铝敏化依诺沙星荧光显微成像体系性质及其应用研究
硫胺素-亚硝酸根体系的荧光性质研究及应用
硫胺素-亚硝酸根体系的荧光性质研究及应用
李松青;李胜;黄灵芝;陈小明
【期刊名称】《分析试验室》
【年(卷),期】2001(20)3
【摘要】研究了在碱性溶液中硫胺素 ( VB1)与亚硝酸根的荧光反应 ,建立了荧光光度法测定硫胺素的新方法。
方法线性范围为 1 .2 8～ 32 4 ng/m L,检出限
0 .52ng/m L,对 1 5个浓度为 1 0 0 ng/m L的硫胺素溶液进行测定 ,相对标准偏
差为1 .4%。
应用于药物中硫胺素的测定 ,回收率在 96.5%～ 1 0 1 .
【总页数】2页(P23-24)
【关键词】硫胺素;亚硝酸根;荧光光度法;维生素B;药物分析;药光反应
【作者】李松青;李胜;黄灵芝;陈小明
【作者单位】湘潭大学化学化工学院
【正文语种】中文
【中图分类】R977.22;R917
【相关文献】
1.钒(Ⅳ)-硫胺素荧光光度法的研究与应用 [J], 陈小明;黄灵芝;李松青;夏殊
2.钴—硫胺素—Triton X—100体系的荧光特性及其分析应用 [J], 揭念芹;周遵宁
3.一种基于形成杂多核配合物的荧光增敏效应的研究(Ⅱ)——钴(Ⅱ)-7-(8-羟基-3，6-二磺基偶氮)-8-羟基喹啉-5-磺酸-硼(Ⅲ)三元体系的荧光性质及其分析应用 [J], 熊国华
4.色氨酸—亚硝酸体系荧光性质的研究及应用 [J], 揭念琴;杨景和
5.一种基于形成杂多核配合物的荧光增敏效应的研究——Ⅰ.锰(Ⅱ)—7-(8-羟基-3,6-二磺基萘偶氮)-8-羟基喹啉-5-磺酸-硼(Ⅲ)三元体系的荧光性质及其分析应用[J], 熊国华;黄坚锋;俞英;刘虹;严中一
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流动注射-鲁米诺-铁氰化钾反应体系化学发光法测定依诺沙星
流动注射-鲁米诺-铁氰化钾反应体系化学发光法测定依诺沙星李世凤;魏先文;朱昌青;肖艳玲;陈红旗;周远辉【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2008(044)003【摘要】试验发现依诺沙星对鲁米诺与铁氰化钾之间的化学发光反应具有显著的增敏作用,而且当依诺沙星浓度在2.0×10-8～2.0×10-5mol·L-1范围内,与相应的化学发光增强信号值(△I)之间呈线性关系,其检出限(3S)为5.7×10-9mol·L-1,取1.0 × 10-6mol·L-1依诺沙星按试验方法测定11次,算得其相对标准偏差为1.75%.结合应用流动注射技术,提出了流动注射-化学发光法(FI-CL)测定药片中依诺沙星的方法,应用此方法分析了3个依诺沙星片剂试样,所测得的结果与其标示值相符.按标准加入法作了回收率试验,所得结果在96.7%～103.0%之间.【总页数】3页(P247-248,251)【作者】李世凤;魏先文;朱昌青;肖艳玲;陈红旗;周远辉【作者单位】安徽师范大学,安徽省功能性分子固体重点实验室,化学与材料科学学院,芜湖,241000;安徽师范大学,安徽省功能性分子固体重点实验室,化学与材料科学学院,芜湖,241000;安徽师范大学,安徽省功能性分子固体重点实验室,化学与材料科学学院,芜湖,241000;安徽师范大学,安徽省功能性分子固体重点实验室,化学与材料科学学院,芜湖,241000;安徽师范大学,安徽省功能性分子固体重点实验室,化学与材料科学学院,芜湖,241000;安徽师范大学,安徽省功能性分子固体重点实验室,化学与材料科学学院,芜湖,241000【正文语种】中文【中图分类】O657.3【相关文献】1.铁氰化钾-鲁米诺体系后化学发光反应及其分析应用研究-分子印迹-后化学发光法测定双嘧达莫 [J], 刘清慧;吕九如;冯娜2.鲁米诺-铁氰化钾流动注射化学发光法测定铜离子 [J], 高乃兵3.鲁米诺-铁氰化钾流动注射化学发光法测定红葡萄酒中白藜芦醇的含量 [J], 刘玉萍; 姚悦悦; 蒋泳汝; 王修中4.鲁米诺-铁氰化钾流动注射化学发光法测定铜离子 [J], 高乃兵5.铁氰化钾-鲁米诺体系后化学发光行为的研究-流动注射后化学发光法测定可待因[J], 冯娜;何云华;杜建修;吕九如因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
