动物细胞工程测试题

细胞工程测试题

1. 动物细胞培养过程的顺序是（）

①原代培养②传代培养③胰蛋白酶处理组织，形成单个细胞，制成细胞悬液

A .①②③

B .①③②

C.②①③ D .③①②

2. 不能作为组织培养、细胞培养或克隆的生物材料的是（）

A .花粉

B .幼叶

C.卵细胞 D .人血中的红细胞

3. （2014南宁二中高二检测）下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是（）

A ?动物细胞培养需要无菌、营养、适宜的温度和pH等条件

B ?用胰蛋白酶作用于离体的动物组织，使其分散成单个细胞

C.放入CO2培养箱中培养动物细胞的主要目的是为了满足细胞对CO2的需求

D .细胞株一般具有恒定的染色体组型、生化特征等

4. 动物细胞培养过程中一定可以出现的情况是（

）

A .培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞

B .培养过程中多数细胞的基因型会发生改变

C.二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的

D .当细胞发生类似于癌细胞的变化时，可进行传代培养

5. 某研究性学习小组同学在研究细胞工程时，列表比较了植物细胞工程和动物细胞培

养的有关内容，其中错误的是

6. 动物细胞培养和植物组织培养的主要区别是（

）

A .动物细胞培养是培养单个细胞，植物组织培养是培养组织

B .动物细胞培养可以传代，而植物组织培养不能传代

C.动物细胞培养所用的培养基的成分与植物的不同

D .动物细胞培养过程中可发生遗传物质的改变，而植物组织培养不能

7. （2013高考浙江卷）实验小鼠皮肤细胞培养（非克隆培养）的基本过程如图所示。下列

叙述错误的是（）

I ----------------------- 甲I ----------------------------- 1 T I ---------------------------- 1 丙I ------------------------------ 1 丁I ------------------------------- 1

A .甲过程需要对实验小鼠进行消毒

B. 乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化

C. 丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型

D. 丁过程得到的细胞具有异质性

8. （2014海淀区高二检测）下列对哺乳动物体细胞核移植技术的描述不正确的是（）

A .该技术的难度明显高于胚胎细胞核移植

B .通常采用减数第二次分裂期的去核卵母细胞作为受体细胞

C.可通过显微操作法除去卵母细胞核

D .克隆动物是对提供体细胞的动物进行了完全复制

9. 下列为克隆羊“多利”的培育过程示意图。

下列各项有关表述错误的是（）

A ?克隆羊“多利”的主要性状与甲羊一致，因其细胞核基因来自甲羊

B ?克隆羊“多利”的培育过程中采用了核移植等生物技术

C ?乙羊的去核卵细胞为重组细胞基因表达提供了细胞内的环境条件

D .此过程说明高度分化的动物细胞具有全能性 10.

（2014阳泉高二检测）中科院动物研究所与福州大熊猫研究中心合作，

通过将大熊猫

细胞核植入去核后的兔子卵细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，表明我国大

熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列描述与克隆无关的是

（）

A .“复制”

B .无性繁殖

C .组织培养

D .基因工程

11. 动物细胞融合和植物原生质体融合决定于

（

）

A .细胞膜的流动性

B .细胞膜的选择透过性

C .细胞质的流动性

D .细胞质中酶的活性 12.

某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了

动植物细胞工程的有关内容，你认为有

几种不正确

C . 2

D . 3

13.

（2014泉州

高二检测）单克隆抗体（单抗）实质上是单个B 淋巴细胞通过克隆形成的细胞群产生的化学性质单

一、特异性强的免疫球蛋白。下列有关叙述中，错误的是

（）

A .单抗作为生物导弹能定向到达癌细胞所在部位

B .单抗制备的过程要用到动物细胞培养和细胞融合技术

C .在单抗制备的过程中必须经过至少两次细胞筛选

D .只有用物理或化学方法的诱导，才能促使B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤

细胞

14.

在进行课题

研究时，甲、乙、丙、丁四位同学所采用的方法中错误的是

（）

A .甲用酶解法去除植物细胞的细胞壁

核移植

--- 乙羊的去核卵细胞‘

适宜条件

早期胚胎

植入丙羊

发育、分娩

B .乙用青蛙的血清来配制小鼠细胞的培养液

C.丙用化学法诱导原生质体的融合

D .丁用体外培养法制备单克隆抗体

15. （2014南京高二检测）正常细胞合成DNA有两

条途径：a通路（主通路）和b通路（旁

路）。用于进行单克隆抗体制备的骨髓瘤细胞是DNA合成的b通路缺陷型细胞株，让B淋

巴细胞与这种缺陷型细胞融合，再在加入DNA合成的a通路阻断剂（氨基嘌呤）的培养液中

培养，这种培养会产生哪些效果（）

21.如图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。

骨憐瘤细胞

：■＜（不能在HAT 培 /?*养基上生长）杂交瘤细胞（混合并进分开培养：?亠行期胞融? ? ? 合，特到

某些淋巴细胞衆T 培养（产生特异性抗体）基上培养未融合的

细胞死亡, 杂交瘤细

胞生技

（1） _____________ 技术是单克隆抗体技术的基础。

（2）根据培养基的用途分类，图中 HAT 培养基属于培养■基。

，还可以采用

①促进细胞融合 ②淘汰B 淋巴细胞③淘汰骨髓瘤细胞 ④选择杂交瘤细胞 ⑤淘

汰骨髓瘤细胞相互融合的细胞 ⑥淘汰B 淋巴细胞相互融合的细胞

A .①②③④⑤⑥

B .②③④⑤⑥

C .②③④

D .④⑤⑥

16. 有人用间接免疫荧光测定细胞表面抗原的分布：以不同荧光染料标记抗体，被标记的抗体分别与小鼠细胞膜和人细胞膜的抗原结合分别产生绿色和红色荧光，然后做如图所示实验，对有关现象的解释，错误的是（）

A ?抗体结合荧光物的部位与抗体结合抗原的部位不同，因而能介导荧光物标记膜抗原

B ?细胞膜都具有流动性，因而能用合适的诱导方法使两种细胞彼此融合

C .膜内分子能在膜上扩散移动，因而才会发生融合后膜抗原的分布变化

D .人和小鼠细胞具有相同的抗原，因而能借免疫系统制备标记抗体 17.

