植物根尖细胞有丝分裂实验
实验一 显微镜使用及植物有丝分裂的观察
（一）材料准备
通过休眠的洋葱鳞茎，经日晒后，置于盛有清水的小烧杯上，根部与水接触，20~25℃光照条件下培养2~3天，待根长1~2cm时，于上午9:00~11:00剪下根尖备用。
（二）预处理
为了获得较多中期分裂相的细胞，同时使染色体缩短和分散，可对根尖进行预处理，将根尖浸在蒸馏水中于在1~4℃低温下处理24小时。
徐州工程学院教案
2008年至2009年第一学期第3周
实验名称：光学显微镜的结构、植物细胞有丝分裂的制片和观察
一、目的与要求
1、掌握光学显微镜的构造及使用方法。
2、掌握植物根尖细胞有丝分裂制片技术。
3、掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化。
二、实验原理
有丝分裂是植物细胞分裂的主要方式，细胞分裂过程中，核内染色体准确地复制，并有规律地、均匀地分配到两个子细胞中去，使子细胞和母细胞的遗传组成一样，保证了植物细胞的遗传性状的一致。各种生长旺盛的植物组织中，如根尖组织、茎尖组织、居间分生组织、愈伤组织等，常进行着剧烈的细胞有丝分裂。在细胞分裂的适当（分裂旺盛期）时候取材，进行预处理，固定、解离、染色和涂抹压片等方法，使细胞、染色体分散，便于在显微镜下观察染色体的形态特征和变化特点及进行染色体计数。
8.使用显微镜时一定严格按规程操作，遇到问题，如机件不灵，千万不可用力转动，切忌任意拆修，应立即报告指导教师。
9．使用完毕要将显微镜擦试干净，恢复原状，转动物镜转换器，将4×物镜转到光路上，使镜台调至接近物镜。
10．关闭光圈、电源，适当下降聚光镜，将塑料罩罩好，及时收回镜箱。
八、作业
1.制作细胞有丝分裂各时期图象片子1~2张。
B液：铁钾矾0.5克溶于100ml 50％丙酸。
染色液：A液和B液等量混合，每5ml的A液和B液的混合液中加入2克水合三氯乙醛，充分溶解摇匀，存放一天后使用。贮存液可较长久保存，染色液只能保存一个月，在两周内使用效果最好。
植物的有丝分裂实验方法
实验过程:取材,解离,漂洗,染色,制片,观察,绘图.具体步骤:1. 取材:课前,将洋葱放在装满水的广口瓶上,底部接触水,装置放在温暖环境中,待根长至1-5cm.注意培养基应经常换水,目的是防止烂根(乙醇发酵).在上午10点——下午2点左右(分生区细胞分裂旺盛),切取其根尖(带有分生区)2-3mm.2. 解离:解离液为盐酸,时间为10——15min目的是使组织细胞相互分离开.(细胞壁由纤维素和果胶构成)解离时间过长,染色体被破坏.解离时间过短,组织细胞解离不充分,不能相互分离.此时通过解离已将细胞杀死,使细胞停留在不同的分裂时期,不会再发生变化而保持原来形态.由于看不到细胞的动态变化,故不可移动装片在视野周围寻找细胞的不同分裂期.3. 漂洗:漂洗液为水,时间为10min目的是洗去盐酸以防解离过度和便于染色.4. 染色:染色液为龙胆紫或醋酸洋红溶液(pH<7,但为有色阳离子碱性染料)目的是使染色体着色.染色时间过长——太深,无法观察.染色时间过短——太浅,不易观察.5. 制片:染色结束后盖上盖玻片,用拇指轻压盖玻片使细胞分散开.6. 观察:先低倍镜观察——找到根尖分生区.再高倍镜观察——找到各时期的细胞.注意:1. 