反相高效液相色谱法测定尿样中维生素C、B 1 和B 2 的浓度
高效液相色谱法测定保健食品中维生素B2的含量
高效液相色谱法测定保健食品中维生素B2的含量夏冰;蔡大川;郑家概;林钦恒;孔丹琪;王李平【期刊名称】《山东化工》【年(卷),期】2016(45)13【摘要】建立高效液相色谱法测定保健品中维生素B2的测定方法.色谱柱:Welch Ultimate(R)XB-C18(4.6×250mm,5μm);流动相:0.1 moL·L-1KH2PO4-2％乙腈;流速1mL·min-1;柱温:30℃;检测波长:260 nm.维生素B2在100～500μg/mL线性范围内线性关系良好,平均回收率为99.6％,RSD =0.73％ (n =6).该方法简便可行,重复性好,可适用于保健品中测定维生素B2的方法.【总页数】3页(P79-81)【作者】夏冰;蔡大川;郑家概;林钦恒;孔丹琪;王李平【作者单位】中国广州分析测试中心广东省化学危害应急检测技术重点实验室,广东广州510070;中国广州分析测试中心广东省化学危害应急检测技术重点实验室,广东广州510070;中国广州分析测试中心广东省化学危害应急检测技术重点实验室,广东广州510070;中国广州分析测试中心广东省化学危害应急检测技术重点实验室,广东广州510070;中国广州分析测试中心广东省化学危害应急检测技术重点实验室,广东广州510070;中国广州分析测试中心广东省化学危害应急检测技术重点实验室,广东广州510070【正文语种】中文【中图分类】O657.7+2【相关文献】1.高效液相色谱法测定五维葡钙口服溶液中维生素B1、维生素B2的含量 [J], 刘元欢;彭建梅;罗燕;陈东波2.高效液相色谱法测定六维胶丸中维生素B1、维生素B2、烟酰胺含量 [J], 海彩虹;董锦燕;盛爱军3.反相高效液相色谱法测定复方肝浸膏片中维生素B1、维生素B2的含量 [J], 曾玉梅4.高效液相色谱法测定功能性饮料中维生素B1、维生素B2含量 [J], 黄伟志; 黄桂东; 钟先锋5.高效液相色谱法测定保健食品中维生素B2的含量 [J], 李煜;黄美山;程琳琳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定维生素B2片的含量
高效液相色谱法测定维生素B2片的含量王景;胡守莲;邱栋梁;张红伟【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2012(31)1【摘要】目的建立高效液相色谱(HPLC)法测定维生素B2片的含量.方法采用Agilent HC-C18(100 mm×4.6 mm,3.5 μm)色谱柱,以乙腈-0.008 mol·L-1己烷磺酸钠-三乙胺-冰醋酸( 12:87:0.25:0.75)为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长267 nm,进样:20 μL,柱温30 ℃.结果维生素B2在0.05～0.40 μg范围内线性较好(r＝0.999 9),平均回收率为98.56% (RSD为0.37%).结论该方法快速、简便、可靠、准确度高、重复性好,用于维生素B2片含量测定.【总页数】2页(P91-92)【作者】王景;胡守莲;邱栋梁;张红伟【作者单位】解放军第153医院药剂科,郑州450007;河南省信阳市食品药品检验所,464000;河南省信阳市食品药品检验所,464000;河南省信阳市食品药品检验所,464000【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.荧光法测定医用维生素B2片剂中维生素B2的含量 [J], 张福娣;蔡碧琼;杨远才2.HPLC法测定复合维生素B片维生素B1、维生素B2、烟酰胺的含量及含量均匀度 [J], 陈华龙;刘旺培3.反相高效液相色谱法测定复方肝浸膏片中维生素B1、维生素B2的含量 [J], 曾玉梅4.高效液相色谱法测定复方肝泰乐胶囊中维生素B1、维生素B2、烟酰胺和苯巴比妥含量 [J], 杨帆;李海英5.高效液相色谱法测定功能性饮料中维生素B1、维生素B2含量 [J], 黄伟志; 黄桂东; 钟先锋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