由单克隆抗体研制而成的“生物导弹”由两部分组成，

一是“瞄准装置”，二是杀

伤性“弹头”，下列对此描述不正确的是

（）

A ?“瞄准装置”是由识别肿瘤的单克隆抗体构成

B ?“弹头”是由放射性同位素、化学药物和细胞毒素等物质构成

C . “弹头”中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能

D ?“生物导弹”是利用细胞工程制备出来的 18. 关于单克隆抗体的生产和应用，错误的是（

）

A .对小动物注射特定抗原以获取所需的

B 淋巴细胞

B ?融合并筛选特定的杂交瘤细胞，原代培养产生遗传物质改变后才能进行传代培养

C .特定的单克隆抗体可制成试剂，用于检测人体是否受某种抗原的感染

D ?治疗癌症的“生物导弹”原理之一是利用单克隆抗体的特异性识别癌细胞

19.

利用细胞工程方法，以SARS 病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关

叙述正确的是（

）

A .用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体

B .体外培养单个效应 B 细胞可以获得大量针对 SARS 病毒的单克隆抗体

C .将等量效应B 细胞和骨髓瘤细胞混合，经 PEG 诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞

D .利用该单克隆抗体与 SARS 病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者 20. （2014泰州高二期中）胚状体是在植物组织培养的哪一阶段上获得的（）

A .愈伤组织

C .形成完整植株 B .再分化

D .取离体组织将待定的抗

原注入小鼠

选育出产生高特异性抗体的细胞

⑷选用的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的 _____________________ 的特点，又具备淋巴细胞的 _________________ 特点。

(5) 淋巴细胞是由动物体 _________ 中的 _________ 细胞分化、发育而来。

(6) 杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是 _____________________ 。 22. 有性生殖的生物产生后代时需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合。如图为细胞融合的简略过程，请回答下列问题。

L 有性杂交后代

(1) 若a 、b 表示两种植物体细胞，则杂种细胞 d 会再生出，分裂形成愈伤组织并逐

步发育成杂种植株。这项技术克服了 _____________________________________________________

⑵若a 、b 分别为B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞，则经融合并筛选得到的 d 细胞的特点是

_______________________________________ ，由 d

细胞产生的抗体与普通血清抗体相比，具有的特点。

下列是单克隆抗体制备过程的部分图解，请把代表各步骤的字母填写在流程示意图中。

23. 据图回答下列问题。

杂种檳株的苗

马铃算细胞

体融合，实际融合的过程中原生质体可能会形成 _________________ 种细胞团(只考虑两个细胞融合的情况)。④是 _____________________________ 的过程，与此过程密切相关的细胞器是 (2) 在⑤过程培养中，首先要经过水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外，还需要

在培养基中加入 _________ 。同时，在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程必须保证 ___________ 。

(3) 若番茄细胞内含 A 条染色体，马铃薯细胞内含 B 条染色体，将番茄和马铃薯采用杂交育种方法培育(假设能成功)，得到的后代应含 ________________ 条染色体，还必须用 ________ 来处理幼苗，才能得到可育的番茄一马铃薯植株，此时体细胞中含有 _________________ 条染色体。

从脾脏收集经免疫的B 淋巴细胞注射特定的抗总蛋白

杂交摘细胞产

生单克隆抗体

(1)过程①②是用处理植物细胞的细胞壁，后经③过程诱导原生质

培养TH 毓删细胞

收集骨船瀚细胞

选择性培屛基筛

选杂交癇细胞

(4) 若番茄是二倍体，马铃薯是四倍体，则杂种植株为________________ 倍体。

细胞工程试题及答案

专题2细胞工程一、选择题 1.运用下列各种细胞工程技术培育生物新品种,操作过程中能形成愈伤组织的是( )。 ①植物组织培养②植物体细胞杂交③动物细胞培养 ④转基因植物的培育 A.①②③ B.①②④ C.①③④ D.①②③④ 2.生物技术的发展速度很快,已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡,以下较易成功“复生”野驴的方法是( )。 A.将野驴的体细胞取出,利用组织培养技术,经脱分化、再分化,培育成新个体 B.将野驴的体细胞两两融合,再经组织培养培育成新个体 C.取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中,经孕育培育成新个体 D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中,培育成新个体 3.下列关于细胞工程的叙述,错误的是( )。 A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D.某种植物甲、乙两品种的体细胞杂种与甲、乙两品种杂交后代的染色体数目相同 4.用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织,下列叙述错误的是( )。 A.该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的 B.该愈伤组织的细胞没有全能性 C.该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成的 D.该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构 5.名为“我的皮肤”的生物活性绷带自从在英国诞生后,给皮肤烧伤病人带来了福音。该活性绷带的原理是先采集一些细胞样本,再让其在特殊的膜片上增殖。5~7天后,将膜片敷在患者的伤口上,膜片会将细胞逐渐“释放”到伤口,并促进新生皮肤层生长,达到加速伤口愈合的目的。下列有关叙述中,不正确的是( )。 A.“我的皮肤”的获得技术属于动物细胞工程 B.人的皮肤烧伤后会因人体第二道防线的破坏而导致免疫力下降 C.种植在膜片上的细胞样本最好选自患者本人 D.膜片能否把细胞顺利“释放”到伤口,加速患者自身皮肤愈合与细胞膜上的糖蛋白有关 6.既可用于DNA重组技术又可用于细胞融合技术的是( )。 A.病毒 B.纤维素酶 C.聚乙二醇 D.质粒 7.培育农作物新品种的过程中,常利用植物组织培养技术。下列叙述正确的是( )。 A.培育转基因的外植体得到的新个体属于基因突变个体 B.在植物组织培养过程中用理化因素诱导可获得大量有益突变体 C.单倍体育种中经减数分裂和组织培养两个过程能获得纯合二倍体 D.植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性 8.下列与细胞工程技术相关的表述中,不正确的是( )。 A.植物体细胞杂交技术可以克服常规的远缘杂交不亲和障碍 B.动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基成分基本相同 C.动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同 D.植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性 9.经植物组织培养技术培养出来的植物一般很少有植物病毒危害,其原因在于( )。 A.在组织培养过程中经过了脱分化和再分化,进行的是快速分裂和分化

