和注射针等出了问题。
如果色谱峰有明显的拖尾现象,可能是进样口有泄漏,或是色谱柱安装不完整,也有可能是分流比设置得太低等。
我们需要重新对色谱柱进行安装并对进样口进行检漏。
只有完全解决了这个问题,才能进行下一步。
表3。
常用的非保留化合物样品检测器化合物1FID甲烷,乙烷TCD 甲烷,乙烷,氩气,空气ECD 二氯甲烷2,SF6,CF2C12NPD 乙腈2,3PID 乙烯,乙快MS甲烷,乙烷,氩气,空气1.对于PLOT柱,以上大多数化合物都有明显地保留吸附2.不要直接液体进样;建议使用顶空进样装置3.当温度小于是100℃时,乙腈在大多数的色谱中都有保留。
使用时需将色谱柱的温度提高到100℃或设置更高的线速度步骤8:色谱柱的老化色谱柱安装和系统检漏工作完成后,就可以对色谱柱进行老化了。
对色谱柱升至一恒定温度,通常为其温度上限。
特殊情况下,可加热至高于最高操作10-20℃左右。
但是一定不能超过色谱柱的温度上限,那样极易损坏色谱柱。
升温速度一定要快,不要将程序声升温的速度设定的太慢。
当得到老化温度后,记录并观察基线。
比例放大基线,以便容易观察。
初始阶段,基线应持续上升,在到达老化温度后5-10分钟开始下降,并且会持续30-90分钟。
当达到一个固定的值后,基线就会稳定下来。
xdb色谱柱说明书
xdb色谱柱说明书摘要:1.色谱柱概述2.色谱柱的性能指标3.色谱柱的应用领域4.色谱柱的维护与保养正文:色谱柱是液相色谱、气相色谱等分析仪器中的核心部件,用于实现样品的分离、检测和分析。
本文将介绍xdb色谱柱的性能指标、应用领域以及维护保养方法,帮助用户更好地了解和运用这款优秀的色谱柱。
一、色谱柱概述xdb色谱柱是一款高性能的色谱柱,采用先进的固定相制备技术,具有良好的分离效果和稳定性。
它适用于多种分析领域,如有机化学、生物化学、环境监测等。
二、色谱柱的性能指标1.分离效果:xdb色谱柱具有较高的分离效率,能够快速、准确地实现样品的分离。
2.稳定性:xdb色谱柱在长时间的使用过程中,固定相不易流失,保证了色谱柱的稳定性。
3.耐压性:xdb色谱柱具有较好的耐压性能,适用于高压液相色谱等分析条件。
4.重现性:xdb色谱柱具有较好的重现性,保证了分析结果的准确性。
5.柱寿命:xdb色谱柱的固定相具有较长的使用寿命,降低了用户的运行成本。
三、色谱柱的应用领域1.有机化学:xdb色谱柱可用于分析有机化合物,如芳香烃、醇、酮、酸等。
2.生物化学:xdb色谱柱可用于分析生物样品,如蛋白质、核酸、氨基酸等。
3.环境监测:xdb色谱柱可用于监测环境中的有害物质,如挥发性有机物、重金属离子等。
4.食品分析:xdb色谱柱可用于分析食品中的添加剂、农药、兽药等。
5.医药分析:xdb色谱柱可用于分析药物成分、杂质和代谢物等。
四、色谱柱的维护与保养1.色谱柱在安装和使用过程中,应轻拿轻放,避免强烈震动和撞击。
2.遵循仪器操作规程,确保色谱柱在合适的分析条件下使用。
3.定期检查色谱柱的性能,如分离效果、柱压等,发现异常应及时处理。
4.更换色谱柱时,应使用相同品牌、相同规格的色谱柱,以保证分析结果的稳定性。
5.色谱柱在使用过程中,应定期清洗,以去除残留的样品和杂质。
通过以上对xdb色谱柱的介绍,相信大家对这款色谱柱有了更深入的了解。
液相色谱柱的使用及保养
C18, C18, C18, C18,
phenyl, CN, NH2, Silica C8, phenyl, CN, Silica C8, Silica C4 C18, C8
色谱柱的清洗
对所做的样品要有充分的了解
用对该样品洗脱能力最强的流动相清洗
硅胶柱的一般方法
先用甲醇洗去极性杂质
回收率低,不出峰
“不可逆”吸附 固定相过强或流动相过弱 非特异性吸附
色谱柱以外的因素(一)
“柱效”问题,不一定是色谱柱问题!
