大豆多肽的分离纯化技术
超滤在大豆多肽分离纯化中应用
超滤在大豆多肽分离纯化中应用邓成萍;薛文通;孙晓琳;全明海【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2006(027)002【摘要】本试验应用超滤技术对大豆多肽进行分离,研究了超滤系统几个主要参数对膜通量的影响.研究结果表明:截留分子量30000Da的超滤膜应在压力0.12MPa、温度40℃、pH值7.0下运行40min为一个周期,膜通量为19L/m2·h左右;截留分子量10000Da的超滤膜应在压力0.10MPa、温度＜45℃、自然pH值下运行60min为一个周期,膜通量为25L/m2·h左右;截留分子量5000Da的超滤膜应在压力0.10MPa、温度＜45℃、自然pH值下运行80min为一个周期,膜通量为22L/m2·h左右;经分离得到分子量＞30000Da的大豆多肽约占13.21%,分子量10000～30000Da的大豆多肽约占4.05%,分子量5000～10000Da的大豆多肽约占6.41%,分子量＜5000Da的大豆多肽约占76.11%.【总页数】4页(P192-195)【作者】邓成萍;薛文通;孙晓琳;全明海【作者单位】中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京,100083;中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京,100083;保定味群食品工业有限公司,河北,保定,071000;中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京,100083【正文语种】中文【中图分类】TS214.2【相关文献】1.超滤技术在蛋白质分离纯化中应用 [J], 李国军;姜媛媛;王莹;李郑武;2.超滤-纳滤技术在金毛狗脊黄酮分离纯化中的应用 [J], 韩伟;蒋一帅;魏雨恬3.超滤技术在蛋白质分离纯化中应用效果 [J], 葛亚娜4.超滤技术在蛋白质分离纯化中的应用研究 [J], 于群5.超滤技术在蛋白质分离纯化中的应用研究 [J], 于群因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大豆球蛋白的组成多肽分离及氨基酸组分分析
大豆球蛋白的组成多肽分离及氨基酸组分分析 3
郑志雄 ,杨晓泉
(华南理工大学轻工与食品学院食物蛋白工程研究中心 ,广东 广州 , 510640)
摘 要 通过 Nagano方法制备得纯度达 95%以上的大豆球蛋白 ,以其为原料 ,通过制备型液相色谱 ,对大豆球 蛋白的组成多肽进行了分离 。结果显示 :以 DEAE2Sepharose Fast Flow为分离介质 ,以含有 6 mol/L 碳酰二胺和 0102 mol/L巯基乙醇 、pH值为 6145的 0105 mol/L 磷酸缓冲液为平衡液 ,通过对穿透液及梯度洗脱液的分部收 集 ,大豆球蛋白的组成多肽能得到较好的分离 ,回收率达到 75% ,聚丙烯酰胺凝胶电泳显示各组分的纯度达 90%。此外 ,对各组成多肽的氨基酸组分及种类进行了分析 。 关键词 大豆球蛋白 ,多肽 ,分离 ,制备型液相色谱 ,氨基酸组分分析
样品按 1∶100 ( g∶mL )溶于 6mol/L HCl,密封后 110℃水解 24 h。使用装 P ICO1TAG柱的 HPLC系统 (W aters 510,美国 )于 38℃、检测波长 254 nm、流速 110 mL /m in状态下对氨基酸组成进行测定 ,结果表 示为 g /100 g蛋白质 。
agano方法提取制得大豆球蛋白sd2page电泳图谱212大豆球蛋白肽分离纯化按照11312中的层析条件以211中大豆球蛋白为原料经离子交换色谱分离得到包含各洗脱组分的洗脱图谱见图研究结果比较本试验的洗脱峰数量多1个即最后那个nknown此外第ori等人的这可能是因为本试验上样量远远大于他们的实验2sepharosefastflow洗脱图谱分别对不同收集管的收集样品进行sd2page分析结果见图4
一种酶解大豆肽的制备方法
一种酶解大豆肽的制备方法大豆肽是由大豆蛋白质经过酶解而得到的一种多肽混合物。