动物细胞工程知识点

动物细胞工程12月20日动物细胞工程常用技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。一、动物细胞培养 1、定义：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 2、原理：细胞增殖 3、过程分散成单个细胞，制成细胞悬液注意： ①10代以内细胞保持正常的二倍体核型，无突变发生，常用于实践或冷冻保存。 ②超过50代，极少数细胞突破自然寿命极限，突变成癌细胞，具有无限增殖能力；若超过50代，细胞不再增殖，全部死亡，则说明细胞没有发生癌变。 ③分瓶之前，称原代培养；出现接触抑制用胰蛋白酶处理，再分瓶培养为传代培养。思考回答： ⑴、为什么选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养? 答：其细胞的分化程度低，增殖能力强，有丝分裂旺盛，容易培养。 ⑵、动物细胞培养需要脱分化吗?为什么? 答：不需要。因为高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去了发育成完整个体的能力，所以没有类似植物组织培养的脱分化过程，要想使培养的动物细胞定向分化，通常采用定向诱导动物干细胞，使其分化成所需要的组织或器官。 ⑶、进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗? 答：主要是蛋白质，不行，因为胃蛋白酶作用的适宜PH约为2，当ＰＨ大于6时就会失去活性，多数动物细胞培养适宜PH为7.2－7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性。（胰蛋白酶作用的适宜PH为7.2－8.4，胰蛋白酶活性较高） ⑷、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?

答：胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白质，长时间作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤，因此必须控制好消化时间。 ⑸、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体 4、重要概念 ①细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。产生原因：培养贴附性细胞时，细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖。培养要求：培养瓶或培养皿内表面光滑、无毒，易于贴附。 ②细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 ③原代培养：动物组织消化后的初次培养 ④传代培养：原代培养的细胞由于接触抑制不再分裂，需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，这种培养叫传代培养。 5、培养条件： ⑴无菌无毒环境：无菌——对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素。；无毒——定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。 ⑵营养：成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基） ⑶温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。 ⑷气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95％空气加5％CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2：是细胞代谢所必需的CO2主要作用是维持培养液的pH。 6、应用：生产有重要价值的生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。基因工程中受体细胞的培养。用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性。科学家培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究，如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据。

植物、动物细胞工程练习

植物细胞工程练习学校:___________姓名：___________班级：___________座号：___________ 一、非选择题 1．草莓是人们经常食用的一种水果，有较高的营养价值。草莓是无性繁殖的作物，长期种植会使病毒积累在体内，产量降低，品质下降。下图是利用植物组织培养技术培育草莓脱毒苗的过程，请据图回答：（1）外植体能够形成幼苗所依据的原理是____________。培育脱毒苗时，一般选取_________作为外植体，其依据是__________________。（2）①是脱分化过程，细胞脱分化是指已经分化的细胞，经过诱导后，失去其__________而转变为未分化细胞的过程。②是_______________过程。（3）研究表明，多倍体草莓产量高于二倍体，利用组织培养技术获得多倍体草莓的方法有两种:一是使用__________〔药剂）处理草莓的愈伤组织，再经培养获得多倍体植株；二是利用_________(药剂)诱导草莓体细胞融合形成杂种细胞后，再经组织培养获得多倍体植株，这种育种技术被称为___________技术。 2．选取A、B植株的细胞进行如下图操作，请回答问题: (1)实现图中的①过程最常用的方法是________。 (2)②过程的发生，必须进行____________,其方法有____________法和____________法。 (3) 若细胞A内含a个染色体，细胞B内含b个染色体，则“杂种细胞”内含________个染色体；若A、B植株采用常规杂交育种方法成功的话，得到的后代含_____个染色体，必须用______________来处理幼苗，才能得到可育的杂种植株，其中含有_____个染色体。这两种方法相比，体细胞杂交方法的优点是：__________________________________。 (4)如果原生质体A为小鼠的浆细胞，原生质体B为小鼠的骨髓瘤细胞，诱导二者融合时，独特的方法是用_______处理。 3．细胞工程是一门新兴的生物工程技术。在动、植物的育种；药物提取；药物生产等领域的应用十分广泛。利用所学知识回答以下关于细胞工程的相关问题。（1）釆用植物细胞工程育种的方法如下：

高中生物动物细胞培养和核移植技术教案新人教版选修3

动物细胞培养和核移植技术备课日期2014年 3 月 4 日课型新授课教学目标知识与技能 1\简述动物细胞养的含义。 2\说出动物细胞养的所需条件。 3\简述动物细胞培养的基本程序。 4\简述动物细胞核移植的概念。过程与方法情感态度与价值观 1\通过学习基因工程的概念，使学生认识到科学研究需要的严谨，激发为祖国而奋斗的精神。 2\通过学习基因操作的工具，使学生树立结构与功能相统一的辩证唯物主义观念。教学重点 1\动物细胞培养的过程及条件； 2\用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景教学难点用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程教学方法以探究法、谈话法、材料教学法相结合。教学用具多媒体课件课时安排1课时教学内容设计与反思板书设计:

教学内容设计与反思一、复习导入: 教师活动：投影幻灯片，引导学生思考、分析讨论。（1）植物细胞工程常用的技术手段有哪些？植物组织培养植物体细胞杂交（2）植物体细胞杂交的结果是产生了？（3）植物体细胞杂交过程中涉及的原理是？二、讲授新课: （一）动物细胞工程动物细胞工程常用的技术手段动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体、动物细胞培养动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。（二）动物细胞培养 1.发展历史: 单20世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的细胞质向外突出形成的，还是由神经细胞周围的其他细胞融合而成的。生物学家们就这个问题展开了激烈的争论。1907年，美国生物学家哈里森(Harrison)从蝌蚪的脊索中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。蝌蚪的神经组织存活了好几周，并且从神经细胞中长出了神经纤维。哈里森的实验不仅解决了神经纤维的起源问题，而且开创了动物组织培养的先河。此后，在许多科学家的不懈努力下，动物组织培养不断改进并逐渐发展成为动物细胞培养。 2、动物细胞培养的应用和概念：动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖. 3、动物细胞培养过程：引导学生阅读课文44--46面相关内容。