仪器问题:连接不好造成死体积
进样器
检测器
管路,连接口 保护柱 在线过滤器堵塞
流动相问题:色谱柱未平衡好 进样量太大
色谱柱与仪器的联接
影响实验结果好坏的最重要因素
是决定性的步骤
样品预处理常用的方法
高速离心 过滤、超滤 选择性沉淀 衍生反应 液-固萃取 其他
/ 液-液萃取
Sep-Pak样品处理小柱
样品预处理的过程
去除微粒
过滤
过滤膜/过滤装置
有机(0.5m)/无机(0.45m)
膜片可更换
流速∶1.0 ml/min 纸速∶20 cm/min (用记录仪时,接检测器10mV档) 检测器灵敏度∶0.5-1.0AUFS (用记录仪时) 检测器时间常数∶小于0.2
谱带展宽(ml) =1000×W(cm)/20 (记录仪) =1000×W(min) (工作站)
液相色谱实用技术(二)
样品衍生∶氨基酸分析
PT法 IA CG O方 NS C
R
-
N C H O CO ຫໍສະໝຸດ 2氨 基 酸异酯 硫 氢 酸 苯
S R N H O H C C H NC O
小议色谱柱的维护与保养
生堵塞 . 柱子将不可能被彻底恢复 , 只 能 通 过 去 掉 进 口端 的 部 分 填 料 。重 新 填 充
进 行 有 限 的柱 效 恢 复 。 而 且 修 复 的厚 度
是2 — 5 mm。
柱 两 大类 。 液 相色 谱 通 常 均 采 用 填 充柱 。
色 谱 柱 的 分 离 效 果 取 决 于 所选 择 的 固定
叠氮化钠或柳硫汞 ) 中, 并 将 购 买 新 色 谱
柱 时 附 送 的 堵 头堵 上 。 三 、色 谱 柱 的维 护 与 保 养 在 高 压 液 相 色谱 中的 应 用
的主要原因是 : ①溶剂 中的不溶物 ; ② 样
品中的不溶物 ;③泵进样器等 中的不 溶 物: ④柱 内不溶物的形成等 。如果色谱柱
样的次数增加 。 出 现 色谱 峰 高 降 低 , 峰 宽
加 大 或 出现 肩峰 。 柱效下降。 需 要定 期 进
行 彻 底 清 洗 和再 生 .不 同 的 色 谱 柱 清 洗 方法各不相同比如: 1 . 反 相 柱 。分 别 用 甲醇 : 水= 9 0 : 1 0 , 纯 甲醇 ( H P L C级 ) , 异 丙醇 ( H P L C级 ) , 二
要 的分 支 。 在 人 类 进 人新 时代 之 际 , 人 们 面临 着 在 信 息 科 学 、生 命 科 学 、材 料 科 学、 环 境 科 学 等 领 域 的快 速 发 展 的 挑 战 , 在 这 些 领 域人 才 的 需 求 成 为 国家 高 度 发 展 的 至关 重要 的 因 素 。而 色 谱 技 术 是 生
保持 色谱 柱 反 方 向连 接 .用 低 于 0 . 5 7 m l / m i n ? 流速冲洗-d , 时 。如 果 压 力 不 下 降 , 则 要 看 内置 过 滤 器 是 否 被 堵 塞 .如 果 被 堵 塞 应 冲 洗 或 更 换 .若 进 口端 的 填 料 发
液相色谱柱的使用和维护保养
液相色谱柱的使用和维护保养液相色谱柱是一种广泛使用的分离技术,可用于分离和测定复杂混合物中的组分。
由于液相色谱柱具有精确分离、操作简便、分离效率高等特点,因此,越来越多的实验室都开始使用该技术。
在使用液相色谱柱时,正确的维护保养非常关键。
本文将介绍液相色谱柱的使用方法和维护保养技巧,以便确保您的分离实验能够得到最佳的结果。