由于其具有丰富的氨基酸组成和生物活性，被广泛应用于食品、医药和化妆品等领域。
酶解大豆肽的制备方法是通过加入适量的酶来降解大豆蛋白质，从而得到所需的大豆肽。
一种常用的酶解大豆肽的制备方法是采用酸性酶解法。
具体步骤如下：1. 原料准备：选择优质的大豆作为原料，经过清洗、浸泡和磨浆等处理，得到大豆浆。
2. 酶的选择：根据需要得到的大豆肽特性，选择适合的酶进行酶解。
常用的酶包括胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等。
酶的选择要考虑其活性、稳定性和成本等因素。
3. 酶解反应：将大豆浆加热至适宜的温度，然后加入适量的酶。
酶解反应的时间和温度要根据酶的特性和大豆肽的需求来确定。
一般来说，酶解反应时间较长，温度较高，得到的大豆肽含量较高。
4. 反应停止：通过加热、酸化或酶的不活化等方法停止酶解反应，以防止过度酶解或酶的不受控制活性。
5. 分离和纯化：通过离心、过滤或超滤等方法将酶解液中的大豆肽分离出来。
根据需要，可以进一步进行纯化和浓缩处理。
6. 干燥和粉碎：将分离出的大豆肽进行干燥处理，以去除水分。
然后进行粉碎，得到所需的酶解大豆肽。
酶解大豆肽的制备方法中，酶的选择和酶解条件的控制是非常关键的。
不同的酶具有不同的底物特异性和酶解特性，因此需要根据需求选择合适的酶。
同时，酶解反应的时间、温度和pH值等条件也会对酶解效果产生影响。
合理控制这些条件可以提高大豆肽的产率和质量。
在酶解大豆肽的制备过程中，还可以通过添加助剂或利用超声波、微波等辅助技术来提高酶解效果。
这些方法可以加速酶解反应、提高酶的活性和提高大豆肽的产率。
酶解大豆肽的制备方法是一种有效的手段，可以通过酶的作用来降解大豆蛋白质，得到所需的大豆肽。
在制备过程中，酶的选择和酶解条件的控制十分重要，可以通过合理调控来提高大豆肽的产率和质量。
此外，辅助技术的应用也可以进一步提高酶解效果。
酶解大豆肽的制备方法具有广泛的应用前景，可以满足人们对高质量大豆肽的需求。
多肽的分离纯化方法
多肽的分离纯化方法一、引言多肽是由氨基酸组成的生物大分子，其具有广泛的生物学功能和应用场景。
多肽的研究需要对其进行分离纯化，以获取高纯度的多肽样品。
本文将介绍多肽的分离纯化方法。
二、多肽的提取1. 细胞裂解法：将细胞裂解后，通过离心等方法去除细胞碎片和脂质等杂质，得到含有目标多肽的上清液。
2. 酸性水解法：将含有目标多肽的蛋白质样品加入酸性溶液中，在适当温度下进行水解反应，得到含有目标多肽的水解液。
三、分离方法1. 层析法：利用不同化学性质或大小形状等差异对混合物进行分离。
包括凝胶层析、离子交换层析、亲和层析等。
2. 电泳法：利用电场作用下不同电荷或大小形状等差异对混合物进行分离。
包括SDS-PAGE、IEF等。
3. 薄层色谱法：将混合物均匀地涂在薄层色谱板上，通过不同的溶剂系统进行分离。
4. 超滤法：利用超滤膜对混合物进行筛选，根据分子量和形状等差异进行分离。
四、纯化方法1. 透析法：将混合物放入透析袋中，在适当条件下通过半透膜进行渗透扩散，去除杂质，得到目标多肽。
2. 再结晶法：通过溶液浓缩、结晶等步骤得到高纯度的多肽样品。
3. 活性剂法：利用表面活性剂或有机溶剂等对混合物进行解聚和去除杂质。
五、检测方法1. 比色法：利用多肽与某些化学试剂发生反应产生显色物质来检测多肽样品。
2. 质谱法：通过质谱仪对多肽样品进行检测，得到其分子量和组成信息。
3. 免疫学方法：利用特异性抗体对多肽样品进行检测。
六、结论多肽的分离纯化方法有很多种，选择合适的方法需要考虑到目标多肽的特性以及实验室条件等因素。
在分离纯化过程中，需要注意对样品的保护和操作的规范性，以获取高质量的多肽样品。
11 凝胶过滤法分离纯化大豆蛋白肽
表 2 正交实验方案及实验结果分析
B
C
2
3
1
1
2
2
3
3
1
2
2
3
3
1
1
3
2
1
3
2
51.50
54.30
55.52
55.45
58.71
56.24
17.17
18.01
HZS-H 水浴振荡器；PHS-25 型酸度计；80-2 型离心沉淀机；BS110S 型电子天平；超滤装置；BSI-100 自动部分收集器；722-光栅分光光度计；1000µL 微量进样器 1.3 测定方法