食品中维生素B_1和B_2的快速高效液相色谱分析
食品中维生素B_1和B_2的快速高效液相色谱分析
暴永平;张宇秋;王朝旭;刘志诚
【期刊名称】《哈尔滨医科大学学报》
【年(卷),期】1991(25)3
【摘要】本文介绍了一种应用高效液相色谱法同时定量测定食品中维生素B_1和B_2的快速分析方法。
在5种食品中应用该方法测定的维生素B_1、B_2含量同Fellman等人介绍的方法比较,结果基本一致。
本方法有快速、准确,灵敏、经济等优点。
回收率维生素B_1为94.4±1.27%,维生素B_2为93.8±3.53%。
最小检出量分别为0.1ng和O.5ng。
【总页数】3页(P225-227)
【关键词】维生素B;食品;高效液相色谱
【作者】暴永平;张宇秋;王朝旭;刘志诚
【作者单位】哈尔滨医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R151.3
【相关文献】
1.高效液相色谱-荧光法与高效液相色谱-二极管阵列法测定食品中维生素B1含量的比较研究 [J], 王柳玲;黄伟乾;吴国辉;高静茵;吴芷欣;谭键辉
2.食品中维生素的高效液相色谱分析——(Ⅰ)同时测定多种维生素 [J], 郑春贤;李真
3.食品中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2的高效液相色谱测定方法 [J], 王君;刘秀梅
4.用高效液相色谱测定食物中维生素B_1、B_2含量 [J], 蒋德云;王海燕;楼超英;乔坤云
D-二极管阵列分光光度法同时测定食品中的维生素B_1和维生素B_2 [J], 刘红河;黎源倩
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维生素b1片含量测定的方法验证
维生素B1在体内参与糖代谢，对维持神经系统正常 功能和防止脚气病有重要作用。
维生素B1的测定方法
荧光分光光度法
01
利用维生素B1在特定波长下的荧光特性进行定量分析。
高效液相色谱法
02
通过色谱柱将维生素B1与其他杂质分离，再通过紫外检测器进
行定量。
微生物法
03
利用含有维生素B1的微生物培养基培养微生物，通过测定微生
维生素B1片含量测 定的方法验证
目 录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 结果分析 • 结论
01
CATALOGUE
实验目的
确定维生素B1片的含量
目的
通过实验测定，确定维生素B1片 中维生素B1的含量，为生产质量 控制和药品监管提供依据。
方法
采用高效液相色谱法（HPLC）进 行测定，通过色谱柱分离、检测 器检测，计算峰面积并外标法定 量。
采用合适的统计分析方法，如平 均值、标准差、变异系数等，对 数据进行分析和比较。
实验误差分析
误差来源
分析实验过程中可能产生的误差来源，如称量误差、滴定误差、 读数误差等。
误差传递
根据误差来源，计算误差对最终结果的影响，并评估误差传递的 规律和特点。
误差控制
针对误差来源，采取相应的措施，如使用高精度天平、规范操作 流程等，以减小误差对结果的影响。
05
CATALOGUE
结论
实验结论总结
实验结果表明，采用高效液相色谱法测定维生素B1片 的含量是可行的，该方法具有较高的准确度和精密度
，能够满足药品质量控制的测定要求。
输标02入题
在实验过程中，我们发现维生素B1片在波长为 246nm处有最大吸收，因此选择该波长作为检测波长 较为合适。
高效液相色谱法同时测定乳粉中维生素B1、B2