解离和压片都有利于根尖分生细胞的分散,便于观察.2. 若视野内部部分细胞清晰而部分不清晰,则可能是根尖压片厚薄不均.3. 不能取成熟植物材料,因为其不再分裂,无法观察其有丝分裂.4. 动物细胞圆形,植物细胞方形.5. 若切取根尖太长,会导致视野中有大量伸长区,成熟区细胞,干扰了分生区细胞的观察.6. 合适地选取材料:分裂期时间越长(错误)分裂期时间在细胞周期的占比越大(正确)这样越容易找到不同分裂时期的图象.7. 滴加清水(使舒展),弄碎根尖以及压片都有利于细胞分散.8. 根尖分生区细胞无叶绿体,但可培养出含叶绿体的植株.9. 若用酶解处理,所用的酶是果胶酶.。
植物细胞有丝分裂的制片和观察
操作要点
1.解离：培养好的根尖先用95％的酒精漂洗再放入1mol /L的HCl中60℃水浴5min左右
2.漂洗：先在清水中浸置2min,再用清水洗去解离液2-3 次，最后置于盛有清水的培养皿中
3.取材：用刀片切取根尖2-3mm处的分生区，并切去乳白 色的根冠
4.染色：用镊子尖把大蒜根尖弄碎（或者用刀片将根尖 均匀切成三份）,用卡宝品红染色,6～8min后， 盖上盖玻片,再盖上一个载玻片，用拇指轻压载 玻片随即用一次性筷子进行敲片。
（3）仔细观察：先找中期，再找其余各时期，注意染色
体特点
（4）移动观察：慢慢移动片，完整观察各个时期
实用文档
四、实验流程 1.大蒜根尖培养及固定 2.装片制作
解离→漂洗→取材→染色
3.观察
低倍镜观察→高倍镜观察→仔细观察→移动观察
注意：a.观察时应先找到呈矩形的分生区细胞，在
一个视野里观察时，要注意边观察边移动装片， 观察有丝分裂各个时期。 b.显微镜下观察到的都是死细胞，不能看到细 胞分裂的动态变化。 c.在显微镜下观察到间期细胞的数目最多
固定的作用：杀死细胞，固定细胞形态， 维持染色体的完整
性，提 实用文档 高染色效果
四、实验流程
1.大蒜根尖培养及固定
2.装片制作
解离液：1mol/L的HCl 目 的：使组织中的细胞分离开
（1）解离 操作：先用95%的酒精漂洗，在HCL中
60℃水浴5min左右 注意（：a）解离充分是实验成功的必备条件
（1）解离 染色剂：卡宝品红染液（使染色体（质）着色）
（2）漂洗 （3）取材
（4）染 色
染色时间过长—细胞全被染色，
时间：6-8min
无法观察
洋葱根尖有丝分裂的观察实验报告
生物研究性学习活动结题报告洋葱根尖固定装片
观察
马蛔虫受精卵固定装片
祝塘中学高一年级
年月日
研究课题：指导老师：
组别：组长：组员：
一、实验目的
二、实验原理
1.在高等植物体内，有丝分裂常见于等分生区细胞。
2.染色体容易被染料着色。
三、实验用具
洋葱。
显微镜、载玻片、盖玻片、玻璃皿、剪子、镊子、滴管。
质量分数为15%的盐酸、体积分数为95%的酒精、质量浓度为0.01g/ml的龙胆紫溶液、洋葱根尖固定装片。
四、实验步骤
1.洋葱根尖的培养。
2.装片的制作
①②③④
3.洋葱根尖细胞有丝分裂的观察
把制成的装片先放在下观察，找到细胞：细胞呈形，排列紧密。
再换成仔细观察。
4.马蛔虫受精卵的有丝分裂固定装片的观察
五、实验结果
六、绘图
绘出植物有丝分裂中期简图绘出动物有丝分裂中期简图。
2020-2021学年高中人教版生物必修一课件：6 实验：观察根尖分生组织细胞的有丝分裂