一、液相色谱柱的使用1. 准备工作使用液相色谱柱之前,必须先进行预备工作。
这包括:清洗和准备液相色谱柱以免携带有污染物。
准备需要分离和测定的样品。
准备适当的流动相。
流动相必须符合样品的性质。
液相色谱柱的流动相应该是无色的,纯净的水或相应的缓冲液,并具有必要的缓冲能力。
根据柱的尺寸来选择适当的样品注射量。
2. 柱的装配通常情况下,液相色谱的柱是由管状的柱壳、填充柱节、柱端固定件和柱段之间的密封件组成。
在对柱进行装配的时候,对组件应该加强检查以保证每一个元件的质量。
柱被放置在可控压力的色谱装置中,直到达到设定的温度,流动相通过柱床高度。
在样品通过柱床的过程中,要确保流动相的速度恰好足够将所有的组分都分开并在规定的时间内溶出。
3. 分析过程准备工作完成后,可以开始进行样品的分离实验。
在整个过程中,以下措施应予以注意:在样品从样品室进入色谱柱之前,流动相必须在柱中流动。
否则,在注入样品时,将有空气囤积在柱床中,会在透射检测器处产生噪音。
更换液相色谱柱的流动相时需要小心,因为对于一些化学品来说,即使是微量的杂质也会对结果产生影响。
如果发现柱床粘住或困住,不应使用力量来拉动柱子,而应该使用相反方向的流动相,以使样品回到某一个位置,并反向流动一会,这样可以避免样品损坏柱子床。
二、液相色谱柱的维护保养液相色谱分析的成功与否,除了预备工作和分析过程外,还与样品的制备、取样位置以及样品进入液相色谱柱中的流动相的条件等因素有关。
因此,经常做好液相色谱柱的保养工作,可以有效防止柱子损坏,延长其寿命并保证实验结果的准确。
色谱柱的使用说明
色谱柱的使用说明色谱柱是一种在色谱分析中广泛使用的关键设备,它能够通过分离混合物中的组分以及测定它们的相对含量。
不同的色谱柱具有不同的分离机理和特点,因此每种色谱柱在使用前都需要仔细阅读其使用说明书,以了解其正确的使用方法和注意事项。
以下是色谱柱使用说明的一般内容:1.色谱柱的储存:色谱柱在储存期间需要避光、避湿、避高温,以免对其质量产生不良影响。
柱子应垂直存放,避免受到侧面压力。
定期检查柱子上是否有裂纹、损坏或其他异常情况。
2.安装色谱柱:在安装色谱柱前,需要进行适当的准备工作,如用洗涤剂或溶剂清洗色谱柱,以去除表面的杂质。
然后在柱子的接口处使用密封垫圈,确保柱子和接口之间的密封性。
安装时,需要根据仪器的要求和色谱柱的规格调整柱床高度和流速。
安装完成后,检查柱床是否均匀填充。
3.色谱条件的选择:正确选择色谱条件对于得到准确的分析结果至关重要。
色谱柱的选择应根据样品的特性、分离需求和分析目标来确定。
例如,对于非极性化合物的分离,应使用非极性柱;对于极性化合物的分离,则需要使用极性柱。
此外,还需合理选择进样方式、流速、温度等色谱条件,并根据需要进行优化。
4.样品的制备和进样:对于色谱分析之前,样品可能需要经过一系列的预处理步骤,如萃取、浓缩、溶解等。
进样前,需要对样品进行适当的稀释,以避免柱子堵塞或过载。
确保样品进样前是清洁无杂质的,以免污染柱子或影响分析结果。
还需根据样品的特性,选择适当的进样方式,如气相色谱中的气态进样、液相色谱中的静态进样或动态进样等。
5.色谱的运行和操作:在进行色谱分析时,需要根据选择的色谱条件设置好仪器的运行参数,如载气流速、柱温、检测器灵敏度等。
同时,还需注意检测器的基线稳定性、测量范围、线性范围等,以确保准确的定量分析。