动物细胞工程

细胞工程第一讲一、概述 1、细胞工程（cell engineering ）定义应用现代细胞生物学、发育生物学、遗传学和分子生物学的原理方法与技术，按照人们的需要，在细胞水平上进行遗传操作，包括细胞融合、核质移植等方法，快速繁殖和培养出人们所需要的新物种的生物工程技术。 2、细胞工程的研究内容（1）动植物细胞和组织培养植物细胞培养主要用于育种和代谢产物制备，日本等国家用生物反应器培养人参细胞生产有效药用成分。动物细胞培养用于制备单克隆抗体、疫苗、生长因子等。（2）细胞融合改良性状，培育新品种（3）染色体工程细胞工程动植物细胞和组织培养细胞融合染色体工程胚胎工程细胞遗传工程器官培养组织培养细胞培养（快速繁育和产物大量制备）（改良性状，培育新品种）（培育新品种，单倍体和多倍体）（获得人们需要的成体）（无性繁殖，改变性状）克隆转基因技术

主要用于培育单倍体或多倍体新品种，如四倍体小麦，八倍体小黑麦（4）胚胎工程主要是获得人们需要的成体如：胚胎分割技术、胚胎融合技术、卵核移植技术、体外授精技术等最成功应用于畜牧业获得优良品种与胚胎保存对人类来说主要用于不孕症获得试管婴儿（5）细胞遗传工程克隆：无性繁殖，动物克隆指经无性繁殖而产生遗传性状完全相同的后代个体。转基因技术：将外源基因整合到生物体内，能够表达并稳定遗传给后代的实验技术。 3、细胞工程的优势（1）避免了分离、提纯、剪切、拼接等基因操作，只需将细胞遗传物质直接转移到受体细胞中就能够形成杂交细胞。（2）不仅可以在植物与植物之间、动物与动物之间、微生物与微生物之间，甚至可以在三者之间形成前所未有的杂交物种。 4、细胞工程发展（1）萌芽阶段---理论渊源和早期的尝试（20世纪初-30年代中期）德国植物生理学家Haberlandt在1902年提出植物细胞的全能性。认为植物细胞有再生出完整植株的潜在能力。美国生物学家Harrison 是公认的动物组织培养的创始人，1907年，以淋巴液为培养基观察了蛙胚神经细胞突起的生长过程，

动物细胞工程练习题

，能够用于杀死人类的某些第I 卷（选择题） 1 .下列关于现代生物技术的叙述中不正确的是（ A. 植物细胞去除细胞壁获得的原生质体仍然具有全能性 B. 动物细胞培养过程中需用胰蛋白酶处理获取单个细胞 C. 需使用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞 D. DNA 连接酶将DNA 分子碱基对之间的氢键连接起来 2 .将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹” 胞，其过程如下图所示。下列相关叙述不正确的是（ A. ①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同 B. 经①形成的杂交瘤细胞能无限增殖并产生单一抗体 C. ②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞 D. 抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性 3 .图示利用奶牛乳汁生产血清白蛋白的过程，分析错误的是 A. ①经胰蛋白酶处理可得到③ B. 图中涉及基因工程、细胞核移植等技术 C. 常用PCR 技术扩增② D. 把⑤送入⑥的最佳时期是囊胚和原肠胚 4 .下表为动、植物细胞工程的有关内容比较，你认为错误的有植物细胞工程动物细胞工程持殊处理酶解法去除细胞壁胰蛋白酶处理配制细胞悬液融合方法物理方法，化学方法物理方法，化学方法，生物方法典型应用人工种子，种间杂种植物单克隆抗体的制备培养液的区别麦芽糖是离体组织赖以生长的成分动物血清不可缺少 A. 0处 B . 1处 C . 2处 5.对细胞全能性的表述正确的有 A. 没有离体植物细胞也能表现出全能性 B. 动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现 C. 单克隆抗体的制备原理依据是细胞的全能性 D. 花粉可培育成单倍体，是细胞全能性的体现脾细胞- 话髓痼细胞- 4 ■杂左痢细胞抗瘵药物 |结律 _ ；辺.单克隆一生物③十抗体导弹「癌细胞 ① Q) III

动物细胞工程试题及详解

动物细胞工程试题 1用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（C）A都须用液体培养基 B都需用培养箱 C都要在无菌条件下进行 D都可体现细胞的全能性解析：动物细胞离体培养主要是获得细胞的代谢产物，植物体细胞离体培养体现的是全能性。植物体细胞是固体培养基。动物体细胞培养需要二氧化碳培养箱。动物细胞培养： 1、动物细胞的培养：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。 2、动物细胞培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。 3、动物细胞培养液的特点：液体培养基含动物血清。 4、动物细胞培养需要满足以下条件 (1)充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。 (2)适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。 (3)无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 (4)气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 5、动物细胞培养的过程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理

分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 2下列关于细胞工程的叙述，错误的是（D） A. 电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B. 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D. 某种植物甲乙两品种的体细胞杂交与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同解析：A正确诱导原生质体融合的方法有物理法（离心振动电刺激）化学法（聚乙二醇PEG）生物方法（灭活的病毒）. B正确去除植物细胞壁需要纤维素酶和果胶酶，将动物组织分散成单个细胞需要胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间。C正确小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合既可以无限增殖，又可产生特异性抗体。D错误，假设甲植物体细胞是2N,乙植物体细胞是2M，甲乙体细胞杂交染色体数目为2N+2M；而甲乙品种杂交染色体数目是N+M。 3制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括（A） ①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植 A．①②B．①③C．②③D．③④ 解析：单克隆抗体的制备过程是人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，经过培养获得的杂交瘤细胞获得单克隆抗体。 4利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（D） A. 用纯化的核衣蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B. 体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体