高效液相色谱法同时测定乳粉中维生素B1、B2何丽姗;聂懿;谢杰菲;李首道【期刊名称】《粮食与食品工业》【年(卷),期】2018(25)5【摘要】本实验建立了高效液相色谱法同时测定婴幼儿配方乳粉中维生素B1、B2的提取分析方法.试验将婴幼儿配方乳粉经酸和碱调pH值,过滤液经碱性铁氰化钾衍生,正丁醇提取,取正丁醇层用微孔滤膜(0.45 μm)过滤.以水和甲醇为流动相,利用高效液相色谱分析,外标法定量.试验结果表明:维生素B1、B2分别在0.0～2.0μg/mL范围内线性良好,相关系数r≥0.999;回收率在84.0％～92.2％之间,RSD＜5％.与现行标准方法相比较,本方法前处理过程简单,流动相对色谱柱损坏小,测定结果准确度高,重现性好,可用于婴幼儿配方乳粉中维生素B1、B2含量测定的快速、批量分析.【总页数】5页(P59-63)【作者】何丽姗;聂懿;谢杰菲;李首道【作者单位】武汉食品化妆品检验所,武汉430012;武汉食品化妆品检验所,武汉430012;武汉食品化妆品检验所,武汉430012;武汉食品化妆品检验所,武汉430012【正文语种】中文【中图分类】TS207【相关文献】1.高效液相色谱法测定五维葡钙口服溶液中维生素B1、维生素B2的含量 [J], 刘元欢;彭建梅;罗燕;陈东波2.高效液相色谱法测定六维胶丸中维生素B1、维生素B2、烟酰胺含量 [J], 海彩虹;董锦燕;盛爱军3.反相高效液相色谱法测定复方肝浸膏片中维生素B1、维生素B2的含量 [J], 曾玉梅4.高效液相色谱法测定复方肝泰乐胶囊中维生素B1、维生素B2、烟酰胺和苯巴比妥含量 [J], 杨帆;李海英5.高效液相色谱法测定功能性饮料中维生素B1、维生素B2含量 [J], 黄伟志; 黄桂东; 钟先锋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定维生素C注射液含量(精)
·药品鉴定·2011年9月第8卷第27期高效液相色谱法测定维生素C注射液含量刘国如，刘永锁，陈振玲，王伟，丰廷宗，周毓瑾中国民用航空局民用航空医学中心（民航总医院），北京100023[摘要]目的：建立高效液相色谱法测定维生素C注射液中维生素C含量的方法。
方法：采用Phenomenexluna-NH2分析色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相为磷酸二氢钾缓冲液-乙腈（1∶1，磷酸调至pH3.0）；流速：1.0ml/min；检测波长：245nm。
结果：维生素C的线性回归方程为Y=29560X-21310（r=0.9995），线性范围为5～30μg/ml，平均回收率为98.30%（n=9，RSD为2.1%）。
结论：该方法操作简便，结果准确，可用于测定维生素C注射液中维生素C的含量。
[关键词]高效液相色谱法；维生素C注射液；维生素C；含量测定[中图分类号]R917[文献标识码]A[文章编号]1673-7210（2011）09（c）-050-02 DeterminationofVitaminCInjectionbyHPLCLIUGuoru,LIUYongsuo,CHENZhenling,WANGWei,FENGTingzong,ZHOUYujin CivilAviationMedicineCentre(CivilAviationGeneralHospital),CAAC,Beijing100023,Ch ina[Abstract]Objective:TodevelopaquantitativemethodforthedeterminationofVitaminCinVi taminCInjection.Methods:Phenomenexluna-NH2column(4.6mm×250mm,5μm)wasusedaschromatographiccolumn,amixtureofaceton itrileanddibasicpotassiumphosphatebuffersolution(1∶1,v/v)wasusedasmobilephase,whi chwasadjustedtopH3.0byphosphoricacid,andthedetectionwavelengthwasat245nmwithafl