【国家自然科学基金】_人体血清_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140731
漆黄素 深低温冻存 淋巴细胞 流动注射 氧化茶油 正气存内 格雷夫斯病 核壳型cdte/cds量子点 有氧运动 有机合成 旋毛虫 斑点免疫金渗滤法 收集 排泄分泌(es)抗原 抗氧化能力 抗氧化 抗原,细菌 性激素结合蛋白 性激素 应用 小鼠 基因表达 基因 唾液 吸收光谱 可溶性il-6受体 受体,促甲状腺素 卵巢 动脉粥样硬化 加味逍遥散 分支杆菌,结核 共振瑞利散射 偕二膦酸 保护作用 代谢γ /-1 pkc ph值 nmr l-arg il-6基因表达 elisa egfr c-myc adma 5-氨基水杨酸锌(5-asz) 3-(2-氰基乙基)胞嘧啶(cect)
2008年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52
1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 ห้องสมุดไป่ตู้ 1 1 1 1 1
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稀土Eu掺杂纳米TiO2的荧光特性研究及其应用
酯在 酸一 水溶 液 中发 生 溶 胶一 胶 反 应 ， 备 了一 种 可 凝 制 作 为 荧光 标记 分 子 的 Ｅ 抖／ ｉ ｕ Ｔ Ｏ。荧光性 纳 米微 粒 ， 并 对样 品的 形貌 、 成及 结构 进行 了表 征 。结 果表 明 ， 组 纳
米 粒 子 的 平 均 粒 径 ５ ｍ 。 用 ４ ８ ｍ 激 发 光 源 激 发 样 ｎ ６ｎ
水。 ２ ２ 实 验 方 法 ． ’
关键 词 ： Ｅ ｕ掺 杂 ； ｏ ； 胶～ 胶 法 ； 光 ； 葱 表 Ｔｉ 溶 凝 荧 洋
皮 细 胞
中 图 分 类 号 ： Ｏ １ ． ； ５ ． ６ １ ４ ０６ ７ ３
文 献标识 码 ： Ａ
文章 编号 ：０ １９ ３ （０ ０ 增 刊 ３０ ３ —３ １ ０ —７ １ ２ １ ） －５ ００
１ 引 言
近年来 ， 纳米 材 料 生 物效 应 的研 究 已经 成 为 迅 速
发 展 的 纳 米 药 物 和 纳 米 生 物 技 术 的 基 础 。 纳 米 Ｔｉ Ｏ
２２１ Ｅ 抖／ Ｏ ． ． ｕ Ｔｉ 纳米 晶体 的制备 将 ２ 的 ＴｉＯ ｕ 边 搅 拌边滴 加 到 ８ ５ ｍＩ （Ｂ ） ｍＬ的 ｉ — Ｐ ＯＨ 中 ， 之充 分 混 合 均 匀 ， 到 溶 液 Ａ； 定 量 的 ｒ 使 得 一
４ ） 入到 ２ ０ 加 ０ ｍＬ的水 中 ， 制其 ｐ 值 １ ５ 得 到溶 控 Ｈ ．， 液 Ｂ； 溶液 Ｂ置 于 冰水 浴 中 ， 高 速 机 械 搅 拌 下 ， 溶 在 将
液 Ａ 以每 ３ ｓ滴 的速 度 ， 慢 地滴 加 到 Ｂ 中 ， 至 ～４ ／ 缓 直 ＴｉＯ ｕ 完 全 水 解 ， 到 溶 液 Ｃ； 溶 液 Ｃ 在 恒 温 （Ｂ ） 得 将
【国家自然科学基金】_人体尿液_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140803
推荐指数 3 2 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2009年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29
推荐指数 4 4 2 2 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2011年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33
2013年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46