2015 动物细胞培养技术实验报告

一、实验目的 1、学习并掌握动物细胞培养的无菌操作技术。 2、学习并掌握细胞传代培养的方法。 3、学习并掌握用倒置荧光显微镜观察细胞细胞形态。二、实验原理细胞培养（cell culture）：细胞在体外条件下生长，细胞不再形成组织。动物细胞培养（animal cell culture）就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞（使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶）然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。由于细胞具有生长和自我复制的能力，为细胞体外培养和研究提供可能。动物细胞培养可分为原代培养和传代培养。原代培养（primary culture）即直接从动物机体分离、获得组织细胞，在无菌条件下，用胰蛋白酶消化或机械分散等方法，将动物组织分散成单个细胞开始首次培养长出单层细胞的方法。传代培养（subculture）当细胞生长增值达到一定密度，用胰蛋白酶将细胞消化分散成单细胞，将细胞转移到新的培养皿中扩大培养的方法。高等生物是由多细胞构成的整体，在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内的功能活动是十分困难的，但如果把或细胞拿到体外培养、增殖并进行观察和研究，则方便简单的多。被培养的动物细胞是非常好的实验对象和实验研究材料，对体外培养的活细胞进行研究可以帮助人类探索防治各种疾病途径和机制，也可以人为地诱导和改变细胞的遗传性状和特性，因此，动物细胞体外培养技术是研究细胞分子机制非常重要的实验手段，被广泛应用于医学、生物技术、基因工程等研究领域。三、细胞培养相关设施及材料 1、细胞培养室无菌操作区：只限于细胞培养及其它无菌操作，与外界隔离。孵育区：培养箱设定的条件为37℃，5%CO2。制备区：培养液及有关培养用液体的制备，液体制备后应该在净化工作台进行过滤除菌。储藏区：包括冰箱、干燥箱、液氮罐等。清洗区和消毒灭菌区：清洗区为相对污染区，消毒灭菌区与清洗区分开。 2、细胞培养常用基本设施：荧光显微镜、超净工作台、孵箱、电热鼓风干燥箱、冰箱、液氮罐、消毒器、恒温水浴槽、滤器等。细胞培养常用器皿：培养瓶、培养板、培养皿，玻璃瓶、吸管，离心管、冻存管，注射器，烧杯、量筒等。 3、细胞培养用品的清洗、消毒新玻璃器皿要用5%稀盐酸浸泡，以中和其表面碱性物质：刷洗：硫酸清洁液浸泡：浓硫酸+重铬酸钾+蒸馏水；冲洗：流水冲洗15-20次，蒸馏水冲洗3次，三蒸水漂洗1-3次。所有需灭菌的器械、物品灭菌前均需包装，防止灭菌后污染。使用时放入超净工

动物细胞工程(2)

高三生物一轮复习导学提纲(38) 选修三：动物细胞工程班级______ 学号_____ 姓名____________ 学习目标：细胞融合与单克隆抗体（A ）知识结构：自主预习： 1.动物细胞融合和植物原生质体融合比较，特殊性表现在 ( ) A ．融合的原因 B ．融合的优点 C ．融合的诱导手段 D ．融合的过程 2.制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括 ( ) ①细胞培养 ②细胞融合 ③胚胎移植 ④细胞核移植 A ．①② B ．①③ C ．②③ D ．③④ 3.下列是应用动物细胞工程获取单克隆抗X 抗体的具体操作步骤，其中对单克隆抗体制备的相关叙述错误的是 ( ) ①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞 ②将X 抗原注入小鼠体内，获得能产生抗X 抗体的B 淋巴细胞 ③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养 ④筛选出能产生抗X 抗体的杂交瘤细胞 ⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞 ⑥从小鼠腹水中提取抗体 ⑦利用促细胞融合因子促使细胞融合 A ．实验顺序应该是①②⑦⑤④③⑥ B ．③过程产生多个杂交瘤细胞的过程称为克隆 C ．⑦过程获得的细胞均可无限增殖 D ．利用细胞融合生产单克隆抗体过程中通常要经过两次筛选典型例题： 4.（06 广东)单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是 A ．特异性强、灵敏度高 B ．与抗癌药物结合可制成“生物导弹” C ．体外培养B 淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体 D ．由效应B 细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌 5.利用细胞工程方法，以SARS 病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。相关叙述正确 A ．用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B ．体外培养单个效应B 细胞可以获得大量针对SARS 病毒的单克隆抗体 C ．将等量效应B 细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG 诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D ．利用该单克隆抗体与SARS 病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者 6.图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。（1）技术是单克隆抗体技术的基础。选育出产生高特异性抗体的细胞骨髓瘤细胞 HA T 某些淋巴细胞（产生特异抗体）混合并进行细胞融合，转到HA T 培养基上培养杂交瘤杂交瘤

生物专题细胞工程之动物细胞工程题库详解

生物专题细胞工程之动物细胞工程题库详解一、单项选择题（共80小题；共160分） 1. 动物细胞融合的原理是 A. 动物细胞没有识别能力 B. 动物细胞易被病毒感染 C. 细胞膜具有流动性 D. 动物细胞膜易被击穿 2. 能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 A. 离心 B. 灭活的病毒 C. 电刺激 D. 振动 3. 科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是 A. 经过免疫的B淋巴细胞 B. 不经过免疫的T淋巴细胞 C. 经过免疫的T淋巴细胞 D. 不经过免疫的B淋巴细胞 4. 动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是 A. 动物细胞培养 B. 动物细胞融合 C. 生产单克隆抗体 D. 胚胎移植、核移植 5. 进行动物细胞培养时，选用的材料是 A. 衰老退化的动物细胞 B. 成熟动物个体的体细胞 C. 动物的受精卵 D. 动物胚胎或幼年个体的细胞 6. 动物细胞融合与植物原生质体融合的理论基础是 A. 细胞膜的流动性 B. 细胞膜的选择透过性 C. 细胞质的流动性 D. 细胞质中酶的活性 7. 用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞 A. 容易产生各种变异 B. 具有更强的全能性 C. 取材十分方便 D. 分裂增殖的能力强 8. 为了让用于培养的动物组织细胞分散开以便配制成一定浓度的细胞悬液，选取来的动物组织应选用下列哪种物质处理 A. 胃蛋白酶 B. 胰蛋白酶 C. 盐酸 D. 胰脂肪酶 9. 动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是 A. 动物细胞培养 B. 动物细胞融合 C. 单克隆杭体 D. 胚胎、核移植 10. 动物细胞培养的细胞来自于 A. 任何个体的细胞 B. 只能取自动物胚胎细胞 C. 只能取自幼龄动物的组织细胞 D. 胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞

动物细胞培养技术思考题

《动物细胞培养技术》复习思考题 1.动物细胞培养的实验器皿清洗要求为何较高？你认为该如何保证器皿中无杂质？如果器皿中有杂质，会对细胞培养产生什么样的影响？答：①离体细胞对各种毒物都很敏感，若所用器材清洗效果未达到要求，各种毒物会损坏细胞影响实验。②器皿使用高压灭菌锅，121.3℃，20~30分钟，在取拿的时候用经过高压灭菌后的镊子取拿，避免造成污染。③ 2.叙述超净工作台的工作原理？答：超净工作台最主要的是空气循环过滤的过程，在这个过程中风机起到了心脏的作用。鼓风机驱动空气通过高效过滤器得以净化，净化的空气被徐徐吹过台面空间而将其中的尘埃、细菌甚至病毒颗粒带走，使工作区构成无菌环境。 3.正压过滤器为何会除菌？答：正压式过滤器没有内置灭菌灯，正压式过滤器利用的是两层0.22um孔的过滤膜，这层膜可以将细菌阻挡在膜上，过滤的液体流下去就基本上完成了灭菌过程 4.各种细胞培养用液的配制需要很精确吗？如果不精确，会导致什么后果？请举例说明。你认为精确配制各种溶液？答： 5.配制后平衡盐溶液呈黄色意味着液体的pH发生了什么变化？答：配制后的液体应呈桃红色，PH值为7.4左右。苯酚红的变色域：1.2（橙）~3.0（黄），6.5（棕色）~8.0（紫色），若为黄色，则液体呈酸性，不利于细胞的生存。 6.用于分离细胞的消化液为什么宜用无Ca、Mg离子的D-Hanks液或PBS液配制答：Ca＋2、Mg＋2是细胞膜的重要组分，具有使细胞凝聚的作用。因此，用于分离细胞的消化液宜用无Ca＋2、Mg＋2离子的D-Hanks液或PBS液。 7.L-谷氨酰胺在营养液中有何作用？答： L－谷氨酰胺是细胞的能量来源；是一种必须氨基酸，是使物体合成核酸、蛋白质、嘌呤、嘧啶的重要前体，也是蛋白质合成分解的调节物；是细胞内氨的清除剂，氨对一些细胞有毒性。 8.HEPES溶液的作用机理？答：它是一种氢离子缓冲剂。主要作用是防止培养基pH迅速变动 9.平衡盐溶液的组成与基本作用？小牛血清在细胞培养中有哪些作用？答：①平衡盐溶液主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH 稳定及提供简单的营养.主要用于取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、配制其他试剂等。②作用：a提供能促使细胞指数生长的激素、基础培养基中没有或含量微小的营养物，以及某些低分子营养物质；b提供结合蛋白，识别维生素、脂类、金属离子，并与有毒金属和热源物质结合，起解毒作用；c是细胞贴壁、铺展生长所需因子的来源；d起酸碱度缓冲液作用； e提供蛋白酶抑制剂，细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受损伤。 10.营养液制备后为什么要小剂量分装？答：避免营养液被污染后，全部的营养液都被污染。营养液一次用完过后，下一次的实验就不能用，会引起污染，影响实验，若冷冻营养液，则营养液的营养成分会有所损失，影响细胞的生长 11.10万U/mL单位青霉素、链霉素的配制方法？答：用注射器吸10毫升双蒸水溶解100万单位的链霉素，弃去2ml，用剩余的8ml链霉素溶解80万单位的青霉素，配制成每毫升青霉素、链霉素各10万单位的母液。

植物细胞工程与动物细胞工程的比较(生物论文)

植物细胞工程与动物细胞工程的比较莱阳市第九中学生物组范海霞植物细胞工程的技术手段主要有植物组织培养和植物体细胞杂交，其中植物组织培养是植物细胞工程的基础；动物细胞工程的技术手段主要有动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体的制备、胚胎移植和核移植，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。动、植物细胞工程的原理和技术手段有相似之点，但也存在不同之处，现对两者的主要技术手段加以分析比较：一、植物细胞的组织培养与动物细胞培养 1．过程 ⑴植物组织培养 ⑵动物细胞培养 2．两者的比较二、植物体细胞杂交与动物细胞融合（单克隆抗体制备） 1．过程 ⑴植物体细胞杂交：细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 …… 细胞株细胞系原代培养传代培养再分化激素、光离体的植物器官、组织或细胞脱分化营养物、激素愈伤组织根、芽植物体胚状体人工种子人造胚乳和种皮发育

⑵动物细胞融合（单克隆抗体制备）：

三、胚胎移植与核移植 1．哺乳动物的胚胎移植：指在体外完成受精作用和早期的胚胎发育，然后将早期的胚胎转移到母体的子宫发育。试管动物是指的体外受精和早期胚胎发育生物。试管牛的培育过程如下图所示： 2．核移植：核移植是动物克隆技术的基础。鲤鲫移核鱼的培育过程如下图所示：值得注意的是：克隆多莉羊是把来自高度分化的体细胞的核移植到去核的卵细胞中形成的重组细胞培育而来的；【例释1】某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你 A ．0 B ．1 C ．2 D ．3 解析：动物的组织块剪碎后只能用胰蛋白酶处理，而不能用胃蛋白酶处理；植物的原生质体的促融方法可用物理法或化学法，而不用生物法；植物组织培养的培养基中的糖用的是蔗糖，而不用葡萄糖。答案：D 【例释2】如图是“白菜—甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法正确的是 A ．图示“白菜—甘蓝”植株不能结籽 B ．愈伤组织的代谢是自养需氧型 C ．上述过程中包含着有丝分裂，细胞分化和减数分裂等过程 D ．“白菜—甘蓝”杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果解析：白菜和甘蓝都是二倍体，它们的体细胞杂交后培育的“白菜—甘蓝”植株中有两个染色体组来自白菜，两个染色体组来自甘蓝，因此“白菜—甘蓝”属于异源四倍体，是可育的，能产籽；愈伤组织是一种高度液泡化的呈无定型状态的薄壁细胞，不能进行光合作用动物→排卵→体外受精??→?培育胚胎??→?移植母牛子宫→试管牛（激素处理）（激素处理）（兼有鲤鱼、鲫鱼特点，具有正常生殖能力）重组细胞→鲤鲫移核鱼 ? ? ? 鲤鱼：囊胚细胞核鲫鱼：去核未受精卵