在运行过程中,还需注意实验室的环境条件,如温度、湿度等,并及时记录实验过程和结果。
6.色谱柱的维护和保养:为了延长色谱柱的使用寿命和维持准确的分析结果,需要进行定期的维护和保养工作。
阳离子色谱柱安全操作及保养规程
阳离子色谱柱安全操作及保养规程前言阳离子色谱柱是分离和纯化药物、天然产物、食品、环境样品等的重要工具。
但在使用时需要注意安全,并保养阳离子色谱柱,以确保其正常工作,延长使用寿命。
本文档旨在介绍阳离子色谱柱的安全操作和保养规程,帮助用户正确地操作和保养阳离子色谱柱。
安全操作规程1. 系统检查在使用阳离子色谱柱前,需要对系统进行检查。
首先需要检查所有的连接件和管路,确保它们的完整性和紧密性,特别是对于易爆管或者高压管应该进行一定的检查。
此外,也需要检查缓冲液和样品瓶中是否有微生物。
2. 样品处理使用阳离子色谱柱前必须将样品处理干净,特别是有机物和有毒物质。
对于强酸、强碱或热处理的样品一定要冷却并去除沉淀。
3. 操作前校准测量设备在操作前,要对所有测量设备进行校准,以确保它们能够精确地记录分离和纯化过程的参数。
4. 防护措施在操作阳离子色谱柱时,必须佩戴适当的防护装备,如实验室外衣、手套、紫外线防护眼镜等。
5. 操作时提防高压操作时必须小心谨慎,要避免高压发生爆炸,不要超过安全规定的压力。
必须根据情况放电以保证安全。
6. 固定阳离子色谱柱在操作前先固定阳离子色谱柱,以免其移动或滑动。
7. 解调离子色谱柱在离子色谱柱解调操作时,需要先调整流量和压力,调整后再开启气路,并逐渐提高压力,保持较低的流量,避免阻塞。
8. 停机保养操作后要进行及时的维护和保养,用适当的保养液冲刷阳离子色谱柱,清洗整个色谱系统,并弄干,以免气路被污染。
保养规程保养阳离子色谱柱可以延长其使用寿命,并保证其正常工作。
以下是保养规程的具体内容:1. 定期清洗定期清洗可保持阳离子色谱柱的最佳性能和寿命。
定期清洗需要使用适当的清洁液来清洗分类器和色谱柱。
2. 避免温度过高放置阳离子色谱柱的环境需要容易进行管理,并且温度和湿度需要在规定范围内。
避免温度过高,以保留阳离子色谱柱的完整性和性能。
3. 正确存储阳离子色谱柱应该存放在干燥、阴凉和洁净的地方,避免阳光、潮湿和震动。
(完整版)色谱柱使用维护保养操作规程
目的:建立色谱柱使用维护保养操作规程,规范色谱柱的使用、维护行为。
范围:适用于色谱柱的使用、维护和保养。
依据:责任:药分部内容:1.操作规程一般要求是一根柱子用于同一个系列的产品,稳定性试验用专用柱。
1.1.新色谱柱在使用之前,首先应查看说明书,检查柱子的pH值范围是否与待验产品的要求相一致,确认柱子和仪器的接头以及管路是否相匹配,并注意柱子上标示的流向箭头,一切确认无误后,编上编号,在《色谱柱启用、报废台帐》上登记开始使用时间、生产厂家、型号规格等。
1.2.使用时,应按各色谱柱的要求进行色谱柱的维护保养,并在色谱柱使用登记表中登记使用日期、所测产品的名称及批次、使用前后维护保养的具体内容;1.3使用后,及时填写《色谱柱使用台帐》。
2.维护规程2.1.液相色谱柱的维护2.1.1. 色谱柱使用时,确认柱子的编号、型号规格与待验产品的要求相一致,流动相的pH值应与柱子说明书上规定的pH值相适应,然后旋开两端的封头,接到高效液相色谱仪上,使色谱柱的箭头指向与流动相流向一致。
2.1.2.流动相应经过0.45um滤膜过滤并脱气后使用,柱压不要超过300bar(3000psig),最高操作温度不得超过60℃。