2.对洋葱根尖分生区细胞的正确描述是( A )
A. 既小且方 B. 形态不规则 C. 细胞已经开始分化 D. 无间期细胞
3.(2019·海南高考)若要观察植物细胞有丝分裂中期
的染色体,适宜的材料和染液组合是
( A)
A.大蒜根尖细胞,龙胆紫溶液
B.玉米根尖细胞,台盼蓝染液
C.菠菜叶肉细胞,碘液
D.番茄果肉细胞,吡罗红染色剂
4.观察并记录： (1)低倍镜下观察：扫视整个装片，找到分生区细 胞；细胞呈 正方形 ，排列 紧密 。 (2)高倍镜下观察：首先找出 分裂中期 的细胞， 然后再找 前期 、 后期 、末期的细胞， 注意观察各时期细胞内染色体 形态和分布的特点。 最后观察 间期 的细胞。
(3)调换：如果自制装片效果不太理想，可观察 洋葱根尖固定装片 。
二、模拟细胞有丝分裂
解离 漂洗 染色 制片
观察
盐酸和酒 精混合液
放入清水中漂洗
使植物细胞之间的果胶质 层松散，细胞相互分离
洗去药液，防止解离过度，便 于碱性染料染色
龙胆紫溶液或醋酸 洋红液
使染色体着色，便于显 微镜下观察
用镊子尖把根尖弄 碎，加盖玻片,再加 载玻片压散细胞
先用低倍镜观察
使细胞分散开
(2)__盐__酸__和__酒__精______使细胞解离开来。
(3)_显__微__镜___可观察细胞有丝分裂各期图像。
3.装片的制作 解离
的是用药液使组织中的细胞相互分离，便 于压片； ②通过解离将细胞杀死，使细胞停留在不同的分裂时 期；
③解离时间过短，根尖未充分解离，压片时细胞无法 分开；解离时间过长，根尖过分酥软，无法进行漂洗 和染色，且染色体已被破坏。
在低倍镜下找到分生区细胞： 呈正方形、排列紧密
实验一 植物有丝分裂过程中染色体行为的观察
实验原理及目的
实验原理：植物根尖细胞的有丝分裂，在适当的 时间对其进行固定，经染色和压片，镜检，可看 到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。
实验目的：掌握有丝分裂各时期的特点和根尖染 色体压片法，此法是观察植物染色体最常用的方 法，也是研究染色体组型、染色体分带、染色体 畸变和姊妹染色单体交换的基础。
卡诺固定液：3份无水酒精＋1份冰醋酸。 酒精：有固定、硬化和脱水作用，可以固
定多种材料，但对核蛋白固定效果较差； 冰醋酸对材料有膨胀作用，对核蛋白的固
定效果好。 固定时间:3-24小时.
解离
使分生组织细胞间的果胶质分离，细胞壁 软化或部分分解，使细胞和染色体容易分 散压平。
酶解：纤维素酶和果胶酶，所需时间较长， 成本高，一般不用。
植物根尖的分区
flash
实验材料
蚕豆的种子 洋葱
蚕豆根尖的准备
吸胀24h
盖上双层纱布
铺上双层纱布
蚕豆根尖的准备
20-25℃培养
洋 葱 根 尖 的 准 备
实验步骤
材料准备
固定
水洗 制片
解离染色 镜检
作业及思考题
实验材料为什么要进行固定? 绘制你所观察到根尖染色体的分裂相。
固定
酸解：1份浓盐酸＋1份无水酒精（解离 液），处理时间依不同材料而有差别。
水洗
水洗作用是什么？如果不水洗会有什么 后果？
水洗至少3次.
染色
将水洗后的根尖切去伸长区等，留下 分生区段染色.
染色液：改良石碳酸品红溶液. 染色时间：一般10-15min左右（但也
需依不同材料而定）.