动物细胞工程习题

选修三动物细胞工程习题一、单选题： 1. 下列关于动物细胞培养的叙述中，正确的是（） A.动物细胞培养选用的培养材料大多是动物的受精卵细胞 B.动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清 C.动物细胞培养过程中要用胰蛋白酶处理使细胞分散 D.“海拉”细胞系在实验室中被广泛传代使用是因为其遗传物质保持了长时间的稳定 2. 关于细胞工程的说法不正确的是（） A.培养动物细胞和植物细胞的重要区别在于培养基的不同 B.单克隆抗体与血清抗体相比，前者特异性强、灵敏度高，产量大 C.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行，而植物细胞培养则需要在无菌条件下进行 D.在生物体内细胞没有表现出全能性，与基因表达的选择性密切相关 3. 小鼠骨髓瘤细胞与某一种B淋巴细胞融合成为杂交瘤细胞，这种杂交瘤细胞（） A.发生了基因突变 B.只能在体外大量增殖 C.只能在体内大量增殖 D.能产生特定的抗体 4. 下列关于细胞工程的叙述中，正确的是（） A.克隆羊“多莉”的培育技术主要包括核移植和胚胎移植两方面 B.植物细胞工程中，融合叶肉细胞时，应先去掉细胞膜，制备原生质体 C.植物细胞工程中，叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织 D.单克隆抗体制备过程中，采用不经免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合从而获得杂交瘤细胞 5. 生产单克隆抗体时，在培养基中加入某种试剂能筛选出杂交瘤细胞，该试剂的作用是（） A.能选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制 B.能阻止淋巴细胞的原癌基因被激活 C.能抑制淋巴细胞的DNA复制 D.能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质的合成 6. 对比植物体细胞杂交和动物细胞融合，以下论述完全正确的是（） A.两者都必须经过人工诱导，但方式不同 B.两者细胞融合的基本原理都是细胞的全能性 C.两者都必须用灭活的病毒进行诱导 D.两者的用途都是为了培养新品种 7．下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是（） A．卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加 B．胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割 C．胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点 D．胚胎干细胞是一类未分化细胞，可从早期胚胎中分离获取 8．用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（） A．都需用CO2培养箱B．都须用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行D．都可体现细胞的全能性 9、下列关于细胞工程的叙述，错误的是（） A．电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B．去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C．小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D．某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同 10、通过特定方法，科学家将小鼠和人已分化的体细胞成功地转变成了类胚胎干细胞。有关分化的体细胞和类胚胎干细胞的描述，正确的是（） A．人类胚胎干细胞能够分化成多种细胞B．分化的体细胞丢失了某些基因 C．二者功能有差异，但形态没有差异。D．二者基因组相同，且表达的基因相同

动物细胞培养总结!!!!

动物细胞培养总结一．实验准备 1.实验器械、器皿的清洗和消毒（1）清洗和包装离心管，2ml,15ml)若干，冻存管若干放进铝饭盒，用牛皮纸包裹，系紧棉绳，用笔在饭盒上和牛皮纸上标记盒内所装物品名称、数量、日期和所属人名称。蓝枪头两盒，黄枪头白枪头各一盒用牛皮纸包裹，用棉绳扎紧。取适量蒸馏水于4L玻璃瓶，瓶盖拧松半圈。过滤器，250ml玻璃瓶，500ml玻璃瓶用自来水毛刷洗涤剂刷洗，蒸馏水润洗，烘干。过滤器两部分分别包裹，先将瓶口部位用锡纸包裹后，再罩以牛皮纸，再用棉布密包起来，用棉绳扎紧。玻璃瓶拧下瓶盖，瓶身浸酸。浸酸时应注意安全，须穿戴耐酸手套和白大褂，注意保护好面部和身体裸露部分，提前备好一盆水在旁以便浸酸结束后清洗耐酸手套，防止走动时酸液滴到地板上不好清洗。瓶口慢慢沉入液面下，注意缓慢降低瓶身，使液体慢慢浸入瓶内，以免产生气泡溅出酸液，发生危险。浸酸时器皿要充满酸液，勿留气泡，浸泡过夜。取出瓶身时，须穿戴耐酸手套和白大褂，注意保护好面部和身体裸露部分，提前备好一盆水在旁，取出后将瓶身放入盆内水中在转移至水池边清洗，以免酸液滴落地板不好清洗。换水洗几次，待水澄清后开始冲洗，每瓶都用自来水灌满，倒掉，重复15次，再用

蒸馏水漂洗5次，去离子水漂洗3次，烘干备用。（2）消毒灭菌 1>全自动高压灭菌锅：插电源，打开开关，检查水位，若水位不足加蒸馏水补足，放入物品，瓶类物体须拧松盖子后放最上面一筐，盖上灭菌锅盖，拧紧盖子至温度显示栏的左上角有一红点亮灯，按start开始升温。若灭有无菌水或玻璃瓶待降温至常温再打开，打开后立即拧紧，无菌水瓶口封上封口膜。若没灭瓶类物品，降温至80度左右即可打开灭菌锅，须戴上线手套取出。 2>手提式高压灭菌锅：插电源，打开开关，检查水位，若水位不足加蒸馏水补足，检查设定是否为121度20分钟，放入物品，盖上灭菌锅盖，注意导气管一定插到锅底并不能堵塞，用手对称地拧紧锅盖螺栓，再用扳手继续拧紧。加温升压之前，先打开排气阀门，加温约半小时后见排气阀处开始排残留在锅内的冷空气，排气五分钟，关闭排气阀，继而开始升压。灭菌后不要立即打开气阀放气以免水汽喷出。待自然降温至常压才能打开气阀。玻璃瓶须拧紧，饭盒，枪头灭菌后放入烘箱烘干备用。 2.无菌间消毒及设备检查用84消毒液拖地，用原液按照1：29的比例兑水，抹布、拖把擦洗。配400ml 75%酒精于盆中，用酒精棉仔细擦拭CO2培养箱，超净台，超净台内物品，显微镜，桌面，若培养箱内未培养细胞可以再打开高温灭菌模式将培养箱灭菌一次。用蒸馏水擦拭清洗水浴锅内壁，注意底座不要沾水。