owrateof1.0ml/min.Results:TheregressionequationwasY=29560X-21310(r=0.9995),whichwaslinearoverarangefrom5μg/mlto30μg/ml.Theaveragerecovery was98.30%(n=9,RSD=2.1%).Conclusion:Thismethodissensitive,rapidandaccurate,whic hiscanbeusedfordeterminationofVitaminCinVitaminCInjection.[Keywords]HPLC;Vita minCInjection;VitaminC;Determination维生素C在临床上不仅用于心血管系统、消化系统疾病的辅助治疗，而且在眼科、口腔科和外科系统疾病的药物治疗中也十分常用[1]。
反相离子对高效液相色谱法测定维生素C
反相离子对高效液相色谱法测定维生素C
邵国健;潘智慧
【期刊名称】《浙江预防医学》
【年(卷),期】2000(012)010
【总页数】1页(P封四)
【作者】邵国健;潘智慧
【作者单位】湖州市卫生防疫站,浙江湖州;湖州市卫生防疫站,浙江湖州
【正文语种】中文
【中图分类】R977.23
【相关文献】
1.反相离子对高效液相色谱法测定盐酸林可霉素注射液中乙二胺四乙酸二钠的含量[J], 屈蓉;钱桂英;陈佳
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3.反相离子对高效液相色谱法测定啤酒中的B族维生素 [J], 陈新;张风;李健
4.反相离子对高效液相色谱法测定头孢克肟中EDTA含量 [J], 石诚
5.反相离子对高效液相色谱法用于利塞膦酸钠有关物质的分离与测定 [J], 张卫民;杨杰;吴拥军
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高效液相色谱法分析(维生素)原始记录
峰面积
（A）
样品浓度
(μg/mL）
结果
（mg/100g）
平均值
（mg/100g）
相对偏差
（ห้องสมุดไป่ตู้）
备注
试验允差要求：≤10%
仪器使用情况使用前：使用后：检验人：复核人：审核人：
V--试样（提取液）的定容体积，（mL）；
f--试液（上清液）衍生前的稀释倍数；
m--试样质量，（g）。
结果保留三位有效数字。
质控（自控）
情况
样品总数
平行样个数
质控样个数
仪器使用情况使用前：使用后：
检验人：复核人：审核人：
高效液相色谱法分析（ 维生素 ）原始记录第页，共页
样品编号
试样质量
(g)
定容体积
标准曲线
序号
1
2
3
4
5
浓度（μg/mL）
峰面积（A）
回归方程
Y=aX+b a= b= r=
检出限
0.03mg/100g
定量限
0.10mg/100g
样品空白值
计算公式：X=
式中：X--试样中维生素 （以硫胺素计）的含量，（mg/100g）;
c--由标准曲线计算得到的试液（提取液）中维生素 的浓度，（μg/mL）；
样品处理情况
按照GB 5009.84-2016第一法对样品进行处理。
标准物质名称及浓度
标准溶液：维生素B1500μg/mL
仪器
检测条件
检测器：荧光检测器
色谱柱：C18反相柱
激发波长：375nm
柱温：/
流速：0.8 mL/min
进样量：μL
发射波长：435nm
检测维生素c和维生素b1的化学方法
检测维生素c和维生素b1的化学方法
检测维生素C和维生素B1的化学方法主要有以下几种：
1. 线性比色法：该方法是采用维生素C和二硝基苯肼在适当条件下反应生
成橙红色化合物，然后根据产物的吸收光谱进行定量测定。
2. 高效液相色谱法：该方法是利用高效液相色谱仪分离维生素C并测定其
峰面积或峰高值，再与外标品进行比较计算出维生素C的含量。
3. 滴定法：该方法是利用碘液与维生素C发生化学反应，在反应过程中当
溶液从无色转变成微红色时，表示抗坏血酸全部被氧化，此时即为滴定终点。
根据滴定消耗染料标准溶液的体积，可以计算出被测定样品中抗坏血酸的含量。