科研热词 推荐指数 鲁米诺 1 骨密度 1 马尿酸 1 雌激素硫酸盐 1 雌激素 1 阿尔茨海默病(ad) 1 阿尔茨海默病 1 镉暴露 1 铅暴露 1 质谱 1 认知障碍 1 蒙特卡罗方法 1 药物疗法 1 色谱法,气相 1 膀胱动力泵 1 缓释片 1 缓冲溶液 1 神经退行性疾病 1 砷形态 1 病理学 1 生物标记物 1 牛血清白蛋白 1 流动注射 1 有效分配系数 1 文献综述 1 故障树 1 尿镉 1 尿铅 1 尿道阀 1 尿药法 1 尿液 1 地方性砷中毒 1 喘平方 1 吸附 1 可靠性 1 医学成像 1 化学发光 1 内蒙古河套平原 1 儿茶酚胺(ca) 1 健康风险 1 保存 1 体外释放度 1 体内外相关性 1 代谢组学 1 bayes判别分析 1 (r)5-(2-氨基丙基)-2-甲氧基苯磺酰胺 1
【国家自然科学基金】_液滴形成_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140801
推荐指数 2 2 2 2 2 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2010年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52
107 4h-sic薄膜
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可视化 反应动力学 单分散 初始液滴 凝结 凝固 内蒙古乳都乳 内燃机 共轴 偏晶合金 仿生学 二氧化硅 乳液 乳化 三维对流云 三元包晶 shan-chen模型 oh发射光 ni-pb-cu偏晶合金 lafe11.7si1.3合金 k-h不稳定性 c2h2o4
流型分布 沉降器结焦 沉降器 水合物 氢氧化镁铝 气溶胶 气体雾化 模拟 棒状组织 柠檬酸钠 显微组织 无损检测 数值计算 微通道 微粒乳化作用 微液滴 微反应器 微区拉曼 微区反应 形核 异质外延 干湿交替 左氧氟沙星 射流 大气腐蚀 图形衬底}量子点 四辊流变仪 喷雾 医用光学与生物技术 分布规律 农药残留 催化裂化装置 催化裂化 储运 体积分数法 传质受阻 二次裂化 主成分分析 两相爆轰 两相流 两相 丙三醇 不可压缩流动 三相共晶 三元合金 vof方法 rayleigh模式破碎 mgso4球形液滴 fe-sn cu-pb合金 ce/se方法 aln/si(111)衬底 al-pb合金 al-cu-ag
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DOI:10.3724/SP.J.1096.2010.00973铝敏化依诺沙星荧光显微成像体系性质及其应用研究
杨乐1 王红1 刘颖*1,21(中央民族大学生命与环境科学学院,北京100081) 2(内蒙古师范大学化学与环境科学学院,呼和浩特010022)
摘 要 应用毛细流自组装成环荧光显微成像技术,建立了铝敏化依诺沙星的测定方法,并实测了不同样品中依诺沙星的浓度。在NH3-NH4Cl缓冲介质(pH9.7)和聚乙烯醇(PVA-124)存在下,Al3+-ENX复合物液滴在疏水性玻璃表面上受热挥发形成直径约为1.63mm,环线宽约为50Lm的自组装环。当点样体积为0.20LL,其线性范围1.00@10-13~5.00@10-13mol/ring(5.00@10-7~2.50@10-6mol/L),检出限为7.65@10-15mol/ring(3.83@10-8mol/L)。本方法用于葡萄糖酸依诺沙星注射液中依诺沙星含量和牛奶中依诺沙星残留量的检测,回收率分别为96.9%~107.0%和94.2%~102.5%,相对标准偏差(RSD)分别小于411%和214%。实测了健康志愿者服用依诺沙星胶囊后尿液中依诺沙星的平均浓度及兔子灌喂依诺沙星后血清中药物平均浓度,均得到了较满意的结果。
关键词 荧光显微成像技术;铝敏化依诺沙星;牛奶;人体尿液;兔子血清
2009-11-22收稿;2010-03-01接受本文系国家自然科学基金(No.20767004)、中央民族大学/985工程0项目(No.MUC985)、中央民族大学/211工程0项目(No.MUC021211306)、中央民族大学引进人才启动基金、内蒙古自治区自然科学基金重点项目(No.200711020202)、内蒙古自治区高等学校科学研究项目(No.NJ06108)资助*E-mai:lliuying430@yahoo.com.cn