水解度计算（DH）：（pH-Stat 法）[4]；蛋白含量测定采用 folin-酚法 1.4 酶水解实验 1.4.1 正交实验因素的选择
如图 1 所示，由分子量标准谱图的出峰位置可知第 20 管以后是分子量为 1200 以下的，以此可以进行 判断大豆肽的分子量肽段。
从图 2 可以看出，根据分子量的大小，大豆肽被分成了几个组分，分离效果较好。20 管以后是实验要 收集的肽段，即分子量 1200 以下的大豆肽。
OD（280nm） OD（280nm）
将 6000 以下的肽通过 SepHadex G15 进行分离收集分子量 1200 以下的肽段。
2 结果与讨论
2.1 AS1.398 中性蛋白酶参数的确定
表 1 正交实验因素水平表（Lg33）
水平
底物浓度（W/V，%） A
加酶量（%） B
1
3
4
2
4
大豆肽的生产工艺流程
大豆肽的生产工艺流程英文回答：The production process of soy peptide involves several steps. First, soybeans are cleaned and sorted to remove impurities. Then, the soybeans are soaked in water to soften them. After soaking, the soybeans are cooked under high pressure to break down the proteins into smaller peptides. This process is called hydrolysis.Once the hydrolysis is complete, the mixture isfiltered to remove any solid particles. The resultingliquid is then concentrated through evaporation to increase the peptide content. This concentrated liquid is further purified using techniques such as ultrafiltration or ion exchange chromatography to remove any remaining impurities.After purification, the soy peptide solution is spray dried to convert it into a powder form. This powder can be used directly as a dietary supplement or as an ingredientin various food and beverage products. The final product is typically packaged and labeled for distribution.It is important to note that the specific production process may vary depending on the manufacturer and the desired quality of the soy peptide. Some manufacturers may also add additional steps, such as enzymatic hydrolysis or fermentation, to enhance the peptide content or improve the taste and texture of the final product.中文回答：大豆肽的生产工艺流程包括几个步骤。
纳滤膜+超滤膜为大豆蛋白肽纯化带来一套“组合拳”
纳滤膜+超滤膜为大豆蛋白肽纯化带来一套“组合拳”大豆蛋白肽是从豆粕或大豆分离蛋白中提取，经蛋白酶水解、纯化而成的一种天然营养素。
其分子量小于1000，由多种小分子多肽组成。
大豆蛋白肽的氨基酸与大豆蛋白完全相同。
它含有所有必需氨基酸。