4. 荧光法：该方法是利用荧光光度计记录维生素C在特定波长下的荧光强度，通过与标准品比较，计算出样品中维生素C的含量。
5. 钼蓝比色法：该方法是利用维生素C与钼酸铵在酸性条件下反应生成蓝
色络合物（钼蓝），在660nm处有最大吸收，通过比色法测定样品中维生素C的含量。
6. 碘滴定法：该方法是利用碘和还原性维生素C反应，根据消耗的碘的量，可以计算出被测物质中还原性维生素C的含量。
这些方法各有优缺点，选择合适的检测方法取决于实验目的、样品类型和实验室条件。
维生素c的含量测定方法
维生素c的含量测定方法
维生素C的含量可以使用以下方法进行测定：
1. Iodometric Titration（碘量滴定法）：该方法是通过氧化还原反应来测定维生素C的含量。
首先，将样品中的维生素C与碘液反应生成碘气。
然后，用含有淀粉指示剂的碘化钾溶液进行滴定，直到溶液变成蓝黑色为止。
根据滴定所需的碘液的体积来计算维生素C的含量。
2. HPLC（高效液相色谱法）：HPLC是一种常用的测定维生素C含量的方法。
样品经过适当的处理后，注入到高效液相色谱仪中进行分析。
利用色谱柱中的分离机制，可以将维生素C和其他化合物分离开来，然后使用紫外检测器来检测维生素C的峰值，并根据峰面积来计算其含量。
3. Spectrophotometry（分光光度法）：该方法是通过测量维生素C溶液在特定波长下的吸光度来测定其含量。
首先，将样品中的维生素C与一种化学试剂反应生成有色产物。
然后，使用分光光度计在特定波长下测量溶液的吸光度，并利用标准曲线来计算维生素C的含量。
这些方法中，碘量滴定法和HPLC法通常被认为是较准确和可靠的测定维生素C 含量的方法。
不同的方法适用于不同的样品类型和实验目的，选择适合的方法可根据具体需求来确定。
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作者：李映章 张志宇 梁晟楠 【关键词】 色谱法 水溶性维生素与人体的生长发育
和健康有着密切关系，在人体的生命活动中具有十分重要的作用，它们在人体内的含量是衡
量一个人的健康指标。目前VitC，VitB 1 和VitB 2 传统测定方法中，VitC常用2，4-二硝
基苯肼比色法和2，6-二氯靛酚钠盐滴定，这两个方法灵敏度较低，特异性差，目前一般科
研项目都不采用这个滴定法;Vit B 1 和Vit B 2 可用荧光法，但该法前期处理操作繁冗，
费时费力，其处理方法和过程增加了影响检测精确度欠佳的人为因素。本文数据采用液相色
谱法分离检测。 1 实验部分 1.1 仪器 SY5000LIQUID CHROMATOGRAPII（BEIFN）具
UV/VIS检测器，色谱柱:Lichrosphcr C18，4.6×250，5μm，TL9900色谱数据工作站。 1.2
试剂 本实验所用水为石英亚沸蒸馏水，以0.45μm水性微孔滤膜过滤。所用试剂均为分析纯
（AR），甲醇为一级色谱纯，标样维生素C、B 1 、B 2 贮备液以0.01mol/L草酸配制，在4℃
冰箱中保存。VitC临用新配。流动相A:0.05ml/L KH 2 PO4缓冲液（pH6.00）;流动相B:甲
醇。均经0.45μm水性微孔滤膜过滤，超声波脱气后使用。整个操作应避光，且操作过程要
迅速，以防维生素被氧化。 1.3 样品处理 检测学生起床后将昨晚尿排空，空腹以200ml
水送服VitC500mg，VitB 1 5mg和VitB 2 5mg，然后收集服药后4h内排出的尿于1000ml广
口棕色瓶中，并加4%的草酸防护，尿液经0.45μm微孔过滤器过滤 ［4］ ，超声波脱气后
即可上色谱柱分离检测。 1.4 色谱仪工作条件 色谱检测的流动相由磷酸二氢钾A和甲
醇B组成，其比例为90∶10和65∶35。流速1.0ml/min，柱温:室温，波长:266nm，柱前压:168～
240ATM。 1.5 标准曲线制作 配制一系列不同浓度的混合液，经检测得出的数据作出如
下3种维生素的标准曲线（如图1示）。 1.6 色谱检测 分时间段采样，每采一批样有30