动物细胞工程制药研究现状和展望-模板

动物细胞工程制药研究现状和展望摘要：当前动物细胞工程所涉及的主要技术领域包括细胞融合技术、细胞器特别是细胞核移植技术、染色体改造技术、转基因动植物技术和细胞大量培养技术等方面.本文综合论述了动物细胞工程制药的发展简史,研究近况和制造实例,并在此基础上探讨了动物细胞工程制药的未来发展趋势和前景. 关键词:动物细胞工程制药;细胞融合;细胞大规模培养;核移植 21世纪,生物技术制药是制药行业的亮点,近25年来,世界生物技术工业飞速发展,创造了35种重要的治疗性生物技术药物.中国生物技术产业是紧跟世界产业同步发展的.20XX年全球生物技术药物市场销售额已达到828亿美元.基因工程、细胞工程和酶工程组成三驾马车行驶在现代生物技术发展大道的前列.动物细胞工程在生物制药的研究和应用中起关键作用,目前全世界生物技术药物中使用动物细胞工程生产的已超过80%,例如蛋白质、单克隆抗体、疫苗等.所以对动物细胞工程制药的研究具有重要意义. 一、发展简史开始疫苗是动物细胞技术的开始,在疫苗产业早期,往往利用动物来生产疫苗,如用家兔人工感染狂犬病毒生产狂犬疫苗,用奶牛来生产天花疫苗,用某些细菌接种到动物身上来生产抵抗该种细菌的疫苗.在1920年至1950年,已经开发了多种病毒或细菌疫苗,如伤寒疫苗、肺结核疫苗、破伤风疫苗、霍乱疫苗、百日咳疫苗、流感疫苗和黄热病疫苗等.早在1950年代,已经能够利用动物细胞培养技术来生产病毒.先在反应器中大规模培养动物细胞,待细胞长到一定密度后,接种病毒,病毒利用培养的细胞进行复制,从而生产大量的病毒,这一突破是动物细胞技术或细胞工程的真正开始.基于动物细胞技术生产的病毒疫苗包括减毒的活病毒,或是灭活的病毒.在过去的30多年时间内,用动物细胞技术生产的疫苗挽救了几百万人和动物的生命.1950年至1985年期间,细胞工程及其他技术的进步,生产了多种人用疫苗来预防脊髓灰质炎、麻疹、腮腺炎、风疹、乙肝和带状疱疹等,并用于生产多种兽用疫苗.但是,这段时期对细胞表达水平的研究仍然很低,因而用这种工艺生产蛋白制品产量低、成本高,因此早期的动物细胞技术只用于疫苗及少量的干扰素和尿激酶的生产. 发展

人教版生物选修三2.2动物细胞工程专项练习题

动物细胞工程专项练习题 1．美国科学家已经在实验室中成功培育出膀胱，并顺利移植到7名患者体内。这种技术为那些急需器官移植的患者带来福音。回答下列问题：（1）科学家从患者的膀胱上取下一小块活细胞样本，将其中的肌肉细胞和膀胱上皮细胞分别置于不同的培养皿中培养。在培养之前，需用 _____处理以分散细胞，将动物组织块消化后的初次培养称为代培养。与植物组织培养的培养基相比，其培养基的主要不同点是含有等一些天然成分。（2）约一周后将培养皿中培养的细胞放在由胶原质制成的“支架”上继续培养，再过7周左右，原先的数万个细胞已经繁殖到15亿个左右，布满“支架”，膀胱上皮在内，肌肉在外，形成“新膀胱”。细胞数目大量增加，其增殖方式是；由这些细胞再形成肌肉和膀胱上皮的过程中要经过。（3）医生将“新膀胱”移植到患者膀胱的上面，这样新器官会继续生长并与老器官“重组”取代老器官中丧失功能的部分。新器官与老器官的“重组” （填“是”或“不是”）基因重组；“新膀胱”移植后， ______________（填“会”或“不会”）引起免疫排斥反应。（4）除上述方法外，还可将患者的体细胞核移入去核的 ______中，利用体细胞技术，形成相应组织、器官用于疾病的治疗。 2．下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物（二倍体）的流程。回答下列问题：（1）图中A 表示正常细胞核，染色体数为2n ，则其性染色体的组成可为____________。过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用_________________的方法。②代表的过程是__________。（2）经过多次传代后，供体细胞中_______________的稳定性会降低，因此，选材时必须关注传代次数。（3）若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是__________________________________。（4）与克隆羊“多莉（利）”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了__________________________。 3．下图为利用小鼠制备抗埃博拉病毒的单克隆抗体过程示意图，图中A ～F 分别表示生物技术或细胞名称，请同答有关问题：（1）若A 细胞是经抗原刺激的小鼠B 淋巴细胞，则B 细胞一般选用__________，C 过程不同于诱导植物原生质体融合的常用诱导因素是____________________。（2）在杂种细胞的培养过程中，为了防止污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的__________。（3）单克隆抗体的制备过程需要经过多次筛选，首先用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，其具有的特点是_______________，还需进行克隆化培养和__________，最终获得足够数量的________________________，选出符合要求的细胞后，可在体外条件下培养或注射到__________内增殖。（4）利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断埃博拉病毒的感染者，这体现了单克隆抗体____________________的特性。 4．人乳头状瘤病毒（HPV ）与宫颈癌的发生密切相关，抗HPV 的单克隆抗体可以准确检测出HPV ，从而及时监控宫颈癌的发生，以下是以HPV 衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程，请据图回答：（1）单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有________________。（2）将经融合处理后的细胞转到HAT 培养基上培养的目的是，该细胞（填“能”、 “不能”）产生专一性抗体，所产生的抗体（填“一定”、“不一定”）能抗HPV 。（3）对于抗体检测呈______性的杂交瘤细胞克隆应进行克隆化培养，克隆化培养的方法最常用的是有限稀释法，即稀释细胞到3～10个/mL ，每孔加入细胞稀释液______mL （填“0．1”、“1”或“10”），使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的。（4）科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因（prG ），该基因能激发动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外，请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路 __________________________________________________________ _________________________________________________________________________________________。 5．不同类型的细胞表达不同的基因组合。那么不同类型的动物细胞都具有全套基因吗？科学家进行了如图所示的克隆研究。Ⅰ～Ⅶ代表有关过程，a ～h 代表有关结构或个体。据图回答问题： (1)a 细胞的名称是________，选用该细胞作为核移植受体细胞的原因是 ________________________________________________________________________。 (2)对b 的操作方法通常是__________。若g 是能产生人生长激素的羊，则培育g 时，应将人生长激素基因导入___________，为了尽快获得大量的生长激素，但让g 进行有性生殖会丢失目的基因，你将通过________________技术来实现。 (3)从 d 中取出细胞进行培养时，一般不超过______代，原因是 ________________________________________________________________________。此培养过程中与植物细胞培养过程中所用的培养基有何不同？_________________________________。 (4)如果图中的细胞均是人体细胞，则获得的h 细胞或器官可用于供体本人组织器官的移植，其优点是