2.1.3.流动相如果是非盐类的,用流动相冲洗约30min,按《高效液相色谱仪操作规程》进行操作,然后进行样品的检验。
如果是盐类的,用有机相:水=10:90的溶液冲洗约10min,再换上相对应的流动相,按《高效液相色谱仪操作规程》进行操作,然后进行样品的检验。
2.1.4.检验完毕,如流动相中含有盐类物质,应先用有机相:水=10:90的溶液以1ml/min的流速冲洗约40min,然后用HPLC级的乙腈或甲醇以1ml/min的流速冲洗约30min,关闭液相色谱仪,取下色谱柱,在柱两端旋上封头,以防止柱内的有机溶剂流失而使柱内填料发干变松,柱效下降。
不用的色谱柱放入液相色谱分析室的专用贮存柜中。
2.1.5.拿用时要轻拿轻放,避免剧烈震动。
(完整版)色谱柱的使用及维护
前言液相色谱的分离原理是,在色谱柱流动相中样品的不同组分与固定相发生吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和等作用,由于作用力的大小、强弱不同,各种组分在固定相中滞留的时间也不同,因而先后从以固定相中流出而得到分离。
因此液相色谱分离的关键之一是色谱柱中的固定相。
柱效的好坏直接影响目标化合物的分析和检测。
但在液相色谱运行过程中,色谱柱极易发生问题,因此掌握正确使用和维护色谱柱的知识非常必要。
色谱柱使用过程中容易发生柱堵塞引起系统压力过高;柱效低引起峰拖尾、变宽;柱污染、损坏导致鬼峰等问题。
引起这些问题的内在原因有:(1) 硅羟基的死吸附。
色谱柱的基材硅胶粒子表面存在硅胶羟基。
任何物质在色谱柱中都存在双分配效应,即在流动相与固定相之间进行分配,又在流动相与硅羟基之间进行分配。
被分析物质被硅羟基吸附称为非特异性吸附,或称死吸附。
当硅羟基对被分析物质的吸附趋近于饱和状态时,色谱柱柱效下降,峰形出现拖尾、变宽。
(2) 重金属。
色谱柱的基材硅胶粒子无论纯度多高,无论怎样处理,都会有不少于5 ×10- 6 的重金属以金属氧化物的形式残存在硅胶粒子的表面,这些金属氧化物很容易与其它化合物形成螯合物,使其被氧化,产生不对称峰或拖尾峰。
例如儿茶素和大多数中药,因含有多酚结构,极易被金属氧化物氧化,影响其分离效果。
(3) 碳流失。
固定相经长期使用,会有部分碳链被流动相洗脱下来,随流动相一起流出色谱柱外, 造成碳流失。
(4) 缓冲液中盐的析出。
在做色谱分析时,有时流动相中会含有缓冲盐溶液。
分析结束后,如果没有先用含一定配比的水相流动相冲洗,而直接用纯有机相冲洗,瞬间柱子中的微环境是高有机相、低水相。
这时流动相中的缓冲盐溶液极易析出盐,将柱子堵塞,使柱压升高,柱效下降。
(5) 色谱柱变干。
如果对色谱柱保存不当,使色谱柱中的保存液全部挥发,柱子内部变干,造成色谱柱的损伤,影响分离效果。
2 色谱柱的使用新柱使用前应先检查产品包装、外观是否完好。
气相色谱仪更换色谱柱操作流程
气相色谱仪更换色谱柱操作流程
几个步骤如下:
1.关闭GC系统。
首先,关闭气相色谱仪,等待各个部位温度降至室温。
2.拆卸旧色谱柱。
关闭进样口和出样口的阀门,打开气阀,等待气体排出,使
用扳手和螺丝刀拆下旧色谱柱,注意不要损坏仪器接口,拆下旧色谱柱后,检查是否有污染或损伤,必要时进行清洁或更换。
3.准备新色谱柱。
确认新色谱柱的型号和规格与旧色谱柱相匹配,检查新色谱