考点三 (实验)制作和观察根尖细胞有丝分裂简易装片
考点三(实验)制作和观察根尖细胞有丝分裂简易装片1.实验原理2.实验步骤(1)取材时为什么只能剪2～3 mm，而不能过长？提示若剪得过长会包括伸长区，伸长区无细胞分裂，增加了寻找观察细胞的难度。
(2)实验操作中漂洗和染色的顺序能不能互换？并说明原因。
提示不能。
漂洗的目的是洗去根尖组织细胞中的药液，有利于碱性染料的着色，若二者顺序颠倒，解离液中的盐酸会影响染色的效果。
(3)使细胞分散开的操作措施有哪三种？提示①解离；②镊子尖弄碎根尖；③拇指按压载玻片。
1.实验成功的关键点2.关注洋葱在实验中的“一材多用”结合观察植物细胞的有丝分裂，考查观察提问实验设计的能力1.(2014·全国卷Ⅰ，29)回答下列问题。
(1)在观察大蒜根尖细胞有丝分裂的实验中，常用盐酸酒精混合液处理根尖，用龙胆紫溶液染色。
实验中，盐酸酒精混合液的作用是____________________；龙胆紫溶液属于________性染料，能够使细胞中的________着色。
(2)用光学显微镜观察细胞，可以看到细胞核。
细胞核的功能可概括为：________ _____________________________________________________________________。
解析(1)盐酸酒精混合液是解离液，用于解离过程，解离的作用是使组织中的细胞相互分离开来。
龙胆紫溶液用于染色过程，为碱性染料，能使细胞核中的染色体(质)着色。
(2)对细胞核功能较为全面的阐述应该是：细胞核是细胞内遗传物质储存、复制和转录的主要场所，是细胞代谢和遗传的控制中心。
答案(1)使组织中的细胞相互分离开来碱染色体(2)细胞核是细胞内遗传物质储存、复制和转录的主要场所，是细胞代谢和遗传的控制中心2.(2019·福建泉州毕业班质检)微核是细胞在有丝分裂过程中因各种有害因素的损伤，使细胞核成分残留在核外而形成的微小染色质块。
当外界环境中存在一定浓度的致突变物时，会使具有微核的细胞增多。
观察洋葱根尖细胞有丝分裂实验教学设计
观察洋葱根尖细胞有丝分裂实验教学设计观察洋葱根尖细胞有丝分裂实验教学设计一、实验目的通过观察洋葱根尖细胞有丝分裂的过程，了解有丝分裂的特点和步骤。
二、实验器材与试剂1. 洋葱2. 盐水或生理盐水3. 10% 醋酸溶液4. 甲醇5. 0.1% 吡啶蓝溶液三、实验步骤1. 准备洋葱根尖：取一个新鲜的洋葱，切下顶部约0.5cm长的部分，将其放入盐水或生理盐水中浸泡10分钟，以软化细胞壁。
2. 制作洋葱根尖切片：用镊子将浸泡后的洋葱根尖取出，用刀片沿着根尖顶部切下一个小块约1cm长。
将该小块横向放在玻璃片上，用刀片轻轻削去一层表皮，然后用镊子将其取下。
再次用刀片削去一层表皮，并取下。
重复这个步骤，直到根尖变得透明。
3. 预处理洋葱根尖切片：将处理后的洋葱根尖切片放入10%醋酸溶液中浸泡5-10分钟，以杀死细胞并使染色体显现。
4. 固定洋葱根尖切片：将处理后的洋葱根尖切片取出，用甲醇进行固定。
将切片放入甲醇中浸泡5分钟。
5. 染色洋葱根尖切片：将固定后的洋葱根尖切片取出，用0.1% 吡啶蓝溶液染色。
将切片放入染料中浸泡2-3分钟。
6. 洗净与观察：用流动自来水冲洗染色好的洋葱根尖切片，直至溢出的颜料不再显现。
然后用草纸轻轻吸干水分。
最后将切片放在玻璃片上，加一滴甘油或透明胶水，并盖上盖玻璃。
使用显微镜观察有丝分裂过程。
四、实验结果与讨论1. 观察结果：在显微镜下观察洋葱根尖切片，可以看到细胞核的形态和位置变化。
有丝分裂的各个阶段可以清晰地观察到。
2. 讨论：通过观察洋葱根尖细胞有丝分裂的过程，可以了解到有丝分裂是一个连续的过程，包括纺锤体形成、染色体分离、两极染色体运动等步骤。
同时还可以观察到细胞核在不同阶段的形态和位置变化。
五、实验注意事项1. 实验操作时要注意安全，避免刀片或镊子伤及手指。
2. 洋葱根尖切片制作时要轻柔操作，避免损伤细胞。
3. 在固定和染色过程中要控制好时间，避免过度固定或染色导致细胞结构破坏。
实验,观察根尖分生区细胞有丝分裂
时期
制片 根尖弄碎，盖上盖玻片， 再加一片载玻片，用拇 指轻压载玻片