1 引 言依诺沙星(Enoxacin,ENX,图1)是第三代喹诺酮类广谱抗菌药,1-乙基-6-氟-1,4-二氢-4-氧代-7-(-哌嗪基)-1,8-萘啶-3-羧酸倍半水合物,它是利用拮抗DNA旋转酶,从而阻断DNA的复制而起到快速杀菌作用[1],在临床上被广泛应用于治疗因敏感菌导致泌尿系统、肠道、呼吸系统、外科、妇科、五官科及皮肤科等感染性疾病[2]。目前,检测喹诺酮类抗生素残留量的方法主要有微生物检测法[3]、毛细管电泳法[4]、酶联免疫法[5]、电化学法[6]、色谱法[7,8]和荧光分析法[9]等。毛细流自组装荧光显微成像技术是一种新兴的检测喹诺酮类药物残留的方法。因为在自组装过程中液滴中的溶质能够在环线上聚集,相当于对样品进行预浓缩,且需要样品量极少,因此它具有测定灵敏度高、共存物质干扰小、适用于微量分析检出限低等优点。SOR(Sel-forderedring)荧光显微成像分析法用于药物分析的研究中,例如盐酸小檗碱[10]、四环素[11,12]和硫酸奎尼丁[13]等。但此技术应用于测定依诺沙星含量未见报道。本实验建立了铝敏化依诺沙星荧光体系,并应用于依诺沙星注射剂中依诺沙星含量和牛奶中残留依诺沙星含量的检测,测定了健康人服用依诺沙星胶囊后尿液中依诺沙星的平均浓度及兔子灌喂依诺沙星后血液中药物平均浓度,均得到了较满意的结果。对于食品中抗生素残留量的测定和药物药代动力学研究具有参考意义。
2 实验部分2.1 仪器与试剂IX-81倒置荧光显微镜(日本Olympus公司),选用U激发单元,激发滤光片波长范围330~385nm;CCD配套采图软件DPController(日本Olympus公司);Image-ProPlus中文版6.0(美国MediaCybernetics公司)图像处理软件获取SOR荧光图像;Origin7.5软件用于线性、高斯拟合等相关分析;800B低速台式离心机(上海安亭科学仪器厂,最高转速:4000r/min);微量进样器(上海安亭微量进样器厂,规格:1LL,5LL);格兰仕微波炉(佛山市顺德区格兰仕微波炉电器有限公司);GL-88B型旋涡混合器(海门市其林贝尔仪器制造有限责任公司);PB-10酸度计(德国赛多利斯公司);BS224S型电
第38卷2010年7月 分析化学(FENXIHUAXUE) 研究报告ChineseJournalofAnalyticalChemistry 第7期973~978子天平(德国赛多利斯公司);BDVacutainer真空采血管(英国Belliver工业产业公司,规格5mL);参照文献[10]自制二氯二甲基硅烷处理疏水性载玻片。依诺沙星(中国药品生物制品检定所,对照品,质量分数91.1%):称取0.0080g依诺沙星于小烧杯中,加适量5%乙酸溶解,用三次蒸馏水定容于250mL容量瓶,配成1.0@10-4mol/L的储备液,避光保存于0~4e冰箱中,用时稀释成1.0@10-5mol/L工作液;NH3-NH4Cl缓冲溶液(pH9.7);1%(w/V)聚乙烯醇-124(PVA-124,北京化学试剂公司),甲醇(北京化学试剂公司)。所用试剂均为分析纯,实验用水为三次蒸馏水。2.2 试样预处理2.2.1 牛奶试液 取4个厂家的牛奶各1mL于200mL容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,冷藏备用。2.2.2 葡萄糖酸依诺沙星注射液试液 取葡萄糖酸依诺沙星注射液1mL于100mL容量瓶中,用三次蒸馏水定容,将该溶液用水稀释100倍作为分析试液。2.2.3 人体尿液试液 健康志愿者空腹8~12h后,按照服药说明服用依诺沙星药片(0.1g/片)2片,然后间隔一定时间取尿液,以3000r/min离心10min。取上清液稀释100倍作为分析试液,保存于0~4e冰箱中。2.2.4 动物血清试液 将0.02g依诺沙星片碾成粉末并用凉开水溶解。体重2.0kg健康白兔空腹8~12h后,按10mg/kg的剂量灌胃给药,间隔一定时间从兔子耳缘静脉取血2~3mL,收集于真空采血管中,静置30min,以3000r/min离心10min。取0.5mL上清液于另一只试管中,加入1.5mL甲醇,再以3000r/min离心10min,蛋白沉淀完全,取上清液作为分析试液[14]。