柱是否有裂纹或损坏,使用适当的工具(如扳手、钳子)和新色谱柱的衬垫(如石墨垫片、Vespel垫片)。
4.安装新色谱柱。
在安装新色谱柱之前,确保新色谱柱已经减压,以避免爆炸
的危险,安装新色谱柱时,注意柱子的位置和方向,保证气流顺畅,在气相色谱端安装垫片,并确保垫片方向正确,在质谱端同样安装垫片,注意离子传输线的长度。
5.测试和调整。
打开进样口和出样口的阀门,关闭气阀,打开气源,等待样品
进入分离柱,使用标准化合物进行测试,检查分离效果,如果效果不满足要求,进行柱温和流量的调整。
6.清理和维护。
更换色谱柱后,清理工作区域,确保仪器清洁,检查仪器是否
正常运行,如有必要,进行适当的保养试验。
请注意,更换色谱柱的具体步骤可能会根据不同的气相色谱仪型号和制造商的指导手册有所不同。
在操作过程中,务必遵循制造商提供的操作说明书和安全指南。
常用液相色谱柱的规范化使用与保养标准操作规程
目的:规范液相色谱柱的使用与管理;液相色谱柱标准化老化与再生;剖析液相色谱柱常见问题与解决办法。
延长色谱柱使用寿命,降低色谱柱使用成本。
提高分析人员液相色谱柱使用与维护水平。
范围:适用于使用高效液相色谱仪的仪器分析操作人员及相关管理人员。
责任:设备员、液相操作人员、质控主管、质量管理部经理、质量受权人。
内容:1.定义1.1 液相色谱柱:指用于液相色谱分离的柱形固定相,由柱管、压帽/卡套、筛板(滤片)、填料、接头等组合而成,可用于液相色谱分析与制备。
1.2 色谱柱再生:指色谱柱在非正常情况下,针对异常现象及原因采取的一系列修复补救措施,以提高色谱柱柱效和延长其使用寿命的处理过程。
1.3 运载溶剂:指色谱柱生产厂商在柱出厂测试合格后饱和于色谱柱内的合适溶剂,以利于运输保存,多与保存溶剂相同。
1.4 保存条件:指色谱柱生产厂商根据不同柱类型及其色谱柱填料的制备、键合、装填、高压定型、净化干燥等工艺条件的不同要求而特别制定的色谱柱保存前净化饱和的处理程序与储存条件,包括净化程序、净化溶剂和保存溶剂、保存条件。
1.5 保存溶剂:用于保存色谱柱并指定了溶剂组成与比例的溶液。
1.6 反相色谱柱:以键合非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。
常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物等。
常用的填充剂有十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。
1.7正相色谱柱:用硅胶填充剂,或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱,常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰基键合硅胶等。
1.8氨基柱(-NH2):可以同时用于正相条件和反相条件,但多用于正相色谱条件。
使用时需注意,正相反相交替使用时必需用异丙醇过度,保证柱保存溶剂与流动相互溶。
[氨基柱出厂保存溶剂多用正相溶剂,例如:正己烷-乙腈(99:1)]。
2.液相色谱柱的使用及保养2.1普通C8及C8反相色谱柱的老化处理与使用保养程序新购色谱柱出厂前均采用适合的运载溶剂饱和,密封,由于运输过程周期较长,柱床容易干涸,所以新柱使用前需重新饱和与老化。