使细胞分散开， 有利于观察
制作洋葱根尖有丝分裂装片的关键是什么？ （1）剪取洋葱根尖材料时，应该在洋葱根尖 细胞一天之中分裂最活跃的时间；
上午10点至下午2点
（2）解离时，要将根尖细胞杀死，细胞间质 被溶解，使细胞容易分离；
（3）压片时，用力的大小要适当，要使根尖 被压平，细胞分散开
B. 核糖体 D .中心体
单击此图标结束
课件制作：石炼中学（二中分校） 赵占兴
6.下图中，a → d表示连续分裂细胞的两个细胞
周期，下列叙述不正确的是 A.a和b为一个细胞周期
( D)
B.c段结束，DNA含量增加一倍
C.遗传物质平分一般发生在d段
D.b和c为一个细胞周期
8.细胞有丝分裂过程中，染色体、染色单
4.绘图(中期)
制作关键
装片的制作流程：解离→漂洗→染色→制片
过程
方法
时间
目的
解离 根尖2-3mm，盐酸和酒 3-5 使组织中的细胞 精混合液（1∶1） min 相互分离开来
漂洗 根尖酥软后，用镊子取 10 洗去药液，防止 出，放入清水中清洗 min 解离过度
染色 龙胆紫或醋酸洋红液 3-5 使染色体着色 min
五.观察根尖分生组织细胞的有丝分裂
（一）实验目的
（二）实验原理：
在高等植物体内，有丝分裂常见于根尖、 芽尖等 分生区 细胞。由于各个细胞的分裂是独 立进行的，因此，当染色体被碱性染料着色后， 通过在 高倍镜 下观察，同一组织中可以看到 不同 时期 细胞内 染色体 的存在状态。从而判断 细胞各处于有丝分裂的哪个时期。
观察细胞有丝分裂时，首 先要找到哪一时期的细胞 进行观察？
“观察植物细胞的有丝分裂”实验解读
“观察植物细胞的有丝分裂”实验解读一、实验原理1．在高等植物体内，有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。
由于各个细胞的分裂是独立进行的，因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。
2．染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液）着色，通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体（或染色质）的存在状态，就可判断这些细胞处于有丝分裂的哪个时期，进而认识有丝分裂的完整过程。
二、实验材料及其准备实验材料：洋葱根尖分生区。
因为根尖生长点属于分生组织，细胞分裂能力强，易观察到有丝分裂各个时期的细胞。
洋葱根尖的培养：在室温为10℃～25℃条件下，实验前3～5天将洋葱鳞茎剥去一层外皮，用刀片切去鳞茎底部陈根或削去一薄层，露出新的细胞有利于洋葱鳞茎尽早生根。
将鳞茎放在盛满水的烧杯上，使其底部接触水面，放在温暖、向阳处。
每天换水，以免氧气不足导致根尖腐烂；温度过低会使细胞生长缓慢，影响细胞有丝分裂的观察。
三、实验步骤：解离→ 漂洗→ 染色→ 制片→ 观察四、思考与分析例1、用洋葱为实验材料，观察植物细胞的有丝分裂。
（1）培养洋葱根尖时，如果没有经常换水，常会出现烂根现象，原因是 。
（2）制作装片时，如果用质量分数为5％的盐酸在10℃下解离5min ，然后按正常要求进行漂洗、染色、制片。
结果在观察中，发现根尖细胞没有较好地分散开，原因是 。
（3）如果观察的某细胞在视野右上方，要把物像移到视野中央，应把玻片向 方移动。
解析：（1）在培养洋葱根尖过程中，不注意经常换水，水中氧气不充足，根尖细胞进行厌氧呼吸产生酒精可导致烂根。
（2）配制解离液应该是质量分数为10％的盐酸，题目中用的解离液不符合要求，原因是盐酸的质量分数太低；解离的时间太短，一般用10%盐酸在室温下要解离10～15min （3）因为显微镜视野中的物像是实物的倒像，要使右上方的物像沿左下移至视野中央，则应把玻片向右上方移动。
答案：（1）水中氧气不足，根尖细胞进行厌氧呼吸产生酒精，毒害细胞 （2）解离液不合要求，特别是盐酸的质量分数太低（应为10％），且解离的时间不够 （3）右上例2、在进行“观察植物细胞的有丝分裂”实验中，甲～戊五位同学在剪取洋葱根尖后立即进行的操作步骤如右表。