2.3 实验方法向1.5mL微量试管中依次加入适量1.0@10-5mol/L依诺沙星工作液、1.0@10-5mol/LAlCl3溶液80LL,NH3-NH4Cl缓冲溶液(pH9.7)50LL,1%PVA-124溶液100LL。每加一种试液后均涡流混匀,用三次蒸馏水定容至0.5mL,摇匀,放置80min使其充分反应。用微量进样器移取适量混合液,滴加在二氯二甲基硅烷处理的疏水性载玻片表面上,置于微波炉中,烘干1.5min,选用倒置荧光显微镜(波长范围330~385nm)的U激发单元及采图软件采集SOR图像,测定Al3+-ENX体系的荧光强度F及空白溶液的荧光强度F0,以$F($F=F-F0)作为测定依诺沙星的信号响应值,用Image-ProPlus中文版6.0图像处理软件测量荧光强度,Origin7.5软件用于线性、高斯拟合等相关分析。
3 结果与讨论3.1 成环特征由于依诺沙星具有大P键和刚性平面结构,自身显示出一定的荧光性质。与Al3+作用后,荧光进一步增强,在330~385nm波长范围的U激发单元下有较强的荧光发射。采用CCD配套采图软件DP-Controller采集Al3+-ENX的复合物在疏水性载玻片表面形成的SOR荧光图像。图1A为依诺沙星在NH3-NH4Cl缓冲溶液(pH9.7)中的蓝色SOR图像。液滴体积为0.50LL,环直径约为1.63mm,环线宽约为50Lm。图1C为依诺沙星荧光强度径向分布,将峰a和峰b的荧光强度(F)分别对径向距离(pixels,像素单位)进行高斯拟合,得高斯拟合曲线:Fa=36.0+84.2/(P)1/2exp[-0.04(x-35.68)2] (V2a=3.36)Fb=35.8+84.7/(P)1/2exp[-0.04(x-305.0)2] (V2b=2.45)V2值反映拟合符合程度。由于两值相近,表明溶质在环线上的径向分布符合高斯分布,同时a,b两
峰的半峰宽分别为Ra=7.25pixels和Rb=7.14pixels,说明环线上依诺沙星分布较均匀。3.2 SOR半径与体积的关系在3张不同的载玻片上(编号1,2,3)考察了SOR的半径(R)与液滴体积(V)在0.20~1.60LL的关系(图2)。线性拟合方程符合关系式R=KV1/3[10]。由于同一液滴在3张载玻片的K值相差不大,表明并行处理的疏水性载玻片表面性质几乎相似,以保证实验有较好的重现性。
974 分析化学第38卷图1 依诺沙星SOR环俯视图(A)、荧光强度3D图(B)和荧光强度剖面图(C)Fig.1 Sel-forderedring(SOR)imageofenoxacin(ENX)(A),3D-SORimage(B)andfluorescenceintensityprofiles(C)1.50Lmol/LENX,1.60Lmol/LAlCl3,NH3-NH4Cl(pH9.7),0.20%PVA-124;液滴体积(Dropletvolume):0150LL,使用4倍镜头(4@objectivelenswasused)。
图2 SOR的半径与液滴体积的关系Fig.2 RelationshipbetweentheouterofSORsandthevolumeofdroplet液滴体积(Dropletvolume,LL):0.20,0.40,0.60,0.80,1.00,1.20,1.40和1.60,其它条件同图1(OtherconditionsarethesameasinFig.1)。
3.3 实验条件优化3.3.1 酸度的影响 在自组装成环过程中,依诺沙星的荧光强度依赖于溶液的pH值。考察了不同酸碱度的HAc-NaAc,Tris-HC,lBritton-Robinson,NH3-NH4Cl等缓冲溶液,发现NH3-NH4Cl作为介质时依诺沙星成环分布均匀,且荧光强度较大。当缓冲溶液的pH=9.7时,体系荧光强度最大且稳定。实验选用50LLNH3-NH4Cl(pH9.7)为依诺沙星的反应介质。3.3.2 PVA-124用量的影响 PVA-124作为辅助成环剂,在二氯二甲基硅烷处理的固载表面上可促进自组装环的形成。由图3可知,当PVA-124用量较小时,空白与样品的SOR荧光强度都较低;PVA-124用量较大时,SOR的荧光强度也将逐渐减小。实验表明,当1%PVA-124加入量为100LL时,荧光强度最大。实验选用PVA-124浓度为0.20%。