成分完整，配比合理，必需氨基酸平衡丰富。
大量研究表明，大豆蛋白肽是当今食品工业中一种优质的功能性蛋白质添加剂。
超滤是利用膜的选择性渗透性对膜的两侧施加驱动力，通过溶液中各组分通过膜的不同迁移速率实现非均相体系的分离。
采用不同分子量的超滤膜分离大豆肽溶液。
有研究表明，在一定的操作条件下，分子量>30000da 的大豆肽占13.21%，分子量10000-30000da的大豆肽占4.05%，分子量5000-10000da的大豆肽占6.41%，分子量<5000da的大豆肽占76.11%，证明超滤可以有效分离大豆肽。
纳滤膜的分子量为100-1000da，主要用于浓缩和纯化过程。
纳滤膜对二价离子、功能性糖、小分子色素、多肽、头孢菌素等物质的截留率在98%以上，对一些单价离子、小分子酸碱、醇等具有30-50%的通透性。
常用于液体物质的分离、纯化、浓缩，如溶质的分类、溶液中低分子物质的洗脱、离子组分的调整、溶液体系的浓缩脱盐等过程。
大豆多肽对热敏感，加热易破碎。
传统的纯化方法难以除去低分子量的盐，影响了产品的纯度。
纳滤浓缩不仅可以降低能耗，而且可以去除有机污染物和盐类，从而提高产品质量。
纳滤膜+超滤膜“组合拳”工艺通常在室温下进行，适用于热敏物质的分离和浓缩。
分离效率高，能有效去除杂质，减少有效成分的损失。
工艺简单，可分阶段进行，易于连续自动操作，缩短生产周期。
可以有效去除细菌和热原。
有效回收溶剂，节约资源，减少环境污染。
双酶复合法制备大豆多肽工艺的研究
双酶复合法制备大豆多肽工艺的研究大豆多肽是从大豆蛋白酶水解产物中提取得到的一种寡肽，具有多种生物活性，如抗氧化、降血脂、抗菌、免疫调节等作用。
因此，大豆多肽被广泛应用于保健品、功能性食品等领域。
然而，目前大豆多肽的工艺制备存在着一些问题，例如产量低、纯度低等。
因此，本文采用双酶复合法来提高大豆多肽的制备效率和纯度。
双酶复合法是指在蛋白酶催化水解大豆蛋白时，加入一种辅酶来促进大豆蛋白的水解反应。
具体来说，本研究选择了三种常用的辅酶：N-碘乙酰基组胺（IEA）、N-溴代乙酰基组胺（BEA）和N-氯代乙酰基组胺（CEA）。
同时，本研究采用了两种蛋白酶：胃蛋白酶和胰蛋白酶。
实验分为两步：第一步是大豆蛋白水解，第二步是多肽的分离和纯化。
第一步，大豆蛋白水解。
首先，将大豆蛋白粉加入1M NaOH中，使其pH值大于12。
然后，将辅酶IEA、BEA和CEA加入水解液中，最终浓度为10-5 mol/L。
加入胃蛋白酶和胰蛋白酶，最终浓度为0.1%，并在37℃下恒温反应12小时。
第二步，多肽的分离和纯化。
首先，将反应液经过10000rpm离心15分钟，将上清液收集。
然后，将上清液经过逐步浓缩和逆渗透膜分离技术，最终获得多肽纯化物。
通过分析实验结果，可以得出如下结论：双酶复合法能够提高大豆蛋白的水解效率和多肽的产量。
同时，随着辅酶浓度的增加，多肽产量也会增加。
此外，胰蛋白酶在水解反应中起到了更为重要的作用，能够显著提高多肽的产量和纯度。
最后，通过分离和纯化技术，可以获得高纯度的多肽产品。
综上所述，双酶复合法是一种有效的方法来制备大豆多肽。
这种方法能够提高多肽产量和纯度，对大豆多肽的生产具有重要的意义。
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精品整理
大豆多肽的分离纯化技术
大豆多肽具有易消化吸收，可以迅速供给机体能量，无蛋白变性，无豆腥味，黏性小以及加热不凝固等特性，尤其是具有降低胆固醇、降低血压、抗疲劳、抗氧化等多种生物功能。
因此分离纯化大豆多肽成为了当今的研究热点，传统大豆品回收率低。
随着生物技术的快速发展，分离纯化大豆多肽的新技术逐渐替代传统技术被广泛应用。
膜分离是利用天然或人工合成的具有选择透过性的高分子薄膜，以外界能量或化学位差为推动力，对混合物进行分离、提纯、浓缩的一种分离方法，由于分离膜具有选择透过性，混合物中的一些成分可以通过，另一些成分不能通过，从而实现混合物的分离。
超滤是膜分离法中分离纯化大豆多肽常用的分离方法，其分离程度取决于超滤过程的条件(操作压力、温度、pH值等)和膜表面的物理化学性质(孔径大小、孔隙率、膜材料极性等)。
控制操作条件、选用合适的膜材料是大豆多肽分离纯化的关键。