个左右尿样。样品处理后，按标准样品检测的条件，以外标法检测VitC、VitB 1 和VitB 2 ，
经TL9900色谱数据工作站处理检测出的数据和图形。 2 检测结果 经检测，得出样
品中所含3种维生素的量，通过分析可得出如下结果（图2为一个样品的VitC、VitB 1 和
VitB 2 3种维生素的色谱分析图）: 色谱法检测得此样品中VitC、VitB 1 和VitB 2 的
峰高分别为1805mV、40mV和386mV，从标准曲线计算出其4h内排出尿样中的三种维生素的
量分别为2.58mg、0.44mg和0.42mg。从五个斑151个尿样检测结果来看，VitC缺乏的占检
测总数的15.23%，不足的占13.90%，正常的占70.87%;VitB 1 缺乏的占1.99%，不足的占
3.31%，正常的占94.70%;VitB 2 不足的占16.56%，正常的占52.31%，良好的占31.13%（正
常以上的占83.44%） ［1］ 。 3 讨论与总结 3.1 检测波长的选择 待检测的3种
维生素中，VitC在261nm，VitB 1 在246nm，VitB 2 在260nm波长处有最大的吸收 ［2，3］ ，
本次实验曾分别选用以上3种波长检测这三种维生素混合液，以上波长都不是这3种维生素
混合液的最大吸收波长，经试验，最后确定266nm波长为三种待检测维生素的最佳检测波长。
[!--empirenews.page--] 3.2 回收率 测得人体尿样的3种维生素的含量，再加入已知
浓度的标准品，混合后按1.6项操作，测其含量，得出其平均回收率的范围是90.12%～99.85%，
变异系数在1.98%～6.56%之间，说明此种方法检测人体尿样中的维生素C、B 1 和B 2 3种
水溶性维生素的含量是可靠的。 3.3 流动相确定 流动相由磷酸二氢钾缓冲液和甲醇组
成，本实验曾以不同比例的流动相和波长对3种维生素C、B 1 、B 2 进行反复分离检测。
通过实验，最终摸索出检峰形好，保留时间短的流动相组成比例。在磷酸二氢甲缓冲液∶甲
醇=90∶10情况下，VitC保留时间在2.280～2.300min之内，VitB 1 在5.250～5.400min
之内，VitB 2 在20min之后。此种情况分析一个的混合样至少需要25min（含平衡时间）。 在
流动相比例65∶35的情况下，VitB 1 保留时间9.120～9.310min。中VitC和VitB 1 出峰
不好，拖尾严重。本实验曾试行以梯度洗脱法检测，可将3种维生素分开，但检测时间长，
至少在25min以上，且出现拖尾情况。考虑到本实验要检测的样品数目多，需以尽快的速度
检测，故采取分步检测法:在流动相比例90∶10和65∶35情况下分别检测VitC、VitB 1 和
VitB 2 ，两次检测合计不用20min，且它们分离得好，波型都是VV波型。 3.4 标准样
品溶剂的选择 在VitC、VitB 1 和VitB 2 的标准溶液配制中，本实验曾采用盐酸、偏磷酸
和草酸作溶剂。从实验情况来看，草酸是以上3种维生素较好的溶剂，其获得检测数据误差
小，检测波型好，这可能是草酸对VitC、VitB 1 和VitB 2 具有更好的稳定作用。 3.5
流速 流速对检测精确度影响不大，但对检测保留时间影响较大。如流速1.0ml/1min，柱前
压稍大一些，在200～240ATM之间，但仪器仍然可承受;如果流速变小，如0.8ml/min，虽然
柱前压随之变小，约168atm，但保留时间却延迟5～10min，这对要检测大量样品是不可取的。
故本实验采用1.0ml/min流速。 3.6 待检样品处理的注意事项 由于维生素类物质稳定
性不好，样品在检测之前，加入适当的保护剂，力求低温保存，防强光照，争取在最短时间
内进行检测，以防维生素被氧化。这些都是取得较高检测精确度的重要性举措。 3.7 总
结 液相色谱法检测快捷，特异性好，灵敏度高;加上仪器具有色谱数据工作站软件，对数据
和图形处理极为方便。故该方法是检测维生素物质的理想方法。